本发明涉及抗菌类化合物领域，具体涉及芳香杂环乙烯基吡唑并嘧啶类化合物、药物制剂及制备方法与应用。
背景技术：
杂环化合物已成为有机和药物化学研究的重要组成部分。大多数市售药物是在杂环支架上构建的，这些支架是负责所需药理活性的药物的核心部分。多年来，这些杂环化合物已通过多种改进的合成方法合成.此外，这些化合物也是合成具有生物学重要性的几种稠合杂环化合物的重要中间体来源.这些稠合杂环化合物在生物过程中起主要作用。它们存在于各种各样的药物，抗生素，维生素，天然产物和许多其他生物分子中。此外，含氮稠合杂环化合物已引起广泛关注，并出现在各种生物活性天然产物，药物，有机材料，染料和农用化学品中。
吡唑和嘧啶类衍生物是具有广泛生物学活性的结构骨架，事实上，通过将这两种杂环骨架通过杂环融合设计得到的吡唑并嘧啶衍生物也具有广泛的生物活性。
吡唑并[4,3-d]嘧啶，作为吡唑并嘧啶的同分异构体，是一个由吡唑环和嘧啶环组成的稠合杂环，在生物学以及药物化学领域受到了广泛关注。吡唑并[4,3-d]嘧啶衍生物已经被证实有许多药理学活性，包括抗肿瘤，抗炎，抗感染，磷酸二酯酶抑制剂，腺苷拮抗剂以及细胞分裂素拮抗剂等。因此，对吡唑并[4,3-d]嘧啶衍生物进行结构改造和修饰，对筛选出有显著抗肿瘤、抗炎等活性的新型化合物具有重要意义。
正是由于这种广泛的生物活性存在，大量的杂环拼合嘧啶衍生物被相继合成。目前已知的几种稠合嘧啶衍生物，如噻吩并嘧啶，吡咯并嘧啶，噻唑并嘧啶和咪唑并嘧啶已显示出良好的抗菌活性。
基于，吡唑并嘧啶骨架的结构修饰具有重要潜在的药用价值，因此，合成一种苯乙烯基吡唑并嘧啶类化合物，提供一种高效抗菌药物，对于开发杀菌、抗炎药物的意义重大。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题在于合成一种高效抗菌、抗炎的苯乙烯基吡唑并嘧啶类化合物，用于开发一种能够杀菌、抗炎药物。
本发明是通过以下技术方案解决上述技术问题的：
一种芳香杂环乙烯基吡唑并嘧啶类化合物，化合物的结构如式i所示：
其中，
r2和r3选自氢、烷基、取代烷基、烷氧基、取代烷氧基、环烷基、取代环烷基、哌嗪基、取代哌嗪基、苯基取代苯基中的任一一种基团。
优选地，化合物的结构如式ii所示：
其中，
r4选自氢、烷基、取代烷基、烷氧基、取代烷氧基、环烷基、取代环烷基、哌嗪基、取代哌嗪基、苯基取代苯基中的任一一种基团；
x＝c、n、o或s；
n＝1或2。
优选地，化合物的结构如式iii所示：
其中，
r5、r6、r7选自h、卤素、c1-c5烷基、硝基、c1-c3烷氧基、苯基、苯氧基、羟基、乙酰胺基、三氟甲基中的任一一种基团；
x＝o或c，y＝n或c；
m＝1或2；
n＝0、1或2。
优选地，所述芳香杂环乙烯基吡唑并嘧啶类化合物的制备方法如下：
将芳香杂环基丙烯酸和氨基吡唑中间体1加入到反应器中，edci和hobt催化缩合反应，制得中间体2；中间体2在碱性条件下，进行关环缩合，制得相应中间体3；中间体3用过量三氯氧磷发生氯化反应，制得关键的中间体4；中间体4和相应胺的衍生物进行取代反应即得式i化合物。
本发明同时公开上述芳香杂环乙烯基吡唑并嘧啶类化合物的制备方法，制备方法如下：
中间体1将芳香杂环基丙烯酸和氨基吡唑中间体1加入到反应器中，edci和hobt催化缩合反应，制得中间体2；中间体2在碱性条件下，进行关环缩合，制得相应中间体3；中间体3用过量三氯氧磷发生氯化反应，制得关键的中间体4；中间体4和相应胺的衍生物进行取代反应即得芳香杂环乙烯基吡唑并嘧啶类化合物，反应过程如下：
其中，
优选地，所述芳香杂环乙烯基吡唑并嘧啶类化合物的制备方法如下：
s1、将1-10ml二氯甲烷、0.362-3.62mmol芳香杂环基丙烯酸、0.54-5.4mmoledci、0.54-5.4mmolhobt，加入反应器中，室温搅拌25-35min后，加入0.362-3.62mmol中间体1以及0.3-3ml的三乙胺，室温搅拌5-10h，tlc监控至反应完全，反应完成后，反应液浓缩至干，加入大量水，搅拌，抽滤，水洗，干燥，得白色固体，即为中间体2粗品，中间体2粗品重结晶后得到中间体2；
其中，芳香杂环基丙烯酸为：2-呋喃丙烯酸、2-吡啶丙烯酸中的任一一种化合物；
s2、依次将2-200ml的无水乙醇、1.58-158mmol金属钠加入到反应器中，干燥条件下，搅拌至金属钠溶解，得到乙醇钠溶液后，加入0.165-16.5mmol中间体2，隔绝湿气条件下，回流搅拌反应6-12h，tlc监控至反应完全，浓缩部分乙醇，稀盐酸调节反应液ph＝3-4后，析出白色固体，过滤，洗涤，干燥，即得中间体3；
s3、反应瓶中，依次加入干燥0.175-17.5mmol中间体2、0.5-5mlpocl3，隔绝湿气条件下，反应6-12h，tlc监控反应，反应完成后，冷却至室温，然后将反应溶液倾入约5-500g冰水混合物中，充分搅拌待碎冰完全消失，用乙酸乙酯萃取，有机层用水，饱和碳酸氢钠洗涤，干燥，浓缩至干，即得中间体4；
