一种化疗药物组合物的制作方法

本发明涉及一种化疗药物组合物，属于医药技术领域。

背景技术：

自1971年首次应用顺铂来治疗恶性肿瘤以来，临床应用铂类药物治疗恶性肿瘤已有 数十年的历史。铂类药物由于具有抗肿瘤谱广、临床应用效果显著等优点，目前已被广泛 的研究。全球大约有2000多种铂制剂，然而在全球范围内被广泛应用于临床药物的铂类 药物，仅有顺铂和卡铂。

顺铂作为一种细胞周期非特异性抗广谱化疗药物，它与细胞内亲核分子蛋白质、DNA、 RNA等相结合，其中DNA是它的最主要靶点。顺铂主要通过与DNA结合，抑制肿瘤细 胞DNA的复制，从而起到杀灭肿瘤细胞的作用。顺铂临床上广泛应用于多种实体肿瘤的 治疗，如睾丸、恶性淋巴瘤、卵巢、肺癌、头颈部癌等，尤其对卵巢癌和睾丸癌疗效显著。 然而在发挥疗效的同时，它引起的毒副作用很大，如常见的肾毒性、神经毒性及肝毒性等。 其中在肝毒性方面，动物实验显示腹腔给予顺铂，引起血清谷草转氨酶和谷丙转氨酶的显 著升高，病理切片上呈现因肝动脉、静脉和胆管的扩展而引起的不同程度的阻塞和肝细胞 索损坏，在氧化指标上丙二醛含量增加，而超氧化物歧化酶活性降低，提示顺铂引起了肝 损伤，作用机理与氧化损伤有关。肝脏损伤后影响了顺铂在体内的分布、代谢及排泄等过 程，严重限制了其临床良好疗效的发挥，因而筛选能够拮抗顺铂肝毒性的药物具有重要意 义，这对肿瘤患者来说无疑是一个很好的治疗选择。

黄酮类化合物是广泛存在于自然界的一大类化合物，不仅分布广泛，而且生物活性多 样，如抗氧化、抗炎、抗菌、抗肿瘤等，常用于防治心脑血管疾病、癌症和肝损伤等疾病， 因而黄酮类化合物成为保肝候选药物的一个重要来源。葛根，历代本草中均有记载，是豆 科植物野葛的干燥根，甘、辛、凉，具有解肌退热，生津，透疹，升阳止泻的功效，主要 用于表证发热，热病口渴，阴虚消渴，脾虚泄泻等。葛根中化学成分主要为黄酮类物质、 碳水化合物、植物蛋白和多种维生素。而葛根素是黄酮类化合物中最主要的一种活性成分， 现代药理学研究表明，葛根素具有抗氧化、抗过敏及抗血栓形成等作用，已被广泛应用于 心脑血管疾病、骨质疏松症、酒精中毒和糖尿病等疾病的实验研究和临床治疗。

技术实现要素：

本发明的目的在于解决现有技术的不足，提供一种化疗药物组合物，疗效好，毒副作 用小。

技术方案

一种化疗药物组合物，由葛根素和顺铂组成，葛根素与顺铂的质量比为3～20:1。

进一步，葛根素与顺铂的质量比为3～10:1，更优选为8:1。

上述化疗药物组合物用于治疗癌症的应用。所述癌症为卵巢癌、睾丸癌、子宫癌、肺 癌、肝癌、乳腺癌、头颈癌、胃癌、结肠直肠癌、胰腺癌、肾癌、食道癌或前列腺癌。

一种化疗药物制剂，包括上述化疗药物组合物和药学上可接受的稀释剂、载体、赋形 剂、辅料或媒介物。

所述化疗药物制剂的剂型为胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、丸剂、液体制剂、喷雾剂、 注射剂或软膏剂。

有益效果：本发明采用葛根素和顺铂联用，原料简单，制备的化疗药物组合物疗效好， 毒副作用小；本发明的化疗药物组合物还可根据需要制备成胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、 丸剂、液体制剂、喷雾剂、注射剂或软膏剂等多种剂型，应用于卵巢癌、睾丸癌、子宫癌、 肺癌、肝癌、乳腺癌、头颈癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、肾癌、食道癌或前列腺癌的治 疗。

附图说明

图1为实施例1和2的化疗药物组合物对小鼠血清中ALT/AST活性的影响；

图2为实施例1和2的化疗药物组合物对小鼠血清中ALP活性的影响；

图3为应用实施例2的化疗药物组合物对小鼠肝组织的光镜图；

图4为实施例3的化疗药物组合物对小鼠血清中ALT/AST活性的影响；

图5为实施例3的化疗药物组合物的抗肿瘤活性。

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明，但是这些具体的实施例不应当理解为 对本发明的限制。值得说明的是，下述实施例中，葛根素(HPLC纯度>98％)购自南京 广润生物制品有限公司；顺铂购自Sigma Chemical Co，但并不限于此。

