本发明属于医药合成技术领域，具体涉及一种s1p-1受体激动剂药物分子的新型合成方法。
背景技术：
鞘脂类是生物膜的重要组成成分，具有保护细胞内物资的作用。近年来，随着生物技术的发展以及人类疾病谱的复杂化，人类对鞘脂类的认识不断深入。现在认为，鞘脂类不仅是生物膜的重要组成成分，同时还在细胞生命活动信号传导中发挥重要作用。鞘氨醇-1-磷酸(s1p)是近年来发现的具有重要生理功能的生物活性脂类，广泛存在于血液、淋巴液，红细胞、中性粒细胞、血小板细胞在形成s1p的同时，可经s1p磷酸化酶作用脱去磷酸基生成鞘氨醇，也可经s1p裂解酶不可逆地分解为磷脂酰乙醇胺和棕榈醛，从而保证了人体生理环境中s1p的动态平衡。s1p即可作为第二信使直接作用于细胞内靶标，也可经转运蛋白转运到细胞外与相应的受体结合，激活一系列下游信号通路产生重要生理功能，如细胞的增殖、迁移、存活、凋亡和细胞通讯等，参与免疫调节、造血调控、同种异体移植反应、糖代谢调节和炎症调节等多种生理功能。抑制sphk激活能显著或者甚至完全阻断促炎物质引起的细胞反应，如ca2+的代谢、脱颗粒、趋化性和细胞因子的分泌。此外，s1p还可通过与细胞表面的s1p受体结合，使受体内陷，诱导淋巴细胞回巢，抑制淋巴细胞自外周淋巴结及次级淋巴器官的外流，阻止淋巴细胞到达炎性损害或抑制物的位置，具有免疫调控作用。s1p信号通路参与多种自身免疫病的发生发展，如多发性硬化症、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、溃疡性结肠炎等。其中(s)-3-(4-(5-(2-环丁基-6-甲氧基吡啶-4-基)-1,2,4-恶二唑-3-基)-2-乙基-6-苄氧基)丙烷-1,2-二醇就是一种良好的s1p-1受体激动剂。
我们通过计算机辅助设计发现药物分子(s)-3-(4-(5-(2-环丁基-6-甲氧基吡啶-4-基)-1,2,4-恶二唑-3-基)-2-乙基-6-苄氧基)丙烷-1,2-二醇不但具有s1p-1受体激动活性，而且还具有良好的抗血小板聚集作用，我们对其合成方法和抗血小板聚集活性进行了研究。
技术实现要素：
本发明解决的技术问题是提供了一种操作简单易行、原料廉价易得、反应效率较高且重复性好的一种s1p-1受体激动剂药物分子的新型合成方法。
本发明为解决上述技术问题采用如下技术方案，一种s1p-1受体激动剂药物分子的新型合成方法，其特征在于具体步骤为：
a、1,3-二溴丙烷与乙酰乙酸甲酯在氢化钠作用下反应得到环丁基乙酮；
b、草酸二乙酯和环丁基乙酮在低温条件下反应结束后与氰基乙酰胺发生成环反应得到2-环丁基-3-羧基-6-吡啶酮；
c、2-环丁基-3-羧基-6-吡啶酮在氯化亚砜作用下先与甲醇发生酯化反应，再通过碱性条件下继续与氯化亚砜发生羰基取代变氯反应生成2-氯-6-环丁烷-4-甲酸甲酯吡啶；
d、2-氯-6-环丁烷-4-甲酸甲酯吡啶在碱性条件下与甲醇发生取代反应生成2-甲氧基-6-环丁烷-4-羧基吡啶；
e、2-甲基-4-氰基-6-乙基苯酚先与甲基磺酰氯发生取代反应活化羟基，再与(r)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-甲醇发生取代反应生成(r)-4-((2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)-3-乙基-n-羟基-5-甲基苄脒；
f、2-甲氧基-6-环丁烷-4-羧基吡啶先于氯化亚砜反应生成2-甲氧基-6-环丁烷-4-甲酰氯吡啶，再与(r)-4-((2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)-3-乙基-n-羟基-5-甲基苄脒发生取代反应，最后缩合生成恶唑环得到化合物(r)-5-(2-环丁基-6-甲氧基吡啶-4-基)-3-(4-((2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)-3-乙基-5-苄基)-1,2,4-恶二唑；