s4、依次将0.33-3.3mmol中间体4、1-10ml异丙醇、0.33-3.3mmol相应胺的衍生物加入到反应器中，回流反应6-12h，tlc监控，反应完成后，冷却至室温，经分离纯化后，即得芳香杂环乙烯基吡唑并嘧啶类化合物。
优选地，所述步骤s4中相应胺的衍生物为以下胺化物中的任一一种化合物：吗啉、2-氯苯乙胺、2-氯苄胺、2-甲氧基苄胺、3-甲氧基苄胺、4-甲氧基苄胺、4-溴苄胺、4-氟苄胺、4-甲氨基吡啶、n-吗啉基苯胺、糠胺、异丙胺、仲丁胺、4-三氟甲基苄胺、正丁胺。
本发明同时公开一种以芳香杂环乙烯基吡唑并嘧啶类化合物为活性化合物的药物制剂，添加药剂学中能够接受的辅料，将活性化合物制备成片剂、胶囊剂、锭剂、注射剂、悬浮剂、栓型、软膏剂中的一种或多种剂型。
优选地，所述辅料包括赋形剂和载体，所述赋形剂包括碳酸钙、磷酸钙、糖类、淀粉、纤维素衍生物、明胶、植物油和聚乙二醇中的一种或多种组合物，载体包括稀释剂、崩解剂、粘合剂和润滑剂中的一种或多种组合物。
优选地，所述药物制剂中活性化合物的剂量为0.01-500mg/kg。
优选地，所述药物制剂中活性化合物的剂量为250mg/kg。
本发明同时将上述药物制剂应用在制备抗炎药物中。
本发明相比现有技术具有以下优点：
1、制备工艺简单、操作方便；
2、具有良好的抗炎活性，在各种急慢性炎症的治疗中体现出良好的应用前景，在对如脓毒血症等急性炎症和以ⅱ型糖尿病、阿尔海默茨病和动脉粥样硬化症为代表的慢性炎症的治疗中体现了良好的应用潜力。
具体实施方式
下面对本发明的实施例作详细说明，本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
实施例1
(e)-4-(5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-基)吗啉(结构如式ⅰ-1所示)的制备：
1.1、中间体2的制备：
制备方法：
反应瓶中加入二氯甲烷10ml，2-呋喃丙烯酸(0.5g，3.62mmol)，1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(edci，5.43mmol)和1-羟基苯并三唑(hobt,5.43mmol),室温反应30min，加入氨基吡唑中间体1(3.62mmol)和三乙胺3ml，室温搅拌10h，tlc监控；反应完成后，浓缩至干，加入大量水，搅拌，抽滤，水洗，干燥，得白色固体，即为中间体2粗品。
1.2、中间体3的制备
制备方法：
干燥条件下，反应瓶中加入20ml无水乙醇，加入金属钠(365mg，15.8mmol)，干燥条件下，搅拌至金属钠溶解，成为溶液，然后加入中间体2(500mg，1.65mmol)，隔绝湿气条件下，回流搅拌反应6-12h，tlc监控；反应完全后，浓缩部分乙醇，用稀盐酸调节ph＝3-4，析出白色固体，过滤，洗涤，干燥，即得中间体3。
1.3、中间体4的制备
制备方法：
反应瓶中，加入干燥中间体3(0.5g，1.75mmol)，加入三氯氧磷(pocl3)(5ml，53.75mmol)，隔绝湿气条件下，反应约6-12h，tlc监控；反应完成后，冷却至室温，然后将反应溶液倾入约50g冰水混合物中，充分搅拌待碎冰完全消失，用乙酸乙酯萃取，有机层用水，饱和碳酸氢钠洗涤，干燥，浓缩干，即得中间体4。
1.4、(e)-4-(5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-基)吗啉(式ⅰ-1)的制备
制备方法：
反应瓶中，加入中间体4(100mg，0.33mmol)(制备方法见实施例1)，加入10ml异丙醇，再加入吗啉(0.33mmol)，回流反应约6-12h，tlc监控，反应完成后，冷却至室温，减压浓缩至干，用异丙醇重结晶，得到黄色固体，即(e)-4-(5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-基)吗啉。
(e)-4-(5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-基)吗啉(式ⅰ-1)的结构数据表征：
1hnmr(600mhz,chloroform-d)δ7.63(d,j＝15.7hz,1h),7.44(s,1h),7.14(d,j＝15.7hz,1h),6.50(s,1h),6.44(s,1h),4.08(s,3h),3.92(s,4h),3.55(s,4h),2.96(t,j＝7.1hz,1h),1.89–1.81(m,2h,ch2),1.02(t,j＝7.1hz,3h,ch3).
