从鱼内脏中提取含有多不饱和脂肪酸组成的磷脂的脂质混合物的方法

专利名称：从鱼内脏中提取含有多不饱和脂肪酸组成的磷脂的脂质混合物的方法
技术领域：
本发明涉及一种提取含有多不饱和脂肪酸组成的磷脂的脂质混合物的方法，特别是涉及一种从海产食品加工业中作为副产品的鱼内脏中提取含有由多不饱和脂肪酸组成的磷脂的脂质混合物的方法，以及为提取而将鱼内脏保存一段时间的方法。
背景技术：
近年来发现由多不饱和脂肪酸如二十碳五烯酸(eicosapentaenoicacid)或二十二碳六烯酸(DHA，docosahexaenoic acid)组成的磷脂在生理学中起重要作用。金枪鱼、鲣鱼、沙丁鱼等鱼类的内脏中含有丰富的磷脂，并且已经作为制造功能食品的备选原料而备受关注。在海产食品加工业中，鱼内脏一般只是作为副产品，通常都会被丢弃。因此，鱼内脏的有效利用对于减少浪费和最大化地利用资源也十分有益。
由于二十碳五烯酸或二十二碳六烯酸等不饱和脂肪酸在鱼内脏中是作为磷脂的组成部分而存在的，开发出一种从鱼内脏中提取高浓度的磷脂的技术就非常重要。
已经发现一种叫做磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine)的磷脂对于改善痴呆、抑郁和提高脑功能如记忆力，以及强健运动员的肌肉均有一定的效果。因此将其应用于食品和医药领域具广阔的前景。由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰丝氨酸存在于人的视网膜或大脑中。磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine)也是一种磷脂，人们发现它具有抗氧化的作用。二十二碳六烯酸组成的磷脂酰丝氨酸也存在于人的视网膜或大脑中。对于由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰丝氨酸和磷脂酰乙醇胺引起了人们的特别关注，因为由于年龄老化而引起的大脑内二十二碳六烯酸的减少与磷脂酰丝氨酸和磷脂酰乙醇胺减少成正比。
但是，鱼内脏中含有一种叫做磷脂酶(phosphorlipase)的可以分解磷脂的酶。因此，随着时间的推移，生物体内的磷脂被磷脂酶分解，导致可提取的磷脂的数量逐渐减少。因此，理想的是在鱼内脏新鲜时提取磷脂，最好是将鱼内脏从存放地或加工厂收集后就立即开始提取加工。
但事实上，在工作时间安排上很难做到将鱼内脏在收集后就立即在工厂内进行提取加工。通常收集到的鱼内脏先被冷冻或冷冻干燥，使磷脂酶的活性停止，之后再解冻加工。
日本专利公告定期出版物HEI 6 -77505和日本公开专利公告定期出版物HEI 8 -325192中公开了从冷冻干燥过的鱼内脏中提取磷脂的技术。
用冷冻或冷冻干燥的方法保存的鱼内脏存在一个问题。冷冻或冷冻干燥仅仅是暂缓了原料中磷脂酶(分解代谢酶)的活性，而不能使其完全失去活性。因此，可以理解为，在鱼内脏被完全冷冻之前的冷冻过程中，磷脂的分解一直在持续。同样，在解冻的过程中，磷脂酶又恢复了活性，并随着时间的推移逐渐将磷脂分解，导致中性脂类(neutronlipid)的增多和磷脂的减少。因此，为了获得高浓度的磷脂，就需要采用快速冷冻和快速解冻工艺。但这种技术成本高昂、设备占地面积巨大，并且维护不便。
由此可见，上述现有的从鱼内脏中提取磷脂的方法在方法与使用上，显然仍存在有不便与缺陷，而亟待加以进一步改进。为了解决从鱼内脏中提取磷脂的方法存在的问题，相关厂商莫不费尽心思来谋求解决之道，但长久以来一直未见适用的设计被发展完成，而一般方法又没有适切解决上述问题，此显然是相关业者急欲解决的问题。
有鉴于上述现有的从鱼内脏中提取磷脂的方法存在的缺陷，本发明人基于从事此类产品设计制造多年丰富的实务经验及专业知识，并配合学理的运用，积极加以研究创新，以期创设一种新的从鱼内脏中提取含有多不饱和脂肪酸组成的磷脂的脂质混合物的方法，能够改进一般现有的从鱼内脏中提取磷脂的方法，使其更具有实用性。经过不断的研究、设计，并经反复试作及改进后，终于创设出确具实用价值的本发明。

