专利名称：含有三嗪的生物活性组合物的制作方法
领域发明涉及含有生物活性化合物和三嗪化合物的生物活性组合物。特别，本发明涉及含有药物的药物组合物。
背景生物活性化合物释放到活性有机体，除生物活性化合物实际的化学身份和药理学活性以外，通常还受大量的参数影响。除了生物活性化合物的制剂添加剂通常用于改变具有生物活性功能产物的物理化学性质。作为一个例子，药物剂型(即包含药物或者活性药用成分的剂量)通常包含一种或多种称为赋形剂的非药用活性成分。赋形剂有各式各样的目的，其中仅仅几个例子是调节剂量的实物形态(例如形成片剂、在半固体中调整粘度)，辅助药物增溶或者稳定，或者增强药物在活性有机体中的吸收(例如增加渗透，导向选择的部位)。
发明内容
本发明尤其提供一种包括生物活性化合物和含有如下通式的三嗪化合物和其质子互变异构体和盐的生物活性组合物。
或
每一个R2独立地选自任何给电子基团、吸电子基团和电子中性基团。R3选自取代杂芳族环、未取代的杂芳族环、取代杂环和未取代的杂环，它们通过R3环内的氮原子连接到三嗪基团。
本发明另外的方面包括一种用于增加生物活性化合物在生物活性组合物中溶解性的方法，包括提供生物活性化合物，提供含有如下通式三嗪化合物 或 和其质子互变异构体和盐。所述生物活性化合物、三嗪化合物和溶剂结合形成组合物，特征在于在组合物中溶解的生物活性化合物的量大于在不包含所述三嗪化合物的相同组合物中能溶解的生物活性化合物量。换句话说，所述三嗪可用于增加可以溶解在组合物中生物活性化合物的量。所述三嗪化合物特征在于每一R2独立地选自任何给电子基团、吸电子基团和电子中性基团。R3选自取代杂芳族环、未取代的杂芳族环、取代杂环和未取代的杂环，它们通过R3环内的氮原子连接到三嗪基团。
在又一方面，本发明包括一种用于增加生物活性化合物在生物活性组合物中稳定性的方法，包括提供生物活性化合物，提供含有如下通式三嗪化合物 或 和其质子互变异构体和盐。所述生物活性化合物、三嗪化合物和溶剂结合形成组合物，特征在于在组合物中生物活性化合物的稳定性大于在不包含所述三嗪化合物的相同组合物中生物活性化合物的稳定性。换句话说，所述三嗪化合物可用于稳定所述生物活性化合物。所述三嗪化合物特征在于每一R2独立地选自任何给电子基团、吸电子基团和电子中性基团。R3选自取代杂芳族环、未取代的杂芳族环、取代杂环和未取代的杂环，它们通过R3环内的氮原子连接到三嗪基团。
本发明的这些及其他特征和优点以下结合本发明各种各样的说明性实施方式进行描述。
详细说明本发明提供一种含有生物活性化合物和含有如下通式三嗪化合物和其质子互变异构体和盐的组合物。
或 每一个R2独立地选自任何给电子基团、吸电子基团和电子中性基团。R3选自取代和未取代的杂芳族环，所述的环通过R3环内的氮原子连接到所述三嗪基团。
以上通式I显示出羧基(-COOH)的取向，所述的羧基相对于连结到所述化合物三嗪骨架的氨基处于对位。如通式II所示，所述羧基同样可以相对于所述氨基键处于间位。应该同样理解的是两个位置可以混合，因此一个羧基处于对位，其他羧基处于间位。
每一个R2独立地选自任何给电子基团、吸电子基团和电子中性基团。优选，R2是氢或者取代或者未取代的烷基。更优选，R2是氢、未取代的烷基或者羟基、醚、酯、磺酸酯或者卤化物官能团取代的烷基。最优选R2是氢。
