专利名称：：苯甲醇卡尼酯化合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及药物化学领域，更具体地，涉及苯曱醇卡尼酯化合物。技术背景左旋卡尼汀衍生物的研究开展于上世纪50年代，主要是围绕卡尼汀的生物活性，模仿辅酶A,制备各种酰化卡尼汀。1980年以来，随着卡尼汀在人体内作用机制.的深入研究，一系列卡尼汀转运酶被发现，卡尼汀及其衍生物的研究随之深入，其作用领域不断扩展，卡尼汀衍生物的药用价值日益突出，目前已经在临床上使用的包括乙酰卡尼汀、丙酰卡尼汀、柠檬酰卡尼汀等，其中乙酰卡尼汀、丙酰卡尼汀已经在欧洲上市。乙酰左旋卡尼汀在神经保护活性方面优于左旋卡尼汀，目前用于治疗和年龄相关的类胆碱功能不足，例如神经元纤维化疾病(痴呆症)及外周神经疾病。对慢性肾病、糖尿病人也有一定的疗效。丙酰左旋卡尼汀主要用于慢性心衰和外周血管疾病。其疗效均优于左旋卡尼汀。但这些卡尼汀衍生物由于特殊的化学结构，具有极强的引湿性，且它们在水溶液中还存在很强的水解倾向，给制剂的研究开发带来了极大的不便，目前上市的品种仅限于片剂、胶嚢、冻干粉针等少数剂型，且制剂难度较大。本发明合成了一系列酰基卡尼汀的酯类，即酰基卡尼汀的前药，很大程度上改善了其引湿性，相应增加了其稳定性，并可延长在体内的作用时间，具有很好的研究前景。
发明内容本发明提供了下式l化合物R其中，R为C1-20烃基，该烃基中的一个或多个碳原子可被氮、氧或.硫原子替代，并且R任选被一个或多个卣素、羟基、氨基、巯基、硝基、氧基、羧基或氰基取代；X—为药学上可接受的抗衡离子，该离子可以为一价、二价或三价离子，化学领域技术人员已知当X—表示二价离子时，该抗衡离子与川穹醇卡尼酯母体化合物的摩尔比为1:2,当X—表示三价离子时，该抗衡离子与川芎醇卡尼酯母体化合物的摩尔比为1:3,例示性的抗衡离子比如无机离子如氯离子、溴离子、碘离子、硫酸氢根、.硫酸根、磷酸根等，比如有机离子如天冬氨酸根、柠檬酸根、酒石酸根、富马酸根、甘油磷酸根、乳酸根、粘酸根、马来酸根、乳清酸根、草酸根、烟酸根、三氯乙酸根、三氟乙酸根、甲磺酸根、帕莫酸根等。在本发明的优选实施方案中，式1化合物中*所示碳原子为R构型。在本发明的优选实施方案中，式I化合物中的X—表示氯离子。本发明还提供了下面的具体化合物氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)-乙酰氧基-N，N,N-三甲基-l-丙铵氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)-丙酰氧基-N,N，N-三曱基-l-丙铵氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)-丁酰氧基-N，N,N-三曱基-1-丙铵氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)-异丁酰氧基-N，N,N-三曱基-1-丙铵氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)-戊酰氧基-N，N，N-三曱基-1-丙铵氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)-异戊酰氧基-N，N,N-三曱基-1-丙铵氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(11)-己酰氧基-N,N,N-三曱基-1-丙铵氯化3-笨曱氧曱酰基-2-(R)-辛酰氧基-N,N，N-三曱基-1-丙铵氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)-油酰氧基-N，N，N-三曱基-l-丙铵氯化3-苯曱氧甲酰基-2-(R》肉桂酰氧基-N，N,N-三甲基-l-丙铵。本发明另一方面提供了上述化合物的制备方法，以左旋卡尼汀为原料,其雍基与酰氯(RCOC1)反应形成l.旨，所得产物与草酰氯反应从而使得卡尼汀的羧基转化为酰氯，再与苯曱醇反应成酯，从而得到终产物。