一种智能靶向载药复合胶束的制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种智能靶向载药复合胶束的制备方法，所述复合胶束表面同时修饰有靶向配体和pH/温度协同敏感聚合物，实现靶向配体在血液循环时（37℃，pH7.4）的“屏蔽”状态和在肿瘤组织时（热疗温度40-44℃，pH6.5-6.8）的“去屏蔽”状态的可逆转变。本发明使用的pH与温度双重敏感具有协同性，更适用于人体的复杂生理环境。本发明的优点是：该复合胶束充分利用了靶向配体的靶向性和pH/温度协同敏感聚合物的灵敏相转变性质，构建了兼具肿瘤靶向特异性和血液循环稳定性的靶向可逆屏蔽纳米给药系统。
【专利说明】一种智能靶向载药复合胶束的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物医药【技术领域】，特别是一种智能靶向载药复合胶束的制备方法。
【背景技术】
[0002] 靶向纳米给药系统可以将包载的"药物"定点输送至病变部位，提高对肿瘤组织的 特异性治疗效果、降低化疗药物的副作用。然而目前广泛使用的靶向配体大多是疏水性和 外源性的，导致靶向纳米给药系统容易被单核吞噬系统(MPS)清除，降低药物在肿瘤区域的 富集量。实现靶向配体在血液循环环境下的屏蔽状态和在肿瘤环境下的去屏蔽状态，可有 效地避免纳米给药系统被单核吞噬系统(MPS)清除和提高纳米给药系统的肿瘤细胞靶向能 力，是提高靶向纳米给药系统的肿瘤富集量和治疗效果的重要方法。
[0003] 研究者设计了多种屏蔽-去屏蔽靶向配体的智能药物传递系统，。屏蔽靶向配 体的方法主要包括PEG掩埋，聚合物修饰，调控靶向配体电性等，然后利用肿瘤部位的特异 性微环境例如低pH(6. 5-6. 8)和过量表达的酶等，触发脱PEG，表面电荷翻转，靶向配体的 弹出以及使失活的配体恢复活性等，从而实现靶向配体的去屏蔽。例如，Zhuo等利用酸敏 感键在载体中修饰上PEG以屏蔽靶向配体，到达肿瘤微酸部位后（pH6. 5-6. 8)，酸敏感键 断裂脱去PEG，暴露靶向配体，发挥靶向作用，参见：QUAN C Y，CHEN J X，WANG H Y，et al. Core Shell Nanosized Assemblies Mediated by the a 旦 Cyclodextrin Dimer with a Tumor-Triggered Targeting Property[J]. ACS nano, 2010， 4(7): 4211-4219 ； Jin等利用血液与肿瘤环境的微小pH差异，使中性环境失活的细胞穿膜肽在肿瘤弱酸性条 件下恢复活性，参见：JIN E, ZHANG B, SUN X，et al. Acid-active cell-penetrating peptides for in vivo tumor-targeted drug delivery[J]. Journal of the American Chemical Society, 2013，135(2): 933-940 ;Zhang 等利用肿瘤环境中过表达的 MMP 酶 实现了纳米粒表面的聚天冬氨酸屏蔽层在肿瘤部位的定点脱落从而恢复靶向能力，参见： ZHANG J, YUAN Z F, WANG Y, et al. Multifunctional envelope-type mesoporous silica nanoparticles for tumor-triggered targeting drug delivery[J]. Journal of the American Chemical Society, 2013, 135(13): 5068-5073。