用于治疗皱纹的蛋白酶抑制剂的制作方法

专利名称：:用于治疗皱纹的蛋白酶抑制剂的制作方法相关申请的交叉参考本申请要求2004年2月5日申请的美国申请序列号60/542,187的优先权，其全部内容在此通过参考而引入。联邦资助研究或开发依照由国立卫生研究院授予Dr.MichaelDetmar的许可号CA92644，美国政府享有本发明的某些权利。
背景技术：
：蛋白酶及其抑制剂涉及调节许多生物功能。一些蛋白酶涉及凋亡。半胱天冬酶(caspases)是断裂天冬氨酸残基后面其它细胞蛋白(包括其它半胱天冬酶)的半胱氨酸蛋白酶，其对凋亡过程起关键作用。Omi/HtrA2是线粒体丝氨酸蛋白酶，其在凋亡过程中被释放入胞浆并经由其IAP-结合基序中和凋亡蛋白抑制剂(IAP)从而促进依赖细胞色素C(Cytc)的半胱天冬酶激活。Omi/HtrA2的蛋白酶活性还有助于凋亡和不依赖半胱天冬酶的细胞死亡的进程。在凋亡中还涉及其它蛋白。发明简介本发明尤其包括适用于治疗皮肤如预防或减少皮肤损伤或其它皮肤病情的方法和组合物(例如化妆或治疗方法、或者组合物)。例如，这些方法和组合物可用于缓解UVB-诱发的光致损伤(如慢性光致损伤)症状和皱纹。本发明人还发现例如通过向受试者如人类给予蛋白酶抑制剂可预防和/和减少皱纹。蛋白酶抑制剂优选是在凋亡中活化的或涉及的蛋白酶的抑制剂，这些蛋白酶比如半胱天冬酶，如半胱天冬酶-7或半胱天冬酶-9，或涉及凋亡的丝氨酸蛋白酶，如与细菌HtrA侣伴蛋白具有统计学上显著的序列同源性的哺乳动物丝氨酸蛋白酶。例如，对于蛋白酶的IC50低于80、50、20或10μM的蛋白酶抑制剂。该蛋白酶抑制剂可优选抑制在凋亡中活化或涉及的蛋白酶，对于上述蛋白酶的IC50至少较对于其它哺乳动物蛋白酶如人激肽释放酶(humankallikrein)、人纤溶酶(humanplasmin)或人凝血酶(humanthrombin)的IC50优越5、10或20倍。在优选实施方案中，蛋白酶抑制剂是半胱天冬酶抑制剂。在优选实施方案中，蛋白酶抑制剂是线粒体丝氨酸蛋白酶Omi/HtrA2的抑制剂。在优选实施方案中，蛋白酶抑制剂是细胞可通透剂(cell-permeable)的抑制剂。在优选实施方案中，蛋白酶抑制剂具有下式结构(I)其中，各R1和R2独立是芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基、杂环烯基、芳烷基或杂芳烷基且任选被1-5个R3取代；各X、Y和Z独立是O或S；----代表任选的双键；n是0-20；各A和B独立是芳基或杂芳基且任选被1-5个R3取代；以及各R3独立是卤素、羟基、C1-C10烷基、C1-C10羟基烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C10烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-C12芳烷基、C7-C12杂芳烷基、C3-C8杂环基、C2-C12链烯基、C2-C12链炔基、C5-C10环烯基、C5-C10杂环烯基、羧基、羧酸酯、氰基、硝基、氨基、C1-C6烷基氨基、C1-C6二烷基氨基、巯基、SO3H、硫酸酯、S(O)NH2、S(O)2NH2、磷酸酯、C1-C4亚烷二氧基、氧代、酰基、氨基羰基、C1-C6烷基氨基羰基、C1-C6二烷基氨基羰基、C1-C10烷氧基羰基、C1-C10硫代烷氧基羰基、C1-C6烷基酸酐基(alkylanhydrido)或C1-C6羟基羰基烷基。在优选实施方案中，R1和R2均是芳基。在优选实施方案中，R1和R2均是苯基。在优选实施方案中，X、Y和Z之一是S，且另两个是O。在另一优选实施方案中，Y是S且X和Z是O。在优选实施方案中，存在双键。在优选实施方案中，n是0。在优选实施方案中，A和B之一是杂芳基，另一个是芳基。在优选实施方案中，A是杂芳基且B是芳基。在优选实施方案中，A具有式(II)结构其中，W是O、S或NRa；以及Ra是氢或C1-C6烷基。优选地，W是O。在优选实施方案中，B具有式(III)结构其中，各Rb、Rc、Rd、Re和Rf独立是氢、卤素、羟基、C1-C10烷基、C1-C10羟基烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C10烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-C12芳烷基、C7-C12杂芳烷基、C3-C8杂环基、C2-C12链烯基、C2-C12链炔基、C5-C10环烯基、C5-C10杂环烯基、羧基、羧酸酯、氰基、硝基、氨基、C1-C6烷基氨基、C1-C6二烷基氨基、巯基、SO3H、硫酸酯、S(O)NH2、S(O)2NH2、磷酸酯、C1-C4亚烷基二氧基、氧代、酰基、氨基羰基、C1-C6烷基氨基羰基、C1-C6二烷基氨基羰基、C1-C10烷氧基羰基、C1-C10硫代烷氧基羰基、C1-C6烷基酸酐基或C1-C6羟基羰基烷基。在优选实施方案中，各Rb、Rc、Rd、Re和Rf独立是氢、羟基、C1-C10烷基、C1-C10烷氧基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C3-C8杂环基、C2-C12链烯基、C2-C12链炔基、羧基、羧酸酯、硝基、氨基、酰基、氨基羰基、C1-C6烷基酸酐基或C1-C6羟基羰基烷基。在优选实施方案中，各Rc、Rd和Re是氢且各Rb和Rf独立是羟基、C1-C10烷基、C1-C10烷氧基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C3-C8杂环基、C2-C12链烯基、C2-C12链炔基、羧基、羧酸酯、硝基、氨基、酰基、氨基羰基、C1-C6烷基酸酐基或C1-C6羟基羰基烷基。在优选实施方案中，Rb或Rf之一是硝基。