反应流程如下J(3)Titlecompound(4)通过常规的改换酸根的方式，比如将所得产物与碱混合，除去盐，然后弄与酸混合的方式，即可得到X—为其它抗衡离子的化合物。根据合成化学的一般理论可知，在上述制备流程中，手性中心不会发生消旋化，即，采用R构型原料(左旋卡尼汀)将得到R构型的终产物，通过圆二色谱和/或CD镨也证明了i一结果。本文所述"烃基"具有化学领域上的通用含义，即，由碳原子和氬原子组成的基团，包括烷基、链烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基等。具体实施方式实施例1肉桂酰氯的制备取肉桂酸29.6g(0.2mol)加入氯化亚砜100ml(0.84mol),搅拌溶解，加热回流4h，蒸除过量的氯化亚砜，得黄色固体，为肉桂酰氯，直接用于下一步反应。盐酸氯化肉桂酰左卡尼汀的制备取盐酸左卡尼汀30.06g(0.125mol)加入CF3COOH100ml,搅拌溶解，O"C分次加入上部所得肉桂酰氯，滴毕升温至45~50°C,保温反应20小时。反应完毕取出冷却至室温，加入丙酮800ml,搅拌2小时，过滤，滤液中加入乙醚1000ml,搅拌至有白色沉淀析出，放入水箱冷藏12小时。取出后，搅拌1小时，过滤，干燥，得白色固体36.30g,即盐酸氯化肉桂酰左卡尼汀，收率76%盐酸氯化肉桂酰左卡尼汀酰氯的制备取盐酸氯化肉桂酰左卡尼汀26.4g(0.09mol)加入二氯曱烷100ml,搅拌溶解，O'C分次15ml(0.12mol)草酰氯，滴毕升温至45~50°C，保温反应4小时。蒸除溶剂，得白色固体，即盐酸氯化肉桂酰左卡尼汀酰氯直接用于下步反应。盐酸氯化肉桂酰左卡尼汀苯曱酯的制备将所得盐酸氯化肉桂酰左卡尼汀溶于100ml无水DMSO中，加入20ml(0.18mol)苯曱醇，逐渐升温直50。C,TLC监测反应完全，冷却至室温，加入乙醚80ml，搅拌2小时，有白色沉淀析出，过滤，干燥，得白色固体21.80g,即盐酸氯化肉桂酰左卡尼汀苯甲酯，收率58%。、精制取盐酸氯化肉桂酰左卡尼汀苯曱酯8.36g(0.02mol)溶于25ml95。/。乙醇中，加入25ml乙酸乙酯，50ml乙醚，冷藏24小时，得无色结晶。M.p:90~920CiHNMR(300Hz,D7O):2.71-2.76(2H,m,-CH2COO-);2.98(9H,S,(CH^N-);3.58(2H,d,d,-NCH2-)二4.79(2H,s,-￡I^C6H5);5.60(lH,m,-NCH2￡H-);6.05(lH,d，-CH=CHCOO-):6.05(lH,d,-CH=￡HCOO-);6.84-7.00(5H,d，-CH^sii^);7.10-7.4(5H,d,-CHHCH^Hs)IR(KBrplate):3067，3027(yCH),1729，1695(yc=o),1669,1628(yc=c)，1504,1588(Yat-c),I486，1431(SCH2,cH3)，1208(vc.N),681,695,723,758,917(aromaticring).ESI-MS(m/z):436.2[M十H]十.实施例2根据实施例1相似的方法，以乙酰氯代替肉桂酰氯，制备得到R为CH3的式l化合物。iH画R(300Hz,D，O):2.01(3H.s,CH2COO-):2.62-2.65(;2H,m,-CH2COO-):3.12(9H,S,(CH^N-);3.58(2H,d,d,-NCH2-):4.56(2H,s,-CH2C6Hs):5.53nH,m,-NCH7CH-);7.35-7.39(5H,d,-CH2G迈5)IR(KBrplate):3013C/ch),1733(yoo)1478，1411(Scm,CH3),1215(vc.N),709，726,768，934(aromaticring).ESI掘(m/z):294.4[M+H]+.实施例3根据实施例1相似的方法，以丙酰氯代替肉桂酰氯，制备得到R为CH2CHb的式I化合物。NMR(300Hz，D70):1.00-1.05(3H,t,CH2CHCOO-):2.5l-2.58(2H,m,-CH3CH2COO-):3.03-3.08(2H.m,-CH2COO-);3.19(9H,S'(CH^N-):3.58(2H,d，d,-NCHr);4.49(2H,s,-CH2C6HQ;5.01(lH,m,-NCH2￡H-);7.25-7.30(5H,d，-CH^gH^)IR(KBrplate):3061,2926(怖)，1725(》0)，1479,1403(Sch2,ch3)，1177(v。