一种用于美白祛斑的秋茄叶总黄酮纳米乳及其凝胶的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种用于美白祛斑的秋茄叶总黄酮纳米乳及其凝胶，所述纳米乳由如下重量份的组分组成：秋茄叶总黄酮0.3~0.65份，油相2.5~5份，乳化剂1.4~6份，助乳化剂1.4~6份，水40~160份，秋茄叶总黄酮纳米乳的平均粒径小于等于100nm；所述凝胶由如下重量百分比的组分组成：凝胶骨架材料0.2%～0.8%，甘油2%～8%，余量为本发明的秋茄叶总黄酮纳米乳。本发明的秋茄叶总黄酮纳米乳及其凝胶，首次采用高纯度的秋茄叶总黄酮为活性成分，同时具有抑制黑色素生成、抑制酪氨酸酶活性、抗氧化和抗紫外能力，可不需再添加其他成分就可起到良好的美白祛斑作用，秋茄叶总黄酮纳米乳及其凝胶稳定性好，进行离心、高温、低温试验，均不分层。
【专利说明】一种用于美白祛斑的秋茄叶总黄酮纳米乳及其凝胶
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种用于美白祛斑的秋茄叶总黄酮纳米乳及其凝胶，属于化妆品及其 制备【技术领域】。
【背景技术】
[0002] 皮肤黑色素沉着是一种常见的多发性皮肤疾病。包括黄褐斑、老年斑、雀斑等，弓丨 起皮肤黑色素沉着的原因主要为人体内分泌失调，新陈代谢功能减弱等，其次日晒、紫外线 辐射、睡眠不足会加重色素沉着。皮肤外用美白祛斑成分主要从以下几个途径发挥作用：抑 制酪氨酸酶合成及活性，还原皮肤色素，化学剥脱，减少外源性因素如紫外线、氧自由基等 对黑色素形成生理过程的负面影响。目前美白祛斑的化妆品多为分别具有以上功效的成分 组合，如已授权的中国发明专利ZL 200910037765. 1的公开了一种三联整合皮肤外用祛斑 功效纳米乳及其制备方法，详细描述了多种功效成分配合起到祛斑作用。
[0003] 然而，目前市场上的化妆品中的美白祛斑成分多为化学合成的成分，对人体皮肤 有一定的刺激性，安全性也存在一定的问题。因此近年来，人们对化妆品的质量和安全越来 越重视，以天然植物提取物为主要成分的化妆品安全高效，成为化妆品开发的趋势。秋茄 (Kandelia candel)为红树科秋爺属植物，本属只有一种，即为秋爺，为红树植物分类中的 真红树植物，秋茄中的化学成分主要有黄酮类、鞣质类、留醇类、脂肪酸和多糖等，本申请的 发明人从秋茄叶里提取分离到高纯度的秋茄叶总黄酮（3 60%)，经试验研究表明秋茄叶总 黄酮同时具备较好的抑制黑色素生成、抑制酪氨酸酶活性、抗氧化和抗紫外能力。此外，秋 茄叶总黄酮的活性及应用尚无文献报道，仅在申请号为200610122710. 7的中国发明专利 中公开了一种含牡蛎壳粉的海洋药物美容防晒霜，的【背景技术】里提到红树林提取物黄酮类 化合物具有很强的紫外吸收能力，但是该专利里以及经查阅文献，没有查到任何相关试验 报道，更无秋茄总黄酮抑制黑色素生成、抑制酪氨酸酶活性及用于美白祛斑化妆品的报道。 秋茄叶活性黄酮用于美白祛斑化妆品的发明，为海洋红树植物秋茄的开发利用及深加工奠 定了基础。
