专利名称：双取代芳香酰基乙二醇类化合物及其医药用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及有机化学、药物化学和药理学领域，具体而言，本发明涉及 双取代芳香酰基乙二醇类化合物及其可药用盐以及它们的制备方法和医药用
途，该类化合物被发现有抑制乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的功能；同时对
两株人体肿瘤细胞显示出一定的细胞毒性，可以预期用于制备治疗相关的5 肝病毒感染性疾病以及肿瘤疾病的药物用途。
背景技术：
乙型病毒型肝炎(HepatitisB)是中国多发和常见重型传染'性疾病，其病 原体是乙型肝炎病毒(HBV)。全国约1.2亿HBV携带者，每年死于原发性 肝癌的15万人中，绝大多数与乙型肝炎感染有关。目前，临床上对HBV病 患的治疗方案只能达到抑制HBV复制和继发感染，最主要药物仍是核苷类ll 物如拉米呋啶(3-TC)、恩替卡韦、阿德福韦(ADV)等，它们虽然能有i 地控制病情，但一则售价昂贵，二则长期使用均可出现耐药性，以及不同程 度的反跳，三是长期使用核苷类药物出现的较为明显的众所周知的不良作用。 所以从民族民间长期使用的药物中发现新的非核苷类乙肝病毒抑制剂有着很 大的意义，选择先导化合物主要的判断指标在于该类新颖的非核苷类物质必 须具有对乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBVDNA)和/或乙肝表面抗原(HBsAg)
的抑制活性。
天然产物中的绿原酸(chlorogenic acid)是由咖啡酸(caffeic acid)与逢 尼酸(鸡纳酸，quinicacid)组成的一取代的缩酚酸，为众多药材(如金银花、 茵陈、杜仲)以及中成药(如复肝宁、双花注射液、粉刺口服液)中抗菌解 毒、消炎利胆的主要有效成分，同时是某些中药制剂质量控制的重要指标。 绿原酸是一种重要的生物活性物质，具有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝 利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、清除自由基和兴奋中枢神经系统等作用， 尤其是在病毒防治领域有重要用途[赵昱等"咖啡酰奎尼酸类化合物研究进 展"，中国中药杂志，2006， 31 (11) ， 869—874]。
奎尼酸的立体结构过于复杂，需要考虑到原材料的成本以及立体定位、保护与脱保护的机制问题等，不利于工业化生产。故而科学家一直致力于用简单的五元环或者六元环环状体系将此复杂的六元环再简化。例如，近期根据改造的奎尼酸为先导化合物，科学家陆续从菊科植物菊苣中发现了新的抗
病毒咖啡酰有机酸酯类化合物L-菊苣酸(二咖啡酰酒石酸)[Robinson, W.E. Jr./"/e"MW. 1998， 15, 129-137]。此先导化合物对fflV病毒整合酶(IN)具有强效抑制活性，同时无毒范围较大，有利于发展成为抗HIV药物。许多的,效关系研究因而相继开展，并制备出多种L-菊苣酸衍生物，其中活性化合d抑制fflV-1整合酶活性的ICso值约为0.8 1.1 [King, P丄，Robinson, W.E.Jr.等， / MW. O^m. 1999， 42， 497—509; Lin, Z., Bruke， T.R. Jr., / Med O^w.1999,42, 1401-1414]。上述研究报道结果指出咖啡酰结构中的邻苯二酚部分在整个分子的抑制活性中起着相当重要的作用，然而过多的酚羟基也会带来较大的毒性。
考虑到以上因素，以及咖啡酰奎尼酸类和L-菊苣酸化合物的分离较为困难等因素，科学家们又设计合成一系列改变奎尼酸母核而仍然保持其生物g
性的化合物。通过对菊苣酸中连接体的不断简化，得到了一系列的有较高生物活性的菊苣酸类似物；其中包括保留菊苣酸一个羧基的；将两个羧基用烷基或环烷基替代的；将两个羧基直接去掉的以及将两个羟基之间连接链增长的等不同系列，在此中间最引人注目的当属二咖啡酰乙二醇，其抑制HIV-l整合酶的1(350值达到0.4 pM，是菊苣酸的2-3倍，但是它的毒性很大，于是其医药方面的用途受到了限制。