在优选实施方案中，各Rb、Rc和Rf是氢，且各Rd和Re独立是羟基、C1-C10烷基、C1-C10烷氧基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C3-C8杂环基、C2-C12链烯基、C2-C12链炔基、羧基、羧酸酯、硝基、氨基、酰基、氨基羰基、C1-C6烷基酸酐基或C1-C6羟基羰基烷基。在优选实施方案中，Rd和Re之一是卤素且另一个是C1-C4烷氧基。在优选实施方案中，Rd是OCH3且Re是Cl。在优选实施方案中，Rb、Rd、Re和Rf是氢，且Rc是羟基、C1-C10烷基、C1-C10烷氧基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C3-C8杂环基、C2-C12链烯基、C2-C12链炔基、羧基、羧酸酯、硝基、氨基、酰基、氨基羰基、C1-C6烷基酸酐基或C1-C6羟基羰基烷基。在优选实施方案中，Rc是羧基。在优选实施方案中，各Rc、Rd和Rf是氢且各Rb和Re独立是羟基、C1-C10烷基、C1-C10烷氧基、C6-C10芳基，C5-C10杂芳基、C3-C8杂环基、C2-C12链烯基、C2-C12链炔基、羧基、羧酸酯、硝基、氨基、酰基、氨基羰基、C1-C6烷基酸酐基或C1-C6羟基羰基烷基。在优选实施方案中，Rb和Re之一是硝基。优选的抑制剂选自蛋白酶抑制剂可局部给予面部、胸部、颈部、手部以及需要皮肤治疗如皱纹治疗的身体其它区域。该治疗还包括不止一次给药，如至少两次、三次或四次给予蛋白酶抑制剂。该治疗例如可包括在特定数目的日子里，如至少2天、3天、4天、7天、14天、21天、一个月、三个月、六个月或更长时间，每日给予蛋白酶抑制剂(如每天一次或每天两次)。在优选的实施方案中，受试者的皱纹减少至少5％，优选至少10％，更优选至少20％，25％或更多(如，使用本文所述的定性或定量的皱纹评价方法)。在一种实施方案中，受试者皮肤长期接触UV辐射，如受试者已在至少一周时间内重复接触(不止一次)阳光，或者受试者表现了皮肤损伤或老化症状，如皱纹。在另一实施方案中，该方法包括确定需要预防或治疗皱纹形成或其它皮肤病情的受试者；给予蛋白酶抑制剂如本文所述蛋白酶抑制剂；以评价给药后对于皱纹形成、其它皮肤病情、或对于例如在受试者皮肤(如，施用的位点)内的凋亡的作用。在优选实施方案中，受试者皮肤已接触UV如UVB辐射。例如可以由受试者、保健提供者或化妆品提供者进行确定需要预防或治疗皱纹形成或其它皮肤病情的受试者。例如可以由受试者、保健提供者或化妆品提供者给予蛋白酶抑制剂。同样，可以由受试者、保健提供者或化妆品提供者评价对于皱纹形成的作用。在一种实施方案中，在化妆品上可接受的组合物中提供蛋白酶抑制剂，该组合物例如乳膏(cream)、洗液(1otion)、泡沫(foam)、凝胶(gel)或其它化妆制剂。在另一实施方案中，在药学上可接受的载体中提供蛋白酶抑制剂，如无菌缓冲液。在一种实施方案中，蛋白酶抑制剂与第二种试剂联合给药，该第二种试剂例如化妆制剂，如一种或多种香料(fragrance)、阴晒剂(tanningagent)、湿润剂(moisturizer)、必需脂肪酸、神经酰胺(ceramide)、精油(essentialoil)、遮光剂(sunscreenagent)(如甲氧基肉桂酸辛酯、氨基苯甲酸、羟苯甲酮、二甲氨苯酸辛酯，胡莫柳酯或二氧化钛)、蛋白或者蛋白水解物、氨基酸、维生素(如，视黄醇/维生素A及其衍生物或生育酚/维生素E)、多元醇、尿素、尿囊素、糖或者糖衍生物、植物提取物(如，巴拉圭茶、可乐树、瓜拉那或芦荟提取物)。当施用于皮肤时，蛋白酶抑制剂可有效减少表观的皱纹，如在至少2-100天的期间，更优选至少7-90天，甚至更优选14-60天，或其可长期地有效减少表观皱纹，如至少3-9个月，更优选4-8个月或约6个月。在一些实施方案中，可对蛋白酶抑制剂进行修饰，如衍生成或共轭于其它分子。在优选实施方案中，蛋白酶抑制剂经修饰以适于人类使用，如使得蛋白酶抑制剂活性更强、更加稳定或溶解度更高。在另一方面，本文特征在于为受试者提供了一种皱纹防护的方法，其向受试者提供蛋白酶抑制剂，例如本文公开的蛋白酶抑制剂如Ucf-101，优选含有在UV辐射如UVB如阳光照射之前或之后施用的说明书。在另一方面，本文特征在于为受试者提供了一种皱纹防护或调控皱纹形成的方法，其给予凋亡抑制剂，如成纤维母细胞的凋亡抑制剂。该抑制剂可局部施用于如皮肤的皱纹或皮肤损伤处，如割伤、水泡、疤痕、UV-B损伤、烧伤等等。在一种实施方案中，蛋白酶抑制剂优选是在凋亡中被活化的或涉及的蛋白酶的抑制剂，这些蛋白酶比如半胱天冬酶，如半胱天冬酶-7或半胱天冬酶-9，或在凋亡中涉及的丝氨酸蛋白酶，如与细菌HtrA侣伴蛋白具有统计学上显著序列同源性的哺乳动物丝氨酸蛋白酶。在另一方面，本文的特征在于用于向受试者提供皱纹防护(wrinkleprotection)的试剂盒。该试剂盒包括含蛋白酶抑制剂如本文公开的蛋白酶抑制剂如Ucf-101的组合物，和使用该蛋白酶抑制剂预防、治疗或减少皱纹的说明书。该说明书可包括在UV照射如UVB如阳光照射之前或之后施用的说明。在优选实施方案中，组合物中蛋白酶抑制剂的重量百分比为0.01％-10％，如0.01％-3％，3％-6％或6％-10％。在另一优选实施方案中，蛋白酶抑制剂的重量百分比为0.05％-10％，如0.05％-5％，如0.05％-3％。在优选的实施方案中，该组合物还含有香料、防腐剂、或其它化妆成分，如湿润剂或遮光剂，如甲氧基肉桂酸辛酯、氨基苯甲酸、羟苯甲酮、二甲氨苯酸辛酯、胡莫柳酯或二氧化钛。除非另有说明，本文所用的所有科技术语的含义与本领域普通技术人员的常规理解相同。本文述及的所有公开在此全部引入作为参考。当相冲突时，以本说明书包括的定义为准。此外，物质、方法和实施例仅是举例说明而非意在限制。根据下面详述的若干实施方案以及附录的权利要求将显然知晓本发明的其它特征或优势。