一种大规模制备人脐带间充质干细胞因子用诱导分泌培养基的制作方法

文档序号:12108620阅读:来源:国知局

技术特征:

1.大规模制备人脐带间充质干细胞因子用诱导分泌培养基,其特征在于,所述诱导分泌培养基主要由DMEM、L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、4-2-羟乙基-1-哌嗪乙磺酸、D-葡萄糖和L-抗坏血酸溶解于磷酸盐缓冲液而成,DMEM、L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、4-2-羟乙基-1-哌嗪乙磺酸、D-葡萄糖和L-抗坏血酸在诱导分泌培养基中的浓度分别为400-600ml/L、1-3mmol/L、10-20μmol/L、10-20g/L、10-100μmol/L。

2.如权利要求1所述的大规模制备人脐带间充质干细胞因子用诱导分泌培养基,其特征在于,主要由DMEM、L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、4-2-羟乙基-1-哌嗪乙磺酸、D-葡萄糖和L-抗坏血酸溶解于磷酸盐缓冲液而成,DMEM、4-2-羟乙基-1-哌嗪乙磺酸、D-葡萄糖和L-抗坏血酸在诱导分泌培养基中的浓度分别为500ml/L、2mmol/L、15μmol/L、15g/L、50μmol/L。

3.如权利要求1所述的大规模制备人脐带间充质干细胞因子用诱导分泌培养基,其特征在于,所述诱导分泌培养基还包括诱导增强剂,所述诱导增强剂在诱导分泌培养基中浓度为1-2g/L,所述诱导增强剂包括10-20重量份的三磷酸腺苷、10-20重量份的三磷酸鸟苷、10-50重量份环磷酸鸟苷和5-20重量份的NaNO3

4.如权利要求3所述的大规模制备人脐带间充质干细胞因子用诱导分泌培养基,其特征在于,所述诱导增强剂在诱导分泌培养基中浓度为1.5g/L。

5.如权利要求4所述的大规模制备人脐带间充质干细胞因子用诱导分泌培养基,其特征在于,所述诱导增强剂包括15重量份的三磷酸腺苷、15重量份的三磷酸鸟苷、20重量份环磷酸鸟苷和10重量份的NaNO3

6.如权利要求5所述的大规模制备人脐带间充质干细胞因子用诱导分泌培养基,其特征在于,所述诱导分泌培养基还包括分泌增强剂,所述分泌增强剂在诱导分泌培养基中浓度为0.1-1g/L,所述分泌增强剂包括10-20重量份的甘油、10-20重量份的亚麻酸、10-50重量份二十二碳六烯酸和1-10重量份的脂肪醇聚氧乙烯醚。

7.如权利要求6所述的大规模制备人脐带间充质干细胞因子用诱导分泌培养基,其特征在于,所述分泌增强剂在诱导分泌培养基中浓度为0.5g/L。

8.如权利要求7所述的大规模制备人脐带间充质干细胞因子用诱导分泌培养基,其特征在于,所述分泌增强剂包括15重量份的甘油、15重量份的亚麻酸、20重量份二十二碳六烯酸和5重量份的脂肪醇聚氧乙烯醚。

9.制备如权利要求1或2任一所述的大规模制备人脐带间充质干细胞因子用诱导分泌培养基的方法,其特征在于,包括以下步骤:

a取配置培养基目标体积四分之一的磷酸盐缓冲液,充分搅拌;

b依次加入DMEM、L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、4-2-羟乙基-1-哌嗪乙磺酸、D-葡萄糖和L-抗坏血酸,充分搅拌;

c用磷酸盐缓冲液定容至目标体积。

10.制备如权利要求6-8任一所述的大规模制备人脐带间充质干细胞因子用诱导分泌培养基的方法,其特征在于,包括以下步骤:

a取配置培养基目标体积四分之一的磷酸盐缓冲液,充分搅拌;

b1依次加入DMEM、L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、4-2-羟乙基-1-哌嗪乙磺酸、D-葡萄糖和L-抗坏血酸,充分搅拌;

b2依次加入三磷酸腺苷、三磷酸鸟苷、环磷酸鸟苷、NaNO3和甘油,充分搅拌;

b3加入脂肪醇聚氧乙烯醚充分搅拌,依次加入亚麻酸和二十二碳六烯酸,充分搅拌;

c用磷酸盐缓冲液定容至目标体积。

当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1