专利名称：含有阿利吉仑、氢氯噻嗪和叶酸的药物组合物及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种含有阿利吉仑、氢氯噻嗪和叶酸的药物组合物，以及该药物组合物在制 备用于预防、治疗或延缓高血压以及高血压引起的靶器官损害的药物中的用途，本发明还涉 及该药物组合物在制备用于降低高血压引起的心脑血管事件危险性的药物中的用途。属于药 学领域。
背景技术：
作为危害人们健康的常见病之一，原发性高血压是引起严重的心脑血管疾病如心肌梗塞、 脑卒中、以及肾脏疾病等的主要原因。治疗高血压的主要目的是最大限度地降低心血管病的 死亡和病残的总危险，药物降低血压可以有效地降低心血管并发症的发病率和死亡率，防止 脑卒中、冠心病、心力衰竭和肾脏疾病的发生和发展。WHO和我国高血压治疗指南推荐的一 线抗高血压药物分别是利尿剂、e-肾上腺素受体拮抗剂、钙拮抗剂、血管紧张素转换酶抑
制剂、血管紧张素n受体拮抗剂，或者由上述药物组成的固定剂量的复方降压制剂。多数高 血压患者需要两种或两种以上的抗高血压药物来达到控制血压目标，两种药物可单独处方或 为固定剂量的复方制剂。国际大规模临床试验证明合并用药有其需要和价值，每种药物的剂 量不大，药物的治疗作用应有协同或至少相加作用，其不良作用可以相互抵消或至少不重叠 或相加。
在美国高血压预防、检测、评估和治疗全国联合委员会第七次报告(JNC-7)、欧洲心脏 学会/欧洲高血压学会(ESC/ESH)及中国的高血压指南推荐的高血压联合用药中，半数以上 的联合用药配伍中使用了利尿剂，其中主要是噻嗪类利尿剂氢氯噻嗪(Hydrochlorothiazide)。 已经上市的有喹那普利/氢氯噻嗪、莫西普利/氢氯噻嗪、奥美沙坦/氢氯噻嗪、厄贝沙坦/氢氯 噻嗪、替米沙坦/氢氯噻嗪、美托洛尔/氢氯噻嗪等。除此之外，2008年1月美国FDA批准了 诺华的阿利吉仑/氢氯噻嗪复方药物，用于治疗高血压。
半个世纪以来，人们对利尿剂的使用较为波折。自50年代起，利尿剂就作为常见的抗高 血压药应用于临床。1978年噻嗪类利尿剂即被世界卫生组织列为一线降压药，常单独应用于 治疗轻、中度高血压。但临床应用发现，长期使用噻嗪类利尿剂可引起低血钠、低血钾和低 血氯，约30%发生糖耐量异常。另外由于抑制碳酸酐酶，减少Pf分泌使NH3排出减少，引起 血氨升高。氢氯噻嗪长期使用可影响脂肪酶的活性，使甘油三脂分解代谢减少，甘油三脂升 高，而导致脂肪代谢紊乱，或引起轻度胆固醇增加。因此，随着钙离子拮抗剂、血管紧张素 转化酶抑制剂等新型抗高血压药的出现，利尿剂临床使用量显著减少。然而近十年来，人们重新发现以小剂量利尿剂作为基础降压药物，能显著降低老年高血 压患者的心血管疾病的患病率和死亡率；小剂量利尿剂同以前的剂量相比，降压效果相似而 不良反应减少；利尿剂引起的有效血容量的减少是对高血压必要的治疗，可能是其他降压药
物治疗的基础；于是又开始重视利尿剂的使用。并且认为利尿剂和e-受体拮抗剂是目前唯一
明确的能够显著降低心血管疾病(尤其对老年患者)患病率和致死率的药物。如果无使用禁 忌证，无使用其他降压药物的强烈指征，应首选这两类药物。
2005年欧洲心脏病学学会(ESC)学术大会公布ASCOT (Anglo-Scandinavian Cardioc Outcomes Trial)的结果，ASCOT的研究对象为19257例高血压(未治疗者血压》 160/lOOmmHg;己接受治疗者血压》140/90mmHg)患者，至少有其他3个或以上的心血管危 险因素，而无明确诊断的冠心病，ASCOT可作为针对临床上常见的心血管中度危险高血压患 者心血管一级预防的研究，主要终点为非致命性心肌梗死(MI)或致命性冠心病(CHD)。 