专利名称：一种用于畜禽支原体肺炎治疗的纳米乳组合物及其制备方法
技术领域：
本发明属于兽药领域，涉及一种可以用于禽慢性呼吸道病、猪喘气病和传染性胸膜肺炎等呼吸系统疾病治疗的纳米乳组合物及其制备方法。
背景技术：
呼吸道疾病是畜禽养殖过程中的常见病和多发病。特别是近些年，随着经济的发展，人们消费水平的提高，市场对肉、蛋、奶的需求不断加大，传统养殖逐渐向现代化集约化养殖转变，畜禽养殖数量增大，规模空前。加上目前我国管理体制还未健全，抗生素的滥用对耐药菌株进行的选择等，致使畜禽呼吸道疾病的发病率一直居高不下，病死率也不断上升，养殖成本也不断增加，成为困扰养我国畜禽养殖的较为严重的问题。鸡慢性呼吸道病是由鸡毒支原体(MG)感染而引起的一种接触性传染病，全年各季均可发生，以寒冬和早春最为严重。以呼吸时发出啰音、咳嗽、流鼻涕和窦部肿胀为临床特征,如为单纯感染,一般呈隐性经过,发病较慢,病程较长,故得名慢性呼吸道病。由于本病可引起机体的生长发育，故可使鸡饲养期延长，饲料报酬降低，产蛋鸡群产蛋率会下降 10°/Γ45%，使养殖户经济大受损失。由于机体抵抗力下降,本病常合并感染其他病原(如大肠杆菌等)，致使病死率居高不下。猪气喘病是由支原体感染而引起的一种慢性呼吸道传染病，病猪主要表现气喘和咳嗽，剖检病理变化集中在胸腔，以病健结合部分界清楚，肺左右两叶病变部呈对称性且大都局限在尖叶、心叶和中间叶，有胰样坚实的感觉为视病病变。本病可引起猪生长缓慢甚至停滞，饲料利用率下降，育肥期延长。目前广大养殖户对畜禽支原体肺炎的治疗主要采用中药散剂拌料和注射剂肌注等传统方法上，中药散剂拌料时很容易出现搅拌不均匀的现象，造成有的动物吃的过多，有的动物吃不到的状况，且畜禽发病后往往食欲低下，药效利用率会很低；注射剂有较好的治疗效果，但对动物的应激性大，费时费力，由于动物的反抗，使操作起来很不方便；本发明中的芸香油具有良好的治疗呼吸系统疾病的疗效，但目前人们对其的利用主要局限在原药上，市场上以滴丸剂为主，其他剂型几乎没有。特别是在畜牧领域，芸香油的利用还未起步， 其药用价值未能在动物身上体现，药用领域狭窄，直接影响了芸香油的推广利用。因此，针对上述情况，有必要以芸香油为主要活性成分并复配其他治疗药物从而开发一种新剂型用于畜禽呼吸系统疾病的治疗，用以服务于畜牧业。
发明内容
本发明针对上述问题和现有技术的缺陷，提供一种吸收率高，生物利用度好，稳定性强的用于治疗禽慢性呼吸道病、猪喘气病和传染性胸膜肺炎等呼吸系统疾病的一种水包油型纳米乳组合物，该组合物安全、无毒副作用且有显著疗效。
实现上述发明目的的技术方案是本纳米乳组合物，由下列质量百分比的原料组成
芸香油O. 1% --8. 0%牡荆油O. 1% --5. 0%紫苏子油O. 1% --3. 0%柴胡油O. 1% --2. 0%大蒜素O. 01% O. 1%延胡索酸泰妙菌素O. 1% --4. 0%表面活性剂19. 0% 31. 0(余量为蒸馏水上述总组分为100%。在表面活性剂的选择上，本发明选用无毒性和生物相容性好的非离子型表面活性剂。非离子型表面活性剂在溶液中比较稳定，不易受强电解质、无机盐类的影响，也不易受酸碱的影响，并且与其他表面活性剂的相容性好，溶血作用较小。理论上，0/W型纳米乳状液的制备需要表面活性剂的HLB值介于8 18之间，考虑到制备工艺的简单性，即纳米乳的易形成性和制备出来的纳米乳的稳定性，本发明选用HLB介于10 15之间的液态非离子型表面活性剂。优选使用吐温-80。本发明以芸香油、牡荆油、柴胡油、紫苏子油、大蒜素和延胡索酸泰妙菌素作为组合，是因为芸香油含胡椒酮40 50%、蒈烯-4 20%、栊牛儿醇10%、栊牛儿酸乙酯10%，尚有栊牛儿醛、柠檬烯等。