这些精巧的设计均 实现了靶向配体在血液循环环境中的屏蔽状态和在肿瘤部位的去屏蔽状态，从而赋予纳米 粒子以血液循环稳定性和肿瘤部位的靶向性。尽管如此，最近的研究（Deng C，Jiang Y， Cheng R, Meng F, Zhong Z. Biodegradable polymeric micelles for targeted and controlled anticancer drug delivery: Promises, progress and prospects [J]. Nano Today 2012; 7:467 - 480.)表明，肿瘤组织的药物富集量仍不足注射量的5%。
[0004] 我们认为，肿瘤组织的药物富集量较低的一个重要原因是，靶向配体的屏蔽和去 屏蔽效果不具有可逆性。那些去屏蔽但未能被肿瘤细胞摄取的载药纳米粒子再次回到血液 循环时，容易被单核吞噬系统（MPS)清除。因此发展一种靶向配体具有可逆屏蔽-去屏蔽 效果的载药纳米系统十分必要。
[0005] 利用温敏聚合物的可逆相转变，可以实现靶向配体在血液循环环境和肿瘤热疗区 域的可逆屏蔽和去屏蔽效果。Salmaso等人和Park等人使用温敏聚合物聚N-异丙基丙 烯酰胺，利用温度敏感控制金纳米粒或者量子点的促融合蛋白介导的可控的细胞摄取，参 见 Mastrotto F, Caliceti P, Amendola V, Bersani S, Magnusson JP, Meneghetti M, et al. Polymer control of ligand display on gold nanoparticles for multimodal switchable cell targeting. Chem Commun 2011;47:9846 - 9848?和Kim C, Lee Y, Kim JS, Jeong JH, Park TG. Thermally triggered cellular uptake of quantum dots immobilized with poly(N-isopropylacrylamide) and cell penetrating peptide. Langmuir 2010;26:14965 - 1499.温和热疗下的肿瘤部位温度在40-44°C之间，人体正 常温度是37°C，据此研究者通过亲水单体与N-异丙基丙烯酰胺共聚等方法(参见文献Li ff, Li J, Gao J, Li B, Xia Y, Meng Y, et al. The fine-tuning of thermosensitive and degradable polymer micelles for enhancing intracellular uptake and drug release in tumors. Biomaterials 2011;32:3832-3844)，提高温敏体系的最低临界溶 解温度到40°C左右，从而实现温和热疗下的靶向配体的可逆屏蔽和去屏蔽转变，但是这种 