抗菌抗肿瘤化合物及其制备方法与应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物医药领域，具体设及抗菌抗肿瘤化合物及其制备方法与应用。
【背景技术】
[0002] 金黄色葡萄球菌是一种革兰氏阳性菌，传播范围极广，从发现至今已经遍布全世 界，成为烧伤，术后和小儿的主要感染病原菌，是医院最常见的致病菌，其感染率也较高，全 世界范围内约有10万例感染该细菌的报告。
[0003] 近年来，由于抗生素的滥用等原因，耐药现象逐年增多，该是造成感染性疾病死亡 率居高不下的主要原因之一，其中WMRSA耐甲氧西林金黄色葡萄球菌最为常见。MRSA具有 更广泛、更严重的耐多药现象，该意味着，其它所有与甲氧西林相同结构的0-内酷胺类和 头抱类抗生素均出现了耐药现象，万古霉素作为临床上治疗耐多药MRSA的唯一选择，其耐 药压力越来越大，现在临床上常用的万古霉素也逐渐出现了耐药现象，抗生素新药的研究 在过去30-40年中遭遇了最大的瓶颈，该最终将导致无药可用的地步。因此，积极开发具有 高效、低毒的抗耐药金黄色葡萄球菌的药物意义重大。
[0004] 癌症是一种非常古老的疾病，伴随着整个人类发展的历史，严重威胁着人类的健 康与生命。世界卫生组织最近的一项调查显示，癌症将超越屯、脏病成为全球人类健康的头 号杀手，全世界范围内因癌症而死亡的人数呈逐年递增的态势。2012年全世界共新增1400 万癌症病例并有820万人死亡。其中，中国新增307万癌症患者并造成约220万人死亡，分 别占全球总量的21. 9%和26. 8%。在肝、食道、胃和肺等4种恶性肿瘤中，中国新增病例和 死亡人数均居世界首位。因此对于癌症的治疗来讲面临着非常严峻的挑战。发现并研究具 有高效、低毒的抗肿瘤药物至关重要。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的之一是提供一种新的二祗糖巧类化合物。
[0006] 所述二祗糖巧类化合物由鼠尾草属中药丹参SalviamiltiorrhizaBunge中 的主要成分丹参酬类化合物通过微生物转化获得，为全新结构类型化合物；所述二祗糖 巧类化合物可由糖巧化位置上的区别而分别命名为化合物TanshinosideA和化合物 TanshinosideB。
[0007] 所述化合物TanshinosideA的结构式如下述式I所示；
[000引
【主权项】
1. 一种二萜糖苷类化合物，其结构式如式I所示：
2. -种二萜糖苷类化合物，其结构式如式II所示：
3. -种制备权利要求1或2所述二萜糖苷类化合物的方法，包括下述步骤：以鲁氏毛 霉CGMCC 3. 3447为转化菌株，对丹参酮I进行微生物转化，得到二萜糖苷类化合物。
4. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述微生物转化为：将鲁氏毛霉CGMCC 3. 3447种子液接种于发酵培养基室温下培养3天-4天，然后加入丹参酮I室温下发酵培养 5天-7天，得到发酵液。
5. 根据权利要求3-4中任一项所述的方法，其特征在于：所述丹参酮I为丹参酮I纳 米制剂； 所述丹参酮I纳米制剂为由质量分数5. 0-10 %的丹参酮I和质量分数90-95 %的聚乙 二醇4000或聚乙二醇6000组成的共熔物粉剂。
6. 根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述方法还包括从所述发酵液中分离分 别得到 Tanshinoside A 和 Tanshinoside B 的步骤； 操作如下：将所述发酵液过滤后收集滤液，将所述滤液用有机溶剂萃取后浓缩得到浓 缩物，将所述浓缩物依次通过硅胶柱层析、中压柱层析、反相高效液相色谱法进行分离，分 别得到 Tanshinoside A 和 Tanshinoside B 化合物。
7. 根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述硅胶柱层析为：以体积比为 100:0-100:50的氯仿-丙酮混合溶液为洗脱液进行洗脱，收集各个体积比下的洗脱组分， 对每个洗脱组分均进行最小抑菌浓度活性测试，将抑菌活性最高的洗脱组分中的溶剂去 除，得到浓缩液； 所述中压柱层析为：将上述经硅胶柱层析得到的浓缩液进行中压柱层析分离，以乙腈 的体积百分含量为10% -100 %的乙腈水溶液为洗脱液进行梯度洗脱，收集体积百分含量 为40% -70%的乙腈水溶液的洗脱组分，除去所述组分中的溶剂，浓缩得到浓缩液，其中， 梯度洗脱的梯度程序为从Omin到90min，乙腈水溶液中乙腈的体积百分含量从10 %到 100% ； 所述反相高效液相色谱法为：将上述经中压柱层析得到的浓缩液进行反相高效液相 色谱法分离，其中，所述反相高效液相色谱法的条件为：Agilent ZORBAX - XDB反相色谱 柱，RP-C8,9. 4*250mm，检测波长254nm，流动相为体积百分含量为42 %的乙腈水溶液，等 度洗脱，依次收集在254nm波长处出现吸收峰时对应的洗脱组分，得到Tanshinoside A和 Tanshinoside B 化合物。
8. 权利要求1或2所述的化合物在下述方面的应用： 1) 在制备抗菌药物中的应用； 2) 在制备真核生物肿瘤细胞增殖抑制剂中的应用； 3) 在制备预防和/或治疗肿瘤药物中的应用。
9. 根据权利要求8所述的应用，其特征在于： 所述抗菌药物为抗金黄色葡萄球菌和/或耐药金黄色葡萄球菌的药物； 所述金黄色葡萄球菌为金黄色葡萄球菌ATCC 6538 ; 所述耐药金黄色葡萄球菌为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌； 所述真核生物为哺乳动物； 所述肿瘤细胞为癌细胞； 所述癌细胞为胃癌细胞和乳腺癌细胞； 所述肿瘤为癌；所述癌为胃癌或乳腺癌。
10. -种产品，其活性成分为权利要求1或2所述的化合物，其中，所述产品为：1)抗菌 药物； 2) 真核生物肿瘤细胞增殖抑制剂； 3) 预防和/或治疗肿瘤药物。
【专利摘要】本发明提供抗菌抗肿瘤化合物及其制备方法与应用。所述化合物为二萜糖苷类化合物，其结构式为式I或式Ⅱ所示。所述化合物通过下述方法制备：以鲁氏毛霉(Mucor roxianus)CGMCC 3.3447为转化菌株，对丹参酮I进行微生物转化，得到所述二萜糖苷类化合物。所述丹参酮I优选为丹参酮I纳米制剂。药效实验表明：所述化合物可抑制金黄色葡萄球菌和耐药金黄色葡萄球菌的生长，同时可以抑制人胃癌细胞和人乳腺癌细胞的增殖。因此可用于抗菌和抗肿瘤活性先导化合物研究或制备抗菌和抗肿瘤药物。
【IPC分类】A61K31-7048, C12P19-60, C12R1-785, C07H17-04, A61P31-04, A61P35-00
【公开号】CN104829664
【申请号】CN201510114000
【发明人】张立新, 刘雪婷, 何文妮, 罗厚蔚, 刘苗苗
【申请人】中国科学院微生物研究所
【公开日】2015年8月12日
【申请日】2015年3月16日