二芳基取代的吡唑并环类衍生物、其制备方法及其在医药领域的应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及二芳基取代的化挫并环类衍生物及其制备方法和应用，具体地，设及 一种具有B-RAFV600E突变高表达的SK-MEL28细胞抑制活性的二芳基取代的化挫并环类 衍生物、其制备方法及其在医药上的应用。
【背景技术】
[0002] 肿瘤是威胁人类健康的最严重疾病之一，近年来随着细胞生物学和肿瘤药理学的 发展，肿瘤的化学药物治疗发生了巨大改变。传统的化学治疗药物由于非特异性地阻断细 胞分裂从而在杀死肿瘤细胞的同时也引起正常细胞死亡而逐渐遭到擬弃，同时，W肿瘤细 胞中异常激活的信号通路中的关键节点蛋白作为祀点，发现高效、低毒、特异性强的小分子 抑制剂已成为当今抗肿瘤药物研究开发的重要方向。在肿瘤中异常表达激活的受体酪氨酸 激酶（RTK)由于在肿瘤发生发展、侵袭转移、化疗抗性等各个环节均发挥关键作用已成为 抗肿瘤药物研究的热点。
[0003] 细胞分裂素活化蛋白激酶（MAPKs)通过大量细胞表面受体介导胞内信号传递。在 MAPK介导的通路中，RAF/MEK/ERK信号级联受到广泛关注，因为它在大量人类癌症的形成 中起重要作用，特别是那些与RAF蛋白激活有关的作用。
[0004] 研究表明RAF的激活主要包括通过N末端的调控区域来解除对RAF催化区域的 抑制。RAS结合区域和富含半脱氨酸的区域都参与了激酶区域的相互作用W及RAF的自身 抑制。该个基本作用模式适用于所有的S种Raf蛋白（A-RAF，B-RAF和C-RAF)。但是对于 A-RAF和C-RAF来说还需要一些其他的步骤来达到最大程度的激活，如激活氨基酸残基的 磯酸化和负调控氨基酸残基的去磯酸化。因此，B-RAF是该家族中最容易被RAS激活的蛋 白。另外，B-RAF激酶的活性要比C-RAF和A-RAF高很多。
[0005] 根据现有的研究成果，B-RAF为与细胞增殖相关的重要的同工型蛋白，且为致癌的 RAS的重要祀标。已证实体内的异常突变仅在B-RAF的情况下发生，该异常突变被认为发生 在皮肤恶性黑色素瘤中的发生率为30~60% (化化re, 2002, 417, 949~954)，在甲状腺 癌中的发生率为30~50 %，在结肠直肠癌中的发生率为5~20 %，在卵巢癌中的发生率为 30%或更少（化1:脚6Rev.Mol.CellBiology, 2004, 5, 875 ~885)。迄今为止，已发现 45 种 或更多种的B-RAF突变。突变的B-RAF蛋白在NI册T3细胞（化化re, 2002, 417, 949~954) 和黑色素瘤细胞（CancerRes. ,2004, 64, 2338~2342)中被转变，且对于黑色素瘤的存活 和转变是必不可少的（CancerRes.，2003, 63, 5198~5202)。因此，处于Raf/MEK/E服的串 联信号转导核屯、的B-Raf在肿瘤的存活中起着至关重要的作用。
[0006]RAF激酶抑制剂已被用于阻止肿瘤细胞增殖从而治疗W下的癌症；组织细胞淋己 瘤、小细胞肺癌和膜腺癌W及乳腺癌。Sorafenib是口服的抑制细胞生长的多祀点激酶抑制 剂，被FDA批准用于治疗晚期肾细胞癌。Sorafenib通过抑制肿瘤细胞增生和肿瘤血管生成 W阻止肿瘤生长（Clark等，2005,ClinicalCancerRes11(15):5472-5480;化等，2005， Oncogene24(46):6861-6869;Wilhelm等，2004,CancerRes. 64(19):7099-7109)。
[0007] 但是上述祀向疗法的应用并不理想，会出现诸如耐药性W及一般人群缺乏肿瘤应 答等问题。因此，本领域亟需开发新的抑制剂来克服肿瘤治疗中的诸多问题。
【发明内容】
[000引本发明的目的是提供一种新的高效低毒的BRAF抑制剂。
[0009] 本发明的第一方面提供了一种如式I所示的化合物、其药学上可接受的盐、其前 药、其水合物或溶剂合物：
[0010]
【主权项】
1. 如式I所示的化合物、其药学上可接受的盐、其前药、其水合物或溶剂合物： 式中：