R3可以选自取代杂芳族环、未取代的杂芳族环、取代杂环和未取代的杂环，它们通过R3环内的氮原子连接到三嗪基团。R3可以是但是不局限于，来源于吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、咪唑、噁唑、异噁唑、噻唑、噁二唑、噻二唑、吡唑、三唑、三嗪、喹啉和异喹啉的杂芳族环。优选R3包括来源于吡啶或者咪唑的杂芳族环。所述杂芳族环R3的取代基可以选自但是不局限于以下任何取代和未取代的基团烷基、羧基、氨基、烷氧基、硫基、氰基、酰胺、磺酸酯、羟基、卤化物、全氟烃基、芳基、醚和酯。所述R3的取代基优选选自烷基、磺酸酯、羧基、卤化物、全氟烃基、芳基、醚，和羟基、磺酸酯、羧基、卤化物、全氟烃基、芳基和醚取代的烷基。当R3是取代吡啶时，所述取代基通常位于4-位。当R3是取代咪唑时，所述取代基通常位于3-位。R3适当的例子包括但是不局限于4-(二甲基氨基)马洛芬〔苯基偶氮二氨基吡啶〕-1-基、3-甲基咪唑鎓-1-基、4-(吡咯烷-1-基)马洛芬-1-基、4-异丙基吡啶鎓-1-基、4-[(2-羟乙基)甲基氨基]吡啶鎓-1-基、4-(3-羟丙基)吡啶鎓-1-基、4-甲基吡啶鎓-1-基、喹啉鎓-1-基、4-叔-丁基吡啶鎓-1-基和4-(2-硫代乙基)吡啶鎓-1-基，显示于以下的通式IV到XIII中。R3杂环的例子可以选自包括例如吗啉、吡咯烷、哌啶和哌嗪。
如以下所示，显示于以上通式V的所述R3基团同样可以具有除了连接到所述咪唑环的甲基以外的取代基团， 其中R4是氢或者取代或者未取代的烷基。在有些情况下，R4是氢、未取代的烷基，或者羟基、醚、酯、磺酸酯或者卤化物官能团取代的烷基。例如R4可以是丙磺酸、甲基或者油烯基。
如以上描述，所述通式I的三嗪是中性的，然而本发明的三嗪分子可以离子的形成存在，其中它们包含至少一个形式的正电荷。在一个优选实施方案中，所述三嗪分子可以是两性离子的。诸如此类两性离子三嗪分子的例子，4-{[4-4-羧基苯胺基)-6-(1-吡啶鎓基)-1，3，5-三嗪-2-基]氨基}苯甲酸盐，显示于以下通式III中，其中R3是通过吡啶环的氮原子连接到所述三嗪基团的吡啶环。所述吡啶氮载带正电荷，一个羧基官能团载带负电荷(并具有离解的阳离子比如氢原子)、-COO-。
显示于通式III中的分子同样以其他互变异构形式存在，比如其中两个羧基官能团载带负电荷，其中正电荷由三嗪基团的氮及吡啶基团氮之一携带。
如US 5,948,487(Sahouani等人)描述，通式I的三嗪衍生物可以制备为水溶液，或者可以制备为盐，随后再溶解以形成水溶液。显示于以上I中的三嗪分子的一个典型合成路线涉及两步方法。氰尿酰氯用4-氨基苯甲酸处理得到4-{[4-(4-羧基苯胺基)-6-氯代-1，3，5-三嗪-2-基]氨基}苯甲酸。该中间体用取代或者未取代的含氮杂环处理。所述杂环的氮原子经历亲核置换三嗪的氯原子以形成对应的氯化物盐。比如显示于以上通式III的两性离子衍生物通过如下制备将氯化物盐溶解在氢氧化铵中，并向下通过阴离子交换柱以用氢氧化物置换氯化物，随后去除溶剂。比如显示于以上II中的替换结构可以通过使用3-氨基苯甲酸而不是4-氨基苯甲酸得到。
在一个实施方式中，所述三嗪包含至少一个形式的正电荷。所述三嗪同样可以是两性离子的，亦即载带至少一个形式的正的及一个形式的负电荷。本发明两性离子的三嗪通过具有离解氢原子的羧基载带至少一个负电荷，-COO-。所述负电荷可以在存在的多个羧基官能团之内共享，因此三嗪适当的代表由两个或多个共振结构组成。做为选择，所述负或者部分负电荷可以通过三嗪中的其他酸敏感基团携带。
在一个方面，三嗪可用于形成chromonic〔相对平坦分子形成线型聚集体〕相或者当在水溶液中时进行组装。chromonic相或者组装体是众所周知的(见，例如Handbook of Liquid Crystals，Volume 2B，Chapter XVIII，Chromonics，John Lydon，pp.981-1007，1998)及由平面、多环芳香分子的叠层组成。所述分子通常由亲水基包围的疏水核组成。所述叠层形成许多形态，但是通常特征在于倾向形成由大量层构造的柱。