N),727，768，876,933(aromaticring).ESI-MS(m/z):308.7[M+H]+.实施例4根据实施例1相似的方法，以丁酰氯代替肉桂酰氯，制备得到R为CH2CH2CH3的式I4匕合物。iHNMR(300Hz,D2O):0.75-0.81(3H，t,￡^CH2-);1.40-1.47(2H,m，-CH3￡Mr);2.18-2.22(2H.m,-CH，CH2COO-):3.14-3.27(2H,m,-CHCH2COO-):3.05(9H，S，(￡Ha)2N-);3.58(2H.d,d,-NCH2-):5.10(2H,s,-CH2C6HO:5.57(lH,m,-NCH7CH-):7.3l7.37(5H,d,陽CH2e迈》IR(KBrplate):2966(yCH)，1739(》。)，1690(yc=c),1504,1588(yat-c),1483，1456(Scm,ch3),1173(vc-n),681，699，752，968(aromaticring).ESI-MS(m/z):322.4[M+H]+.实施例5根据实施例1相似的方法，以异丁酰氯代替肉桂酰氯，制备得到R为CH(CH3)2的式I4t合物。力NMR(300Hz,D7O):0.97-1.09(6H,m,(CH2)2CH-);2，46-2.51(lH,m,(CHACH-);2.75-2.78(2H,m,-CH2COO-):2.83(9H,S,(CH^3N-):3.56(2H,d,d,-NCH2-):5.12(2H,s,-e￡bC6H5);5.59(lH,m,-NCH2￡Ji-);7.32-7.38(5H，d,-CH^^IR(KBrplate):3229,2971(YcH)，1732(yoo)，"80,1391(5ch2,ch3),1179(vc.N),700,718，755,799,935(aromaticring).ESI-MS(m/z):422.6[M+H]+.实施例6根据实施例1相似的方法，以戊酰氯代替肉桂酰氯，'制备得到R为CH2CH2CH2CH3的式I4匕合物。&NMR(300Hz，D，O):0.77-0.80(3H,t,CH2CH");0.88-0.93(2H,m,-CH3CHr):1.45-1.47(2H,m,-CH7CH2CH7-):2.54-2.62(2H、m，-CH7CH2COO-):3.04-3.07(2H,m,-CHCH2COO-);3.13(9H,S,(eH^N-);3.58(2H，d,d,-N涯-);5.08(2H,s，-涯C6H5);5.55(lH,m,-NCH2eH-);7.34(5H，d，-CH2￡,IR(KBrplate):3020,2959(yCH),1732(yc=0),1480,1455(SCH2，CH3),1173(vc.N)，616,700,753,936(aromaticring).ESI-MS(m/z):337.4[M+H]+.实施例7根据实施例1相似的方法，以异戊酰氯代替肉桂酰氯，制备得到R为CH2CH(CH3)2的式I化合物。&NMR(300Hz，D2O):0.78-0.87(6H,m,(eH^CH-);2.15-2.19(lH,m,(CH3)2￡H-);2.77-2.84(2H,m,-CH2COOCH-);3.10-3.15(2H,m,-CH2COOCH7-);3.07(9H,S,(CH^N-):3.56-3.76(2H,d,d,-NCHr):5.11(2H,s,-CH2C6Hs);5.59(lH,m,-NCHCH-):7.34-7.38(5H,d,-CH^HJIR(KBrplate):3020,2957(yCH),1736,1704(》。)，1488,1412(SCH2,CH3),1181(vC-N)，665,699，752，880，938(aromaticring).ESI-MS(m/z):336.5[M+H]+.