结果与阿替洛尔或联用利尿剂(e-受体阻断剂和噻嗪类利尿剂配伍)对比，氨氯地平(或 联用培哚普利)组总死亡率下降11% (P=0.0247);同时，新药组的心血管死亡减少24% (P =0.001)，脑卒中减少23% (P = 0.0003)，冠心病事件减少16% (PO.Ol)，新发生糖尿病减 少30% (P<0.01)。因此，具有心血管疾病中度危险的高血压患者采用以钙拮抗剂(CCB)为 基础必要时加用血管紧张素转换酶抑制剂的治疗方案，其疗效优于以阿替洛尔为基础或加用 噻嗪类利尿剂的疗效，这一优势尤其在患者治疗早期达标时最为显著。可见，P-受体阻断剂 联用噻嗪类利尿剂不再是所有高血压患者的一线治疗药物。
ASCOT研究引起人们重新审视利尿剂在高血压治疗中的地位，使用噻嗪类利尿剂的利弊 都十分突出。美国高血压防治指南JNC-7中，强化了噻嗪类利尿剂作为抗高血压一线治疗药 物的重要地位，在6项强适应症中有4项(心力衰竭、冠心病高危、糖尿病和预防脑卒中复 发)列有噻嗪类利尿剂；并且从成本一效益角度分析，噻嗪类利尿剂列为最值得选择的抗高 血压药物。同时噻嗪类利尿剂的不良反应多也是被人们所公认的。
肾素抑制剂(renin inhibitor, RI)被认为是一类新的抗高血压药物。自1898年Tigerstedt 和Bergmann首次证实肾素的作用以来，肾素一血管紧张素系统(Ras)已得到了广泛研究， 肾素为RAS链中一级频率限制酶，仅对底物血管紧张素原(AngG)有显著的特异性，其主 要作用为控制血压(BP)和血容量，生理功能为分裂AngGN端释放10肽氨酸一血管紧张 素I (Angl)，再经血管紧张素转换酶(ACE)作用而生成血管紧张素II(AngII)ScottBB， et al. Development of inhibitors of the aspartyl protease renin for the treatment of hypertension[J]. Curr Protein Pept Sci. 2006, 7: 241 254。肾素抑制剂与ACEI或ARBs的主 要生化差别为前者显著抑制肾素活性而不改变Ang G表达，使Ang I和AngII均明显减少。
4肾素抑制剂的不足之处是生物利用度低。阿利吉仑(Aliskiren， SPP100)是第一种用于抗高 血压口服的非肽类低分子量肾素抑制剂，能有效降低血压和治疗相关心血管疾病。阿利吉仑 与内源性肾素竞争性地紧密结合，作用机制主要为阿利吉仑呈剂量依赖性地降低肾素活性， 阻止AngI和AngII的生成，不会引起血管紧张肽原水平的增高；降低血浆和尿中的醛固酮 水平；促进尿钠排泄，而尿钾排泄不变。阿利吉仑在治疗高血压及其相关疾病中还存在不足 之处，阿利吉仑单用治疗会刺激一种代偿性反射，部分抵消血压降低，从而阻碍血压降低到 理想值。阿利吉仑最常见的不良反应为乏力、胃肠道反应或头痛。阿利吉仑对靶器官保护方 面的疗效也有待提高。
美国FDA己经批准了诺华公司的阿利吉仑/氢氯噻嗪复方药物(TekturnaHCT)，用于治 疗高血压。研究数据显示，阿利吉仑与氢氯噻嗪结合使用较单独使用其中任一种药物降压具 有显著的相加作用。美国批准Tektuma HCT上市是基于2 700例患者接受阿利吉仑+氢氯噻 嗪治疗的临床研究结果。但到目前为止，还不知道阿利吉仑/氢氯噻嗪复方药物对靶器官的疗 效以及长期使用带来的副作用。
由于治疗高血压病人的主要目的是最大限度地降低心血管病的死亡和病残的总危险，因 此，开发一种可以增强阿利吉仑+氢氯噻嗪对心脑血管保护作用，降低靶器官的损害的复方 药物对于心血管疾病的治疗具有重大的临床意义。
发明内容