发明内容
本发明的主要目的在于，克服现有的从鱼内脏中提取磷脂的方法存在的缺陷，而提供一种新的从鱼内脏中提取含有多不饱和脂肪酸组成的磷脂的脂质混合物的方法，所要解决的技术问题是使其通过一种简单且成本低廉的方法使活鱼中磷脂的分解代谢酶失去活性而获得高浓度磷脂，从而更加适于实用。
本发明的另一目的在于，提供一种一种使用溶剂将鱼内脏保存一预定时间的方法，所要解决的技术问题是使其能够保存鱼内脏而不减少其磷脂含量以便日后提取之用，从而更加适于实用。
本发明的再一目的在于，提供一种从鱼内脏中提取含有多不饱和脂肪酸组成的磷脂的脂质混合物的方法，所要解决的技术问题是使其从鱼内脏中获得高浓度的由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰丝氨酸和磷脂酰乙醇，从而更加适于实用。
本发明的目的及解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。依据本发明提出的一种提取脂质混合物的方法，其包括以下步骤(a)用热水或蒸汽将鱼内脏加热；以及(b)利用一种溶剂从加热过的鱼内脏中提取脂质混合物，该脂质混合物含有由多不饱和脂肪酸组成的磷脂。
本发明的目的及解决其技术问题还可采用以下技术措施进一步实现。
前述的提取脂质混合物的方法，其还进一步包括以下步骤(c)在提取脂质混合物的步骤开始之前将加热过的鱼内脏以冷藏或冷冻的方式保存。
前述的提取脂质混合物的方法，其中所述的内脏在步骤(a)中被加热到60℃或更高的温度。
前述的提取脂质混合物的方法，其中所述的内脏在步骤(a)中被加热10～180分钟。
前述的提取脂质混合物的方法，其中所述的鱼包括有鲣鱼、金枪鱼、鲐鱼、沙丁鱼、鳕鱼、鲷鱼、比目鱼、鲆鱼、鲨鱼、鲑鱼和鳟鱼。
前述的提取脂质混合物的方法，其中所述的内脏包括卵巢、睾丸、心脏、肝脏、胃和肠。
前述的提取脂质混合物的方法，其中所述的脂质混合物含有由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰丝氨酸和由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰乙醇胺。
前述的提取脂质混合物的方法，其进一步包括以下步骤(d)从所述的脂质混合物分离提取出磷脂酰丝氨酸和磷脂酰乙醇胺。
前述的提取脂质混合物的方法，其中所述的脂质混合物在步骤(b)中是通过使用一种有机溶剂或有机溶剂与水的混合溶剂被提取的。
本发明的目的及解决其技术问题还采用以下的技术方案来实现。依据本发明提出的一种使用溶剂将鱼内脏保存一预定时间的方法，其应用于提取含有由多不饱和脂肪酸组成的磷脂的脂质混合物之前，该方法包括以下步骤(e)将鱼内脏加热；和(f)将加热过的鱼内脏冷冻或冷藏。
本发明的目的及解决其技术问题还采用以下的技术方案来实现。依据本发明提出的一种脂质混合物，其是通过一种方法提取得到的，该方法包括以下步骤(a)用热水或蒸汽将鱼内脏加热；和(b)使用一种溶剂从加热过的鱼内脏中提取由多不饱和脂肪酸组成的磷脂的脂质混合物。
本发明的目的及解决其技术问题还采用以下的技术方案来实现。依据本发明提出的一种磷脂酰丝氨酸，其是从上述的脂质混合物中分离提取的。
本发明的目的及解决其技术问题还采用以下的技术方案来实现。依据本发明提出的一种磷脂酰乙醇胺，其是从上述的脂质混合物中分离提取的。
本发明的目的及解决其技术问题还可采用以下技术措施进一步实现。
前述的从鱼内脏中提取含有多不饱和脂肪酸组成的磷脂的脂质混合物的方法，其中所述的前述的脂质混合物，其包括由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰丝氨酸和二十二碳六烯酸组成的磷脂酰乙醇胺。
