具有胶原蛋白合成能力的新型的肽及其用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种肽及其用途，更详细而言，涉及一种具有胶原蛋白合成能力的新 型的肽及其用途。
【背景技术】
[0002] 人随着年龄增大会引起皮肤老化，其代表的症状为皱纹（Wrinkle)。皱纹是表示年 龄的1个现象，产生皱纹的代表的原因起因于在皮肤的真皮中形成基质的胶原蛋白发生分 解。由于发生老化，皮肤胶原蛋白的生成降低。
[0003] 作为促进胶原蛋白合成的现有的物质，已知有类视黄素（RE36068)、TGF-M转化 生长因子，Transforming growth factor)、桦木酸（JP8-208424)、野生日本薯截萃取物（大 韩民国公开专利第2009-0055079)等。
【发明内容】
[0004] 发明所要解决的问题
[0005] 这种现有的胶原蛋白合成促进剂存在其效率降低、或作为重组蛋白质成本昂贵、 为天然萃取物时再现性降低的缺点。
[0006] 本发明用于解决包含所述问题点在内的多种问题点，其目的在于：提供一种能够 以比较廉价的成本有效地促进胶原蛋白合成的新型肽及其用途，由此，可作为用于减轻皮 肤老化或改善皱纹的化妆料组合物或创伤治疗剂等使用。但是，这种要解决的问题为示例， 并不由此限定本发明的范围。
[0007] 用于解决问题的技术方案
[0008] 根据本发明的一个观点提供一种用于减轻皮肤老化的组合物，其含有具有序列号 1中所记载的氨基酸序列的YIGSR肽作为有效成分。
[0009] 根据本发明的其它观点提供一种用于改善皱纹的化妆料组合物，其含有YIGSR肽 或在所述肽的N末端添加了棕榈酰基而成的肽衍生物作为有效成分，所述HGSR肽具有序 列号1中所记载的氨基酸序列。
[0010] 根据本发明的其它观点提供一种用于创伤治疗的药学的组合物，其含有YIGSR肽 或在所述肽的N末端添加了棕榈酰基而成的肽衍生物作为有效成分，所述HGSR肽具有序 列号1中所记载的氨基酸序列。
[0011] 根据本发明的其它观点提供一种皮肤填充剂，其含有YIGSR肽或在所述肽的N末 端添加了棕榈酰基而成的肽衍生物作为有效成分，所述HGSR肽具有序列号1中所记载的 氨基酸序列。
[0012] 根据本发明的其它观点提供一种创伤治疗方法，其包括：将在药学上有效的量的 YIGSR肽或在所述肽的N末端添加了棕榈酰基而成的肽衍生物给药于遭受创伤的个体的阶 段，所述HGSR肽具有序列号1中所记载的氨基酸序列。
[0013] 根据本发明的其它观点提供一种YIGSR肽或其衍生物，其用于创伤治疗中，所述 YIGSR肽具有序列号1中所记载的氨基酸序列，所述衍生物在所述肽的N末端添加了棕榈酰 基而成。
[0014] 根据本发明的其它观点一种YIGSR肽或其衍生物在改善皱纹用化妆料组合物的 制造中的应用，所述HGSR肽具有序列号1中所记载的氨基酸序列，所述肽衍生物在所述肽 的N末端添加了棕榈酰基而成。
[0015] 发明的效果
[0016] 根据如上所述进行的本发明的一个实施例，可以体现具有胶原蛋白合成能力的新 型的肽。当然，并不通过这种效果而限定本发明的范围。
【附图说明】
[0017] 图1是通过蛋白质印迹分析及实时RT-PCR分析确认了本发明的一个实施例的 YIGSR肽处理引起的Hs27细胞中胶原蛋白表达变化的结果，图1A是根据YIGSR肽处理浓 度（0、10 2、10 iUUOUO'lO'KAK^nM)确认了胶原蛋白I蛋白质表达变化的坐标图，图 1B是根据YIGSR肽（103nM)处理时间（0、0. 5、6、12及24小时）确认了胶原蛋白I蛋白质 表达变化的坐标图，图1C是根据HGSR肽处理浓度（0、10、102、10 3、104、105nM)确认了胶原 蛋白I mRNA表达变化的坐标图。
[0018] 图2是通过MTT分析确认了本发明的一个实施例的HGSR肽处理细胞引起的生存 率变化的结果，图2A是根据HGSR肽处理浓度（0、10、10 2、103、104、105nM)变化确认了 Hs27 细胞的生存率的坐标图，图2B是根据YIGSR肽（103nM)处理时间（0、0. 1、0. 25、0. 5、1、3、6、 12及24小时）显示Hs27细胞的生存率的坐标图。
[0019] 图3是通过蛋白质印迹分析确认了本发明的一个实施例的YIGSR肽处理引起的 MMP-1水解酶的表达变化的照片。