实施例8根据实施例1相似的方法，以己酰氯代替肉桂酰氯，制备得到R为CH2CH2CH2CH2CH3的式I讦匕合物。!HNMR(300Hz,D2O):0.62-0.64(3H,t￡ifcCH2-);0.96-1.02(4H，m,-CH3ei^Q^-);1.98-2.07(2H,m,-CH2CH，COO-);2.53-2.62(2H,m,-CH7CH2COO-):3.07-3.12(2H,m,-CHCH2C0O-);3.04(9H,S,(QH^N-);3.56(2H，d,d,陽N幽國);4"0(2H，s,-QH2C6H5);5.50-5.57(lH，m,-NCH2￡H-);7.29-7.31(5H,d，-CH2￡6H5)IR(KBrplate):3014,2957(YcH),1734(Yc=o),1480，1413(SCH2，CH3),1174(vc.N),700,727，768,935(aromaticring).ESI-MS(m/z):350.4[M+H]+.实施例9根据实施例1相似的方法，以辛酰氯代替肉桂酰氯，制备得到R为CH2(CH2)5CH3的式I化合物。M.p:122-125°CNMR(300Hz，D2O):0.76-0.78(3H、t,CH3CH-);l.08-1.24(8H,tn,-CH"CH2)r):2.35-2.40(2H,m,-￡H2CH2COO-);2.75-2.78(2H,m，-CH2￡H2COO-);3.10-3.16(2H,ni,-CHNCH2￡H-);7.33-7.39(5H，d，墨CH2g迈^)IR(KBrplate):3017，2927(yCH)，1735,1698(yc=0)，1646(Yc=c)，1482,1416(5CH2,CH3),1174(vc.N),666,726,880，938(aromaticring).ESI國MS(m/z):378.6[M+H]+.实施例10根据实施例1相似的方法，以油酰氯代替肉桂酰氯，制备得到R为(CH2)7CH=CH(CH2)7CH3的式I4b合物。HNMR(300Hz,D2O):0.86-0.90(3H,t￡^CH2-);1.18-1.42(20H,m,-fCH^CH7CHCHCH"CH2)^1.68<;4H,tn,-CH2CHCHCH2-);2.22-2.29(2H,m,-CH2CH7COO-):2.75-2.80(2H,m,-CH2CH2COO-);3.03-3.10(2H,m,CHCH2COO-、:3.24(9H,s,(C叫N-、二3.87(2H,d,d，-N￡H2-);5.10(2H，s,-￡i^C6H5);5.51-5.62(lH,m,-NCH2￡H-);6.43(lH,d,-￡H=CH-);6.87(lH,d，-CH=CH-):7.27-7.36(5H,d,-CH2￡gHs)IR(KBrplate):3034,3028(yCH)，1735,1688(yc=o),1479,1468(SCH2,CH3),1184(vc.N),705,712,753,799,914(aromaticring).ESI國MS(m/z):552.7[M+H]+.实施例11加速稳定性实验精密量取丙酰卡尼汀与实例3化合物约50mg各三份，置2ml的量瓶中，分别加注射用水至刻度，于温度40。C土2。C、相对湿度75%±5%条件下放置3个月，分别于O、1、2、3月取样用高效液相测定各项指标。丙酰卡尼汀与实例3化合物加速试验结果(RH75%,40°C)批号时间(月)性状澄明度有关物质含量(°/。)丙酰卡尼汀实例3化合物01230123无色澄明溶液合格1.1898.82无色澄明溶液合格4.5195.45无色澄明溶液合格5.7594.25无色澄明溶液合格7.1592.85无色澄明溶液合格1.4198.59无色澄明溶液合格1.6798.33无色澄明溶液合格1.5398.47无色澄明溶液合格1.9598.15实例3化合物在水溶液中的稳定性明显高于丙酰卡尼汀。实施例12引湿性实验精密量取丙酰卡尼汀与实例3化合物约50mg各三份，置2ml的量瓶中，于温度"。C土2。C、相对湿度35%±5%条件下放置，24小时后，观察，丙酰卡尼汀已变为澄清水溶液，实例3化合物只略微有吸潮现象.