单一利用温敏可逆相转变实现聚合物的伸展和收缩变化的可逆性不佳，响应速度慢(参见 文献 Lutz J-FF, Akdemir, Hoth A, Akdemir 0. Point by point comparison of two thermosensitive polymers exhibiting a similar LCST: Is the age of poly (NIPAM) over J Am Chem Soc 2006; 128:13046 - 13047.)，难以适用于复杂的人体生理环境。因此， 提高温敏靶向可逆屏蔽体系在复杂生理环境下的实用性十分有必要。
[0006] 本发明利用肿瘤组织的微酸环境，构建一种具有温度和pH双重刺激的靶向可逆 屏蔽体系，这种具有协同性的双重敏感提高了该体系在复杂生理环境下的相转变灵敏性。 靶向配体在血液循环时（37°C，pH7. 4)处于"屏蔽"状态，在肿瘤组织时(热疗温度40-44°C， pH6. 5-6. 8)处于"去屏蔽"状态；这种靶向配体的"屏蔽"和"去屏蔽"转变具有可逆性，实现 了在肿瘤组织中未被细胞摄取而重新回到血液循环中的靶向纳米粒靶向配体再次处于"屏 蔽"状态，从而获得兼具高效血液循环稳定性和肿瘤靶向性的靶向纳米给药系统。
【发明内容】
[0007] 本发明针对靶向纳米给药粒子在肿瘤细胞中的药物累积量不足的问题，提供一 种智能靶向载药复合胶束的制备方法。该纳米粒子表面的靶向配体在血液循环时处于 "屏蔽"状态，从而提高血液循环稳定性，在到达肿瘤组织时(温和热疗40-44°C、微酸环境 pH6. 5-6. 8)处于"去屏蔽"状态，从而恢复纳米粒的靶向能力。这种靶向配体的"屏蔽"和 "去屏蔽"状态的转变，具有可逆性。同时，本发明中使用的PH/温度协同敏感聚合物，提高了 靶向纳米系统在复杂生理环境下的相转变灵敏性，进而赋予靶向配体更快的"屏蔽"和"去 屏蔽"可逆转变，从而获得兼具长效的血液循环性和高效靶向性的靶向纳米给药系统。
[0008] 本发明的技术方案： 一种智能靶向载药复合胶束的制备方法，其特征在于：所述智能靶向载药复合胶束使 用PH/温度协同敏感聚合物可逆控制纳米粒子表面靶向配体的"屏蔽"与"去屏蔽"状态， 即该纳米粒子表面的靶向配体在正常血液循环时处于"屏蔽"状态，提高纳米粒的血液循环 稳定性，在到达肿瘤组织时靶向配体处于"去屏蔽"状态，从而恢复纳米粒的靶向能力，这种 靶向配体的"屏蔽"和"去屏蔽"状态的转变具有可逆性，因此可以兼具长效血液循环和高 效肿瘤细胞靶向性，其制备方法包括如下步骤： 1) 温敏嵌段共聚物、PH/温度协同敏感嵌段共聚物、非靶向两亲性嵌段共聚物和靶向两 亲性嵌段共聚物的合成 首先制备由亲水嵌段和疏水嵌段组成的非靶向两亲性嵌段共聚物；使用同样方法，制 备末端含有靶向配体（TLs)的靶向两亲性嵌段共聚物，其中靶向配体偶联在亲水嵌段末端； 制备温敏嵌段共聚物，其中一段为具有温度敏感性的嵌段，一段为疏水嵌段，通过调控投料 比等参数，获得不同的嵌段长度和不同最低临界溶解温度（LCST)的嵌段共聚物；制备pH/ 温度协同敏感嵌段共聚物，其中一段是具有PH/温度协同敏感的共聚物，一段为疏水嵌段， 通过调控投料比等参数，获得不同的嵌段长度、不同pH敏感性和不同最低临界溶解温度 (LCST)的嵌段共聚物； 2) 载药复合胶束的制备 在低于最低临界溶解温度的条件下，通过透析方法，将以上制备的温敏嵌段共聚物和 靶向嵌段共聚物与药物混合制成复合胶束，通过调节嵌段共聚物的投料比例和种类，控制 复合胶束的两嵌段比例和嵌段长度，即可制得智能靶向载药复合胶束。