本发明的目的是克服阿利吉仑/氢氯噻嗪复方降压药存在的上述不足，提供一种在靶器官 保护和降低心脑血管事件危险性方面优于阿利吉仑/氢氯噻嗪复方降压药，而副作用不增加的 药物组合物。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案
一种药物组合物，包括
(1) 药用剂量的阿利吉仑；
(2) 药用剂量的氢氯噻嗪；
(3) 药用剂量的叶酸；及
(4) 药剂学上可接受的载体。
上述药用剂量的阿利吉仑，含量为100 600mg，优选150 300mg;所述药用剂量的氢氯 噻嗪，含量为12.5 25mg;所述药用剂量的叶酸，含量为0.2 1.6mg，优选0.4 1.0mg。
我们运用本发明提供的药物组合物对高血压治疗的研究过程中，着重针对靶器官保护和 降低心脑血管事件危险性方面。这是因为若高血压不进行有效控制，持续几年后可引起全 身细小动脉硬化，变得僵硬且缺乏弹性，管腔变窄，输送至组织的血流速度减慢，造成心、脑、肾、眼等重要脏器损害而不能正常工作。高血压引起的靶器官损害，包括左室肥厚、良 性小动脉性肾硬化症、恶性小动脉性肾硬化症、肾功能衰竭、视网膜动脉硬化、或高血压眼 底病变。当上述这些靶器官损害仍不能给予有效控制，则发展成为更严重的后果，即心脑血 管事件的发生，心脑血管事件包括心绞痛、心肌梗死、心力衰竭、脑梗塞、或脑出血，其中 脑梗塞和脑出血合称脑卒中。因此，治疗高血压病人的主要目的是最大限度地降低心脑血管 病的死亡和病残的总危险，靶器官保护与降压并举，是高血压治疗的核心。
研究发现，本发明提供的药物组合物不仅具有有效的降压作用还具有显著的耙器官保护 作用；当将阿利吉仑、氢氯噻嗪和叶酸合用时，可明显降低SHR高血压大鼠收缩压，但与阿 利吉仑+氢氯噻嗪比较，降低幅度无显著性差异。
当将阿利吉仑、氢氯噻嗪和叶酸合用时，还能协同增强靶器官保护作用，且其协同作用 强于仅应用阿利吉仑/氢氯噻嗪二联复方降压药，也强于单用叶酸，差异均具有统计学意义。
进一步，在实验中，我们发现，当将阿利吉仑、氢氯噻嗪和叶酸合用时，能协同降低心 脑血管事件危险性，且作用强于仅应用阿利吉仑/氢氯噻嗪二联复方降压药，差异具有统计学居、。
因此，本发明提供了上述药用剂量的阿利吉仑、药用剂量的氢氯噻嗪和药用剂量的叶酸 组成的药物组合物在制备用于预防、治疗或延缓高血压的药物中的用途；本发明还提供该药 物组合物在制备用于预防、治疗或延缓高血压引起的靶器官损害的药物中的用途。高血压引 起的靶器官损害，包括左室肥厚、良性小动脉性肾硬化症、恶性小动脉性肾硬化症、肾功能 衰竭、视网膜动脉硬化、或高血压眼底病变。本发明还提供该药物组合物在制备用于降低高 血压引起的心脑血管事件危险性的药物中的用途；其中降低心脑血管事件危险性是指降低心 绞痛、心肌梗死、心力衰竭、脑梗塞、或脑出血的发生率，降低心脑血管事件危险性还指降 低脑卒中的发生率。
本发明提供的药物组合物中还含有药剂学可接受的载体，可制成普通口服制剂，包括普 通片剂、胶囊、颗粒剂等，制成片剂时所述药学上可接受的载体包括有助于将活性化合物配 制成药用制剂的赋形剂和辅药，如淀粉、微晶纤维素、无机盐类、蔗糖、糊精、乳糖、糖粉、 葡萄糖、氯化钠、半胱氨酸、柠檬酸和亚硫酸钠等的一种或几种物质的组合物，属于本领域 常识。
本发明提供的药物组合物的剂型包括但不限于普通片剂、双层片剂、多层片剂、缓释片 剂、单室控释片剂、双室控释片剂、微孔型控释片剂、舌下含片、口腔速崩片、分散片、肠 溶片、颗粒剂、丸剂、肠溶胶囊、延迟释放片、定时/位释放片、普通胶囊、缓释胶囊、控释胶囊、含有微丸或小片的胶囊、含有微丸或小片的pH依赖型胶囊、颗粒剂、口服液、膜剂 或贴剂等剂型，其中优选片剂、胶囊或颗粒剂。
