专利名称：新的含阻滞共聚物和蒽环类抗癌剂的固体制剂及其生产方法
技术领域：
本发明涉及用于注射的固体制剂，该制剂包含阻滞共聚物，该阻滞共聚物组成亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分，作为恶性肿瘤治疗剂的蒽环类抗癌剂。本发明还涉及该制剂的生产方法。
背景技术：
已知的一些制剂是通过蒽环类抗癌剂包含在由阻滞共聚物形成的聚合物微团中，该阻滞共聚物由亲水聚合物结构部分组成，该结构部分具有聚环氧乙烷作为主链和在侧链具有脂溶性取代基的多氨基酸结构部分得到的。
例如，JP-A No.7-69900描述了微团制剂水性溶液，该溶液包含阻滞共聚物，该阻滞共聚物由聚环氧乙烷和多天门冬氨酸通过阿霉素残基和阿霉素结合而组成。
然而，该出版物未特别描述有关临床上可应用注射的固体制剂。生产上述水性溶液的方法的问题包括用工业上不易进行的超声波照射和透析的工艺，和在沉淀的阻滞共聚物中使用有机溶剂如二甲基甲酰胺溶解阻滞共聚物和阿霉素，及异丙基醚等。当使用有机溶剂时，需要完全清除溶剂，使用具有抗溶剂腐蚀和防爆炸特性的设备，应考虑防备溶剂蒸汽在操作中的安全，因此，生产用于注射的制剂的设备应当是很特殊的设备。因此，有机溶剂通常不用于注射用制剂的工厂中。
因此，需要临床可应用的注射用固体制剂，该制剂包含由亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成的阻滞共聚物，和蒽环类抗癌剂，用作恶性肿瘤治疗剂；显示长时间的稳定性，提供添加剂的安全性，并且用不需透析工艺和不使用有机溶剂的普通生产设备就可以生产。
发明内容
本发明的发明者致力于研究解决上述问题，结果发现了本发明的用于注射的新的固体制剂及其生产方法。
即，本发明涉及
(1)用于注射的固体制剂，该制剂包含由亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成的阻滞共聚物，和蒽环类抗癌剂，糖和碱。
(2)如(1)所述的用于注射的固体制剂，其中蒽环类抗癌剂是阿霉素或其盐，糖是二糖。
(3)如(1)或(2)所述的用于注射的固体制剂，其中糖包括选自蔗糖、海藻糖、麦芽糖和乳糖的一种或多种化合物。
(4)如(1)到(3)中任何一种用于注射的固体制剂，其中碱包括选自碳酸氢钠、磷酸氢二钠、柠檬酸钠和氢氧化钠的一种或多种化合物。
(5)如(1)到(4)中任何一种用于注射的固体制剂，其中阻滞共聚物中亲水聚合物结构部分是聚环氧乙烷衍生物，和疏水多氨基酸结构部分是多天门冬氨酸，其侧链结合蒽环类抗癌剂。
(6)如(5)中所述的用于注射的固体制剂，其中疏水多氨基酸结构部分的侧链结合的蒽环类抗癌剂是阿霉素。
(7)如(1)所述的用于注射的固体制剂，其中蒽环类抗癌剂的含量是10到100份重量，糖的含量是10到500份重量，碱的含量是0.1到10份重量，基于由亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成的阻滞共聚物的100份重量。
(8)如(1)所述的用于注射的固体制剂，其中成分的比例如下由亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成的阻滞共聚物的10到85份重量；蒽环类抗癌剂1到50份重量；糖5到80份重量；碱0.05到5份重量。
(9)如(8)所述的用于注射的固体制剂，其中蒽环类抗癌剂是阿霉素或其盐，糖是蔗糖、海藻糖、麦芽糖和乳糖；碱是碳酸氢钠、磷酸氢二钠、柠檬酸钠或氢氧化钠。
(10)如(1)到(9)中任何一种用于注射的固体制剂，其中用于注射的固体制剂是冻干的制剂。
(11)一种由亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成的阻滞共聚物微团制剂，包含蒽环类抗癌剂在疏水内核中，通过溶解(1)到(10)中任何一种用于注射的固体制剂在输注时获得。
