水不溶性凝胶组合物及其制备方法
【专利摘要】本发明提供了制备水不溶性凝胶组合物的方法，包含以下步骤：混合水溶性多糖、环氧交联剂、碱性化合物和溶剂；及在真空下在1-30℃干燥上述所得混合物以去除溶剂，及水不溶性凝胶组合物。
【专利说明】水不溶性凝胶组合物及其制备方法
【【技术领域】】
[0001]本发明涉及制备水不溶性凝胶组合物的方法及其制备方法。尤其地，本发明涉及制备水不溶性凝胶组 合物的方法，包括混合水溶性多糖、环氧交联剂、碱性化合物和溶剂，以及在低温真空下干燥由此得到的混合物。
【【背景技术】】
[0002]多糖是由糖作为重复单元形成的天然的水溶性聚合物。由于当多糖被制成水溶液时显示出高粘度，因此，难以在组合物，例如洗剂、软膏、乳膏或溶液中维持多糖的高含量。这样的高粘度使得难以保证在组合物中混合物的均匀混合。此外，在将组合物移植到生物组织的情况下，生物降解性非常重要。移植到生物组织的材料应为无毒的，并且要求在完成预期功能后，在活体内由代谢作用分解并排出。已知透明质酸，一种典型的多糖，在植入或移植至多3-4天后，经受代谢作用并排出，不管组合物中透明质酸的分子量和透明质酸的浓度。透明质酸在活体内如此短周期的代谢作用，使得透明质酸不仅不足以用作在活体内需要保持至少数月时间的生物恢复材料，而且也不足以用作需要保持大约7-10天时间的术后组织抗粘附剂。
[0003]当包含高浓度多糖的组合物形成时，需要解决的问题之一是当多糖溶于水中时出现的高粘度。为了解决该问题，已经开发了一些方法，其具体例子包括减小多糖的分子量的方法，增加水溶液中渗透压的方法，和将多糖形成细粉，随后分散的方法。
[0004]为了将水溶性聚合物的多糖转化为水不溶性的凝胶而开发的交联工艺可归类为寻找新的交联剂，控制多糖的分子量，控制多糖在交联反应溶液中的浓度，控制交联密度，诱导交联密度的非均一性，和改变在多糖和交联剂之间产生的化学键的类型。
[0005]将透明质酸转化为水不溶性凝胶的一般方法包括将透明质酸和环氧基交联剂与被调节至PH为12或更高的水混合，并将混合物在大约40-60°C的温度保持数小时。此种交联工艺的优势在于它加速环氧基交联剂和透明质酸之间的反应，但是其缺点在于用强碱溶液的加热引起透明质酸分子量的下降，导致生成具有过低的机械强度的水不溶性凝胶成品。为了弥补由用强碱溶液加热引起的透明质酸分子量的这种下降，使用具有大约3，000, 000道尔顿分子量的高分子量透明质酸代替当前使用的具有大约1，000, 000道尔顿分子量的透明质酸。然而，这从成本效益的角度是不可取的。另一种用于解决用强碱溶液加热引起的问题的方法包括降低透明质酸溶液的PH至12或更低，或降低反应温度至40之下。然而，此类方法包括降低PH或反应温度的问题在于交联反应需要非常长的时间或需要增加交联剂的量。为了克服在溶液中进行的透明质酸的交联反应的缺点，已经开发了一种方法包括将固态透明质酸混入其中包含溶解的环氧交联剂的有机溶剂中。然而，通过此方法得到的水不溶性凝胶的表面表现出高的交联密度，但是其内部部分表现出很小或无交联密度。为了克服多糖如透明质酸在强碱溶液中交联反应进行中发生的分子量下降的缺点，提出了另一种方法，此方法包括将透明质酸和环氧基交联剂溶于弱碱性水或被调节至PH为9或更低或酸性pH的蒸馏水中，然后室温干燥。通过该方法，可能得到完全溶胀后具有相当于其干重的至多2倍的重量的透明质酸，即使使用非常少量的交联剂。然而，在将通过此方法得到的水不溶性透明质酸凝胶移植到小鼠生物组织后，仅七天内30%的水不溶性凝胶分解。这样的生物降解度不适合用于其中水不溶性凝胶态应在活体组织内保持数月或更长的长时间的工业领域。