根据本发明，药物组合物也可以是指含有两个或三个独立药物的药盒。当"药物组合物" 是指含有两个独立药物的药盒时，上述"组合药盒"是一种盒状容器，内置多种剂量形式的 药物组合及其服用说明书。"组合药盒"更适用于个体化用药；第一个药物中含有阿利吉仑 和氢氯噻嗪，第二个药物中含有叶酸。当"药物组合物"是指含有三个独立药物的药盒时， 上述"组合药盒"是一种盒状容器，内置多种剂量形式的药物组合及其服用说明书；第一个 药物中含有阿利吉仑，第二个药物中含有氢氯噻嗪，第三个药物中含有叶酸。该药盒中的两 个或三个独立的药物可以伴随给药，也可以在同一种药物制剂中或者在不同的药物制剂中按 顺序给药。
本发明的有益效果是本发明提供的药物组合物具有明显协同作用，其协同作用在于能 协同保护高血压引起的靶器官损害，协同降低高血压引起的心脑血管事件危险性。因此，本 发明提供了上述药用剂量的阿利吉仑、药用剂量的氢氯噻嗪和药用剂量的叶酸组成的药物组 合物在制备用于预防、治疗或延缓高血压、高血压引起的靶器官损害或高血压相关疾病的药 物中的用途；进一步，本发明提供了上述药物组合物在制备用降低高血压引起的心脑血管事 件危险性的药物中的用途。通过本发明的实施，提供给患者这种特定用途的药物组合物可以 提高患者依从性，使患者服药方便，降低医疗费用，具有较好市场前景。
下面结合具体实施方式
对本发明做进一步说明，药理作用的实验支持详见以下具体实施 方式。
具体实施例方式
实施例1:阿利吉仑+氢氯噻嗪+叶酸对自发性高血压大鼠降压及靶器官损害的保护作用
SHR大鼠，体重150 180g，平均分为6组，每组20只，分别为模型组、阿利吉仑+氢 氯噻嗪+叶酸(15 + 1.25+0.04mg/kg)组、阿利吉仑+氢氯噻嗪+叶酸(15 + 1.25+0.08mg/kg) 组、阿利吉仑+氢氯噻嗪+叶酸(15 +1.25 + 0.16mg/kg)组、阿利吉仑+氢氯噻嗪(15 + 1.25mg/kg ) 组、叶酸(0.08mg/kg)组，另取20只正常大鼠作为正常对照组。给予等容量0.5% CMC溶 液，每周称重一次，根据体重调整药量，连续给药20周。 检测指标-
(1) 分别测定给药前和给药后不同时间鼠尾收縮压，比较各组间血压差别。(3) 心肌羟脯氨酸测定取左心室游离壁心肌组织，制备成10%的心肌组织匀浆，按羟 脯氨酸测试盒说明书，消化法测定心肌羟脯氨酸含量，按胶原蛋白含量二羟脯氨酸含量X 7.46,换算成胶原蛋白含量。
(4) 心肌组织常规切片，天狼星红-苦味酸染色，测量心肌胶原容积分数(CVF)和心 肌血管周围胶原面积(PVCA) 。 CVF为胶原面积与心肌总面积的比值，其中胶原面积不包 括血管周围胶原面积，随机分析5个视野，取其均值。PVCA为每一标本测量4支呈横切面 的壁内小动脉的周围面积与管腔面积的比值，取其均值。
(5) 肾内小动脉观察经腹主动脉插管，0.1mg/ml硝普钠充分扩张血管后，用10%的 甲醛溶液在10 12kPa下灌注固定，分离左肾，6肾门处剪下肾脏，置丁-4%甲醛中固定，常 规脱水、石蜡包埋、横切片、HE染色。光学显微镜下选取外径为50 100ym的肾内小动脉， 测量肾内小动脉内径、壁厚，计算壁厚内径比。每个标本测量4支呈横切面的壁内小动脉， 取其平均值。
计量资料用S士s表示，数据统计学处理采用SAS统计软件包，两组间比较采用方差分析。 结果
(1)阿利吉仑+氢氯噻嗪+叶酸对SHR高血压大鼠血压的影响第20周末，与正常组大 鼠比较，模型组大鼠收縮压显著升高；与模型组比较，叶酸组大鼠收缩压有所改善，阿利吉 仑+氢氯噻嗪组及阿利吉仑+氢氯噻嗪(15 + 1.25mg/kg) +不同剂量叶酸(0.04 0.16mg/kg) 组大鼠收缩压均显著降低；但与阿利吉仑+氢氯噻嗪组比较，加用不同剂量叶酸组大鼠收縮压 的降压幅度没有显著改变。见表l。