发明详述本发明尤其涉及通过给予受试者蛋白酶抑制剂而预防或减少皱纹形成或其它皮肤病情(如，皮肤损伤)的方法。优选的蛋白酶抑制剂是在凋亡中活化的或涉及的蛋白酶的抑制剂，这些蛋白酶比如涉及凋亡的丝氨酸蛋白酶或半胱天冬酶。例如，蛋白酶抑制剂是线粒体丝氨酸蛋白酶Omi/HtrA2抑制剂。例示性的抑制剂是Ucf-101。蛋白酶抑制剂半胱天冬酶抑制剂通过结合半胱天冬酶的活性位点起效并形成可逆或不可逆的结合。半胱天冬酶抑制剂包括连接功能基团比如醛(CHO)、氯甲基酮(CMK)、氟甲基酮(FMK)或氟乙酰氧基甲基酮(FAOM)的肽识别序列。含有CHO的半胱天冬酶抑制剂通常是可逆的，而含有CMK、FMK或FAOM基团的抑制剂通常是不可逆的。FMK表现出较CMK弱的活性，因此对于所抑制的酶位点更加特异性。在内源性底物中发现的肽识别序列决定了具体半胱天冬酶的特异性。含有Ac-YVAD-CHO序列的肽是半胱天冬酶1和4的强效抑制剂(Ki≈10nM)，但对半胱天冬酶3和7的抑制活性很弱(Ki≥50μM)。从肽抑制剂除去酪氨酸残基将导致强效的但较低特异性的抑制剂，例如Z-VAD-FMK不仅抑制剂半胱天冬酶1和4而且抑制半胱天冬酶3和7。含有识别序列DEVD的抑制剂是半胱天冬酶-3的强效抑制剂(Ki≈0.5nM)。它们还以很高的浓度抑制剂半胱天冬酶3、6、7、8和10。为了提高半胱天冬酶抑制剂的细胞浸透性，可酯化天冬氨酸残基(OMe)。在一些实施方案中，可向识别序列中加入相当于卡波西成纤维母细胞(Kaposifibroblast)生长因子疏水区域或其它细胞浸透性增强剂的肽以提高细胞浸透性。半胱天冬酶抑制剂还可以是凋亡蛋白抑制剂(IAP)，该蛋白例如包括凋亡蛋白重复(BIR)区域的至少一种杆状病毒抑制剂(Pfam登录号PF00653(Batemanetal.(2004)NucleicAcidsRes.32D138-41))。半胱天冬酶抑制剂还可以是可抑制半胱天冬酶的功能片段或蛋白衍生物，如保留抑制剂功能的片段。Ucf-101Ucf-101是可透过细胞的呋喃次甲基(furfurylidine)-硫代巴比妥酸化合物，其是强效、特异性、竞争性且可逆的前-凋亡、热诱导、线粒体丝氨酸蛋白酶Omi/HtrA2的抑制剂(His-Omi134-458的IC50＝9.5μM)。参见Cilentietal.(2003)J.Biol.Chem.278(13)11489-94。Ucf-101对于所测试的各种其它丝氨酸蛋白酶几乎不表现出活性(IC50＝200μM)。已报道了Ucf-101在半胱天冬酶-9(-/-)无成纤维母细胞中阻滞Omi/HtrA2诱发的细胞死亡。Ucf-101可从Calbiochem购得。由于其是小分子，Ucf-101可进入哺乳动物细胞以实施其活性。除了Ucf-101，本文所述的结构相关且抑制Omi/HtrA2的其它化合物可用于本文所述的方法。使用蛋白酶及其抑制剂进行的测验和技术为本领域所熟知且记载于例如Proteolyticenzymesserineandcysteinepeptidases，MethodsinEnzymologyVol244，A.J.Barrett，Editor(AcademicPress1995)。Omi蛋白酶活性描述于例如Faccio(2000)JBiolChem.275(4)2581-8中。评价Omi抑制剂的其它方法描述于例如Cilentietal.(2003)J.Biol.Chem.278(13)11489-94中。术语“卤素”或“卤原子”指任一种氟、氯、溴或碘基团。术语“烷基”指可以是直链或支链的烃链，包含所示数目的碳原子。例如C1-C12烷基指其中可含有1-12(包括在内)个碳原子基团。术语“卤代烷基”指其中一个或多个氢原子被卤素取代的烷基，并包括其中所有氢被卤素取代的烷基基团(如，全氟烷基)。术语“芳基烷基”或“芳烷基”指其中烷基氢原子被芳基取代的烷基基团。芳烷基包括其中不止一个氢原子被芳基取代的基团。“芳基烷基”或“芳烷基”例如包括苄基、2-苯基乙基、3-苯基丙基、9-芴基、二苯甲基和三苯甲基。术语“亚烷基”指二价烷基，如-CH2-(亚甲基)、-CH2CH2-(亚乙基)和-CH2CH2CH2-(亚丙基)。术语“链烯基”指包含2-12个碳原子且含有一个或多个双键的直链或支链烃链。链烯基例如包括但不限于烯丙基、丙烯基、2-丁烯基、3-己烯基和3-辛烯基。双键碳之一可任选是链烯基取代基的连接点。术语“链炔基”是指包含2-12个碳原子且特征在于含有一个或多个三键的直链或支链烃链。链炔基例如包括但不限于乙炔基、炔丙基和3-己炔基。三键碳之一可任选是链炔基取代基的连接点。术语“烷基氨基”和“二烷基氨基”分别指-NH(烷基)和-NH(烷基)2基团。术语“芳烷基氨基”指-NH(芳烷基)基团。术语“烷氧基”指-O-烷基。术语“巯基”指SH基团。术语“硫代烷氧基”指-S-烷基。术语“芳基”指芳香性单环、双环或三环烃环系统。任一环原子可被取代。芳基基团例如包括但不限于苯基、萘基和蒽基。本文所用的术语“环烷基”包括含有3-12个碳的饱和的环状、双环、三环或多环烃基。任一环原子可被取代。环烷基可包含稠合环。稠合环是共享碳原子的环。环烷基基团例如包括但不限于环丙基、环己基、甲基环己基、金刚烷基和norbornyl。术语“杂环基”指非芳香性3-10元单环、8-12元双环或11-14元三环环系统，其中该系统如果是单环则具有1-3个杂原子，如果是双环则具有1-6个杂原子，或如果是三环则具有1-9个杂原子，所述杂原子选自O、N或S(如，如果是单环、双环或三环则分别含碳原子和1-3、1-6或1-9杂原子)。杂原子可任选是杂环取代基的连接点。任一杂原子可被取代。杂环基可包含稠合环。稠合环是共享碳原子的环。杂环基例如包括但不限于四氢呋喃基、四氢吡喃基、哌啶基、吗啉基、吡咯啉基、嘧啶基、喹啉基或吡咯烷基。术语“环烯基”指含有5-12个碳优选5-8个碳的，部分饱和的、非芳香性的、环状、双环、三环或多环的烃基。