本发明涉及抗微生物组合物及其应用。
背景技术：
包括例如细菌、病毒和真菌的病原微生物造成大量人类疾病，从较小的病如上下呼吸道感染到潜在致命性感染如李斯特菌病。
在过去的100年，与病原微生物引起的疾病的斗争取得了重大进展，开发了可用于治疗的大量的药品和非药品剂。例如，在药剂学领域，抗生素剂可用于治疗人类的细菌感染，而基于化学品的剂可用于外部处理(例如，在坚硬的表面上)以防止污染和传播给人类，如李斯特菌在即食肉类和家禽加工厂中的情形。
虽然已经开发了通常有效地针对各种病原体的剂，但是有越来越多的证据表明，这些剂都存在着缺陷。具体来说，某些菌株的病原微生物已变得对一种或多种抗微生物剂越来越耐药，从而使标准疗程无效。因此，需要更高剂量的抗微生物治疗来实现效力，这可能导致对人类和环境的不良副作用和毒性。此外，许多抗微生物治疗并不旨在抗击生物膜，而生物膜是对生物(体内)和环境抗微生物耐药性发展的主要贡献者。
胰蛋白酶(Trypsin,Parenzyme)，EC 3.4.21.4，是从牛、羊、猪的胰脏提取的一种丝氨酸蛋白水解酶。胰脏制造的前体胰蛋白酶原分泌到小肠后，肠肽酶使其活化，成为胰蛋白酶。胰蛋白酶是肽链内切酶，它能选择性地水解多肽链的赖氨酸和精氨酸残基中的羧基。胰蛋白酶不仅起消化酶的作用，而且还能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前体，起活化作用。
溶菌酶(lysozyme)又称胞壁质酶(muramidase)或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶(N-acetylmuramide glycanohydrlase)，是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶。主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键，使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。溶菌酶还可与带负电荷的病毒蛋白直接结合，与DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐，使病毒失活。因此，该酶具有抗菌、消炎、抗病毒等作用。
技术实现要素：
为解决现有抗微生物剂的活性差、微生物耐药性强、且安全性差等缺陷，本发明提出一种抗微生物组合物。
出人意料地，本发明人发现当胰蛋白酶和溶菌酶组合使用时，取得了意料不到的针对微生物的抑制效果。
为实现上述目的，本发明的一个方面涉及一种抗微生物组合物，包括胰蛋白酶和溶菌酶。
根据本发明的一个或多个实施方式，所述抗微生物组合物按重量份可以为：溶菌酶0.1-5份，以及胰蛋白酶0.1-5份。
根据本发明的一个或多个实施方式，按组合物的重量计，胰蛋白酶可以是例如0.1份、0.15份、0.2份、0.25份、0.3份、0.35份、0.4份、0.45份、0.5份、0.55份、0.6份、0.65份、0.7份、0.75份、0.8份、0.85份、0.9份、0.95份、1份、1.5份、2份、2.5份、3份、3.5份、4份、4.5份、5份等，以及溶菌酶可以是例如0.1份、0.15份、0.2份、0.25份、0.3份、0.35份、0.4份、0.45份、0.5份、0.55份、0.6份、0.65份、0.7份、0.75份、0.8份、0.85份、0.9份、0.95份、1份、1.5份、2份、2.5份、3份、3.5份、4份、4.5份、5份等。
根据本发明的一个或多个实施方式，所述抗微生物组合物中：溶菌酶与胰蛋白酶可以是干粉。根据本发明的一个或多个实施方式，相对于所述组合物，所述胰蛋白酶的含量是0.1-5mg/g，和所述溶菌酶的含量是0.1-5mg/g。
根据本发明的一个或多个实施方式，所述抗微生物组合物中：溶菌酶与胰蛋白酶可以是液体。