前述的磷脂酰丝氨酸，其中由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰丝氨酸占全部磷脂酰丝氨酸重量的45％或更高。
前述的磷脂酰乙醇胺，其中由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰乙醇胺占全部磷脂酰乙醇胺重量的35％或更高。
本发明与现有技术相比具有明显的优点和有益效果。由以上技术方案可知，为了找到在加工前可以长时间保存鱼内脏而不使其中的磷脂分解的最佳方法，本发明人进行了一系列的研究，并发现在某一预定温度对鱼内脏进行迅速的蒸煮可以实现上述目的。
具体如下，对用于提取磷脂的鱼内脏进行预煮沸，使磷脂的分解代谢酶失去活性，从而将保存期间磷脂的损失降至最低。使用一种溶剂从煮沸的内脏中提取含有磷脂的脂质混合物，并使用层析法等方法将提取的脂质混合物分离为成分单一的脂质。采用该工艺可获得含有高浓度的有用的多不饱和脂肪酸的磷脂。
还有，发明人在研究期间意外地发现，对煮过的鱼内脏进行加工后得到的提取物与直接加工鲜鱼内脏后得到的提取物相比，其中的磷脂的含量要高。
根据本发明的第一个方面，提供了一种由鱼内脏中提取脂质混合物的方法，其中的提取方法包括以下步骤(a)对鱼内脏进行加热；(b)使用一种溶剂从加热的鱼内脏中提取含有由多不饱和脂肪酸组成的磷脂的脂质混合物。所述方法还包括以下步骤(c)在进行脂质混合物的提取之前，将加热过的鱼内脏采用冷藏或冷冻的方式保存。
根据本发明的第二个方面，提供了一种在使用一种溶剂从加热的鱼内脏中提取含有由多不饱和脂肪酸组成的磷脂的脂质混合物之前，将鱼内脏保存一段时间的方法，其中所述的内脏保存方法包括以下步骤(a)对鱼内脏进行加热；(b)将加热后的鱼内脏冷藏或冷冻。
根据本发明的第三个方面，提供了一种通过一种方法或得的脂质混合物，该方法包括以下步骤(a)对鱼内脏进行加热；(b)使用一种溶剂从加热的鱼内脏中提取含有由多不饱和脂肪酸组成的磷脂的脂质混合物。所述的脂质混合物含有由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰丝氨酸和磷脂酰乙醇。
根据本发明的第四个方面，提供了磷脂酰丝氨酸，其中由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰丝氨酸占全部磷脂酰丝氨酸总重量的45％或更高。
根据本发明的第五个方面，提供了磷脂酰乙醇胺，其中由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰乙醇胺占全部磷脂酰乙醇胺总重量的35％或更高。
借由上述技术方案，本发明从鱼内脏中提取含有多不饱和脂肪酸组成的磷脂的脂质混合物的方法至少具有下列优点
1、根据本发明，在提取前仅仅使用普通而低成本的热水处理就可以使鱼内脏中磷脂中的分解代谢酶失活，使内脏可以保存较长的时间。
2、根据本发明，可以获得一种高磷脂含量、低杂质含量和极少鱼腥味的脂质混合物。
3、本发明属于天然健康型，因为是由天然鱼类的内脏中提取的。
4、本发明利用通常被扔掉的鱼内脏，利用低成本的处理实现资源利用的最大化。
综上所述，本发明特殊的从鱼内脏中提取含有多不饱和脂肪酸组成的磷脂的脂质混合物的方法，其具有上述诸多的优点及实用价值，并在同类方法中未见有类似的设计公开发表或使用而确属创新，在技术上有较大的进步，并产生了好用及实用的效果，且较现有的从鱼内脏中提取磷脂的方法具有增进的多项功效，从而更加适于实用，而具有产业的广泛利用价值，诚为一新颖、进步、实用的新设计。
具体实施例方式
为更进一步阐述本发明为达成预定发明目的所采取的技术手段及功效，以下结合附图