[0009] 所述靶向配体（TLs)是具有肿瘤细胞靶向作用的物质，包括实体瘤组织表面具有 相应高表达特异性受体的配体-叶酸（FA)、甘草次酸、甘草酸、生物素（biotin)和RGD多 肽。
[0010] 所述非靶向两亲性嵌段共聚物是包括亲水嵌段和疏水嵌段的两嵌段共聚物，其 中亲水嵌段为聚乙二醇（PEG)，聚羟乙基丙烯酸甲酯（PHEMA)、聚甲基丙烯酸P羟丙酯 (PHPMA)或聚乙烯醇（PVA);疏水嵌段为聚己内酯（PCL)、聚乳酸（PLA)或聚（乙交酯-丙交 酯）（PLGA)。
[0011] 所述靶向两亲性嵌段共聚物为亲水嵌段末端修饰有靶向配体（TLs )的两亲性嵌段 共聚物，包括亲水嵌段和疏水嵌段两部分，其中亲水嵌段为聚乙二醇（PEG)，聚羟乙基丙烯 酸甲酯（PHEMA)、聚甲基丙烯酸P羟丙酯（PHPMA)或聚乙烯醇（PVA);疏水嵌段为聚己内酯 (PCL)、聚乳酸（PLA)或聚（乙交酯-丙交酯）（PLGA)。
[0012] 所述温敏嵌段共聚物是包含温敏嵌段和疏水嵌段的两嵌段共聚物，其中温敏嵌段 由温敏单体和亲水性调节单体聚合而成，其中温敏单体为N-异丙基丙烯酰胺（NIPAAm)、 N，N-二乙基丙烯酰胺、甲基乙烯基醚、2-(2-甲氧基乙氧基）乙基甲基丙烯酸酯（ME02MA)或 寡聚乙二醇甲醚甲基丙烯酸酯（OEGMA);亲水性调节单体为丙烯酰胺或N，N-二甲基丙烯酰 胺（DMAAm)单体；疏水嵌段为聚己内酯（PCL)、聚乳酸（PLA)或聚（乙交酯-丙交酯）（PLGA)。
[0013] 所述温敏嵌段共聚物的最低临界溶解温度（LCST)受共聚比例、盐浓度和溶液pH 的影响，当温敏单体为N-异丙基丙烯酰胺（NIPAAm)、亲水单体为N，N-二甲基丙烯酰胺 (DMMm)且N-异丙基丙烯酰胺（NIPAAm)与N，N-二甲基丙烯酰胺（DMMm)的共聚比例为 5:l-l:l、pH为7.4、NaCl浓度为135 mM时，该嵌段共聚物自组装得到的聚合物胶束的最低 临界溶解温度（LCST)为38-41 °C。
[0014] 所述pH/温度协同敏感嵌段共聚物是包含pH/温度协同敏感嵌段和疏水嵌段的两 嵌段共聚物，其中PH/温度协同敏感嵌段是有温敏单体、调节单体和pH敏感单体共聚而成， 温敏单体为N-异丙基丙烯酰胺（NIPAAm)、N，N-二乙基丙烯酰胺、甲基乙烯基醚、2-(2-甲氧 基乙氧基）乙基甲基丙烯酸酯（ME02MA)或寡聚乙二醇甲醚甲基丙烯酸酯（OEGMA)，调节单 体为丙烯酰胺（AAm)、N，N-二甲基丙烯酰胺（DMAAm)、甲基丙烯酸乙酯、丙烯酸乙酯单体，pH 敏感单体为丙烯酸（AA)或甲基丙烯酸(MAA)，疏水嵌段为聚己内酯（PCL)、聚乳酸（PLA)或 聚（乙交酯-丙交酯）（PLGA)。
[0015] 所述最低临界溶解温度（LCST)受共聚比例、盐浓度和溶液pH的影响，当温敏单 体为N-异丙基丙烯酰胺（NIPAAm)、亲水性调节单体为N，N-二甲基丙烯酰胺（DMAm)且 N-异丙基丙烯酰胺（NIPAAm)与N，N-二甲基丙烯酰胺（DMAm)的共聚比例为 pH为7. 4、NaCl浓度为135 mM时，该温敏嵌段共聚物的最低临界溶解温度（LCST)为 38-41°C;当温敏单体为N-异丙基丙烯酰胺（NIPAAm)、调节单体为甲基丙烯酸乙酯、pH敏感 单体是丙烯酸（AA)，且N-异丙基丙烯酰胺：甲基丙烯酸乙酯：丙烯酸的三单体共聚比例为 1:0. 04-0. 15:0. 04-0. 15,在离子强度为150mM的PBS中，pH/温度协同敏感共聚物在pH7. 4 下的 LCST 大于 50°C，在 pH6. 5 下的 LCST 为 36. 4°C。