[0004] 皮肤表皮由角质层、颗粒层、棘层、基底层组成，黄褐斑及其他色素沉着虽然是表 现在颜面上，但黑色素是沉着在基底层，因此美白祛斑活性成分要穿过严密的重重屏障才 能到达基底层发挥作用。化妆品传统的剂型如普通乳液、乳膏剂、霜剂、面膜等，由于采用的 是传统技术，不能保证活性成分能有效地到达基底层，并持续地发挥作用。而且天然植物提 取物粉末在化妆品里常以混悬物的形式存在，不能有效地溶解分散，大大限制了其穿透皮 肤的能力。纳米乳是由水、油、表面活性剂和助表面活性剂等自发形成，粒径为10?IOOnrn 的热力学稳定、各向同性，透明或半透明的均相分散体系，容易通过生物膜，透皮性能好，能 在皮肤内形成有效成分的贮库，实现靶向、缓释的作用。例如专利号为ZL200910037765. 1 的中国发明授权专利中也提及了外用祛斑化妆品制备为纳米乳，但该技术方案的不足之处 在于：该专利用的都是可以溶在水相或油相的单体成分，天然植物提取物多为多种成分的 混合物，特别是一定浓度的乙醇提取物，往往在水相和油相溶解度都不好，做成纳米乳难度 较大。
【发明内容】
[0005] 本发明的一个目的在于解决现有的不足，提供一种用于美白祛斑的秋茄叶总黄酮 纳米乳。
[0006] 本发明的另一个目的在于提供一种由上述纳米乳制成的凝胶。
[0007] 本发明解决其技术问题所采用的技术方案是： 一种用于美白祛斑的秋茄叶总黄酮纳米乳，由如下重量份的组分组成：秋茄叶总黄酮 0. 3?0. 65份，油相2. 5飞份，乳化剂1. 4?6份，助乳化剂1. 4?6份，水4(Tl60份，秋茄叶总黄 酮纳米乳的平均粒径小于等于l〇〇nm。
[0008] 作为优选，秋茄叶总黄酮纳米乳由以下重量份的组分组成：秋茄叶总黄酮 0. 4、. 6份，油相3. 5?4. 5份，乳化剂2?5. 2份，助乳化剂2?5. 2份，水40?100份。
[0009] 作为优选，所述油相为肉豆蘧酸异丙酯；所述乳化剂为吐温-80和司盘-80的混合 物；所述助乳化剂选自聚乙二醇400、1，2-丙二醇、甘油中的一种或几种。
[0010] 作为优选的，所述乳化剂为质量比I. 5: fl. 9:1的吐温-80与司盘-80的混合物， 助乳化剂优选为聚乙二醇400。本申请的发明人比较了秋茄叶总黄酮在几种常用油相中 的溶解度，大小顺序为肉豆蘧酸异丙酯〉大豆油〉辛葵酸三甘油酯〉中链甘油三酯〉油酸 乙酯，因此优选肉豆蘧酸异丙酯为油相。此外，发明人筛选了 1，2-丙二醇、甘油、聚乙二醇 400、正丁醇、异丙醇等乳化剂，发现以聚乙二醇400为助乳化剂，与以吐温-80和司盘-80 的混合物为乳化剂，搭配后制备的纳米乳效果最好。
[0011] 更优选的，乳化剂为质量比I. 7: fl. 8:1的吐温-80与司盘-80混合物。由于秋茄 叶总黄酮的性质特殊，在水和油相的溶解度都不好，要形成透明澄清有乳光稳定的纳米乳， 必须有合适的HLB值的乳化剂，在经过大量的试验筛选，乳化剂以吐温-80和司盘-80混合 使用才能形成纳米乳，吐温-80和司盘-80的质量比如前所述。