(12)一种pH为4到9的阻滞共聚物微团溶液，包含阻滞共聚物，该阻滞共聚物由被蒽环类抗癌剂结合的亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分，蒽环类抗癌剂，糖和碱组成。
(13)一种生产用于注射的固体制剂的方法，包含在水中溶解由亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成的阻滞共聚物、蒽环类抗癌剂、糖、碱，随后干燥产生固体。
(14)一种如(13)所述生产用于注射的固体制剂的方法，其中在水中溶解由亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成的阻滞共聚物，加入碱，并加热混合物。
(15)一种如(14)所述的生产用于注射的固体制剂的方法，其中加热温度是50到80℃。
(16)一种如(13)到(15)所述的生产用于注射的固体制剂的方法，包括在水中溶解由亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成的阻滞共聚物、蒽环类抗癌剂、糖、碱，随后通过膜过滤器过滤。
(17)一种如(16)所述生产用于注射的固体制剂的方法，其中膜过滤器是纤维素基或合成聚合物基的过滤器，其孔大小为0.05到0.5μm。
(18)如(12)所述的微团溶液，其中蒽环类抗癌剂是阿霉素或其盐，糖是二糖。
(19)如(18)所述的微团溶液，其中二糖包括选自蔗糖、海藻糖、麦芽糖和乳糖的一种或多种化合物。
(20)如(12)所述的微团溶液，其中碱包括选自碳酸氢钠、磷酸氢二钠、柠檬酸钠和氢氧化钠的一种或多种化合物。
(21)如(12)所述的微团溶液，其中蒽环类抗癌剂是阿霉素或其盐，糖是蔗糖、海藻糖、麦芽糖和乳糖；碱是碳酸氢钠、磷酸氢二钠、柠檬酸钠或氢氧化钠。
(22)如(12)所述的微团溶液，其中阻滞共聚物由被蒽环类抗癌剂结合的亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成。
(23)如(22)所述的微团溶液，其中阻滞共聚物的亲水聚合物结构部分是聚环氧乙烷衍生物，疏水多氨基酸结构部分是具有侧链结合蒽环类抗癌剂的多天门冬氨酸。
(24)如(22)或(23)所述的微团溶液，其中结合疏水多氨基酸结构部分的侧链的蒽环类抗癌剂是阿霉素。
(25)一种用于注射的固体制剂，通过对(18)到(22)中任何一种微团溶液进行干燥获得。
发明的最佳实施例本发明的用于注射的固体制剂包含由亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成的阻滞共聚物、蒽环类抗癌剂、糖和盐。
用于本发明的注射用固体制剂的蒽环类抗癌剂不是特别限制的，只要该蒽环霉素类化合物具有抗癌活性，特别是用于临床治疗癌症的蒽环类抗生素及其衍生物，例子包括柔红霉素、阿霉素、吡拉柔比星(pyrarubicin)、阿克拉霉素、表阿霉素、去甲氧柔红霉素等。阿霉素特别优选。
当本发明中使用的蒽环类抗癌剂是能与酸或碱形成盐的蒽环类抗癌时，该盐的使用也包括在本发明的范围内。对于盐来说，优选酸加成盐，形成酸加成盐的酸，例如，盐酸、硫酸、硝酸、氢溴酸等。
对于构成本发明的亲水聚合物结构部分的聚合物，包括所有通常已知的有亲水性的聚合物，但是，其具体例子包括聚环氧乙烷、多糖、聚丙烯酸、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇及其衍生物等，特别优选聚环氧乙烷衍生物。
本发明的疏水多氨基酸结构部分并没有特别限制，只要它是显示疏水性的α-氨基酸或β-氨基酸或其衍生物，优选的是蒽环类抗癌剂结合部分或全部侧链的多氨基酸，特别优选是阿霉素结合部分侧链的多天门冬氨酸。