不饱和碳可任选是环烯基取代基的连接点。任一环原子可被取代。环烯基可包含稠合环。稠合环是共享碳原子的环。环烯基例如包括但不限于环己烯基、环己二烯基或降冰片烯基。术语“杂环烯基”指部分饱和的、非芳香性的、5-10元单环、8-12元双环或11-14元三环环系统，其中该环系统如果是单环则具有1-3个杂原子，如果是双环则具有1-6个杂原子，或如果是三环则具有1-9个杂原子，所述杂原子选自O、N或S(如，如果是单环、双环或三环则分别含碳原子和1-3、1-6或1-9杂原子)。不饱和的碳原子或杂原子可任选是杂环烯基取代基的连接点。任一环原子可被取代。杂环烯基可包含稠合环。稠合环是共享碳原子的环。环烯基例如包括但不限于四氢吡啶或二氢吡喃。术语“杂芳基”指芳香的5-8元单环、8-12元双环或11-14元三环环系统，其中该环系统如果是单环则具有1-3个杂原子，如果是双环则具有1-6个杂原子，或如果是三环则具有1-9个杂原子，所述杂原子选自O、N或S(如，如果是单环、双环或三环则分别含碳原子和1-3、1-6或1-9杂原子)。任一环原子可被取代。杂芳基例如包括但不限于呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡啶基。术语“氧代”指氧原子，当连接于碳时其形成羰基，当连接于氮时形成N-氧化物，当连接于硫时形成亚砜或砜。术语“酰基”指烷基羰基、环烷基羰基、芳基羰基、杂环基羰基或杂芳基羰基取代基，其中任一基团可被取代基进一步取代。术语“氨基羰基”、“烷氧羰基”、“烷基酸酐基”或“羟基羰基烷基”分别指-C(O)NH2、-C(O)O(烷基)、-C(O)OC(O)(烷基)和(烷基)CO2H基团。术语“取代基”指“取代”于烷基、环烷基、链烯基、链炔基、杂环基、杂环烯基、环烯基、芳基或杂芳基上任一原子处的基团。任一原子可被取代。适宜的取代基包括但不限于烷基(如，C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9、C10、C11、C12直链或支链烷基)、环烷基、卤代烷基(如，全氟烷基比如CF3)、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、杂环基、链烯基、链炔基、环烯基、杂环烯基、烷氧基、卤代烷氧基(如，全氟烷氧基比如OCF3)、卤素、羟基、羧基、羧酸酯、氰基、硝基、氨基、烷基氨基、SO3H、硫酸酯、磷酸酯、亚甲基二氧基(-O-CH2-O-其中氧与邻近的原子相连)、亚乙基二氧基、氧代、硫代(如C＝S)、亚氨基(烷基、芳基、芳烷基)、S(O)n烷基(其中n是0-2)、S(O)n芳基(其中n是0-2)、S(O)n杂芳基(其中n是0-2)、S(O)n杂环基(其中n是0-2)、氨基(单-、二-，烷基、环烷基、芳烷基、杂芳烷基、芳基、杂芳基或其组合)、酯(烷基、芳烷基、杂芳烷基、芳基、杂芳基)、酰胺(单-、二-，烷基、芳烷基、杂芳烷基、芳基、杂芳基或其组合)、氨磺酰(单-、二-，烷基、芳烷基、杂芳烷基或其组合)。在一个方面，基团上的取代基独立地是任何一个单一取代基或上述取代基的任何子集。在另一个方面，取代基自身可以被任一上述取代基取代。应理解为仅通过一种正规形式(即Lewis结构)可能无法充分地表示某些化学实体的实际电子结构。不希望受限于理论，实际结构可由一些混合的或两种或多种正规形式的权重平均所替代，统称为共振形式或结构。共振结构不是离散的化学实体且仅存在于纸面上。对于具体的化学实体而言，相互之间的区别仅在于结合和非结合电子的布局或“位置”不同。一种共振结构对于混合体的贡献可能较其它形式更大。由此，所写出的和所画出的形式是考虑了本领域技术人员所认定为具体化合物的主导共振形式。取代基和变量的组合通常是指导致形成稳定化合物的那些组合。如本文所用，术语“稳定”指稳定性足以允许制造且在足够长时间保持完整性以适用于本文详述的目的(如，对于受试者的治疗或预防给药)的化合物。本文所述化合物可通过商业途径获得(例如，商业可得的化合物库)或通过如下所示常规方法使用商业可得起始原料和试剂合成。本文所述化合物可从反应混合物分离并进一步通过柱层析、高压液相层析或重结晶的方法纯化。如本领域技术人员所理解的，合成本文化合物的其它方法对于本领域普通技术人员是显而易见的。此外，可以以可替换的序列或顺序进行合成步骤以产生所需化合物。适用于合成本文化合物的合成化学转变和保护基方法(保护和脱保护)为本领域所知并例如包括描述于R.Larock，ComprehensiveOrganicTransformations，VCHPublishers(1989)；T.W.GreeneandP.GM.Wuts，ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis，2d.Ed.，JohnWileyandSons(1991)；L.FieserandM.Fieser，FieserandFieser′sReagentsforOrganicSynthesis，JohnWileyandSons(1994)；andL.Paquette，ed.，EncyclopediaofReagentsforOrganicSynthesis，JohnWileyandSons(1995)及其后续版本中的方法本文所述化合物可包含一个或多个不对称中心并以外消旋体和外消旋混合物、单一对映体、各非对映异构体和非对映异构体混合物存在。清楚地包括所有这些化合物的这些异构体形式。这些化合物还可包含其中键旋转被限制于具体价键的价键(如，碳-碳键)，该限制例如是由环或双键的存在引起的。因此，清楚地包括顺/反和E/Z异构体。这些化合物还可表示为多种互变异构形式，此时，本文清楚地包括本文所述化合物的所有互变形式，甚至还可表示为单一互变异构体形式(如，环系的烷基化可导致多个位点的烷基化，本文清楚地包括所有这些反应产物)。清楚地包括这些化合物的所有这些异构体形式。