g、(r)-5-(2-环丁基-6-甲氧基吡啶-4-基)-3-(4-((2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)-3-乙基-5-苄基)-1,2,4-恶二唑水解得到(s)-3-(4-(5-(2-环丁基-6-甲氧基吡啶-4-基)-1,2,4-恶二唑-3-基)-2-乙基-6-苄氧基)丙烷-1,2-二醇。
进一步限定，步骤a的具体过程为：在反应瓶中，加入1,3-二溴丙烷和氢化钠，在氮气保护下缓慢加热到50℃；缓慢加入乙酰乙酸甲酯，保持温度不超过55℃，滴加完后在50℃条件下加热搅拌3h；tlc监控原料反应完后用1nhcl溶液调节反应液ph到8～9，保持温度在60℃反应2h，然后降温至40℃；分出有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤一次，再用无水硫酸镁干燥，最后真空浓缩得到环丁基乙酮。
进一步限定，步骤b的具体过程为：在反应器中加入甲醇钠和thf，反应温度降至-10℃，加入草酸二乙酯和环丁基乙酮的混合液，保持温度不超过0℃；滴加完后升温至升温至15℃反应1h，加入氰基乙酰胺，在室温条件下反应5h；加入一定量水后在真空条件下浓缩反应液，然后向浓缩残渣中加入冰乙酸中，在50℃条件下搅拌反应3h，再次在真空条件下浓缩反应液，然后在残渣中加入水，在10℃条件下搅拌，有大量固体悬浮析出，抽滤烘干后得到2-环丁基-3-羧基-6-吡啶酮。
进一步限定，步骤c的具体过程为：在反应瓶中，将2-环丁基-3-羧基-6-吡啶酮加入到甲醇，再加入碳酸钠，在室温条件下缓慢滴加氯化亚砜，tlc监控原料反应完全，真空浓缩反应液后，加入dmf和n,n-二异丙基乙胺，氮气保护下加入氯化亚砜，缓慢加热至回流，反应2h后tlc监控原料再次反应完全，真空浓缩反应液，除去未反应完的氯化亚砜，降温至20℃，加入一定量的水，缓慢升温至50℃后冷却至10℃，搅拌过程中有大量固体析出，抽滤后干燥得到2-氯-6-环丁烷-4-甲酸甲酯吡啶。
进一步限定，步骤d的具体过程为：在反应瓶中，把2-氯-6-环丁烷-4-甲酸甲酯吡啶和含有氢氧化钠的甲醇溶液加热至100℃反应2h，真空整除甲醇，继续反应4h，然后浓缩反应液，加入一定量的水后在80℃条件下反应2h，再次浓缩反应液，最后在10℃条件下，缓慢滴加浓度为32％的盐酸溶液，温度不超过15℃；滴加完后反应液用乙酸叔丁酯1000ml萃取，分出有机相后用水洗涤，浓缩得到2-甲氧基-6-环丁烷-4-羧基吡啶。
进一步限定，步骤e的具体过程为：在反应瓶中，把4-二甲氨基吡啶，2-甲基-4-氰基-6-乙基苯酚和三乙胺加入甲苯中，在20℃条件下缓慢滴加溶有甲基磺酰氯的甲苯溶液；滴加完后反应2h，先用水洗涤一次，再用水和1n的盐酸溶液的混合溶液洗涤一次，最后用水和饱和碳酸氢钠的混合溶液洗涤一次；有机相浓缩后得到黄色油状液体，全部加入dmf中，再加入(r)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-甲醇，最后加入碳酸钾，在120℃条件下反应3h，冷却至室温后加入甲基叔丁基醚，再用水洗涤三次，有机相浓缩后得到黄色液体；再加入正庚烷1000ml，在25℃条件下搅拌，有大量固体析出，抽滤烘干后得到白色固体(r)-4-((2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)-3-乙基-n-羟基-5-甲基苄脒。