用于本发明的由亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成的阻滞共聚物，例如，是按照下列方法生产的。推测用该方法生产的阻滞共聚物，例如，由上述通式(I)代表。在通式中，R代表羟基或蒽环类抗癌剂残基，R1代表氢原子或低级烷基，优选低级烷基；R2代表低有亚羟基，R3代表亚甲基或乙烯基，和R4代表氢原子或低级酰基，优选低级酰基。n代表5到1000的整数，m代表2到300的整数，x+y代表0到300的整数，优选的是，n是80到300，m是20到50，x+y是0到50，并且x+y不大于m。x和y可以是任何数值，包括0，只要它是满足上述条件的整数。
以R代表的在蒽环类抗癌剂残基中的蒽环类抗癌剂与上述本发明的用于注射的固体制剂中提及的蒽环类抗癌剂是一样的，蒽环类抗癌剂的具体例子也与上文中描述的相同，优选的蒽环类抗癌剂也如上文所述的阿霉素。在一个分子的阻滞共聚物中，疏水多氨基酸结构部分中的蒽环类抗癌剂残基的重量比例优选是20％到70％，特别优选是25％到60％。
在R1中低级烷基包括有1到4个碳原子的直链或支链烷基，其具体的例子包括甲基、乙基、n-丙基、i-丙基、n-丁基、t-丁基等，优选是甲基。
在R2中低级亚羟基包括有1到4个碳原子的直链或支链亚羟基，其具体的例子包括亚甲基、乙烯基、三亚甲基、2-甲基三亚甲基、四亚甲基基等，优选是三亚甲基。
R3代表亚甲基或乙烯基，优选是亚甲基。
R4中低级酰基包括有1到4个碳原子的酰基，其具体例子包括甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基等，优选是乙酰基。
蒽环类抗癌剂残基与通式(I)中的多氨基酸侧链的结合模式并没有特别限制，优选是由蒽环类抗癌剂的氨基基团或羟基基团与多氨基酸的羧酸侧链形成的酰胺链或酯链，特别优选的是由蒽环类抗癌剂的氨基糖部分的伯氨基基团与多氨基酸的羧酸侧链形成的酰胺键。
对于本发明的由亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成的阻滞共聚物，在提到的特别优选的阻滞共聚物中，R1代表甲基，R2代表三亚甲基，R3代表亚甲基，R4代表乙酰基，n是80到300，m是20到50，x+y是0到50不大于m。
对于本发明的由亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成的阻滞共聚物可按照上文描述的方法生产，例如，JP-A No.7-69900描述的方法。即，一端甲氧基一端为氨丙氧基聚乙二醇和β-苄基-L-天门冬氨酸-N-羧酸酐反应，所得的阻滞共聚物的末端氨基被酰化，侧链的苄基酯用碱水解，在侧链上所得的游离羧酸和蒽环类抗癌剂使用缩合剂和反应助剂来缩合以获得阻滞共聚物。
对本发明的注射用固体制剂中使用的糖并没有特别限制，只要它是能用作稳定剂、溶解辅助剂或赋形剂的糖，但优选二糖，其具体例子包括蔗糖、麦芽糖、乳糖、海藻糖等，优选蔗糖和海藻糖。这些二糖中的两个或更多的糖可联合使用。而且，一个或多个糖醇可与糖联合。对于糖醇，可具体提到肌醇、木糖醇、山梨糖醇、甘露糖醇等。
对本发明的注射用固体制剂中使用的碱并没有特别限制，只要它是在水中溶解阻滞共聚物的溶解辅助剂，和该碱有质子接受能力，与溶解在水中时显示碱度。具体的是，氢氧化钠、氢氧化钾、弱酸的碱金属盐(例如，碳酸、磷酸、醋酸、乳酸、柠檬酸的钠盐或钾盐等)，优选氨或胺如三乙醇胺等，更优选碳酸氢钠、磷酸氢二钠、柠檬酸钠或氢氧化钠。
本发明的注射用固体制剂中，由亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成的阻滞共聚物的化合比例是基于该制剂总重量的10％到85％，优选是30％到60％。
本发明的注射用固体制剂中，蒽环类抗癌剂的量是5到100份重量，优选10到50份重量，基于阻滞共聚物的100份重量；其在制剂中的化合比例是基于该制剂总重量的1％到50％，优选5％到20％。
本发明的注射用固体制剂中，糖的量是10到500份重量，优选20到200份重量，基于阻滞共聚物的100份重量；其在制剂中的化合比例是基于该制剂总重量的5％到80％，优选25％到65％。
本发明的注射用固体制剂中，碱的量是0.1到10份重量，优选1到4份重量，基于阻滞共聚物的100份重量；其在制剂中的化合比例是基于该制剂总重量的0.05％到5％，优选0.5％到2％。
