一种青蒿HD‑ZIPIV类转录因子编码序列及应用的制作方法

文档序号:12346414阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种青蒿HD-ZIP IV类转录因子编码序列,其特征在于,所述编码序列记为AaHD1,所述AaHD1的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.一种青蒿HD-ZIP IV类转录因子编码序列,其特征在于,所述AaHD1编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

3.一种多肽,其特征在于,所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

4.一种重组表达载体,其特征在于,所述重组表达载体包含如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。

5.一种重组表达转化体,其特征在于,所述重组表达转化体包含如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。

6.根据权利要求1或2所述的青蒿HD-ZIP IV类转录因子编码序列AaHD1在提高青蒿素含量中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述应用包括以下步骤:

步骤1、将青蒿HD-ZIP IV类转录因子编码序列AaHD1连于植物表达调控序列上,构建含所述青蒿HD-ZIP IV类转录因子编码序列的植物表达载体;

步骤2、将步骤1中的所述植物表达载体转入农杆菌,将所述农杆菌转入青蒿;

步骤3、通过抗生素筛选,获得含有所述青蒿HD-ZIP IV类转录因子编码序列AaHD1的转化细胞,再生转基因植株。

8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述步骤2中,采用冻融法进行转入。

9.一种提高青蒿中青蒿素含量的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:

步骤1、对青蒿栽培种H-ZIP IV类转录因子分析,从青蒿cDNA文库中克隆得到青蒿HD-ZIP IV类转录因子AaHD1;

步骤2、将AaHD1基因可操作性地连接于表达调控序列,形成含所述AaHD1基因的植物超表达载体;

步骤3、将含所述AaHD1基因的植物超表达载体转化根癌农杆菌,获得具有所述植物超表达载体的根癌农杆菌菌株;

步骤4、利用所述根癌农杆菌菌株转化青蒿,经潮霉素筛选得到抗性苗,再经PCR检测为阳性的植株即为转基因青蒿苗;

步骤5、对获得的转基因青蒿进行腺毛密度分析,获得腺毛密度显著提高的转基因青蒿,进而获得青蒿素含量提高的青蒿植株。

10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,所述根癌农杆菌为EHA105。

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