在此基础上，本发明人选择以乙二醇代替L-酒石酸为奎尼酸的替代母銜;作为一个连接体将两个芳香化合物连接起来形成一个芳香酰基乙二醇酯类化合物。我们将该化合物进行改造，减少酚羟基以降低整个分子的毒性，用不同取代的苯丙烯酰替代咖啡酰，引入卤素原子，加入呋喃环系，用烷氧基代替咖啡酰基的羟基等作为新的尝试。
基于抗HIV药物和HBV药物的高同源性，本发明对合成出的芳香酰基乙二醇酯类化合物测试了其对乙肝表面抗原HBsAg的抑制活性，以期寻找更多样的能对乙肝病毒复制产生抑制作用的L-菊苣酸类类似物。
在我们合成的该系列化合物中，I~e为已见报道的化合物[Lewis,Frederick D.等，/owrwa/ q/" //ze Jwen'caw C7zewfca/ <Soc/e^, 1986, 108(11)，3005—3015 ;iang， Xikui 等，Jbwwa/ o/ f/ze CTzewn.ca/ iSocz"e^， CTaewz'ca/Cowmwm'o^om. 1988, 11,689-690]，但其公开的化合物用途是参与光化学反
5应中肉桂酸的异构体的选择性合成或将苯丙烯酰乙二醇作为形成大环化合物
的原料。关于本发明所涉及的苯丙烯酰乙二醇抑制HIV-1整合酶活性、抑制
乙肝表面抗原活性、细胞毒活性等化合物的生物活性及相关应用则未见报道。为了探索本发明制备得到的芳香酰基乙二醇酯类化合物的其他生理活
性，我们还采用了 MTT (3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐)法对此类化合物针对两种人体肿瘤体外培养细胞株[人子宫颈癌细胞(Hela)和人肺癌细胞(A549)]进行了生长抑制活性测试，从而完成本发明。
发明内容
本发明的目的在于提供一类用于制备新的抗乙肝病毒和细胞毒类抗肿瘤药物的化合物，具体而言，本发明提供了一类式(I)所示结构的双取代芳f酰基乙二醇类化合物及其可药用盐
R广O 0—R2
式(I)
其中取代基R,和R2可以相同或不同，分别选自2-呋喃环-3-烯丙酰基，2位或4位甲氧基取代的苯甲酰基，邻位或间位或对位二甲氧基取代的苯甲酰基，甲氧基或卤素单取代的3-苯烯丙酰基，或邻位或间位或对位卣素二取代的3-苯烯丙酰基；其条件是R,、 R2不能同时为3位甲氧基单取代的3-苯;i丙酰基或同时为4位甲氧基单取代的3-苯烯丙酰基，也不能同时为4位氟单取代的3-苯烯丙酰基，R,、 R2还不能同时为3，4-二甲氧基取代或同时为2,5-二甲氧基取代的3-苯烯丙酰基。
本发明的另一目的是提供了式(I)化合物的制备方法。
本发明的又一目的是提供了所述之芳香酰基乙二醇类化合物及其可药用盐用于制备抑制乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的药物用途。
本发明的再一目的是提供了式(I)化合物及其可药用盐用于制备细胞毒:类抗肿瘤药物的用途。
本发明的再一个目的是提供了一种含有式(I)化合物的用于抗乙肝病毒疾病的药物组合物和/或细胞毒类抗肿瘤药物。根据本发明，该药物组合物中可加入各种药用赋形剂、添加剂及载体。
本发明优选的式(I)化合物及其可药用盐列举如下
I-a. l-氧-[3-(4-甲氧基苯)烯丙酰]-2-氧-4-甲氧基苯甲酰-乙二醇；I-b. 1，2-二-氧-[3-(4-氯苯)-烯丙酰]-乙二醇；I《1,2-二-氧-[3-(2-呋喃基)-烯丙酰]-乙二醇；I-d. 1,2-二-氧-[3-(2，4-二氯苯)-烯丙酰]-乙二醇(
H3CO
OCH3
本发明还提供了化合物1，2-二-氧-[3-(4-甲氧基苯)烯丙酰]-乙二醇(I~e)用于制备细胞毒类抗肿瘤的药物用途。