下一步，将描述本发明的注射用固体制剂的生产方法。
首先，由亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成的阻滞共聚物和碱被加入水中，被溶解，如果需要，通过加热。阻滞共聚物的浓度是0.01％到50％，优选0.1％到25％。PH是6到13，优选pH7到10的碱的量是0.1到10份重量，优选1到4份重量，基于阻滞共聚物的100份重量。碱可先溶解在水中，或与阻滞共聚物同时加入或在阻滞共聚物之后加入。加热可有效提高温度从50到80℃，优选60到70℃。溶解后，进行快速降温到40℃或更低。优选加热时间尽可能短，以抑制阻滞共聚物在最低水平的分解，特别优选1小时或更短时间。
加入蒽环类抗癌剂和糖并溶解在此阻滞共聚物溶液中。在5到50℃进行溶解，优选15到40℃。蒽环类抗癌剂的量是5到100份重量，优选10到50份重量，基于阻滞共聚物的100份重量。糖的量是10到500份重量，优选20到200份重量。蒽环类抗癌剂和/或糖可以分开溶解在水中，所得的溶液互相混合。如果需要，控制pH以产生阻滞共聚物-蒽环类抗癌剂复合物的水性溶液。为了混合和搅拌操作，可使用螺旋浆式搅拌器，均匀混合器，分散剂等。可使用用于微团形成、乳化和悬液的匀浆器、高压匀浆器等及专用机器。
如果需要，控制水性溶液的pH，在4到9，优选5到8。作为pH控制剂，优选是盐酸、硝酸、氢氧化钠、氢氧化钾、氨、胺如三乙醇胺等，或柠檬酸、醋酸、酒石酸、碳酸、乳酸、硫酸、磷酸，或它们的碱金属盐如钠盐，钾盐等，或它们的铵盐，更优选是盐酸或氢氧化钠。所获得的水性溶液也包括在本发明中。
为了用作注射的制剂，优选是在无菌操作下制备阻滞共聚物-蒽环类抗癌剂复合物的水性溶液，或在配制后过滤灭菌。为了均化阻滞共聚物-蒽环类抗癌剂复合物的微团的粒度，可以在过滤灭菌前一次或多次过滤。过滤操作可在正压下进行。该操作可在一次过滤操作下进行，使用装有灭菌过滤的过滤器。为了过滤微团的均化粒度，可使用膜过滤器如普通的纤维素基或合成聚合物基膜等，最小的孔大小优选为0.05到0.5μm。
使用通常的方法干燥过滤的水性溶液产生固体粉末。干燥方法，例如，可使用冻干方法，喷雾干燥方法等，优选冻干方法。可使用常用的生产医学制剂的冷冻干燥机，水性溶液被装入小瓶或大管，并冻干，封装产生注射用固体制剂。
按上述生产方法产生的注射用固体制剂也包括在本发明中。
以冻干制备的本发明的注射用固体制剂也被包括在本发明中。
另外，本发明还包括阻滞共聚物微团的水性溶液制剂，该阻滞共聚物由疏水多氨基酸结构部分和包含蒽环类抗癌剂在疏水内核的亲水聚合物结构部分组成，通过溶解上述输注中注射用的固体制剂获得。
对于本发明的输注，常用的输注如注射溶剂、生理盐水、葡萄糖液体等。其pH从4到9，优选5到8。本发明的水性溶液制剂可包含药学上可接受的pH控制剂和用于使溶解液体有所需的pH和渗透压的等渗剂。
对于上述的pH控制剂，盐酸、氢氧化钠、氢氧化钾、氨、胺如三乙醇胺等，和柠檬酸、醋酸、酒石酸、碳酸、乳酸、硫酸、磷酸，或它们的碱金属盐如钠盐，钾盐等，或它们的铵盐，或优选包含一种酸及其有缓冲作用的盐的组合物，即，更优选包含柠檬酸、磷酸或它们的盐的组合物。通过使用上述pH控制剂，水性溶液的pH被控制在4到9，优选5到8。
对于上述的等渗剂，氯化钠、甘油、单糖如葡萄糖、果糖、甘露糖醇、木糖醇等，提及的二糖如麦芽糖等，优选氯化钠、甘油和甘露糖醇。等渗剂的使用浓度使溶解液体与生理盐水的渗透压比率是0到3，优选约0.5到2。优选氯化钠的浓度是0.5％到1.8％，甘油的浓度是1.3％到5％，和甘露醇的浓度是2.5％到10％。
另外，通过在水中或含有盐的水性溶液中溶解由蒽环类抗癌剂结合的亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成的阻滞共聚物蒽环类抗癌剂、糖和碱所获得的pH为4到9的阻滞共聚物微团水性溶液也包括在本发明中。在该水性溶液中，阻滞共聚物形成微团，该微团包含亲水聚合物结构部分作为外侧部分和被蒽环类抗癌剂结合的疏水多氨基酸结构部分作为内侧部分，和蒽环类抗癌剂主要包含在其疏水内核。对于阻滞共聚物、蒽环类抗癌剂、糖和碱，提及可用于上述注射用固体制剂的物质，和它们的量和量比率也在上述范围中提及。