根据本发明的一个或多个实施方式，所述抗微生物组合物配制为液体后的最终pH值为2.5-7.5，例如，优选pH值为4.5-7.0，或者，例如优选pH值为6.0-6.5。
根据本发明的一个或多个实施方式，所述胰蛋白酶可以是从市场上常规购买的。替代地，所述胰蛋白酶可以是通过盐析、柱层析等方法制备的。
根据本发明的一个或多个实施方式，所述溶菌酶可以是从市场上常规购买的。替代地，所述胰蛋白酶可以是通过盐析、柱层析等方法制备的。
根据本发明的一个或者多个实施方式，所述组合物还可以包括药学上可接受的载体或赋形剂。
根据本发明的一个或者多个实施方式，所述抗微生物组合物可以是抗细菌剂、抗真菌剂或抗病毒剂。
根据本发明的一个或者多个实施方式，所述抗微生物组合物可用于治疗微生物感染，包括细菌感染、真菌感染、病毒感染。
根据本发明的一个或者多个实施方式，所述抗微生物组合物可用于治疗因细菌、真菌、病毒抗药性细菌所造成的感染。
本文所用的术语“抗微生物”是指该组合物有益地控制、破坏或杀死病原微生物、酸败微生物、或以其它方式有害的微生物的生长与繁殖能力，所述微生物包括但不限于细菌、真菌、病毒、原生动物、酵母菌、霉菌等。
本发明所述的组合物可用于革兰氏阳性细菌，包括厚壁菌(Firmicutes)门中的细菌，其包括芽孢杆菌属(Bacillus spp.)、梭状杆菌属(Clostridium spp.)、分枝杆菌属(Mycobacterium spp.)、葡萄球菌属(Staphylococcus spp.)、链球菌属(Streptococcus spp.)和肠球菌属(Enterococcus spp.)，例如，所述革兰氏阳性细菌可以是金黄色葡萄球菌；革兰氏阴性细菌，包括肠杆菌科(Enterobaceriaceae)，例如沙门氏菌属(例如肠道沙门氏菌、肠炎沙门菌或鼠伤寒沙门菌)，以及肠杆菌属(Escherichia spp.)(例如大肠杆菌))，例如，革兰氏阴性细菌可以是弯曲菌属(Campylobacter spp.)和假单胞菌属(Pseudomonas spp.)。
本发明所述的组合物可用于感染人和动物的真菌，例如丝状真菌，例如青霉属(Penicillium spp.)或曲霉属(Aspergillus spp.)，以及常感染植物的疫霉属(Phytophthora)、腐霉菌(Pythium)、核盘菌属(Sclerotinia)、轮枝孢属(Verticillium)、文图拉属(Ventura)、葡萄孢属(Botrytis)和镰刀菌属(Fusarium)的真菌。
本发明所述的组合物也可用于对抗例如酿酒酵母菌。
本发明所述的组合物还可用于对抗病毒，例如乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、E型肝炎病毒、鼻病毒、脊髓灰质炎病毒、轮状病毒、诺如病毒、肠道病毒、肝病毒、星状病毒、A/B/C型流感病毒、副流感病毒、腮腺炎病毒、麻疹病毒、狂犬病病毒、埃博拉病毒、RS病毒、尼帕病毒、亨德拉病毒、黄热病病毒、登革热病毒、风疹病毒、拉沙病毒、人T细胞白血病病毒、人免疫缺陷病毒、人冠状病毒、人微小病毒、人多瘤病毒、人乳头瘤病毒、腺病毒、疱疹病毒、水痘病毒、带状疱疹病毒、EB病毒、细胞巨化病毒、天花病毒、猴痘病毒、牛痘病毒、软疣痘病毒和副痘病毒等。
根据本发明的一个或多个实施方式，所述组合物可以配制成液体剂。
根据本发明的一个或多个实施方式，所述组合物可以配制成泡沫剂。
根据本发明的一个或多个实施方式，所述组合物可以配制成粉剂。
根据本发明的一个或多个实施方式，所述组合物可以配制成颗粒剂。
根据本发明的一个或多个实施方式，所述组合物可以配制成凝胶剂。
根据本发明的一个或多个实施方式，所述组合物可以配制成泡腾片。
根据本发明的一个或多个实施方式，所述抗微生物组合物可以包括植物油和/或精油。