形成有序的分子叠层，随着浓度增加生长，但是它们与胶束相不同，因为它们通常不具有类似表面活性剂的特性，而且不显示临界的胶束浓度。通常，Chromonic相显示均型键性能，亦即分子结合到有序的叠层导致自由能单调减少。在一些实施方式中，所述三嗪在水溶液中形成Chromonic M或者N相。所述Chromonic M相通常特征在于以六角点阵排列的分子有序的叠层。所述Chromonic N相特征在于向列排列的柱，亦即沿着向列相特征的柱长程有序，但是在所述柱中间几乎没有或者没有次顺，因此比M相不太有序。所述Chromonic N相通常显示异离体组构，特征在于在透明介质中不同折射率的区域。
尽管不希望被任何具体的理论束缚，但相信有序的Chromonic相，通过在有序的叠层之内提供位置，可以促进增加生物活性化合物的溶解性，在所述的叠层中所述生物活性化合物可以驻留，它们与本体溶剂比如水相几乎没有相互作用，所述生物活性化合物具有更低的溶解性。同样的，所述Chromonic有序相可以从所述溶剂中分离所述生物活性化合物，及可能彼此分离，因为所述生物活性化合物可以在分子规模上交插或者插入在三嗪分子之间。因此，在组合物其他化学成分例如本体溶剂、其他赋形剂及低含量杂质存在下不稳定的生物活性化合物可以通过Chromonic相进行保护避免降解。在其他剂型物理或者包装组件，例如注射器或者小瓶的壁、计量剂量吸气管罐存在下不稳定的生物活性化合物可以通过Chromonic相进行保护避免降解。
在一些实施方式中，本发明的组合物可以包括表面活性剂。适当的表面活性剂包括例如长链饱和脂肪酸或者醇，及单或者多不饱和脂肪酸或者醇。油烯基膦酸是一个优选的表面活性剂。尽管不希望被任何具体的理论束缚，但人们认为表面活性剂有助于分散生物活性化合物。
本发明的一些组合物可以包括碱性的化合物。适当的碱性化合物的例子包括乙醇胺、氢氧化钠或者氢氧化锂，或者胺比如单、二、三胺或者多胺。再一次，尽管不希望被任何具体的理论束缚，人们认为碱性的化合物有助于溶解三嗪化合物。
如本发明使用的生物活性化合物定义为意欲用于诊断、治疗、减轻、处置或者预防疾病的化合物，或者定义为可以影响活性有机体组织或者功能的化合物。生物活性化合物的例子包括药物、除草剂、杀虫剂、信息素及抗真菌剂。药物(即药用活性成分)是特别重要的生物活性化合物。做为选择，除草剂及杀虫剂是意欲对活性有机体比如植物或者有害物具有负效应的生物活性化合物的例子。尽管任何类型的药物可以用于本发明的组合物，但特别重要的是药物，当配制为溶液、悬浮液或者半固体剂型时相对不稳定的药物，及在常规的载体中溶解性差的那些药物。适当的药物例子包括消炎的药物，甾族的(例如氢化可的松、脱氢皮醇、去炎松)及非甾族的(例如甲氧萘丙酸、吡罗昔康)；系统抗菌剂(例如红霉素、四环素、庆大霉素、磺胺噻唑、硝基呋喃妥英、万古霉素、青霉素比如苯氧甲基青霉素、头孢菌素比如先锋霉素IV、及2-羟基喹啉比如氟哌酸、氟甲喹、环丙沙星及依巴沙星)；抗原虫药(例如2-甲基-5-硝基-1-咪唑基-乙醇)；杀真菌(例如制霉菌素)；冠状血管扩张剂；钙通道阻滞药(例如心痛定、地尔硫卓)；支气管扩张药(例如茶碱、吡布特罗、沙美特罗、异丙基肾上腺素)；酶抑制剂比如胶原酶抑止剂、蛋白酶抑制剂、胰肽酶E抑止剂、脂氧化酶抑止剂及血管紧张肽转化酶抑止剂(例如甲巯丙脯酸、赖诺普利)；其他抗高血压药(例如萘异丙促胺)；白细胞三烯拮抗剂；抗溃疡药比如H2拮抗药；甾族的激素(例如黄体酮、睾丸激素、强力求偶素)；局部麻醉剂(例如利度卡因盐酸盐、对氨基苯甲酸乙酯、异丙酚)；强心剂(例如洋地黄、异羟洋地黄毒甙)；止咳药(例如可待因、美沙芬)；抗组胺剂(例如可他敏、扑尔敏、特非那定)；免疫反应改性剂(例如咪喹莫特、瑞喹莫德)；麻醉止痛剂(例如咖啡、芬太奴)；肽类激素(例如人或者动