用于眼部递送的嵌合细胞因子制剂的制作方法

本申请是基于申请日为2014年3月13日，优先权日为2013年3月13日，申请号为201480025086.1，发明名称为“用于眼部递送的嵌合细胞因子制剂”的专利申请的分案申请。相关申请本申请要求要求2013年3月13日提交的美国临时申请号61/779,974的优先权，其全部内容通过提述完整并入本文序列表本申请含有已以ascii形式电子提交且通过提述完整并入本文的序列表。所述ascii拷贝，在2014年3月12日创建，称为d2046-70s0wo_sl.txt且大小为28,329个字节。本发明涉及用于，例如il-1抑制物的治疗性组合物和制剂。技术背景白介素-1α(il-1α)和β(il-1β)是免疫调节细胞因子il-1家族的长远。已鉴定了至少十一种白介素-1细胞因子家族的成员，九种推定或证实的激动剂(il-1α,il-1β,il-18,il-36α(il-1f6),il-36β(il-1f8),il-36γ(il-1f9),il-33,il-1f7andil-1f10)以及两种天然的拮抗剂(il-1ra和il36ra(il-1f5))。il-1α和il-1β在调节免疫系统中具有功能，并涉及炎症性眼科疾病，包括显著炎症性眼部病症。因此，对于il-1抑制试剂眼部施用，需要更好的方法和材料。阿那白滞素(anakinra)(amgen,thousandoaks,ca)，一种重组il1-ra分子，批准用于治疗类风湿性关节炎和cryopyrin相关的周期综合症(caps)，称为新生儿发病多系统炎症性疾病(nomid)。其提供为单次使用的带有27号针头的玻璃注射器，作为无菌、清澈、无色至白色，不含防腐剂的溶液用于日常皮下施用。配制于ph6.5的0.67ml的溶液中，含有100mg阿那白滞素，1.29mg柠檬酸钠，5.48mg氯化钠，0.12mg乙二酸四乙胺二钠，以及0.70mg聚山梨糖醇酯溶于水中用于注射。建议储存在2-8℃。未批准用于眼部施用。发明简述本文的特征为含有嵌合细胞因子(例如，描述于wo2012/016203或wo2012/103240中的嵌合细胞因子或嵌合细胞因子结构域)的稳定制剂，其可以用于，除了别的以外，调节相应il-1家族细胞因子和其相应受体的细胞信号，来治疗病症，并检测和/或结合细胞受体，以及其它试剂。本文描述的药学制剂其包括1mg/ml至50mg/mlil-1β/il-1ra嵌合细胞因子蛋白；表面活性剂；张力剂；和缓冲试剂。在一些方面，所述嵌合细胞因子是p05或另一种嵌合细胞因子，例如，描述于wo2012/016203或wo2012/103240中描述的那些。在实施方案中，所述制剂用于局部施用。在实施方案中，所述制剂用于局部施用到眼睛。在一些实施方案中，所述制剂具有ph5.5至7.5，例如ph6.0至7.0。在实施方案中，所述制剂不含有黏度剂。某些实施方案涉及也含有黏度剂的制剂。在实施方案中，所述黏度剂为羧甲基纤维素钠；羟乙基纤维素；羟丙甲纤维素；聚乙烯醇；和/或甘油。在实施方案中，羧甲基纤维素钠以0.1-6％w/v包括在所述制剂中。所述制剂在25℃储存至少60天后，通常具有至少90％、93％、95％，或98％的纯度。在一些方面，所述制剂在25℃储存至少四个月后，具有至少90％、93％、95％，或98％的纯度。在其它方面，所述制剂在40℃储存至少2周后，具有至少90％的纯度。在一些情况下，所述制剂当储存于2℃至8℃时，至少稳定两年。在一些情况下，所述制剂当储存于25℃时至少稳定六个月。在一些情况下，所述制剂当储存于25℃时至少稳定八个月。在一些实施方案中，所述表面活性剂是非离子型表面活性剂，例如聚醚酸f-68(泊洛沙姆188)、聚山梨糖醇酯-20，或聚山梨糖醇酯-80。在实施方案中，所述表面活性剂是聚醚酸f-68(泊洛沙姆188)，并且所述表面活性剂以约0.1％w/v的浓度存在。在一些情况下，所述表面活性剂是f-68(泊洛沙姆188)，并且所述表面活性剂以0.1％w/v的浓度存在。制剂中的张力剂可以是，例如，氯化钠、山梨糖醇、甘露糖醇、蔗糖、或海藻糖。在实施方案中，所述张力剂是山梨糖醇，并且所述山梨糖醇以约5％w/v的浓度存在。在某些实施方案中，所述张力剂是山梨糖醇，并且所述山梨糖醇以5％w/v的浓度存在。所述制剂中的缓冲剂通常是弱缓冲剂。在实施方案中，所述缓冲剂是磷酸盐、柠檬酸盐、醋酸盐、硼酸盐，和/或琥珀酸盐。所述缓冲试剂可以是磷酸盐、柠檬酸盐、醋酸盐、硼酸盐，或琥珀酸盐的药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述缓冲液以从约10mm至约50mm的量存在。在实施方案中，所述缓冲试剂以20mm或更低的浓度存在。在实施方案中，所述缓冲剂，例如，柠檬酸钠和/或磷酸钠，以5-15mm的总浓度存在。在一些实施方案中，所述缓冲剂，例如柠檬酸钠，以5-15mm、7-13mm、8-12mm、或9-11mm的浓度存在。在一些情况下，所述缓冲剂是柠檬酸钠，并在制剂中以约10mm的浓度存在。在一些情况下，所述缓冲试剂是柠檬酸钠并在制剂中以10mm的浓度存在。在某些实施方案中，所述制剂包括il-1β/il-1ra嵌合细胞因子蛋白例如p05；10mm柠檬酸钠；5％w/v山梨糖醇，以及0.1％w/v泊洛沙姆188(泊洛沙姆f-68)，并且所述制剂的ph为6.0。在一些实施方案中，所述制剂进一步包括氨基酸。例如，所述氨基酸为精氨酸、谷氨酸、组氨酸，或蛋氨酸。在一个实施例中，嵌合细胞因子(例如，嵌合细胞因子多肽)，例如，含有衍生于il-1β和il-1ra的序列的嵌合细胞因子，以5mg/ml至20mg/ml的浓度(例如，浓度为1mg/ml,5mg/ml,或20mg/ml)配制到含有5％w/v山梨糖醇和0.1％w/v泊洛沙姆，例如泊洛沙姆188(也称为，例如，f-68(本文也称为)，p188，以及聚(乙二醇)-嵌段-聚(乙二醇))，ph6.0的10mm柠檬酸钠中。在实施方案中，所述嵌合细胞因子选自以下一种或多种：p01,p02,p03,p04,p05,p06,和p07。在实施方案中，所述嵌合细胞因子是p05。在实施方案中，本文所述制剂中的组分以可以围绕本文所提供的值变化量高达5％,10％,15％,20％,25％,30％,40％,or50％的量存在。在实施方案中，制剂中的组分以围绕本文提供的值变化10％的量提供。在实施方案中，所述制剂包含9.5-10.5mm,9-11mm,8.5-11.5mm,8-12mm,7.5-12.5mm,7-13mm,6-14mm,或5-15mm柠檬酸钠。在实施方案中，所述制剂包含4.75-5.25％,4.5-5.5％,4.25-5.75％,4-6％,3.75-6.25％,3.5-6.5％,3-7％,或2.5-7.5％w/v的山梨糖醇。在实施方案中，所述制剂包含0.095-0.105％,0.09-0.11％,0.085-0.115％,0.08-0.12％,0.075-0.125％,0.07-0.13％,0.06-0.14％,或0.05-0.15％w/v的泊洛沙姆188。在实施方案中，所示制剂中治疗性蛋白(例如，嵌合细胞因子，例如p05)的浓度为1-50mg/ml,1-25mg/ml,或1-20mg/ml。在实施方案中，所述治疗性蛋白的浓度为4.75-5.25mg/ml,4.5-5.5mg/ml,4.25-5.75mg/ml,4-6mg/ml,3.75-6.25mg/ml,3.5-6.5mg/ml,3-7mg/ml,或2.5-7.5mg/ml。在实施方案中，所述制剂的ph为5.5至7.5,或5.5至6.5。在实施方案中，所述制剂包含8-12mm柠檬酸钠，4-6％w/v山梨糖醇，0.08-0.12％w/v泊洛沙姆188，以及4-6mg/mlp05。在实施方案中，所述制剂的ph为5.5至7.5。在实施方案中，ph为5.5至6.5。在实施方案中，ph为6至7。在实施方案中，所述制剂包含9-11mm柠檬酸钠，4.5-5.5％w/v山梨糖醇，0.09-0.11％w/v泊洛沙姆188，以及4.5-5.5mg/mlp05。在实施方案中，所述制剂的ph为5.5至7.5。在实施方案中，ph为5.5至6.5。在实施方案中，ph为6至7。在实施方案中，il-1抑制物，例如阿那白滞素，以适当的浓度(例如，浓度为5mg/ml至100，例如5至50mg/ml，例如，5至20mg/ml)配制到含有5％w/v山梨糖醇和0.1％w/v泊洛沙姆，例如泊洛沙姆188的ph6.0的10mm宁酸钠溶液中。在实施方案中，制剂中组分的量围绕本文提供的值可以变化高达5％,10％,15％,20％,25％,30％,40％,or50％。在实施方案中，所述制剂的ph为5.5至7.5。在实施方案中，ph为5.5至6.5。在实施方案中，ph为6至7。在实施方案中，本文描述的制剂进一步包含黏度剂，例如羧甲基纤维素钠(cmc)。在实施方案中，所述制剂包含cmc，例如，cmc浓度为0.1-1％w/v,0.1-0.5％w/v,或0.2-0.3w/v％。本文还提供用于治疗患有il-1相关病症的受试者的方法。所述方法包括向受试者施用治疗有效量的组合物，所述组合物包含本文描述的制剂。在实施方案中，所述方法包括鉴定患有il-1相关病症的受试者，例如，干眼病；以及向所示受试者施用治疗有效量的组合物，所述组合物包含本文描述的制剂。本文还描述了抑制受试者中il-1活性的方法。所述方法包括向受试者施用如本文所描述的制剂。在实施方案中，所述受试者患有il-1相关病症，例如，干眼病。在一些实施方案中，本发明涉及药物递送装置，其包含本文所描述的制剂。本文还公开如本文所描述的复合物在制备用于在受试者中治疗或预防il-1相关病症的药物中的用途，例如，在制备用于局部施用到受试者来治疗或预防受试者中il-1相关病症。在实施方案中，所述药物用于施用要眼睛，例如，用于局部施用到眼睛。在一些实施方案中，所述药物为媒介物制剂，例如，包含如本文所述的山梨糖醇、柠檬酸钠和泊洛沙姆188或由其组成的水性制剂。在实施方案中，所述媒介物制剂基本不含有(例如，不含有)治疗性蛋白。一般来说，本文所述的治疗的受试者是人或其它哺乳动物例如狗或者猫。在一些实施方案中，本发明涉及容器或装置，其包含如本文所述的制剂。在实施方案中，所述容器是吹填的密封容器。申请人还发现了药物制剂(例如，媒介物制剂)，其包含表面活性剂，张度剂，以及缓冲试剂，可以用于治疗干眼病。在一些实施方案中，所述制剂不含有蛋白或多肽，例如，所述制剂不含有治疗性蛋白或多肽。在一些实施方案中，所述表面活性剂是普郎尼克f68(泊洛沙姆188)，所述缓冲试剂是柠檬酸盐，并且所述张度剂是山梨糖醇。在一些实施方案中，所述制剂包含嵌合细胞因子蛋白，例如，描述于本文或wo2012/103240中的嵌合细胞因子蛋白，例如p05。在一些实施方案中，所述药物制剂还包括黏度剂，例如，cmc。在一些实施方案中，所述药物制剂适合用于眼睛中(例如，适合用于眼部递送)，例如，用于治疗眼部疾病例如干眼的迹象和/或症状。本文引用的天然发生的蛋白特别包括人形式的此类蛋白，以及来自其它哺乳动物物种的形式。本文描述的实施方案包括以下：实施方案1.一种水性制剂，其包含浓度为8至12mm的柠檬酸钠或磷酸钠；4％至6％(w/v)的山梨糖醇；浓度为0.08％至0.12％(w/v)的泊洛沙姆188；以及可选的羧甲基纤维素钠，其中所述制剂的ph为5.5至7.5，并且所述制剂用于治疗眼部病症有效。实施方案2.实施方案1的制剂，其中所述制剂的ph为5.5至6.5。实施方案3.实施方案1或实施方案2的制剂，其中所述制剂基本不含治疗性蛋白。实施方案4.实施方案1至3任一项的制剂，其中所述制剂包含8至11mm的柠檬酸钠；4.5％至5.5％(w/v)的山梨糖醇；以及浓度为0.09％至0.11％(w/v)的泊洛沙姆188。实施方案5.实施方案4的制剂，其中所述制剂由9至11mm的柠檬酸钠；4.5％至5.5％(w/v)的山梨糖醇；以及浓度为0.09％至0.11％(w/v)的泊洛沙姆188组成。实施方案6.实施方案5的制剂，其中所述制剂由9至11mm的柠檬酸钠；4.5％至5.5％(w/v)的山梨糖醇；以及浓度为0.09％至0.11％(w/v)的泊洛沙姆188组成。实施方案7.实施方案1-6任一项的制剂，其包含浓度为0.1-1％(w/v)的羧甲基纤维素钠。实施方案8.一种水性制剂，其包含9至11mm的柠檬酸钠；4.5％至5.5％(w/v)的山梨糖醇；以及浓度为0.09％至0.11％(w/v)的泊洛沙姆188，其中所述制剂ph为5.7至6.3，其中所述制剂基本不含治疗性蛋白，并且所述制剂用于治疗眼部病症(例如，本文所述的眼部病症)有效。实施方案9.实施方案1-8任一项的制剂，其中所述眼部病症是干眼病。实施方案10.实施方案1-9任一项的制剂，其中所述制剂有效减轻眼睛疼痛或酸胀(soreness)，osdi分数，和/或角膜荧光素染色(cfs)分数。实施方案11.实施方案10的制剂，其中眼睛疼痛或酸胀使用视觉模拟量表或来自osdi的问题进行评估。实施方案12.一种水性制剂，包含1-50mg/mlil-1β/il-1ra嵌合细胞因子蛋白(例如，p01,p02,p03,p04,p05,p06,或p07)；选自柠檬酸钠和磷酸钠的缓冲剂；山梨糖醇，例如，浓度为3.5-6.5％(w/v)；泊洛沙姆188，例如，浓度为0.07-0.13％(w/v)；以及可选的羧甲基纤维素钠(cmc)，其中所述制剂ph为5.5至7.5。实施方案13.实施方案12的制剂，其中所述嵌合细胞因子蛋白是p05。实施方案14.实施方案13的制剂，其中所述制剂包含1-20mg/mlp05。实施方案15.实施方案13的制剂，其中所述制剂包含3-7mg/mlp05。实施方案16.实施方案13的制剂，其中所述制剂包含4-6mg/mlp05。实施方案17.实施方案13的制剂，包含总浓度为5mm至15mm的柠檬酸钠和/或磷酸钠。实施方案18.实施方案12至17任一项的制剂，其中柠檬酸钠以5mm至15mm的浓度存在。实施方案19.实施方案18的制剂，其中柠檬酸钠以8mm至12mm的浓度存在。实施方案20.实施方案18的制剂，其中柠檬酸钠以9mm至11mm的浓度存在。实施方案21.实施方案12至20任一项的制剂，其中泊洛沙姆188以0.05％至0.15％w/v的浓度存在。实施方案22.实施方案20的制剂，其中泊洛沙姆188以0.05％至0.12％w/v的浓度存在。实施方案23.实施方案20的制剂，其中泊洛沙姆188以0.09％至0.11％w/v的浓度存在。实施方案24.实施方案12至23任一项的制剂，其中山梨糖醇以2.5％至7.5％w/v的浓度存在。实施方案25.实施方案24的制剂，其中山梨糖醇以4％至6％w/v的浓度存在。实施方案26.实施方案24的制剂，其中山梨糖醇以4.5％至5.5％w/v的浓度存在。实施方案27.一种水性制剂，包含1-25mg/mlp05；浓度为8至12mm的柠檬酸钠或磷酸钠；4％至6％(w/v)的山梨糖醇；浓度为0.08％至0.12％(w/v)的泊洛沙姆188；以及可选的羧甲基纤维素钠，其中所述制剂的ph为5.5至7.5。实施方案28.一种水性制剂，其包含以下物质，或由以下物质组成：1mg/ml至25mg/mlp05；浓度为8至12mm的柠檬酸钠；4％至6％(w/v)的山梨糖醇；以及浓度为0.08％至0.12％(w/v)的泊洛沙姆188，其中所述制剂的ph为5.5至7.5。实施方案29.一种水性制剂，其包含以下物质，或由以下物质组成：1mg/ml至25mg/mlp05；浓度为9mm至11mm的柠檬酸钠；4.5％至5.5％(w/v)的山梨糖醇；以及浓度为0.09％至0.11％(w/v)的泊洛沙姆188，其中所述制剂的ph为5.7至6.3。实施方案30.一种水性制剂，其包含以下物质，或由以下物质组成：4-6mg/mlp05；浓度为9mm至11mm的柠檬酸钠；4.5％至5.5％(w/v)的山梨糖醇；以及浓度为0.09％至0.11％(w/v)的泊洛沙姆188，其中所述制剂的ph为5.7至6.3。实施方案31.实施方案12至30任一项的制剂，其中所述制剂具有270-370mosm/kg的渗透压。实施方案32.实施方案1-31任一项的制剂，其中所述制剂适合用于施用到眼睛。实施方案33.实施方案30的制剂，其中所示制剂适合用于局部施用到眼睛。实施方案34.实施方案1至4和8-33任一项的制剂，其中所述制剂不包含黏度剂，例如，不包含cmc。实施方案35.实施方案12至34任一项的制剂，其中所述制剂进一步包含氨基酸，例如精氨酸、谷氨酸、组氨酸，或蛋氨酸。实施方案36.实施方案12至34任一项的制剂，其中所述制剂进一步包含蛋氨酸。实施方案37.实施方案36的制剂，其中蛋氨酸以1至20mm的浓度存在于制剂中。实施方案38.实施方案36或37的制剂，其中当所述制剂经受储存，例如在25℃至少4周时，所述制剂与不包含蛋氨酸的对应制剂相比，具有降低的氧化。实施方案39.实施方案38的制剂，其中当所述制剂经受储存于多剂量容器中时，所述制剂与不包含蛋氨酸的对应制剂相比，具有降低的氧化。实施方案40.实施方案38或39的制剂，其中所述制剂的氧化使用rp-hplc评估。实施方案41.实施方案12至40任一项的制剂，其中所述制剂使用光遮蔽粒子计数测试评估，具有≥10μm的颗粒少于或等于50个颗粒每ml，和≥25μm的颗粒少于或等于5个颗粒每ml。实施方案42.实施方案12至41任一项的制剂，其中通过在室温，例如25℃涡流振荡蛋白溶液4小时后，蛋白单体形式相对于聚集形式>90％的存在表明所述制剂稳定。实施方案43.实施方案42的制剂，其中蛋白的单体形式相对于聚集形式的百分比使用sec-hplc评估。实施方案44.