【
【发明内容】
】
[0006]【技术问题】
[0007]本发明要解决的技术问题为提供制备水不溶性凝胶组合物的新方法，此方法可在交联步骤中分子量下降最小化时使交联密度最大化。
[0008]【技术方案】
[0009]在本发明的一个总的方面，提供了制备水不溶性凝胶组合物的方法，包含以下步骤:
[0010]混合水溶性多糖、环氧交联剂、碱性化合物和溶剂；及
[0011]在真空下在1-30°C干燥上述所得混合物以去除溶剂。
[0012]根据本发明的一个实施方案，真空干燥步骤可在l-30_Hg下进行。
[0013]根据本发明的另一个实施方案，去除溶剂的步骤可以以水溶性多糖被浓缩至浓度为50-99wt%的方式进行。
[0014]根据本发明的再一个实施方案，水溶性多糖可具有500，000-5，000，000道尔顿的
分子量。
[0015]根据本发明的再一个实施方案，基于100重量份的溶剂，水溶性多糖可使用1-100
重量份。
[0016]根据本发明的再一个实施方案，水溶性多糖可为选自由透明质酸、透明质酸盐、聚-Y -谷氨酸、聚-Y -谷氨酰胺、琼脂、海藻酸、海藻酸盐、角叉菜胶、红藻胶、果胶、阿拉伯树胶、刺梧桐树胶、黄蓍胶、茄替胶、瓜尔豆胶、刺槐豆胶、欧车前籽胶、明胶(gelatin)、几丁质、葡聚糖、黄原胶、壳聚糖、软骨素-4-硫酸盐、软骨素-6-硫酸盐和淀粉组成的组中的至少一个。
[0017]根据本发明的再一个实施方案，每摩尔水溶性多糖中的羟基，可使用0.01-60摩尔份的环氧交联剂。
[0018]根据本发明的再一个实施方案，环氧交联剂可为选自由表氯醇、表溴醇、1，4-丁二醇二缩水甘油醚、乙二醇二缩水甘油醚、1，6-己二醇二缩水甘油醚、丙二醇二缩水甘油醚、聚乙二醇二缩水甘油醚、聚丙二醇二缩水甘油醚、聚丁二醇二缩水甘油醚、新戊二醇二缩水甘油醚、聚甘油聚缩水甘油醚、二甘油聚缩水甘油醚、甘油聚缩水甘油醚、三甲基丙烷(trimethlypropane)聚缩水甘油醚、1，2-(双(2，3-环氧丙氧基)乙烯、季戍四醇聚缩水甘油基醚和山梨糖醇聚缩水甘油基醚组成的组中的至少一个。
[0019]根据本发明的又一个实施方案，碱性化合物可为包含碱金属，包括钠、钾、钙和锂的化合物。
[0020]在本发明的另一个总的方面中，提供包含水溶性多糖、环氧交联剂、碱性化合物和溶剂的水不溶性凝胶组合物。 [0021]根据本发明的一个实施方案，水溶性多糖可具有500，000-5，000，000道尔顿的分子量。
[0022]根据本发明的另一个实施方案，基于100重量份的溶剂，水溶性多糖可使用1-100
重量份。
[0023]根据本发明的再一个实施方案，基于水溶性多糖中的羟基，可使用0.01-60摩尔份的环氧交联剂。
[0024]根据本发明的再一个实施方案，基于组合物的总重量，组合物可包含1_2(^丨％的水不溶性凝胶。
[0025]根据本发明的再一个实施方案，当水不溶性凝胶具有30-200的溶胀度时，组合物是透明的，当水不溶性凝胶具有10-30的溶胀度时 ，组合物是半透明的并为乳白色，及当水不溶性凝胶具有2-10的溶胀度时，组合物是不透明并且是白色的。
[0026]根据本发明的再一个实施方案，当将组合物加入具有6.5-7.5的pH的磷酸盐缓冲溶液中，溶胀并在压力下灭菌时，70-99Wt%的最初加入的组合物仍为水不溶性凝胶。
[0027]根据本发明的又一个实施方案，组合物在溶胀后具有相当于加压灭菌后仍然存在的水不溶性凝胶干重的2-200倍的重量。
[0028]【有益效果】
