专利名称：竹节参皂苷Ⅳa制备方法以及在制备保肝降酶药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种中药单体的制备方法及其医药用途，具体涉及珠子参中一种齐墩 果酸型三萜皂苷-竹节参皂苷IVa的制备方法及其在制备保肝降酶药物中的应用。
背景技术：
珠子参系五加科植物珠子参[Panaxjaponicus C. A. Mey. var. major (Buck. )C. Y. Wu et K. Μ. Feng]或羽叶三七[Panax jap Onicus C. A. Mey. var. bipinnatif idus (Seem.) C. Y. Wu et K. Μ. Feng]的干燥串珠状根茎。主要分布在我国陕西、 四川、湖北、云南等省。具有补肺、养阴、活络、止血的功效，用于气阴两虚、烦热口渴、虚劳咳 嗽、跌扑损伤、关节疼痛、咳血、吐血、外伤出血等。其地上部分习称参叶或汉中参叶，具有清 热解毒、滋补强壮等功效，民间多以其叶泡茶饮用以保护嗓音。珠子参根茎中皂苷成分主要 为齐墩果烷型三萜皂苷，也含有少量达玛烷型三萜皂苷。通过对皂苷成分进行分析，结果表 明珠子参皂苷成分从苷元结构上可分为两大类一类是齐墩果烷型皂苷，如人参皂苷Ro， 竹节参皂苷IVa等；另一类是达玛烷型皂苷，该类按其达玛烷氧化类型可分为三种类型，即 原人参二醇型(如人参皂苷Rbl，Rd等)；原人参三醇型(如人参皂苷Re，Rg1等)；奥可提 罗型(如假人参皂苷F11,珠子参皂苷ig等。目前，有关珠子参化学成分的研究报道较多，但主要集中于总皂苷的研究。张国 明等研究了珠子参有效成分制剂及制备方法，并申请了国家专利(珠子参有效成分制剂及 制备方法00115425. 7)。该发明专利提供了高含量珠子参总皂甙制剂及制备方法，克服了 由生药或粗浸膏所制得的制剂质量不稳定诸因素，提高了珠子参制剂内在质量，从而保证 药物的临床使用安全和疗效能确保药物使用安全并提高疗效。但该专利没有涉及珠子参总 皂苷及有关单体成分的进一步分离、药理作用及相关制剂制备的研究。
发明内容
本发明提供了一种竹节参皂苷IVa制备方法，以解决现有技术工艺复杂，制备的 竹节参皂苷IVa单体纯度不高等问题。该制备方法包括以下步骤(1)将珠子参原料药材破碎，将破碎物料用5-40倍量(V/V)水或亲水性有机溶剂 溶解提取，得到提取液；( 收集提取液，过滤，将滤液浓缩，浓缩比例为1 2-1 3，即每毫升浓缩液含 原药材0. 5-0. 33克；(3)将步骤( 浓缩处理后的滤液经高分子材料吸附，先后以2-20倍量的水、 30-10倍量的浓度为20-70% (V/V)的醇-水混合溶液洗脱(具体选择时，高倍量对应于低 浓度)，收集醇-水混合溶液洗脱得到醇-水洗脱液；(4)对得到的醇-水洗脱液-0. 04 -0. 06MPa, 55°C 80°C的条件下浓缩、干燥，得到总皂苷；(5)将总皂苷按1 10-90倍量进行吸附柱色谱分离，再以三氯甲烷-甲醇梯度 (20-5 1，V/V)洗脱；将同一梯度多次洗脱得到的洗脱液合并，得到多组不同浓度的竹节 参皂苷IVa粗品；(6)将竹节参皂苷IVa粗品经葡聚糖凝胶LH-20开口柱纯化，再以三氯甲烷-甲醇 梯度O0-5 1，V/V)洗脱，收集洗脱液，减压回收，干燥得到竹节参皂苷IVa粉末；(7)将竹节参皂苷IVa粉末经过丙酮和/或醇类等亲水性有机溶剂反复重结晶得 到竹节参皂苷IVa结晶纯品。上述步骤(1)的溶解提取过程是对所述破碎物料用5-40倍量水或脂肪族低级醇 或酮加热回流提取1-3次，每次1-3小时。上述步骤(3)中所述高分子材料为大孔吸附树脂，树脂与待吸附的原药材之质量 比为1 0. 1-1 (即每克树脂吸附原药材的量为0. 1到1克)。上述步骤C3)所述醇-水混合溶液中的醇为甲醇或乙醇。上述步骤(5)中所述吸附柱色谱分离是采用硅胶吸附柱，总皂苷与硅胶之比为 1 10-90 (g/g)；然后以三氯甲烷-甲醇按20-5 1(V/V)梯度洗脱，进行等份收集，通过薄 层层析检测，将同一梯度多次洗脱得到的洗脱液合并，得到多组不同浓度的竹节参皂苷IVa 粗品。竹节参皂苷IVa的结构式为