清楚地包括本文所述化合物的所有晶型。这些化合物还可包括化合物自身以及适当时它们的盐和前药。例如，阴离子与本文所述化合物上的正电荷取代基(如氨基)可形成盐。适宜的阴离子包括氯离子、溴离子、碘离子、硫酸根、硝酸根、磷酸根、柠檬酸根、甲磺酸根、三氟乙酸根和乙酸根。同样，阳离子与本文所述化合物上的负电荷取代基(如羧酸根)也可形成盐。适宜的阳离子包括钠离子、钾离子、镁离子、钙离子和铵阳离子比如四甲基铵离子。前药例如包括酯和其它药学上可接受的衍生，其在给予受试者时可提供活性化合物。皱纹皱纹通常是由于皮肤的自然老化过程以及接触太阳紫外线而引起的。皱纹是是皮肤表面的外形改变，在组织学水平上没有特殊的构造改变。通常，皱纹如Kligman等(1985)BrJDerm11337-42中所述分类，其在此通过参考而引入。Kligman将皱纹分类为三类线形皱纹(linearwrinkles)、沟形皱纹(glyphicwrinkles)、波形皱纹(crinkle)。线形皱纹是直的，通常出现在面部皮肤，是由于自然老化和接触紫外光下引起的。沟形皱纹这是在外观上形成了三角形或长方形的皱纹，是基于接触日光的脸部、手部、和颈部形成的，在紫外光下或皮肤日射病进一步恶化。波形皱纹比较细，波状出现在松弛的皮肤上，基于皮肤的任何部位，作为代表性的是指手背和眼睑的四周的皮肤。线形皱纹可进一步细分为(a)常规皱纹和(b)细纹。常规皱纹长、深、清晰，也被称为crow′sfeet。细纹则窄且浅。常规皱纹的宽度至少约为155微米(0-32Hz)，优选约160-250微米。细纹的宽度少于约154微米，优选约40-154微米(32-126Hz)，计算时通过两维的傅里叶变换将三维的形状数据转变为频率域数据而获得功率谱(例如使用ShiseidoWrinkleAnalyzer3DPro系统，基本上如Takasuetal.(1996)JSocCosmetChemJapan29394-405；和日本专利申请公开号07-113623，公开于1995年5月2日所述)。组合物的有效量定义为给予受试者时，预防受试者的皱纹或细纹形成、减少受试者的表观皱纹或细纹的组合物的量。给予受试者的有效量通常基于许多因素包括年龄、性别、表面积、体重和皮肤状况。体表面积可由患者的高度和体重大约确定。例如参见ScientificTables，GeigyPharmaceuticals，Ardley，NewYork，1970，537。如本领域技术人员所知，有效剂量将取决于给药路线、赋形剂用法以及可能的与其它治疗比如应用其它减少皱纹化合物的联合应用。如本文所用，术语“预防或治疗皱纹”意指施用或给予受试者治疗剂，该受试者有皱纹或有皱纹倾向、或接触易于引起皱纹的试剂如UV辐射如UVB辐射，其目的在于减少、改善、缓解、改变、补救、改进或影响皱纹表观或皱纹形成。该治疗剂可由受试者自身或由他人如健康护理提供者或化妆品提供者给予。在本文所述方法的优选实施方案中，受试者的皱纹减少至少5％，优选至少10％，更优选至少20％、25％或更多。这些方法和组合物可以预先使用或它们可用于预防受试者皱纹的进一步形成或减少表观皱纹。该组合物还可用于制备用于预防、减少或治疗皱纹的药物。蛋白酶抑制剂组合物的给药用于预防或减少皱纹或其它皮肤病情的药物组合物可经由胃肠外途径给药，包括口服、局部、皮下、腹膜内、肌内、鼻内和静脉内。优选局部给药。可重复给予本组合物，如重复性局部给药。可同时使用超过一种给药途径，如局部给药联合口服给药。胃肠外剂型例如包括活性剂的水溶液，在等渗盐水中，5％葡萄糖和其它公知的药学上可接受的载体。可使用稳定剂比如环糊精或本领域熟悉的其它稳定剂作为递送减少皱纹的组合物的药物赋形剂。本文所述的组合物还可被配制成利用常规方法给药的用于其它途径的剂型。药物组合物例如可被配制成胶囊、片剂(分别包括定时释放(timedrelease)和缓释制剂)或胶封(gelseal)等剂型用于口服给药。胶囊可含有任何标准的药学上可接受物质比如明胶或纤维素衍生物。片剂可根据常规方法通过压制由蛋白酶抑制剂化合物与固体载体和润滑剂的混合物而配制。固体载体例如包括淀粉和糖皂土。减少皱纹组合物还可以以硬壳片剂或胶囊进行给药，其中所述胶囊包含例如乳糖或甘露醇作为粘合剂以及常规填充剂和成片剂(tabletingagent)。局部给予本文所述的减少皱纹化合物代表了上述许多不同途径中的优选给药途径。对于局部给药，组合物可包括与皮肤相容的媒介。这样的药物组合物可以存在许多形式，如适于施用于皮肤的溶液、乳膏、软膏、凝胶、洗液、香波或气溶胶制剂的形式。使活性成分如用于预防或减少皱纹的蛋白酶抑制剂化合物在组合物中的重量百分比，在约0.01％-10％范围内(基于组合物总重)而与药学上可接受的载体混合。许多载体物质可应用于本文所述的减少皱纹组合物中，比如酒精、芦荟凝胶、尿囊素、甘油、维生素A和E油、矿物油和聚乙二醇。该组合物中可存在其它添加剂如防腐剂、香料、遮光剂或其它化妆品成分。局部组合物可在施用后立即除去，或其可在施用后长期如整夜或整天留在皮肤表面如面部。皱纹的测量化合物对于皱纹形成或出现的作用可通过视觉观察定性地或通过计算机辅助测量皱纹形态学定量地进行评价。优选地，定量分析皱纹形态学。测量皱纹的定量方法的例子例如包括但不限于应用激光束的光学切割术，如Hoshino(1992)Pixel45121所提议的，在此通过参考引入；或分析三维皮肤复型(three-dimensionalskinreplicas)的方法如ShiseidoWrinkleAnalyzer3DProsystem(Takasuetal.(1996)JSocCosmetChemJapan29394-405；日本专利申请公开号07-113623，公开于1995年5月2日(相应于美国专利申请序列号08/364,346))。可使用SILFLO(FlexicoDevelopmentLtd.)系统或类似系统形成皮肤复型(skinreplica)。