血 小板减少性紫齋、凝血障碍、血小板病症、血液蛋白病症、血液病、出血障碍、止血障碍、淋己 性疾病、紫齋、血小板减少、血栓性微血管病、止血障碍、血管病、类风湿性关节炎、风湿性疾 病、结缔组织病、天瘤疮、系统性红斑狼疮、多发性硬化、瘤疹病毒科感染、和/或DNA病毒感 染。
[0174] 本发明的冻干制剂可单位剂型（例如在容器、瓶、管或注射器中）或W多剂型 (例如在多剂量容器中）来提供。合适的容器和提供此类容器的材料（例如玻璃）是本领 域技术人员已知的。容纳冻干制剂的容器可W仅包含冻干制剂或者可W进一步包含容纳用 于重构所述冻干制剂的稀释剂的第二隔间。
[0175] 本发明的冻干制剂可W单独给予或与本领域技术人员认为适用于治疗任何上述 疾病的任何其它治疗药联用。所述其它治疗药可W与本发明的制剂单独、同时或序贯给予。 运类其它治疗药的实例是例如细胞毒性剂、抗血管生成剂、皮质类固醇类、抗体、化疗药、激 素、抗炎药和免疫调节剂。
[0176] 本发明另一方面设及治疗患者的方法，包括W下步骤： (i) 提供本文所述的抗CD20抗体的冻干制剂， (ii) 重构所述冻干制剂，和 (iii) 将所述重构制剂给予患者。
[0177] 可W理解，治疗患者的方法的步骤（i)可包括本文关于提供抗CD20抗体的冻干 制剂的方法所述的任何步骤。在一个实施方案中，治疗患者的方法的步骤（i)中提供的冻 干制剂是维妥珠单抗或其片段的冻干制剂。
[0178] 在治疗患者的方法的步骤（ii)中，冻干制剂可W用本领域技术人员认为合适的 本文所述的任何重构介质来重构。
[0179] 在一个实施方案中，治疗患者的方法的步骤（iii)可设及胃肠外给药，例如皮下、 静脉内、皮内、肌内、乳房内、腹膜内、銷内、眼球后、肺内给药和/或手术植入特定部位。在 治疗患者的方法的一个实施方案中，步骤（iii)设及重构制剂的皮下给药。然而，本文所述 的任何给药模式和方法也可用于本文所述的治疗方法的步骤（iii)。
[0180] 通过本文所述的方法治疗的患者可W是患有本文所述的一种或多种疾病和/或 病症。在本文所述的治疗患者的方法的一个实施方案中，所述患者患有癌症和/或非恶性 疾病，任选自身免疫性疾病。在一个实施方案中，通过本文所述的治疗方法而治疗的患者是 患有W下疾病的患者：类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、特发性细胞减少、血小板减少性 紫齋和/或天瘤疮，尤其是系统性红斑狼疮。
[0181] 在W下实施例中进一步描述本发明，所述实施例仅用于说明本发明的具体实施方 案的目的，而不得视为W任何方式限制本发明的范围。 实施例
[0182] 实施例1 残余水分含量对Tg、重构和聚集的影响 为了测定冻干制剂中是否存在提高胆存期间的稳定性的残余水分水平，测定了残余水 分对玻璃转化溫度灯g)、冻干制剂的重构时间和聚集的影响。
[0183] 为此，包含W下成分的组合物经历了冻干：
溶液通过除菌过滤，装入小管，用冻干塞部分地闭塞并放入冷冻干燥机中。为了在冻干 物中得到不同的残余水分，第二干燥步骤中的干燥溫度是变化的，即样品在第二干燥步骤 中经历〇°C、20°C或40°C达4小时。所进行的冻干过程如表1所述，该表描绘了第二干燥步 骤中的示例性的溫度20°C。 阳184] 表1:冻干过程I_^^^
循环的总持续时间：大约68. 5h 将来自所述过程的、残余水分含量为2. 02%、1. 25%和0. 80%的样品随后在40°C胆存12 周。
[018引用ultra turrax，通过卡尔费休滴定，在KF滴定器784 Titrino (Metrohm)中用 双安培终点检测来测定残余水分含量。为此，打开小管并用刮刀打碎冻干物。然后将200mg粉末移入接收器中。用ulha-化rrax将冻干物在8000巧m均质30秒钟。然后，粉末用 经调整的卡尔费休试剂（例如Hy化anal Composite 5,得自Riedel de化en)滴定。
[0186] 此外，在胆存前，通过差示扫描量热法测定玻璃转化溫度，其中使用如下参数： 系统：TA Instruments Q 2000 盘的型式：Tzer。侣密封的 在-20°c平衡5分钟 每90秒调整±0.6°C 匀变 2. 5°C/min至 160°C。
[0187] 图1 - 3显示分别经历0°C、20°C和40°C的一个样品的示例性的DSC曲线。
[018引而且，在胆存前后通过大小排阻色谱测定聚集，其中在所有样品中的聚集的起始 值为1. 1%。胆存后的聚集值示于下表2。