实施方案12至43任一项的制剂，其中所述制剂在2-8℃和60％相对湿度储存至少5个月后稳定。实施方案45.实施方案12至44任一项的制剂，其中所述制剂在环境条件下，例如室温，例如25℃储存至少5个月后稳定。实施方案46.实施方案12至45任一项的制剂，其中所述制剂在2-8℃和60％相对湿度储存至少4个月后稳定。实施方案47.实施方案12至46任一项的制剂，其中所述制剂在环境条件下，例如室温，例如25℃储存至少4个月后稳定。实施方案48.实施方案12至47任一项的制剂，其中所述制剂在2-8℃和60％相对湿度储存至少3个月后稳定。实施方案49.实施方案12至48任一项的制剂，其中所述制剂在环境条件下，例如室温，例如25℃储存至少3个月后稳定。实施方案50.实施方案12至49任一项的制剂，其中所述制剂在2-8℃和60％相对湿度储存至少2个月后稳定。实施方案51.实施方案12至50任一项的制剂，其中所述制剂在环境条件下，例如室温，例如25℃储存至少2个月后稳定。实施方案52.实施方案12至51任一项的制剂，其中所述制剂在2-8℃和60％相对湿度储存至少1个月后稳定。实施方案53.实施方案12至52任一项的制剂，其中所述制剂在环境条件下，例如室温，例如25℃储存至少1个月后稳定。实施方案54.实施方案12至53任一项的制剂，其中通过例如，使用光遮蔽粒子计数测试评估，存在少于或等于50个≥10μm的颗粒每ml，少于或等于5个≥25μm的颗粒每ml，和少于或等于2个≥50μm的颗粒每ml表明所述制剂稳定。实施方案55.实施方案12至54任一项的制剂，其中通过使用sec-hplc评估，存在>90％的蛋白单体形式相对于聚集形式，表明所述制剂稳定。实施方案56.实施方案12至55任一项的制剂，其中通过在还原sds-page中，主条带相对于参考标准的一致性，表明所述制剂稳定。实施方案57.实施方案12至56任一项的制剂，其中通过在非还原sds-page中，主条带相对于参考标准的一致性，表明所述制剂稳定。实施方案58.实施方案12至57任一项的制剂，其中当所述制剂使用弱阳离子交换hplc(wcex-hplc)评估时，主峰大于或等于85％表明所述制剂稳定。实施方案59.实施方案58的制剂，其中所述制剂包含p05并且通过使用wcex-hplc评估，存在少于10％的des-ala形式的p05，表明其稳定。实施方案60.实施方案12至59任一项的制剂，其中所示制剂包装在吹填密封容器中。实施方案61.实施方案44至53任一项的制剂，其中所述储存是储存在吹填密封容器中。实施方案62.一种治疗方法，所述方法包含向患有il-1相关病症的受试者施用根据实施方案1-61任一项的制剂，从而治疗所述il-1相关病症。实施方案63.实施方案62的方法，其中所述il-1相关病症是干眼病。实施方案64.一种治疗眼部病症，例如干眼病的方法，所述方法包含向患有所述眼部病症，例如干眼病的受试者施用水性制剂，所述水性试剂包含浓度为8mm至12mm的柠檬酸钠或磷酸钠；浓度为4％至6％(w/v)的山梨糖醇；浓度为0.08％至0.12％(w/v)的泊洛沙姆；以及可选的，羧甲基纤维素钠；其中所述制剂ph为5.5至7.5，并且基本不含治疗性蛋白，从而治疗干眼病。实施方案65.实施方案64的方法，其中所述水性制剂包含浓度为8mm至11mm的柠檬酸钠，4.5％至5.5％(w/v)的山梨糖醇，以及浓度为0.09％至0.11％的泊洛沙姆188。实施方案66.实施方案64的方法，其中所述水性制剂由浓度为8-11mm的柠檬酸钠，4.5％至5.5％(w/v)的山梨糖醇，以及浓度为0.09％至0.11％的泊洛沙姆188组成。实施方案67.一种治疗干眼病的方法，所述方法包含向患有干眼病的受试者施用水性制剂，所述水性制剂包含1至25mg/ml的p05；浓度为8mm至12mm的柠檬酸钠或磷酸钠；4％至6％(w/v)的山梨糖醇；浓度为0.08％至0.12％(w/v)的泊洛沙姆188；以及可选的羧甲基纤维素钠，其中所述制剂ph为5.5至7.5，从而治疗干眼病。实施方案68.一种治疗干眼病的方法，所述方法包含向患有干眼病的受试者施用水性制剂，所述水性制剂由1至25mg/ml的p05；浓度为8mm至12mm的柠檬酸钠；4％至6％(w/v)的山梨糖醇；以及浓度为0.08％至0.12％(w/v)的泊洛沙姆188组成，其中所述制剂ph为5.5至7.5，从而治疗干眼病。实施方案69.一种治疗干眼病的方法，所述方法包含向患有干眼病的受试者施用水性制剂，所述水性制剂包含以下物质，或由以下物质组成：1至25mg/ml的p05；浓度为9mm至11mm的柠檬酸钠；4.5％至5.5％(w/v)的山梨糖醇；以及浓度为0.09％至0.11％(w/v)的泊洛沙姆188，其中所述制剂ph为5.7至6.3，从而治疗干眼病。实施方案70.实施方案62至69任一项的方法，其中所述方法有效减少眼睛疼痛或酸胀，osdi分数，和/或角膜荧光素染色(cfs)分数。实施方案71.实施方案70的方法，其中使用视觉模拟量表或来自osdi的问题评估眼睛疼痛或酸胀。实施方案72.实施方案62至70任一项的方法，其中所述制剂以每天一至五次施用。实施方案73.实施方案62至72任一项的方法，其中所述制剂局部施用。实施方案74.实施方案73的方法，其中所述制剂局部施用到眼睛。实施方案75.实施方案62至74任一项的方法，其中所述制剂每天施用三次。实施方案76.实施方案62至71或73至74任一项的方法，其中所述制剂随意施用。实施方案77.一种容器或装置，其包含实施方案1至61任一项的制剂。实施方案78.实施方案77的容器或装置，其中所述容器或装置已经在25℃储存至少两周，例如，至少四周，而基本不含颗粒。实施方案79.一种吹填密封容器，包含实施方案1至61任一项的制剂。实施方案80.一种多剂量容器，其包含实施方案1至61任一项的制剂。实施方案81.一种多剂量容器，其包含实施方案35至40的制剂。实施方案82.一种药物递送装置，其包含实施方案1至61任一项的制剂。实施方案83.实施方案82的药物递送装置，其中所述药物递送装置是吹填密封容器。实施方案84.实施方案77至83任一项的容器或装置，其中所述容器或装置密封于袋中，可选的含有惰性气体，例如氮气或氩气。实施方案85.实施方案1至61任一项的制剂，用于治疗il-1相关病症，例如干眼病。实施方案86.实施方案1至61任一项的制剂在制备用于治疗受试者中il-1相关病症的药物中的用途。实施方案87.一种包含容器或装置的试剂盒，所述容器或装置包含实施方案1至61任一项的制剂，以及可选的，使用说明。本文描述的实施方案还包括以下项：1.一种水性制剂，包含浓度为8至12mm的柠檬酸钠或磷酸钠；4％至6％(w/v)的山梨糖醇；浓度为0.08％至0.12％(w/v)的泊洛沙姆(poloxamer)188；以及可选的羧甲基纤维素钠，其中所述制剂的ph为5.5至7.5，和其中所述制剂用于治疗眼部病症有效。2.项1的制剂，其中所述制剂包含：浓度为8至12mm的柠檬酸钠；4.5％至5.5％(w/v)的山梨糖醇；和浓度为0.09％至0.11％(w/v)的泊洛沙姆188。3.项2的制剂，其中所述制剂由以下成分组成：浓度为8至12mm的柠檬酸钠；4.5％至5.5％(w/v)的山梨糖醇；和浓度为0.09％至0.11％(w/v)的泊洛沙姆188。4.项3的制剂，其中所述制剂由以下组分组成：浓度为9至11mm的柠檬酸钠；4.5％至5.5％(w/v)的山梨糖醇；和浓度为0.09％至0.11％(w/v)的泊洛沙姆188。5.项1至4任一项的制剂，包含浓度为0.1-1％的羧甲基纤维素钠。6.项1至5任一项的制剂，其中所述制剂基本不含治疗性蛋白。7.项1至6任一项的制剂，其中所述眼部病症是干眼病。8.项1至7任一项的制剂，其中所述制剂有效降低眼睛疼痛或酸胀，osdi分数，和/或角膜荧光素染色(cfs)分数。9.一种水性制剂，包含1-50mg/ml选自下组的il-1β/il-1ra嵌合细胞因子蛋白：p01,p02,p03,p04,p05,p06,和p07；选自柠檬酸钠和磷酸钠的缓冲剂；山梨糖醇；泊洛沙姆188；以及可选的羧甲基纤维素钠(cmc)，其中所述制剂ph为5.5至7.5。10.项9的制剂，其中所述嵌合细胞因子蛋白是p05。11.项9或10的制剂，包含：总浓度为5mm至15mm的柠檬酸钠和/或磷酸钠，浓度为3.5％至6.5％(w/v)的山梨糖醇，和浓度为0.07％至0.13％(w/v)的泊洛沙姆188。12.项9至11任一项的制剂，其中柠檬酸钠以5mm至15mm的浓度存在。13.项9至12任一项的制剂，其中所述制剂包含浓度为0.1-1％(w/v)羧甲基纤维素钠。14.项9至13任一项的制剂，其中泊洛沙姆188以0.08％至0.12％w/v的浓度存在。15.项9至14任一项的制剂，其中山梨糖醇以4％至6％w/v的浓度存在。16.一种水性制剂，由以下物质组成：4-6mg/mlp05；浓度为9mm至11mm的柠檬酸钠；4.5％至5.5％(w/v)的山梨糖醇；和浓度为0.09％至0.11％(w/v)的泊洛沙姆188；其中所述制剂的ph为5.7至6.3。17.项9至16任一项的制剂，其中所述制剂具有270-370mosm/kg的渗透压度。18.项1，2，9，10，11，12，14，15，16，或17任一项的制剂，其中所述制剂不包含黏度剂。19.项9至18任一项的制剂，其中所述制剂进一步包含氨基酸。20.项19的制剂，其中所述制剂包含浓度为1至20mm的蛋氨酸。21.项20的制剂，其中当所述制剂经受储存在25℃至少4周时，所述制剂与不包含蛋氨酸的对应制剂相比，具有减少的氧化作用。22.项9至21任一项的制剂，其中所述制剂具有少于或等于50个≥10μm的颗粒每ml，和少于或等于5个≥25μm的颗粒每ml，如使用光遮蔽粒子计数测试评估的。23.项9至22任一项的制剂，其中通过在25℃涡流振荡蛋白溶液4小时后，相对于聚集形式蛋白单体形式>90％的存在表明所述制剂稳定，其中使用sec-hplc评估相对于聚集形式蛋白的单体形式的百分比。24.项9至23任一项的制剂，其中所述制剂在2-8℃和60％相对湿度储存至少1个月后稳定。25.项9至23任一项的制剂，其中所述制剂在环境条件下，例如室温，例如25℃储存至少1个月后稳定。26.项9至25任一项的制剂，其中通过例如，使用显微粒子计数测试评估，存在少于或等于50个≥10μm的颗粒每ml，少于或等于5个≥25μm的颗粒每ml，和少于或等于2个≥50μm的颗粒每ml表明所述制剂稳定。27.项9至26任一项的制剂，其中通过使用sec-hplc评估，相对于聚集形式>90％的蛋白单体形式的存在表明所述制剂稳定。28.项9至27任一项的制剂，其中通过在还原sds-page或非还原sds-page中主条带相对于参考标准的一致性表明所述制剂稳定。29.项9至28任一项的制剂，其中当所述制剂使用弱阳离子交换hplc(wcex-hplc)评估时，主峰大于或等于85％表明所述制剂稳定。30.项9至29任一项的制剂，其中所示制剂包装在吹填密封容器中。31.根据项1-30任一项的制剂，用于il-1相关病症的治疗。32.根据项31的制剂，其中所述il-1相关病症是干眼病。33.一种水性制剂，包含浓度为8mm至12mm的柠檬酸钠或磷酸钠；4％至6％(w/v)的山梨糖醇；浓度为0.08％至0.12％(w/v)的泊洛沙姆188；和可选的羧甲基纤维素钠；其中所述制剂ph为5.5至7.5，并且基本不含治疗性蛋白，用于干眼病的治疗。34.一种水性制剂，包含1至25mg/ml的p05；浓度为8mm至12mm的柠檬酸钠或磷酸钠；4％至6％(w/v)的山梨糖醇；浓度为0.08％至0.12％(w/v)的泊洛沙姆188；和可选的羧甲基纤维素钠；其中所述制剂ph为5.5至7.5，用于干眼病的治疗。35.根据项34使用的制剂，其中所述制剂由以下物质组成：1至25mg/ml的p05；浓度为9mm至11mm的柠檬酸钠；4.5％至5.5％(w/v)的山梨糖醇；和浓度为0.09％至0.11％(w/v)的泊洛沙姆188；其中所述制剂ph为5.7至6.3。36.根据项31至35任一项的制剂的用途，其中所述制剂有效减少眼睛疼痛或酸胀，osdi分数，和/或角膜荧光素染色(cfs)分数。37.根据项31至36任一项的制剂的用途，其中所述制剂用于每天一至五次施用。38.根据项31至37任一项的制剂的用途，其中所述制剂用于局部施用。39.根据项38的制剂的用途，其中所述制剂用于局部施用到眼睛。40.根据项31至39任一项的制剂的用途，其中所述制剂用于随意施用。41.一种容器或药物递送装置，包含项1至30任一项的制剂。42.项41的容器或药物递送装置，其中所述容器或药物递送装置是吹填密封容器。43.项41的容器或药物递送装置，其中所述容器或药物递送装置是多剂量容器。44.项41至43任一项的容器或装置，其中所述容器或装置密封于含有惰性气体的袋中。45.项1至30任一项的制剂在制造用于治疗受试者中il-1相关病症的药物中的用途。46.一种包含根据项41至44任一项的容器或装置，以及可选的使用说明的试剂盒。47.根据项45的用途，其中所述il-1相关病症是干眼病。前述实施方案不一定是单独的实施方案。在一些情况下，可以将它们互相组合和/或与本文公开的其它方面和实施例组合。本文引用的所有专利，公开的专利申请，以及公开的参考文献通过提述并入本文用于所有目的。附图简述图1是sds-page凝胶的再现，示出了从表达受体结合剂的大肠杆菌纯化的蛋白示例性样品。左侧标明了15和20kda分子量的标记物。泳道如下：分子量标记物(第1和6道)，提取物(第2和7道)，通过阳离子交换色谱纯化的材料(第3和8道)，此外通过阴离子色谱交换纯化的材料(第4和9道)，以及这些材料的还原样品(第5和10道)。第2-5道为p05纯化，而第6-10道为p04纯化。也见实施例2。图2a是伴随有柱状图的表格，阐明了测试p06、p07和p01蛋白激动il-1β以及阴性对照β-葡萄糖醛酸酶(gus)蛋白相关信号能力的实验结果。图2b柱状图描述了测试p01在不同il-1β浓度拮抗il-1β活性能力的实验结果。图3a柱状图描述了在0.1ng/mlil-1β(人)存在下，测试p03(六组氨酸标签的(seqidno:23))，p04(六组氨酸标签的(seqidno:23))，p05(六组氨酸标签的(seqidno:23))，以及il-1ra对il-1β拮抗的实验结果。图3b柱状图描述了在0.1ng/mlil-1β(人)存在下并使用相应裂解物中蛋白浓度的估算值，含有无标签形式的p01、p02、p03、p04和p05，以及il-1ra的裂解物对il-1β拮抗的实验结果。图4a曲线图示出了p05在磷酸盐制剂中的动态光散射(dls)结果(p0520mg/ml，10mm磷酸盐，5％w/v山梨糖醇，0.1％w/v泊洛沙姆188，ph6.5)。图4b曲线图示出了p05在柠檬酸盐制剂中的dls结果(p0520mg/ml，10mm柠檬酸盐，5％w/v山梨糖醇，0.1％w/v泊洛沙姆188，ph6.0)。图5a曲线图描述了如实施例8所述的il-1ra,il-1β,p03,p04,和p05的热变性。图5b曲线图描述了图5a中曲线图的负一阶导数(该负一阶倒数提供对熔解温度改进的可视化)。图6a柱状图描述了干眼模型中，小鼠在第0,3,7,9,和11天两次独立实验每只眼睛角膜的荧光素染色的平均角膜染色分数±sem。所述小鼠不接受处理(n＝18)，接受10mg/mlp05(n＝19)，或接受媒介物1.25×pbs(n＝20)。星号表明p05相对于媒介物的统计显著性，如下：*(p<0.05)和**(p<0.005)。图6b柱状图表现的数据示出了干眼模型中，小鼠在第0,3,7,9,和11天每只眼睛角膜的平均角膜染色分数±sem。所述小鼠不接受处理(n＝8)，接受媒介物1.25×pbs(n＝8)，接受10mg/ml鼠血清白蛋白(msa)(n＝8)，或10mg/mlp05(n＝9)。星号表明p05相对于鼠血清白蛋白的统计显著性，如下：*(p<0.05)和***(p<0.0005)。图6c柱状图表现了与图6b相同的实验中，使用(0.05％环孢素乳剂)处理的小鼠的数据(n＝8)。星号表明了p05相对于环孢素的统计显著性，如下：**(p<0.005)和***(p<0.0005)。图7描述了实施例16中所述的临床试验的设计。图8曲线图示出了接受ebi-005制剂(接受5mg/ml和20mg/ml治疗的组的组合数据)和媒介物制剂的受试者组osdi分数从基线的平均变化。图9曲线图示出了接受ebi-005制剂(接受5mg/ml和20mg/ml治疗的组的组合数据)和媒介物制剂的受试者组疼痛从基线的平均变化。图10曲线图示出了接受ebi-005制剂(接受5mg/ml和20mg/ml治疗的组的组合数据)和媒介物制剂的受试者组角膜荧光素染色从基线的平均变化。发明详述申请人完成了可用于向需要使用这些制剂治疗的受试者提供蛋白，例如，嵌合细胞因子多肽，例如il-1β/il-1ra嵌合体的制剂。所述制剂通常有用于配制要求稳定性的蛋白组合物，例如，容易受到搅拌的蛋白，容易受到氧化的蛋白，例如由于蛋氨酸残基，或容易受到脱酰胺的蛋白，例如，由于天冬酰胺或精氨酸残基。本文也公开了制备和施用这些制剂的方法。在一些实施方案中，包含嵌合细胞因子多肽的制剂，例如含有衍生于il-1β和il-1ra序列的选择序列的嵌合多肽，其适合用于药物用途，例如，用于眼部用途，包括il-1相关病症的有效治疗。一般来说，本文所述的制剂惊人的稳定，甚至是在所述多肽相对高的浓度下，例如，在适合用于大量药物物质储存的浓度以及适合用于治疗受试者的浓度。这一特征的优势在于不需要为了配制药物为患者使用而从大量药物物质中移除不合需要的试剂。