皮肤复型表面不规则处，即皱纹，经ShiseidoWrinkleAnalyzer3DPro或类似系统分析提供三维形状数据，包括相应于皮肤两维平面上的点的高度。根据该三维数据，计算各皱纹的长度、宽度、深度、面积和体积。根据本文描述的区别常规皱纹和细纹的参数，独立地识别并标识不同皱纹类型包括常规皱纹和细纹的细分类型。试剂盒本文所述的蛋白酶抑制剂可提供于试剂盒内。该试剂盒包括(a)抑制剂如包括抑制剂的组合物，和(b)信息材料。该信息材料可以是说明性的、指导性的、营销性的或其它与本文所述方法和/或用于本文所述方法的抑制剂的用法相关的其它材料。例如，该信息材料涉及皱纹或其它形式的光致老化。在一种实施方案中，说明材料可包括以适宜方式给予抑制剂以实施本文所述方法的说明书，如适宜的剂量、剂型或给药方式(如，剂量、剂型或本文所述的给药方式)。优选剂量为0.05-10％的抑制剂，优选方式是局部给药。在另一实施方案中，信息材料可包括将抑制剂给予适宜受试者如人如患有或有罹患UVB诱发皱纹危险的人的说明书。例如，该材料可包括将抑制剂给予面部、手或颈部的说明书。不限制试剂盒的信息材料的形式。许多情况下，该信息材料如说明书以打印的方式提供，如打印的文字、图片和/或照片，如标签或打印纸。但是，该信息材料还可以其它形式提供，比如盲文、机读材料、影视记录或声音记录。在另一实施方案中，试剂盒的信息材料是联系信息，如物理地址、电子邮件地址、网址或电话号码，试剂盒的使用者可获得有关抑制剂和/或其在本文所述方法中应用的基本信息。当然，该信息材料还可以以任何联合模式提供。除了抑制剂，试剂盒的组合物可包括其它成分，比如溶剂或缓冲剂、稳定剂、防腐剂、香料或其它化妆品成分和/或用于治疗本文所述病情或紊乱的其它制剂如遮光剂。可供选择地，在试剂盒中可包括不同于抑制剂的组合物或容器的其它成分。在这些实施方案中，试剂盒可包括混合抑制剂和其它成分、或抑制剂与其它成分一起使用的说明书。可以以任何形式使用抑制剂，如液态的、干燥的或冻干的形式。优选抑制剂基本上纯净和/或无菌。当抑制剂以液体溶液提供时，该液体溶液优选是水溶液，优选无菌水溶液。当抑制剂以干燥形式提供时，通常通过加入适宜的溶剂而制成。在试剂盒中任选可提供溶剂，如无菌水或缓冲液。试剂盒可包括一种或多用容器以盛放包含抑制剂的组合物。在一些实施方案中，试剂盒包含独立的容器、分隔或室以盛放组合物和信息材料。例如，组合物可包含于瓶、小瓶或注射器中，信息材料可包含于塑料袋或包中。在其它实施方案中，试剂盒的分离要素可包含于单一的未分隔的容器中。例如，组合物包含于瓶、小瓶或注射器中，其贴有标签形式的信息材料。在一些实施方案中，试剂盒包括许多个别的容器(如包)，各自包含一个或多个单元剂型(如，本文所述剂型)的抑制剂。例如，试剂盒包括许多注射器、安瓿、箔包裹或发泡包装，各自包含单一剂量的抑制剂。试剂盒的容器可以是气密的和/或防水的。试剂盒任选包括适于给予组合物的装置如注射器吸入器、移液管、钳子、测量匙、滴管(如，滴眼管)、药签(如，棉签或木签)，或任何其它释药装置。在优选实施方案中，该装置室药签。下面的具体实施例仅是为了举例说明而非以任何方式限制本文的保留方面。实施例实施例1Ucf-101对于耳厚度的作用该实施例表明ucf-101对于皮肤没有刺激性。使用厚度仪(MitsutoyoCorp.)测量小鼠(FVB株，雄性，7周龄，n＝3/组)耳部的对照厚度。测量双耳厚度后，将10μl的ucf-101溶液(1.0％或0.1％)施用于左耳且将10μl的溶剂施用于右耳。给药后连续三天测量耳厚度。左耳和右耳厚度的结果(均值±S.D.)提供于表1中。表1由表1可见，当与单独的溶剂(DMSO和丙酮)相比时，ucf-101不增加耳厚度。由此，ucf-101在DMSO中为1％或在丙酮中为0.1％浓度时不是刺激性的。实施例2Ucf-101对于接触UVB-照射皮肤的耳厚度的作用本实施例表明ucf-101对于接触UVB的皮肤没有刺激性。在第0天使用厚度仪(MitsutoyoCorp.)测量小鼠(FVB株，雄性，7周龄，n＝3/组)耳部的对照厚度。测量双耳厚度后，双耳均经UVB照射(80mJ/cm2)。将5μl1％的ucf-101的DMSO溶液施用于左耳并将5μl的DMSO施用于右耳。24小时(1天)后，测量耳厚度并给予第二剂量(左耳1％的ucf-101的DMSO溶液；右耳DMSO)。再过24小时(2天)后，再次测量耳厚度并给予第三剂量(左耳1％的ucf-101的DMSO溶液；右耳DMSO)。然后在另一连续四天(3-6天)内监测耳厚度。结果(均值±S.D.)提供于表2中。表2如表2所示，当与对照物相比时，ucf-01不增加耳厚度(即，刺激)。实施例3Omi抑制剂对于皱纹和血管形成的作用本实施例表明了抑制Omi/HtrA2降低了UVB-诱发的皮肤损伤。使用了五组小鼠(7周龄雌性无毛Skh-1小鼠，n＝3/组)1组UVB+1％ucf-101的DMSO溶液；2组UVB+DMSO对照；3组UVB+0.1％ucf-101的丙酮溶液；4组UVB+丙酮对照；5组没有UVB的对照。使用荧光灯(SouthernNewEnglandUltraviolet)使1、2、3和4组接触UVB辐射，以0.35mW/cm2递送于小鼠背部皮肤表面。辐射后，将所述各组样品(各100μl)施用于背部皮肤。每周重复该过程三次，持续十周，从而刺激长期的接触UVB。UVB辐射的开始剂量为0.5最小红斑剂量(minimumerythemadose，MED)(20mJ/cm2)且以0.5MED的增幅逐渐增加到4.5MED的最大剂量。总累积剂量为6.54J/cm2UVB。10周后，使用五种类别评价皮肤皱纹(0没有皱纹；1浅皱纹；2清晰皱纹；3深皱纹；4严重皱纹)。处死1组和2组小鼠并在液氮中快速冷却背部皮肤样品。在7微米冷冻切片上使用单克隆大鼠抗小鼠CD31抗体(BDPharmingen)进行免疫组化染色。通过UVB辐射小鼠获得代表性切片并使用NikonE-600显微镜进行分析。