硫酸依替米星的连续色谱分离纯化方法
【专利摘要】本发明涉及一种依替米星的连续分离纯化方法，本发明利用连续色谱层析工艺实现依替米星的高效分离。本发明将合成所得的依替米星的水解液，进入连续色谱系统经吸附、洗杂、洗脱依替米星、收集洗脱液及色谱柱再生，收集的洗脱液浓缩，再经成盐脱色得硫酸依替米星。采用本法分离的依替米星得率高，纯度高，成本低，环保，适合工业化生产。
【专利说明】硫酸依替米星的连续色谱分离纯化方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于化学制药领域，特别涉及一种抗菌药物依替米星的分离纯化方法。
【背景技术】
[0002] 硫酸依替米星巧timicin sulfate)的结构式如下：
[0003]
【权利要求】
1. 一种硫酸依替米星的连续色谱分离纯化方法，其特征在于，所述方法步骤如下： 步骤1，依替米星水解液上连续色谱柱，得到洗脱液； 步骤2,洗脱液经过浓缩，干燥得到依替米星纯品。
2. 根据权利要求1的方法，其特征在于，其中，步骤1所述上连续色谱柱，方法如下： 色谱柱数量是20?40根； 树脂选自：D103、HPD100、华震层析 1 号、华震层析2 号、JK006、DK110、D110、DK-1、D101、 YPR- II, 树脂孔径为30?100目， 色谱柱分为吸附区、洗杂区、解吸区、再生清洗区四个区，各区的色谱柱分别采用串联 或并联方式连接；洗杂区用去〇?〇. 5mol/L的氨水洗涤；解吸区采用乙醇溶液洗脱，解吸 溶剂为l〇wt%?50wt%乙醇溶液；再生清洗区，依次用乙醇，水交替活化再生。
3. 根据权利要求1的方法，其特征在于，其中，步骤2所述浓缩干燥，方法如下：浓缩采 用真空浓缩，操作条件为真空度〇. 02?0. 15Mpa，操作温度为35?90°C，浓缩至依替米星 质量浓度为15%?70%，得到浓缩液；浓缩液用冷冻干燥或喷雾干燥的方法得固体。
4. 根据权利要求1的方法，其特征在于，其中，依替米星水解液上连续色谱柱前，可以 将依替米星水解液稀释至依替米星质量浓度为1 %?40 %。
5. 根据权利要求1的方法，其特征在于，其中，连续色谱选自：圆盘传送式连续色谱分 离系统或者模拟移动床式连续色谱分离系统。
6. 根据权利要求1的方法，其特征在于，其中，所述模拟移动床式连续色谱分离系统， 所述系统分为吸附区、洗杂区、解吸区、再生清洗区四个区，其中 1) 吸附区：3?8根柱；控制流速，依替米星水解液从2或8号柱进入，1号柱出。 2) 洗杂区：3?6根柱；经吸附后，树脂柱转到洗杂区，控制流速，同样为逆向进柱。 3) 解吸区：7?12根柱；各柱子之间为串、并连接。控制流速，采用不同浓度的氨水或 乙醇解吸，且全部采用正进料。 4) 再生清洗区：4?7根柱；控制流速，正、逆向单独进料；洗脱剂回收利用。 所述模拟移动床式连续色谱分离系统一般包括恒流泵、带夹套离子交换柱、控制阀、pH 计、温度计。 所述模拟移动床式连续色谱分离系统，需要将各个区的进出口沿着料液流动方向分别 进行周期性切换，收集洗脱液。所述的周期性切换是指，通过调节进料液、洗杂剂、洗脱剂、 再生剂的流量，使得各区的第一根柱子处理完全后，同时切换进入下一区，成为下一区的最 后一根柱子，执行下一区流程。所述的各区第一根柱子是指各区液体进口处的柱子。所述 的各区第一根柱子处理完全是指吸附区第一根柱子吸附饱和，洗杂区第一根柱子杂质完全 洗掉；解吸区第一根柱子依替米星完全被洗脱；再生区第一根柱子树脂完全被再生，能满 足下一轮吸附。