进一步限定，步骤f的具体过程为：在反应瓶中，加入2-甲氧基-6-环丁烷-4-羧基吡啶和甲苯；在20℃条件下滴加氯化亚砜，约20min滴加完全，再搅拌反应30min后在50℃条件下真空抽滤反应液，排出未反应完的氯化亚砜；加入(r)-4-((2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)-3-乙基-n-羟基-5-甲基苄脒和三乙胺的甲苯混合液，在不超过30℃条件下约20min滴加完全；继续反应15min后加热至回流，通过分水器分出反应过程中生成的水，反应3h后真空浓缩反应液，得到黄色液体品(r)-5-(2-环丁基-6-甲氧基吡啶-4-基)-3-(4-((2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)-3-乙基-5-苄基)-1,2,4-恶二唑。
进一步限定，步骤g的具体过程为：在反应器中加入(r)-5-(2-环丁基-6-甲氧基吡啶-4-基)-3-(4-((2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)-3-乙基-5-苄基)-1,2,4-恶二唑和乙醇，加热到45℃，再加入1nhcl溶液；反应3h缓慢滴加浓度为32％的氢氧化钠溶液，调节反应液ph为中性，滴加完后浓缩反应液，再加入乙酸乙酯萃取，再用水洗涤两次，有机相浓缩后得到产品(s)-3-(4-(5-(2-环丁基-6-甲氧基吡啶-4-基)-1,2,4-恶二唑-3-基)-2-乙基-6-苄氧基)丙烷-1,2-二醇。
进一步限定，步骤g中所得产物的具体应用为：(s)-3-(4-(5-(2-环丁基-6-甲氧基吡啶-4-基)-1,2,4-恶二唑-3-基)-2-乙基-6-苄氧基)丙烷-1,2-二醇具有良好的抗血小板聚集作用。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明的上述内容做进一步详细说明，但不应该将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本发明上述内容实现的技术均属于本发明的范围。
实施例1
在反应瓶中，加入1,3-二溴丙烷(200g，1.0mol)和含量为40％氢化钠(90g，1.5mol)，在氮气保护下缓慢加热到50℃；缓慢加入乙酰乙酸甲酯(116g，1.0mol)，保持温度不超过55℃，滴加完后在50℃条件下加热搅拌3h；tlc监控原料反应完后用1nhcl溶液调节反应液ph到8～9，保持温度在60℃反应2h，然后降温至40℃；分出有机相，用饱和氯化钠溶液100ml洗涤一次，再用无水硫酸镁5g干燥，最后真空浓缩得到环丁基乙酮88g，收率为90％；1hnmr(400m，cdcl3):2.82(s,1h),2.33-2.31(m.4h),2.01(m,2h),1.98(s,3h).
实施例2
在反应器中加入甲醇钠(60g，1.1mol)和thf(1000ml)，反应温度降至-10℃，加入草酸二乙酯(146g，1mol)和环丁基乙酮(98g，1.0mol，1.0eq)的混合液，保持温度不超过0℃；滴加完后升温至升温至15℃反应1h，加入氰基乙酰胺(100g，1.2mol)，在室温条件下反应5h；加入水(600ml)后在真空条件下浓缩反应液，然后向浓缩残渣中加入冰乙酸1000ml，在50℃条件下搅拌反应3h，再次在真空条件下浓缩反应液，然后在残渣中加入水(2500ml)，在10℃条件下搅拌，有大量固体悬浮析出，抽滤烘干后得到183g产品2-环丁基-3-羧基-6-吡啶酮，收率为94％；1hnmr(400m，d6-dmso):12.65-12.62(m,2h),6.61(s,1h),6.35(s,1h),2.89-2.88(m,1h),1.95-1.93(m,2h),1.66-1.61(m,4h).