本发明的式(I)化合物或其可药用盐对乙型肝炎表面抗原(HBsAg)表达有一定的抑制作用，其还对两种人体肿瘤体外培养细胞株[人子宫颈癌细胞(Hda)、人肺癌细胞(A549)]有一定的抑制作用。根据本发明，该类化合物或其可药用盐可以与药学上常用的辅料或载体结合，制备得到可以用于治疗病毒性乙肝疾病相关的药物组合物和/或细胞毒类抗肿瘤药物。我们以乙二醇为奎尼酸的替代母核，作为一个连接体将两个芳香化合物连接起来形成一个芳香酰基乙二醇酯类化合物，并用不同取代的苯丙烯酰替代咖啡酰进行改造合成系列衍生物。我们对本发明合成出来的系列芳香酰基乙二醇酯类化合物进行活性测试，包括对所合成出之化合物进行了对乙肝表面抗原HBsAg以及对两种人体肿瘤体外培养细胞株的抑制生长活性测试。
下面通过实施例进一步说明本发明。实施例给出了代表性化合物的合成及相关结构鉴定数据。必须说明，下述实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护的范围。
实施例1:化合物I-a即1-氧-[3-(4-甲氧基苯)烯丙酰]-2-氧-4-甲氧基苯甲酰-乙二醇的制备 -'向反应瓶中加入3-(4-甲氧基苯)烯丙酸(85毫克，0.48毫摩尔)，4-甲氧基苯甲酸(73毫克，0.48毫摩尔)，二环己基碳二亚胺(200毫克，0.97毫摩尔)，无水二氯甲垸10毫升，在室温下搅拌20分钟，出现白色混浊后，加入乙二醇(20毫克，0.32毫摩尔)，4-二甲氨基吡啶(DMAP， 12毫克，O.l毫摩尔)，整个溶液在室温下反应2天，抽滤除去不溶物，蒸去溶剂，脱溶得到白色固体，柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯=10:1)，分离得到白色固体95毫克，产率为83%。 ',
化合物I-a:白色固体，熔点103~105°C (氯仿)；& (氯仿/甲醇/甲酸
=50:2:1): 0.48;核磁共振氢谱(400 MHz，氘代甲醇)3 3.86 (6 H,单峰，OO/j),4.53 (4 H,多重峰，H-l， 2)， 6.43 (1 H，双峰，7=16.0 Hz， H-2'), 7.00 (4 H，双峰，Hz, H國6', 8'， 4"， 6〃)， 7.65 (2 H,双峰，《/=8.4 Hz, H-5'， 9')， 7.68 (1 H,双峰， /=16.0 Hz, H-3'), 7.99 (2 H,双峰,《7=8.4 Hz， H-3"， 7");电喷雾质谱ESI-MS w/b374.04 ([M+H2。n。
根据实施例1相同的方法制备得到表一所示实施例24化合物
/~\
R广O 0—R2
8表一_
实施例号 化合物编号
2 I-b
3 I—c
4 I"d
下面列出表一中各化合物的理化数据化合物I-b:白色固体，i y(氯仿/甲醇/甲酸50/2/1): 0.42;核磁共振氢
谱。HNMR) (400MHz，氖代甲醇)3 4.50 (4H，多重峰，H-l, 2)， 6.40 (2H,双峰，《/=16.0 Hz， H-2'， 2")， 7,21 (4H，双峰，《/=8.7 Hz, H-6', 6"， 8', 8")， 7.25 (4H，双峰,/=8.7 Hz， H國5', 5"， 9'， 9") ， 7.66 (2H，双峰，《/=16.0 Hz, H-3'， 3")。
化合物I"C:白色固体，& (氯仿/甲醇/甲酸50/2/1): 0.58;核磁共振鸳
谱。HNMR) (400MHz，気代甲醇)(5 4.48 (4H，多重峰，H-l， 2)， 6.29 (2H，多重峰，H-6', 6")， 6.38 (2H,双峰,J=16.0 Hz, H-2'， 2")， 6.72 (2H,多重峰，H-5', 5")，7.27 (2H,多重峰，H画7', 7")，7.56(2H,双峰，《/=16.0 Hz, H-3', 3")。
化合物14:白色固体，& (氯仿/甲醇/甲酸50/2/1): 0.31;核磁共振氢
谱(^HNMR) (400MHz，氘代甲醇)3 4.49 (4H，多重峰,H-l, 2), 6.36 (2H，双峰，《/=16.0 Hz, H-2'， 2")， 7.36 (2H,双峰，/=8.6 Hz， H-8'， 8"), 7.50 (2H，单峰jH-6', 6"), 7.76 (2H,多重峰，H-9'， 9"), 7.58 (2H，双峰，J=16.0 Hz, H曙3'， 3")。