临床实践证明，芸香油具有显著的止咳、平喘、缓解慢性气管炎和哮喘症状并具有一定的抗菌作用。市场上主要有芸香油滴丸等剂型用来治疗慢性气管炎和哮喘病，疗效明显，其作用与其含有的胡椒酮、蒈烯-4等有很大关系；牡荆油内含β_ 丁香烯， 可以明显提升血清中IgG含量，增强体液免疫和巨噬细胞吞噬力，抗感染效果显著；柴胡油具有解热、镇痛和抗炎作用，对畜禽合并感染而引起的体温升高，肌肉痛等炎性反应有显著的治疗作用，可以有效改善临床症状和缩短病程；紫苏子油具有降气消痰，平喘，润肺的功效，用于痰壅气逆，咳嗽气喘，与芸香油起协同作用，起到辅助治疗的作用；大蒜素具有较强的抗菌消炎作用，其分子中的氧原子与细菌生长繁殖所必需的半胱氨酸分子中的巯基相结合从而抑制了细菌的生长和繁殖，对多种球菌、杆菌、真菌、病毒等均有抑制和杀灭作用，可以预防和治疗畜禽患病期间合并的其他病原菌的感染，对健康畜禽也有保健作用；延胡索酸泰妙菌素又名支原净，对革兰氏阳性菌(如金葡菌、链球菌)、支原体(鸡毒支原体、猪肺炎支原体)、猪胸膜肺炎放线杆菌及猪密螺旋体等都有较强的抗菌作用，用于对鸡慢性呼吸道病、猪气喘病、传染性胸膜肺炎等的治疗。各味药组合后起协同作用，效果增强。本发明经透射电子显微镜检测，液滴直径分布在I IOOnm之间，外观为黄色或淡黄色的透明液体，具有很好的稳定性
I、经时稳定性
该纳米乳组合物在室温自然变化条件下储藏后，经检验外观持久澄清透明，未发现浑浊或沉淀等破乳情况，说明经时稳定性好。2、热贮稳定性
将该纳米乳组合物分装于几个玻璃瓶中，密封之后置于50°C恒温箱中贮存15d，每隔5d取样观察。结果表明，该纳米乳热贮后检验外观仍保持澄清透明的外观，未发现浑浊或分层等破乳情况，说明热贮稳定性良好。3、抗冷冻稳定性
将该纳米乳组合物在冰箱中-10°c保存一周后。恢复至室温。该纳米乳会由固态融化为液态，经稀释检验后外观仍澄清透明，放置一周后继续检验，未发现浑浊或沉淀等破乳情况，表明抗冷冻性良好。4、加速稳定性
将该纳米乳组合物置于试管，密封，在15000r/min的转速下离心20分钟，经稀释检验后外观仍澄清透明，未发现浑浊或沉淀等破乳情况。5、光稳定性实验
将部分该纳米乳组合物装于玻璃瓶中，密封置于日光下，室温光照10d，于ld、3d、5d、 IOd分别取样。经稀释检验表明该纳米乳液保持澄清透明，无浑浊或分层等破乳情况，表明光稳定性良好。本发明的一种用于畜禽支原体肺炎治疗的水包油型纳米乳组合物具有治疗禽慢性呼吸道病、猪喘气病和传染性胸膜肺炎等呼吸系统疾病的功效。用法用量口服或饮水。每吨水稀释本纳米乳液，猪5L ;禽10L。自由饮用，连用 4 5天。本发明的一种用于畜禽支原体肺炎治疗的水包油型纳米乳组合物与现有技术相比，具有以下优点
1)水溶性好。可以在水中无限稀释而不会破乳，可以作为液体添加剂使用，用于防治畜禽呼吸道疾病；
2)热力学稳定性高。本纳米乳组合物在一10°C和50°C之间储存不分相、不沉淀，不浑池，未出现破乳情况，稳定性提闻；
3)吸收率高于市场普通剂型。该纳米乳组合物乳滴粒径在fIOOnm之间，口服后可以更好地被肠道吸收，吸收率高于滴丸剂等；
4)经肠道吸收后可以避开肝脏的首过效应，使药物的生物利用度提高；
5)方法工艺简单，适合规模化生产。
具体实施例方式以下通过药物安全性试验和药效对比试验来进一步阐述本发明所述药物的有益效果。试验例I 本发明的纳米乳组合物药物(以实施例I为例)安全性试验
