专利名称：一种小檗皮提取物及该提取物和小檗皮的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种小檗皮提取物及该提取物和小檗皮的用途，属药物领域。
背景技术：
随着生活水平及现代化程度的提高，生活节奏的加快，膳食结构与生活习惯的改变，糖尿病、高血脂、高血压、代谢综合征等一系列慢性疾病的发病率也逐渐增加。研究发现，胰岛素抵抗(Insulin Resistance，IR)，不仅是II型糖尿病的发病基础，更是贯穿高血脂、代谢综合征等多种代谢相关疾病的主线，是连结它们的纽带，为这些疾病的共同病理生
理基础。目前，对代谢疾病的研究发现，过氧化物酶体增殖物活化受体(PPARs)与胰岛素抵抗有着密切关系。PPARS包括α、δ、Y三个亚型。报道较多的为PPAR α和PPAR γ 0 其中，PPAR α主要在肝脏中表达，能够增强脂肪酸的β氧化，能降低血脂、改善胰岛素敏感性，在动物模型及人群中均可改善胰岛素敏感性[李全民，等.中国药学杂志.2005， 40(14) :1070-1072] ；PPAR γ主要在脂肪组织中表达，其功能是促进脂肪酸在脂肪组织的沉积和脂肪细胞的分化，目前已知PPAR γ与胰岛素抵抗密切相关[方朝晖，等.丹蛭降糖胶囊对胰岛素抵抗大鼠大网膜脂肪细胞PPAR-YmRNA表达的影响.]。常用的PPARy激动剂，是吡格列酮和罗格列酮，为胰岛素增敏剂，但这两种药物会引起体重增加、浮肿、LDL胆固醇水平升高等副作用。这是因为PPAR γ在人体内涉及调节脂质合成、糖类代谢，以及脂肪细胞的分化，它的活化会促进脂肪细胞的分化和脂肪吸收的储存。而PPAR α主要在肝脏表达，它可以促进脂质的分解，目前市售的贝特类降脂药就是PPAR α激动剂。研究表明， 若同时激动PPAR γ和PPAR α，则能够同时调节糖尿病患者血糖和脂质。近年来，除PPAR γ和PPAR α以外，PPAR δ也逐渐受到人们的重视，研究发现PPAR δ在脂质及糖类代谢、炎症反应、细胞存活、创伤愈合等多方面都有重要作用。 Chih-Hao Lee 等[Chih-Hao Lee, et al. PPAR δ regulates glucose metabolism and insulin sensitivity. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 2006,103(9) :3444 3449]报道，高糖高脂饮食诱导胰岛素抵抗的对比研究结果表明PPAR δ基因敲除小鼠显示代谢低下和葡萄糖耐受降低；PPAR δ 激活剂受体活化2型糖尿病模型小鼠(db/db)显示肝脏葡萄糖输出抑制，葡萄糖消耗增加， 脂肪细胞游离脂肪酸释放抑制；通过不同组织的互补作用，PPAR δ调节新陈代谢平衡，改善机体糖脂代谢，增加胰岛素敏感性。因此，研制开发PPAR δ激动剂也已成为预防和治疗仪脂代谢紊乱和胰岛素抵抗为主要特征的代谢性疾病的新方向。在对PPARs的不断认识过程中，人们考虑到PPARs各亚型对人体均有不同的作用， 已经开始着手研发PPARs多重激动剂。如史克必成公司研发的含苯并恶唑结构的烷氧基苯丙酸类化合物，就是很好的α / Y双重激动剂；PPAR葛兰素-史克公司的GWM33，为PPAR α / δ双重激动剂；礼来研究实验室于2006年报道了 PPAR γ / δ双重激动剂，具有良好的胰岛素增敏性，而体重增加等副作用轻于罗格列酮；甚至，默克公司还得到了一种PPAR完全激动剂，能够同时激活PPAR a、PPAR δ、PPAR Y的表达。目前，有研究表明，肝X细胞受体α (LXR α)激活也可能产生类似PPAR Y激活剂的作用[李婧.肝X受体在脂肪生成和脂肪细胞形成中的作用.国际生殖健康/计划生育杂志.2010, ) :92-95] 0综上，适度激活PPAR a、PPAR δ、PPAR Y、LXR α的表达，具有胰岛素增敏剂的作用机制，能够改善胰岛素抵抗。