[0020] 图4是为了确认参与本发明的一个实施例的YIGSR肽引起的胶原蛋白表达增加的 信号机制，使用蛋白质印迹分析确认了作为层粘连蛋白受体的下位信号传递的FAK、Pyk2、 及ERK的磷酸化水平的结果，图4A是蛋白质印迹照片，图4B是对蛋白质印迹图像进行了浓 度分析的坐标图。
[0021] 图5是确认了 FAK或ERK抑制剂处理引起的对由本发明的一个实施例的HGSR 肽所诱导的胶原蛋白生成产生了抑制的蛋白质印迹分析照片，图5A是作为FAK抑制剂的 PF573228处理时的结果，图5B是作为ERK抑制剂的TO98059处理时的结果。
[0022] 图6是表示本发明的YIGSR肽衍生物（Pal-YIGSR)的浓度依赖性胶原蛋白合成活 性的免疫印迹分析结果。
[0023] 图7是比较本发明的YIGSR肽衍生物（Pal-YIGSR)及比较例的胶原蛋白合成活性 的免疫印迹分析结果。
[0024] 图8是比较了本发明的YIGSR肽衍生物（Pal-YIGSR)及比较例的肽的ERK磷酸化 活性的免疫印迹分析结果。
[0025] 图9是表示本发明的HGSR肽衍生物（Pal-YIGSR)的浓度依赖性皮肤成纤维细胞 增殖活性的坐标图。
[0026] 图10是比较了由本发明的HGSR肽衍生物（Pal-YIGSR)及比较例的肽的暴露时 间而产生的胶原蛋白合成活性的免疫印迹分析结果。
【具体实施方式】
[0027] 以下，对本发明更详细地进行说明。
[0028] 根据本发明的一个观点，提供一种用于减轻皮肤老化的组合物，其含有YIGSR肽 或在所述肽的N末端添加了棕榈酰基而成的肽衍生物作为有效成分，所述HGSR肽具有序 列号1中所记载的氨基酸序列。
[0029] 本发明的一个实施例的具有序列号1中所记载的氨基酸序列的HGSR肽在转录水 平上调节胶原蛋白的表达，并产生处理量及处理时间依赖性地增加胶原蛋白I的生成的效 果。此时，提供以下效果：所述序列号1中所记载的YIGSR肽通过在10 3~10 4nM的低浓度 下使胶原蛋白I的生成显著地增加，作为所述肽衍生物的Pal-YIGSR，即使在50~100 yM 的高浓度下也会产生使胶原蛋白I的生成显著地增加。另外，这种增加胶原蛋白生成的效 果是作为层粘连蛋白受体的下位信号传递机制的FAK、Pyk2、及ERK的磷酸化引起的，而并 不是分解胶原蛋白的MMP-1水解酶表达的抑制而引起的。因此，可以作为减轻由于减少胶 原蛋白I的减少含量而促进的皮肤老化的组合物而利用。
[0030] 所述皮肤老化减轻用组合物可以以化妆料组合物的形态提供。
[0031 ] 在化妆料组合物中使用本发明的一个实施例的肽时，在其剂型上没有特别限定， 例如，具有柔软化妆水、营养化妆水、按摩霜、营养霜、润肤膏、凝胶或皮肤粘合型化妆料的 剂型的化妆料组合物，可以为如化妆水、软膏、凝胶、霜、贴剂（patch)或喷雾剂那样的经皮 给药型剂型。
[0032] 本发明的组合物可以进一步含有在化妆品制造中通常使用的适当的载体、赋形剂 及稀释剂。根据化妆品的剂型而适当地剂型选择，可列举：凡士林、液体石蜡、凝胶化烃（别 名：Plastibase)等经类；中链脂肪酸甘油三酯、猪油、加硬PET(hard PET)、可可脂等动植 物性油；鲸蜡醇、硬脂醇、硬脂酸、棕榈酸异丙酯等高级脂肪酸醇及脂肪酸、及其酯类；聚乙 二醇（聚乙二醇）、1，3-丁二醇、甘油、明胶、白糖、糖醇等水溶性基剂；甘油脂肪酸酯、聚乙 二醇硬脂酸酯、聚氧乙烯固化蓖麻油等乳化剂；丙烯酸酯、海藻酸钠等粘合剂；液化石油气 体、二氧化碳等喷射剂；对羟基苯甲酸酯类等防腐剂等。
[0033] 根据本发明的其它观点，提供一种用于改善皱纹的化妆料组合物，其含有HGSR 肽或在所述肽的N末端添加了棕榈酰基而成的肽衍生物作为有效成分，所述HGSR肽具有 序列号1中所记载的氨基酸序列。
[0034] 此时，在具有序列号1所示的氨基酸序列的HGSR肽产生在103~10 4nM的低浓度 下显著地增加胶原蛋白I的生成的效果。
[0035] 根据本发明的其它观点，提供一种创伤治疗用药学的组合物，其含有YIGSR肽或 在所述肽的N末端添加了棕榈酰基而成的肽衍生物作为有效成分，所述HGSR肽具有序列 号1中所记载的氨基酸序列。
[0036] 原来，YIGSR肽是经常保存在层粘连蛋白（Laminin)等胶原蛋白结合蛋白质中的 部位，作为胶原蛋白