使用点式数字照相机(DiagnosticInstruments)捕获图像，并使用IP-LAB软件进行形态测定分析。测定真皮内血管所占据的面积。结果(均值±S.D.)示于表3(皱纹)和表4(血管面积)中。表3由表3可见，抑制Omi/HtrA2对于预防和减少UVB-诱发的皱纹形成有效。表4由表4可见，抑制Omi/HtrA2对于减少UVB-诱发的血管膨胀有效。实施例4测试样品对于耳厚度的作用本实施例表明包括ucf-101的测试样品不刺激皮肤。在0天，使用厚度仪(MitsutoyoCorp.)测量小鼠(FVB株，雌性，7周龄，n＝3/组)耳部的对照厚度。测量双耳厚度后，将10μl的ucf-101溶液(1.0％或0.1％)施用于左耳且将10μl的溶剂施用于右耳。24小时(1天)后，测量耳厚度并给予第二剂量(左耳测试溶液；右耳DMSO)；再过24小时(2天)后，再次测量耳厚度并给予第三剂量(左耳测试溶液；右耳DMSO)。结果(均值±S.D.)提供于表5中。表5由表5可见，当与对照物相比时，所评价的测试样品没有增加耳厚度。实施例5测试样品对皮肤的作用本实施例表明包括ucf-101的测试样品不刺激皮肤。在0天使用电动剪毛机修剪小鼠背皮毛发(FVB株，7周龄，n＝3/组)。向背皮施用5μl测试样品溶液(～1cm直径)。24小时(1天)后，基于评分系统测量皮肤刺激(0无红斑；1非常轻微的红斑；2边界明显的红斑；3中等程度的红斑；4若干红斑和水肿)并给予第二剂量。再经过24小时(2天)后，测量皮肤刺激并给予第三剂量。第三个24小时(3天)后，再次测量皮肤刺激。所得结果提供于表6中。表6由表6可见，测试样品溶液没有诱发皮肤刺激。这些物质在0.1％浓度时不是刺激物。实施例6Omi抑制对于皱皮和血管形成的作用本实施例表明抑制Omi/HtrA2降低了UVB-诱发的皮肤损伤。使用了七组小鼠(7周龄，雌性，无毛Skh-1小鼠，n＝3/组)1组UVB+1％ucf-101在25％DMSO+75％乙醇中的溶液；2组UVB+0.1％zVAD-FMK在25％DMSO+75％乙醇中的溶液；3组UVB+0.1％TAPI-0在25％DMSO+75％乙醇中的溶液；4组UVB+0.1％氨甲环酸在25％DMSO+75％乙醇中的溶液；5组UVB+0.1％大豆胰蛋白酶抑制剂在25％DMSO+75％乙醇中的溶液；7组没有UVB的对照。使用荧光灯(SouthernNewEnglandUltraviolet)使1、2、3、4、5和6组接触UVB辐射，以0.35mW/cm2递送到小鼠背部皮肤表面。辐射后，将所述各组样品(各自为100μl)施用于背部皮肤。每周重复该过程三次，持续十周，从而刺激长期的接触UVB。UVB辐射的开始剂量为0.5最小红斑剂量(MED)(20mJ/cm2)且以0.5MED的增幅逐渐增加到4.5MHD的最大剂量。总累积剂量为6.54J/cm2UVB。10周后，使用五种类别评价皮肤皱纹(0没有皱纹；1浅皱纹；2清晰皱纹；3深皱纹；4严重皱纹)。处死1组和2组小鼠并在液氮中快速冷却背部皮肤样品。在7微米冷冻切片上使用单克隆大鼠抗小鼠CD31抗体(BDPharmingen)进行免疫组化染色。由UVB辐射小鼠获得代表性切片并使用NikonE-600显微镜进行分析。从UVB辐射小鼠获得代表性的切片并使用NikonE-600显微镜进行分析。使用SPOTTM数字照相机(DiagnosticInstruments)捕获图像，并使用IP-LABTM软件进行形态测定分析。测定真皮内血管所占据的面积。相对于1组，使用双方不成对t检验研究分析血管的差异。结果(均值±S.D.)示于表7(皱纹)和表8(血管面积)中表7由表7可见，抑制Omi/HtrA2对于预防和减少UVB-诱发的皱纹形成有关。表8**P＜0.01，***P＜0.001，N.S.没有显著性由表8可见，抑制Omi/HtrA2对于降低UVB-诱发的血管膨胀有效。其它实施方案在权利要求范围内。权利要求1.一种减少受试者皱纹的方法，所述方法包括以足以减少所述皱纹的量向受试者给予含有在凋亡中涉及的半胱天冬酶或丝氨酸蛋白酶的抑制剂的组合物。2.根据权利要求1的方法，其中皱纹是由长期接触UVB引起的。3.根据权利要求1的方法，其中组合物是经局部给予的。4.根据权利要求1的方法，其中组合物是无菌的。5.根据权利要求1的方法，其中抑制剂是半胱天冬酶抑制剂。6.根据权利要求1的方法，其中抑制剂是Omi/HtrA2抑制剂。7.根据权利要求1的方法，其中抑制剂具有式(I)结构其中各R1和R2独立是芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基、杂环烯基、芳烷基或杂芳烷基且任选被1-5个R3取代；各X、Y和Z独立是O或S；----代表任选的双键；n是0-20；各A和B独立是芳基或杂芳基且任选被1-5个R3取代；以及各R3独立是卤素、羟基、C1-C10烷基、C1-C10羟基烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C10烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-C12芳烷基、C7-C12杂芳烷基、C3-C8杂环基、C2-C12链烯基、C2-C12链炔基、C5-C10环烯基、C5-C10杂环烯基、羧基、羧酸酯、氰基、硝基、氨基、C1-C6烷基氨基、C1-C6二烷基氨基、巯基、SO3H、硫酸酯、S(O)NH2、S(O)2NH2、磷酸酯、C1-C4亚烷二氧基、氧代、酰基、氨基羰基、C1-C6烷基氨基羰基、C1-C6二烷基氨基羰基、C1-C10烷氧基羰基、C1-C10硫代烷氧基羰基、C1-C6烷基酸酐基或C1-C6羟基羰基烷基。8.根据权利要求7的方法，其中R1和R2均是芳基。9.根据权利要求8的方法，其中R1和R2均是苯基。10.根据权利要求7的方法，其中X、Y和Z之一是S，且另两个是O。