目前，国内对该领域也有较多研究，发现了某些中药也具有PPARs激动剂的作用。 如专利申请号201010174927. 9，发明名称醋炙黄连炮制品的新用途，该申请公开了醋炙黄连在制备胰岛素增敏剂及PPAR Y激动剂的药物中的用途。黄连中主要含有小檗碱 (6. 68% )、药根碱(0. 36% )、巴马汀(1.61% )、黄连碱(1.96% )、非洲防己碱(0. 44% 表小檗碱(0. 97% )等6种生物碱。藏药小檗皮，藏药名译音杰唯哇兴、给尔驯、杰星、吉尔巴，为小檗科植物甘肃小檗Berberis kansuensis Schneid.及同属多种植物的干燥皮，主要包括甘肃小檗、直穗小檗、鲜黄小檗、小檗、西北小檗、川滇小檗、无粉刺红珠、无脉小檗、刺红珠、砂生小檗、 大黄檗、粉叶小檗等12种(《藏药部颁标准》1995年版)，为藏医临床治疗常用药物，本品性凉、糙，味酸，敛诸毒、干黄水，功能清热解毒、燥湿，用于尿路感染、肾炎等疾病的防治 (西藏等六省区卫生局.藏药标准.西宁青海人民出版社.1979:11、卫生部药典委员会.药品标准·藏药第一册.1995 340)(帝玛尔·丹增彭措.晶珠本草.上海上海科学技术出版社.1986 :76)，可使尿频和小便浑浊之症状得到改善。小檗皮中含有小檗碱、 药根碱、巴马汀、小檗胺等生物碱类成分，干燥皮(根皮、茎皮)中的平均百分含量依次为 1. 274士0. 973,0. 421 士0. 464,0. 097士0. 104,0. 840士0. 772(郑晓峰，王勤·兰州大学学报 (医学版).2009，35(1) :71-75)。目前，尚未见将小檗皮或其提取物用于制备PPARs、LXR α激动剂的相关报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种小檗皮提取物，以及该提取物和小檗皮的新用途；本发明的另一目的是提供一种激动PPARs和/或LXR α的药物组合物。本发明提供了一种小檗皮提取物，它来源于小檗科植物甘肃小檗Berberis kansuensis Schneid.及同属多种植物的干燥皮，该提取物中，含有小檗胺5. 2 11. 0%ff/ W、药根碱2. 6 5. 5% W/W、巴马汀0. 7 1. 4% W/W、小檗碱7. 9 16. 5% ff/ff0其中，同属植物为直穗小檗、鲜黄小檗、小檗、西北小檗、川滇小檗、无粉刺红珠、无脉小檗、刺红珠、 砂生小檗、大黄檗、粉叶小檗。(参见《藏药部颁标准》1995年版)进一步地，该提取物中，各成分的重量比例为小檗胺药根碱巴马汀小檗碱=(7.4 9.8) (3.7 5. 2) 1.0 (11. 3 16. 3)。其中，所述的小檗皮提取物为小檗皮的水或有机溶剂提取物。其中，所述的有机溶剂提取物为60-95% V/V的乙醇提取物，优选70-90% V/V乙醇提取物，更优选为70% V/V乙醇提取物。本发明还提供了小檗皮或上述小檗皮提取物在制备PPARs或/和LXR α激动剂中的用途。
其中，所述激动剂为PPAR α激动剂、PPAR δ激动剂、或PPAR α /PPAR δ双重激动剂。进一步地，所述激动剂为改善胰岛素抵抗的药物。其中，所述激动剂为治疗糖尿病、糖尿病高脂血症、糖尿病高胆固醇血症、糖尿病肾病、肥胖症的药物。其中，所述小檗皮提取物来源于小檗科植物甘肃小檗Berberis kansuensis Schneid.及同属多种植物的干燥皮，该提取物中，含有小檗胺3. 6 11.0% W/W、药根碱 1. 3 5. 5% W/W、巴马汀 0. 35 1. 4% W/W、小檗碱 3. 95 ~ 16. 5% ff/ff0进一步地，该提取物中，各成分的重量比例为小檗胺药根碱巴马汀小檗碱=(7. 4 9. 8) (3. 7 5. 2) 1.0 (11. 3 16. 3)。