实施例本发明的效果可通过下文实施例和测试实施例来具体说明，但是，本发明的范围并不受其限制。
实施例1按照下文描述的参考实施例获得的1000mg阻滞共聚物，和18.5g碳酸氢钠加入20ml注射溶剂中，在60到70℃搅拌溶解，随后，该溶液冷却到室温。200mg盐酸阿霉素和1000mg蔗糖分别搅拌溶解在40ml注射溶剂中。混合两种溶液，其pH用氢氧化钠和盐酸控制在6，随后，总量用注射溶剂控制到100ml。该溶液通过孔大小为0.45μm的膜过滤器过滤，随后，通过孔大小为0.2μm的膜过滤器过滤灭菌。该溶液装入小瓶，每瓶5ml，冻干，随后小瓶封口，产生注射用固体制剂。5ml注射溶剂加到该制剂以再溶解制剂，获得阻滞共聚物-阿霉素复合物的水性溶液。以动态光散射方法确定的该复合物的平均微团直径是27nm。
实施例21000mg阻滞共聚物(与实施例1相同)，和8.8g氢氧化钠加入20ml注射溶剂中，在60到70℃搅拌溶解，随后，该溶液冷却到室温。200mg盐酸阿霉素和800mg海藻糖被搅拌溶解在40ml注射溶剂中。混合两种溶液，其pH用氢氧化钠和盐酸控制在6，随后，总量用注射溶剂控制到100ml。该溶液通过孔大小为0.45μm的膜过滤器过滤，随后，通过孔大小为0.2μm的膜过滤器过滤灭菌。该溶液装入小瓶，每瓶5ml，冻干，随后小瓶封口，产生注射用固体制剂。5ml注射溶剂加到该制剂以再溶解制剂，获得阻滞共聚物-阿霉素复合物的水性溶液。以动态光散射方法确定的该复合物的平均微团直径是28nm。
实施例31000mg阻滞共聚物(与实施例1相同)，和18.5g碳酸氢钠加入20ml注射溶剂中，在60到70℃搅拌溶解，随后，该溶液冷却到室温。200mg盐酸阿霉素和1000mg麦芽糖分别搅拌溶解在40ml注射溶剂中。混合两种溶液，其pH用氢氧化钠和盐酸控制在6，随后，总量用注射溶剂控制到100ml。该溶液通过孔大小为0.45μm的膜过滤器过滤，随后，通过孔大小为0.2μm的膜过滤器过滤灭菌。该溶液装入小瓶，每瓶5ml，冻干，随后小瓶封口，产生注射用固体制剂。5ml注射溶剂加到该制剂以再溶解制剂，获得阻滞共聚物-阿霉素复合物的水性溶液。以动态光散射方法确定的该复合物的平均微团直径是29nm。
实施例41000mg阻滞共聚物(与实施例1相同)，和9.6g氢氧化钠加入20ml注射溶剂中，在60到70℃搅拌溶解，随后，该溶液冷却到室温。200mg盐酸阿霉素和800mg乳糖分别搅拌溶解在40ml注射溶剂中。混合两种溶液，其pH用氢氧化钠和盐酸控制在6，随后，总量用注射溶剂控制到100ml。该溶液通过孔大小为0.45μm的膜过滤器过滤，随后，通过孔大小为0.2μm的膜过滤器过滤灭菌。该溶液装入小瓶，每瓶5ml，冻干，随后小瓶封口，产生注射用固体制剂。5ml注射溶剂加到该制剂以再溶解制剂，获得阻滞共聚物-阿霉素复合物的水性溶液。以动态光散射方法确定的该复合物的平均微团直径是25nm。
实施例51000mg通式(I)的阻滞共聚物(与实施例1相同)，和20mg碳酸氢钠加入20ml注射溶剂中，在60到70℃搅拌溶解，随后，该溶冷却到室温。200mg盐酸阿霉素和600mg蔗糖分别搅拌溶解在40ml注射溶剂中。混合两种溶液，其pH用氢氧化钠和盐酸控制在5.5，随后，总量用注射溶剂控制到100ml。该溶液通过孔大小为0.45μm的膜过滤器过滤，随后，通过孔大小为0.1μm的膜过滤器过滤灭菌。该溶液装入小瓶，每瓶5ml，冻干，随后小瓶封口，产生注射用固体制剂。5ml注射溶剂加到该制剂以再溶解制剂，获得阻滞共聚物-阿霉素复合物的水性溶液。以动态光散射方法确定的该复合物的平均微团直径是36nm。