物生长激素、促黄体素释放激素)；作用于心脏的产品比如心房肽；蛋白质产品(例如胰岛素制剂)；酶(例如抗斑块酶、溶菌酶、葡聚糖酶)；止恶心药；抗惊厥剂(例如乙胺嗪)；免疫抑制剂(例如环孢霉素A)；精神疗法药(例如地西泮)；镇静剂(例如苯巴比妥)；抗凝血剂(例如肝素)；止痛剂(例如扑热息痛)；抗偏头痛药(例如麦角胺、5-甲氧基-N-乙酰-色胺、舒马曲坦)；抗心律失常药(例如氟卡胺)；止吐剂(例如metaclopromide、奥坦西隆)；抗癌剂(例如氨甲喋呤)；神经病试剂比如抗镇静剂(例如氟苯氧丙胺)及抗焦虑药(例如氟苯哌苯醚)；止血剂；等等及其药用可接受的盐及酯。
作为是单克隆抗体的蛋及缩氨酸特别适合用于本发明的组合物。在水溶液中溶解性差的药物或者在含水环境中降解的药物特别适用于本发明的组合物。在适当考虑特定药物、特定载体、特定剂量方式及希望的治疗效果的情况下，本领域的普通技术人员很容易确定构成治疗有效量的药物量。
药物与所述三嗪化合物的重量比通常大于约1∶1000，通常大于约1∶100，通常大于约1∶20，有时大于约1∶10。药物与所述三嗪化合物的重量比通常小于约10∶1，通常小于约1.5∶1，通常小于约1∶1，及有时小于约1∶2。
所述三嗪化合物通常本身是非治疗性的。所述三嗪化合物可以改变剂型及影响，例如以生物利用形式输送到活性有机体某部位的药物量，这显然影响所述药物的治疗活性。尽管这种对治疗活性的影响是本发明中所述三嗪化合物作用的直接结果，但通常优选所述三嗪化合物本身一旦与所述药物分离是非治疗的。因此，就非治疗来说意思是当将所述三嗪化合物以分离出来分子形式输送到有机体，例如动物中时没有明显的治疗活性。所述三嗪化合物通常很大程度上与有机体生物学相互作用呈惰性，因此仅作为药物的载体。所述三嗪化合物优选是非毒性的、非致突变的及非刺激的。
本发明组合物在各种各样的给药途径中获得应用，包括口服，比如小片、胶囊、液体溶液及糖浆；通过静脉内、肌肉内或者腹膜内注射，比如含水的或者油的溶液或者悬浮液；通过皮下注射；或者通过结合进入经皮肤、局部或者粘膜的剂型，比如乳膏、凝胶、粘性补片、栓剂及鼻喷入法。本发明的组合物同样可以植入或者注入各种各样的内脏器官及组织，例如癌的肿块，或者可以直接施加到内部体腔，比如在手术过程期间。本发明的组合物同样可以适于吸入剂型，比如增压计量剂量的吸气管，例如描述在US 5,836,299(Kwon等人)的那些，其所述公开以参考方式引入；及喷雾器，例如描述在US 6,338,443(Piper等人)的那些，其所述公开以参考方式引入。在本发明一种类型的实施方式中，液体或者半固体组合物可以包含在口服释放胶囊之内，所述的胶囊设计成能在胃肠道内特定位置处释放所述组合物。在另外类型实施方式中，本发明的组合物可以是非连续相的油包水乳剂。
本发明的组合物可以任选包括除所述生物活性化合物及三嗪化合物之外的一种或多种其他成分，比如引发剂、填充剂、增塑剂、交联剂、增粘剂、粘结剂、抗氧化剂、稳定剂、表面活性剂、增溶剂、缓冲剂、渗透改进剂、粘合剂、粘度增强剂、着色剂、增香剂及其混合物。同样可以使用生物活性化合物的组合物。
在另外的方面，本发明包括一种制备生物活性组合物的方法，包括提供生物活性化合物及提供包括通式I或者II分子的三嗪化合物及其质子互变异构体及盐。其中每一个R2独立地选自任何给电子基团、吸电子基团及电子中性基团，R3选自取代及未取代的杂芳族环，所述的杂芳族环通过R3环内的氮原子连接到所述三嗪基团上。所述生物活性化合物、三嗪化合物及溶剂结合以形成生物活性组合物。所述溶剂是能够溶解或者分散所述生物活性化合物及三嗪化合物的液体或者半固体。所述溶剂可以留存在最后的剂型中。在药用组合物中，例如药用可接受的赋形剂比如水、乙醇、丙二醇或者1，1，1，2-四氟乙烷留存在最后的剂型中。做为选择，溶剂可以用于处理加工目的，在最后的剂型制备之前除去溶剂。加工溶剂可以通过本领域的普通技术人员熟知的任何方法除去，包括例如蒸馏、溶剂反萃取、空气穿透干燥、风干、蒸发和/或真空干燥。典型加工溶剂包括例如甲醇、乙酸乙酯、庚烷、己烷及丙酮。适用于最后剂型中的溶剂比如水同样可以用作加工溶剂。