[0029]根据本发明的制备水不溶性凝胶组合物的方法，通过使用少量的交联剂就有可能获得具有极好的强度和稳定性的水不溶性凝胶，同时可使多糖的分子量下降最小化并使交联密度最大化。当通过使用水不溶性凝胶制备组合物时，即使增加组合物中多糖的含量时，也有可能保证组合物的流动性。因此，在化妆品领域、保健食品和药物领域，有可能克服由于混合大量的(例如2-3wt %或更多)多糖发生的问题，包括制备组合物过程中的不均匀混合和组合物使用中由流动性减少导致的使用时手感的下降。此外，当包括多糖的组合物移植到身体内时，有可能允许多糖在活体内稳定保留至少10天至数月。如此，组合物可用作组织恢复组合物、术后抗粘附剂、关节内滑液等等。而且，组合物对加压灭菌是稳定的，而加压灭菌对于用于活体内的移植材料是必不可少的，并且具有高的成本效益。
【【专利附图】
【附图说明】】
[0030]图1是图示说明根据本发明的一个实施方案的透明质酸组合物的体积保留时间的曲线图。
[0031]【最佳方式】
[0032]下文中将更充分地描述本发明的优选实施方案，以便本领域技术人员能够容易地实施本发明。
[0033]在一个方面，提供了制备水不溶性凝胶组合物的方法，包含以下步骤:
[0034]混合水溶性多糖、环氧交联剂、碱性化合物和溶剂；及
[0035]在真空下在1_30°C干燥上述所得混合物以去除溶剂。
[0036]下文中，将更详细地解释制备水不溶性凝胶组合物的方法。
[0037]首先，将水溶性多糖、环氧交联剂、碱性化合物和溶剂混合。
[0038]如本文使用的，术语“水溶性多糖”为包括作为重复单元的糖类并且具有500，000道尔顿(Da) -5，000, OOODa的分子量的水溶性聚合物。当水溶性多糖具有小于500，OOODa的分子量时，水不溶性凝胶不能形成，或者即使水不溶性凝胶形成，所述凝胶也会在加压灭菌过程中消失。当水溶性多糖具有大于5，000, OOODa的分子量时，其中溶解有水溶性多糖的溶液具有极高的粘度，从而使其难以完成均匀混合。水溶性多糖是由于加热、PH和微生物污染易于经受分子量下降的聚合物。因此，需要考虑的变量是完成为交联而进行的步骤后测定的分子量，即最终的分子量，而不是为了交联和洗涤作为起始材料加入的多糖的分子量，即初始分子量。因此，在本发明中，进行粘度测量以确定交联引起的水溶性多糖的分子量变化。这通过下面的测试实施例得以支持。
[0039]通常，关于同样交联密度下的聚合物的交联，随着聚合物分子量的增加，溶胀度降低并且交联的凝胶的机械强度增加。同样的也适用于交联的多糖。因此，当使用同样量的多糖用于交联步骤提供同样的交联度时，使用具有较高分子量的多糖是以高产率提供水不溶性凝胶的方法之一。
[0040]所述水溶性多糖并不特别限定，但是水溶性多糖的具体例子包括选自由透明质酸、透明质酸盐、聚-Y -谷氨酸、聚-Y -谷氨酰胺、琼脂、海藻酸、海藻酸盐、角叉菜胶、红藻胶、果胶、阿拉伯树胶、刺梧桐树胶、黄蓍胶、茄替胶、瓜尔豆胶、刺槐豆胶、欧车前籽胶、明胶(gelatin)、几丁质、葡聚糖、黄原胶、壳聚糖、软骨素_4_硫酸盐、软骨素_6_硫酸盐和淀粉组成的组中的至少一个。特别是，透明质酸是优选的。
[0041]基于100重量份的溶剂,所述水溶性多糖优选以1-100重量份,更优选5-40重量份的量使用。当水溶性多糖以少于I重量份的量使用时，在真空干燥时易发生暴沸，导致工业实用性下降。当水溶性多糖以多于100重量份的量使用时，其中溶解有水溶性多糖的溶液具有增加的粘度，从而使得难以完成均匀混合。
[0042]如本文使用的，术语“环氧交联剂”意为包含至少两个环氧官能团的化合物。