实施例61000mg通式(I)的阻滞共聚物(与实施例1相同)，和20mg碳酸氢钠加入20ml注射溶剂中，在60到70℃搅拌溶解，随后，该溶液冷却到室温。200mg盐酸阿霉素和1500mg蔗糖分别搅拌溶解在40ml注射溶剂中。混合两种溶液，其pH用氢氧化钠和盐酸控制在5.5，随后，总量用注射溶剂控制到100ml。该溶液通过孔大小为0.45μm的膜过滤器过滤，随后，通过孔大小为0.1μm的膜过滤器过滤灭菌。该溶液装入小瓶，每瓶5ml，冻干，随后小瓶封口，产生注射用固体制剂。5ml注射溶剂加到该制剂以再溶解制剂，获得阻滞共聚物-阿霉素复合物的水性溶液。以动态光散射方法确定的该复合物的平均微团直径是35nm。
对比例11000mg的阻滞共聚物(与实施例1相同)，和20mg碳酸氢钠加入20ml注射溶剂中，在60到70℃搅拌溶解，随后，该溶液冷却到室温。200mg盐酸阿霉素搅拌溶解在40ml注射溶剂中。混合两种溶液，其pH用氢氧化钠和盐酸控制在6，随后，总量用注射溶剂控制到100ml。该溶液通过孔大小为0.45μm的膜过滤器过滤，随后，通过孔大小为0.2μm的膜过滤器过滤灭菌。该溶液装入小瓶，每瓶5ml，冻干，随后小瓶封口，产生注射用固体制剂。5ml注射溶剂被加到该制剂以再溶解制剂，获得阻滞共聚物-阿霉素复合物的水性溶液。以动态光散射方法确定的该复合物的平均微团直径是165nm。
测试实施例1(再溶解特性)在实施例1到4中本发明的注射用固体制剂和对比例中的注射用固体制剂储存在40℃达1周，加入5ml注射溶剂以再溶解制剂。比较该操作中再溶解的时间。该测试是按照Sugihara等(M.Sugihara，“Iyakuhin housou no shiyousei to sonohyouka”，138页，Kodansha Ltd.Publishers，1996)的方法进行的。再溶解后的平均微团直径以动态光散射方法测定。结果见表1。在实施例1到4中本发明的注射用固体制剂是稳定的，在加热中溶解性和平均微团直径没有变化。对比例1中不包含糖的制剂在加热中不能再溶解。
测试方法(1)20℃的5ml注射溶剂加入到实施例的小瓶的制剂中和对比例的小瓶中的制剂中。
(2)该混合物以手摇动15秒，振幅40cm，速度每秒2个往复，静置5秒，观察溶解情况。
(3)重复摇动15秒和静置5秒，总的摇动时间用作再溶解时间。
表1
不可溶解；在60秒内没有溶解测试实施例2(稳定性)在实施例1中本发明的注射用固体制剂储存在25℃达6个月，通过外观、剩留比率、再溶解时间和储存后平均微团直径来检测其稳定性。结果见表2。本发明的注射用固体制剂在长期储存后仍稳定，并认为可用于临床。
表2
参考实施例23.32g的一端甲氧基一端氨丙氧基聚乙二醇(CH3(OCH2CH2)nO(CH2)3NH2(分子量约5000)溶解在464ml二甲亚砜(DMSO)，混合物加热到35℃。42.87g的β-苄基-L-天门冬氨酸-N-羧酸酐(BLA-NCA)加入该混合物中反应22小时。反应混合物滴加到3.73升的二异丙基醚(IPE)和0.93升乙醇(EtOH)的混合溶剂中，过滤沉积的沉淀物，用IPE和EtOH(4∶1)的混合溶液和IPE洗涤，随后用真空干燥，获得54.29g的一端甲氧基聚乙二醇-聚(β-苄基-L-天门冬氨酸)共聚物(天门冬氨酸单位数29.0)。
52.85g所得的一端甲氧基聚乙二醇-聚(β-苄基-L-天门冬氨酸)共聚物溶解在529ml的二甲基甲酰胺，溶液加热到35℃。在其中加入2.50ml乙酸酐，反应3小时。反应混合物滴加到4.76升的二异丙基醚(IPE)和0.53升乙醇(EtOH)的混合溶剂中，过滤沉积的沉淀物，用IPE和EtOH(9∶1)的混合溶液和IPE洗涤，随后真空干燥，获得51.67g一端甲氧基聚乙二醇-聚(β-苄基-L-天门冬氨酸)共聚物N-酰化的化合物。