本发明的组合物可以通过混合三嗪与生物活性化合物制备。例如，所述三嗪可以溶解在水溶液中，所述生物活性化合物加入到三嗪溶液中。希望制备一种三嗪及生物活性化合物的浓缩备用液，所述的备用液随后稀释以制备最后的剂型。同样，另外的成分可以加入到所述初始三嗪溶液或者加入到得到的三嗪及生物活性混合物中。在一个优选实施方案中，所述三嗪溶液显示Chromonic M或者N相。该Chromonic溶液可以是中等或者高度粘性的。包含15wt％三嗪的Chromonic溶液的典型溶液粘度在室温下为约100-约700厘泊，更优选在室温下为约200-400厘泊。也许希望加热一种或多种中间体溶液以有助于最后剂型的一种或多种成分的溶解或者混合。
在另外的例子中，所述生物活性化合物可以溶解在水溶液中，所述三嗪加入到生物活性化合物溶液中。
在本发明一个方面，本发明可以用作一种增加生物活性化合物在生物活性组合物中溶解性的方法，包括提供生物活性化合物，及提供包括通式I或者II分子的三嗪化合物，及其质子互变异构体及盐，其中每一个R2独立地选自任何给电子基团、吸电子基团及电子中性基团，R3选自取代及未取代的杂芳族环，所述的杂芳族环通过R3环内的氮原子连接到所述三嗪基团上。所述生物活性化合物、三嗪化合物和溶剂结合形成组合物，特征在于在组合物中溶解的生物活性化合物的量大于在不包含所述三嗪化合物的相同组合物中溶解的生物活性化合物量。能溶解在使用三嗪化合物组合物中的生物活性化合物的量与能溶解在相同但不包含三嗪化合物组合物中的生物活性化合物量的比例大于约1.5∶1，在有些情况下大于2∶1。在一些实施方式中，能溶解在使用三嗪化合物组合物中的生物活性化合物的量与能溶解在相同但不包含三嗪化合物组合物中的生物活性化合物量的比例大于约100∶1。
在另外的方面，本发明包括一种增加生物活性化合物在生物活性组合物中稳定性的方法，包括提供生物活性化合物及通式I或者II分子的三嗪化合物，及质子互变异构体及盐其，其中每一个R2独立地选自任何给电子基团、吸电子基团及电子中性基团，R3选自取代及未取代的杂芳族环，所述的杂芳族环通过R3环内的氮原子连接到所述三嗪基团上。所述生物活性化合物、三嗪化合物和溶剂结合形成组合物，特征在于在组合物中生物活性化合物的稳定性大于在不包含所述三嗪化合物的相同组合物中生物活性化合物的稳定性。稳定性受储藏条件比如温度、相对湿度(RH)等等的影响。本发明生物活性组合物的稳定性通常是增加的，并在典型储藏条件比如25℃/60％RH及40℃/75％RH下进行测量。
稳定性通常特征在于测量所述组合物中生物活性化合物量作为时间函数的减少，其中生物活性化合物的初始量被认为是100％含量。例如，生物活性化合物初始量的95％的测量结果相当于生物活性化合物初始量5％的减少。使用或者包括本发明方法及组合物的剂型特征在于随着时间的推移生物活性化合物量的减少小于随着时间的推移在相同但不包含三嗪化合物剂型中生物活性化合物量的减少。在从4周到3年包括例如1月、3月、6月、1年及2年的时间中通常观察到生物活性化合物量的减少变小。随着时间的推移生物活性化合物量的减少与类似的不包含三嗪化合物的剂型，随着时间的推移生物活性化合物量的减少相比，优选小于约3∶4，更优选小于约1∶2，最优选小于约1∶4。所述剂型可以包括一种以上的生物活性化合物，例如两种生理活性物质比如恩纳普利及非洛地平的组合物，及在一种或者两种所述生物活性化合物中发现诸如此类剂型稳定性的改进。