将60只一月龄的健康蛋雏鸡随机分为空白对照组和本纳米乳组合物(以实施例2为例)组2组，每组30只。本纳米乳组合物组每只灌胃本纳米乳液I. 0ml，空白对照组每只灌胃等量生理盐水，每日一次，连续灌胃一周。期间每日观察鸡群的活动情况和健康状态，并做记录；末次给药6h后，将鸡处死并剖检，观察各个脏器的病理变化，并做记录。结果表明两组鸡群活动情况和健康状态均正常，剖检后各脏器也无异常病变，两组之间无差异，表明该纳米乳液安全性好。试验例2本发明的纳米乳组合物与其他制剂治疗鸡慢性呼吸道病效果对比试验
5从自然感染鸡败毒支原体发病鸡群中选取近似发病程度病雏鸡60只，将其随机分为空白对照组、强力霉素组和本纳米乳组合物组三组，另选取健康同日龄同品种雏鸡20只作为阴性对照组，4组鸡群于相同条件下饲养，但相互之间隔离。阴性对照组和空白对照组鸡群每日饮清洁自来水，强力霉素组按100mg/L的计量自由饮水，本纳米乳组合物(以实施例 I为例)组按10g/L水的计量稀释后供其自由饮用。用药期间禁用其他同类药物，连续治疗 3天，每天观察鸡群活动状况并记录。 疗效判断标准
无效患鸡仍表现流鼻涕，咳嗽，呼吸时有啰音，精神萎靡，两翅下垂，不愿进食和走动， 且较治疗前严重；
有效患鸡呼吸道症状较治疗前有所减轻，呼吸时啰音微弱，饮食逐渐恢复，精神和活动有所改善；
显效患鸡呼吸道症状消失，呼吸时气流通畅，啰音消失，饮食、活动和精神基本恢复， 表现活跃；
治愈患鸡饮食状况和活动情况和健康鸡无差别，症状完全消失；
表I本纳米乳组合物与强力霉素治疗鸡慢性呼吸道病效果对比试验结果
组别雏鸡数量(只)治愈显效有效无效阴性对照组20------------空白对照组2000 I 19强力霉素组2075 3 5本纳米乳组合物组 20125 2 I
由表I可知空白对照组治愈率为0，显效率为0，有效率为5%，无效率为95%，总有效为5% ;强力霉素组治愈率为35%，显效率为25%，有效率为15%，无效率为25%，总有效率为 75% ;本纳米乳组合物组治愈率为60%，显效率为25%，有效率为10%，无效率为5%，总有效率为 95%。由结果可以看出本发明一种用于畜禽支原体肺炎治疗的纳米乳组合物治疗鸡支原体感染效果要优于强力霉素。以下通过具体实施例来进一步阐述本发明所述药物的组成和制备方法。实施例I
芸香油3. 0g、牡荆油I. 9g、紫苏子油O. 8g、柴胡油I. 2g、大蒜素O. lg、延胡索酸泰妙菌素3. 0g、吐温-80 27. 0g、蒸懼水63. 0g。上述各组分制成用于畜禽支原体肺炎治疗的纳米乳组合物，包括下列步骤
1)按配方准确称取吐温-80、芸香油、牡荆油、紫苏子油、柴胡油、大蒜素、延胡索酸泰妙菌素、蒸馏水的质量，备用；
2)将所述量的芸香油、牡荆油、紫苏子油、柴胡油、大蒜素混合搅拌均匀，作为油相；3)将所述量的表面活性剂吐温-80加入到油相当中并搅拌均匀；
4)将所述量的延胡索酸泰妙菌素溶于所述量的蒸馏水并将其水溶液作为水相，在室温 下迅速搅拌油相和吐温-80混合物，搅拌的同时缓慢滴加水相，该混合物体系会出现由稀 变稠，最后又由稠变稀的一系列变化，直至体系呈透明的液体，即得本纳米乳组合物。实施例2
芸香油8. 0g、牡荆油1. 0g、紫苏子油0. lg、柴胡油0. 2g、大蒜素0. 05g、延胡索酸泰 妙菌素2. 5g、吐温-80 28. 0g、蒸懼水61. 05g。实施例3
芸香油2. 0g、牡荆油5. 0g、紫苏子油0. 2g、柴胡油0. lg、大蒜素0. 05g、延胡索酸泰 妙菌素2. 8g、吐温-80 26. 0g、蒸懼水63. 85g。实施例4
芸香油4. 3g、牡荆油2. 9g、紫苏子油3. 0g、柴胡油0. 9g、大蒜素0. 08g、延胡索酸泰 妙菌素3. 5g、吐温-80 22. 8g、蒸馏水62. 52g。实施例5