50.19g所得的一端甲氧基聚乙二醇-聚(β-苄基-L-天门冬氨酸)共聚物N-酰化的化合物与753ml乙腈和2.16升的0.2N氢氧化钠溶液反应5小时。反应混合物用2N盐酸中和，随后在减压下浓缩移除乙腈，随后以1.2升醋酸乙酯提取3次。浓缩水性层，随后用HP-20 SS柱(由Mitsubushi Chemical Co.Ltd.制造)和Dowex 50W8柱纯化，进一步，在减压下浓缩，随后冻干。所得的冻干产品溶解在320ml二甲基甲酰胺(DMF)，该溶液滴加入2.56升己烷和0.64升醋酸乙酯的混合溶剂中。过滤沉积的沉淀物，用己烷和醋酸乙酯(4∶1)的混合溶液洗涤，随后真空干燥，获得33.20g一端甲氧基聚乙二醇-天门冬氨酸共聚物N-酰化的化合物。
28.85g所得的一端甲氧基聚乙二醇-聚天门冬氨酸共聚物N-酰化的化合物溶解在577ml的二甲基甲酰胺，溶液加热到35℃。在其中加入19.75g二环己基碳二亚胺(DCC)和11.01g N-羟基琥珀酰亚胺(HoSu)，反应1小时。所得的二环己脲通过棉花塞过滤。所得的过滤物用2.3升醋酸乙酯稀释，随后加入3.5升己烷。过滤沉积的沉淀物，用己烷和醋酸乙酯(3∶1)的混合溶液洗涤，随后在真空干燥，获得33.82g被HoSu酯化作用激活的一端甲氧基聚乙二醇-聚天门冬氨酸共聚物N-酰化的化合物。
33.73g所得的被HoSu酯化作用激活的一端甲氧基聚乙二醇-聚天门冬氨酸共聚物N-酰化的化合物溶解在1.35升的二甲基甲酰胺，混合物加热到35℃。26.13g的盐酸阿霉素以粉剂形式加入，悬浮于反应液中，随后加入8.16ml的三乙胺，反应1小时。反应混合物滴加到4.0升醋酸乙酯和16.0己烷的混合溶剂中，过滤沉积的沉淀物，用己烷和醋酸乙酯(3∶1)的混合溶液洗涤，随后真空干燥。其后，所得的沉淀悬浮于590ml的乙腈中，随后加入1780ml水，混合物搅拌加热到35℃。在确定沉淀溶解后，溶液搅拌1小时，随后在减压下浓缩反应溶液以除去乙腈并冻干。所得的冻干产品被进一步纯化，获得45.39g一端甲氧基聚乙二醇-聚天门冬氨酸共聚物N-酰化的化合物-阿霉素缩合物。在该阻滞共聚物中阿霉素结合部分的比例是约47％。
本发明的效果本发明首次提供了含有临床用于抗癌剂的阿霉素的微团医学制剂的注射用固体制剂，由亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成的阻滞共聚物制成，能长期稳定，显示了极好的再溶解性，有添加剂的安全性，可应用于临床，其生产方法不需要有机溶剂、超声波放射和透析的特殊设备，能以常用的生产方法的组合有效生产，并可进行工业生产。
上述的注射用固体制剂是从由阻滞共聚物和蒽环类抗癌剂组成的阻滞共聚物-蒽环类抗癌剂复合物中得到的一种固体组合物，在使用中，溶解于输注液中产生阻滞共聚物-蒽环类抗癌剂复合物的微团的水性溶液。
权利要求
1.一种用于注射的固体制剂，该制剂包含由亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成的阻滞共聚物，蒽环类抗癌剂，糖和碱。
2.如权利要求1所述的用于注射的固体制剂，其特征在于，蒽环类抗癌剂是阿霉素或其盐，糖是二糖。
3.如权利要求1或2所述的用于注射的固体制剂，其特征在于，糖包括选自蔗糖、海藻糖、麦芽糖和乳糖的一种或多种化合物。
4.如权利要求1到3中任何一项所述的用于注射的固体制剂，其特征在于，碱包括选自碳酸氢钠、磷酸氢二钠、柠檬酸钠和氢氧化钠的一种或多种化合物。
5.如权利要求1到4中任何一项所述的用于注射的固体制剂，其特征在于，阻滞共聚物中亲水聚合物结构部分是聚环氧乙烷衍生物，疏水多氨基酸结构部分是多天门冬氨酸，其侧链结合蒽环类抗癌剂。
6.如权利要求5中所述的用于注射的固体制剂，其特征在于，与疏水多氨基酸结构部分的侧链结合的蒽环类抗癌剂是阿霉素。
7.如权利要求1所述的用于注射的固体制剂，其特征在于，蒽环类抗癌剂的含量是5到100份重量，糖的含量是10到500份重量，碱的含量是0.1到10份重量，基于包含亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成的阻滞共聚物的100份重量。