其中，所述的小檗皮提取物为小檗皮的水或有机溶剂提取物。其中，所述的有机溶剂提取物为60-95% V/V的乙醇提取物。本发明还提供了一种激动PPARs或/^PLXR α的药物组合物，它是由有效量的小檗皮或上述的提取物为活性成分，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备成药学上常用的制剂。其中，所述的制剂是口服制剂。小檗皮及其提取物，能够激动PPAR δ ,PPAR α、Lxr α，可以改善机体糖脂代谢， 增加胰岛素敏感性，具有明显的降血糖、降血脂作用；同时，还可以部分拮抗PPAR γ，克服了单纯的PPAR γ激动剂所具有的不良反应，并且能阻止脂肪形成，可以避免现有胰岛素增敏剂(PPAR γ激动剂)产生的体重增加、胆固醇水平升高等副作用，为临床治疗代谢性疾病提供了一种新的选择。
图1本发明小檗皮提取物的HPLC检测图谱，其中，1.盐酸小檗胺；2.盐酸药根碱； 3.盐酸巴马汀；4.盐酸小檗碱；图2对3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型PPARs、LXR α表达图。
具体实施例方式实施例1本发明小檗皮提取物的制备取药材粉小檗皮(甘肃小檗Berberis kansuensis Schneid.的干燥皮)碎成粗粉，浸渍M小时，加70%乙醇9倍量，以2ml/min. kg的速度渗漉，收集渗漉液，浓缩，干燥即得。实施例2本发明小檗皮提取物的制备取药材粉小檗皮(甘肃小檗Berberis kansuensis Schneid.的干燥皮)碎成粗粉，加70 %乙醇12倍量，回流提取2次，合并滤液，浓缩，干燥即得。实施例3本发明小檗皮提取物的制备取小檗皮(甘肃小檗Berberis kansuensis Schneid.的干燥皮)，去其杂质，切段，加水约高出药面6 10cm，加热，在沸腾状态，保持1 2小时，倾出煮液，残渣再照上法
5煎煮，残渣弃出，残渣再煎煮1次，煎煮液合并，静置12小时，使杂质沉淀，倾出上清液，底部浑浊液过滤，合并上清液及滤液，浓缩，即得。若测定该提取物的成分含量，也可对其进行干
O实施例4本发明药物组合物的制备取小檗皮(甘肃小檗Berberis kansuensis Schneid.的干燥皮)，去杂质后，粉碎，过筛，装胶囊即得。实施例5本发明小檗皮提取物中生物碱含量的测定1、色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶柱XtimateTM C18 (4. 6X 250謹，5 μ m)。以 0. 三乙胺(碳酸氢铵，氨水调PH为10)为流动相A，乙腈为流动相B进行梯度洗脱，0 15min(10% 25% ) B，15 25min(25% 30% ) B，25 40min (30 % 45 % )B。检测波长为270nm ；流速为lml/min ；柱温为30°C ；理论塔板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于6000， 供试品色谱峰中其他杂质色谱峰与待测物质色谱峰的分离度应符合要求。本发明检测方法也可以参考文献张艺，等.RP-HPLC测定不同产地黄连中6种生物碱的含量.中国中药杂志·2010,35(19) :2576-2580。2、对照品溶液的制备精密称取盐酸药根碱、非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱适量，以盐酸-甲醇(1 100)分别制成1.06mg/ml、1.04mg/ml、0.256mg/ml、 0. 456mg/ml、0. 48mg/ml、0. 552mg/ml的溶液，做为对照品储备液。分别吸取盐酸药根碱、非洲防己碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀和盐酸小檗碱对照品储备液适量，以盐酸甲醇(1 100)制成 16.96μβ/πι1、Μ.96μβ/πι1、40.96μβ/πι1、 72. 