及较佳实施例，对依据本发明提出的从鱼内脏中提取含有多不饱和脂肪酸组成的磷脂的脂质混合物的方法其具体实施方式
、步骤、特征及其功效，详细说明如后。
在一系列的对长时间保存鱼内脏而不使其中的磷脂分解的研究中，本发明人发现以某一预定温度对鱼内脏进行迅速的蒸煮可以实现上述目的。
以下三种方法可以使酶失去活性添加螯合剂、改变pH值和加热。
添加螯合剂的方法常用于使液态原料中的酶失去活性，因为它在液体中易于溶解。但是，在这里是要将固体状态的原料中的酶失去活性，此种方法并不适用。这是因为螯合剂渗入的时间较长，例如，需要将原料浸入螯合剂中24小时。还有，即使经过如此长时间，失活作用仍然总是不完全。
改变pH值的方法可能损坏原料本身，分解含有二十二碳六烯酸的磷脂。此外，pH为中性时会形成盐，需要进行脱盐加工，而对脱盐设备等的投资会使成本增加。
而在加热法中，原料可以被加热，例如，在水浴中允许通过中部进行热传递，确保磷脂酶失活。采用此种方法还可以除去溶于水的杂质，如原料的各种提取成分。因此，该加热法提供了一种不会引起高价的设备费用的经济的获取高浓度含有二十二碳六烯酸的磷脂的方法。
在采用水浴加热原料的方法中，温度越高、加热时间越长，酶的失活就越完全。但是，对在原料加工中温度过度和时间过长会使含有二十二碳六烯酸的磷脂分解，从而使高浓度含有二十二碳六烯酸的磷脂的获取变得困难。通常酶在60℃或更高的温度下就会失去活性。从健康角度来说，食物中不应含有大肠杆菌。因此，为了杀死大肠杆菌，应将原料加热到足够的温度，即60℃或更高，而最好是在80℃到110℃之间。所以，使分解代谢酶失活的处理温度的下限最好设定在60℃。
在60℃或更高的温度下对原料进行加工会将中性脂类和水溶性成分(有机酸、氨基酸、胺)等洗提出来，并且降低含水量，从而有可能提取出杂质和鱼腥味更少的脂质混合物。如果仍然存在鱼腥味的问题，在溶剂提取后还可以进行脱味加工，如使用活性炭或硅酸铝进行处理。
煮沸并非唯一的加热原料的方法。真正需要的仅仅是将原料置于60℃或更高温度的环境之中。原料可以浸于热水中，或通过将热水或蒸汽喷射或喷洒到原料上进行加热均可。
加热时间较佳的在180分钟以内，如下面的实施例中所示。最好是加热10到90分钟。
本发明中所使用的原料包括红色鱼类(red-flesh fish)如鲣鱼(bonito)、金枪鱼(tuna)、鲐鱼(mackerel)和沙丁鱼(sardine)，或白色鱼类(white-flesh fish)如鳕鱼(cod)、鲷鱼(sea bream)、比目鱼(flounder)、鲆鱼(flatfish)、鲨鱼(shark)、鲑鱼(salmon)和鳟鱼(trout)等。本发明中所使用的鱼内脏包括卵巢、睾丸、心脏、肝脏、胃和肠等。特别是鲣鱼或金枪鱼的睾丸从磷脂的产出量来说是最适宜的。由于是海洋食品加工业的副产品，睾丸的利用从成本方面来说也是可取的。
本发明提取的磷脂包括由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰丝氨酸和磷脂酰乙醇。最近的研究发现这些磷脂具有有益的生理影响。
煮沸后的提取可使用不机溶剂或有机溶剂与水的混合溶剂。有机溶剂包括乙醇、甲醇、丙醇、乙醚、己烷和氯仿。
从脂质混合物中将磷脂酰丝氨酸和磷脂酰乙醇胺分离出来可以通过层析法来完成。根据本明，对脂质混合的进行分离，得到组成磷脂酰丝氨酸的二十二碳六烯酸的重量为全部磷脂酰丝氨酸的45％或更高；得到组成磷脂酰乙醇胺的二十二碳六烯酸的重量为全部磷脂酰乙醇胺的35％或更高。因此，到目前为止，根据本发明的液态混合物中二十二碳六烯酸的含量是最高的，是一种极为有用的食品和医药原料。
按重量二十二碳六烯酸含量为45％或更高的磷脂酰丝氨酸与按重量二十二碳六烯酸含量为35％或更高的磷脂酰乙醇胺的生物成分相似。他们被特别应用于医药领域。