7. 根据权利要求1的方法，其特征在于，其中，所述圆盘传送式连续色谱分离系统分为 吸附区、洗杂区、解吸区、再生清洗区四个区。 1) 吸附区：1?3个单元；控制流速，水解液从24或25号单元进入，27号单元出。 2) 洗杂区：1?10个单元；经吸附后，树脂柱转到洗杂区，控制流速。 3) 解吸区：12?22个单元；在该解吸区，用连续、梯度解吸方式，分别收集各出口解吸 液。 4)再生清洗区：4?8个单元；均单独进料，且为顺、逆向进料，洗脱剂回收利用。
8. 根据权利要求1的方法，其特征在于，其中，根据依替米星水解液中各成分的特性， 本发明所选择的树脂优选为华震层析1号、华震层析2号、YPR- II树脂，树脂颗粒直径在 30?100目，均匀度95%以上。
9. 根据权利要求1的方法，其特征在于，其中，根据依替米星水解液中各成分的特性， 本发明所选择的树脂最优选为华震层析1号、YPR- II树脂，树脂颗粒直径在50?100目， 均匀度95%以上。
10. 根据权利要求1的方法，其特征在于，步骤如下： 步骤1，依替米星水解液上连续色谱柱，得到洗脱液； 步骤2,洗脱液经过浓缩，干燥得到依替米星纯品； 其中，述树脂为华震层析1号树脂，树脂粒径为100目95%以上，每个树脂柱填装量为 0. 08m3,树脂柱容量为0. lm3,实际填装比为80%。系统总尺寸为3mX3mX5m(长X宽X 商）。 圆盘传送式连续色谱分离系统分离依替米星分以下几个区域： 1) 吸附区：（25号单元）该区域共有1个单元（25号单元），通过流速控制，原料首先 进入25号单元，再通过串联进入27号单元进行洗杂。 2) 洗杂区：（24、26?30号单元）经过吸附后，各树脂需要水洗，位于吸附区前后。树 脂柱旋转到吸附水洗区后，夹带在树脂间的料液（主要是澄清液）被水顶出，流出液与吸附 区25号单元的流出液混合一同进入27号单元。洗去夹杂在树脂空隙处的料液并尽量带走 杂质，防止料液夹带进入解吸区，提高解吸液的纯度，并将其水洗液进入到吸附区，再次吸 附水洗液中的有效组分。 3) 解吸区（3?23号单元）在该解吸区，用连续、梯度解吸方式，收集洗脱依替米星出 口解吸液，根据工艺方法设计分为如下几部分： I 14?23号串联进15wt %乙醇溶液，解吸液进入27号单元； II 5?13号串联，5号单元进纯化水，将进入该区域的乙醇溶液浓度调节至25wt%，12 号出口解吸液收集主要为依替米星； III 3?4号串联进50wt %乙醇溶液，解吸液进入5号单元 4) 再生清洗区（1、2号单元）；该区两个单元均单独进料，且为逆向或顺向进料。其中 2号为95 %乙醇溶液；1号为纯化水； 各区参数如下： 吸附区：进料量30L/hr ;树脂总量0. 08m3 吸附后水洗60L/hr ; 解吸区：纯化水1 :120L/hr ;乙醇溶液1 (15wt %乙醇溶液）：120L/hr ;乙醇溶液 2 (45wt% 乙醇溶液）：270L/hr，纯化水 2 :270L/hr。 再生区：各单元再生分别为：95%乙醇洗120L/hr ;水洗120L/hr。
【文档编号】C07H15/236GK104447909SQ201410591877
【公开日】2015年3月25日 申请日期:2014年10月28日 优先权日:2014年10月28日
【发明者】薛超一 申请人:无锡济民可信山禾药业股份有限公司, 江西济民可信集团有限公司