η为1或2 ; X为N或CH ; Y为卤素或NR2R3; R1选自下组：取代或未取代的C ^C8烷基、取代或未取代的C 3-C8环烷基、取代或未取代 的C6-Cltl芳基、含有1-3个杂原子的杂芳基，其中，所述取代是指具有选自下组的取代基： C1-C3烷基、C「C3卤代烷基、C 3-(：8环烷基、C 6-C1Q芳基、C「C6烷氧基、卤素； 馬选自下组：H、甲酰基、烷氧基羰基、-L PHC(O)OR1^ -L1NHC (O) NHRla、取代或未取代的 C3-C6环烷基、取代或未取代的C1-C3烷基、取代或未取代的酰基； 其中，所述"取代"是指具有选自下组的取代基：氰基、-C(O)NH2、羟基或C1-C 6烷基； L1是任选地被1-3个各自独立地选自卤素 、C ^C4烷基或卤素取代的C ^C4烷基取代的 c「c4亚烷基； Rla选自H、C rC4烷基或卤素取代的C rC4烷基； 馬为H或甲基； &为H、卤素或C i-C；烷基； 1?5为H或卤素； R6为H、卤素 、C ^C4烷氧基、C「(^烷基； &为卤素、H或C1-C4烷基。
2. 如权利要求1所述的式I化合物，其特征在于，所述化合物选自下组： N-{3-[3-(2-氨基-嘧啶-4-基）-4, 5, 6, 7-四氢-吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-苯 基} -2, 6-二氟-苯磺酰胺； N-{3-[3-(2-氨基-嘧啶-4-基）-4, 5, 6, 7-四氢-吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-苯 基}_甲磺酰胺； N-{3-[3-(2-氨基-嘧啶-4-基）-5, 6-二氢-4H-吡咯并[1，2-B]吡唑-2-基]-苯 基}_甲磺酰胺； 丙烷-1-磺酸{3-[3-(2_氨基-嘧啶-4-基）-4,5,6,7_四氢-吡唑并[l，5-a]吡 啶-2-基]-苯基}_酰胺； 丙烷-1-磺酸{3-[3- (2-异丁基氨基-嘧啶-4-基）-4, 5, 6, 7-四氢-吡唑并[1，5-a] 吡啶-2-基]-苯基}_酰胺； 2, 6-二氟-N- {3- [3- (2-异丁基氨基-嘧啶-4-基）-4, 5, 6, 7-四氢-吡唑并[1，5-a] 吡啶-2-基]基-苯基}-苯磺酰胺； N-{3-[3-(2-氨基-嘧啶-4-基）-5, 6-二氢-4H-吡咯并[1，2-b]吡唑-2-基]-苯 基} -2, 6-二氟-苯磺酰胺； 丙烷-1-磺酸{3-[3-(2-氨基-嘧啶-4-基）-5,6-二氢-纽-吡咯并[1，2-8]吡 唑-2-基]-苯基}-酰胺； N-{3-[3-(2-异丁基氨基-嘧啶-4-基）-4, 5, 6, 7-四氢-吡唑并[1，5-a]吡 啶-2-基]-苯基}_甲磺酰胺； 丙烷-1-磺酸{3-[3-(2-异丁基氨基-嘧啶-4-基）-5, 6-二氢-4H-吡咯并[1，2-b] 吡唑-2-基]-苯基}-酰胺； 丙烷-1-磺酸（3-{3-[2-(2-氰基乙基氨基）-嘧啶-4-基]-5, 6-二氢-4H-吡咯并 [1，2-b]吡唑-2-基}-苯基）-酰胺； ^(3-{3-[2-(2-氰基乙基氨基）-嘧啶-4-基]-4,5,6,7-四氢-吡唑并[1，5-&]吡 啶_2_基}基-苯基）-2, 6-二氟-苯横酰胺； 丙烷-1-磺酸{3-[3- (2-氰基-乙氨基-嘧啶-4-基）-4, 5, 6, 7-四氢吡唑并[1，5-a] 吡啶-2-基]-苯基}_酰胺； N-(3-{3-[2-(2-氰基乙基氨基）-嘧啶-4-基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[l，2-b]吡 唑-2-基}-苯基基）-2, 6-二氟-苯磺酰胺； N-(3-{3-[2-氨基吡啶-4-基]-4, 5, 6, 7-四氢吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}-2-氟苯 基）-2, 6-二氟苯磺酰胺； N- (5-氯3- {3- [2- (2-氰基乙基氨基）-嘧啶-4-基]-5, 6-二氢-4H-吡咯并[1，2-b] P比挫-2-基} -2-氟苯基基）-2, 