在脂质混合物中磷脂，除了磷脂酰丝氨酸和磷脂酰乙醇胺之外，还有磷脂酰胆碱(phosphateidyl choline)、溶血磷脂酰胆碱(lysophosphatidylcholine)和溶血磷脂酰乙醇胺(lysophosphatodylethanolamine)等。磷脂中的组成型脂肪酸除二十二碳六烯酸外还有如棕榈酸、油酸、二十碳五烯酸和二十二碳五烯酸等。
以下对本发明在具体应用中的最佳实施例进行详细说明。这些实施例并非要对本发明的范围进行约束。
实施例1在静冈县政府所在地烧津市的鲣鱼干加工厂内，鲜鲣鱼被切分时所得到的副产品卵巢(表1)和睾丸(表2)在采集后迅速在95℃的热水中分别加热一定时间。
测量含水量后，采用一种由布莱-戴尔法(Bligh and Dyer method)变化方法提取出脂质混合物。将溶剂去除后，对其气味进行感官评定。再次对溶剂进行洗提后，用硅土筒将脂质混合物分离为中性脂和磷脂。除去溶剂后，对脂质的混合比进行评定。
还有，为了确认本发明的热水处理的效果，对照组是从收集后立刻在新鲜状态下进行分析中选择的(对照1)，以及那些不在收集后立即进行热水处理，而是在冷冻两天后才进行分析(对照2)，并与本实施例的热水处理组进行比较。热水处理的各组在热水处理后冷藏两天后进行分析。
表1鲣鱼卵巢热水处理试验(鲣鱼卵巢95℃水煮试验)

*NL代表中性脂；PL代表磷脂；MO代表含水量表2鲣鱼睾丸热水处理试验(鲣鱼睾丸95℃水煮试验)

表1

<p>*NL代表中性脂；PL代表磷脂；MO代表含水量。
表5鲣鱼卵巢热水处理试验(鲣鱼卵巢70℃水煮试验)

*NL代表中性脂；PL代表磷脂；MO代表含水量。
表6鲣鱼卵巢热水处理试验(鲣鱼卵巢85℃水煮试验)

*NL代表中性脂；PL代表磷脂；MO代表含水量。
在表3～6中，与对照2相比而言，在所有经过热水处理10～90分钟的组中，不仅磷脂含量的下降由于磷脂中磷脂酶的失活而受到的抑制，还有磷脂本身的含量也增加了。
可以看出磷脂酶(磷脂的分解酶)在70℃下经过10分钟后失去活性。还有，含水量有所下降，通过煮沸去除了水和水溶性成分(有机酸、氨基酸和胺)，减少了鱼腥味。
在本实施例中，鱼内脏在60℃或以上温度的热水中处理，然后在不改变内脏状态的情况利用某种溶剂进行提取。但是，本发明不限于此方法。例如，可以将鱼内脏在60℃或以上温度的热水中处理后进行干燥。干燥后再利用某种溶剂进行提取。
实施例2在静冈县政府所在地烧津市的鲣鱼干加工厂内，作为副产品而获得的鲣鱼睾丸在60℃～100℃的热水中煮沸。用乙醇提取后，除去乙醇而得到脂质混合物。
根据本实施例所述的方式获得的脂质混合物中按重量含有中性脂27.6％，磷脂72.4％。在一对照例中，鲣鱼睾丸在收集后立即使用乙醇提取，得到的脂质混合物中按重量含有中性脂30.7％，磷脂69.3％。因此，根据本实施可获得磷脂含量较高的脂质混合物。
采用HPLC将磷脂酰丝氨酸从根据本实施例获得的脂质混合物中的磷脂中分离出来。磷脂酰丝氨酸的含量很高，占磷脂总量的9.5％～12.7(按重量)[12.7重量％](实例1)、12.4(按重量)[12.7重量％](实例2)、9.6(按重量)[9.6重量％](实例3)、9.5(按重量)[9.5重量％](实例4)(实例1～4的平均含量＝11.05重量％)。此外，还进行按每GC对磷脂酰丝氨酸中脂肪酸的分析。发现由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰丝氨酸占全部磷脂酰丝氨酸的比例非常高50.2％～55.2％(按重量)[53.8重量％(实例1)、51.8重量％(实例2)、50.2重量％(实例3)、55.2重量％(实例4)(实例1～4平均含量＝52.重量％)]。