13cnmr(151mhz,chloroform-d)δ157.11,153.64,153.10,147.51,143.13,126.84,124.28,123.25,111.94,110.63,66.51,50.05,38.58,27.95,22.26,14.18.
hr-ms:calcdforc19h24n5o2[m+h]+,354.1925；found354.1925。
实施例2
(e)-n-(2-氯苯乙基)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺(结构如式ⅰ-2所示)的制备：
制备方法：
反应瓶中，加入中间体4(100mg，0.33mmol)(制备方法见实施例1)，加入10ml异丙醇，再加入2-氯苯乙胺(0.33mmol)，回流反应约6-12h，tlc监控，反应完成后，冷却至室温，减压浓缩至干，用异丙醇重结晶，得到白色固体，即(e)-n-(2-氯苯乙基)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺。
结构数据表征：
1hnmr(300mhz,dmso)δ9.10(brs,1h),7.95(s,1h,arh),7.84(d,j＝15.3hz,1h,＝ch),7.40(m,2h,arh),7.25–7.20(m,2h,arh),7.16(d,j＝15.3hz,1h,＝ch),6.97(d,j＝3.2hz,1h,arh),6.73(s,1h,arh),4.27(s,3h,nch3),4.04(d,j＝6.6hz,2h,ch2),3.17(t,j＝6.8hz,2h,ch2),2.91(t,j＝7.5hz,2h,ch2),1.69(dd,j＝14.8,7.5hz,2h,ch2),0.94(t,j＝7.3hz,3h,ch3)。
hr-ms:calcdforc23h25cln5o[m+h]+,422.1742；found422.1747.
实施例3
(e)-n-(2-氯苄基)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺(结构如式ⅰ-3所示)的制备：
制备方法：
反应瓶中，加入中间体4(100mg，0.33mmol)(制备方法见实施例1)，加入10ml异丙醇，再加入2-氯苄胺(0.33mmol)，回流反应约6-12h，tlc监控，反应完成后，冷却至室温，减压浓缩至干，残余物经柱层析纯化，洗脱剂为石油醚：乙酸乙酯(10:1,v/v)，得到白色固体，即(e)-n-(2-氯苄基)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺。
结构数据表征：
1hnmr(600mhz,chloroform-d)δ7.65(dd,j＝15.6,1.5hz,1h),7.57(t,j＝5.6hz,0h),7.44(s,1h),7.40(t,j＝5.6hz,0h),7.26–7.21(m,2h),7.11(d,j＝15.7hz,1h),6.50(d,j＝2.0hz,1h),6.44(dd,j＝3.3,1.6hz,1h),5.70(t,j＝6.0hz,1h),4.99(d,j＝6.0hz,1h),4.21(s,2h),2.91(t,j＝7.1hz,2h),1.83(q,j＝7.5hz,2h),1.00(t,j＝7.8hz,3h).
13cnmr(151mhz,chloroform-d)δ157.56,153.30,148.98,145.75,143.34,143.00,135.95,133.85,131.03,129.79,129.27,127.44,127.27,122.98,121.14,111.88,110.31,42.78,39.12,27.84,22.72,22.36,14.17。
实施例4
(e)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-n-(2-甲氧基苄基)-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺(结构如式ⅰ-4所示)的制备
制备方法：
反应瓶中，加入中间体4(100mg，0.33mmol)(制备方法见实施例1)，加入10ml异丙醇，再加入2-甲氧基苄胺(0.33mmol)，回流反应约6-12h，tlc监控，反应完成后，冷却至室温，减压浓缩至干，残余物经柱层析纯化，洗脱剂为石油醚：乙酸乙酯(10:1,v/v)，得到白色固体，即(e)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-n-(2-甲氧基苄基)-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺。
结构数据表征：
1hnmr(600mhz,chloroform-d)δ7.70(d,j＝15.7hz,1h),7.45(s,2h),7.32–7.27(m,1h),7.12(d,j＝15.7hz,1h),6.99–6.92(m,2h),6.52(d,j＝3.0hz,1h),6.45(dd,j＝3.1,1.7hz,1h),5.85(s,1h),4.92(d,j＝5.7hz,2h),4.18(s,3h),3.94(s,3h),2.94–2.87(m,2h),1.83(q,j＝7.5hz,2h),1.00(t,j＝7.3hz,3h).