[0016] 所述亲水嵌段的分子量为500-5000,温敏嵌段和pH/温度协同敏感嵌段的分子量 为2000-50000,疏水嵌段的分子量为2000-100000。
[0017] 一种所制备的智能靶向载药复合胶束的应用，用于包封药物，所述药物为阿霉素、 紫杉醇或喜树碱。
[0018] 本发明的技术分析： 嵌段共聚物的亲水段优选为聚乙二醇（PEG)，PEG具有优异的水溶性和生物相容性，是 FDA批准的生物医用材料，可长时间在体内循环，通过聚乙二醇（PEG)链端引入生物靶向分 子可实现高效肿瘤细胞内吞；温敏单体优选为N-异丙基丙烯酰胺（NIPAAm)，因聚合物聚 N-异丙基丙烯酰胺（PNIPAAm)具有独特的温敏性而在生物医学上应用广泛，研究表明其分 子量小于4万时，可以通过泌尿系统排出体外。所选用的pH敏感单体是丙烯酸或者甲基丙 烯酸，溶液PH可以调节其质子化程度，进而调节亲疏水程度，pH降低质子化增强疏水性增 强导致共聚物的LCST降低，同时这种pH对LCST的调节具有可逆性。
[0019] 在低于最低临界溶解温度（LCST)的温度下，温敏段表现为亲水性，在水溶液中自 由伸展；当温度上升到LCST以上时，温敏段转变为疏水性，在水溶液中坍塌。对于外壳中含 有温敏嵌段的复合胶束来说，温敏嵌段在低于和高于其LCST时，其分别处于充分伸展和坍 塌的状态，利用温敏嵌段伸展和坍塌的效果，可以分别赋予聚合物胶束表面的靶向配体的 隐藏和暴露的状态，从而赋予靶向配体以屏蔽状态和去屏蔽状态的靶向能力。
[0020] 本发明报道的pH/温度协同敏感聚合物，是一种三单体共聚物，由温敏单体、调节 单体和pH敏感单体共聚而成。其中温敏单体赋予聚合物以温度敏感性，pH敏感单体赋予 聚合物以PH敏感性，而调节单体的作用则是调节聚合物的最低临界溶解温度（LCST)到人 体适用的环境范围。PH敏感单体具有质子化/去质子化官能团，因此pH刺激可以通过影响 质子化程度调控聚合物的亲疏水性，进而调控pH/温度协同敏感聚合物的最低临界溶解温 度（LCST)。因此，pH/温度协同敏感聚合物的最低临界溶解温度（LCST)具有pH依赖性。为 了实现体内的应用，我们期望通过调控聚合物的单体比例等参数，实现了聚合物的最低临 界溶解温度（LCST)在正常pH (人体正常生理环境，pH7. 4)下高于人体正常温度37°C，在低 pH下(肿瘤组织微酸环境pH6. 5-6. 8)低于人体正常温度37°C和温和热疗温度（40-44°C )， 通过pH敏感进一步限制温敏敏感聚合物的相转变位置，可以避免人体温度的波动，对温敏 聚合物的影响，另一方面，提高了温敏敏感聚合物的相转变灵敏性，提高对生理复杂环境的 响应速度，进而有助于提高治疗效果。