6-二氟苯横酰胺； N-(3-{3-[2-(2-氰基乙基氨基）-嘧啶-4-基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[l，2-b]吡 挫_2_基丨_2, 4-二氟苯基）-2, 6-二氟苯横酰胺； N-(3-{3-[2-(2-氰基乙基氨基）-嘧啶-4-基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[l，2-b]吡 挫_2_基丨_2, 6-二氟苯基）-2, 6-二氟苯横酰胺； 甲基（S) - (1- ((4- (2- (3- ((2, 6-二氟苯基）横酰氨基）_2_氟苯基）-5, 6-二氢-4H- P比 咯[1，2-b]吡唑-3-基）嘧啶-2-基）氨基）丙烷-2-基）氨基甲酸酯； 2. 6-二氟-N-(2-氟-3-(3-(2-((2-(甲基磺酰）乙基）氨基）嘧啶-4-基）4H - 5, 6-二氢吡咯并[3, 2-b]吡唑-2-基）苯基）苯磺酰胺。
3. 式I化合物的制备方法，其特征在于，所述方法包括步骤： 二取代炔烃中间体V与斯德酮I II发生环加成反应，得到吡唑并环类衍生物I :
4. 一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物含有治疗有效量的如权利要求1所 述的式I化合物，或其药学上可接受的盐、互变异构体、光学异构体、药学上可接受的溶剂 合物。
5. 如权利要求4所述的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物用于治疗与B-RAF V600E突变相关的疾病，或所述的药物组合物用于治疗与与B-RAF V600E突变相关的疾病。
6. -种B-RAF激酶抑制剂，其特征在于，所述抑制剂含有抑制有效量的如权利要求1所 述的式I化合物，或其药学上可接受的盐、互变异构体、光学异构体、药学上可接受的溶剂 合物。
7. 如权利要求4所述的药物组合物或如权利要求6所述的抑制剂，其特征在于： 所述药学上可接受的盐是式I化合物的选自下组的盐：无机酸盐、有机酸盐、烷基磺 酸盐、芳基磺酸盐，或其组合；较佳地，所述的盐选自下组：盐酸盐、氢溴酸盐、硝酸盐、硫酸 盐、磷酸盐、甲酸盐、乙酸盐、丙酸盐、苯甲酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、 柠檬酸盐、甲基磺酸盐、乙基磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐，或其组合； 所述药学上可接受的溶剂合物，是指式I化合物与选自下组的溶剂形成的溶剂合物： 水、乙醇、异丙醇、乙醚、丙酮，或其组合。
8. 如权利要求1所述的式I化合物的用途，其特征在于，用于： (a) 制备B-RAF抑制剂； (b) 用于体外非治疗性地抑制SK-MEL28细胞的活性； (c) 用于体外非治疗性地抑制肿瘤细胞生长； (d) 用于制备治疗B-RAF V600E突变抑制活性的药物。
9. 一种体外非治疗性的抑制B-RAF激酶的方法，其特征在于，所述方法包括步骤： 在式I化合物或其药学上可接受的盐存在的情况下，培养细胞，从而抑制所述细胞中 B-RAF激酶活性。
10. -种治疗与BRAF V600E突变相关疾病的方法，其特征在于，所述方法包括步骤： 向治疗对象施用治疗有效剂量的如权利要求1所述的式I化合物或其药学上可接受的 盐、互变异构体、光学异构体、药学上可接受的溶剂合物。
【专利摘要】本发明公开了一种具有式I结构的二芳基取代的吡唑并环类衍生物、其制备方法及其在医药领域的应用。本发明的二芳基取代的吡唑并环类衍生物具有明显的SK-MEL28细胞抑制活性，可作为BRAF抑制剂，用于制备预防或治疗包括黑色素瘤在内的及其与B-RAF V600E突变相关疾病的药物，具有广阔的应用前景和价值。
【IPC分类】A61P43-00, C07D471-04, A61P35-00, C07D487-04, A61K31-444, A61K31-506
【公开号】CN104829613
【申请号】CN201510174036
【发明人】安晓霞, 别平彦, 杨午立, 庄戈诗
【申请人】上海创诺医药集团有限公司
【公开日】2015年8月12日
【申请日】2015年4月13日