实施例3
在反应瓶中，将2-环丁基-3-羧基-6-吡啶酮(965g，5.0mol)加入到甲醇(6000ml)，再加入碳酸钠(320g，3.0mol)，在室温条件下缓慢滴加氯化亚砜(360g，3.0mol)，tlc监控原料反应完全，真空浓缩反应液后，加入dmf2000ml和n,n-二异丙基乙胺(600g，5.0mol)，氮气保护下加入氯化亚砜(600g，5.0mol)，缓慢加热至回流，反应2h后tlc监控原料再次反应完全，真空浓缩反应液，除去未反应完的氯化亚砜，降温至20℃，加入水(2000ml)，缓慢升温至50℃后冷却至10℃，有大量固体析出，抽滤后干燥得到2-氯-6-环丁烷-4-甲酸甲酯吡啶1080g，收率为90％；1hnmr(d6-dmso):7.71(s,1h),7.62(s,1h),3.97(s,3h),3.23-3.19(m,1h),2.19-2.17(m,2h),1.86-1.82(m,4h).
实施例4
在反应瓶中，把2-氯-6-环丁烷-4-甲酸甲酯吡啶(225g，1.0mol)和氢氧化钠(400g，10mol)的甲醇溶液1500ml加热至100℃反应2h，真空整除甲醇570ml，继续反应4h，然后浓缩反应液，加入水1800ml后在80℃条件下反应2h，再次浓缩反应液，最后在10℃条件下，缓慢滴加浓度为32％的盐酸溶液700ml，温度不超过15℃；滴加完后反应液用乙酸叔丁酯1000ml萃取，分出有机相后用水500ml洗涤两次，浓缩得到2-甲氧基-6-环丁烷-4-羧基吡啶200g，收率为96.6％。
实施例5
在反应瓶中，把4-二甲氨基吡啶dmap(12g，0.1mol)，2-甲基-4-氰基-6-乙基苯酚(161g，1.0mol)，和三乙胺(133ml，1.0mol)加入甲苯300ml中，在20℃条件下缓慢滴加溶有甲基磺酰氯(114g，1.0mol)的甲苯溶液250ml；滴加完后反应2h，先用水200ml洗涤一次，再用水130ml和1n的盐酸溶液70ml的混合溶液洗涤一次，最后用水130ml和饱和碳酸氢钠70ml的混合溶液洗涤一次；有机相浓缩后得到黄色油状液体，全部加入dmf500ml中，再加入(r)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-甲醇(158g，1.2mol)，最后加入碳酸钾(276g，2.0mol)，在120℃条件下反应3h，冷却至室温后加入甲基叔丁基醚1000ml，再用水1000ml洗涤三次，有机相浓缩后得到黄色液体；再加入正庚烷1000ml，在25℃条件下搅拌，有大量固体析出，抽滤烘干后得到白色固体(r)-4-((2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)-3-乙基-n-羟基-5-甲基苄脒286g，收率为92.8％；1hnmr(d6-dmso):9.44(s,1h),7.39-7.37(m,2h),5.69(s,2h),4.45-4.44(m,1h),4.11-4.10(m,1h),3.83-3.82(m,1h),2.66-2.64(m,2h),2.25(s,3h),1.39(d,j＝12.0hz,6h),1.13(t,j＝8.0hz,3h)，ms(esi)m/z:309.4(m+h+).