13cnmr(151mhz,chloroform-d)δ157.88,157.71,153.44,149.42,145.67,143.02,142.94,130.46,129.22,127.69,126.44,122.92,121.38,121.07,111.86,110.68,110.15,55.60,41.10,38.96,27.85,22.40,14.18。
实施例5
(e)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-n-(3-甲氧基苄基)-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺(结构如式ⅰ-5所示)的制备
制备方法:
反应瓶中，加入中间体4(100mg，0.33mmol)(制备方法见实施例1)，加入10ml异丙醇，再加入3-甲氧基苄胺(0.33mmol)，回流反应约6-12h，tlc监控，反应完成后，冷却至室温，减压浓缩至干，残余物经柱层析纯化，洗脱剂为石油醚：乙酸乙酯(10:1,v/v)，得到白色固体，即(e)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-n-(3-甲氧基苄基)-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺。
结构数据表征：
1hnmr(600mhz,chloroform-d)δ7.64(d,j＝15.7hz,1h),7.43(d,j＝1.7hz,1h),7.30(t,j＝8.1hz,1h),7.12(d,j＝15.7hz,1h),7.04–7.00(m,2h),6.88–6.84(m,1h),6.48(d,j＝3.4hz,1h),6.43(dd,j＝3.3,1.8hz,1h),5.33(t,j＝5.5hz,1h),4.90(d,j＝5.4hz,2h),4.19(s,3h),3.80(s,3h),2.95–2.91(m,2h),1.89–1.81(m,2h),1.02(t,j＝7.4hz,3h).
13cnmr(151mhz,chloroform-d)δ160.11,157.68,153.29,149.18,145.83,143.37,143.02,140.33,130.07,127.37,123.12,121.05,120.27,113.87,113.17,111.88,110.37,55.40,45.00,39.20,27.86,22.39,14.
实施例6
(e)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-n-(4-甲氧基苄基)-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺(结构如式ⅰ-6所示)的制备
制备方法：
反应瓶中，加入中间体4(100mg，0.33mmol)(制备方法见实施例1)，加入10ml异丙醇，再加入4-甲氧基苄胺(0.33mmol)，回流反应约6-12h，tlc监控，反应完成后，冷却至室温，减压浓缩至干，残余物经柱层析纯化，洗脱剂为石油醚：乙酸乙酯(10:1,v/v)，得到白色固体，即(e)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-n-(4-甲氧基苄基)-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺。
结构数据表征：
1hnmr(600mhz,chloroform-d)δ7.66(d,j＝15.7hz,1h),7.43(d,j＝1.7hz,1h),7.39–7.36(m,2h),7.13(d,j＝15.7hz,1h),6.92–6.89(m,2h),6.49(d,j＝3.3hz,1h),6.43(dd,j＝3.3,1.8hz,1h),5.25(t,j＝5.3hz,1h),4.85(d,j＝5.3hz,2h),4.16(s,3h),3.81(s,3h),2.93(t,j＝7.7hz,2h),1.85(q,j＝7.6hz,2h),1.01(t,j＝7.3hz,3h).
13cnmr(151mhz,chloroform-d)δ159.21,157.56,153.18,149.04,145.64,143.13,142.87,130.55,129.38,127.28,122.95,120.90,114.24,111.74,110.21,55.32,44.38,39.03,27.72,22.25,14.05.
实施例7
(e)-n-(4-溴苄基)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺(结构如式ⅰ-7所示)的制备
制备方法：
反应瓶中，加入中间体4(100mg，0.33mmol)(制备方法见实施例1)，加入10ml异丙醇，再加入4-溴苄胺(0.33mmol)，回流反应约6-12h，tlc监控，反应完成后，冷却至室温，减压浓缩至干，残余物经柱层析纯化，洗脱剂为石油醚：乙酸乙酯(10:1,v/v)，得到黄色固体，即(e)-n-(4-溴苄基)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺。
结构数据表征:
1hnmr(600mhz,chloroform-d)δ7.57(d,j＝15.7hz,1h),7.50–7.47(m,2h),7.43(d,j＝1.7hz,1h),7.31(d,j＝8.3hz,2h),7.10(d,j＝15.7hz,1h),6.47(d,j＝3.2hz,1h),6.43(dd,j＝3.3,1.8hz,1h),5.37(t,j＝5.6hz,1h),4.87(d,j＝5.5hz,2h),4.19(s,3h),2.94–2.90(m,2h),1.84(q,j＝7.5hz,2h),1.01(t,j＝7.4hz,3h).