实施例5:化合物"即1，2-二氧-[3-(4-甲氧基苯)烯丙酰]-乙二醇的制备
向反应瓶中加入3-(4-甲氧基苯)烯丙酸(173毫克，0.97毫摩尔)，二环己基碳二亚胺(200毫克，0.97毫摩尔)，无水二氯甲烷10毫升，在室温下搅拌20分钟，出现白色混浊后，加入乙二醇(20毫克，0.32毫摩尔)，4-二甲氨基吡啶(12毫克，O.l毫摩尔)，整个溶液在室温下反应2天，抽滤除
9去不溶物，蒸去溶剂，脱溶得到白色固体，柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯=
10:1)，分离得到白色固体73毫克，产率为60°/。。<formula>formula see original document page 10</formula>
化合物I-e:白色固体，熔点140~141°C (氯仿)；/^(氯仿/甲醇/甲酸
=50:2:1):0.6;核磁共振氢谱(400 MHz,氖代甲醇)(5 3.84 (6 H，单峰，OC/f》,4.48 (4 H，单峰，H-l， 2), 6.35 (2 H,双峰，J-16.0 Hz， H-2', 2〃)， 6.90 (4 H,双峰， 7=8.8 Hz， H國6'， 8'， 6", 8"), 7.48 (4 H,双峰， /=8.8 Hz, H-5'， 9' ， 5", 9")， 7.68 (2 ri;双峰，J=16.0 Hz， H-3', 3〃)；电喷雾质谱ESI-MS m/z: 399.87 ([M+H20]+)。
本发明的式(I)化合物或其可药用盐具有抑制乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的功能；可以用于制备治疗相关的乙肝病毒感染性疾病药物。该药物可以与药学上常用的辅料或载体结合，用制药领域中的常规技术制备得到具有抗病毒活性从而可以用于防治病毒引起的疾病的药物组合物。上述各类药物组合物可以采用注射剂、片剂、胶嚢剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴丸剂、外用搽剂、软膏剂等剂型药物，还可以利用现有公知技术制备成其控释、缓释剂型及纳米制剂，还可以应用靶向药物制剂技术制备成相应药物剂型和给药方式。
本发明的式(I)化合物或其可药用盐可以与现已上市的治疗乙型病毒性肝炎药物如拉米呋啶(lamivuding)、阿德福韦及其二匹伏酯(adevovir/adevovirdipivoxil)、恩替卡韦(entecavir)、恩曲他滨(emtricitabine)、克来福定(clevudine)、泛昔络韦(famciclovir)、洛布卡韦(lobucavir)、干扰素(IFN)等联合使用，制备得到具有治疗乙型病毒性肝炎的药物。上述各类药物组食物均可以采用注射剂、片剂、胶囊剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴丸剂、外用搽剂、软膏剂等剂型药物，还可以利用现有公知技术制备成其控释、缓释剂型及纳米制剂，还可以应用靶向药物制剂技术制备成相应药物剂型和给药方式。
此外，本发明的式(I)化合物或其可药用盐，以及化合物I-e (即1,2-二-氧-[3-(4-甲氧基苯)烯丙酰]-乙二醇)或其可药用盐对于人子宫颈癌细胞(Hda)和人肺癌细胞(A549)具有一定的生长抑制活性，可期待作为防i相关肿瘤性疾病药物用途。
本发明的式(I)化合物或其可药用盐，以及化合物I-e(即1，2-二-氧-[3-(4-甲氧基苯)烯丙酰]-乙二醇)或其可药用盐可以与药学上常用的辅料或载体结合，制备得到具有抗肿瘤用途的药物组合物。上述药物组合物可以采用注射剂、片剂、胶囊、贴片、皮下植埋剂等剂型，或其他采用公知理论和技术制备的控释、缓释剂型以及纳米制剂。