根据本发明的一个或多个实施方式，所述植物油/精油可以包括百里香油、丁香油、茶树精油、大茴香子油、菖蒲油、樟脑油、柏木油、松枝油、肉桂油、香茅油、柠檬油、柠檬草油、梨莓油、肉豆蔻油、玫瑰草油、薄荷油、迷迭香油、罗勒油、香根草油、黑胡椒油、姜油、没药油、牛至油、月桂叶油、香叶油、橙油、椰油、莳萝油或冬青油。
根据本发明的一个或多个实施方式，所述载体可以包括纺织品或聚合物、包装材料等。
根据本发明的一个或多个实施方式，所述辅料可以包括任何以及所有的溶剂、盐、分散介质、包衣材料、表面活性剂、抗氧化剂、防腐剂(例如抗菌剂、抗真菌剂)、等渗剂、吸收延迟剂、药物稳定剂、粘合剂、赋形剂、崩解剂、润滑剂、甜味剂、矫味剂、染料等和它们中一种、多种或全部的组合，这是本领域技术人员所熟知的(例如参见Remington's Pharmaceutical Sciences,18th Ed.Mack Printing Company,1990,pp.1289-1329)。除了与活性成分不相容的辅料外，可考虑在治疗用或药物组合物中使用的任何常规辅料。
本发明的又一个目的涉及一种抗微生物的方法，包括给予本发明的抗微生物组合物。
根据本发明的一个或多个实施方式，向有需要的受试者给予根据本发明的抗微生物组合物，所述抗微生物组合物包括胰蛋白酶和溶菌酶。
本发明的又一个目的涉及一种消毒产品，包括胰蛋白酶和溶菌酶。
本发明的又一个目的涉及配制消毒产品的方法，包括单独或与消毒产品组合施用作为活性成分的本发明的抗微生物组合物。
本发明的又一个目的涉及杀灭微生物的方法，包括单独或与微生物杀灭剂组合施用作为活性成分的本发明的抗微生物组合物。
本发明的又一个目的涉及一种动物用消毒产品，包括胰蛋白酶和溶菌酶。
采用本发明的胰蛋白酶与溶菌酶组合的抗微生物组合物，具有强的抗微生物效力，且微生物对其耐受性差，两种活性物质共同配合能够有效抑制多种微生物，达到抗微生物效果所需的接触时间非常短，抑菌率高，无毒无副作用，能够应用于人体、动物以及其他多种设备和环境。
具体实施方式
实施例1：一种胰蛋白酶与溶菌酶组合的水凝胶。
从陕西源太生物科技公司购得胰蛋白酶，从青岛高科技工业园海博生物技术有限公司购得溶菌酶。胰蛋白酶与溶菌酶由以下组分构成：溶菌酶200mg，胰蛋白酶300mg，加入凝胶基质充分溶解后形成水凝胶。使用本发明的凝胶进行抑菌试验。
本发明凝胶剂对肠道沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌进行2、5、10、20分钟的作用，结果见表1。
表1:
试验结果表明，胰蛋白酶和溶菌酶组合凝胶对肠道沙门氏菌、金黄红色葡萄球菌、大肠杆菌有较强的抑制作用。
实施例2：一种胰蛋白酶与溶菌酶组合的喷剂。
从陕西源太生物科技公司购得胰蛋白酶，从青岛高科技工业园海博生物技术有限公司购得溶菌酶。胰蛋白酶与溶菌酶由以下组分构成：溶菌酶200mg，胰蛋白酶300mg，加入去离子水充分溶解后形成喷剂。使用本发明的喷剂进行抑菌试验。
本发明喷剂对白色念珠菌、黄曲霉素和腐霉菌进行2、5、10、20分钟的作用，结果见表2。
表2:
试验结果表明，胰蛋白酶和溶菌酶组合物喷剂对白色念珠菌、黄曲霉素和腐霉菌有较强的抑制作用。
实施例3：一种胰蛋白酶与溶菌酶组合的乳液。
从陕西源太生物科技公司购得胰蛋白酶，从青岛高科技工业园海博生物技术有限公司购得溶菌酶。胰蛋白酶与溶菌酶由以下组分构成：溶菌酶200mg，胰蛋白酶300mg，加入乳化剂充分溶解后形成乳液。使用本发明的乳液进行抑菌试验。
本发明凝胶剂对肠道病毒、轮状病毒和人冠状病毒进行2、5、10、20分钟的作用，结果见表3。
表3:
试验结果表明，胰蛋白酶和溶菌酶组合乳液对肠道病毒、轮状病毒和人冠状病毒有较强的抑制作用。
当然，本发明还可有其它多种实施例，在不背离本发明精神及其实质的情况下，熟悉本领域的技术人员可根据本发明作出各种相应的改变和变形，但这些相应的改变和变形都应属于本发明权利要求的保护范围。