13cnmr(151mhz,chloroform-d)δ157.60,153.20,149.05,145.86,143.46,143.06,137.80,132.03,129.75,127.23,123.13,121.66,120.97,111.90,110.44,44.32,39.20,27.86,22.37,14.19.
实施例8
(e)-n-(4-氟苄基)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺(结构如式ⅰ-8所示)的制备
制备方法：
反应瓶中，加入中间体4(100mg，0.33mmol)(制备方法见实施例1)，加入10ml异丙醇，再加入4-氟苄胺(0.33mmol)，回流反应约6-12h，tlc监控，反应完成后，冷却至室温，减压浓缩至干，残余物经柱层析纯化，洗脱剂为石油醚：乙酸乙酯(10:1,v/v)，得到白色固体，即(e)-n-(4-氟苄基)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺。
结构数据表征：
1hnmr(600mhz,chloroform-d)δ7.60(d,j＝15.7hz,1h),7.43(d,j＝1.7hz,1h),7.41(dd,j＝8.4,5.4hz,2h),7.11(d,j＝15.7hz,1h),7.04(t,j＝8.6hz,2h),6.47(d,j＝3.3hz,1h),6.43(dd,j＝3.3,1.8hz,1h),5.40(t,j＝5.3hz,1h),4.87(d,j＝5.4hz,2h),4.17(s,3h),2.92(t,j＝7.7hz,2h),1.84(q,j＝7.6hz,2h),1.01(t,j＝7.3hz,3h).
13cnmr(151mhz,chloroform-d)δ162.27(d,j＝245.8hz),157.47,153.07,148.96,145.64,143.14,142.94,134.37(d,j＝3.4hz),129.65(d,j＝8.2hz),127.04,123.03,120.86,115.68(d,j＝21.4hz),111.77,110.33,44.11,39.05,27.72,22.25,14.05.
实施例9
(e)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-1-甲基-3-丙基-n-(吡啶-4-基甲基)-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7--胺(结构如式ⅰ-9所示)的制备
制备方法：
反应瓶中，加入中间体4(100mg，0.33mmol)(制备方法见实施例1)，加入10ml异丙醇，再加入4-甲氨基吡啶(0.33mmol)，回流反应约6-12h，tlc监控，反应完成后，冷却至室温，减压浓缩至干，残余物经柱层析纯化，洗脱剂为石油醚：乙酸乙酯(10:1,v/v)，得到白色固体，即(e)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-1-甲基-3-丙基-n-(吡啶-4-基甲基)-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7--胺。
结构数据表征：
1hnmr(600mhz,chloroform-d)δ8.60–8.55(m,2h),7.47(d,j＝15.7hz,1h),7.41(d,j＝1.7hz,1h),7.34–7.32(m,2h),7.07(d,j＝15.7hz,1h),6.44(d,j＝3.3hz,1h),6.42(dd,j＝3.3,1.8hz,1h),5.56(t,j＝5.8hz,1h),4.94(d,j＝5.7hz,2h),4.24(s,3h),2.93(t,j＝7.7hz,2h),1.85(q,j＝7.4hz,2h),1.01(t,j＝7.3hz,3h).
13cnmr(151mhz,chloroform-d)δ157.55,153.10,150.19,148.97,148.06,146.00,143.66,143.10,127.02,123.20,122.55,120.95,111.91,110.52,43.80,39.25,27.86,22.36,14.19.
实施例10
(e)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-1-甲基-n-(3-吗啉代丙基)-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺(结构如式ⅰ-10所示)的制备
制备方法：
反应瓶中，加入中间体4(100mg，0.33mmol)(制备方法见实施例1)，加入10ml异丙醇，再加入n-吗啉基苯胺(0.33mmol)，回流反应约6-12h，tlc监控，反应完成后，冷却至室温，减压浓缩至干，残余物经柱层析纯化，洗脱剂为石油醚：乙酸乙酯(10:1,v/v)，得到白色固体，即(e)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-1-甲基-n-(3-吗啉代丙基)-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺。
结构数据表征：
1hnmr(600mhz,chloroform-d)δ7.62(d,j＝15.7hz,1h),7.43(s,1h),7.10(d,j＝15.7hz,1h),6.48(d,j＝3.1hz,1h),6.43(dd,j＝3.1,1.7hz,1h),6.07(s,1h),4.24(s,3h),3.80(q,j＝6.1hz,2h),3.72(t,j＝4.4hz,4h),2.94–2.91(m,2h),2.57(t,j＝6.2hz,2h),2.52(s,4h),1.97–1.89(m,2h),1.85(q,j＝7.5hz,2h),1.01(t,j＝7.4hz,3h).
13cnmr(151mhz,chloroform-d)δ157.66,153.36,149.49,145.84,143.02,142.93,127.69,122.80,121.31,111.86,110.08,66.78,58.36,54.22,40.94,39.33,27.87,24.69,22.37,14.19.