值得注意的是，申请人已成功的完成了嵌合细胞因子多肽的有效水性制剂，其适合用于局部施用，例如眼睛中，例如，施用到眼睛的前表面或角膜表面。据申请人所知，当本申请提交时，没有由fda批准的用于局部眼部给药的生物药物(生物制品)。此外，申请人能够以适合施用到眼睛的ph配制此多肽(例如，ph为4.5至7.0,5.5至7.0,5.5至6.5,或6.0至7.0)，并含有使得所述制剂对于使用该多肽治疗的受试者舒适的组分。如果所述制剂舒适，例如，不引起刺激，患者更可能服从治疗。在实施方案中，所述制剂不引起一种或多种刺激例如，眼睛发红，流泪，粘膜分泌物，或主观不适。稳定性局部眼部药物通常由患者自我施用。因为患者可能将药物储存一段相对长的时间，该制剂与施用前通常仅由医师或药剂师储存的制剂相比，可能经受较高的温度和较高水平的搅拌压力。如本领域所知，与小分子相比蛋白对搅动和温度更为敏感。搅拌压力可以引起沉淀，而热压力可以引起沉淀和化学降解。另外，将化合物装载到递送装置中期间，可能暴露于热压力。申请人已经完成了制剂，所述制剂当暴露于搅拌压力和热时，成功的提供了极好的稳定性。一些制造过程要求制剂至少短暂的暴露于相对高的温度。例如，将制装载到吹塑装填密封(bfs)容器除了与填充相关的搅动外，可以导致所述制剂暴露于升高的温度。申请人已经将制剂装载到这种装置中(bfs容器)并在转载后紧接着和延长的时间周期后，证明了所述制剂的稳定性。在一些实施方案中，本文提供的制剂适合与bfs一同使用。在实施方案中，适合于bfs一同使用的制剂在转载后紧接着和/或储存于bfs容器后，例如在本文所述条件下储存一段时间后，表现出稳定性。在实施方案中，本文所述的制剂是稳定的。在实施方案中，所述制剂在本文所述的条件下(例如，储存于特定温度，或搅拌压力)表现出稳定性。在实施方案中，使用本文所述的一种或多种方法评估稳定性(例如，基于视觉外观，分光光度法的含量(a280)，非还原sds-page，还原sds-page；尺寸排阻hplc(sehplc)；反相hplc(rp-hplc)；弱阳离子交换hplc(wcex-hplc)；效价；光遮蔽粒子计数测试(例如，如usp<788>中所描述的光遮蔽粒子计数测试)；或微观粒子计数测试(例如，如usp<788>中所描述的微观粒子计数测试))和/或本领域已知的方法。可以基于视觉外观评估稳定性。在实施方案中，如果制剂是基本不含可见颗粒的清澈到轻微乳白色的无色溶液，则所述制剂稳定。在实施方案中，所述制剂在约25℃至约40℃，例如，约27℃、约28℃、约29℃、约30℃、约31℃、约32℃、约33℃、约34℃、约35℃、约36℃、约37℃、约387℃、约39℃、或约40℃稳定至少两天的时间；三天；五天；一周；十天、两周、三周、四周、五周、六周、八周、16周、20周、25周、30周、35周、40周、45周、一个月、两个月、三个月、四个月、五个月、六个月、七个月、八个月，或更多。在实施方案中，所述制剂在储存于从约2℃至约8℃期间长时间稳定，例如在约4℃、约5℃、约6℃、从2℃到8℃、4℃、5℃，或6℃。例如，所述制剂在这些储存温度稳定至少两周的时间；四周；六周；两个月；三个月；六个月；一年；两年；三年，或四年。制剂的稳定可以在，例如2-8℃储存至少2,4,6,8,12或18个月，或在环境温度储存，例如室温，例如约25℃至少2周、1个月、2个月、3个月、5个月、6个月、12个月，或18个月来评估。在实施方案中，所述制剂在2-8℃储存至少8个月后稳定。在实施方案汇总，所述制剂在暴露于室温至少5个月后稳定。在一些这样的实施方案中，所述制剂在bfs容器中储存，例如至少5个月后稳定。可以基于本文描述的或本领域已知的方法和标准来评估稳定性。例如，可以基于物理纯度(例如，没有聚集，例如，使用尺寸排阻hplc，本文也称为尺寸排阻，sehplc，或sechplc)，化学纯度(例如，使用弱阳离子交换hplc，反相hplc，和/或sdspage(例如还原或非还原sdspage))，和/或颗粒的水平(例如，肉眼评价或使用hiac液体例子计数器(beckmancoulter,brea,ca)计算颗粒数)来评估稳定性。在实施方案中，基于遵守眼科溶液的颗粒物准则证明稳定性，例如，列于usp<789>中的准则(美国药典，眼科溶液中的颗粒物)。在实施方案中，所述制剂具有少于或等于50个≥10μm的颗粒每ml和/或少于或等于5个≥25μm的颗粒每ml，例如，使用光遮蔽粒子计数测试(例如，usp<788>中描述的光遮蔽粒子计数测试)。在实施方案中，所述制剂具有少于或等于50个≥10μm的颗粒每ml，少于或等于5个≥25μm的颗粒每ml，和/或少于或等于2个≥50μm的颗粒每ml，例如，使用显微粒子计数测试(例如，usp<788>中描述的显微粒子计数测试)。在实施方案中，基于遵守注射中的颗粒物准则证明稳定性，例如，列于usp<788>中的准则(美国药典，注射中的颗粒物)。在实施方案中，所述制剂具有少于或等于6000个≥10μm的颗粒每个容器(体积为100ml或更少的容器)，和/或少于或等于600个≥25μm的颗粒每个容器(体积为100ml或更低的容器)，例如，使用光遮蔽粒子计数测试(例如，usp<788>中描述的光遮蔽粒子计数测试)。在实施方案中，所述制剂具有少于或等于3000个≥10μm的颗粒每5ml和/或少于或等于300个≥25μm的颗粒每5ml，例如，使用显微粒子计数测试(例如，usp<788>中描述的显微粒子计数测试)。在实施方案中，例如通过涡旋振荡蛋白溶液没有聚集(如果所述制剂相对于聚集形式含有>90％,>91％,>92％,>93％,>94％,>95％,>96％,>97％,>98％,或>99％的蛋白单体形式，可以证明没有聚集)证明制剂中的蛋白被保护免受搅动压力，例如，在室温(rt)振荡1-8小时，例如rt4小时。可以使用本文描述的或本领域已知的方法来评估聚集。例如，可以使用超速离心，尺寸排阻层析，凝胶电泳，动态光散射，和/或浊度测量来评价聚集。在一些方面，通过本领域已知的物理或化学方法来测定稳定性。例如，可以使用尺寸排阻hplc或其它确定制剂中单体多肽相对量的方法来确定物理纯度或没有聚集。典型地，具有可接受稳定性的制剂含有相对于聚集形式的蛋白>90％单体形式的治疗蛋白(例如，嵌合细胞因子，例如p05)。在实施方案中，所述制剂含有相对于聚集形式的蛋白，>90％(例如，>91％,>92％,>93％,>94％,>95％,>96％,>97％,>98％,或>99％)单体形式的治疗蛋白(例如，嵌合细胞因子，例如p05)。可以使用，例如，弱阳离子交换hplc或反相hplc确定化学纯度。典型地，具有可接受稳定性的制剂含有相对于分子的修饰形式>80％的天然分子，例如，使用弱阳离子交换hplc评估。在实施方案中，所述制剂含有相对于化学修饰形式的分子(例如，氧化或乙酰化形式)，>80％(例如，>85％,>87％,>90％,或>95％)的天然分子。可以肉眼识别颗粒。在实施方案中，所述制剂为基本不含可肉眼识别的颗粒的制剂。申请人注意到，阿那白滞素，il-1ra，配制用于通过注射递送，其信息声明，该产品具有三年的保质期，储存于3-8℃，并且“为了动态使用的目的，可以将从冰箱中取出在不高于25℃12个小时而不会超过有效期。在该时期结束时，产品不能放回冰箱并且必须加以处理”(见：medicines.org.uk/emc/medicine/23104/spc/kineret+100+mg+solution+for+injection+in+a+pre-filled+syringe#shelf_life)。这提供了与，例如，本文提供的p05制剂惊人的稳定性的对比。对于施用者，生物治疗可能是有问题的，因为它们可能具有相对短的保质期或需要特殊的储存条件，可能对储存，运输，和患者使用，以及保证生物的充足供应造成障碍。本文提供的某些制剂的优势在于所述制剂不仅在制冷的条件下，并且在与室温一致(例如，25℃)或更高的温度(例如，40℃)下惊人的稳定。因此，所述细胞因子蛋白或多肽制剂(例如，异源性细胞因子蛋白或多肽制剂)，例如本文描述的制剂，在一些实施方案中提供在室温(rt，例如，25℃)稳定至少三天、五天、一周、十天、两周、三周、六周、八周、16周、20周、25周、30周、35周、40周、45周、一个月、两个月、三个月、四个月、五个月、六个月、七个月、八个月、十二个月，或更久时间的液体形式。在实施方案中，基于，例如从月份的第一天到第二个月的第一天的日期来确定一个月。在其它方面，所述制剂在约25℃至约40℃，例如约27℃,约28℃,约29℃,约30℃,约31℃,约32℃,约33℃,约34℃,约35℃,约36℃,约37℃,约38℃,约39℃,或约40℃稳定至少两天；三天；五天；一周；十天、两周、三周、四周、五周、六周、八周、16周、20周、25周、30周、35周、30周、35周、40周、45周、一个月、两个月、三个月、四个月、五个月、六个月、七个月、八个月，或更多。在一个实施例中，当制剂的蛋白组分，例如p05，浓度为20mg/ml时，所述制剂在25℃稳定一个月并且在40℃稳定一周。在另一个特定的实施方案中，对于包含蛋白，例如p05，浓度为1mg/ml,5mg/ml,或10mg/ml的制剂，所述制剂装载到吹塑充填的密封小瓶或吹塑充填的递送装置中，在25℃稳定至少三个月。在一些实施方案中，该制剂至少稳定八个月。在实施方案中，包含4.5-5.5mg/mlp05，9-11mm柠檬酸钠；4.5-5.5％w/v山梨糖醇，和0.09-0.11％w/v泊洛沙姆的制剂在2℃至8℃和/或在室温，例如25℃至少稳定五个月。在一些实施方案中，组成为10mm柠檬酸钠，ph6.0，5％山梨糖醇，0.1％泊洛沙姆，以及5mg/ml或20mg/mlp05的制剂在2℃至8℃和/或在室温稳定至少五个月，例如，在25℃稳定至少5个月。浓度施用生物制剂中的另一个问题是提供足够浓度的生物制剂。这在眼科应用中尤其是一个问题，其中需要提供相对高浓度的生物制剂以便使用最小给药数量达到治疗效果。申请人已经能够完成制剂，其能够递送含有高浓度或治疗有效浓度多肽的嵌合细胞因子制剂的有效剂量，所述制剂当储存于例如描述于上文和本说明书其它地方的条件时，不明显聚集，沉淀，或丧失化学纯度。此外，申请人已证明了蛋白浓度高达80mg/ml，例如50mg/ml的细胞因子制剂在包含张度剂，表面活性剂，和缓冲剂的制剂中的稳定性。因此，在一个方面，在本发明中起重要作用的制剂含有嵌合细胞因子多肽，其以0.1mg/ml至100mg/ml,0.1-80mg/ml,0.1至50mg/ml,0.1mg/ml至20mg/ml,0.1mg/ml至5mg/ml,0.1mg/ml至1mg/ml,1mg/ml至100mg/ml；5mg/ml至100mg/ml；5mg/ml至30mg/ml；10mg/ml至100mg/ml；10mg/ml至30mg/ml；20mg/ml至100mg/ml；30mg/ml至100mg/ml；40mg/ml至100mg/ml；50mg/ml至100mg/ml；60mg/ml至100mg/ml；1mg/ml至80mg/ml；5mg/ml至80mg/ml；10mg/ml至80mg/ml；20mg/ml至80mg/ml；40mg/ml至80mg/ml；50mg/ml至80mg/ml；60mg/ml至80mg/ml；1mg/ml至60mg/ml；5mg/ml至60mg/ml；10mg/ml至60mg/ml；20mg/ml至60mg/ml；30mg/ml至60mg/ml；40mg/ml至60mg/ml；或50mg/l至60mg/ml的浓度稳定存在于所述制剂中。例如，所述制剂含有0.1mg/ml,1mg/ml,2mg/ml,5mg/ml至20mg/ml,例如5mg/ml至20mg/ml。黏度剂频繁的用于制剂中，例如，用于眼部用途。通常纳入这些试剂来增加眼部治疗的停留时间，否则其将通过眨眼和通过结膜囊排出而快速清除。然而，这些试剂可能具有有害影响，例如，过敏症状，损害制剂的蛋白成分，或引起视力模糊。虽然这些试剂可以用于本文所述的某些制剂中，在一些实施方案中申请人已经完成了活性成分例如嵌合细胞因子不需要黏度剂的制剂，用作有效的治疗。在另一个方面，在本发明中起重要作用的制剂含有一种或多种表面活性剂。虽然使用表面活性剂可以有用于，例如减少分子对容器的粘附，减少蛋白的聚集，尤其是再搅动的条件下，但添加表面活性剂也可能使得治疗试剂因为起泡，天然膜和其它屏障的瓦解，以及治疗引起的不适而不可用。申请人已经成功的提供了包括表面活性剂但不引发这些缺点的制剂。典型地，所述表面活性剂是非离子型表面活性剂。适合用于本公开制剂的表面活性剂包括但不限于：泊洛沙姆，例如泊洛沙姆188。在一些实施方案中，表面活性剂是聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯-20和聚山梨醇酯-80。其它可能有用的表面活性剂包括el，四丁酚醛，辛苯聚醇40(x405)，以及聚乙二醇40硬脂酸酯。在某些实施方案中，制剂含有浓度为约0.05％,0.06％,0.1％至1.0％,0.1％至0.5％,0.2％至0.5％,或0.1％至0.2％w/v的表面活性剂(例如，泊洛沙姆188)，例如0.1％w/v的泊洛沙姆188。适合的表面活性剂和这些表面活性剂的浓度可以通过测试所述表面活性剂在搅动研究中是否防止聚集来确定。进行这些研究的方法是本领域已知的。例如，可以确定是否需要表面活性剂来防止因为搅拌压力的沉淀。在这些实验中，通常使用搅拌和分析来进行筛选。用于这些研究的浓度的例子为0.01％,0.02％,0.06％,和0.1％w/v的表面活性剂，例如泊洛沙姆188。在实施方案中，使用分光光度法(a280)，目测，尺寸排阻色谱(sec)，光遮蔽(例如，使用hiac装置)，或微流成像tm(mfi,proteinsimple,santaclara,ca)评估聚集和/或沉淀。通常来说选择用于制剂中的表面活性剂与最少量沉淀相关，例如，没有可见的沉淀，或颗粒计数符合注射中的颗粒物准则(见，例如usp<788>)或眼部溶液的颗粒物准则(见，例如usp<789>)。在另一个方面，在本发明中起重要作用的制剂含有一种或多种黏度剂。适合的黏度剂包括但不限于，氯化钠，山梨糖醇；甘露糖醇，蔗糖，海藻糖，或其它糖。不承诺为任何理论，这些试剂可能有助于嵌合细胞因子多肽惊人的稳定性。在实施方案中，黏度剂，例如糖，例如山梨糖醇，提供或有助于热稳定性。在某些实施方案中，在本发明中起重要作用的制剂与眼睛是等渗的(例如，具有渗透压度为约270-330mosm每kg)。在一些实施方案中，所述制剂具有渗透压度为从约250至约450mosm每kg，300至400mosm每kg，350至400mosm每kg，200至375mosm每kg，或350至375mosm每kg。在实施方案中，所述制剂具有渗透压度为270-330mosm每kg，例如，约320mosm每kg。根据所述黏度剂，在本发明中起重要作用的某些实施方案含有从约1％至约15％w/v；2％至12％w/v；5％至12％w/v；或5％至10％w/v。对于山梨糖醇或甘露糖醇，浓度的例子为约5％w/v，例如，浓度为5％w/v。对于蔗糖或海藻糖，浓度的例子为约9％w/v。缓冲剂在另一个方面，在本文中起重要作用的制剂含有一种或多种缓冲剂。适合的缓冲剂包括但不限于，磷酸盐；柠檬酸盐；乙酸盐；硼酸盐；琥珀酸盐，和tris。在一些情况下，缓冲试剂的盐是钠盐或钾盐。在本发明中起重要作用的某些实施方案中，所述缓冲剂以从约10mm至约50mm的量存在，例如从约20mm至约40mm，提供弱缓冲效果。这允许所述制剂在施用位点被快速的中和，例如，在眼睛的表面，在刺激和不适的情况下。在一些实施方案中，所述缓冲剂以约10mm、约15mm、约20mm、约25mm、约30mm、约35mm、约40mm、约45mm或约50mm的量存在。在一些制剂中，所述缓冲剂是柠檬酸盐，例如，柠檬酸钠。在其它制剂中，所述缓冲剂为10mm的柠檬酸盐。通常来说，所述缓冲剂为弱缓冲剂。通常来说，通过进行稳定性研究来选择缓冲剂，在所述研究中感兴趣的多肽暴露于不同ph，浓度，温度的不同缓冲剂不同时间。例如，可以通过将感兴趣的多肽置于缓冲剂并将所述样品经受升高的温度(加速稳定性测试)接着测试物理稳定性(通过视觉检查沉淀)或化学稳定性，例如，通过弱阳离子交换色谱分析监控脱酰胺基作用或通过反相色谱分析氧化作用，来选择缓冲剂。另外的测定可以包括监控a280,sds-page,ph以及浊度。选择提供最佳物理和化学稳定性的缓冲剂。氨基酸在另一个方面，本发明中起重要作用的制剂含有一种或多种氨基酸。适合的氨基酸包括但不限于：精氨酸，谷氨酸，组氨酸，或蛋氨酸。通常选择所述氨基酸来提高蛋白的稳定性和/或溶解度。鉴定这些氨基酸的方法是本领域已知的。在一些实施方案中，制剂例如p05制剂包含组氨酸或蛋氨酸。在一些实施方案中，制剂含有除氧剂，例如蛋氨酸。在一些实施方案中，所述制剂在塑料容器中。在实施方案中，所述塑料容器使用产生自由基的方法杀菌，例如，所述容器是用γ射线或环氧乙烷杀菌。在一些这样的实施方案中，所述制剂包括蛋氨酸，例如，浓度为1-20mm的蛋氨酸。在实施方案中，蛋氨酸的浓度为1-5mm，5-10mm，10-15mm，15-20mm，或5-15mm。在实施方案中，蛋氨酸为约1mm，5mm，10mm，15mm，或20mm。在实施方案中，所述制剂包含浓度为约5mm的蛋氨酸，例如，浓度为2.5-7.5mm，3-7mm，或4-6mm。在一些实施方案中，包含蛋氨酸的制剂在无菌的塑料容器中，并且氧化量比不含有蛋氨酸的对应制剂少。黏度剂在另一个方面，本发明中起重要作用的制剂可以含有一种或多种黏度剂。