紫锥菊根颗粒剂及其制备方法和在制备猪鸡疫苗免疫增强剂中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明属于植物药制品领域，公开了一种紫锥菊根颗粒剂及其制备方法和应用。该紫锥菊根颗粒剂中菊苣酸含量为5mg/g～25mg/g。制备方法按照以下步骤：将紫锥菊根药材粉碎，过筛得紫锥菊根粉末；将紫锥菊根粉末与重量百分比浓度为50～80％的乙醇溶液混合，浸泡，超声提取两次，过滤并收集滤液和残渣；将残渣与重量百分比浓度为10～30％的乙醇溶液混合，超声波提取1次，过滤并收集滤液，合并上述滤液；将滤液减压回收乙醇，浓缩；将浓缩液喷雾干燥，得到浸膏粉；将浸膏粉与辅料混合，制粒；流化床干燥，粉筛，灌装，即得紫锥菊根颗粒剂。该紫锥菊根颗粒剂可显著增强鸡新城疫疫苗和猪蓝耳病疫苗的免疫效果。
【专利说明】紫锥菊根颗粒剂及其制备方法和在制备猪鸡疫苗免疫增强 剂中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于植物药制品领域，具体涉及一种紫锥菊根颗粒剂及其制备方法和在制 备猪鸡疫苗免疫增强剂中的应用。
【背景技术】
[0002] 现代规模化养殖由于各种管理原因导致动物免疫力低下，使养殖生产性能下降， 容易感染疾病，给养殖业带来巨大的经济利益损失，免疫增强剂可以提高动物机体的免疫 力，提高抗病能力、与疫苗同用，可以增强机体对疫苗的免疫应答，保护免疫水平提前达到， 抗体滴度明显提高，与抗病毒药物抗菌药物同用，可以增强抗病毒药物抗菌药物杀灭病原 体的能力。
[0003] 紫锥菊根为菊科紫锥菊属多年生草本植物紫锥菊（Echinaceapupurea(L.) Moench)的根和根茎，具有较强的免疫强化及抗炎作用，目前兽药上紫锥菊根剂型有紫锥菊 根末，为散剂，散剂仅用于混饲，不能饮水给药，使用不方便，其中有效成分在植物细胞内， 需经过消化、溶出才能被动物吸收，而动物的消化道短，部分药物未被吸收就被排出体外， 造成浪费，紫锥菊根末中有效果成分的生物利用率相对较低，使用不方便，起效慢。
【发明内容】
[0004] 为了解决现有技术的缺点和不足之处，本发明的首要目的在于提供一种紫锥菊根 颗粒剂的制备方法。
[0005] 本发明的另一目的在于提供一种由上述制备方法制备得到的紫锥菊根颗粒剂。
[0006] 本发明的再一目的在于提供上述紫锥菊根颗粒剂在制备猪鸡疫苗免疫增强剂中 的应用。可以解决现有产品吸收慢、生物利用度低、使用不方便的问题。
[0007] 本发明目的通过以下技术方案实现：
[0008] -种紫锥菊根颗粒剂的制备方法，按照以下操作步骤：
[0009] (1)将紫锥菊根药材粉碎，过筛得到紫锥菊根粉末；
[0010] (2)将紫锥菊根粉末以质量比1 :8?1 :15的料液比与重量百分比浓度为50? 80%的乙醇溶液混合，浸泡30?60分钟，超声提取两次，每次超声时间20?30分钟，过滤 并收集滤液和残渣；将残渣以质量比1 :5?1:10的料液比与重量百分比浓度为10?30% 的乙醇溶液混合，超声波提取1次，提取时间为10?30分钟，过滤并收集滤液，合并上述滤 液；
[0011] (3)将上述所得滤液在50?80°C下减压回收乙醇，浓缩至60°C下相对密度为 1. 05?1. 15的浓缩液；
[0012] (4)将上述浓缩液喷雾干燥，得到浸膏粉；
[0013] (5)将浸膏粉与辅料按1 :3?1 :6的质量比混合，制粒；
[0014] (6)流化床干燥，粉筛，灌装，即得紫锥菊根颗粒剂。
[0015] 步骤（1)所述紫锥菊根药材为紫锥菊药材地下部分，即紫锥菊的根和根茎；所述 紫锥菊为紫花紫锥菊；所述过筛为过10?40目筛。