[0043]所述环氧交联剂并不特别限定，但是环氧交联剂的具体例子包括选自由表氯醇、表溴醇、1，4- 丁二醇二缩水甘油醚、乙二醇二缩水甘油醚、1，6-己二醇二缩水甘油醚、丙二醇二缩水甘油醚、聚乙二醇二缩水甘油醚、聚丙二醇二缩水甘油醚、聚丁二醇二缩水甘油醚、新戊二醇二缩水甘油醚、聚甘油聚缩水甘油醚、二甘油聚缩水甘油醚、甘油聚缩水甘油醚、三甲基丙烷(trimethlypropane)聚缩水甘油醚、1，2-(双(2，3-环氧丙氧基)乙烯、季戊四醇聚缩水甘油基醚和山梨糖醇聚缩水甘油基醚组成的组中的至少一个。特别是，1,4-丁二醇二缩水甘油醚(BDDE)是优选的。
[0044]每摩尔水溶性多糖中的羟基，可使用0.01-60摩尔份，优选0.05-40摩尔份，更优选0.1-20摩尔份的环氧交联剂。也就是说，环氧交联剂的含量通过存在于形成水溶性多糖的重复单元中的可交联羟基官能团的摩尔数确定。为了控制通过交联反应得到的多糖的水不溶性凝胶的物理性质，交联步骤过程中环氧交联剂和多糖的实际反应的量，而非进行交联反应加入的环氧交联剂的量，是重要的。即使加入大量的交联剂，未参与交联的交联剂部分也应通过洗涤步骤(通过该步骤未反应的交联剂被去除)去除。因此，当以上文限定的范围内的量使用交联剂时，有可能使用最佳量的交联剂实际参与交联中。
[0045]也就是说，当环氧交联剂以小于0.01摩尔份的量使用时，不可能充分进行交联并且因此几乎不可能生成水不溶性凝胶。当环氧交联剂以大于60摩尔份的量使用时，交联不能改进多糖的物理性质，未反应的交联剂是危险的，并且洗涤需要的成本增加导致经济损失。
[0046] 如本文使用的，术语“碱性化合物”为pH调节剂并且一般的碱性化合物将pH调节到12或更高。碱性化合物为水溶性的并且与水混合后表现出12或更高的pH。当其中溶解有多糖和环氧基交联剂的溶液具有4或更低的pH时，在透明质酸和环氧基交联剂之间会大量产生酯键。当溶液具有12或更高的pH时，在透明质酸和环氧基交联剂之间会大量产生醚键。当溶液具有4-12的pH时，在透明质酸和环氧基交联剂之间酯键和醚键联合存在。因此，有可能通过改变PH控制交联键的类型。本发明中，交联在碱性条件下进行，从而产生醚键。如通过下面的测试实施例确定的，在加压灭菌过程中醚交联键更稳定。
[0047]所述碱性化合物可为包含碱金属，包括钠、钾、钙和锂的化合物。例如碱性化合物优选为氢氧化钠但不限于此。
[0048]优选地，溶剂为水。
[0049]然后，混合物在真空下在1_30°C干燥以去除溶剂。 [0050]此步骤通过在低温真空下干燥混合物进行。如本文使用的，所述低温干燥通过在真空下干燥混合物同时，考虑到水的沸点，控制压力而进行。优选地，干燥产品的温度保持在1_30°C。此外，用于交联的反应混合物保持在水的沸点为1_30°C时的压力下，也即
l-30mmHg的压力，此时通过干燥从混合物中蒸发的水连续不断地被去除。去除溶剂的步骤后，水溶性多糖被浓缩至浓度为50-99wt%，优选为50-90wt%。
[0051]当温度低于rc时，冷冻干燥后得到的组合物在真空干燥过程中和完成干燥步骤后变成多孔的海绵状。因此，不可能改进本发明寻求的抗生物降解性。当温度高于30°c时，在强碱条件下出现分子量迅速下降。因此，难以改进本发明寻求的抗生物降解性。
[0052]此外，当压力低于ImmHg时，由蒸发潜热干燥的组合物的温度变得低于凝固点，组合物凝固，导致多孔的海绵状结构。因此，难以改进抗生物降解性。当压力高于30mmHg时，水的去除速率太慢难以进行快速干燥。因此，需要过长的处理时间，从而导致成本效益下降。
[0053]当通过此真空干燥去除溶剂时，在水溶性多糖和环氧交联剂之间发生交联，从而形成水不溶性凝胶。结果显示，在30°C或更低的低温下的真空干燥步骤，抑制了在强碱水溶液状态下发生的水溶性多糖的分子量的下降。
