一种米糠抗氧化活性肽的分离制备方法与流程

文档序号:11145599阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种米糠抗氧化活性肽的分离制备方法,其特征在于,所述方法是通过碱提酸沉法和Osborne分级提取脱脂米糠来获得米糠谷蛋白,然后选用离子交换和凝胶层析技术对米糠谷蛋白进行分离纯化,再将分离纯化后的米糠谷蛋白用碱性蛋白酶水解、离心、真空浓缩、冷冻干燥,之后利用离子交换层析、凝胶层析、制备RP-HPLC及分析型RP-HPLC分离纯化得到抗氧化活性肽,所述抗氧化活性肽的序列如SEQ ID NO.1所示。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述碱性蛋白酶水解的条件为[E]/[S]1.5%—1.8%、pH值为10.0、温度为50℃、反应时间为4.2h。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法具体包括如下步骤:

(1)谷蛋白的提取:脱脂米糠→加水并调pH值为9.0,料液比为1:10,所述料液比的单位为mL/g,40℃水浴4h→离心→取上清液→pH值为4.0条件下酸沉→离心→取沉淀→水洗,调pH值为7.0→冷冻干燥→碱提米糠谷蛋白→Osborne分级提取,得到米糠谷蛋白;

(2)选用pH值为10.0,浓度为0.1 mol/L 的Na2CO3-NaHCO3作为缓冲液对大米谷蛋白进行初步的分离;以pH值12.0,浓度为0.05 mol/L Na2HPO4-NaOH缓冲液溶解碱提米糠谷蛋白,利用 DEAE-52 阴离子交换层析介质对碱提米糠谷蛋白进行进一步分离纯化;

(3)制备米糠蛋白悬浮液,按碱性蛋白酶/谷蛋白质量比为1.5%-1.8%的比例添加碱性蛋白酶→调 pH 值为10.0→50℃下超级恒温水浴酶反应器中溶解 30min→酶解4.2h→灭酶→离心→取上清液→真空浓缩→冷冻干燥,得大米谷蛋白肽;

(4)对大米谷蛋白肽进行分离纯化后得抗氧化活性肽。

当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1