一种原鲁烷型倍半萜类化合物及其制备方法和医药用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物技术领域，具体涉及从乌药的干燥块根中分离得到的一种具有内 皮细胞保护作用的原鲁烷型倍半萜类化合物及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 乌药为棒科（Lauraceae)山胡椒属（Lindera)植物乌药（Lindera aggregata(Sims)Kosterm.)的干燥块根。全年均可采挖，除去细根，洗净，趁鲜切片，晒干， 或直接晒干。主产于浙江、安徽、湖南、广东、广西等地。乌药作为中国传统中药具有行气止 痛，温肾散寒的作用。主治胸胁满闷、脘腹胀痛、头痛、寒疝疼痛、痛经及产后腹痛、尿频、遗 尿等证。
[0003] 乌药的化学成分种类较多，目前报道的主要成分有挥发油、异喹啉生物碱、倍半萜 及其内酯、黄铜类等成分。乌药的根、叶、果皮及种子中均含有挥发油，其主要成分多为常见 的单萜和倍半萜类化合物。乌药所含的生物碱以异喹啉型生物碱为主。乌药中报道最多的 成分是呋喃倍半萜及其内酯，并且该类成分是乌药的特征性成分，具有较强的专属性，2010 版中国药典中规定以乌药醚内酯作为乌药含量测定的指标性成分。
[0004] 乌药的化学成分复杂，药理作用广，具有抗炎镇痛、抗病毒、抑菌、抗氧化、抗疲劳、 调节消化道、松弛内脏平滑肌、改善中枢神经系统功能、调理妇科病症等药理作用。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种从乌药的干燥块根中分离得到的一种具有内皮细胞保 护作用的原鲁烷型倍半萜类化合物及其制备方法。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0007] 具有下述结构式的化合物（I)，
[0008]
[0009] 所述的化合物（I)的制备方法，包含以下操作步骤：(a)将乌药的干燥块根粉 碎，用80~90 %乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和 水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步骤 (a)中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱6个柱体积，再用75%乙醇洗 脱10个柱体积，收集75 %乙醇洗脱液，减压浓缩得75 %乙醇洗脱物浸膏；（c)步骤（b)中 75 %乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为85:1、55:1、25:1、10:1和1:1的二氯 甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤（c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用 体积比为15:1、10:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤（d)中组分 2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为70%的甲醇水溶液等度洗脱， 收集8~10个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（I)。
[0010] 进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。
[0011] 进一步地，所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为85 %。
[0012] -种药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物（I)和药学上可接受的 载体。
[0013] 所述的化合物（I)在制备内皮细胞保护的药物中的应用。
[0014] 所述的药物组合物在制备内皮细胞保护的药物中的应用。
[0015] 本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。
[0016] 该药物组合物含有治疗有效量的本发明化合物（I)，其余为药物学上可接受的、 对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0017] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本发明药物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
【附图说明】
[0018] 图1为化合物（I)结构式；
[0019] 图2为化合物（I)理论E⑶值与实验E⑶值比较。
【具体实施方式】
[0020] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0021] 实施例1 :化合物（I)分离制备及结构确证
[0022] 试剂来源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化 学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。
[0023] 制备方法：（a)将乌药的干燥块根（8kg)粉碎，用85%乙醇热回流提取（25LX3 次），合并提取液，浓缩至无醇味（3L)，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和 水饱和的正丁醇（3LX3次）萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物（345g)和正 丁醇萃取物；(b)步骤（a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8型大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱 6个柱体积，再用75 %乙醇洗脱10个柱体积，收集75 %乙醇洗脱液，减压浓缩得75 %乙醇 洗脱物浸膏（133g) ;(c)步骤（b)中75%乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为 85:1 (8个柱体积）、55:1 (8个柱体积）、25:U6个柱体积）、10:1 (8个柱体积）和1:1 (5个 柱体积）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤（c)中组分4 (27g)用正相硅 胶进一步分离，依次用体积比为15:1 (8个柱体积）、10:1 (10个柱体积）和5:U6个柱体 积）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤（d)中组分2 (13g)用十八烷基硅 烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为70%的甲醇水溶液等度洗脱，收集8-10个柱体 积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（I)(32mg)。
[0024] 结构确证：无色油状物；HR-ES頂S显示[M+Na]+为m/z287. 1314,结合核磁特 征可得分子式为(：15氏。04,不饱和度为6。核磁共振氢谱数据SH(ppm，DMS0-d6,500MHz): H-1 (1. 46,ddd，J= 8. 3,10. 3,10. 3)，H-1 (1. 92,m)，H-2 (1. 58,m)，H-2 (1. 64,dddd，J= 9· 0,10. 3,11. 3,11. 3)，H-2a(2. 45,dd，J= 9· 3,11. 3)，H-4a(3. 86,dd，J= 4· 0,10. 8)， H-5(L55,ddd，J= 3. 4,10. 8,12. 2)，Η-5(2· 01，br，dd，J= 4. 0,12. 2)，H-8(L01，s)， H-9(l. 19,s)，H-10(3. 40,d，J= 6. 5)，H-10(3. 48,dd，J= 3. 4,6. 5)，H-11(0. 91，s);核磁 共振碳谱数据δc (ppm，DMS0-d6,125MHz) :28. 2 (CH2,1-C)，21. 5 (CH2, 2-C)，59. 1 (CH，2a-C)， 76. 4(C，3-C)，211. 4(C，4-C)，47. 6(CH，4a-C)，30. 7(CH2,5-C)，52. 8(C，6-C)，205. 6(C， 7-C)，116. 8 (C，7a-C)，42. 4 (C，7b-C)，19. 3 (CH3, 8-C)，18. 7 (CH3, 9-C)，76. 3 (CH2,10-C)， 21.7(CH3，11-C);碳原子标记参见图1。该化合物在204nm处有最大紫外吸收。i-NMR谱 表明三个甲基信号[SHO. 91(s，H-ll)，1.01(s，H-8)和1. 19(s，H-9)]，一个含氧亚甲基信 号[δH3. 40(d，J= 6. 5Hz，H-10)，3. 48(dd，J= 3· 4,6· 5Hz，H-10)]。13CNMR谱显示 15 个 碳信号，包括三个甲基，四个亚甲基（一个含氧亚甲基），两个次甲基，以及六个季碳（两个 羰基季碳，两个含氧季碳）。根据核磁数据可知C-3(δC76. 4)位连有一个羟基，且为β构 型。HMBC谱中，单甲基信号Me-9与亚甲基C-5,季碳C-6,含氧亚甲基C-10和羰基C-7的 相关性表明C-6位连有一个甲基。通过H