适合的黏度剂包括但不限于，甲基纤维素，包括羧甲基纤维素钠(本文也称为羧甲基纤维素或cmc)；羟基纤维素，包括乙基纤维素，羟丙基甲基纤维素(羟丙甲纤维素)；卡波姆(carbomers)，例如934p，971p和974p；聚乙烯醇；黄原胶；瓜尔豆胶；结冷胶；和甘油。本发明中起重要的制剂还可以含有其他要药学上可接受的赋形剂。见，例如gennaro(ed.),remington:thescienceandpracticeofpharmacy,20thed.,lippincott,williams&wilkins(2000)(isbn:0683306472)；anseletal.,pharmaceuticaldosageformsanddrugdeliverysystems,7thed.,lippincottwilliams&wilkinspublishers(1999)(isbn:0683305727)；kibbe(ed.),handbookofpharmaceuticalexcipients,3rded.(2000)(isbn:091733096x)；proteinformulationanddelivery,mcnallyandhastedt(eds.),informahealthcare(isbn:0849379490)(2007)。这些赋形剂中可以添加的是防腐剂，渗透增强剂和生物粘附剂。渗透增强剂和生物粘附剂可以包括，例如壳聚糖，细胞松弛素b，胺化明胶，聚-ε-己内酯(卡波普(carbopol)941p)；聚(氰基丙烯酸正丁酯)；聚-l-精氨酸；环糊精；结冷胶；聚(丙烯酸)；透明质酸；粘蛋白；褐藻胶；carbophil，和泊洛沙姆(例如，见nagarwaletal.,jcontrolledrelease,136:2-13(2009)；ding,pstt1:328-35(1998)；和sahooetal.,drugdiscoverytoday,13:144-51(2008))。其它作为稳定剂可能有用的赋形剂可以包括，例如甘油，氯化钾，磷酸钾，丙二醇，乙酸钠，亚硫酸氢钠，硼酸钠，硼酸钠十水合物，氯化钠，柠檬酸钠，磷酸钠，磷酸钠(包括磷酸二氢钠和二盐基的)；氯化锌，苯酚，苯甲酸盐，蓖麻油和环氧乙烷的衍生物，以及(basfcorp.,germany)。本发明中起重要作用的药物组合物可以以不同形式配制。这些包括，例如，液体，半固体以及固体剂型形式，例如液体溶液(例如，可注射和可输注的溶液)，分散液或悬浮液，包括纳米颗粒和脂质体。形式将通常取决于预期的施用模式和治疗应用。本文所述的试剂的组合物通常以可注射或可输注溶液的形式，或配制为用于局部递送，例如，局部眼部递送。在一些实施方案中，本文描述的药物组合物为无菌的，并在制备和储存条件下稳定。也可以测试药物组合物来保证其符合施用的法规和工业标准。所述组合物可以配制为溶液，微乳剂，分散液，脂质体，或其它适合高药物(例如，生物制剂)浓度的有序结构。可以通过将本文所述的试剂以所需量整合到具有上文列举的一种成分或其组合的适合溶剂，根据需要，接着过滤除菌来制备无菌可注射溶液。通常来说，通过将本文所述的试剂整合到含有基本分散介质以及上文列举的其它所需成分的无菌媒介物中来制备。在使用无菌粉末制备无菌可注射溶液的情况下，示例性的制备方法包括真空干燥和冷冻干燥，产生本文所述试剂的粉末加上任意其它所需成分，来自其先前无菌过滤的溶液。溶液的适当流动性可以通过使用包被例如卵磷脂，在分散液的情况下通过维持颗粒的大小，以及通过使用表面活性剂来维持。可注射组合物延长的吸收可以通过包括延迟吸收的试剂工程化，例如，单硬脂酸盐和明胶。这些试剂在低剂量制剂中可能尤其有用。在实施方案中，所述制剂包含≤1mg/ml的治疗蛋白(例如，嵌合细胞因子，例如p05)，并且所述制剂包含明胶。在某些实施方案中，使用载体制备制剂，例如，来延伸嵌合细胞因子多肽的药代动力学(pk)(例如，基于其在身体中的半衰期评估，例如，在眼睛中，例如，在角膜上)。在这些实施方案中，所述嵌合细胞因子多肽可以，例如，作为控释制剂递送，通过植入物或微胶囊递送系统递送。可以使用生物可降解，生物相容性多聚物，例如乙烯乙酸乙烯酯，聚酸酐，胶原蛋白，聚正酯，和聚乳酸。见，例如sustainedandcontrolledreleasedrugdeliverysystems,j.r.robinson,ed.,marceldekker,inc.,newyork,1978。本文所述制剂的一个特征为它们不含有防腐剂。通常来说，防腐剂可能影响嵌合细胞因子多肽，例如，引起所述多肽结构的变化。另外，防腐剂可以引起受试者中，例如，炎症反应，其与所需的治疗效果对立。制剂在无菌条件下除菌、储存，并填充到其最终容器中。媒介物制剂申请人还意外的发现了如本文所描述的不含有治疗性蛋白的制剂(例如，仅媒介物制剂)，其有用于治疗眼部疾病的一种或多种迹象或症状，例如干眼病，例如，本文所述的干眼病的迹象或症状。在一些实施方案中，媒介物制剂包含表面活性剂，张度剂，以及缓冲剂。在一些这样的实施方案中，所述制剂有效减少疼痛(例如使用疼痛问题分数或视觉模拟量表评估的疼痛)，osdi，或osdi的分量表。在一些这样的实施方案中，所述制剂减少角膜荧光素染色(cfs)。如本文使用的，术语“仅媒介物制剂”特异性指代本文所述的制剂，其基本不含蛋白或肽组分，例如，不含有治疗性蛋白。应当理解本文所述的媒介物制剂可以含有任意治疗性蛋白，例如治疗性多肽。在一些实施方案中，所述媒介物制剂，例如，仅媒介物制剂，基本上包含表面活性剂(例如，泊洛沙姆188)，张度剂(例如，山梨糖醇)，以及缓冲剂(例如，柠檬酸钠)。在实施方案中，所述媒介物制剂基本不含蛋白。在实施方案中，所述媒介物制剂基本不含治疗性蛋白或多肽。在实施方案中，所述媒介物制剂不含粘度剂。有用的表面活性剂，张度剂，以及缓冲剂包括本文公开的那些。在一些实施方案中，所述表面活性剂是泊洛沙姆188，所述张度剂是山梨糖醇，而所述缓冲剂是柠檬酸钠和/或磷酸钠。在实施方案中，所述缓冲剂以浓度为20mm或更少存在。在一些实施方案中，所述媒介物制剂包含约0.1％w/v泊洛沙姆188,约5％w/v山梨糖醇,以及约10mmw/v柠檬酸钠。在实施方案中，本文所述的媒介物的组分以围绕本文所提供的值可以变化高达5％,10％,15％,20％,25％,30％,40％,或50％的量存在。在实施方案中，媒介物制剂的组分以围绕本文所提供的值变化10％的量存在。在一些实施方案中，所述媒介物制剂是由10mm柠檬酸钠，ph6.0,5％山梨糖醇(w/v),和0.1％泊洛沙姆188组成的水性制剂。在实施方案中，所述媒介物制剂包含9.5-10.5mm,9-11mm,8.5-11.5mm,8-12mm,7.5-12.5mm,7-13mm,6-14mm,或5-15mm的磷酸钠或柠檬酸钠。在实施方案中，所述媒介物制剂包含9.5-10.5mm,9-11mm,8.5-11.5mm,8-12mm,7.5-12.5mm,7-13mm,6-14mm,或5-15mm柠檬酸钠。在实施方案中，所述媒介物制剂包含4.75-5.25％,4.5-5.5％,4.25-5.75％,4-6％,3.75-6.25％,3.5-6.5％,3-7％,或2.5-7.5％w/v的山梨糖醇。在实施方案中，所述媒介物制剂包含0.095-0.105％,0.09-0.11％,0.085-0.115％,0.08-0.12％,0.075-0.125％,0.07-0.13％,0.06-0.14％,或0.05-0.15％w/v泊洛沙姆188。在实施方案中，所述媒介物制剂的ph为5.5至7.5。在实施方案中，ph为5.5至6.5。在实施方案中，ph为6至7。在实施方案中，所述制剂包含8-12mm柠檬酸铵，4-6％w/v山梨糖醇,0.08-0.12％w/v泊洛沙姆188,并具有ph5.5至7.5,例如，ph5.5至6.5。在实施方案中，所述媒介物制剂包含9-11mm柠檬酸铵，4.5-5.5％w/v山梨糖醇,0.09-0.11％w/v泊洛沙姆188,并具有ph5.5至7.5,例如，ph5.5至6.5。在实施方案中，所述媒介物制剂包含7-13mm柠檬酸铵，3.5-5.5％w/v山梨糖醇,0.07-0.13％w/v泊洛沙姆188,并具有ph5.5至7.5,例如，ph5.5至6.5。在实施方案中，所述媒介物制剂不含有粘度剂。在实施方案中，所述媒介物制剂包含粘度剂，例如，羧甲基纤维素钠(cmc)。在实施方案中，所述媒介物制剂包含cmc，例如，浓度为0.1-1％w/v,0.1-0.5％w/v,或0.2-0.3w/v％的cmc。在一些实施方案中，所述媒介物制剂包含0.1％w/v泊洛沙姆188，5％w/v山梨糖醇，0.25％w/v羧甲基纤维素钠，以及10mm磷酸钠。在实施方案中，所述媒介物制剂ph为约6.5。在实施方案中，所述制剂的组分以围绕本文所提供的值可以变化高达5％,10％,15％,20％,25％,或30％的量存在。在一些实施方案中，所述媒介物制剂由0.1％w/v泊洛沙姆188，5％w/v山梨糖醇，0.25％w/v羧甲基纤维素钠，以及10mm磷酸钠组成。在一些实施方案中，所述制剂包含0.08-0.12％w/v泊洛沙姆188，4-6％w/v山梨糖醇，0.2-0.3％w/v羧甲基纤维素钠，以及8-10mm磷酸钠。在实施方案中所述制剂具有ph5.5-7.5，例如ph5.5-6.5。施用在一些实施方案中，本文中起重要作用的制剂，例如，含有治疗性蛋白例如嵌合il-1抑制物的制剂，或媒介物制剂，局部施用到受试者，例如，人或其它哺乳动物例如狗，猫，或马，并且例如施用到眼睛。通常来说，本文所述的制剂可以通过任意适合的方法施用到受试者，例如作为推注或连续输注一段时间的静脉内施用，通过肌肉内、动脉内、鞘内，囊内，眼眶内，心内，皮内，腹膜内，滑膜内，经气管，皮下，表皮，关节内，囊下，蛛网膜下，脊柱内，硬膜外注射，胸骨内注射和输注。其它适合的施用模式包括局部(例如，皮肤或粘膜)或吸入(例如，鼻内或肺内)途径。对于某些应用，施用途径为以下一种：静脉内注射或输注，皮下注射，或肌肉内注射。对于施用到眼睛，在一些实施方案中，本文中起重要作用的制剂(例如，本文所述的嵌合细胞因子制剂)的施用模式为局部施用到眼睛，例如，以液滴的形式。可以含有所述制剂和/或用于施用所述制剂的装置的例子包括简单的眼药水，具有或不具有计量功能的挤瓶，以及吹塑/填充/密封(bfs)装置，例如由catalent(somerset,nj)制造的那些，使用例如顶端-密封技术，银/微动技术，无菌过滤，崩初级容器(collapsingprimarycontainers)等技术的多用装置。对制剂的另一个考虑时最小化对递送装置或容器的粘附。例如，表面活性剂例如泊洛沙姆188的添加可以最小化p05对容器的粘附。对容器的另一个考虑是一旦填充，其提供可接受的半衰期，例如，可接受的低水平蒸发和/或所述制剂符合释放试验规范，例如，本文所述的规范。在实施方案中，所述容器适合提供至少两年的保质期，例如，至少3年，至少4年，或至少5年，例如，在5℃。在实施方案中，所述容器适合提供在5℃至少3年的保质期。在实施方案中，所述容器适合提供在rt至少2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、8个月、10个月，或12个月的保质期。在实施方案中，所述容器适合在rt提供至少5个月的保质期。本领域已知各种适合的容器材料，例如，特定塑料，例如，低密度聚乙烯(ldpe)，高密度聚乙烯(hdpe)，或聚乙烯。所述制剂可以制备在容器中用于单次使用应用，或制备用于多次使用容器中。本文中起重要作用的制剂可以玻璃体内递送，例如，来治疗例如与眼后段相关的病症。玻璃体内施用的方法是本领域已知的，并包括，例如眼内注射，可植入装置。在实施方案中，所述制剂使用可植入玻璃体内施用。在实施方案中，所述制剂包含热稳定剂，例如，山梨糖醇。在实施方案中，山梨糖醇以≥5％w/v的浓度存在。可植入装置可以是，例如，非生物降解的装置例如聚乙烯醇-乙烯乙酸乙烯酯聚合物和聚砜毛细纤维，生物可降解装置例如聚乳酸、聚乙醇酸、和聚乳酸-共-乙醇酸，聚己内酯，和聚酸酐。装置亦可以例如纳米颗粒，脂质体，或微球体的形式递送。本发明中起重要作用的制剂可以以固定剂量递送，作为体重确定的剂量(例如，mg/kg)，或作为年龄确定的剂量。所述制剂，例如，媒介物制剂或治疗性制剂(包括治疗剂例如治疗性蛋白的制剂)可以施用，例如，每天四次；每天三次；每天两次；每天一次；每两天一次；每三天一次；四或五天一次；每周一次；每两周一次；每三周一次；每四周一次；每五周一次；每个月一次；每两个月一次；每三个月一次；每四个月一次；每六个月一次；或根据需要(随意)。在实施方案中，所述制剂每天施用一次、两次，或三次。在一些这样的实施方案中，所示制剂局部施用，例如，到眼睛表面。药物组合物可以包括本文所述的试剂的“治疗有效量”。试剂的治疗有效量根据因素可能不同，例如疾病状态、年龄、性别，和个体的体重，以及该化合物在个体中引起所需反应的能力，例如，改善至少一项病症参数(例如，迹象)，或改善至少一项病症症状(以及可选的，施用的任意其它试剂的效果)。治疗有效量也是其中组分的任意毒性或有害作用被治疗有益效果生活的量。在一些实施方案中，“治疗有效量”在一群个体中确定，并且所述量有效地改善细胞因子相关病症的至少一种症状或迹象，例如，至少5％,10％,25％,50％,70％,75％,80％,85％,90％,95％,或100％受到影响的人群中的il-1相关病症。通常制剂以治疗有效量施用。在一些情况下，所述治疗有效制剂是媒介物制剂。在一些情况下，治疗有效制剂包含治疗性蛋白。在一些实施方案中，所述制剂施用到患有il-1相关病症的受试者，并且所述嵌合细胞因子多肽包含il-1β和il-1ra序列的片段。这种制剂含有，例如5mg/ml至20mg/ml,5mg/ml或20mg/ml的多肽。在实施方案中，所述制剂局部施用到眼睛每天一次、两次、三次、四次、五次、或六次。药物组合物可以使用如本文所描述的和本领域已知的医疗装置施用，例如，植入物，输注泵，皮下注射针头，和无针头皮下注射装置。装置可以包括，例如一个或多个外壳用于储存药物组合物，并可以配置来递送嵌合细胞因子多肽的单位计量，以及可选的第二种试剂。所述剂量可以是固定剂量，例如适合作为单一剂量用于待治疗的受试者的物理分离单位；每个单位含有嵌合细胞因子多肽经计算的预定量，用来与药物载体联合以及可选的与另一种试剂联合产生所需的治疗效果，所述另一种试剂例如或人工泪液，例如那些可以在柜台获得或规定的产品。在一些实施方案中，为了治疗本文所述的病症，例如il-1相关病症，所述制剂以足够诱导所述病症至少一种迹象或症状持续改善的量和时间施用到患有所述病症的受试者。如果受试者表现出长时间的改善，认为改善是“持续的”，例如一至四周相隔的至少两次。可以基于迹象或症状来确定改善的程度，也可以采用问卷给予受试者，例如生活质量问卷。在一个非限制性的实施例中，所述嵌合细胞因子多肽包含il-1β和il-1ra的片段，并以至少每周一次局部施用，例如，至少每天一次，至少每天两次，或至少每天三次。可以通过重复施用制剂的剂量直到受试者出现所选迹象和/或症状从基线的改善，来诱导改善。在治疗长期病症中，改善的量可以通过重复施用至少一个月或更多的时期来评价，例如，一个、两个，或三个月或更长，或无限期。在治疗急性病症中，所述试剂可以使用一至六周的时期，或甚至作为单次给药。虽然在最初或间断治疗后，病症的程度根据一种或多种迹象或症状可以表现为改善，治疗可以以相同的水平或减少的剂量或频率无限期持续。也可以中断治疗，例如，根据迹象或症状的改善或消失。一旦治疗减少或中断，如果症状再次出现，可以恢复治疗。治疗本文中起重要作用的一些制剂包含治疗性蛋白。在实施方案中，所述制剂包含嵌合受体结合试剂(例如，嵌合细胞因子)，例如可以结合il-1r的试剂和可以拮抗il-1信号的试剂，因此可以用于治疗“il-1”相关疾病，包括任意疾病或医疗状况，其(1)至少部分地由il-1激动导致，(ii)与il-1信号组分(例如，il-1α,il-1β,或il-1ri)水平或活性的升高，或il-1信号的升高相关，和/或(iii)通过降低il-1活性减轻。il-1相关病症包括急性和慢性病症，包括自身免疫疾病和炎症性疾病。il-1相关病症包括系统性和非系统性病症。公认il-1α和il-1β是强力的促炎症细胞因子，涉及感染性反应以及炎症性疾病，例如类风湿性关节炎。在患有某些自身免疫疾病，局部缺血，和各种癌症的患者中已经观察到了il-1的产生增加，因此将il-1涉及这些和相关疾病中(例如，见simsandsmith,naturerevimmunol,10:89-102(2010))。如本文所使用的，术语“治疗”指代本文所述的试剂施用到受试者，例如，患者，所述施用以有效地改善病症例如本文所述的病症相关的病症、症状，或参数的量、方式，和/或模式进行，或者阻止疾病的发作或发展，以统计学显著的程度或本领域技术人员可检测的程度。所述治疗可以是治疗、治愈、减轻、缓解、改变、补救、改善、缓和、改进或影响病症，病症的症状，或对病症的易感性。有效量、方式，或模式可能取决于受试者不同，并可以根据受试者调整。示例性的受试者包括人、灵长类动物，以及其它非人哺乳动物。本发明中起重要作用的制剂也可以预防性地给药来减少病症或其症状或迹象发生的风险。il-1相关病症可以是自身免疫疾病。il-1相关自身免疫疾病的例子包括类风湿性关节炎，强直性脊柱炎，白塞氏综合征，炎症性肠疾病(包括crohn氏病和溃疡性结肠炎)，哮喘，牛皮癣，i型糖尿病，某些形式的痤疮，以及本文鉴定的其它病症。本文所述的制剂可以施用到患有或有风险患这些il-1介导的自身免疫疾病的受试者。所述il-1介导的病症可以是炎症性疾病例如下文所描述的。本文所述的制剂可以施用到患有或由风险患il-1介导的炎症性疾病的受试者。