附带说明的是，磷脂酰丝氨酸中的脂肪酸包括(十五烷酸pentadecanoic acid)0.6±0.4重量％；棕榈酸(palmitin acid)2.2±0.2重量％；十七烷酸(margaric acid)1.0±0.2重量％；硬脂酸(stearicacid)22.5±2.4重量％；棕榈油酸(palmtooleic acid)0.1±0.1重量％；油酸(oleic acid)1.0±0.2重量％；顺异油酸(sis-vaccenic acid)0.5±0.1重量％；硫辛酸(linoic acid)0.1±0.1重量％；a-亚麻酸(a-linolenicacid)1.9±0.3重量％；花生四烯酸(arachnidonic acid)1.5±0.7重量％；二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid)1.1±0.2重量％；二十二碳三烯酸(docosatrienoic acid)1.7±0.3重量％；二十二碳四烯酸(docosatetraenoic acid)5.6±0.4重量％；二十二碳五烯酸(docosapentaenoic acid)4.8±0.4重量％；以及二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid)52.8±1.9重量％。
因此，根据本实施例，按重量计算可以获得由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰丝氨酸的含量在50％以上。
检查磷脂酰乙醇胺时也采用了类似的分析。脂酰乙醇胺的含量在全部磷脂总量中非常高29.3％～38.2(按重量)[38.2重量％](实例1)、30.7重量％(实例2)、29.5重量％(实例3)、29.4重量％(实例4)(实例1～4的平均含量＝31.93重量％)。此外，由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰乙醇胺占全部磷脂酰乙醇胺的比例非常高46.0％～50.9％(按重量)[49.2重量％(实例1)、50.9重量％(实例2)、46.0重量％(实例3)、50.9重量％(实例4)(实例1～4平均含量＝49.3重量％)]。
顺便说明的是，磷脂酰乙醇胺中的脂肪酸包括肉豆蔻酸(myristicacid)0.1±0.1重量％；十五烷酸pentadecanoic acid)0.3±0.1重量％；棕榈酸(palmitinacid)19.8±1.1重量％；十七烷酸(margaric acid)1.4±0.2重量％；硬脂酸(stearic acid)8.4±0.6重量％；棕桐油酸(palmitooleic acid)0.6±0.2重量％；油酸(oleic acid)3.3±0.6重量％；顺异油酸(sis-vaccenic acid)1.2±0.1重量％；硫辛酸(linoic acid)0.3±0.1重量％；a-亚麻酸(a-linolenic acid)0.2±0.1重量％；花生四烯酸(arachnidonic acid)1.5±0.7重量％；二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid)2.1±0.4重量％；二十二碳三烯酸(docosatrienoic acid)0.8±0.1重量％；二十二碳四烯酸(docosatetraenoic acid)3.2±0.2重量％；二十二碳五烯酸(docosapentaenoic acid)2.4±0.3重量％；以及二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid)49.3.8±2.0重量％。
因此，根据本实施例，按重量计算可以获得含量很高的由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰乙醇胺，即按重量计算可以达到45％或更高。
实施例3在与前述实施例2中的鲣鱼睾丸同样的处理方式，将金枪鱼的睾丸水煮，用乙醇提取后并除去乙醇得到一种脂质混合物。