比较本发明实例3化合物与丙酰卡尼汀比较引湿性明显低于丙酰卡尼汀实施例12神经细胞保护实验损伤模型CoCb造成的缺氧损伤细月包活力测定方法MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide)法试验步骤1、取对数生长期的PC12(pheochromocytoma)细胞，胰酶消化后接种到6孔板中，细胞密度约为5x1()S个/ml，培养条件为DMEM补加10%马血清和5%胎牛血清；2、待细胞贴壁以后，加入2^J肝微粒体酶和终浓度为10mg/l的样品(实施例中的化合物)，样品溶剂为DMSO，储备液浓度为10g/l;3、4小时后加入，终浓度为500,300,或200pM的CoCl2,继续孵育12-16小时。采用MTT法测定川芎參系列衍生物对CoCl2造成的PC12细胞缺氧损伤的保护作用。在各种处理的PC12细胞中加入溶液，使其终浓度达到0.5mg/mL37。C下孵育2-4小时。终止孵育后，吸去上清，加入DMSO(pH4.7),溶解活细胞中的曱臜颗粒。用酶标仪在570nm波长下测定光密度值OD570，参考波长为630nm(吸光值表示为OD63o)。活性试验结果见下表:<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>结果表明本发明化合物在肝微粒体酶作用下能发挥卡尼汀、乙酰卡尼汀的作用。权利要求1、下式化合物其中，R为C1-20烃基，该烃基中的一个或多个碳原子可被氮、氧或硫原子替代，并且R任选被一个或多个卤素、羟基、氨基、巯基、硝基、氧基、羧基或氰基取代；X-为氯离子、溴离子、碘离子、硫酸氢根、硫酸根、磷酸根、天冬氨酸根、柠檬酸根、酒石酸根、富马酸根、甘油磷酸根、乳酸根、粘酸根、马来酸根、乳清酸根、草酸根、烟酸根、三氯乙酸根、三氟乙酸根、甲磺酸根或帕莫酸根。2、根据权利要求1所述的化合物，其中*所示碳原子为R构型。3、根据权利要求1所述的化合物，其中X-为氯离子。4、根据权利要求1所述的化合物，其为氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)，乙酰氧基-N,N,N-三曱基-l-丙铵氯化3-苯曱氧甲酰基-2-(11)-丙酰氧基-N，N,N-三曱基-1-丙铵氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)-丁酰氧基-N,N,N-三甲基-l-丙铵氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)-异丁酰氧基-N,N，N-三曱基-1-丙铵氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)-戊酰氧基-N,N,N-三曱基-l-丙铵氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)-异戊酰氧基-N，N,N-三曱基-l-丙铵氯化3-苯曱氧甲酰基-2-(R》己酰氧基-N,N,N-三曱基-1-丙铵氯化3-苯甲氧曱酰基-2-(R)-辛酰氧基-N,N,N-三曱基-l-丙铵氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)-油酰氧基-N,N，N-三曱基-1-丙铵氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(11)-肉桂酰氧基-N,N,N-三曱基-1-丙铵。5、权利要求1所述化合物的制备方法，其特征在于，以卡尼汀为原料，其羟基与式RCOCl的酰氯反应形成酯，所得产物与草酰氯反应从而使得卡尼汀的羧基转化为酰氯,再与苯曱醇反应成酯，从而得到所需产物，其中R的含义如权利要求1所述。6、根据权利要求1所述的化合物在制备用于神经细胞保护和治疗心脑血管疾病药物中的用途。全文摘要本发明公开了一类苯甲醇卡尼酯化合物，其具有较低的引湿性和较好的稳定性，为全新结构的卡尼汀的前药。文档编号C07C229/00GK101219963SQ20081001421公开日2008年7月16日申请日期2008年1月28日优先权日2008年1月28日发明者波冯,崔美兰,张志华,徐文方,徐桂英,丽王,翟海民,贡肖巍,赵雪坤申请人:山东大学;山东齐都药业有限公司