芸香油3. 3g、牡荆油2. 0g、紫苏子油0. lg、柴胡油2. 0g、大蒜素0. lg、延胡索酸泰 妙菌素2. 0g、吐温-80 30. 0g、蒸懼水60. 5g。实施例6
芸香油4. 5g、牡荆油1. 0g、紫苏子油1. 0g、柴胡油0. 2g、大蒜素0. 05g、延胡索酸泰 妙菌素1. 0g、吐温-80 25. 0g、蒸馏水67. 25g。实施例7
芸香油3. 8g、牡荆油0. 5g、紫苏子油0. 5g、柴胡油0. 5g、大蒜素0. 06g、延胡索酸泰 妙菌素2. 0g、吐温-80 19. 0g、蒸懼水73. 64g。实施例8
芸香油4. 0g、牡荆油1. 0g、紫苏子油0. 5g、柴胡油0. 3g、大蒜素0. 01g、延胡索酸泰 妙菌素4. 0g、吐温-80 23. 0g、蒸懼水67. 19g。实施例9
芸香油5. 0g、牡荆油2. 0g、紫苏子油0. 5g、柴胡油0. 2g、大蒜素0. lg、延胡索酸泰 妙菌素0. lg、吐温-80 31. 0g、蒸懼水61. lg。实施例10
芸香油0. lg、牡荆油1. 5g、紫苏子油1. 0g、柴胡油1. 0g、大蒜素0. 05g、延胡索酸泰 妙菌素3. 0g、吐温-80 29. 0g、蒸懼水64. 35g。
权利要求
1.一种用于畜禽支原体肺炎治疗的水包油型纳米乳组合物，其特征在于，由下列质量百分比的原料组成芸香油O. 1% 8. 0%、牡荆油O. 1% 5. 0%、紫苏子油O. 1% 3. 0%、柴胡油O. 1% 2. 0%、 大蒜素O. 01% O. 1%、延胡索酸泰妙菌素O. 1% 4. 0%、表面活性剂19. 0% 31. 0%、余量为蒸馏水，上述原料的质量百分比之和为100% ；所述的表面活性剂是非离子表面活性剂吐温-80。
2.根据权利要求I所述的一种用于畜禽支原体肺炎治疗的水包油型纳米乳组合物，其特征在于该纳米乳的粒径在I IOOnm之间。
3.根据权利要求I所述的一种用于畜禽支原体肺炎治疗的水包油型纳米乳组合物制备方法，其特征在于，包括以下步骤按配方准确称取表面活性剂、芸香油、牡荆油、紫苏子油、柴胡油、大蒜素、延胡索酸泰妙菌素、蒸馏水的质量，备用；将所述量的芸香油、牡荆油、紫苏子油、柴胡油、大蒜素混合搅拌均匀，作为油相；将所述量的表面活性剂加入到油相当中并搅拌均匀；将所述量的延胡索酸泰妙菌素溶于所述量的蒸馏水并将其水溶液作为水相，在室温下迅速搅拌油相和表面活性剂混合物，搅拌的同时缓慢滴加水相，直至体系呈透明的液体，即得用于畜禽支原体肺炎治疗的水包油型纳米乳组合物。
全文摘要
本发明公开了一种用于畜禽支原体肺炎治疗的纳米乳组合物，由下列质量百分比的原料组成芸香油0.1%～8.0%、牡荆油0.1%～5.0%、紫苏子油0.1%～3.0%、柴胡油0.1%～2.0%、大蒜素0.01%～0.1%、延胡索酸泰妙菌素0.1%～4.0%、表面活性剂19.0%～31.0%、余量为蒸馏水，上述成分的质量百分比之和为100%。本纳米乳具有扩张气管、抑制咳嗽反射、提高机体免疫力、抗炎和抑杀肺炎支原体或混合感染的其他病原体的作用，可用于禽慢性呼吸道病、猪喘气病和传染性胸膜肺炎等呼吸系统疾病的治疗和预防。本发明稳定性好，口服后肠道吸收利用率高，可避开肝首过效应，疗效显著。
文档编号A61P11/00GK102600304SQ20121005726
公开日2012年7月25日 申请日期2012年3月7日 优先权日2012年3月7日
发明者欧阳五庆, 欧阳伸雨, 郭建军 申请人:西北农林科技大学