在另外的方面，本发明包括一种给药的方法，包括提供生物活性组合物，所述的组合物包括药物及含通式I或者II分子的三嗪化合物，及其质子互变异构体及盐，其中每一个R2独立地选自任何给电子基团、吸电子基团及电子中性基团，R3选自取代及未取代的杂芳族环，所述的杂芳族环通过R3环内的氮原子连接到所述三嗪基团上。所述生物活性组合物释放到有机体，并保持与有机体一部分接触一段足够时间以提供得自于释放药物的治疗效果。所述生物活性组合物可以释放给一种动物例如口服、静脉内、皮下、瘤内或者肌肉注射，口或者鼻吸入，或者任何其他本领域熟知适当的给药方法。
实施例实施例1-4在包含三嗪化合物基础溶液中咪喹莫特溶解性通过如下确定。通过将大约1g 1-[4，6-双(4-羧基苯胺基)-1，3，5-三嗪-2-基]-4-(二甲基氨基)氯化吡啶鎓加入到9g包含摩尔等量平衡离子碱的蒸馏水中制备溶液。溶液加热到70℃，过量的咪喹莫特(大约0.1g)加入到所述溶液，并搅拌大约14小时。然后溶液放置冷却到室温至少5小时，之后通过5.0μm滤纸过滤除去不溶解的固体。这些溶液的pH为9-10。然后通过HPLC确定眯喹莫特浓度，此刻通过0.45μm滤纸进一步过滤溶液。制备溶液中三嗪化合物的浓度、平衡离子碱类型及测量的咪喹莫特溶解性显示于以下表1中。pH为6.05而且不包含三嗪化合物的缓冲溶液中咪喹莫特溶解度为0.02mg/mL。pH为7.82而且不包含三嗪化合物的缓冲溶液中咪喹莫特溶解度为0.0012mg/mL。
实施例5-9通过如下确定包含三嗪化合物溶液中昔罗卡因的溶解度。通过使1-[4，6-双(4-羧基苯胺基)-1，3，5-三嗪-2-基]-4-(二甲基氨基)氯化吡啶鎓(6.0027g)、乙醇胺(1.35g)及蒸馏水(18.00g)混合制备备用液。搅拌该溶液直到固体溶解得到含20％w/w三嗪化合物的溶液。通过从备用液中移出等分试样并用蒸馏水稀释等分试样以达到每一三嗪浓度从而制备具有不同三嗪浓度的溶液(显示于表2)。过量(至少3-倍)的昔罗卡因加入到每一溶液中，在环境温度下震荡至少24小时。
通过0.45μm滤纸过滤溶液除去不溶解的固体，然后通过HPLC分析昔罗卡因浓度。所述制备溶液中三嗪化合物的浓度及测量的昔罗卡因溶解度显示于以下表2中。
实施例10-14通过如下确定包含三嗪化合物溶液中昔罗卡因的溶解度。通过使1-[4，6-双(4-羧基苯胺基)-1，3，5-三嗪-2-基]-4-(二甲基氨基)氯化吡啶鎓(4.02169g)、乙醇胺(0.8898g)及蒸馏水(12.0019g)混合制备备用液。搅拌该溶液直到固体溶解得到含20％w/w三嗪化合物的溶液。通过从备用液中移出等分试样并用蒸馏水稀释等分试样以达到希望的三嗪浓度从而制备具有不同三嗪浓度的溶液(显示于表3)。过量的阿伦膦酸盐加入到每一溶液中并在环境温度下震荡至少24小时。
通过0.45μm滤纸过滤溶液以除去不溶解的固体，然后通过毛细管电泳分析阿伦膦酸盐浓度(仪表Agilent technologies的G1600AX3DCE system；毛细管30厘米×50μ内径熔融石英；缓冲液20mM的2，4-吡啶二羧酸+200μg/ml聚凝胺逆流试剂，pH为12；电势-20kV；实验时间15分钟；检测器UV，350纳米，230纳米的参考)。三嗪化合物的浓度及测量的阿伦膦酸盐溶解度显示于以下表3中。通过将过量阿伦膦酸盐加入到蒸馏水中，振荡24小时、过滤并通过如上毛细管电泳分析确定蒸馏水中阿伦膦酸盐的溶解度。蒸馏水中阿伦膦酸盐的溶解度为3.1％[w/w]。