本发明中起重要作用的制剂尤其适用于眼部病症，例如，其中需要直接施用嵌合细胞因子受体到眼睛，或局部施用到眼睛区域的眼部病症。示例性的il-1相关眼部病症包括综合症(例如，与综合症相关的角膜结膜炎)，干眼病，包括干燥性角膜结膜炎(相关或非相关)，干燥性角膜炎，干燥综合症，眼球干燥症，泪膜病，泪液产生减少，水液性泪液不足，与移植物抗宿主疾病相关的干眼病，以及脸板腺功能障碍。患有干眼病的受试者可能表现出眼睛的炎症，并可能经历刺痒、刺痛、发痒、烧灼或压力感，刺激、疼痛，以及红肿。干眼病可能与眼过度流泪和泪液产生不足相关。本发明中起重要作用的制剂可以施用到这些受试者来改善或防止一种或多种这些症状的发作或恶化。本发明中起重要作用的制剂也可以减轻受试者中的疼痛，例如，眼部疼痛，例如由于神经炎症的疼痛。本文所述的实施方案包括治疗患有il-1相关病症的动物的方法，例如，干眼病。干眼可能是严重的病症，例如，在犬科动物中。狗中与干眼相关病症的非限制性的例子包括先天性病症，感染(例如犬瘟热病毒)，药物诱导(例如，磺胺类抗生素)，以及第三眼睑的移除(“樱桃眼”)。干眼病也在某些狗品种中常见，例如可卡犬，西施犬，拉萨阿普索犬，斗牛犬，雪纳瑞，以及西高地白梗。其它可以治疗的动物的非限制性例子包括猫和马。本文中起重要作用的制剂也可以用于治疗其它影响眼睛表面，例如角膜的病症。这些病症包括角膜眼表炎症性疾病，角膜新生血管，角膜炎，包括外周溃疡性角膜炎以及微生物角膜炎。所述制剂可以用于治疗经历角膜伤口愈合的受试者(例如，具有角膜伤口的受试者)。所示制剂也可以施用到将要接受，正经历，或正从涉及眼睛的过程中恢复的受试者，例如角膜移植，人工角膜手术，板层移植，选择性内皮移植。见，例如dana(2007)transamophthalmolsoc105:330-43；dekaris等，(1999)curreyeres19(5):456-9；和dana等，(1997)transplantation63:1501-7。所述制剂可以用于治疗影响结膜的病症，包括结膜瘢痕性疾病和结膜炎，例如，过敏性结膜炎，例如，严重过敏性结膜炎。所述制剂可以用于治疗其它病症例如类天胞疮综合症和stevens-johnson综合症。本发明中起重要作用的制剂可以施用到受试者来调节眼睛中或周围的血管新生。见，例如dana(2007)transamophthalmolsoc105:330-43。本发明的制剂可以施用到具有影响眼睛的过敏发明的受试者，例如，经历严重过敏反应(过敏性)眼病的受试者，例如，过敏性角膜炎。例如，所示制剂可以局部施用。也见，例如keane-myers等，(1999)investophthalmolvissci,40(12):3041-6。本文中发挥重要作用的制剂可以施用到患有影响眼睛的自身免疫疾病的受试者。示例性的自身免疫眼部疾病包括交感性眼炎，vogt-koyanagiharada(vkh)综合症，视网膜脉络膜病变，眼瘢痕性类天疱疮，fuchs’异时性虹膜睫状体炎，以及各种形式的葡萄膜炎。所述制剂可以施用到受试者来治疗任意前述的病症。本发明中起重要作用的制剂可以施用到患有或有风险患糖尿病视网膜病变的受试者。见，例如demircan等，(2006)eye20:1366-1369和doganay等，(2006)eye,16:163-170。葡萄膜炎.葡萄膜炎包括急性和慢性形式，并包括虹膜、睫状体和脉络膜中的一个或多个的炎症。慢性形式可能与系统性自身免疫疾病相关，例如白塞氏综合征，强直性脊柱炎，幼年型类风湿性关节炎，reiter’s综合征，和炎症性肠病。在前葡萄膜炎中，炎症主要在虹膜(也称虹膜炎)。前虹膜炎可能影响患有系统性自身免疫疾病的受试者，但也影响不患有系统性自身免疫疾病的受试者。中间葡萄膜炎涉及前部玻璃体，视网膜周边和睫状体，通常伴有少量前或脉络膜视网膜炎症。睫状体平坦部炎(panplanitis)由于虹膜和脉络膜之间的平坦部的炎症导致。后葡萄膜炎涉及葡萄膜并主要涉及脉络膜，也称为脉络膜炎。后葡萄膜炎可能与系统性感染或自身免疫疾病相关。其可能持续数月甚至数年。本发明中起重要作用的制剂可以施用到受试者来治疗任意前述形式的葡萄膜炎。也见，例如tsai等，(2009)molvis15:1542-1552和trittibach等，(2008)genether.15(22):1478-88。在一些实施方案中，在本发明中起重要作用的制剂用于治疗患有或有风险患年龄相关性黄斑病变(amd)的受试者。所述制剂可以局部应用到眼睛，注射(例如，玻璃体内)或系统性提供。见，例如olson等，(2009)oculimmunolinflamm17(3):195-200。本文中所述的制剂可以通过任意模式施用来治疗眼部疾病。所述试剂可以通过肠胃外模式递送。或者或此外，所述制剂可以直接递送到眼睛或眼睛附近。例如，所示制剂可以局部或眼内施用，例如，如本文所述。用于眼部递送的制剂和方法本发明中起重要作用的眼用制剂可以递送用于局部施用，例如，作为液滴、软膏，或凝胶用于施用，或用于植入，例如植入到眼前房或结膜囊中。滴剂，例如液滴，可以使用眼滴管递送。凝胶和软膏也可以使用滴管施用。当配置用于眼部递送时，活性试剂(例如，嵌合细胞因子蛋白或受体结合试剂)可以以0.0001％至0.1％,0.001％至5％,例如0.005％至0.5％,0.05％至0.5％,0.01％至5％,0.1％至2％或1％至5％的浓度存在。在一些实施方案中，所述浓度为2％，例如，p05。在其它实施方案中，所述浓度为0.5％，例如p05。在一些实施方案中，所述受体结合试剂，例如p05配置为mg/ml的基础，例如，如上文所述。例如，所述活性试剂，是il-1抑制物，并且以1-50mg/ml,1-25mg/ml,1-20mg/ml,1-10mg/ml,2-8mg/ml,3-7mg/ml,或4-6mg/ml的浓度存在。在实施方案中，所述活性试剂以1mg/ml,2mg/ml,3mg/ml,4mg/ml,5mg/ml,8mg/ml,10mg/ml,15mg/ml,20mg/ml,25mg/ml,30mg/ml,40mg/ml,或50mg/ml的浓度存在。在实施方案中，所述活性试剂，例如il-1抑制物，以高达100mg/ml的浓度存在。典型地，所述眼部制剂直接应用到眼睛，包括角膜，眼睑上或输注到眼球和眼睑之间的空间(cul-de-sac)。所述眼科制剂可以经设计容易与泪液混合，并覆盖角膜和结膜的表面。使用施用技术，药物的主要部分通常沉积在下部穹窿。毛细管作用、扩散力，和眨眼反射驱动药物渗入到角膜前膜，并从这里穿透进入和穿过角膜。在本发明中起重要作用的眼部制剂还可以包括一种或多种其它试剂，例如，抗炎症类固醇，例如利美索龙(rimexolone)，氯替泼诺(loteprednol)，甲羟松(medrysone)和氢化可的松(hydrocortisone)，或非类固醇类抗炎药物。例如，所述类固醇可以以0.001％至1％的浓度存在。在一些实施方案中，没有类固醇。例如，受体结合试剂为制剂中仅有的活性试剂。所述制剂还可以包括一种或多种如本文所述的以下组分：表面活性剂，张度剂，缓冲剂，防腐剂，共溶剂和粘度构建剂。张度剂可以用于调整所述组合物的涨肚，例如，调整至天然泪液的张度。张度剂，特别是糖，也可以作为热稳定剂发挥功能。在实施方案中，可以添加氯化钾、氯化钠、氯化镁、氯化钙、葡萄糖和/或甘露糖醇来达到适合的张度，例如生理张度。张度剂可以以足够提供如本文所述适合的渗透压度的量添加。在实施方案中，添加张度剂来提供约150mosm每kg至450mosm每kg或250mosm每kg至350mosm每kg的渗透压度。在实施方案中，添加粘度剂来提供与眼睛等压的渗透压度。在实施方案中，添加张度剂，例如山梨糖醇，来提供270-330mosm每kg的渗透压度(osmolality)。所述制剂还可以包括适合眼部递送和如本文所述的缓冲剂。所述缓冲剂可以包括一种过多种缓冲组分例如柠檬酸盐、磷酸盐、硼酸盐、硼酸、琥珀酸盐、醋酸盐或其药学上可接受的盐(例如，磷酸钠、乙酸钠、柠檬酸钠、硼酸钠、琥珀酸钠，或乙酸钠)，来改变ph。所述缓冲组分尤其可用于储存条件下，例如，当所述制剂将经受长期储存时。例如，可以选择提供在ph5.5-6.5,ph5.5-6.0,ph6.0至7.5,或ph6.5至7.5范围内的目标ph的缓冲剂。典型地，所述缓冲剂是弱缓冲剂，其中所述缓冲组分的浓度低于20mm。在实施方案中，所述缓冲组分的浓度在5至20mm之间，例如5至15mm，例如5至10mm。所述包含治疗性蛋白的制剂可以包括水性或磷脂载体。尤其是用于治疗干眼病，所述制剂可以包括实际来提供短期缓解，例如润滑眼球并协助泪液形成的化合物。例如，磷脂载体(其包括一种或多种磷脂)可以用于提供短期缓解。作为人工泪液载体有用的人工泪液组分的例子包括商业产品例如tears(alconlabs,inc.,txusa)。例如，每ml所述制剂可以包括：1mg葡聚糖70和3mg羟丙甲纤维素，以及可选的防腐剂例如(聚季铵盐-1)0.001％(m/v)。磷脂载体制剂的例子包括在u.s.4,804,539,u.s.4,883,658,u.s.5,075,104,u.s.5,278,151,和u.s.5,578,586中公开的那些。所述制剂还可以包括其它作为润滑剂或润湿剂作用的化合物。这些化合物包括粘度剂例如：单体多元醇，例如甘油、丙二醇、乙二醇；聚合物多元醇，例如聚乙二醇，纤维素家族的各种聚合物：羟丙甲纤维素(“hpmc”)，羧甲基纤维素钠，羟丙基纤维素(“hpc”)，葡聚糖，例如葡聚糖70；水溶性蛋白，例如明胶；以及乙烯基聚合物，例如聚乙烯醇，聚乙烯吡咯烷酮，聚维酮和卡波姆，例如卡波姆934p；卡波姆941；卡波姆940，卡波姆974p。还另外的例子包括多糖，例如透明质酸和盐以及软骨素和盐，以及丙烯酸聚合物。在某些实施方案中，所述制剂具有1cp至400cp之间的粘度。所述制剂，例如媒介物制剂，可以包装用于单剂量或多剂量使用，例如在具有相连滴管的瓶中或作为一组单次使用的滴管。所述制剂可以包括一种或多种防腐剂，例如，来防止使用期间微生物和真菌污染，和/或一种或多种去垢剂，或表面活性剂，例如，来使蛋白溶解。示例性的防腐剂包括：氯化苯甲烃铵，氯丁醇，苯度氯铵溴化物，对羟基苯甲酸甲酯，对羟基苯甲酸丙酯，苯乙醇，依地酸二钠，山梨酸，和聚季铵盐-1，并且可以包括0.001w/v至1.0％w/v的浓度。典型地，如本文所述的含有治疗性蛋白的制剂为无菌但不含防腐剂。示例性的去垢剂/表面活性剂包括例如f-68，表面活性剂，例如tritonx-100，聚山梨醇酯，例如tween-20和tween-80，elugenttm，和聚乙氧基化蓖麻油，以及四丁酚醛，辛苯聚醇40和聚乙二醇40硬脂酸酯油。通常来说，可以包括浓度为从0.001％w/v至1.0％w/v的去垢剂和/或表面活性剂。在一些方面，所示制剂不含去垢剂。眼科包(ophthalmicpacks)可以用于给予眼科制剂与眼睛长时间的接触。饱含所述制剂的棉拭子插入结膜上穹或结膜下穹。所述制剂可以通过离子导入法的方式施用。该方法保持溶液在承载电极的洗眼杯中与角膜接触。离子导入系统也用于包括(iomedinc.,usa)；iideliverysystem1(eyegatepharma,usa)；和(aciontinc.,usa)。见amoandurtti,drugdiscoverytoday,13:143(2008)。另一种用于持续眼部递送的策略是使用凝胶化剂。这些材料可以以液体的形式递送，作为眼睛滴剂或眼内注射。输注后，聚合物经历相变并形成半固体或固体基质，长时间释放药物。可以通过温度，离子浓度，或ph的改变诱导相转变。对于眼部局部使用，凝胶形成溶液，例如(merckandco.inc.,usa)，其含有(从结冷胶纯化的阴离子杂多糖)；(alcon,inc.,switzerland)眼药水中含有聚(丙烯酸)；以及(insitevision,usa)已经临床测试。相对于传统的滴眼液，这些材料提高药物的保留，并引起药物吸收到眼睛中的增加和施用频率的减少。见amoandurtti,drugdiscoverytoday,13:135-143(2008)。在本发明中起重要作用的制剂可以通过注射递送，例如玻璃体内，眼周，或结膜下注射。所述制剂可以结膜下注射，促进穿过巩膜并通过简单的扩散进入眼睛中。所述制剂也可以结膜下注射并在眼睛更后部分的结膜囊(tenon'scapsule)下面，来将试剂递送到睫状体、脉络膜和视网膜。所述制剂也可以通过球后注射施用。在实施方案中，本文提供的试剂玻璃体内施用。在实施方案中，所述制剂不包含cmc。评价对于干眼和其它表面病症，可以使用一种或多种本领域已知的方法来评价受试者，例如，眼表疾病指数(osdi)，角膜和结膜染色，以及泪液分泌试验(schirmertest)。当使用osdi时，从基线的负变化表明视力相关功能和眼部炎症疾病的改善。对于角膜荧光素染色，使用生理盐水湿润的荧光素条或1％的荧光素钠溶液用于泪膜染色。典型地，接着使用具有黄色屏障过滤器(#12wratten)和钴蓝色照明的裂隙灯评价整个角膜。可以根据，例如nei量表，oxfordschema，或修改的oxfordschema来对染色分级。典型地，根据nei量表对染色分级，其为15分量表，其中角膜分为5个部分(中心圆形部分，和4个围绕中心角膜部分的象限，称为下，上，鼻侧和颞象限)，每一个根据点状染色评分为0-3，产生15的最大可能分数。结膜染色同样也是眼表面上皮疾病或上皮屏障断裂的测量。结膜染色在使用丽丝胺绿的裂隙灯下进行。生理盐水湿润的条或1％丽丝胺绿水溶液用于染泪膜，并在多于30秒但少于2分钟后评价睑间结膜染色。使用中等强度的白光，只对鼻和颞的睑间区域结膜染色进行分级，例如，使用oxfordschema。泪液分泌试验(schirmertest)在使用或不使用麻醉下进行，通过将窄的滤纸条(5x35mm的whatman#41滤纸条)放置到下cul-de-sac中。该测试在光线昏暗的房间中进行。患者轻柔的闭上他/她得眼睛直到五分钟后并将纸条移除。因为将它从眼睛移除后，泪液前沿将继续前进几毫米，因此在精确五分钟时使用圆珠笔标记泪液前沿。通过5分钟期间弄湿的纸条毫米长度来测量泪液的产生。对于不使用麻醉的泪液分泌试验10mm或更少或者对于使用麻醉的泪液分泌试验5mm或更少认为不正常。从基线的改变表明本文所述的眼部炎症性疾病的一种或多种症状的改善。干眼病模型.本文中制剂的功效可以在小鼠干眼病模型中评价。可以通过皮下注射莨菪碱和接着将小鼠放置在受控环境室中来诱导干眼。通过具体例子的方式，正常健康的6至10周雌性c57bl/6小鼠可以通过持续暴露于受控环境室中的干燥环境诱导患有干眼。所述室具有少于30％的低相对湿度(通常约19％)，高气流(15升/分钟)和常温(约22℃)。放置在室中的小鼠也使用莨菪碱处理来抑制泪液分泌。可以从novartis(summit,n.j.)获得缓释莨菪碱透皮贴剂。每48小时，贴剂的四分之一应用到小鼠的脱毛的尾中段。受控环境室和莨菪碱的组合在相对短的时间周期(约2-4天)产生严重干眼。可以如barbinoetal.(investophthalvissci,46:2766-2711(2005))中所述准备受控环境室，使得能够控制气流、湿度和温度。可以监控小鼠的干眼迹象，例如，通过进行a)棉线测试来测量泪液产生，其在干眼患者中通常减少；b)角膜荧光素染色，其为角膜表面损伤的标志；以及一般眼科检查。棉线测试：可以使用侵染有酚红的棉线测试测量泪液产生(zone-quick,lacrimedics,eastsound,wash.)。在放大荧光灯下，使用珠宝钳固定棉线，并放置于右眼结膜穹窿的lateralcantus中30或60秒。在显微镜下使用血球计数器量表读出泪液的mm距离。角膜荧光素染色：可以通过微量吸样管将1.0ml5％的荧光素应用到眼的下结膜囊中，来评价角膜荧光素染色。在荧光素滴注3分钟后，使用钴蓝灯的裂隙灯生物显微镜检查角膜。以设盲方式记录点状染色，对角膜表面分成的五个区域的每一个使用0-3的标准化nationaleyeinstitute(nei)分级系统。等同实施方案所有技术特征可以以这些特征任何可能的组合方式单独地组合。可以以其他特定形式实施本发明而不背离其精神或基本特征。因此，前述实施方案在所有方面认为是说明性的而不限制本文所述的发明。本文引用的所有参考文献的全部内容以其整体并入本文。以下的非限制性实施例进一步说明本文所述的发明的实施方案。实施例实施例1：治疗性蛋白例如，嵌合蛋白的例子编码具有表1(下方)中列出的氨基酸序列的核酸构建到含有t7启动子和氨苄青霉素(pet31系列)或卡那霉素抗性基因(pet28系列)的pet载体中(emdchemicals,gibbstown,nj,usa)，并表达。能够用于表达的编码序列的例子提供于表2中。表1编码以上蛋白的示例性核酸序列列于表2中。在一些实施方案中，所述核酸序列在下面列出的第一个核苷酸之前进一步包括atg。在一些实施方案中，所述核酸序列在下面列出的最后一个核苷酸之后进一步包括终止密码子(例如taa,tag,或tga)表2所述蛋白如下文所示可以包括一系列来自il-1β和il-1ra的残基。在p01,p02,p03,p04,和p05这些例子中，细胞因子结构域可以具有48-70％来自il-1β的残基和55-78％来自il-1ra的残基。因为一些氨基酸残基在这两种蛋白之间保守，与il-1β和il-1ra的百分比同一性的总和可以大于100％。表6治疗性蛋白的其它例子包括il-1ra(例如，阿那白滞素)，康纳单抗(canakinumab)，gevokizumab，rilanacept，或抗il-1r抗体(例如，由amgen生产的)。