用上述方式获得的脂质混合物含有34.2％重量含量的中性脂和65.8％重量含量的磷脂。因此，根据本发明可获得高含量磷脂的脂质混合物。
使用HPLC将按照本实施例获得的脂质混合物中的磷脂中的磷脂酰丝氨酸分离出来。磷脂酰丝氨酸的含量很高，占磷脂总量的9.2％～111.2(按重量)[11.2重量％](实例1)、10.5重量％(实例2)、9.8重量％(实例3)、9.6重量％(实例4)、9.2重量％(实例5)(实例1～5的平均含量＝10.06重量％)。此外，还进行按每GC对磷脂酰丝氨酸中脂肪酸的分析。发现由二十二碳六烯酸组成磷脂酰丝氨酸占全部磷脂酰丝氨酸的比例非常高46.9％～53.2％(按重量)[50.1重量％(实例1)、46.9重量％(实例2)、53.2重量％(实例3)、51.0重量％(实例4)、50.5重量％(实例5)(实例1～5平均含量＝50.3重量％)]。
检查磷脂酰乙醇胺时也采用了类似的分析。磷脂酰乙醇胺的含量在所有磷脂中非常高26.8％～31.1％(按重量)[31.12重量％(实例1)、29.9重量％(实例2)、27.8重量％(实例3)、26.9重量％(实例4)、26.8重量％(实例5)(实例1～5的平均含量＝28.5重量％)]。此外，由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰乙醇胺占全部磷脂酰乙醇胺的比例非常高38.7％～46.9％(按重量)[41.7重量％(实例1)、38.7重量％(实例2)、43.4重量％(实例3)、46.9重量％(实例4)、43.4重量％(实例5)(实例1～5平均含量＝42.8重量％)]。
因此，根据本实施例，可以获得的磷脂酰丝氨酸中由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰丝氨酸的比例非常高，即45％重量或更高。还有，可以获得的磷脂酰乙醇胺中由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰乙醇胺的比例非常高，即45％重量或更高。
在上述实施例1、2和3中，鱼内脏在60℃或更高的温度下处理，然后使用一种溶剂进行提取处理，而不改变内脏的状态。但是，以上并非根据本发明的唯一方法。例如，鲣鱼或金枪鱼的内脏可在60℃或更高温度的水中处理后被干燥，并且在干燥后再用溶剂进行提取处理。
根据本发明，在提取前仅仅使用普通而低成本的热水处理就可以使鱼内脏中磷脂中的分解代谢酶失活，使内脏可以保存较长的时间。还有，根据本发明，可以获得一种高磷脂含量、低杂质含量和极少鱼腥味的脂质混合物。还有，本发明属于天然健康型，因为是由天然鱼类的内脏中提取的。还有，本发明利用通常被扔掉的鱼内脏，利用低成本的处理实现资源利用的最大化。还有，根据本发明，可以获得含有由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰丝氨酸和由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰乙醇胺的脂质混合物。具体地由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰丝氨酸占全部磷脂酰丝氨酸重量的45％或更高，由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰乙醇胺占全部磷脂酰乙醇胺重量的45％或更高。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，虽然本发明已以较佳实施例揭露如上，然而并非用以限定本发明，任何熟悉本专业的技术人员，在不脱离本发明技术方案范围内，当可利用上述揭示的方法及技术内容作出些许的更动或修饰为等同变化的等效实施例，但是凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。