[0012] 作为优选，所述秋茄叶总黄酮为秋茄叶的提取物，其纯度大于等于60%，该秋茄叶 总黄酮的提取与纯化方法如下：秋茄叶粗粉在7(T80°C，用15倍体积分数为60%?70%的 乙醇溶液提取2次，每次0. 5 h，合并提取液，提取液浓缩到5?6mg/L，离心，取上清液，采 用HPD722或HPD100或HPD826大孔吸附树脂柱纯化，以2?3BV/h的上样速度将6?7 BV的 上清液加入大孔树脂柱，吸附30min，用一定体积的蒸馏水洗去水溶性杂质，再用体积分数 35%?80%乙醇洗脱，洗脱流速为3?6BV/h，洗脱剂用量为4 BV树脂柱体积以上，收集洗 脱液，洗脱液减压回收溶剂后，真空或冷冻干燥，粉碎，即得黄棕色秋茄叶总黄酮。
[0013] 用于美白祛斑的秋茄叶总黄酮纳米乳的制备方法，所述制备方法如下：将配方量 的乳化剂、助乳化剂置于容器中，磁力搅拌l~2min后加入配方量的油相，搅拌l~2min，然后 加入配方量的秋茄叶总黄酮，搅拌5~8min，最后慢慢加入配方量的水，继续搅拌至混合物呈 透明状，获得秋茄叶总黄酮纳米乳。
[0014] 一种用于美白祛斑的秋茄叶总黄酮纳米乳凝胶，由如下重量百分比的组分组成： 凝胶骨架材料0. 2%?0. 8%，甘油2%?8%，余量为如前所述的秋茄叶总黄酮纳米乳。
[0015] 作为优选，用于美白祛斑的秋茄叶总黄酮纳米乳凝胶由如下重量百分比的组分组 成：凝胶骨架材料为0. 3%?0. 6%，甘油3%?6%，余量为如前所述的秋茄叶总黄酮纳米乳。
[0016] 作为优选，凝胶骨架材料选自卡波姆940。
[0017] 作为优选，用于美白祛斑的秋茄叶总黄酮纳米乳凝胶经由如下方法制备而成：取 凝胶骨架材料，加入甘油润湿，再加入秋茄叶总黄酮纳米乳，搅拌均匀后放置12 h，充分溶 胀后，加入三乙醇胺调节pH到6. (Te. 5,即得。
[0018] 本发明通过对秋茄叶总黄酮进行活性实验研究，发现如下结果： (1)秋茄叶总黄酮对B16小鼠黑色素瘤细胞黑素含量的影响 由附图1可见，秋茄叶总黄酮对B16黑色素瘤细胞具有明显地抑制黑色素合成作用，且 随着浓度的增大，抑制率逐渐增大。
[0019] (2)秋茄叶总黄酮体外对酪氨酸酶抑制作用考察结果 由附图2可见，秋茄叶总黄酮对酪氨酸酶的抑制作用虽然不如抗坏血酸和曲酸，但也 具有较强的抑制酪氨酸酶的活性。且随着浓度的增加，抑制率逐渐增大。
[0020] (3)抗氧化能力 ①秋茄叶总黄酮对1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH ?)自由基的清除能力 如附图3-1和3-2所示，秋茄叶总黄酮对DPPH ?有明显的抑制作用，其清除率在0?50 M?/mL的浓度范围内上升明显。当浓度为50 Mg/mL清除率达到平台。由结果可见，秋爺叶 总黄酮50 Mg/mL对DPPH ?的清除能力相当于20 Mg/mL抗坏血酸（Vc)。
[0021] ②秋茄叶总黄酮总酚含量测定 以没食子酸为对照品制备总酚标准曲线，测定秋茄叶总黄酮中总酚含量，结果如下： 表1秋茄叶总黄酮中总酚含量测定结果
【权利要求】
1. 一种用于美白祛斑的秋茄叶总黄酮纳米乳，其特征在于，由如下重量份的组分组成： 秋茄叶总黄酮0. 3?0. 65份，油相2. 5飞份，乳化剂1. 4?6份，助乳化剂1. 4?6份，水4(Tl60 份，所述秋茄叶总黄酮纳米乳的平均粒径小于等于lOOnm。