[0189] 此外，在胆存后测定所得冻干物的重构时间。
[0190] 在表2中，概述了在具有不同的残余水分含量的样品中的玻璃转化溫度、重构行 为和聚集所得到的数值。
[0191] 表2:胆存后的Tg、重构和聚集（两个样品的平均值）
从上表2可W得出，残余水分含量的增加降低了胆存后的聚集水平，因此提供了更稳 定的冻干物。
[0192] 实施例2 冷冻干燥过程 此外，开发了表3所示的冷冻干燥过程，W允许产生残余水分含量在整个批次中都介 于1. 5至2. 5%之间的维妥珠单抗的冻干物。
[0193] 表3:冷冻干燥过程
步骤2至10的总持续时间为45小时 该冷冻干燥过程没有设及在相比第一干燥步骤所用的溫度的升高溫度下的二次干燥 步骤。
[0194] 测定了通过上述过程得到的冻干物的特性。从分布于搁板上的不同位置的8个单 独小管（即边缘和中间小管）中测定了残余水分含量。从表4可W得出，可W得到具有所 需残余水分含量和在40°C胆存时稳定的冻干物。
[0195] 表4:通过表3所示的冷冻干燥过程得到的冻干物的特性 实施例3
冻干制剂的制备和重构 具有W下成分的冻干前组合物经历冻干。 n、去球单技涨0 m掉g .輿嫌 41.CJ mg/g(-120mM) L-浊氣度堯 0-270 mg/g I、-;、段拓沒 I?、、；gs'!;! ;;;M，这细:教毅） 聚山發撒20 0.10 mg/g pH 5.5r0.2 难i： !说巧0诫成尝
[0196] 将7. 10g冻干前组合物装入小管（10R小管，1型，Schott)并使其经历表3所述 的冻干过程。
[0197] 冻干物随后在加塞的玻璃小管中在巧°(：胆存达12个月。根据表3所示的结果，可 W得出如此得到的冻干物在巧°c的胆存期间是稳定的。
[019引表5:在巧°(：胆存1、3、6、9、12和18个月后的结果
CEX阳离子交换色谱、APG酸性峰基团、BPG碱性峰基团、CGE毛细管凝胶电泳、HP-SEC大小排阻-高效液相色谱、CDC补体依赖性细胞毒性 用2.2mL注射用水将冻干物重构后（重构时间5分钟，直到冻干物完全溶解），得到W下组合物： 维妥珠举抗 L巧化塔/mL 竊鑛 H殺m接/mL (.、-32谷嚇M) L-纽氣繫〇7|8nig/mL 矣？K HU * U:U 4{、！0 mg g 1 r n说、公纽扳冷、）。聚山，謀薇號 0、；!'?!啤喻L py 5 5 ± 0.2 渗量 、.450 mO沸vkg
【主权项】
1. 提供抗CD20抗体的冻干制剂的方法，包括以下步骤： I) 提供包含抗⑶20抗体的溶液， II) 将所述抗体溶液冷冻， III) 在-KTC至30°C的搁板温度使所述抗体溶液经历至少一个干燥步骤，以得到冻 干制剂， 其中所述冻干制剂的残余水分含量范围为1%至10%，任选范围为1%至5%。2. 权利要求1的方法，其中所述抗体溶液经历一个干燥步骤。3. 权利要求1的方法，进一步包括使所述抗体溶液经历第二干燥步骤，其中第二干燥 步骤中使用的搁板温度低于第一干燥步骤中使用的搁板温度。4. 权利要求3的方法，其中相比第一干燥步骤中使用的搁板温度，第二干燥步骤中使 用的搁板温度至少低2tC，任选至少低:TC。5. 前述权利要求中任一项的方法，其中第一干燥步骤中使用的搁板温度为8°C和/或 第二干燥步骤中使用的搁板温度为5 °C。6. 前述权利要求中任一项的方法，其中步骤（I)中提供的溶液包含缓冲剂，任选包含 组氨酸或磷酸盐的缓冲剂。7. 前述权利要求中任一项的方法，其中步骤（I)中提供的溶液包含张度调节剂，任选 蔗糖。8. 前述权利要求中任一项的方法，其中步骤（I)中提供的溶液包含表面活性剂，任选 非离子型表面活性剂。9. 前述权利要求中任一项的方法，其中步骤（I)中提供的溶液的pH值范围为5. 0至 7. 0,任选pH值为 5. 5±0. 3。10. 前述权利要求中任一项的方法，其中步骤（I)中提供的溶液包含 a) 至少40mg/g抗⑶20抗体， b) 5 - 15mM组氨酸， c) 100 - 150mM鹿糖， d) 0? 05 - 0? 5mg/g聚山梨酯 20 ;和 其中步骤（I)中提供的溶液的pH值为5.5 ± 0.3。11. 前述权利要求中任一项的方法，其中所述抗CD20抗体是维妥珠单抗或其片段。12. 提供抗CD20抗体的液体制剂的方法，其包括根据权利要求1-11中任一项的方法 提供冻干制剂，然后进行重构所述冻干制剂的步骤IV)。13. 