8.如权利要求1所述的用于注射的固体制剂，其特征在于，所述成分的比例如下包含亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成的阻滞共聚物占10到85份重量；蒽环类抗癌剂1到50份重量；糖占5到80份重量；碱占0.05到5份重量。
9.如权利要求8所述的用于注射的固体制剂，其特征在于，蒽环类抗癌剂是阿霉素或其盐，糖是蔗糖、海藻糖、麦芽糖和乳糖；碱是碳酸氢钠、磷酸氢二钠、柠檬酸钠或氢氧化钠。
10.如权利要求1到9中任何一项所述的用于注射的固体制剂，其特征在于，用于注射的固体制剂是冻干制剂。
11.一种阻滞共聚物微团制剂由亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成，包含蒽环类抗癌剂在疏水内核，通过输注时溶解如权利要求1到10中任何一项所述的用于注射的固体制剂获得。
12.一种pH为4到9的阻滞共聚物微团溶液，包含阻滞共聚物，该阻滞共聚物由被蒽环类抗癌剂结合的亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成，蒽环类抗癌剂，糖和碱。
13.一种生产用于注射的固体制剂的方法，包含在水中溶解由亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成的阻滞共聚物、蒽环类抗癌剂、糖、碱，随后干燥产生固体。
14.如权利要求13所述的生产注射用固体制剂的方法，其特征在于，在水中溶解由亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成的阻滞共聚物，加入碱，并加热混合物。
15.如权利要求14所述的生产注射用固体制剂的方法，其特征在于，加热温度是50到80℃。
16.如权利要求13到15中任何一项所述的生产注射用固体制剂的方法，包括在水中溶解由亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成的阻滞共聚物、蒽环类抗癌剂、糖、碱，随后通过膜过滤器过滤。
17.如权利要求16所述的生产注射用固体制剂的方法，其特征在于，膜过滤器是纤维素基或合成聚合物基的过滤器，其孔大小为0.05到0.5μm。
18.如权利要求12所述的微团溶液，其特征在于，蒽环类抗癌剂是阿霉素或其盐，糖是二糖。
19.如权利要求18所述的微团溶液，其特征在于，二糖包括选自蔗糖、海藻糖、麦芽糖和乳糖的一种或多种化合物。
20.如权利要求12所述的微团溶液，其特征在于，碱包括选自碳酸氢钠、磷酸氢二钠、柠檬酸钠和氢氧化钠的一种或多种化合物。
21.如权利要求12所述的微团溶液，其特征在于，蒽环类抗癌剂是阿霉素或其盐，糖是蔗糖、海藻糖、麦芽糖或乳糖；碱是碳酸氢钠、磷酸氢二钠、柠檬酸钠或氢氧化钠。
22.如权利要求12所述的微团溶液，其特征在于，阻滞共聚物由被蒽环类抗癌剂结合的亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成。
23.如权利要求22所述的微团溶液，其特征在于，阻滞共聚物的亲水聚合物结构部分是聚环氧乙烷衍生物，疏水多氨基酸结构部分是侧链结合蒽环类抗癌剂的多天门冬氨酸。
24.如权利要求22或23所述的微团溶液，其特征在于，结合疏水多氨基酸结构部分侧链的蒽环类抗癌剂是阿霉素。
25.一种用于注射的固体制剂，通过对权利要求18到24中任何一项所述的微团溶液进行干燥获得。
全文摘要
需要一种可临床应用的注射用固体制剂，该制剂包含由亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸部分组成的阻滞共聚物和蒽环类抗癌剂。本发明提供了可临床应用的注射用固体制剂，该制剂包含由亲水聚合物结构部分和疏水多氨基酸结构部分组成的阻滞共聚物、蒽环类抗癌剂、糖和碱。
文档编号A61P35/00GK1658887SQ0381269
公开日2005年8月24日 申请日期2003年6月2日 优先权日2002年6月3日
发明者本山顺 申请人:日本化药株式会社, 独立行政法人科学技术振兴机构, 樱井靖久