[0016] 步骤⑷所述喷雾干燥的进风温度为120°C，出风温度为80°C。
[0017]步骤（5)所述辅料为蔗糖、葡萄糖或糊精。
[0018] 步骤（6)所述流化床干燥的温度为20?80°C。
[0019] 一种由上述制备方法制备得到的紫锥菊根颗粒剂。
[0020] 所述紫锥菊根颗粒剂中菊苣酸含量为5mg/g?25mg/g。
[0021] 每lg所述紫锥菊根颗粒相当于紫锥菊根药材lg?3g。
[0022] 上述紫锥菊根颗粒剂在制备猪鸡疫苗免疫增强剂中的应用。
[0023] 所述猪鸡疫苗为鸡新城疫疫苗和猪蓝耳病疫苗；所述应用是采用以下步骤：每 100g紫锥菊根颗粒兑水20L?60L饮水使用，连用7天。
[0024] 本发明的紫锥菊根颗粒的制备方法包括紫锥菊根的粉碎、超声提取、过滤、浓缩、 喷雾干燥和制粒、干燥步骤，本发明可以有效的提高有效成分的提取得率，且成本低，质量 稳定、生物利用率高、饮水给药方便，该制备方法适合于工业化生产。用于提高动物免疫功 能，适用于免疫功能低下动物，提高疫苗免疫效果。
[0025] 下面结合试验方法来说明本发明方法的合理性。
[0026] 本发明采用超声波提取技术从紫锥菊根提取有效成分的工艺方法、浓缩干燥的方 法、制粒干燥的方法以及所得到的产品与现有提取技术和产品相比，具有以下优点和显著 的效果：
[0027]1、提取温度低，有效成分降解少，得率高：超声波提取紫锥菊根药材的温度可控制 在常温，最佳提取时间为20?30分钟，有效避免菊苣酸、单咖啡酰酒石酸等对热不稳定、易 水解或氧化等成分的破坏，有效成分的收率比加热回流提取法得率高5%?15%，且大大 降低能耗。
[0028] 2、缩短提取时间：超声波提取紫锥菊根在20?30分钟即可获得最佳提取率，提取 时间较常规方法缩短50%?90%，提高了提取效率。
[0029] 3、溶剂用量少：超声波提取溶剂使用量是常规方法的40?70%，节省了溶剂的使 用量和浓缩时的耗能、耗时，减轻环境污染。
[0030] 4、喷雾干燥可以实现瞬间干燥，有效的减少了有效成分的破坏，提高了生产效率； 流化床干燥技术，在常温、低温下就可以快速干燥颗粒；防止有效成分破坏，提高生产效率。
[0031] 5、本发明所得制剂，增强免疫活性和临床疗效可靠，同时，采用口服或混水饮用的 给药方式，使用方便，操作简单，药物分散度大，易吸收，生物利用度高，奏效快，药效好，适 合在养殖生产中应用。
【具体实施方式】
[0032] 下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
[0033] 实施例1
[0034] (1)紫锥菊根的粉碎：将紫花紫锥菊根药材粉碎，过10目筛得紫锥菊根粉末；
[0035] (2)乙醇溶液超声波提取：取1000g紫锥菊根粉末，将其以质量比1 :8的料液比与 重量百分比浓度为70%的乙醇溶液混合，浸泡30分钟，超声提取两次，每次超声时间20分 钟，过滤并收集滤液和残渣；将残渣以质量比1 :5的料液比与重量百分比浓度为10%的乙 醇溶液混合，超声波提取1次，提取时间为10分钟，过滤并收集滤液，合并上述滤液；
[0036] (3)浓缩：将上述所得滤液在50°C下减压回收乙醇，浓缩至60°C下相对密度为 1. 10的浓缩液；
[0037] (4)将上述浓缩液喷雾干燥，进风温度120°C，出风温度80°C，得到浸膏粉；
[0038] (5)将浸膏粉与蔗糖按1: 3的质量比混合，制粒；
[0039] (6)60°C流化床干燥，干燥温度40°C;干燥后，粉筛，灌装，即得紫锥菊根颗粒。