实施例11
(e)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-n-(呋喃-2-基甲基)-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7--胺(结构如式ⅰ-11所示)的制备
制备方法：
反应瓶中，加入中间体4(100mg，0.33mmol)(制备方法见实施例1)，加入10ml异丙醇，再加入糠胺(0.33mmol)，回流反应约6-12h，tlc监控，反应完成后，冷却至室温，减压浓缩至干，残余物经柱层析纯化，洗脱剂为石油醚：乙酸乙酯(10:1,v/v)，得到白色固体，即(e)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-n-(呋喃-2-基甲基)-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7--胺。
结构数据表征：
1hnmr(600mhz,chloroform-d)δ7.67(d,j＝15.7hz,1h),7.44(s,1h),7.42–7.38(m,1h),7.12(d,j＝15.7hz,1h),6.50(d,j＝3.1hz,1h),6.44(dd,j＝3.1,1.7hz,1h),6.37(dt,j＝4.8,3.0hz,2h),5.35(d,j＝4.6hz,1h),4.91(d,j＝5.2hz,2h),4.20(s,3h),2.95–2.90(m,2h),1.84(q,j＝7.5hz,2h),1.01(t,j＝7.4hz,3h).
13cnmr(151mhz,chloroform-d)δ157.53,153.32,151.54,148.81,145.83,143.39,143.03,142.42,127.36,123.12,121.14,111.89,110.77,110.34,108.06,39.13,37.92,27.86,22.35,14.17.
实施例12
(e)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-n-异丙基-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺(结构如式ⅰ-12所示)的制备
制备方法:
反应瓶中，加入中间体4(100mg，0.33mmol)(制备方法见实施例1)，加入10ml异丙醇，再加入异丙胺(0.33mmol)，回流反应约6-12h，tlc监控，反应完成后，冷却至室温，减压浓缩至干，残余物经柱层析纯化，洗脱剂为石油醚：乙酸乙酯(10:1,v/v)，得到白色固体，即(e)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-n-异丙基-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺。
结构数据表征：
1hnmr(600mhz,chloroform-d)δ7.61(d,j＝15.7hz,1h),7.43(s,1h),7.10(d,j＝15.7hz,1h),6.49(d,j＝3.1hz,1h),6.43(dd,j＝3.1,1.7hz,1h),4.81(d,j＝6.7hz,1h),4.67–4.60(m,1h),4.21(s,3h),2.94–2.90(m,2h),1.84(q,j＝7.5hz,2h),1.38(d,j＝6.5hz,6h),1.01(t,j＝7.3hz,3h).
13cnmr(151mhz,chloroform-d)δ157.74,153.38,148.85,145.68,143.06,142.91,127.67,122.87,121.09,111.84,110.12,42.71,39.10,27.83,22.92,22.39,14.18.
实施例13
(e)-n-仲丁基-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺(结构如式ⅰ-13所示)的制备
制备方法：
反应瓶中，加入中间体4(100mg，0.33mmol)(制备方法见实施例1)，加入10ml异丙醇，再加入仲丁胺(0.33mmol)，回流反应约6-12h，tlc监控，反应完成后，冷却至室温，减压浓缩至干，残余物经柱层析纯化，洗脱剂为石油醚：乙酸乙酯(10:1,v/v)，得到白色固体，即(e)-n-仲丁基-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺。
结构数据表征：
1hnmr(600mhz,chloroform-d)δ7.60(d,j＝15.7hz,1h),7.43(s,1h),7.10(d,j＝15.7hz,1h),6.49(d,j＝3.1hz,1h),6.43(dd,j＝3.2,1.7hz,1h),4.80(d,j＝7.5hz,1h),4.52–4.45(m,1h),4.21(s,3h),2.95–2.90(m,2h),1.84(q,j＝7.5hz,2h),1.77–1.63(m,2h),1.34(d,j＝6.5hz,3h),1.05–1.02(m,3h),1.01(t,j＝5.8hz,3h).
13cnmr(151mhz,chloroform-d)δ157.76,153.39,149.14,145.69,143.06,142.91,127.68,122.87,121.13,111.84,110.10,47.81,39.12,29.70,27.84,22.40,20.36,14.19,10.55.
实施例14
(e)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-1-甲基-3-丙基-n-(4-(三氟甲基)苄基)-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺(结构如式ⅰ-14所示)的制备
制备方法：
反应瓶中，加入中间体4(100mg，0.33mmol)(制备方法见实施例1)，加入10ml异丙醇，再加入4-三氟甲基苄胺(0.33mmol)，回流反应约6-12h，tlc监控，反应完成后，冷却至室温，减压浓缩至干，残余物经柱层析纯化，洗脱剂为石油醚：乙酸乙酯(10:1,v/v)，得到白色固体，即(e)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-1-甲基-3-丙基-n-(4-(三氟甲基)苄基)-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺。
结构数据表征：
1hnmr(600mhz,chloroform-d)δ7.62(d,j＝8.1hz,2h),7.57–7.52(m,3h),7.42(s,1h),7.09(d,j＝15.7hz,1h),6.46(d,j＝3.1hz,1h),6.44–6.42(m,1h),5.44(s,1h),4.99(d,j＝5.5hz,2h),4.21(s,3h),2.95–2.91(m,2h),1.85(q,j＝7.5hz,2h),1.01(t,j＝7.4hz,3h).