[0021] 所述三种嵌段共聚物的制备方法皆为本领域技术人员公知的技术，其中以生 物素（biotin)为靶向配体，疏水嵌段为聚己内酯PCL，亲水嵌段为PEG，温敏嵌段为 N-异丙基丙烯酰胺（NIPAAm)与N，N-二甲基丙烯酰胺（DMAm)的共聚物，pH/温度协 同敏感共聚物嵌段为N-异丙基丙烯酰胺（NIPAAm)和丙烯酰胺和丙烯酸的共聚物为 例，得到的温敏嵌段共聚物P (NIPAAm-C0-DMAm) -b-PCL，pH/温度协同敏感嵌段聚合物 P (NIPAAm-co-AAm-co-AA) -b-PCL、非靶向两亲性嵌段共聚物mPEG-b-PCL和靶向两亲性嵌 段共聚物Biotin-PEG-b-PCL的制备路线如下式所示：
【权利要求】
1. 一种智能靶向载药复合胶束的制备方法，其特征在于：所述智能靶向载药复合胶束 使用pH/温度协同敏感聚合物可逆控制纳米粒子表面靶向配体的"屏蔽"与"去屏蔽"状态， 即该纳米粒子表面的靶向配体在正常血液循环时处于"屏蔽"状态，提高纳米粒的血液循环 稳定性，在到达肿瘤组织时靶向配体处于"去屏蔽"状态，从而恢复纳米粒的靶向能力，这种 靶向配体的"屏蔽"和"去屏蔽"状态的转变具有可逆性，因此可以兼具长效血液循环和高 效肿瘤细胞靶向性，其制备方法包括如下步骤： 1) 温敏嵌段共聚物、pH/温度协同敏感嵌段共聚物、非靶向两亲性嵌段共聚物和靶向两 亲性嵌段共聚物的合成 首先制备由亲水嵌段和疏水嵌段组成的非靶向两亲性嵌段共聚物；使用同样方法，制 备末端含有靶向配体（TLs)的靶向两亲性嵌段共聚物，其中靶向配体偶联在亲水嵌段末端； 制备温敏嵌段共聚物，其中一段为具有温度敏感性的嵌段，一段为疏水嵌段，通过调控投料 比等参数，获得不同的嵌段长度和不同最低临界溶解温度（LCST)的嵌段共聚物；制备pH/ 温度协同敏感嵌段共聚物，其中一段是具有pH/温度协同敏感的共聚物，一段为疏水嵌段， 通过调控投料比等参数，获得不同的嵌段长度、不同pH敏感性和不同最低临界溶解温度 (LCST)的嵌段共聚物； 2) 载药复合胶束的制备 在低于最低临界溶解温度的条件下，通过透析方法，将以上制备的温敏嵌段共聚物和 靶向嵌段共聚物与药物混合制成复合胶束，通过调节嵌段共聚物的投料比例和种类，控制 复合胶束的两嵌段比例和嵌段长度，即可制得智能靶向载药复合胶束。
2. 根据权利要求1所述智能靶向载药复合胶束的制备方法，其特征在于：所述靶向配 体（TLs)是具有肿瘤细胞靶向作用的物质，包括实体瘤组织表面具有相应高表达特异性受 体的配体-叶酸（FA)、甘草次酸、甘草酸、生物素（biotin)和R⑶多肽。
3. 根据权利要求1所述智能靶向载药复合胶束的制备方法，其特征在于：所述非靶向 两亲性嵌段共聚物是包括亲水嵌段和疏水嵌段的两嵌段共聚物，其中亲水嵌段为聚乙二醇 (PEG)，聚羟乙基丙烯酸甲酯（PHEMA)、聚甲基丙烯酸0羟丙酯（PHPMA)或聚乙烯醇（PVA); 疏水嵌段为聚己内酯（PCL)、聚乳酸（PLA)或聚（乙交酯-丙交酯）（PLGA)。
4. 根据权利要求1所述智能靶向载药复合胶束的制备方法，其特征在于：所述靶向两 亲性嵌段共聚物为亲水嵌段末端修饰有靶向配体（TLs)的两亲性嵌段共聚物，包括亲水嵌 段和疏水嵌段两部分，其中亲水嵌段为聚乙二醇（PEG)，聚羟乙基丙烯酸甲酯（PHEMA)、聚 甲基丙烯酸0羟丙酯（PHPMA)或聚乙烯醇（PVA);疏水嵌段为聚己内酯（PCL)、聚乳酸（PLA) 或聚（乙交酯-丙交酯）（PLGA)。