[0040] 本实施例所得紫锥菊根颗粒为棕褐色颗粒，生药含量为每lg药液相当于紫锥菊 根lg，经高效液相色谱法检测，菊苣酸含量为5. 76mg/g。
[0041] 实施例2
[0042] (1)紫锥菊根的粉碎：将紫锥菊根药材粉碎，过20目筛得紫锥菊根粉末；
[0043] (2)乙醇溶液超声波提取：取2000g紫锥菊根粉末，将其以质量比1:10的料液比 与重量百分比浓度为50%的乙醇溶液混合，浸泡50分钟，超声提取两次，每次超声时间25 分钟，过滤并收集滤液和残渣；将残渣以质量比1 :8的料液比与重量百分比浓度为20%的 乙醇溶液混合，超声波提取1次，提取时间为30分钟，过滤并收集滤液，合并上述滤液；
[0044] (3)浓缩：将上述所得滤液在60°C下减压回收乙醇，浓缩至60°C下相对密度为 1. 15的浓缩液；
[0045] (4)将上述浓缩液喷雾干燥，进风温度120°C，出风温度80°C，得到浸膏粉；
[0046] (5)将浸膏粉与葡萄糖按1:3. 5的质量比混合，制粒；
[0047] (6)20°C流化床干燥，干燥温度40°C;干燥后，粉筛，灌装，即得紫锥菊根颗粒。
[0048] 本实施例所得紫锥菊根颗粒为棕色颗粒，生药含量为每lg颗粒相当于紫锥菊根 2g，经高效液相色谱法检测，菊苣酸含量为10. 30mg/g。
[0049] 实施例3
[0050] (1)紫锥菊根的粉碎：将紫锥菊根药材粉碎，过40目筛得紫锥菊根粉末；
[0051] (2)乙醇溶液超声波提取：取3000g紫锥菊根粉末，将其以质量比1 :15的料液比 与重量百分比浓度为80 %的乙醇溶液混合，浸泡60分钟，超声提取两次，每次超声时间30 分钟，过滤并收集滤液和残渣；将残渣以质量比1 :1〇的料液比与重量百分比浓度为30%的 乙醇溶液混合，超声波提取1次，提取时间为20分钟，过滤并收集滤液，合并上述滤液；
[0052] (3)浓缩：将上述所得滤液在80°C下减压回收乙醇，浓缩至60°C下相对密度为 1. 05的浓缩液；
[0053] (4)将上述浓缩液喷雾干燥，进风温度120°C，出风温度80°C，得到浸膏粉；
[0054] (5)将浸膏粉与糊精按1:6的质量比混合，制粒；
[0055] (6)80°C流化床干燥，干燥温度40°C;干燥后，粉筛，灌装，即得紫锥菊根颗粒。
[0056] 本实施例所得紫锥菊根颗粒为棕色颗粒，生药含量为每lg颗粒相当于紫锥菊根 3g，经高效液相色谱法检测，菊苣酸含量为15. 22mg/g
[0057] 实施例4 (对比实施例）
[0058] (1)紫锥菊根的粉碎：将紫锥菊根药材粉碎，过20目筛得紫锥菊根粉末；
[0059] (2)乙醇溶液超声波提取：取2000g紫锥菊根粉末，将其以质量比1:10的料液比 与重量百分比浓度为30%的乙醇溶液混合，浸泡50分钟，超声提取两次，每次超声时间25 分钟，过滤并收集滤液和残渣；将残渣以质量比1 :8的料液比与重量百分比浓度为20%的 乙醇溶液混合，超声波提取1次，提取时间为30分钟，过滤并收集滤液，合并上述滤液；
[0060] (3)浓缩：将上述所得滤液在60°C下减压回收乙醇，浓缩至60°C下相对密度为 1. 15的浓缩液；
[0061] (4)将上述浓缩液喷雾干燥，进风温度120°C，出风温度80°C，得到浸膏粉；
[0062] (5)将浸膏粉与葡萄糖按1:3. 5的质量比混合，制粒；
[0063] (6)20°C流化床干燥，干燥温度40°C;干燥后，粉筛，灌装，即得紫锥菊根颗粒。
[0064] 本实施例所得紫锥菊根颗粒为棕色颗粒，生药含量为每lg颗粒相当于紫锥菊根 2g，经高效液相色谱法检测，菊苣酸含量为10. 30mg/g。
[0065] 实施例5