本发明已经参考其几种实施方式进行了描述。从此可以理解仅为了清楚的理解提供上述的详细说明及实施例，而不是必要的限制。对于本领域的普通技术人员显而易见的是在不背离本发明精神及范围的前提下，描述的实施方式具有许多的变化。因此，本发明的范围不应该被限制于本发明描述的组合物及结构的准确的细节，而是通过下述的权利要求的术语限定。
权利要求
1.一种生物活性组合物，包括生物活性化合物，和包含如下三嗪化合物及其质子互变异构体及盐 或 其中每一个R2独立地选自任何给电子基团、吸电子基团及电子中性基团，和R3选自取代杂芳族环、未取代杂芳族环、取代杂环及未取代杂环，它们通过R3环内的氮原子连接到所述三嗪基团上。
2.根据权利要求1的生物活性组合物，其中每一个R2独立地选自氢、未取代烷基、或者用羟基、醚、酯、磺酸酯或卤化物官能团取代的烷基。
3.根据权利要求1的生物活性组合物，其中R3包括来源于吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、咪唑、噁唑、异噁唑、噻唑、噁二唑、噻二唑、吡唑、三唑、三嗪、喹啉及异喹啉的杂芳族环。
4.根据权利要求3的生物活性组合物，其中R3包括来源于吡啶或者咪唑的杂芳族环。
5.根据权利要求4的生物活性组合物，其中R3选自吡啶鎓-1-基、4-(二甲基氨基)苯基偶氮二氨基吡啶-1-基、3-甲基咪唑鎓-1-基、4-(吡咯烷-1-基)苯基偶氮二氨基吡啶-1-基、4-异丙基吡啶鎓-1-基、4-[(2-羟乙基)甲基氨基]吡啶鎓-1-基、4-(3-羟丙基)吡啶鎓-1-基、4-甲基吡啶鎓-1-基、喹啉鎓-1-基、4-叔-丁基吡啶鎓-1-基，及4-(2-硫代乙基)吡啶鎓-1-基。
6.根据权利要求1的生物活性组合物，进一步包括水。
7.根据权利要求6的生物活性组合物，其中所述生物活性化合物、三嗪化合物及水基本上均一分散。
8.根据权利要求7的生物活性组合物，基本上不包含不溶解的生物活性化合物。
9.根据权利要求1的生物活性组合物，其中所述生物活性化合物是药物。
10.根据权利要求1的生物活性组合物，其中三嗪化合物是两性离子的。
11.根据权利要求6的生物活性组合物，包括Chromonic M或者N相。
12.根据权利要求1的生物活性组合物，其中所述三嗪化合物包括如下通式的化合物及其质子互变异构体及盐
13.根据权利要求12的生物活性组合物，其中每一个R2独立地选自氢、未取代烷基、或者用羟基、醚、酯、磺酸酯或者卤化物官能团取代的烷基。
14.根据权利要求12的生物活性组合物，其中R3包括选自吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、咪唑、噁唑、异噁唑、噻唑、噁二唑、噻二唑、吡唑、三唑、三嗪、喹啉及异喹啉的杂芳族环。
15.根据权利要求14的生物活性组合物，其中R3包括来源于吡啶或者咪唑的杂芳族环。
16.根据权利要求15的生物活性组合物，其中R3选自吡啶鎓-1-基、4-(二甲基氨基)苯基偶氮二氨基吡啶-1-基、3-甲基咪唑鎓-1-基、4-(吡咯烷-1-基)苯基偶氮二氨基吡啶-1-基、4-异丙基吡啶鎓-1-基、4-[(2-羟乙基)甲基氨基]吡啶鎓-1-基、4-(3-羟丙基)吡啶鎓-1-基、4-甲基吡啶鎓-1-基、喹啉鎓-1-基、4-叔-丁基吡啶鎓-1-基及4-(2-硫代乙基)吡啶鎓-1-基。
17.一种制备生物活性组合物的方法，包括(a)提供生物活性化合物；(b)提供包括如下通式的三嗪化合物及其质子互变异构体及盐； 或 其中每一个R2独立地选自任何给电子基团、吸电子基团及电子中性基团，和R3选自取代杂芳族环、未取代杂芳族环、取代杂环及未取代杂环，它们通过R3环内的氮原子连接到所述三嗪基团上；及(c)所述生物活性化合物、三嗪化合物及溶剂结合形成生物活性组合物。
18.根据权利要求17制备生物活性组合物的方法，其中所述溶剂包括水。