本发明的式(I)化合物或其可药用盐，以及化合物I-e(即1，2-二-氧-[3-(,甲氧基苯)烯丙酰]-乙二醇)或其可药用盐可以与现己上市的抗肿瘤药物如d类药物顺铂(DDP)、喜树碱类药物伊立替康(Irinatecan， CPT-ll)、长春花碱类药物失碳长春花碱(Vinorebine， NVB诺维本)、脱氧胞昔类药物吉西他滨(Gemcitabine， Gemzar，健择)、足叶乙甙(Etoposide)、紫杉醇(Paclitaxel)等联合使用，制备得到具有肿瘤生长抑制活性的细胞毒性的药物组合物，可用于制备治疗多种肿瘤疾病的药物。
为了更好地理解本发明的实质，下面分别用药理实施例的形式简述式(I;化合物，以及1,2-二-氧-[3-(4-甲氧基苯)烯丙酰]-乙二醇(化合物I-e)对乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)抑制试验以及两株人体体外培养肿瘤细胞株的生长抑制之药理实验结果，说明其在抗病毒药物和抗肿瘤药物开发领域中的用途。药理实施例给出了式(I)化合物和1,2-二-氧-[3-(4-甲氧基苯)烯丙酰]-乙二醇(化合物I—)的部分活性数据。同样必须说明，本发明的药理实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护的范围。
药理实施例l:化合物I-a对乙型肝炎病毒表面抗原的抑制作用1.1细胞培养
将HepG2.2.15细胞培养于含10%灭活胎牛血清，100U/毫升青霉素和100微克/毫升链霉素，100微克/毫升G418的DMEM培养基中，置37'C， 5%二氧化碳C02， 100%相对湿度的培养箱中培养。
1.2采用MTT法测定化合物I-a对HepG2.2.15细胞生长的抑制作用
取对数生长期的HepG2.2.15细胞，用培养基将细胞稀释成1乂105个/毫升，接种于96孔细胞培养板，每孔100微升，在37"C, 5% C02, 100%相对湿度的培养箱中培养24小时后加入用培养基稀释的化合物I-a，浓度分别为100微克廣升，20微克/毫升，和4微克/毫升，每孔200微升，每个浓度设三个复孔，置于37"C， 5% C02, 100%相对湿度的培养箱中培养，培养72小时 后，每孔加入5毫克/毫升MTT (3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐) 试剂10微升，继续培养4小时，弃去培养基，每孔加入二甲基亚砜DMSO 20G 微升，用振荡器振荡20分钟，在570nm波长下用酶标仪测定OD值。以只加 培养基的培养孔为对照孔。实验重复三次。
抑制率(％)=(对照孔OD值-实验组OD值)/对照孔OD值X 100%。
1.3测定化合物I-a对乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的抑制作用
取对数生长期的HepG2.2.15细胞，用培养基将细胞稀释成1乂105个/毫 升，接种于96孔细胞培养板，每孔100微升，在100%相对湿度的5% CC1 培养箱中37"C培养24小时后加入用培养基稀释的化合物I-a化合物，浓度分 别为100微克/毫升，20微克/毫升和4微克/毫升，每孔200微升，每个浓度 设三个复孔，置于37"， 5%C02， 100%相对湿度的培养箱中培养，每4天 换含相同浓度样品的培养基，将同一样品同一浓度的换出的培养基等体积混 匀，作为待测样品。用酶联反应ELISA试剂盒测定培养基中乙型肝炎表面抗 原(HBsAg)浓度，以P/N表示；以拉米呋啶(3-TC)为阳性对照。
1.4实验结果
实验结果如表二所示，化合物I-a有显著的抑制乙型肝炎表面抗原的作 用。其对HepG2.2.15细胞的生长无明显抑制作用，但对HepG2.2.15细胞分泌 的乙型肝炎表面抗原HBsAg在高、中、低剂量下抑制活性都高于拉米呋啶。
表二化合物I-a对HepG2.2.15分泌的乙型肝炎表面抗原抑制率(%)
样品编号浓度(微克/毫升)4天8天
10027.2345.12
I-a2016.2730.15
48.9118.58
10012.1211.37