实施例2：嵌合蛋白的表达和纯化通过使用1mm异丙基β-d-1-硫代半乳糖苷在液体培养基中37℃诱导3小时，在大肠杆菌细胞bl21(des)菌株中表达含有六聚组氨酸标签(seqidno:23)的蛋白。细胞裂解于20-50mmtris,0.5mnacl,2.5mmedta,0.1％tritonx-100,ph8.0中。裂解液使用含有0.1％聚山梨醇酯80的1.25xpbs透析，接着通过0.8/0.2μm过滤器无菌过滤，然后进行固定离子亲和层析(imac)，使用histrap预填充柱(gehealthcare,piscatawaynj,usa)。使用50mm磷酸盐,500mmnacl,ph7.1平衡该柱，装载，接着使用相同缓冲液清洗。使用25mm咪唑预洗脱并使用溶于相同缓冲液的125mm咪唑洗脱。洗脱的蛋白使用1.25xpbs，0.1％聚山梨醇酯，ph7.4充分透析。所述蛋白装载于20mm磷酸钠，0.5mnacl,10mm咪唑，ph7.4缓冲液中。使用200mm咪唑，20mm磷酸钠，0.5mnaclph7.4缓冲液洗脱。洗脱的蛋白使用pbs,0.1％聚山梨醇酯80,ph7.4充分透析，使用amicon(10k)过滤器浓缩，并储存于4°或-80℃。通过离子交换色谱纯化没有六聚组氨酸标签(seqidno:23)的蛋白。通过离子交换色谱纯化p05蛋白。来自表达细胞的裂解物在低ph(约ph5.5)不存在盐(电导率约1ms/cm)应用于gigacapstm柱(tosohbiosciencellc,kingofprussia,pa,usa)。接着通过ph梯度(缓冲液a＝10mm醋酸,ph5.5；缓冲液b＝20mmtrisph8)洗脱所述柱。含有洗脱蛋白的5ml部分接着使用5mlh2o和5ml20mmtrisph8稀释并应用于captotmq树脂(gehealthcare,piscatawaynj,usa)并使用溶于20mmtrisph8.0的0mm至250mmnacl梯度洗脱。洗脱的蛋白使用1.25xpbs0.1％80或不含的1.25xpbs充分透析并储存。见图1。使用类似的方法纯化蛋白p03和p04。表达p05的细胞也在teknovatmterrificbroth中生长，所述培养基具有无动物成分的大豆蛋白胨(#t7660)，补充有10g/l葡萄糖，10mmmgso4，微量元素(1mg/mlteknovatm1000xtraceelements,#t1001)，以及sartorius2lbiostattma+中的抗生素，并在od35-40时使用1mmiptg诱导约6小时。细胞在37℃，30％溶液氧和ph7.0生长，并以200-800rpm搅动伴随2l/min氧气喷雾。当通过ph增加检测到葡萄糖耗尽时，使用9g葡萄糖/l/hr供给细胞。当ph降低时，供给减少为6g葡萄糖/l/hr(诱导后约2.5hrs)。收集细胞并在裂解缓冲液中裂解(0mmtris,10mmedta,0.1％triton,ph8.0；20mmtris,10mmedta,0.1％triton,ph7.0；50mmmops,10mmedta,0.1％triton,ph6.5；或50mmmops,10mmedta,0.1％triton,ph6.0)。将裂解液以ph5.3和3ms/cm(每ml柱树脂35mg产物)装载到xs阳离子交换媒介物(lifetechnologiescorp.,carlsbadcausa)。在示例性的方法中，使用含有100mmmops25mmnaclph7.0的缓冲液，通过使ph到7.0的步骤洗脱p05蛋白。弃去第一个洗脱峰，将第二个洗脱峰收集到合并物中并含有p05蛋白。相对于去丙氨酸(des-ala)种类，早期的合并物富集完整的p05蛋白。该洗脱材料接着流过阴离子交换树脂。收集流穿液，其含有完整p05蛋白。在另一个示例性的方法中，使用100mmmops20mmnaclph6.0清洗所述媒介物。使用含有100mmmops50-58mmnaclph6.0的缓冲液，通过使ph到6.0的步骤洗脱p05蛋白。将第一个洗脱峰从随后的峰分离并含有完整的p05蛋白。接着该洗脱材料流过阴离子交换树脂。收集流穿液，其含有完整的p05蛋白。实施例3：基于细胞的试验在基于细胞的试验中评价所述蛋白或含有蛋白的上清的il-1活性。使用hek-bluetmil-1β反应细胞监控il-1β活性(可从invivogeninc.,sandiegoca,usa获得)。这些细胞包括在ifn-β最小启动子控制下的分泌性胚胎碱性磷酸酶(seap)报告基因，所述启动子融合到五个nf-kb和五个ap-1结合位点。il-1β与il-1受体在细胞表面的结合引起nf-kb活化和seap的产生。可以使用，例如quanti-bluetm(invivogeninc.,sandiegoca,usa)和分光光度分析检测seap报告基因。从培养至70-80％覆盖的细胞制备hek-blueil-1β细胞悬液。重悬的细胞在新鲜的生长培养基(dmem,4.5g/l葡萄糖，2mml-谷氨酸，10％(v/v)热失活的胎牛血清(56℃，30分钟)，50u/ml青霉素,50mg/ml链霉素，100mg/ml)中调整至～330,000细胞/ml。将以下试剂添加到平底96孔细胞培养板的孔中：10μl20ng/ml的il-1β，10μl感兴趣的试剂，以及30μl细胞培养基，达到50μl的终体积。平行制备阳性和阴性对照样品。接着将hek-blueil-1β细胞悬液(～50,000个细胞)添加到每个孔，并将所述板在37℃，5％co2的组织培养箱中培养过夜。通常来说，最终il-1β浓度(在200μl终体积中)为0.1ng/ml。第二天(12-15小时后)评价il-1β的活性。定量前，根据说明书制备quanti-bluetm试剂。制备平底96孔试验板，其中向每个孔添加150μlquanti-bluetm溶液。50μl来自96孔组织培养板的孔的条件性培养基添加到试验板的每个孔。在37℃孵育所述板约15-20分钟。接着使用分光光度计在620-655nm评价seap水平。结果.如图2a所示，在该试验中，p06蛋白表现为il-1ri的激动剂，p07蛋白表现为部分激动剂，而p01蛋白未能激动。实际上，p01蛋白在il-1β存在时表现为拮抗剂。图2b示出了使用本文所述的hekbluetm细胞试验范围内的il-1β蛋白浓度，p01对il-1β活性的拮抗作用。拮抗作用随着p01的量增加而增加(x轴反应含有p01的上清的微升)。蛋白p01,p02,p03,p04,和p05每一个拮抗il-1β活性。例如，见图3a和图3b。p05的ic50小于约5ng/ml。在该试验中测试p05激动il-1ri的能力，甚至在测试的最高浓度1mg/ml也没有观察到任何可检测的激动活性。p01,p02,p03,p04,和p05也抑制mg-63细胞中il-1β诱导的il-6表达，mg-63是一种响应il-1β的人骨肉瘤细胞系。在鼠干眼病模型中，观察到六聚组氨酸标签的(seqidno:23)的p05具有生物学活性。关于未加标签的p05，也见实施例9。实施例4：嵌合蛋白的结合特性使用具有reichertsr7000dcdualchannelspr系统的表面等离振子共振评价蛋白与可溶性重组人il-1ri(对应il-1ri的胞外结构域)的结合特性。在具有0.005％tween20的磷酸盐缓冲盐水中评价结合。观察到il-1β具有8-9nm之间的kd和2-3×10-3s-1之间的解离常数(kd)，而在另一个实验中，kd为约2nm，结合常数为1.3-1.5×106m-1s-1，而解离常数(kd)为约2.9-3.0×10-3s-1。p01蛋白以与il-1β相似的结合动力学结合，但在结合实验的解离阶段期间不解离(约180秒)。因此，在相似条件下，p01蛋白以比il-1β更高的亲和力结合il-1ri。观察到il-1r的结合具有约0.33nm的kd，约2×105m-1s-1的结合常数(ka)，以及约6.6×10-5s-1的解离常数(kd)。观察到嵌合细胞因子结构域p01,p02,p03,p04,和p05具有范围从约12-1700pm的kd，范围从约3×104m-1s-1至3×106m-1s-1的结合常数(ka)，以及范围从约2×10-5至1×10-3s-1的解离常数(kd)。见下面的表3。表3蛋白ka(m-1s-1)kd(s-1)kd(pm)il-1β1.47×106m-1s-12.95×10-3s-12010il-1ra2.01×105m-1s-16.58×10-5s-1326p014.93×104m-1s-12.32×10-5s-1470p023.39×104m-1s-12.16×10-5s-1636p034.1×106m-1s-11.2×10-3s-1290p043.00×104m-1s-15.14×10-4s-11714p053.47×106m-1s-14.15×10-5s-112p064.8×106m-1s-11.7×10-3s-1410p071.58×104m-1s-11.46×10-3s-192553实施例5：嵌合蛋白的其它例子其它的示例性嵌合il-1家族蛋白也包括以下：下面的多肽是包括至少两个来自il-1α的片段和至少两个来自il-1ra片段的嵌合结构域。实施例6：制剂例子根据本发明的示例性制剂如下文描述：制剂具有以25g/l的浓度存在的p05蛋白；以0.25％w/v浓度存在的羧甲基纤维素；以0.1％w/v浓度存在的泊洛沙姆188；以5％w/v浓度存在的山梨糖醇；以10mm浓度存在的磷酸钠；以100mm浓度存在的精氨酸和/或谷氨酸。所述制剂ph为6.5。所述制剂在室温下两周测试稳定性，以及在2-8℃高达至少12个月测试储存稳定性，所述稳定性使用以下一种或多种方法测量：反相hplc(rp-hplc)；弱阳离子交换hplc(wcex-hplc)；分光光度法(a280)；以及视觉检测。实施例7：制剂例子和稳定性研究在i期临床研究中使用的p05制剂(也称为ebi-005)为水性制剂，其含有浓度为0.25％w/v的羧甲基纤维素钠；浓度为0.1％w/v的泊洛沙姆188；浓度为5％w/v的山梨糖醇；浓度为10mm的磷酸钠，以及浓度为5或20mg/ml的p05。所述制剂ph为约6.5。这些制剂使用以下测量测试稳定性：外观，ph，渗透压度，分光光度法含量(a280)，非还原性sds-page，还原性sds-page；尺寸排阻hplc(sehplc)；反相hplc(rp-hplc)；wcex-hplc；效力；以及容器的完整性(cit)。这些测试在(1)释出时(第0个月)；(2)在5±3℃储存1个月、2个月、3个月、4个月、5个月，和6个月后；(3)在25℃和60％相对湿度(室温实验)储存1个月或3个月后进行。这些测量的规格和5mg/ml和20mg/ml制剂代表性批次的结果示于下面的表14a-e中。这些结果表明，所述制剂极为稳定；所述制剂甚至在2-8℃储存6个月和在室温储存3个月后持续满足规格。表14a：ebi-005i期gmp药物产物(20mg/ml，批次x1)5±3℃表14b：ebi-005i期gmp药物产物(20mg/ml，批次x1)25℃/60％相对湿度表14c：ebi-005i期gmp药物产物(20mg/ml，批次x2)5±3℃表14d：ebi-005i期gmp药物产物(20mg/ml，批次x3)5±3℃表14e：ebi-005i期gmp药物产物(20mg/ml，批次x3)在25℃/60％相对湿度实施例8：熔解概况(profiles)蛋白p03、p04、p05、mil-1ra(甲硫氨酰il-1ra)，以及il-1β以0.5mg/ml制备于磷酸缓冲盐水(pbs)中，ph7.4。将所述蛋白与储液浓度1:500稀释的橙色染料(invitrogen,ca)混合，并进行差示荧光扫描荧光分析。见，例如heetal.(2010)jpharmsciences,991707-1720。随着温度从25℃以1℃每分钟的速率增加到95℃，使用agilentmx3005qpcr仪监控荧光测量。熔解温度(tm)值来自于荧光转变一阶导数的最大值。观察到蛋白p03、p04和p05解折叠的起始大于50℃并高至59℃，而tm大于59、60、62，和64℃。结果示于下面的表4和图5a和图5b中。表4p04具有比mil-1ra和il-1β高约四度的tm，并表现出比mil-1ra高约三度而比il-1β高约十度的解折叠起始。p03和p05具有比mil-1ra和il-1β高约九度的tm，并表现出比mil-1ra高约11度而比il-1β高约18度的解折叠起始。这些数据揭示了确定il-1抑制物熔解温度的方法，例如在本文所述的制剂中。实施例9：在动物模型中治疗干眼纯化的p05(没有六聚组氨酸标签(seqidno:23))制备于1.25xpbs中并在鼠干眼病模型中测试。在这一模型中，来自jacksonlaboratories的6至10周年龄的雌性c57bl/6小鼠(在≥30％相对湿度，水凝胶食物补充剂，enviro-dritm环境富集的动物收容室中驯化1-2周)在第0天预筛选荧光素染色。对于荧光素染色，新鲜制备的以10mg/ml稀释于wfih2o的荧光素以0.4μl施用到每只眼睛。在施用后约8-13分钟，使用olympus荧光解剖显微镜对眼睛评分。使用标准化的nationaleyeinstitute(nei)分级系统0-3，记录角膜表面分成的五个区域每一个中的点状染色(分数范围0-15/眼睛)。使用教学桥(teachingbridge)，两位设盲的计分员同时评价小鼠，给出每只眼睛单个的集体评分。在第1天，将每只眼睛分数≤7(最大分数15)的小鼠置于干眼室(20％±2％湿度和恒定空气流～21l/min/笼)，并在实验过程期间保持在该室中(除检查外)。在第3天，再次对小鼠评分，并将小鼠以8至10只小鼠/组随机分配到处理组。随机分配小鼠使得每个笼子中的4至5只小鼠具有大约相同的均值疾病评分。从第3天开始和在随机分配后，小鼠以3μl/眼睛每天两次局部施用滴眼剂中的p05或媒介物(1.25×pbs)。在第7、9和11天检查小鼠并对如上所述的角膜荧光素染色评分。在实验过程期间，评分员对治疗组是不知情的。图6a柱状图是第0、3、7、9和11天来自两个相同实验的小鼠的均值角膜染色评分±sem，所述小鼠根据以下每天两次(bid)处理：无处理，媒介物(1.25×pbs)，以及10mg/ml(1％)p05。在实验的第7、9和11天，10mg/mlp05显著降低了角膜染色。在低至0.1mg/mlp05的剂量也观察到了如通过角膜染色评价的效力。在大肠杆菌中产生的重组il-1ra在动物模型中也中度降低了角膜染色。如图6b所示，基于与溶于相同媒介物的10mg/ml鼠血清白蛋白的比较，10mg/mlp05的效果是特异性的。相对于媒介物，10mg/ml鼠血清白蛋白(msa)没有看到效果，而10mg/mlp05的效果相对于10mg/ml鼠血清白蛋白统计上显著。如图6c所示，10mg/mlp05与溶于眼科乳剂的0.05％环孢霉素比较。在每天两次给药约一周后，p05降低了角膜染色，而0.05％环孢霉素眼科乳剂没有观察到效果。这些实验揭示了测试本文所述制剂中的il-1抑制物效力的方法。实施例10：搅动研究为了鉴定适合使用的表面活性剂，1mg/ml和50mg/ml的p05制备于以下一种溶液中(i)pbs,0.5％w/vcmc,ph7.4，或(ii)含有各种表面活性剂的10mm柠檬酸钠，ph6.0。通过在室温涡流振荡该蛋白四个小时进行搅动。通过微流体成像(mgi)，sec，a280和目测分析样品。发现与其它表面活性剂(包括，例如聚山梨醇酯20，聚山梨醇酯80，或无表面活性剂)相比，0.1％w/v泊洛沙姆188的使用保护蛋白免受沉淀(使用目测评估)和搅拌期间在显微镜下可见的显著颗粒积累。例如，0.1％w/v泊洛沙姆减少了≥10微米粒子和≥25微米粒子的粒子计数。该结果证明，泊洛沙姆188是适合用于配制多肽例如p05的表面活性剂。此外，它证明了少至0.1％w/v的表面活性剂可以有效限制甚至减少沉淀的量。这些实验也揭示了确定本文所述的制剂的适用性的方法。实施例11：制剂的制备制备了p05制剂。简单的说，以含有溶于1×pbs，ph6.5的52.8mg/mlp05的冷冻液体的形式提供p05。所述多肽使用3500分子量截留透析盒相对含有10mm柠檬酸钠和5％w/v山梨糖醇ph6.0的缓冲液以约10000倍交换在2-8℃透析24小时。透析后，通过测量a280/a320确定浓度。透析后，使用如下不同浓度的p05制备制剂，100x泊洛沙姆188表面活性剂以1x浓度添加到透析的p05储液。通过添加制剂缓冲液(10mm柠檬酸钠，5％w/v山梨糖醇，ph6.0)将蛋白浓度调整为约1mg/ml,5mg/ml和20mg/ml。制剂组分的终浓度为约10mm柠檬酸钠，5％w/v山梨糖醇，以及0.1％w/v泊洛沙姆188。接着混合样品并在无菌条件下无菌过滤，接着在无菌条件下填充到(以250μl)2cc玻璃小瓶中。制备后，将样品置于稳定性研究来确认在上述条件下制备的制剂的稳定性。这揭示了制备il-1抑制物，例如il-1β/il-1ra嵌合蛋白制剂的方法。实施例12.溶于磷酸盐缓冲液相对柠檬酸盐缓冲液的p05的稳定性动态光散射或dls(也称为准弹性光散射或qels)通过将激光聚焦到样品上，在孔板中测量分析物(例如p05)的扩散，并监控通过快光子计数器测量的散射光的波动频率。称为相关函数的一种数学技术用来量化波动的平率以确定扩散系数。该动态系数用于通过通过stokes-einstein方程获得水化半径。p05的半径测量作为dls板读数器(wyattdynaprotm,wyatttechnologies,santabarbara,ca)中增加的温度的函数。获取时间为5秒并对于每次测量进行5次扫描。