13cnmr(151mhz,chloroform-d)δ157.42,153.00,148.89,145.75,143.37,142.92,142.78,δ129.87(q,j＝32.5hz),128.03,126.96,125.69(q,j＝3.8hz),124.03(d,j＝271.9hz).,123.02,120.82,111.75,110.32,44.28,39.04,27.70,22.19,14.01.
实施例15
(e)-n-丁基-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺(结构如式ⅰ-15所示)的制备
制备方法：
反应瓶中，加入中间体4(100mg，0.33mmol)(制备方法见实施例1)，加入10ml异丙醇，再加入正丁胺(0.33mmol)，回流反应约6-12h，tlc监控，反应完成后，冷却至室温，减压浓缩至干，残余物经柱层析纯化，洗脱剂为石油醚：乙酸乙酯(10:1,v/v)，得到白色固体，即((e)-n-丁基-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-1-甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺。
结构数据表征：
1hnmr(600mhz,chloroform-d)δ7.61(d,j＝15.7hz,1h),7.42(s,1h),7.09(d,j＝15.7hz,1h),6.47(d,j＝3.2hz,1h),6.42(dd,j＝3.1,1.7hz,1h),5.07(s,1h),4.18(s,3h),3.68(q,j＝7.0hz,2h),2.94–2.87(m,2h),1.83(q,j＝7.5hz,2h),1.74–1.67(m,2h),1.47(q,j＝7.4hz,2h),1.00(t,j＝7.3hz,6h).
13cnmr(151mhz,chloroform-d)δ157.68,153.35,149.54,145.64,142.95,142.91,127.54,122.91,121.17,111.82,110.15,40.71,39.06,31.58,27.84,22.34,20.38,14.15,13.98.
实施例16
(e)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-n，n，1-三甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺(结构如式ⅰ-15所示)的制备
制备方法：
反应瓶中，加入中间体4(100mg，0.33mmol)(制备方法见实施例1)，加入10ml异丙醇，再加入二甲胺盐酸盐(0.33mmol)，3滴三乙胺，回流反应约6-12h，tlc监控，反应完成后，冷却至室温，减压浓缩至干，残余物经柱层析纯化，洗脱剂为石油醚：乙酸乙酯(10:1,v/v)，得到白色固体，即(e)-5-(2-(呋喃-2-基)乙烯基)-n，n，1-三甲基-3-丙基-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺。
结构数据表征：
1hnmr(600mhz,chloroform-d)δ7.66(d,j＝15.7hz,1h),7.44(s,1h),7.14(d,j＝15.7hz,1h),6.50(d,j＝3.0hz,1h),6.45–6.40(m,1h),4.10(s,3h),3.15(s,6h),2.96(t,j＝7.7hz,2h),1.86(dt,j＝14.9,7.5hz,2h),1.03(t,j＝7.4hz,3h).
13cnmr(151mhz,chloroform-d)δ156.97,154.42,153.31,147.25,144.90,143.00,127.20,124.31,123.03,111.88,110.33,41.11,39.29,27.99,22.29,14.21.
实施例17
(e)-n-(2-甲氧基苄基)-1-甲基-3-丙基-5-(2-(吡啶-4-基)乙烯基)-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺(结构如式ⅰ-17所示)的制备
制备方法：
反应瓶中，加入中间体4(100mg，0.32mmol)(制备方法见实施例1)，加入10ml异丙醇，再加入2-甲氧基苄胺(0.33mmol)，回流反应约6-12h，tlc监控，反应完成后，冷却至室温，减压浓缩至干，残余物经柱层析纯化，洗脱剂为石油醚：乙酸乙酯(10:1,v/v)，得到白色固体，即为(e)-n-(2-甲氧基苄基)-1-甲基-3-丙基-5-(2-(吡啶-4-基)乙烯基)-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺。
结构数据表征：
1hnmr(600mhz,chloroform-d)δ8.59(d,j＝4.6hz,2h),7.79(d,j＝15.8hz,1h),7.45(t,j＝5.9hz,3h),7.37(d,j＝15.8hz,1h),7.30(t,j＝7.8hz,1h),6.99–6.92(m,2h),5.92(t,j＝5.3hz,1h),4.93(d,j＝5.6hz,2h),4.20(s,3h),3.94(s,3h),2.92(t,j＝7.7hz,2h),1.89–1.81(m,2h),1.01(t,j＝7.4hz,3h).