3-TC (拉米呋啶)20/a/a
4/a
表示无抑制活性。1.5结果说明
乙型肝炎表面抗原(HBsAg)抑制率是判断乙型肝炎病毒感染重要标志， 有效抑制HBsAg分泌并使HBsAg反应转阴是治疗乙型肝炎的目标之一。化 合物I-a在第八天对HepG2.2.15细胞分泌的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)具 有显著的抑制作用，说明此类芳香酰基乙二醇类化合物可预期发展为降低乙 型肝炎表面抗原、控制病毒性乙型肝炎症状的药物。
药理实施例2:化合物I-d对乙型肝炎病毒表面抗原的抑制作用 2.1细胞培养同药理实施例1。
2.2采用MTT法测定化合物I-d对H印G2.2.15细胞生长的抑制作用取对数 生长期的HepG2.2.15细胞，方法同药理实施例1。
2.3测定化合物I"d对乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的抑制作用，以拉米呋啶 (3-TC)为阳性对照。具体方法同药理实施例l。
2.4实验结果实验结果如表三所示，化合物I"d有显著的抑制乙型肝炎表面 抗原(HBsAg)的作用。其对H印G2.2.15细胞的生长无明显抑制作用，但对 HepG2.2.15细胞分泌的乙型肝炎表面抗原HBsAg在高、中、低剂量下抑制活 性都高于拉米呋啶。
表三化合物I-d对H印G2.2.15分泌的乙型肝炎表面抗原抑制率(％ )
样品编号浓度(微克/毫升)4天8天
10017.3728.54
I-a2011.2619.57
45.219.98
3-TC (拉米呋啶)謂 20 412.1211.37 /a
表示无抑制活性。
132.5结果说明乙型肝炎表面抗原(HBsAg)抑制率是判断乙型肝炎病毒感染 重要标志，有效抑制HBsAg分泌并使HBsAg反应转阴是治疗乙型肝炎的目 标之一。化合物14在第八天对HepG2.2.15细胞分泌的乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)具有一定的抑制作用，说明该类芳香酰基乙二醇类化合物可预期 发展为降低乙型肝炎表面抗原、控制病毒性乙型肝炎症状的药物。
药理实施例3:化合物对人子宫颈癌(Hela)细胞的细胞毒活性 3.1人子宫颈癌(Hela)细胞用RPMI 1640培养基培养，培养基中含10%小 牛血清，100U/毫升青霉素和100U/毫升链霉素。细胞以每孔"104个密度接 种到96孔板中，在37'C， 5%(302潮湿空气的培养箱中培养24小时。
3.2细胞存活率的测定方法用改良MTT法。细胞经24小时的孵育后，分 别将新配的化合物的二甲亚砜溶液以浓度梯度加入到各孔中，使孔中化合物 的最终浓度分别为100微克/毫升、50微克慮升、25微克/毫升、5微克慮升。 72小时后，加入10微升MTT(5毫克虔升)的生理盐水溶液，再继续在37'C， 5%<:02潮湿空气的培养箱中培养3小时，每孔中加入150微升二甲亚砜，振 荡溶解生成的MTT晶体甲臜(formazan)，所形成的甲臜用酶标仪在570 nm波 长下比色，细胞存活率由样品OD值对于对照OD值的比值计算。其中化合钩 对Hda细胞的半数抑制浓度(IC5o)由剂量效应曲线得到。实验结果显示各 测试化合物的IC5o如表四所示。本试验以抗肿瘤一线用药顺铂(DDP)作为 阳性对照，阳性对照顺铂对Hela细胞的IC5o为19.6 pM。
表四各测试化合物对Hela细胞的半数抑制浓度(IC5o)(微克/毫升) 化合物 I-a I-d I~e
抑制活性IC5。 156.2 121.2 213.0
3.3结果说明化合物I-a、I"d、I-e对Hda细胞的生长具有一定的抑制作用， 说明该类双取代芳香酰基乙二醇类化合物有望发展为细胞毒类治疗人类宫颈 癌的药物。
药理实施例4:化合物对人肺癌A549细胞的细胞毒活性4.1人肺癌(A549)细胞用RPMI 1640培养基培养，培养基中含10%的胎牛血清，100U/毫升青霉素和100U/毫升的链霉素。细胞以每孔5X1()S的浓度加入到96孔板中，在37"C含5%(302潮湿空气的培养箱中培养24小时。