实施例1

取葛根素和顺铂以3.3:1的质量比混合均匀，得到化疗药物组合物。

实施例2

取葛根素和顺铂以6.7:1的质量比混合均匀，得到化疗药物组合物。

实施例3

取葛根素和顺铂以8:1的质量比混合均匀，得到化疗药物组合物。

应用测试：

1、对肝损伤的影响测试

试验方法：将动物(雄性ICR小鼠，体重20±2g，购于扬州大学比较医学中心)饲 养在塑料笼中，给以标准食物，自由饮水。标准条件下适应性饲养后，分四组，一组作为 对照组，给予0.9％生理盐水，另外三组分别灌胃给以等体积的药物(实施例1的化疗药 物组合物32.5mg/kg(葛根素25mg/kg+顺铂7.5mg/kg)，溶解于0.9％生理盐水；实施例2 的化疗药物组合物57.5mg/kg(葛根素50mg/kg+顺铂7.5mg/kg)，溶解于0.9％生理盐水；顺 铂7.5mg/kg作为对比例组，溶解于0.9％生理盐水)，连续给药6天。24小时后，通过摘 眼球收集血液，测试血清肝功能指标，将小鼠通过脱臼处死后，收取肝脏，对肝组织进行 病理学分析。

1.1血清肝功能指标测试

将血液样品在室温下放置2小时后，以3,500rpm离心10分钟，上层的血清收集到新 管中。根据试剂盒说明书，用比色测定试剂盒确定丙氨酸/天冬氨酸氨基转移酶(ALT/ AST)，碱性磷酸酶(ALP)的血清水平，然后计算ALT、AST和ALP活性，结果见图1 和图2。

ALT、AST和ALP是肝细胞损伤的敏感标志物，其血清升高提示急性肝损伤的发生。 图1为实施例1和2的化疗药物组合物对小鼠血清中ALT/AST活性的影响，图2为实施 例1和2的化疗药物组合物对小鼠血清中ALP活性的影响。由图1和2可以看出，与对照 组相比，腹腔内给予顺铂(7.5mg/kg)的对比例组显著升高血清ALT、AST和ALP活性(P <0.001，P<0.001，P<0.001)，提示顺铂成功地诱导了肝损伤；采用实施例1的化疗药物组 合物对血清AST活性明显没有影响，但ALT和ALP活性显著降低(P<0.05，P<0.01)；采 用实施例2的化疗药物组合物能够抑制顺铂诱导的ALT、AST和ALP活性(P<0.01，P <0.05，P<0.01)，表明葛根素可以防御顺铂诱导的肝损伤。

1.2肝组织的病理学观察

将肝组织切成5μm的小块，在15％福尔马林中浸泡固定8～10小时，开始用30％的 酒精脱水，经70％、85％、95％直至纯酒精(无水乙醇)，每次脱水1小时。在纯酒精与 二甲苯1:1混合溶液中透明2小时，再用纯二甲苯分别处理，浸渍2小时。选取熔点在52～ 54℃的石蜡，将肝组织块放在熔化的石蜡和二甲苯的1:1混合溶液中浸泡1～2小时，移入 熔化的石蜡液中浸渍3小时两次，浸蜡55～57℃左右的温箱中进行，以便于石蜡浸入组织 内。将浸蜡后的块状肝组织包埋在石蜡中，并切片处理。制好的切片在37℃恒温干燥箱中 中干燥，二甲苯脱蜡，逐级经分级浓度的乙醇直至30％酒精，用苏木精-伊红染色法 (haematoxylin and eosin,H&E)染色。经苏木精-伊红染色后，苏木精将细胞核染成蓝紫色， 其它成分则被伊红染成粉红色。染色后的切片经梯度酒精脱水以及二甲苯透明后，迅速擦 去肝组织块周围多余液体，滴加1～2滴中性树胶，将洁净盖玻片倾斜放下(避免出现气 泡)，封片后就制成永久性的玻片标本，在光学显微镜下观察肝组织块的病理生理变化。 结果见图3。

图3为应用实施例2的化疗药物组合物后小鼠肝组织的光镜图，图3A为对照组，图 3B为对比例组(单独顺铂组)，图3C为实施例2组。与对照组小鼠相比，单独的顺铂组 诱导小鼠严重的肝损伤，病理切片呈现肝结构严重破坏，肝细胞明显坏死，而实施例2的 化疗药物组合物组肝细胞排列整齐，恢复了正常肝脏结构，表明葛根素能够抑制顺铂诱导 的肝损伤。

2、抗肿瘤活性测试

取接种肿瘤7天后且生长良好的S180腹水型荷瘤小鼠，颈椎脱臼处死后，在无菌条 件下抽取乳白色腹水，用生理盐水稀释成1×10⁷/ml，以每只0.1ml进行腋下接种。按体 重随机分组，分别为control、顺铂组(5mg/kg)、葛根素组(40mg/kg)和实施例3组(45 mg/kg)。各组给药前禁食不禁水12h后，连续给药10天(隔天给药)，其中control组 给予等量的生理盐水。末次给药24h后摘眼球取血，测定血清生化指标，结果见图4；此 外，剥离肿瘤并称重，计算抑瘤率，结果见图5。

图4为实施例3的化疗药物组合物对小鼠血清中ALT/AST活性的影响。由图4可以 看出，与对照组相比，顺铂组(5mg/kg)显著升高血清ALT、AST活性(P<0.01，P<0.01)， 提示荷瘤条件下顺铂成功地诱导了肝损伤；实施例3组(45mg/kg)能够显著抑制顺铂诱导 的血清ALT、AST活性(P<0.05，P<0.05)，表明葛根素可以防御荷瘤条件下顺铂诱导的 肝损伤。

图5为实施例3的化疗药物组合物的抗肿瘤活性。由图5可以看出，与对照组相比， 顺铂组(5mg/kg)和实施例3组均能够显著降低荷瘤小鼠的瘤重(P<0.001)，并且实施例 3的抗肿瘤活性更好(P<0.05)。