2. 根据权利要求1所述的用于美白祛斑的秋茄叶总黄酮纳米乳，其特征在于：由以下 重量份的组分组成：秋茄叶总黄酮〇. 4~0. 6份，油相3. 5~4. 5份，乳化剂2~5. 2份，助乳化剂 2?5. 2份，水40?100份。
3. 根据权利要求1或2所述的用于美白祛斑的秋茄叶总黄酮纳米乳，其特征在于：所 述油相为肉豆蘧酸异丙酯；所述乳化剂为吐温-80和司盘-80的混合物；所述助乳化剂选 自聚乙二醇400、1，2-丙二醇、甘油中的一种或几种。
4. 根据权利要求3所述的用于美白祛斑的秋茄叶总黄酮纳米乳，其特征在于：所述乳 化剂为质量比1. 5:1~1. 9:1的吐温-80与司盘-80的混合物，所述助乳化剂优选聚乙二醇 400。
5. 根据权利要求1或2所述的用于美白祛斑的秋茄叶总黄酮纳米乳，其特征在于：所 述秋茄叶总黄酮为秋茄叶的提取物，其纯度大于等于60%，该秋茄叶总黄酮的提取与纯化方 法如下：秋茄叶粗粉在7(T80°C，用15倍体积分数为60%?70%的乙醇溶液提取2次，每 次0. 5 h，合并提取液，提取液浓缩到4?6mg/L，离心，取上清液，采用HPD722或HPD100或 HPD826大孔吸附树脂柱纯化，以2?3BV/h的上样速度将6?7BV的上清液加入大孔树脂 柱，吸附30min，用:T4BV的蒸馏水洗去水溶性杂质，再用体积分数35%?80%乙醇洗脱，洗 脱流速为3?6BV/h，洗脱剂用量为4BV树脂柱体积以上，收集洗脱液，洗脱液减压回收溶剂 后，真空或冷冻干燥，粉碎，即得黄棕色秋茄叶总黄酮。
6. -种权利要求1-5任意一项所述的用于美白祛斑的秋爺叶总黄酮纳米乳的制备方 法，其特征在于：所述制备方法如下：将配方量的乳化剂、助乳化剂置于容器中，磁力搅拌 l~2min后加入配方量的油相，搅拌l~2min，然后加入配方量的秋茄叶总黄酮，搅拌5~8min， 最后慢慢加入配方量的水，继续搅拌至混合物呈透明状，获得秋茄叶总黄酮纳米乳。
7. -种用于美白祛斑的秋茄叶总黄酮纳米乳凝胶，其特征在于，由如下重量百分比的 组分组成：凝胶骨架材料〇. 2%?0. 8%，甘油2%?8%，余量为权利要求1-6任意一项所述秋 茄叶总黄酮纳米乳。
8. 根据权利要求7所述的用于美白祛斑的秋茄叶总黄酮纳米乳的凝胶，其特征在于： 由如下重量百分比的组分组成：凝胶骨架材料0. 3%?0. 6%，甘油3%?6%，余量为权利要求 1-6任意一项所述秋茄叶总黄酮纳米乳。
9. 根据权利要求7或8所述的用于美白祛斑的秋茄叶总黄酮纳米乳的凝胶，其特征在 于：所述凝胶骨架材料选自卡波姆940。
10. 权利要求7至9任意一项所述的用于美白祛斑的秋茄叶总黄酮纳米乳的凝胶，其特 征在于：所述凝胶经由如下方法制备而成：取凝胶骨架材料，加入甘油润湿，再加入秋茄叶 总黄酮纳米乳，搅拌均匀后放置12 h，充分溶胀后，加入三乙醇胺调节pH到6. (T6. 5,即得。
【文档编号】A61K8/81GK104382801SQ201410725901
【公开日】2015年3月4日 申请日期:2014年12月4日 优先权日:2014年12月4日
【发明者】李成平, 唐岚, 饶桂维, 姜燕清, 计燕萍, 严小平, 活泼 申请人:浙江树人大学