[0054]如本文使用的，水不溶性凝胶意为通过交联具有线性结构、有连接到主链或径向结构的分支的支链结构的水溶性多糖形成的三维网状结构，并且不具有水溶性但仅在水中溶胀。决定水不溶性凝胶的物理性质的主要参数包括用于交联的聚合物的分子结构和分子量、交联密度和交联类型。
[0055]根据本发明的方法，有可能使交联步骤期间发生的多糖分子量的下降最小化，使多糖和环氧交联剂之间的交联效率最大化，并且保持水不溶性凝胶状态稳定，即使在由交联得到的水不溶性凝胶与缓冲溶液混合并经受加压灭菌的条件下。
[0056]在本发明的另一方面中，提供了包含水溶性多糖、环氧交联剂、碱性化合物和溶剂的水不溶性凝胶组合物。
[0057]所述组合物优选包含基于组合物的总重量的l-20wt%的量的水不溶性凝胶。当水不溶性凝胶以低于lwt%的量使用时，组合物的流动性太高以致注射后难以固定在组织中，从而导致实用性下降。当水不溶性凝胶以高于20wt%的量使用时，组合物的流动性太低以致难以使用注射器针头进行注射。
[0058]根据本发明的水不溶性凝胶组合物，当其具有30-200的溶胀度时，是透明的，当具有10-30的溶胀度时，是半透明的并为乳白色，以及当其具有2-10的溶胀度时，是不透明的并为白色的。通常，商购的包含透明质酸水不溶性凝胶的组合物是完全透明的。然而，根据本发明得到的包含水不溶性凝胶的组合物，取决于组合物中透明质酸水不溶性凝胶的溶胀度，表现出不同的外观。这是由于在较低的溶胀度下不同的光散射程度，从而导致较低的透明度。
[0059]当根据本发明的水不溶性凝胶组合物加入具有6.5-7.5的pH的磷酸盐缓冲溶液中，然后进行溶胀和加压灭菌时，基于最初加入的组合物的重量的70-99wt%的组合物仍为水不溶性凝胶。所述磷酸盐缓冲溶液优选具有0.0OlM或更高的磷酸盐浓度。
[0060]如本文使用的，加压灭菌不作特别限定，只要其对本领域技术人员是已知的。例如，加压灭菌可为在大约121°C下进行20分钟。
[0061]此外，组合物在溶胀后具有相当于加压灭菌后仍然存在的水不溶性凝胶干重的
2-200倍的重量。也就是说，在加压灭菌并加入用于溶胀的等渗溶液后仍然存在的水不溶性凝胶溶胀后的重量为加压灭菌后仍然存在的水不溶性凝胶干重的2-200倍。当溶胀后重量小于干重的2倍时，水不溶性凝胶具有极高的强度，并因此难以使凝胶形成微粒。另一方面，当溶胀后重量大于干重的200倍时，不可能完成根据本发明的改进抗生物降解性的目标。
[0062]当存在于交联剂中的任何一个能够交联的官能团未反应时(也即交联不完全)，使用水不溶性凝胶作为要被移植入生物组织的组合物的原料会对移植的组合物的安全性带来不利影响。因此，根据本发明，为了使在交联后得到的交联的水不溶性凝胶中未完全交联的交联剂最小化，洗涤并再次干燥经受交联的水不溶性凝胶。然后，相互比较最初的水不溶性凝胶和再干燥步骤后得到的水不溶性凝胶的溶胀度。如此，优化未完全交联的交联剂最少化的交联条件。
[0063]根据制备水不溶性凝胶组合物的方法和由此制得的水不溶性凝胶组合物，有可能通过使用少量的交联剂，获得其中具有均匀混合的高分子量的水溶性多糖的水不溶性凝胶组合物。所述水不溶性凝胶组合物包含高含量多糖同时表现出使得组合物可通过注射器针头注射的这样程度的极好的流动性。此外，所述水不溶性凝胶组合物对当组合物用作活体移植材料时必不可少的加压灭菌是稳定的，并且具有高的成本效益和特性(quality)。因此，根据本发明的水不溶性凝胶组合物可作为稳定剂、保湿剂、分散助剂、粘度调节剂、药物递送载体、组织恢复填料、手术后的抗粘附膜形成材料等等用于食品、化妆品、药品和医疗器械。