缓变率为0.17℃/min。随着蛋白解折叠，该半径增加。半径增加的温度称为ton(解折叠开始的温度)。对溶于两种制剂的20mg/mlp05进行了该实验：(i)10mm磷酸盐，5％w/v山梨糖醇,0.1％w/v泊洛沙姆188,ph6.5，和(ii)10mm柠檬酸钠，5％w/v山梨糖醇,0.1％w/v泊洛沙姆188，ph6.0。该结果，如图4a和图4b所示，显示相对于磷酸盐缓冲液，柠檬酸盐缓冲液中的ton发生于高得多的温度。溶于柠檬酸盐缓冲液的p05的ton为48.2℃，而溶于磷酸盐缓冲液的p05为35.2℃。ton大的差异是令人惊讶的，表明与磷酸盐缓冲液比较，溶于柠檬酸盐缓冲液的p05稳定得多。因此，在一些实施方案中，包含il-1抑制物，例如p05的制剂，含有柠檬酸盐缓冲液。实施例13：稳定性研究为了测试实施例11中所述的制剂的稳定性，制备了具有不同浓度p05的制剂(如实施例11中所述，见上文)并分析基线测量。配制多肽的小瓶在25℃孵育0天，3天，1周，2周，和4周，以及在40℃孵育3天，1周，和两周。每个时间点至少准备2个小瓶。孵育后，使用尺寸排阻hplc(se-hplc)，弱阳离子交换hplc(wcx-hplc)，反相hplc(rp-hplc)，浓度(a280-a320)，视觉外观，使用照片进行的正式检查分析所述样品。在t＝0和t＝4周分析ph。仅在t＝0分析渗透压度。25℃和40℃两者都在2周和4周评价视觉外观和浓度。2周后，所有制剂都澄清无色，没有可见颗粒。所述25℃在4周后澄清无色。这些浓度研究的结果示于表5中。表5在4周确定了25℃样品的ph。在所有情况下，t＝0时的ph为6.00-6.01而4周时的ph为6.03-6.07。这些数据证明了一系列浓度的制剂在25℃为至少4周，并在40℃为至少2周的制剂稳定性。sec-hplc使用尺寸排阻hplc方法评估纯度，所述方法使用吸光度和荧光检测。简单的说，使用了sepaxsec-1507.8mmx20cm(pn213150-7820)柱。流动相为1xpbs。使用agilent1100hplc系统以等度模式使用1ml/分钟的流速，总共运行时间18分钟，在环境温度下进行评价。吸光度检测在280nm，荧光检测在激发波长280nm和发射检测波长350nm。对于采用1和5mg/ml样品的荧光检测实验，装载10μg多肽制剂而对于20mg/ml样品的吸光度检测，装载50μg多肽制剂。储存2周后，1mg/ml和5mg/mlp05制剂的参考标准具有99.1％的检验纯度而1mg/ml和5mg/mlp05制剂样品的纯度分别为99.1％-99.2％，不论它们储存在25℃或40℃。对于20mg/ml样品，参考具有99.2％的纯度。储存两周后，20mg/ml样品具有99.2％的纯度，不论它们储存在25℃或40℃。在25℃储存4周后，20mg/mlp05制剂具有99.2％的纯度。wcex-hplc在另外的研究中，弱阳离子交换hplc方法用于评估制剂。在该方法中，使用dionexwcx-10,4x250mm(pn054993)柱。流动相a为10mm乙酸na，ph5.5而流动相b为流动相a+0.25mnacl。使用agilent1100hplc系统以1.2ml/分钟的流速和总运行时间35分钟在环境温度下进行试验。通过检验214nm和280nm进行检测。样品量为25μg/注射。表6中示出了在25℃储存2周后的结果，在40℃储存2周后的结果示于表7中，而在25℃储存4周后的结果示于表8中。弱阳离子交换是通过监控电荷异质性评估纯度的另一种方法。对p05制剂样品的分析基于电荷解析了相对于杂质来自于几种产物的主要产物峰。典型的p05制剂由约>85％的主峰和几个前峰和后峰组成。前峰1为未知，前峰2是一种脱酰胺的p05形式，前峰3是一种具有n-末端蛋氨酸的p05形式。后峰1是一种缺少n-末端丙氨酸的p05形式，后峰-2是一种缺少n-末端丙氨酸和脯氨酸的p05形式，后峰3为未知。表6：25℃储存/2周form#formulation％pre-peak1％pre-peak2％pre-peak3％mainpeak％post-peak1％post-peak2％post-peak3totalarea-ref.std.0.01.01.391.55.50.30.31200c101c6.0sp0.01.41.390.36.10.40.41166c205c6.0sp0.01.11.191.55.60.40.41176c320c6.0sp0.01.51.390.85.40.50.51255表7：40℃储存/2周form#formulation％pre-peak1％pre-peak2％pre-peak3％mainpeak％post-peak1％post-peak2％post-peak3totalarea-ref.std.0.01.11.491.45.50.40.21220c101c6.0sp0.01.91.389.46.50.60.31151c205c6.0sp0.01.81.489.36.50.70.31181c320c6.0sp0.02.01.489.56.10.70.31223表8：25℃储存/4周form#formulation％pre-peak1％pre-peak2％pre-peak3％mainpeak％post-peak1％post-peak2％post-peak3totalarea-ref.std.0.01.11.491.45.50.40.21220c101c6.0sp0.01.91.389.46.50.60.31151c205c6.0sp0.01.81.489.36.50.70.31181c320c6.0sp0.02.01.489.56.10.70.31223在25℃储存2周后，如使用本方法确定的，对于5mg/ml制剂(c2)，主峰的百分比保持了与参考类似，约91％纯度，而c3(20mg/ml)和c1(1mg/ml)的纯度有轻微减少。对于所有样品在40℃储存后，观察到主峰的减少和前峰2，后峰1，和后峰2的增加。储存四周后，观察到主峰纯度的减少和前峰2和后峰1的增加。反相hplc(rp-hplc)也使用rp-hplc评估了制剂。rp-hplc试验是通过基于疏水性监控产物异质性评估纯度的另一种方法。该方法能够将天然分子从含有氧化的蛋氨酸的产物相关杂质分离。前峰2和3为氧化形式的p05，而后峰1和2为该分子的乙酰化形式。在本方法中，使用了watersc4(4.6x150mm；3.5μm；pn186000283)，流动相a为溶于水的0.05％三氟乙酸(tfa)，而流动相b为95％乙腈(acn)中的0.05％tfa。使用agilent1200hplc系统，流速1ml/分钟，总运行时间35分钟和柱温度55℃运行该试验。在280nm处进行检测。对于1mg/ml和5mg/ml样品，装载的样品量为25μg和装载的样品量为50μg。对于1mg/ml和5mg/ml制剂，在25℃储存2周后结果的总结示于表9中，在40℃储存2周后结果的总结示于表9中，而在25℃储存4周后结果的总结示于表11中。20mg/ml制剂在25℃和40℃储存两周后的数据分别示于表12和13中。表9：25℃储存2周form.#formulation％pre-peak1％pre-peak2％pre-peak3％pre-peak4％mainpeak％post-peak1％post-peak2totalareat＝2weekref.std.0.00.21.30.296.81.10.41650c101c6.0sp0.00.34.50.493.11.30.51602c205c6.0sp0.00.22.60.395.11.30.41602表10：40℃储存2周，1mg/ml和5mg/ml制剂form.#formulation％pre-peak1％pre-peak2％pre-peak3％pre-peak4％mainpeak％post-peak1％post-peak2totalareat＝2weekref.std.0.00.21.30.296.81.10.41650c101c6.0sp0.00.34.50.493.11.30.51602c205c6.0sp0.00.22.60.395.11.30.41602表11：25℃储存4周，1mg/ml和5mg/ml制剂form.#formulation％pre-peak1％pre-peak2％pre-peak3％pre-peak4％mainpeak％post-peak1％post-peak2totalareat＝4weeksref.std.0.00.21.30.396.81.00.41648c101c6.0sp0.00.35.50.691.91.40.41583c205c6.0sp0.00.23.00.694.51.40.31598表12：25℃储存2周，20mg/ml制剂form.#formulation％pre-peak1％pre-peak2％pre-peak3％pre-peak4％mainpeak％post-peak1％post-peak2totalareat＝2weekref.std.0.00.21.30.296.81.10.43297c320c6.0sp0.00.22.00.396.11.10.43340表13：40℃储存2周，20mg/ml制剂form.#formulation％pre-peak1％pre-peak2％pre-peak3％pre-peak4％mainpeak％post-peak1％post-peak2totalareat＝2weekref.std.0.00.21.30.296.81.10.43297c320c6.0sp0.00.23.30.794.11.40.43270在25℃或40℃储存两周后，对于1mg/ml和5mg/ml制剂观察到了主峰纯度的减少并观察到了前峰3(氧化的p05)的增加。这一效果对于1mg/ml样品(c1)在高温度下最为显著。在25℃储存四周后，对于这些试剂观察到了主峰纯度的减少并观察到了前峰3(氧化的p05)的增加，并且该效果对于1mg/ml样品最为显著。有趣的是，在25℃储存两周后，20mg/ml制剂具有与t＝0相似的主峰百分比(96.1％纯度)。对于该样品，在40℃储存两周后观察到了主峰百分比的减少和前峰3(氧化的p05)的增加。在25℃储存四周后，20mg/ml制剂表现出主峰纯度的轻微减少和前峰(氧化的p05)的增加。这些分析数据证明了分析嵌合细胞因子制剂的稳定性的方法尤其是证明了含有p05多肽的嵌合细胞因子制剂令人惊讶的稳定性。相应的，在一些实施方案中，本发明涉及浓度为至少1mg/ml,至少5mg/ml,或至少20mg/ml，储存了至少2周，例如，在25℃至少4周，例如40℃而具有纯度为至少92％，例如，至少94％，或至少96％的制剂。实施例14：在吹填密封容器中的制剂的稳定性将制剂包装到吹填密封(bfs)容器中的过程涉及依次压制，模塑，无菌灌装，和密封。见，例如liu,w.等，2011biopharminternational,24(7):22-29。在压制步骤中，塑料颗粒在高于160℃的温度熔化。随后，塑料模塑到所需的容器形状中，填充制剂溶液，并紧密密封。因为用于形成该容器的塑料材料在一定程度上透气，因此在长期储存期间，所述制剂的稳定性可能损失(例如，由于水从所述容器蒸发和/或蛋白氧化)。将这些容器密封在铝箔袋或其它适合的包装中可以保护制剂免受光诱导的降解。在这些铝箔袋中使用惰性气体，例如氮气或氩气密封容器可以保护免受氧化。相应的，进行了实验来研究将p05包装到吹填塑封(bfs)容器中以及随后的储存，具有或不具有使用惰性气体覆盖的铝箔袋的效果。对于含有活性药物，p05的制剂进行了测试。将块状药物物质配置为水溶液，其含有10mm柠檬酸钠，5％w/v山梨糖醇l,0.1％w/v泊洛沙姆188,ph6.0用于吹填处理。p05的目标浓度为5.0mg/ml。将制剂冷却至约2℃-8℃并填充到容器中。填充了约1000个容器，而容器的目标填充体积为0.32ml。一部分容器装入铝箔包中使用氮气覆盖。在包装到bfs容器中后，进行了初始表征，而进一步的稳定性评价在储存于两个温度(2℃至8℃和25℃)后进行，装袋或不装袋。初始表征分析包括，a280浓度，sds-page,sec-hplc,wcex-hplc,rp-hplc，渗透压度和通过光遮蔽的颗粒分析。通过sec-hplc,wcex-hplc和rp-hplc每月监控p05的稳定性，在第4个月和第5个月进行a280评价，和在第5个月进行ph和渗透压度。吹填处理后p05制剂的起始表征表现出稳定性的保留吹填处理后对p05的起始分析证明了尽管吹填处理，该蛋白保留了其化学和物理稳定性。将未暴露于bfs处理的p05制剂(含有浓度为50mg/ml的p05,0.01％w/v泊洛沙姆188,5％w/v山梨糖醇,10mm磷酸钠,ph6.5的水性制剂)与经吹填处理的p05制剂(含有浓度为5mg/ml的p05,0.01％w/v泊洛沙姆188；5％w/v山梨糖醇；10mm柠檬酸钠,ph6.0的水性制剂)比较。这些制剂使用来自相同生产批次的p05制备。结果表明在吹填包装后的时间零点，吹填的制剂甚至在暴露于潜在有害的吹填处理后保留了极好的稳定性，如通过使用尺寸排阻色谱，rp-hplc,wcex,和sds-page分析所表明的(见表15)。表15：稳定性比较*测量是从来自于填充/成品的后一半(随机抽出)的三个小瓶取平均数除了上述试验外，对包装于bfs容器中的制剂进行了颗粒分析，使用根据方法usp<789>的光遮蔽。显微镜下可见颗粒计数在usp局部眼的规格内(具有≥10μm的颗粒少于或等于50个颗粒每ml和≥25μm的颗粒少于或等于5个颗粒每ml)，与bfs容器中没有可见沉淀一致(数据未示出)。这些数据证明p05在吹填处理后是即时物理稳定(根据sec-hplc，光遮蔽，和可见观察的测量)和化学稳定的(根据wcex-hplc,rp-hplc,sds-page的测量)。作为起始表征的一部分，测量了渗透压度和a280浓度。平均渗透压度测量为317mosm，而平均a280浓度为5.0mg/ml。储存于吹填容器中的p05制剂保留了稳定性将bfs容器中的p05制剂在25℃，60％相对湿度或在2至8℃储存于孵育器中。每隔一个月，通过sec,rp-hplc,和wcex-hplc分析样品。在第4和5个月，通过a280测量浓度。在第5个月，也测量了渗透压度(以评估蒸发)，ph和a280浓度。表16：储存于bfs容器中的p05制剂的sec-hplc稳定性结果(％主峰)sec-hplc结果(见表16)表明储存于bfs容器中的p05制剂在室温或2至8℃至少五个月不形成聚集。氮气冲洗后装袋的小瓶不影响产物在任一温度下的稳定性。p05制剂的wcex-hplc稳定性结果示于表17和表18中(分别为％主峰和％脱酰胺峰)。表17：储存于bfs容器中的p05制剂的wcex-hplc稳定性结果(％主峰)表18：储存于bfs容器中的p05制剂的wcex-hplc稳定性结果(％脱酰胺峰)wcex-hplc结果表明，吹填塑封容器中的p05制剂在室温保持稳定高达五个月。p05在2至8℃也保持了稳定性至少5个月。在氮气冲洗后，容器的装袋不影响产物在任一温度的稳定性。p05工程化运行药物产品的的rp-hplc稳定性结果示于表19和表20中(分别为％主峰和％氧化蛋白峰)。表19：储存于bfs容器中的p05制剂的rp-hplc稳定性结果(％主峰)表20：储存于bfs容器中的p05制剂的rp-hplc稳定性结果(％氧化峰)rp-hplc结果表明储存于bfs容器中的p05制剂在室温和2至8℃稳定至少五个月。另外，渗透压度和ph测量表明，对于25℃的样品，渗透压度或ph不随着时间发生显著变化(见表)。这表明极少至没有蒸发发生，而溶液的ph保持稳定。如使用a280测量的蛋白浓度也与之前的测量一致(见表21)。总体来说，ebi-005在长期储存于吹塑填充密封小瓶中在2至8℃和环境温度(rt)展现出极好的物理稳定性。表21：在bfs容器中五个月储存后，p05制剂的渗透压度，ph和浓度*使用milli-qtm水空白实施例15：含有蛋氨酸的制剂在一些实施例中，本发明涉及如本文所述的含有蛋氨酸的制剂。使用两种不同的压力条件，研究了对溶于10mm柠檬酸钠,5％w/v山梨糖醇,0.1％w/v泊洛沙姆188,ph6.0的p05制剂抗氧化剂的使用：温度(储存于40℃)和使用过氧化氢的强制氧化。过氧化氢是一种压力剂，其通过自由基导致氧化，因此用于模仿可能在储存于经γ辐射的多剂量容器中储存后发生的氧化效果(见下文)。当长时间储存于高温时，p05展现出增加的氧化水平。对于在40℃储存3周的p05制剂，检测了添加至制剂的10mm蛋氨酸或7mm硫酸氢盐的使用。另外，也使用强制氧化检测了相同的制剂，其中将10％v/v的0.02％过氧化氢添加至该样品。通过rp-hplc测试了所述样品以评估氧化的水平。表22提供了数据总结。表22：对有和没有抗氧化剂的压力样品的rp-hplc分析这些数据证明蛋氨酸，而不是硫酸氢盐，减少了氧化的蛋白的水平，尤其是对于储存于高温或使用过氧化氢添加的低浓度蛋白。研究了两种容器密闭系统(吹填和多剂量)以及对于多剂量小瓶抗氧化剂在制剂中的使用对p05氧化水平的效果。多剂量容器(小瓶)通过γ辐射杀菌。γ辐可以导致该容器中自由基的生成，其可能对蛋白的化学稳定性有害，特别是通过氧化分子上的蛋氨酸残基。因此，本实验研究向溶于10mm柠檬酸钠,5％w/v山梨糖醇,0.1％w/v泊洛沙姆188,ph6.0的p05制剂添加蛋氨酸是否减轻p05的氧化。10mm蛋氨酸用于多剂量或吹填小瓶中的1mg/mlp05。所述蛋白储存于2-8℃或环境温度长达4周。通过rp-hplc分析蛋白以确定氧化的p05的水平。表23示出了结果的总结。