11.根据权利要求10的方法，其中Y是S并且X和Z是O。12.根据权利要求7的方法，其中存在双键。13.根据权利要求7的方法，其中n是0。14.根据权利要求7的方法，其中A和B之一是杂芳基，且另一个是芳基。15.根据权利要求14的方法，其中A是杂芳基且B是芳基。16.根据权利要求15的方法，其中A具有式(II)结构其中，W是O、S或NRa；以及Ra是氢或C1-C6烷基。17.根据权利要求16的方法，其中W是O。18.根据权利要求15的方法，其中B具有式(III)结构其中，各Rb、Rc、Rd、Re和Rf独立是氢、卤素、羟基、C1-C10烷基、C1-C10羟基烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C10烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-C12芳烷基、C7-C12杂芳烷基、C3-C8杂环基、C2-C12链烯基、C2-C12链炔基、C5-C10环烯基、C5-C10杂环烯基、羧基、羧酸酯、氰基、硝基、氨基、C1-C6烷基氨基、C1-C6二烷基氨基、巯基、SO3H、硫酸酯、S(O)NH2、S(O)2NH2、磷酸酯、C1-C4亚烷基二氧基、氧代、酰基、氨基羰基、C1-C6烷基氨基羰基、C1-C6二烷基氨基羰基、C1-C10烷氧基羰基、C1-C10硫代烷氧基羰基，C1-C6烷基酸酐基或C1-C6羟基羰基烷基。19.根据权利要求18的方法，其中各Rb、Rc、Rd、Re和Rf独立是氢、羟基、C1-C10烷基、C1-C10烷氧基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C3-C8杂环基、C2-C12链烯基、C2-C12链炔基、羧基、羧酸酯、硝基、氨基、酰基、氨基羰基、C1-C6烷基酸酐基或C1-C6羟基羰基烷基。20.根据权利要求18的方法，其中各Rc、Rd和Re是氢，且各Rb和Rf独立是羟基、C1-C10烷基、C1-C10烷氧基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C3-C8杂环基、C2-C12链烯基、C2-C12链炔基、羧基、羧酸酯、硝基、氨基、酰基、氨基羰基、C1-C6烷基酸酐基或C1-C6羟基羰基烷基。21.根据权利要求20的方法，其中Rb或Rf之一是硝基。22.根据权利要求18的方法，其中各Rb、Rc和Rf是氢，且各Rd和Re独立是羟基、C1-C10烷基、C1-C10烷氧基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C3-C8杂环基、C2-C12链烯基、C2-C12链炔基、羧基、羧酸酯、硝基、氨基、酰基、氨基羰基、C1-C6烷基酸酐基或C1-C6羟基羰基烷基。23.根据权利要求22的方法，其中Rd和Re之一是卤素，且另一个是C1-C4烷氧基。24.根据权利要求23的方法，其中Rd是OCH3，且Re是Cl。25.根据权利要求18的方法，其中各Rb、Rd、Re和Rf是氢，且Rc是羟基、C1-C10烷基、C1-C10烷氧基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C3-C8杂环基、C2-C12链烯基、C2-C12链炔基、羧基、羧酸酯、硝基、氨基、酰基、氨基羰基、C1-C6烷基酸酐基或C1-C6羟基羰基烷基。26.根据权利要求25的方法，其中Rc是羧基。27.根据权利要求18的方法，其中各Rc、Rd和Rf是氢且各Rb和Re独立是羟基、C1-C10烷基、C1-C10烷氧基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C3-C8杂环基、C2-C12链烯基、C2-C12链炔基、羧基、羧酸酯、硝基、氨基、酰基、氨基羰基、C1-C6烷基酸酐基或C1-C6羟基羰基烷基。28.根据权利要求27的方法，其中Rb和Re之一是硝基。29.根据权利要求7的方法，其中化合物选自30.根据权利要求7的方法，其中皱纹是由接触UVB辐射引起的。31.根据权利要求29的方法，其中皱纹是由接触UVB辐射引起的。32.根据权利要求7的方法，其中抑制剂是经局部给予的。33.根据权利要求29的方法，其中抑制剂是经局部给予的。34.根据权利要求7的方法，其中组合物是化妆组合物。35.根据权利要求29的方法，其中组合物是化妆组合物。36.根据权利要求7的方法，其中将抑制剂提供在药学上可接受的载体中。37.根据权利要求29的方法，其中将抑制剂提供在药学上可接受的载体中。38.根据权利要求7的方法，其中组合物进一步含有化妆试剂。39.根据权利要求29的方法，其中组合物进一步含有化妆试剂。40.一种向受试者提供皱纹防护的方法，所述方法包括以足以减少所述皱纹的量向受试者提供含有在凋亡中涉及的半胱天冬酶或丝氨酸蛋白酶的抑制剂的组合物；以及向受试者提供应用所述组合物减少皱纹的说明书。41.根据权利要求40的方法，其中所述说明书包括在接触阳光之前将组合物施用于皮肤的说明。42.根据权利要求40的方法，其中组合物进一步含有化妆试剂。43.用于局部施用的组合物，该组合物以足以减少所述皱纹的量含有在凋亡中涉及的半胱天冬酶或丝氨酸蛋白酶的抑制剂。44.一种方法，包括确定需要减少皱纹的受试者，以足以减少所述皱纹的量给予在凋亡中涉及的半胱天冬酶或丝氨酸蛋白酶的抑制剂；并且监测抑制剂对于皱纹减少的作用。专利摘要提供了应用蛋白酶抑制剂比如Ucf－101减少皱纹或其它皮肤损伤的方法、组合物和试剂盒。文档编号A61Q19/08GK1997339SQ20058001018公开日2007年7月11日申请日期2005年2月7日发明者藤井成四郎,平川哲,迈克尔·德特马,安东尼斯·S·泽沃斯申请人:通用医疗公司,中央佛罗里达大学研究基金会导出引文BiBTeX,EndNote,RefMan