更具体地，所述水不溶性凝胶组合物可以用作用于注射药物载体的组合物，用于经粘膜和经皮吸收的药物载体的组合物，用于口服的药物载体的组合物，用于生物组织修复的组合物，用于预防手术后生物组织粘附的组合物，用于整形外科的填料组合物，用于关节的嵌入组合物，贴片式伤口处理敷料组合物，用于治疗骨关节炎的组合物，支持眼科手术的注射组合物，用于治疗干眼症的组合物，用于治疗皱纹的组合物，用于治疗齿龈的组合物，用于治疗鼓膜穿孔的组合物，保健食品的组合物或化妆用的组合物。
[0064]现在将描述实施例和比较例。下面的实施例仅用于说明目的并不打算限制本发明的范围。
[0065][比较例I]
[0066] 向50ml具塞试管中加入Ig的具有1，400，000分子量的透明质酸钠(sodiumhayaluronate)(下文中称为HA-Na)。接下来，向其加入PBS7.0以使ΗΑ-Na的浓度为0.5%。然后，搅拌所得混合物直至得到透明的溶液。
[0067][比较例2]
[0068]向50ml具塞试管中加入9g的氢氧化钠水溶液(pH13)和Ig的具有1，400, 000分子量的HA-Na。接下来，搅拌所得混合物直至得到透明的溶液。完成搅拌后，所得混合物在40°C的水浴中存放4小时并用PBS7.0稀释至20倍以使HA-Na的浓度为0.5%。
[0069][比较例3]
[0070]向50ml具塞试管中加入9g的氢氧化钠水溶液(pH13)和Ig的具有1，400, 000分子量的HA-Na。接下来，搅拌所得混合物直至得到透明的溶液。完成搅拌后，所得HA-Na溶液置于聚乙烯板上，压至2mm的厚度并放入设置为40°C的加热炉中，随后干燥24小时并用PBS7.0稀释至HA-Na的浓度为0.5%。
[0071][比较例4]
[0072]向50ml具塞试管中加入9g的氢氧化钠水溶液(pH13)和Ig的具有1，400, 000分子量的HA-Na。接下来，搅拌所得混合物直至得到透明的溶液。完成搅拌后，所得HA-Na溶液置于聚乙烯板上，压至2mm的厚度并在室温下干燥4天，随后用PBS7.0稀释至HA-Na的浓度为0.5%。
[0073][比较例5]
[0074]向50ml具塞试管中加入9g的氢氧化钠水溶液(pH13)和Ig的具有1，400, 000分子量的HA-Na。接下来，搅拌所得混合物直至得到透明的溶液。完成搅拌后，所得HA-Na溶液置于聚乙烯板上，压至2mm的厚度并放入设置为40°C的真空干燥箱中，所述真空干燥箱的压力控制至IOmmHg或更小，随后干燥24小时并用PBS7.0稀释至HA-Na的浓度为0.5%。
[0075][实施例1]
[0076]向50ml具塞试管中加入9g的氢氧化钠水溶液(pH13)和Ig的具有1，400, 000分子量的HA-Na。接下来，搅拌所得混合物直至得到透明的溶液。完成搅拌后，所得HA-Na溶液放置于聚乙烯板上，使其形成2mm的厚度并放入设置为30°C的真空干燥箱中，所述真空干燥箱的压力控制至IOmmHg或更小，随后干燥24小时并用PBS7.0稀释至HA-Na的浓度为0.5%。
[0077][测试实施例1]使用圆盘粘度计的粘度的测量
[0078]进行下面的测试以测量根据比较例1-5和实施例1的每种组合物的粘度。在0.02M磷酸盐缓冲溶液(PH7.0, NaCl0.8wt%，称为PBS7.0)中包含浓度为0.5wt%的透明质酸钠的溶液的粘度通过使用勃罗克费尔特(Brookfield)圆盘粘度计测量。粘度测量在温度为25 °C,使用圆盘尺寸#62在圆盘转速为30rpm下进行。