13cnmr(151mhz,chloroform-d)δ157.75,156.71,150.12,149.37,145.83,144.36,142.81,133.72,132.25,130.23,129.18,126.13,121.46,121.37,120.93,110.63,55.49,55.48,41.10,38.82,27.69,22.20,13.98。
实施例18
(e)-n-(2-氯苄基)-1-甲基-3-丙基-5-(2-(吡啶-4-基)乙烯基)-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺(结构如式ⅰ-18所示)的制备
制备方法：
反应瓶中，加入中间体4(100mg，0.32mmol)(制备方法见实施例1)，加入10ml异丙醇，再加入2-氯苄胺(0.33mmol)，回流反应约6-12h，tlc监控，反应完成后，冷却至室温，减压浓缩至干，残余物经柱层析纯化，洗脱剂为石油醚：乙酸乙酯(10:1,v/v)，得到黄色固体，即为(e)-n-(2-氯苄基)-1-甲基-3-丙基-5-(2-(吡啶-4-基)乙烯基)-1h-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-胺。
结构数据表征：
1hnmr(600mhz,chloroform-d)δ8.54(d,j＝4.6hz,2h),7.76(d,j＝15.8hz,1h),7.43(t,j＝5.9hz,3h),7.37(d,j＝15.8hz,1h),7.30(t,j＝7.8hz,1h),6.99–6.92(m,2h),5.92(t,j＝5.3hz,1h),4.93(d,j＝5.6hz,2h),4.21(s,3h)，2.92(t,j＝7.7hz,2h),1.89–1.81(m,2h),1.01(t,j＝7.4hz,3h).
13cnmr(151mhz,chloroform-d)δ157.75,156.70,150.20,149.36,145.63,144.36,142.81,133.56,132.45,130.23,128.98,126.44,121.76,121.46,120.83,110.63,55.59,55.58，27.79,22.24,13.88。
实施例19
以上述实施例制备得到的芳香杂环乙烯基吡唑并嘧啶类化合物为活性化合物，按照药物制剂常规的制备方法，将上述活性化合物制备成片剂、胶囊剂、锭剂、注射剂、悬浮剂、栓型、软膏剂中的一种或多种剂型。其中，制剂中包括活性化合物本身以及药学上能够接受的辅料，辅料为载体或赋形剂。
其中，上述药物制剂中活性化合物的剂量为0.01-500mg/kg。
其中，赋形剂为碳酸钙、磷酸钙、糖类、淀粉、纤维素衍生物、明胶、植物油或聚乙二醇；载体为稀释剂、崩解剂、粘合剂或润滑剂。
抗炎活性验证实验：
为了验证本发明公开的芳香杂环乙烯基吡唑并嘧啶类化合物具有抗炎活性，选取上述实施例制备得到的芳香杂环乙烯基吡唑并嘧啶类化合物化合物(式ⅰ-1～式ⅰ-18)进行活性实验。
1、实验原理：实验采用no含量测定法，利用硝酸还原酶还原硝酸盐为亚硝酸盐，然后通过griessreagent试剂检测亚硝酸盐，从而计算出总的no含量。
2、实验步骤如下：
(1)取处于对数生长期细胞，收集细胞，利用细胞计数板进行计数；利用培养基进行稀释细胞使浓度为1.4*105/ml，接种细胞在24孔板内，每孔加入体积为500μl，培养过夜；
(2)24孔板分为三组：空白组(只有细胞)、模型组(细胞+lps)、实验组(细胞+lps+化合物)；
(3)隔夜后换液，空白组、模型组直接换新鲜培养基500μl，实验组每孔加入含有不同浓度(40、20、10、5、2.5μm)的化合物溶液500μl；
(4)1h后加入lps进行刺激，使lps的终浓度为1μg/ml(一般可以把高浓度的lps用少量培养基进行稀释，再进行滴加)；
(5)24h后，观察细胞提细胞上清液，用碧云天生产的一氧化氮检测试剂盒检测并计算细胞上清no的浓度；
(6)配置标准曲线：用新鲜培养基稀释标准品浓度为1、5、10、20、40、60、100μm；
(7)按50μl每孔，在96孔板中分别加入标准品及细胞上清；
(8)每孔分别先加室温50μlgriessreagentⅰ，再加50μlgriessreagentⅱ；
(9)使用酶标仪在540nm测定吸光度，带入标曲算出no含量。
(10)以上实验均重复三次，结果用spss17.0统计分析软件进行分析作图。
3、实验结果：实验结果如表1所示：
表1：各实施例中相应编号化合物的抗炎活性数据统计表
注：ic50值单位为：μmol/l，“--”表示ic50值大于50μmol/l,没有进行复筛，“/”表示未测试活性。
由表1可知：本实施例提供的各吡唑并嘧啶杂环化合物具有良好的抗炎活性，在各种急慢性炎症的治疗中体现出良好的应用前景，在对如脓毒血症等急性炎症和以ⅱ型糖尿病、阿尔海默茨病和动脉粥样硬化症为代表的慢性炎症的治疗中体现了良好的应用潜力。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。