实施例6
在反应瓶中，加入2-甲氧基-6-环丁烷-4-羧基吡啶(414g，2.0mol)和甲苯2000ml；在20℃条件下滴加氯化亚砜(240g，2.0mol)，约20min滴加完全，再搅拌反应30min后在50℃条件下真空抽滤反应液，排出未反应完的氯化亚砜；加入(r)-4-((2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)-3-乙基-n-羟基-5-甲基苄脒(616g，2.0mol)和三乙胺(400g，4.0mol)的甲苯混合液2000ml，在不超过30℃条件下约20min滴加完全；继续反应15min后加热至回流，通过分水器分出反应过程中生成的水，反应3h后真空浓缩反应液，得到黄色液体品(r)-5-(2-环丁基-6-甲氧基吡啶-4-基)-3-(4-((2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)-3-乙基-5-苄基)-1,2,4-恶二唑950g，收率94％；1hnmr(d6-dmso):7.82(d,j＝6.3hz,2h),7.44(s,1h),7.31(s,1h),4.57-4.56(m,1h),4.23(dd,j1＝8.4hz,j2＝6.5hz,1h),4.09-4.06(m,4h),3.92-3.90(m,2h),3.27-3.26(m,1h),2.77-2.76(m,2h),2.36(s,3h),2.09-2.07(m,2h),1.20-1.97(m,2h),1.74-1.73(m,2h),1.51(s,3h),1.46(d,j＝22.0hz,6h),1.35-1.33(m,3h)，ms(esi)m/z:480.6(m+h+).
实施例7
在反应器中加入(r)-5-(2-环丁基-6-甲氧基吡啶-4-基)-3-(4-((2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)-3-乙基-5-苄基)-1,2,4-恶二唑(960g，2.0mol)和乙醇5000ml，加热到45℃，再加入1nhcl(2000ml)；反应3h缓慢滴加浓度为32％的氢氧化钠溶液调节反应液ph到中性，滴加完后浓缩反应液，再加入乙酸乙酯5000ml，用水4000ml洗涤两次，有机相浓缩后得到产品(s)-3-(4-(5-(2-环丁基-6-甲氧基吡啶-4-基)-1,2,4-恶二唑-3-基)-2-乙基-6-苄氧基)丙烷-1,2-二醇865g，收率为98％；1hnmr(d6-dmso):7.78(s,2h),7.56-7.55(m,1h),7.26-7.25(m,1h),4.98(s,1h),4.69(s,1h),3.91-3.89(m,3h),3.82-3.80(m,2h),3.75-3.74(m,1h),3.53-3.52(m,2h),3.29-3.27(m,1h),2.79-2.77(m,2h),2.32(s,3h),1.81-1.78(m,4h),1.67-1.65(m,2h),1.23-1.21(m,3h)，ms(esi)m/z:440.5(m+h+).
实施例8
抗血小板聚集活性测试
选用健康雄性兔子，随机分组。设正常及噻氯匹定对照组，灌胃给药，剂量30mg/kg-1。正常对照组给予等量质量浓度为0.5％的cmc-na。给药后2h，腹腔注射40mg/kg-1戊巴比妥钠(1ml/kg-1)麻醉，采集兔子心脏部位血液，用质量浓度为3.8％的枸橼酸钠抗凝，分别制备富血小板血浆(prp)和贫血小板血浆(ppp)，将二磷酸腺苷(终浓度：1.5μmol/l-1)加入以诱导血小板聚集，在37℃下检测相对透光率5分钟，观测期间的最大影响被用于计算诱导的血小板最大聚集率和抑制率。抑制率(％)＝(对照组的聚集最大值-测试组的聚集最大值)/对照组的聚集最大值*100％。
由上表可见，我们(s)-3-(4-(5-(2-环丁基-6-甲氧基吡啶-4-基)-1,2,4-恶二唑-3-基)-2-乙基-6-苄氧基)丙烷-1,2-二醇抗血小板聚集效果与噻氯匹定相当。
以上实施例描述了本发明的基本原理、主要特征及优点，本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明原理的范围下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进均落入本发明保护的范围内。