权利要求12的方法，其中步骤IV)中得到的液体制剂包含 a) 至少80mg/mL抗⑶20抗体， b) 10 - 40mM缓冲剂，任选包含组氨酸的缓冲剂， c) 200 - 400mM张度调节剂，任选蔗糖， d) 0. 2 - 0. 5mg/mL表面活性剂，任选聚山梨酯20 ;和 pH值为 5.5 ± 0.3。14. 通过权利要求12或13的方法得到的重构制剂。15. 抗CD20抗体的冻干制剂，其包含抗CD20抗体，任选维妥珠单抗或其片段，并且 残余水分含量范围为1%至10%，任选范围为1%至5%。16. 权利要求15的冻干制剂，进一步包含缓冲剂，任选包含组氨酸或磷酸盐的缓冲剂。17. 权利要求15或16的冻干制剂，进一步包含张度调节剂，任选蔗糖。18. 权利要求15-17中任一项的冻干制剂，进一步包含表面活性剂，任选非离子型表面 活性剂。19. 权利要求15-17中任一项的冻干制剂，其中所述冻干制剂按照权利要求1-11中任 一项的方法制备。20. 权利要求15-19中任一项的冻干制剂在药物制备中的用途。21. 权利要求14的重构制剂或权利要求15-19中任一项的冻干制剂，其用作药物。22. 权利要求14的重构制剂或权利要求21的冻干制剂或权利要求20的用途，其中所 述药物是供胃肠外给药，任选用于皮下给药。23. 权利要求14的重构制剂或权利要求15-22中任一项的冻干制剂，其用于治疗癌症 或非恶性疾病。24. 权利要求14的重构制剂或权利要求15-23中任一项的冻干制剂，其用于治疗选自 以下的疾病：伯基特淋巴瘤、EB病毒感染、B细胞白血病、慢性淋巴细胞性B细胞白血病、 急性成淋巴细胞性白血病、淋巴样白血病、前淋巴细胞性白血病、毛细胞白血病、多发性骨 髓瘤、B细胞淋巴瘤、边缘区B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、免疫母 细胞性大细胞淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、淋巴瘤样肉芽肿、浆细胞肿瘤、前体 细胞成淋巴细胞性白血病-淋巴瘤、肿瘤病毒感染、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症、免疫增殖 性病症、前淋巴细胞性淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、免疫母细胞性大细胞淋巴瘤、套细 胞淋巴瘤、淋巴瘤样肉芽肿、淋巴增生性病症、病变蛋白血症、前体细胞成淋巴细胞性白血 病-淋巴瘤、特发性血小板减少性紫癜、血小板减少性紫癜、特发性血小板减少性紫癜、凝 血障碍、血小板病症、血液蛋白病症、血液病、出血障碍、止血障碍、淋巴性疾病、紫癜、血小 板减少、血栓性微血管病、止血障碍、血管病、类风湿性关节炎、风湿性疾病、结缔组织病、天 疱疮、系统性红斑狼疮、疱疹病毒科感染，和/或DNA病毒感染。25. 权利要求14的重构制剂或权利要求15-23中任一项的冻干制剂，其用于治疗自身 免疫性疾病。26. 权利要求14的重构制剂或权利要求25的冻干制剂，其中所述自身免疫性疾病是 类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮和/或天疱疮，任选系统性红斑狼疮。27. 治疗患者的方法，包括 (i) 根据权利要求1-11中任一项的方法提供抗CD 20抗体的冻干制剂， (ii) 重构所述冻干制剂，和 (iii) 将所述重构制剂给予患者。28. 权利要求27的方法，其中所述患者患有癌症或非恶性疾病，任选自身免疫性疾病。29. 权利要求28的方法，其中所述自身免疫性疾病是类风湿性关节炎、系统性红斑狼 疮和/或天疱疮，任选系统性红斑狼疮。
【专利摘要】本发明提供制备抗CD？20抗体的冻干制剂的方法以及抗CD？20抗体的冻干制剂，所述冻干制剂包含抗CD？20抗体并且其残余水分含量范围为1%至10%。本发明也涉及通过本文所述方法得到的重构制剂，所述抗体制剂作为药物的用途，所述冻干制剂在药物制备中的用途和治疗患者的方法。
【IPC分类】C07K16/28
【公开号】CN105189559
【申请号】CN201480025774
【发明人】M.拉斯特, W.伊泽, G.贝克, P.斯库夫卡, H.吉泽勒
【申请人】塔科达有限责任公司
【公开日】2015年12月23日
【申请日】2014年3月17日
【公告号】CA2903611A1, EP2970465A1, US20140271636, US20160022585, WO2014140361A1