专利名称：一种测定土荆芥挥发油中有效成分含量的方法
技术领域：
本发明涉及一种中药中有效成分含量的方法，特别涉及一种测定土荆芥挥发油中有效成分含量的方法。
背景技术：
土荆芥为藜科植物土荆芥Chenopodium ambrosioides L.带有果穗的全草，具有祛风、杀虫、通经止痛的功效，用于皮肤风湿痹痛、痛经、闭经、皮肤湿疹和蛇虫咬伤。据文献报道，驱蛔素、对伞花烃和α-萜品烯是土荆芥挥发油的主要成分，且具有一定的代表性， 但是对这三种成分同时进行含量测定的方法一直未见报道。挥发油类成份一般选用气相色谱法进行分析，但气相色谱采用毛细管柱由于分流等因素影响其测定的稳定性，本发明提供了一种用HPLC法同时测定土荆芥挥发油中驱蛔素、对伞花烃、α -萜品烯的HPLC含量测定方法。大大提高了准确性，同时本方法简单、快速、灵敏、准确、重现性好，特别适用于同时测定土荆芥挥发油中驱蛔素、对伞花烃、α -萜品烯的含量。
发明内容
本发明提供一种测定土荆芥挥发油中有效成分含量的方法，所述方法包括以下步骤步骤1，土荆芥挥发油溶液的配制；步骤2，注入高效液相色谱仪测定峰面积；步骤3，计算土荆芥挥发油中有效成分含量。优选的方法，步骤如下步骤1，土荆芥挥发油用无水乙醇配制成溶液；步骤2，注入高效液相色谱仪测定峰面积；步骤3，计算土荆芥挥发油中有效成分含量。最优选的方法，步骤如下步骤1，取土荆芥挥发油200mg，精密称定，置于IOml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇勻，取适量过0. 45 μ m滤膜，即得。步骤2，注入高效液相色谱仪测定峰面积；步骤3，计算土荆芥挥发油中有效成分含量。本发明的色谱条件如下色谱柱Agilent SB-C18 (4. 6匪X 250匪，5 μ m)；流动相为乙腈-水 (40-80 30-50)；流速 0. 5-2ml · min—1 ；检测波长为 224nm ；柱温为 20-40 0C0优选的色谱条件如下色谱柱Agilent SB-C18 (4. 6匪X 250匪，5 μ m)；流动相为乙腈-水(60 40)；流速1. Oml · miiT1 ；检测波长为224nm ；柱温为30°C。在计算土荆芥挥发油中有效成分含量时需要用到标准对照品的色谱图，为此可以
3通过以下方法配制对照品溶液。对照品溶液的制备精密称取驱蛔素对照品、对伞花烃对照品、α -萜品烯对照品适量，用无水乙醇溶解，制成每Iml含驱蛔素40mg、对伞花烃10mg、α -萜品烯7mg的溶液，即得。将对照品溶液注入高效液相色谱仪得到色谱图，通过该色谱图用归一法计算土荆芥挥发油中有效成分含量。本发明的测定方法，可以一次测定土荆芥挥发油中最主要的有效成分含量，比现有测定方法更便捷。本发明的测定方法，通过以下实验证明具有良好的重现性和准确性。线性关系考察精密吸取对照品溶液0. 1、0. 2、0.4、l、1.6、2ml于2ml容量瓶中，用无水乙醇稀释
至刻度，摇勻，注入高效液相色谱仪测定峰面积。以峰面积为纵坐标、对照品浓度为横坐标， 进行线性回归，得到驱蛔素、对伞花烃、α-萜品烯的回归方程，见表1。结果表明其线性关系良好。表1.驱蛔素、对伞花烃、α -萜品烯标准曲线测定结果Table 1 Regression equations, correlation coefficients and linearity ranges of ascaridole, p-cymene and α -terpinene
权利要求
1.一种测定土荆芥挥发油中有效成分含量的方法，所述方法步骤如下步骤1，土荆芥挥发油溶液的配制；步骤2，注入高效液相色谱仪测定峰面积；步骤3，计算土荆芥挥发油中有效成分含量。
2.根据权利要求1的方法，其特征在于，步骤如下步骤1，土荆芥挥发油用无水乙醇配制成溶液；步骤2，注入高效液相色谱仪测定峰面积；步骤3，计算土荆芥挥发油中有效成分含量。
3.根据权利要求1的方法，其特征在于，步骤如下步骤1，取土荆芥挥发油200mg，精密称定，置于IOml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度， 摇勻，取适量过0. 45 μ m滤膜，即得。步骤2，注入高效液相色谱仪测定峰面积；步骤3，计算土荆芥挥发油中有效成分含量。
4.根据权利要求1的方法，其特征在于，色谱条件如下色谱柱Agilent SB-C18，4. 6mmX 250mm，5 μ m ；流动相为乙腈水=40-80 30-50 ；流速 0. 5-2ml · miiT1 ；检测波长为 224nm ；柱温为 20-40 0C0
5.根据权利要求1的方法，其特征在于，色谱条件如下色谱柱Agilent SB-C18，4. 6謹X 250謹，5 μ m ；流动相为乙腈水=60 40;流速 1. Oml · miiT1 ；检测波长为224nm ；柱温为30°C。
6.根据权利要求1的方法，其特征在于，所述有效成分为驱蛔素、对伞花烃和α-萜品火布。
7.根据权利要求1的方法，其特征在于，在计算土荆芥挥发油中有效成分含量时需要用到标准对照品的色谱图，为此通过以下对照品色谱图，对照品溶液的制备精密称取驱蛔素对照品、对伞花烃对照品、α -萜品烯对照品适量，用无水乙醇溶解，制成每Iml含驱蛔素 40mg、对伞花烃10mg、α -萜品烯7mg的溶液，即得，将对照品溶液注入高效液相色谱仪得到色谱图，通过该色谱图用归一法计算土荆芥挥发油中有效成分含量。
8.根据权利要求1的方法，其特征在于，步骤如下仪器与材料美国Agilent1100高效液相色谱仪，色谱条件色谱柱Agilent SB-C184. 6，mmX 250mm，5 μ m ；流动相为乙腈 /JC= 60 40 ；流速 1. Oml · min—1 ；检测波长为 224nm ；柱温为 30°C ；对照品溶液的制备精密称取驱蛔素对照品、对伞花烃对照品、α-萜品烯对照品适量，用无水乙醇溶解，制成每Iml含驱蛔素40mg、对伞花烃10mg、α -萜品烯7mg的溶液，即得，供试品溶液的制备取土荆芥挥发油200mg，精密称定，置于IOml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇勻，取适量过0. 45 μ m滤膜，即得，将对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，测定供试品溶液峰面积；计算供试品土荆芥挥发油中有效成分驱蛔素、对伞花烃和 α-萜品烯的含量。
全文摘要
本发明涉及一种测定土荆芥挥发油中有效成分含量的方法，所述方法包括以下步骤步骤1，土荆芥挥发油溶液的配制；步骤2，注入高效液相色谱仪测定峰面积；步骤3，计算土荆芥挥发油中有效成分含量。
文档编号G01N30/02GK102478551SQ20101055596
公开日2012年5月30日 申请日期2010年11月23日 优先权日2010年11月23日
发明者周水平, 宋兆辉, 张兰兰, 李瑞明, 黄芝娟 申请人:天津天士力制药股份有限公司