[0066] 采用实施例1、实施例2和实施例3、以及实施例4制得的紫锥菊根颗粒对鸡促免 疫效果的影响试验：
[0067] 7日龄试验肉鸡150只，随机分为10个组，分别为八、8、(：、03、？、6、11、1、1组，药 物添加及处理情况具体见下表1，分别在10、11、12日龄按环磷酰胺80mg/Kg的剂量给D、E 组的鸡连续注射3d，每天1次，造成雏鸡机体中度免疫抑制。饲喂方法采用笼养群饲，每日 喂料两次，自由饮水。试验期：21d，给药期为7d。分别在给药前、给药后7天、14天、21天 各组随机抽取5只，心脏无菌采血，离心分离血清，采用血凝抑制试验（HI)检测新城疫抗 体滴度。所有肉鸡采用如下免疫程序：
[0068] 6日龄：NDIV滴鼻、点眼；
[0069] 7日龄：IBD双倍饮水。
[0070]表1紫锥菊根颗粒对鸡免疫功能的试验[0071]
【权利要求】
1. 一种紫锥菊根颗粒剂的制备方法，其特征在于按照以下操作步骤： (1) 将紫锥菊根药材粉碎，过筛得到紫锥菊根粉末； (2) 将紫锥菊根粉末以质量比1 :8?1 :15的料液比与重量百分比浓度为50?80%的 乙醇溶液混合，浸泡30?60分钟，超声提取两次，每次超声时间20?30分钟，过滤并收集 滤液和残渣；将残渣以质量比1 :5?1:10的料液比与重量百分比浓度为10?30%的乙醇 溶液混合，超声波提取1次，提取时间为10?30分钟，过滤并收集滤液，合并上述滤液； (3) 将上述所得滤液在50?80°C下减压回收乙醇，浓缩至60°C下相对密度为1. 05? 1. 15的浓缩液； (4) 将上述浓缩液喷雾干燥，得到浸膏粉； (5) 将浸膏粉与辅料按1 :3?1 :6的质量比混合，制粒； (6) 流化床干燥，粉筛，灌装，即得紫锥菊根颗粒剂。
2. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（1)所述紫锥菊根药材为紫锥 菊药材地下部分，即紫锥菊的根和根茎；所述紫锥菊为紫花紫锥菊；所述过筛为过10?40 目筛。
3. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（4)所述喷雾干燥的进风温度 为120°C，出风温度为80°C。
4. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（5)所述辅料为蔗糖、葡萄糖或 糊精。
5. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（6)所述流化床干燥的温度为 20 ?80?。
6. -种由权利要求1?5任一项所述制备方法制备得到的紫锥菊根颗粒剂。
7. 根据权利要求6所述的紫锥菊根颗粒剂，其特征在于：所述紫锥菊根颗粒剂中菊苣 酸含量为5mg/g?25mg/g。
8. 根据权利要求6所述的紫锥菊根颗粒剂，其特征在于：每lg所述紫锥菊根颗粒相当 于紫锥菊根药材lg?3g。
9. 根据权利要求6所述的紫锥菊根颗粒剂在制备猪鸡疫苗免疫增强剂中的应用。
10. 根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述猪鸡疫苗为鸡新城疫疫苗和猪蓝耳 病疫苗；所述应用是采用以下步骤：每l〇〇g紫锥菊根颗粒兑水20L?60L饮水使用，连用7 天。
【文档编号】A61P37/04GK104257714SQ201410461337
【公开日】2015年1月7日 申请日期:2014年9月11日 优先权日:2014年9月11日
【发明者】吴鸿, 郭世宁, 武力, 王昌库, 石达友, 李美娣, 陈宝妮, 涂玉蓉 申请人:华南农业大学, 广州华农大实验兽药有限公司