96 μ g/ml、57. 6 μ g/ml,264. 96 μ g/ml的混合溶液，作为混合对照品储备液。3、供试品溶液的制备取待测样品约0. 5g，精密称定，置150ml锥形瓶中，精密加入盐酸甲醇 (1 100) 50ml，称定重量，超声处理(功率200W，频率40kHz) 30分钟，放冷，再称定重量，盐酸甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，过0. 45 μ m微孔滤膜，作为供试品溶液。4、测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。结果参见图1，表1-3。表1各成分在药材中的含量
权利要求
1.一种小檗皮提取物，其特征在于它来源于小檗科植物甘肃小檗BerberiS kansuensis Schneid.及同属多种植物的干燥皮，该提取物中，含有小檗胺3. 6 11. 0%ff/ W、药根碱 1. 3 5. 5% W/W、巴马汀 0. 35 1. 4% W/W、小檗碱 3. 95 16. 5% W/W。
2.根据权利要求1所述的提取物，其特征在于该提取物中，各成分的重量比例为 小檗胺药根碱巴马汀小檗碱=(7. 4 9. 8) (3. 7 5. 2) 1.0 (11. 3 16. 3)。
3.根据权利要求1或2所述的提取物，其特征在于所述的小檗皮提取物为小檗皮的水或有机溶剂提取物。
4.根据权利要求3所述的提取物，其特征在于所述的有机溶剂提取物为60-95%V/V 的乙醇提取物。
5.小檗皮或权利要求1-4任意一项所述的小檗皮提取物在制备PPARs或/和LXRα 激动剂中的用途。
6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于所述激动剂为PPARα激动剂、PPAR δ 激动剂、或PPAR α /PPAR δ双重激动剂。
7.根据权利要求5或6所述的用途，其特征在于所述激动剂为改善胰岛素抵抗的药物。
8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于所述激动剂为治疗糖尿病、糖尿病高脂血症、糖尿病高胆固醇血症、糖尿病肾病、肥胖症的药物。
9.根据权利要求5-8任意一项所述的用途，其特征在于所述小檗皮提取物来源于小檗科植物甘肃小檗Berberis kansuensis Schneid.及同属多种植物的干燥皮，该提取物中，小檗胺3. 6 11. 0% W/W、药根碱1. 3 5. 5% W/W、巴马汀0. 35 1. 4% W/W、小檗碱 3. 95 16. 5% W/W。
10.一种激动PPARs或/和LXR α的药物组合物，其特征在于它是由有效量的小檗皮或权利要求1-4任意一项所述的提取物为活性成分，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备成药学上常用的制剂。
全文摘要
本发明公开了一种小檗皮提取物。本发明还公开了小檗皮及该提取物的新用途。小檗皮及其提取物，能够激动PPAR δ、PPAR α、Lxr α，可以改善机体糖脂代谢，增加胰岛素敏感性，具有明显的降血糖、降血脂作用；同时，还可以部分拮抗PPAR γ，克服了单纯的PPAR γ激动剂所具有的不良反应，并且能阻止脂肪形成，可以避免现有胰岛素增敏剂(PPAR γ激动剂)产生的体重增加、胆固醇水平升高等副作用，为临床治疗代谢性疾病提供了一种新的选择。
文档编号A61P3/06GK102327309SQ201110296460
公开日2012年1月25日 申请日期2011年9月28日 优先权日2010年9月28日
发明者孟宪丽, 张艺, 赖先荣 申请人:成都中医药大学