权利要求
1.一种提取脂质混合物的方法，其特征在于其包括以下步骤(a)用热水或蒸汽将鱼内脏加热；以及(b)利用一种溶剂从加热过的鱼内脏中提取脂质混合物，该脂质混合物含有由多不饱和脂肪酸组成的磷脂。
2.根据权利要求1所述的提取脂质混合物的方法，其特征在于该方法还进一步包括以下步骤(c)在提取脂质混合物的步骤开始之前将加热过的鱼内脏以冷藏或冷冻的方式保存。
3.根据权利要求1所述的提取脂质混合物的方法，其特征在于其中所述的内脏在步骤(a)中被加热到60℃或更高的温度。
4.根据权利要求1所述的提取脂质混合物的方法，其特征在于其中所述的内脏在步骤(a)中被加热10～180分钟。
5.根据权利要求1所述的提取脂质混合物的方法，其特征在于其中所述的鱼包括鲣鱼、金枪鱼、鲐鱼、沙丁鱼、鳕鱼、鲷鱼、比目鱼、鲆鱼、鲨鱼、鲑鱼和鳟鱼。
6.根据权利要求1所述的提取脂质混合物的方法，其特征在于其中所述的内脏包括卵巢、睾丸、心脏、肝脏、胃和肠。
7.根据权利要求1所述的提取脂质混合物的方法，其特征在于其中所述的脂质混合物含有由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰丝氨酸和由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰乙醇胺。
8.根据权利要求1所述的提取脂质混合物的方法，其特征在于其进一步包括以下步骤(d)从所述的脂质混合物分离提取出磷脂酰丝氨酸和磷脂酰乙醇胺。
9.根据权利要求1所述的提取脂质混合物的方法，其特征在于其中所述的脂质混合物在步骤(b)中是通过使用一种有机溶剂或有机溶剂与水的混合溶剂被提取的。
10.一种使用溶剂将鱼内脏保存一预定时间的方法，其应用于提取含有由多不饱和脂肪酸组成的磷脂的脂质混合物之前，其特征在于该方法包括以下步骤(e)将鱼内脏加热；和(f)将加热过的鱼内脏冷冻或冷藏。
11.一种脂质混合物，其是通过一种方法提取得到的，其特征在于该方法包括以下步骤(a)用热水或蒸汽将鱼内脏加热；和(b)使用一种溶剂从加热过的鱼内脏中提取由多不饱和脂肪酸组成的磷脂的脂质混合物。
12.根据权利要求11所述的脂质混合物，其特征在于其包括由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰丝氨酸和二十二碳六烯酸组成的磷脂酰乙醇胺。
13.一种磷脂酰丝氨酸，其特征在于其是从权利要求11的脂质混合物中分离提取的。
14.一种磷脂酰乙醇胺，其特征在于其是从权利要求11的脂质混合物中分离提取的。
15.根据权利要求13所述的磷脂酰丝氨酸，其特征在于其中由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰丝氨酸占全部磷脂酰丝氨酸重量的45％或更高。
16.根据权利要求14所述的磷脂酰乙醇胺，其特征在于其中由二十二碳六烯酸组成的磷脂酰乙醇胺占全部磷脂酰乙醇胺重量的35％或更高。
全文摘要
本发明是关于一种从鱼内脏中提取含有多不饱和脂肪酸组成的磷脂的脂质混合物的方法，其提供一种提取含有高百分比多不饱和脂肪酸的磷脂的脂质混合物的方法。该方法包括步骤(a)用热水或蒸汽将鱼内脏加热；并且(b)利用一种溶剂从加热的鱼内脏中提取由多不饱和脂肪酸组成的磷脂的脂质混合物。通过本方法获得的该脂质混合物含有高浓度的由二十二碳六烯酸组成的多磷脂酰丝氨酸和磷脂酰乙醇胺。
文档编号C07F9/00GK1649988SQ0380752
公开日2005年8月3日 申请日期2003年3月28日 优先权日2002年3月29日
发明者平塚圣一, 铃木敏博, 桥诘昌幸, 松江叶子, 吉多川知子, 横山正秋, 田村昌巳, 藤井达也, 村松宪行 申请人:株式会社丸八村松, 静冈县地方政府