表23：储存于吹填或多剂量容器中±蛋氨酸的p05的rp-hplc分析nd*：由于样品污染未确定向制剂添加蛋氨酸较少了多剂量容器中的氧化。例如。在储存于多剂量容器中在环境温度储存4周后，没有蛋氨酸的制剂中的％氧化峰为7.5％耳有蛋氨酸的制剂中的％氧化峰仅为4.7％。实施例16：ebi-005制剂和媒介物制剂的治疗效果完成了多中心，双盲，随机，安慰剂对照的临床试验，以评价ebi-005水性制剂在具有中等至严重的干眼病的患者中的安全性和生物学活性。本研究中采用的制剂含有浓度为20mg/ml或5mg/ml的ebi-005(本文中也称为p05)(见下文)，浓度为0.25％w/v的羧甲基纤维素钠；浓度为0.1％w/v的泊洛沙姆188，浓度为5％w/v的山梨糖醇；以及浓度为10mm的磷酸钠。本试验在美国八个中心的74位患者中进行。本试验在自然环境中进行(未使用对照不利环境室)。患者在首次就诊时针对资格标准进行筛选。具有参加资格的患者接受媒介物的局部施用，每只眼睛每天三次施用一周。在一周的磨合期结束时，再次对患者重新评估资格标准。在这些附加标准下具有资格的那些患者随机分配到三个治疗组的一个。随机分配时取得的角膜荧光素染色(cfs)分数，眼表疾病指数(osdi)分数和其它测量本文称为基线测量。合格的受试者年龄至少18岁，患有中等至严重的干眼病。附加资格标准包括以下：(i)筛选时，osdi分数大于或等于23并小于90；(ii)随机分配时osdi分数大于或等于19；(iii)筛选时在nei量表上cfs分数大于或等于六而小于15；和(iv)随机分配时cfs分数大于或等于五。随机分配到治疗组的患者从随机分配开始，双眼治疗每天三次持续六周。对于本试验中三个组的治疗如下：(i)在第一组中，22位患者每只眼睛每天三次接受ebi-005制剂的局部施用，所述制剂含有浓度为20mg/ml的ebi-005，(ii)在第二组中，22位患者每只眼睛每天三次接受ebi制剂的局部使用，所述制剂含有浓度为5mg/ml的ebi-005，(iii)在第三组中，30位患者每只眼睛每天三次接受媒介物制剂的局部使用(媒介物制剂为含有与ebi制剂相同组分的水性制剂，除了所述媒介物制剂中没有ebi-005)。在筛选时；在随机分配时；在随机分配后第二，四六周的评价访问时；以及在治疗完成后一周后续访问时评估患者。本临床试验的时间轴和随机分配到ebi-005治疗和媒介物对照组的患者的数量描述于图7中。基于询问患者关于疼痛或眼痛的osdi的12个问题的一个问题评估疼痛。结果示于图8至10中。这些结果表明干眼症的征兆和症状，如使用osdi(图8)，疼痛(图9)，和角膜荧光素染色(cfs)分数(图10)所测量的，在使用ebi-005制剂治疗期间改善。出人意料的，使用仅媒介物的制剂治疗也导致osdi分数，疼痛，和cfs分数的显著改善。实施例17：在患有中度至重度干眼病(ded)的患者中对ebi-005(5mg/ml)外用滴眼液和媒介物的双盲，随机，对照研究进行了确定媒介物制剂(10mm柠檬酸钠,ph6.0,5％山梨糖醇(w/v),和0.1％泊洛沙姆188(w/v))和治疗制剂(含有5mg/mlp05的10mm柠檬酸钠,ph6.0,5％山梨糖醇(w/v),和0.1％泊洛沙姆188(w/v))的疗效的研究，所述制剂作为外用滴眼液给药到患有中度至重度干眼病(ded)的受试者的每只眼睛，每天三次持续12周。受试者评估ded，且纳入标准包括两只眼睛都具有干眼病(ded)史，其由以前的临床诊断支持，或在筛选前至少6个月具有主诉的自我报告史(访问1)，在同一只眼睛或两只眼睛中患有进行中的ded，如通过以下标准在访问1时确定：≥23而≤75的osdi分数，对osdi的疼痛或眼痛问题评分且总角膜荧光素染色分数≥6(nei量表)而<15。筛选的受试者接着使用遮蔽了的媒介物制剂经历五至八天的治疗，接着再筛选(访问2)以确定他们在此访问时符合随机分配标准。所述随机分配标准包括具有总osdi分数≥19而<50，在随访1中符合条件的相同眼睛中具有总角膜荧光素染色分数≥5(nei量表)，且至少一只眼睛中csf<15，并且遵守所述五至八天遮蔽的媒介物制剂期。遵守定义为施用剂量的至少80％。接着随机分别受试者以使用媒介物或治疗制剂治疗，并提供足够的媒介物制剂或治疗制剂以施用一滴到每只眼睛中，每天3次直到访问4(第3周/注意周编号在受试者随机分配并指定接受媒介物或治疗制剂后开始)。其它药物在每次复诊后分发直到访问6(第9周)。在访问3(第1周)，访问4(第3周)，访问5(第6周)，访问6(第9周)，访问7(第12周)和访问8(第15周)评价受试者。研究药物的最后给药和最终治疗访问完成于访问7(第12周)。最终评价在三周后的访问8时(后续，第15周)。制剂作为低密度聚乙烯(ldpe)吹填单元中的2至8℃溶液提供。如果需要，可以向受试者提供refresh泪液在最终评价前的21天期间使用。在本研究的其它部分期间，受试者不使用任何此类人工泪液。其它研究信息可以在clinicaltrials.gov,trialno.nct01998802获得。研究期间对受试者的评价包括总角膜荧光素染色(一种征兆)，osdi问卷的疼痛或眼痛问题(一种症状)，总osdi和osdi的个体问题和领域，下部和中部区域cfs，全球评估(研究者和受试者)，干眼症个体症状的受试者评价严重度，以及无麻醉的schirmer测试。对于那些分配到媒介物制剂组的受试者，与他们的初始评价相比，在第一周结束时(例如，在三至八天遮蔽的媒介物磨合后)和/或后续研究访问期间，至少一项这些标准的改善进一步证明了媒介物制剂的疗效。对于那些分配到治疗制剂组的受试者，与他们的初始评价或三至八天遮蔽的媒介物磨合后的评价相比，在后续研究随访期间至少一种这些标准的改善进一步证明了治疗制剂的疗效，例如，包含p05的制剂。其它实施方案包括在实施例的范围内。序列表<110>十一生物治疗股份有限公司<120>用于眼部递送的嵌合细胞因子制剂<130>d2046-7050wo<140><141><150>61/779,974<151>2013-03-13<160>23<170>patentinversion3.5<210>1<211>153<212>prt<213>人工序列<220><221>来源<223>/注解="人工序列的描述:合成多肽"<400>1alaprovalargserleualapheargiletrpaspvalasnglnlys151015thrphetyrleuargasnasnglnleuvalalaglytyrleuglngly202530proasnvalasnleugluglulysileaspvalserphevalglngly354045glugluserasnasplysileprovalalaleuglyilehisglygly505560lysmetcysleusercysvallysserglyaspgluthrargleugln65707580leuglualavalaspprolysasntyrprolyslyslysmetasplys859095argphealapheileargseraspserglyprothrthrserpheglu100105110seralaalacysproglytrppheleucysthralametglualaasp115120125glnprovalserleuthrasnmetproaspgluglyvalmetvalthr130135140lysphetyrmetglnphevalserser145150<210>2<211>153<212>prt<213>人工序列<220><221>来源<223>/注解="人工序列的描述:合成多肽"<400>2alaprovalargserleualapheargiletrpaspvalasnglnlys151015thrphetyrleuargasnasnglnleuvalalaglytyrleuglngly202530proasnvalasnleugluglulysileaspvalserphevalglngly354045glugluserasnasplysileprovalalaleuglyilehisglygly505560lysmetcysleusercysvallysserglyaspgluthrargleugln65707580leuglualavalaspprolysasntyrprolyslyslysmetglulys859095argphevalpheasnlysilegluileasnasnlysleuserpheglu100105110seralaalacysproglytrppheleucysthralametglualaasp115120125glnprovalserleuthrasnmetproaspgluglyvalmetvalthr130135140lysphetyrmetglnphevalserser145150<210>3<211>153<212>prt<213>人工序列<220><221>来源<223>/注解="人工序列的描述:合成多肽"<400>3alaprovalargserleualapheargiletrpaspvalasnglnlys151015thrphetyrleuargasnasnglnleuvalalaglytyrleuglngly202530proasnvalasnleugluglulysphesermetserphevalglngly354045glugluserasnasplysileprovalalaleuglyleulysglulys505560asnleutyrleusercysvalleulysaspasplysprothrleugln65707580leugluservalaspprolysasntyrprolyslyslysmetglulys859095argphevalpheileargseraspserglyprothrthrserpheglu100105110seralaalacysproglytrppheleucysthralametglualaasp115120125glnprovalserleuthrasnmetproaspgluglyvalmetvalthr130135140lysphethrmetglnphevalserser145150<210>4<211>153<212>prt<213>人工序列<220><221>来源<223>/注解="人工序列的描述:合成多肽"<400>4alaprovalargserleualapheargiletrpaspvalasnglnlys151015thrphetyrleuargasnasnglnleuvalalaglytyrleuglngly202530proasnvalasnleugluglulysphesermetserphevalglngly354045glugluserasnasplysileprovalalaleuglyleulysglulys505560asnleutyrleusercysvalleulysaspasplysprothrleugln65707580leugluservalaspprolysasntyrprolyslyslysmetglulys859095argphevalpheasnlysilegluileasnasnlysleuglupheglu100105110seralaalacysproglytrppheleucysthralametglualaasp115120125glnprovalserleuthrasnmetproaspgluglyvalmetvalthr130135140lysphethrmetglnphevalserser145150<210>5<211>153<212>prt<213>人工序列<220><221>来源<223>/注解="人工序列的描述:合成多肽"<400>5alaprovalargserleuasncysargiletrpaspvalasnglnlys151015thrphetyrleuargasnasnglnleuvalalaglytyrleuglngly202530proasnvalasnleugluglulysphesermetserphevalglngly354045glugluserasnasplysileprovalalaleuglyleulysglulys505560asnleutyrleusercysvalleulysaspasplysprothrleugln65707580leugluservalaspprolysasntyrprolyslyslysmetglulys859095argphevalpheasnlysilegluileasnasnlysleuglupheglu100105110seralaglnpheproasntrppheleucysthralametglualaasp115120125glnprovalserleuthrasnmetproaspgluglyvalmetvalthr130135140lysphetyrmetglnphevalserser145150<210>6<211>152<212>prt<213>人工序列<220><221>来源<223>/注解="人工序列的描述:合成多肽"<400>6alaprovalargserleuasncysthrleutrpaspvalasnglnlys151015thrphetyrleuargasnasnglnleuvalalaglytyrleuglngly202530proasnvalgluglnglnvalvalphesermetserphevalglngly354045glugluserasnasplysileprovalalaleuglyleulysglulys505560asnleutyrleusercysvalleulysaspasplysprothrleugln65707580leugluservalaspprolysasntyrprolyslyslysmetglulys859095argphevalpheasnlysilegluileasnasnlysleuglupheglu100105110seralaglnpheproasntrptyrileserthrsermetglualaasp115120125glnprovalpheleuglyglythrlysglyglyglnaspilethrasp130135140phethrmetglnphevalserser145150<210>7<211>153<212>prt<213>人工序列<220><221>来源<223>/注解="人工序列的描述:合成多肽"<400>7alaprovalargserleuasncysargiletrpaspvalasnglnlys151015thrphetyrleuargasnasnglnleuvalalaglytyrleuglngly202530proasnvalasnleugluglulysphesermetserphevalglngly354045glugluserasnasplysileprovalalaleuglyleulysglulys505560asnleutyrleusercysvalleulysaspasplysprothrleugln65707580leugluservalaspprolysasntyrprolyslyslysmetglulys859095argphevalpheasnlysilegluileasnasnlysleuglupheglu100105110seralaglnpheproasntrppheleucysthralametglualaasp115120125glnprovalserleuthrasnmetproaspgluglyglnaspilethr130135140aspphethrmetglnphevalserser145150<210>8<211>459<212>dna<213>人工序列<220><221>来源<223>/注解="人工序列的描述:合成多核苷酸"<400>8gcacctgtacgatcactggccttcagaatctgggatgttaaccagaagaccttctatctg60aggaacaaccaactagttgctggatacttgcaaggaccaaatgtcaatttagaagaaaag120atagatgtgtcctttgtacaaggagaagaaagtaatgacaaaatacctgtggccttgggc180atccatggagggaagatgtgcctgtcctgtgtcaagtctggtgatgagaccagactccag240ctggaggcagttgatcccaaaaattacccaaagaagaagatggacaagcgcttcgccttc300atccgctcagacagcggccccaccaccagttttgagtctgccgcctgccccggttggttc360ctctgcacagcgatggaagctgaccagcccgtcagcctcaccaatatgcctgacgaaggc420gtcatggtcaccaaattctacatgcaatttgtgtcttcc459<210>9<211>459<212>dna<213>人工序列<220><221>来源<223>/注解="人工序列的描述:合成多核苷酸"<400>9gcacctgtacgatcactggcc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