[0079]结果示于以下表1中。从表1可以看出，当比较比较例1-5实施例1时，在使用强碱的条件下，透明质酸的分子量表现出迅速的下降。还发现在强碱水溶液中发生的透明质酸分子量的这种下降可通过在30 V或更低的低温真空过程进行抑制。
[0080][表 I]
[0081]
【权利要求】
1.一种制备水不溶性凝胶组合物的方法，包含以下步骤: 混合水溶性多糖、环氧交联剂、碱性化合物和溶剂；及 在真空下在1-30°C干燥上述所得混合物以去除溶剂。
2.根据权利要求1所述的制备水不溶性凝胶组合物的方法，其中真空干燥步骤在l-30mmHg下进行。
3.根据权利要求1所述的制备水不溶性凝胶组合物的方法，其中去除溶剂的步骤以水溶性多糖浓缩至浓度为50-99Wt%的方式进行。
4.根据权利要求1所述的制备水不溶性凝胶组合物的方法，其中所述水溶性多糖具有500，000-5, 000, 000道尔顿的分子量。
5.根据权利要求1所述的制备水不溶性凝胶组合物的方法，其中基于100重量份的溶剂，所述水溶性多糖使用的量为1-100重量份。
6.根据权利要求1所述的制备水不溶性凝胶组合物的方法，其中所述水溶性多糖为选自由透明质酸、透明质酸盐、聚-Y -谷氨酸、聚-Y -谷氨酰胺、琼脂、海藻酸、海藻酸盐、角叉菜胶、红藻胶、果胶、阿拉伯树胶、刺梧桐树胶、黄蓍胶、茄替胶、瓜尔豆胶、刺槐豆胶、欧车前籽胶、明胶(gelatin)、几丁质、葡聚糖、黄原胶、壳聚糖、软骨素-4-硫酸盐、软骨素-6-硫酸盐和淀粉组成的组中的至少一个。
7.根据权利要求1所述的制备水不溶性凝胶组合物的方法，其中每摩尔水溶性多糖中的羟基，使用0.01-60摩尔 份的环氧交联剂。
8.根据权利要求1所述的制备水不溶性凝胶组合物的方法，其中所述环氧交联剂为选自由表氯醇、表溴醇、1，4- 丁二醇二缩水甘油醚、乙二醇二缩水甘油醚、1，6-己二醇二缩水甘油醚、丙二醇二缩水甘油醚、聚乙二醇二缩水甘油醚、聚丙二醇二缩水甘油醚、聚丁二醇二缩水甘油醚、新戊二醇二缩水甘油醚、聚甘油聚缩水甘油醚、二甘油聚缩水甘油醚、甘油聚缩水甘油醚、三甲基丙烷(trimethlypropane)聚缩水甘油醚、1，2-(双(2，3-环氧丙氧基)乙烯、季戊四醇聚缩水甘油基醚和山梨糖醇聚缩水甘油基醚组成的组中的至少一个。
9.根据权利要求1所述的制备水不溶性凝胶组合物的方法，其中所述碱性化合物为包含碱金属，包括钠、钾、钙和锂的化合物。
10.通过权利要求1-9任一项限定的方法得到的水不溶性凝胶组合物。
11.根据权利要求10所述的水不溶性凝胶组合物，其包含基于组合物总重的l-20wt%的水不溶性凝胶。
12.根据权利要求10所述的水不溶性凝胶组合物，当水不溶性凝胶具有30-200的溶胀度时，组合物是透明的，当水不溶性凝胶具有10至小于30的溶胀度时，组合物是半透明的并为乳白色，及当水不溶性凝胶具有2至小于10的溶胀度时，组合物是不透明的并为乳白色的。
13.根据权利要求10所述的水不溶性凝胶组合物，其中当组合物加入具有6.5-7.5的pH的磷酸盐缓冲溶液中，溶胀并加压灭菌时，70-99wt %的最初加入的组合物仍为水不溶性凝胶。
14.根据权利要求13所述的水不溶性凝胶组合物，其在溶胀后具有相当于加压灭菌后仍然存在的水不溶性凝胶干重的2-200倍的重量。
【文档编号】A61K9/10GK103974722SQ201280057847
【公开日】2014年8月6日 申请日期:2012年11月21日 优先权日:2011年11月24日
【发明者】阿泳昌, 赵成衍, 黄仁锡, 朴宣映, 高现珠, 金赫, 权珉贞, 朴元锡 申请人:株式会社爱茉莉太平洋