4.2细胞存活率的测定用改良MTT法，具体方法如药理实施例l。其中化合物对A549细胞的半数抑制浓度(IC5o)由剂量效应曲线得到。实验结果显示各测试化合物的IC5Q如表五所示。而阳性对照顺铂对A549细胞的『50为17.8 ,。
表五各测试化合物对A549细胞的半数抑制浓度(IC5Q)(微克/毫升)化合物 I-a I-d I~e
抑制活性IC5Q 125.3 140.8 262.7
4.3结果说明化合物I-a、 14、 I-e对A549细胞的生长具有一定的抑制作用，说明该类双取代芳香酰基乙二醇类化合物有望发展为细胞毒类治疗人类肺癌的药物。
在上述说明书阐述本发明时，同时提供了实施例和药理实施例的目的是举例说明本发明的实际操作过程和本发明的意义。在进入本发明权利要求和其等同物范围内时，本发明的实际应用包括所有一般变化、配合，或改进。
1权利要求
1.一种具有式(I)所示结构的双取代芳香酰基乙二醇类化合物及其可药用盐式(I)其中取代基R1和R2可以相同或不同，分别选自2-呋喃环-3-烯丙酰基，2位或4位甲氧基取代的苯甲酰基，邻位或间位或对位二甲氧基取代的苯甲酰基，甲氧基或卤素单取代的3-苯烯丙酰基，或邻位或间位或对位卤素二取代的3-苯烯丙酰基；其条件是R1、R2不能同时为3位甲氧基单取代的3-苯烯丙酰基或同时为4位甲氧基单取代的3-苯烯丙酰基，也不能同时为4位氟单取代的3-苯烯丙酰基，R1、R2还不能同时为3，4-二甲氧基取代或同时为2，5-二甲氧基取代的3-苯烯丙酰基。
2. 根据权利要求1所述双取代芳香酰基乙二醇类化合物，其特征为式(I)化 合物选自I-a. l-氧-[3-(4-甲氧基苯)烯丙酰]-2-氧-4-甲氧基苯甲酰-乙二醇； I-b. 1，2-二-氧-[3-(4-氯苯)-烯丙酰]-乙二醇；1，2-二-氧-[3-(2-呋喃基)-烯丙酰]-乙二醇； I-d. 1，2-二-氧-[3-(2,4-二氯苯)-烯丙酰]-乙二醇。
3. 根据权利要求1 2任一所述之双取代芳香酰基乙二醇类化合物及其可药, 盐用于制备抑制乙肝病毒表面抗原药物的用途。 '
4. 根据权利要求1 2任一所述之双取代芳香酰基乙二醇类化合物及其可药用 盐用于制备细胞毒类抗肿瘤药物的用途。
5. 化合物l-e及其可药用盐用于制备细胞毒类抗肿瘤药物的用途，其特征为 化合物l-e的名称是1，2-二氧-[3-(4-甲氧基苯)烯丙酰]-乙二醇。
6. —种用于降低乙肝表面抗原的药物组合物，其含有治疗有效量的作为活性 成分的根据权利要求l、 2任一所述的化合物或它们的混合，以及它们的可药用盐和可药用辅料。
7. —种用于治疗肿瘤疾病的药物组合物，其含有治疗有效量的作为活性成分 的根据权利要求1 2任一所述的化合物、化合物l-e，或它们的混合和它们的 可药用盐和可药用辅料。
8. 根据权利要求3 7任一所述的药物和药物组合物，其剂型是注射剂、片齐U、 胶囊剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴丸剂、外用搽剂，或其控释或缓释剂型或 纳米制剂。
全文摘要
本发明涉及一种具有式(I)所示的双取代芳香酰基乙二醇类化合物及其医药用途，本发明还涉及这些化合物的制备方法和含有该类化合物的药物组合物。本发明的式(I)化合物及其可药用盐，以及1，2-二-氧-[3-(4-甲氧基苯)烯丙酰]-乙二醇及其可药用盐具有抑制乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的功能；它们还对两株人体肿瘤细胞显示出一定强度的细胞毒性，可以预期用于制备治疗相关的乙肝病毒感染性疾病以及肿瘤性疾病的药物用途。
文档编号C07C69/00GK101492373SQ200810062450
公开日2009年7月29日 申请日期2008年6月17日 优先权日2008年6月17日
发明者巫秀美, 张丽娟, 李校堃, 李海波, 骅 白, 佳 瞿, 胡明辉, 昱 赵, 郑群雄, 马建设, 黄可新 申请人:温州医学院