19.根据权利要求18的制备生物活性组合物的方法，其中三嗪溶解在水溶液中，之后与生物活性化合物混合。
20.根据权利要求19的制备生物活性组合物的方法，其中三嗪水溶液显示为Chromonic M或N相。
21.根据权利要求20的制备生物活性组合物的方法，其中所述生物活性化合物是药物。
22.一种增加生物活性化合物在生物活性组合物中溶解度的方法，包括(a)提供生物活性化合物；(b)提供包括如下通式的三嗪化合物及其质子互变异构体及盐； 或 其中每一个R2独立地选自任何给电子基团、吸电子基团及电子中性基团，和R3选自取代杂芳族环、未取代杂芳族环、取代杂环及未取代杂环，它们通过R3环内的氮原子连接到所述三嗪基团上；及(c)所述生物活性化合物、三嗪化合物和溶剂混合形成组合物，特征在于在组合物中溶解的生物活性化合物的量大于在不包含所述三嗪化合物的相同组合物中可溶解的生物活性化合物的量。
23.根据权利要求22的增加生物活性化合物在生物活性组合物中溶解度的方法，其中在所述剂型中能溶解的生物活性化合物的量与在相同但不包含所述三嗪化合物组合物中可溶解的生物活性化合物的量的比例大于2∶1。
24.一种增加生物活性化合物在生物活性组合物中稳定性的方法，包括(a)提供生物活性化合物；(b)提供包括如下通式的三嗪化合物及其质子互变异构体及盐； 或 其中每一个R2独立地选自任何给电子基团、吸电子基团及电子中性基团，和R3选自取代杂芳族环、未取代杂芳族环、取代杂环及未取代杂环，它们通过R3环内的氮原子连接到所述三嗪基团上；及(c)所述生物活性化合物、三嗪化合物和溶剂混合形成组合物，特征在于在组合物中生物活性化合物的稳定性大于在不包含所述三嗪化合物的相同组合物中生物活性化合物的稳定性。
25.根据权利要求24的增加生物活性化合物在生物活性组合物中稳定性的方法，其中在所述组合物中所述生物活性化合物的稳定性特征在于随着时间的推移，生物活性化合物的量减少，随着时间的推移，生物活性化合物的量的减少小于在相同但不包含三嗪化合物组合物中随着时间的推移生物活性化合物量的减少。
26.根据权利要求25的增加生物活性化合物在生物活性组合物中稳定性的方法，其中在25℃/60％RH条件下存储3个月之后，测量随着时间的推移在所述组合物中生物活性化合物量的减少。
27.根据权利要求25的增加生物活性化合物在生物活性组合物中稳定性的方法，其中在40℃/75％RH条件下存储3个月之后，测量随着时间的推移在所述组合物中生物活性化合物量的减少。
28.一种给药方法，包括(a)提供权利要求9的生物活性组合物；(b)将生物活性组合物释放到有机体；及(c)使生物活性组合物与有机体的一部分保持接触一段足够的时间以提供得自于释放活性剂的治疗效果。
29.根据权利要求28的给药方法，其中所述生物活性组合物口服释放给动物。
30.根据权利要求28的给药方法，其中生物活性组合物通过静脉内或者肌肉注射释放给动物。
31.一种生物活性组合物，包括一种生物活性化合物，及含有如下通式的三嗪化合物及其质子互变异构体及盐； 其中每一个R2独立地选自任何给电子基团、吸电子基团及电子中性基团，和R3选自取代杂芳族环、未取代杂芳族环、取代杂环及未取代杂环，它们通过R3环内的氮原子连接到所述三嗪基团上。
全文摘要
一种生物活性组合物，包括生物活性化合物，及包括如通式(I)或(II)的三嗪化合物及质子互变异构体及盐，其中每一个R
文档编号A61K9/00GK1832725SQ200480022462
公开日2006年9月13日 申请日期2004年7月29日 优先权日2003年7月31日
发明者哈桑·萨霍阿尼, 罗伯特·A·谢勒, 牟汉纳德·朱马, 伊西德罗·安杰洛·埃利埃泽·萨拉加, 基姆·M·沃格尔, 丹尼斯·E·沃格尔, 邹伟 申请人:3M创新有限公司