权利要求
1.竹节参皂苷IVa的制备方法，其特征在于，包括以下步骤(1)将珠子参原料药材破碎，将破碎物料用5-40倍量(V/V)水或亲水性有机溶剂溶解 提取，得到提取液；(2)收集提取液，过滤，将滤液浓缩，浓缩比例为1 2-1 3，即每毫升浓缩液含原药 材 0. 5-0. 33 克；(3)将步骤(2)浓缩处理后的滤液经高分子材料吸附，先后以2-20倍量的水、30-10倍 量的浓度为20%-70% (V/V)的醇-水混合溶液洗脱，收集醇-水混合溶液洗脱得到醇-水 洗脱液；(4)对得到的醇-水洗脱液在-0.04 -0. 06MPa, 55°C 80°C的条件下浓缩、干燥，得 到总皂苷；(5)将总皂苷按1 10-90倍量进行吸附柱色谱分离，再以三氯甲烷-甲醇梯度 (20-5 1，V/V)洗脱；将同一梯度多次洗脱得到的洗脱液合并，得到多组不同浓度的竹节 参皂苷IVa粗品；(6)将竹节参皂苷IVa粗品经葡聚糖凝胶LH-20开口柱纯化，再以三氯甲烷-甲醇梯度 (20-5 1，V/V)洗脱，收集洗脱液，减压回收，干燥得到竹节参皂苷IVa粉末；(7)将竹节参皂苷IVa粉末经过丙酮和/或醇类亲水性有机溶剂反复重结晶得到竹节 参皂苷IVa结晶纯品。
2.根据权利要求1所述的竹节参皂苷IVa的制备方法，其特征在于步骤(1)的溶解 提取过程是对所述破碎物料用5-40倍量水或脂肪族低级醇或酮加热回流提取1-3次，每次 1-3小时。
3.根据权利要求2所述的竹节参皂苷IVa的制备方法，其特征在于步骤(3)中所述 高分子材料为大孔吸附树脂，树脂与待吸附的原药材之质量比为1 0.1-1。
4.根据权利要求3所述的竹节参皂苷IVa的制备方法，其特征在于步骤(3)所述 醇_水混合溶液中的醇为甲醇或乙醇。
5.根据权利要求4所述的竹节参皂苷IVa的制备方法，其特征在于步骤(5)中所述 吸附柱色谱分离是采用硅胶吸附柱，总皂苷与硅胶之比为1 10_90(g/g)；然后以三氯甲 烷-甲醇按20-5 1(V/V)梯度洗脱，进行等份收集，通过薄层层析检测，将同一梯度多次 洗脱得到的洗脱液合并，得到多组不同浓度的竹节参皂苷IVa粗品。
6.竹节参皂苷IVa在制备保肝降酶药物制剂中的应用。
7.根据权利要求6所述的药物制剂，其特征在于该药物制剂是由竹节参皂苷IVa与 一种或多种医药上可接受的载体/辅料混合制成。
8.根据权利要求7所述的药物制剂，其特征在于所述药物制剂包括固体口服制剂、液 体口服制剂。
9.如权利要求8所述的固体口服制剂的制备方法，其特征在于竹节参皂苷IVa按 1 0.25-11. 5重量比与常规药物固体赋形剂混合，以常规制剂制备工艺制成固体口服制 剂。
10.如权利要求8所述的液体口服制剂的制备方法，其特征在于将竹节参皂苷IVa按 1 10-50重量比与常规药物液体赋形剂混合，以常规制剂制备工艺制成液体口服制剂。
全文摘要
本发明公开了一种以珠子参为原料制备竹节参皂苷IVa方法，并指出竹节参皂苷IVa在制备保肝降酶药物中的应用。其制备方法步骤主要有珠子参原料药材破碎，用水或亲水性有机溶剂提取，将提取液过滤，浓缩；浓缩液经大孔吸附树脂色谱柱富集总皂苷，先后以水、醇-水混合液洗脱，收集醇-水洗脱液，低温减压浓缩、干燥得到总皂苷；总皂苷经色谱分离，溶剂洗脱，减压回收溶剂、干燥，得到竹节参皂苷IVa粗品；粗品用有机溶剂反复重结晶得竹节参皂苷IVa结晶纯品。经验证，竹节参皂苷IVa具有保肝降酶生物活性，可与一种或多种医药上可接受的载体/辅料混合制成具有保肝降酶药效的固体和液体口服制剂。
文档编号C07J63/00GK102134268SQ201110008170
公开日2011年7月27日 申请日期2011年1月14日 优先权日2011年1月14日
发明者冯改利, 刘越, 唐志书, 宋小妹, 宋蓓, 崔九成, 晁旭, 王薇, 蒙跃龙, 邓翀 申请人:陕西中医学院