5. 根据权利要求1所述智能靶向载药复合胶束的制备方法，其特征在于：所述温敏嵌 段共聚物是包含温敏嵌段和疏水嵌段的两嵌段共聚物，其中温敏嵌段由温敏单体和亲水性 调节单体聚合而成，其中温敏单体为N-异丙基丙烯酰胺（NIPAAm)、N，N-二乙基丙烯酰胺、 甲基乙烯基醚、2-(2-甲氧基乙氧基）乙基甲基丙烯酸酯（ME02MA)或寡聚乙二醇甲醚甲基 丙烯酸酯（0EGMA);亲水性调节单体为丙烯酰胺或N，N-二甲基丙烯酰胺（DMAAm)单体；疏 水嵌段为聚己内酯（PCL)、聚乳酸（PLA)或聚（乙交酯-丙交酯）（PLGA)。
6. 根据权利要求1所述智能靶向载药复合胶束的制备方法，其特征在于：所述温敏嵌 段共聚物的最低临界溶解温度（LCST)受共聚比例、盐浓度和溶液pH的影响，当温敏单体为 N-异丙基丙烯酰胺（NIPAAm)、亲水单体为N，N-二甲基丙烯酰胺（DMAAm)且N-异丙基丙烯 酰胺（NIPAAm)与N，N-二甲基丙烯酰胺（DMAAm)的共聚比例为5:1-1:1、pH为7.4、NaCl 浓度为135 mM时，该嵌段共聚物自组装得到的聚合物胶束的最低临界溶解温度（LCST)为 38-41。。。
7. 根据权利要求1所述智能靶向载药复合胶束的制备方法，其特征在于：所述pH/温 度协同敏感嵌段共聚物是包含pH/温度协同敏感嵌段和疏水嵌段的两嵌段共聚物，其中 pH/温度协同敏感嵌段是有温敏单体、调节单体和pH敏感单体共聚而成，温敏单体为N-异 丙基丙烯酰胺（NIPAAm)、N，N-二乙基丙烯酰胺、甲基乙烯基醚、2-(2-甲氧基乙氧基）乙 基甲基丙烯酸酯（ME02MA)或寡聚乙二醇甲醚甲基丙烯酸酯（OEGMA)，调节单体为丙烯酰胺 (AAm)、N, N-二甲基丙烯酰胺（DMAAm)、甲基丙烯酸乙酯、丙烯酸乙酯单体，pH敏感单体为丙 烯酸（AA)或甲基丙烯酸（MAA)，疏水嵌段为聚己内酯（PCL)、聚乳酸（PLA)或聚（乙交酯-丙 交酯）（PLGA)。
8. 根据权利要求1所述智能靶向载药复合胶束的制备方法，其特征在于：所述最低 临界溶解温度（LCST)受共聚比例、盐浓度和溶液pH的影响，当温敏单体为N-异丙基丙烯 酰胺（NIPAAm)、亲水性调节单体为N，N-二甲基丙烯酰胺（DMAAm)且N-异丙基丙烯酰胺 (NIPAAm)与N，N-二甲基丙烯酰胺（DMAAm)的共聚比例为5:1-1:1、pH为7. 4、NaCl浓度为 135 mM时，该温敏嵌段共聚物的最低临界溶解温度（LCST)为38-41 °C;当温敏单体为N-异 丙基丙烯酰胺（NIPAAm)、调节单体为甲基丙烯酸乙酯、pH敏感单体是丙烯酸（AA)，且N-异 丙基丙烯酰胺：甲基丙烯酸乙酯：丙烯酸的三单体共聚比例为1:0. 04-0. 15:0. 04-0. 15,在 离子强度为150mM的PBS中，pH/温度协同敏感共聚物在pH7. 4下的LCST大于50°C，在 pH6. 5 下的 LCST 为 36. 4°C。
9. 根据权利要求1所述智能靶向载药复合胶束的制备方法，其特征在于：所述亲水嵌 段的分子量为500-5000,温敏嵌段和pH/温度协同敏感嵌段的分子量为2000-50000,疏水 嵌段的分子量为2000-100000。
10. -种权利要求1所制备的智能祀向载药复合胶束的应用，其特征在于：用于包封药 物，所述药物为阿霉素、紫杉醇或喜树碱。
【文档编号】A61K47/34GK104382851SQ201410555571
【公开日】2015年3月4日 申请日期:2014年10月17日 优先权日:2014年10月17日
【发明者】袁直, 吴玉昆, 杨承玲, 赖全勇, 郭华, 王蔚 申请人:南开大学