表1阿利吉仑+氢氯噻嗪+叶酸对SHR高血压大鼠收缩压(mmHg)的影响(f士SD)
组别齐糧(mg/kg)给药前血压(n)8周血压(n)16周血压(n)20周血压(n)
正常组一112.8± 18.6(20)126.9±24.1(20)128.1 ±18.2(20)124.1 ±16.9(20)
模型组一179.1 土22,2"(20)178.4 士22.6"( 18)184.3±25.7"(16)跳1士19.2"(15)
阿利吉仑+氢15+1.25+0.04178.5 ±18.9(20)123.8±18.8、19;>128.1±17.8、18)122.0±13.4*(17)
氯噻嗪+叶酸15+1.25+0.08177.1 ±19.5(20)129.7±22 (19)126.1±21.7、18)127.3±25.2"(18)
15+1.25+0.16173.8± 19.6(20)126.2±19.6、20)121.7士22.4、20)121綠19.2"(19)
阿利吉仑+氢15+1.25179.4 ±19.2(20)131.6±20.9A(19)122.4±18.2A(19)123.9±25.3A(18)
氯噻嗪
叶酸0.08178.2 ±22.4(20)174.2±23.1阔168.9士28.3(18;i176.2士24.8(16;)
注与正常组比较，'P<0.05， "PO.01;与模型组比较，AP<0.05， "P《O.OL
(2〉阿利吉仑+氢氯噻嗪+叶酸对SHR高血压大鼠肾功能的影响与正常组大鼠比较， 模型组大鼠尿24hod-微球蛋白、尿蛋白显著升高，Ccr明显降低。与模型组比较，阿利吉仑+
8氢氯噻嗪组大鼠尿24hal-微球蛋白、尿蛋白显著降低，Ccr显著升高。与阿利吉仑+氢氯噻嗪 组比较，阿利吉仑+氢氯噻嗪+不同剂量叶酸(0.04 0.16mg/kg)组大鼠Ccr进一步升高， 24hal-微球蛋白、尿蛋白进一步降低。表明阿利吉仑+氢氯噻嗪对SHR高血压大鼠出现的早 期肾功能损害具有保护作用，叶酸与阿利吉仑+氢氯噻嗪合用，对SHR高血压大鼠的肾功能 保护作用显著增强。见表2。
表2阿利吉仑+氢氯噻嗪+叶酸对SHR高血压大鼠肾功能的影响d土SD)
组别剂量(mg/kg)N尿蛋白24hon-微球蛋白Ccr
(mg/24 h)(吗)(ml/min)
正常组一208.73 ±4,8321.43±5.320.43 ±0.14
模型组一1546.11 ±10.41"104.71 ±31.24"0.12 ±0.03"
阿利吉仑+氢氯噻嗪+叶酸15+1.25+0.041713.73 ±8.26"63.68士10.46"0.28±0.02A"
15+1.25+0.08188.14±4.78A"53.89±9.33A"0.29 ±0.06"*
15+1.25+0.16198.35±3.84"*57.85 ±9.94A"0.28±0.04*"
阿利吉仑+氢氯噻嗪15+1.251815.26 ± 7.41A70.91 ±9.25"0.22土0.03"
叶酸0.081638.61 ±11.5393.81 ±14.920.13±0.04
注与正常组比较，"PO.01;与模型组比较，AP<0.05, "PO.01;与阿利吉仑+氢氯噻嗪组比较，*P<0.05。
(3) 阿利吉仑+氢氯噻嗪+叶酸对SHR高血压大鼠心肌胶原蛋白含量及心肌胶原容积分 数(CVF)和心肌血管周围胶原面积(PVCA)的影响与正常组大鼠比较，模型组大鼠心肌 胶原蛋白含量，心肌间质纤维化指标CVF、心肌血管周围纤维化指标PVCA均显著增加，CVF 与PVCA升高几乎同步，表明心肌间质纤维化参与了高血压大鼠心脏重构的病理过程。与模 型组比较，阿利吉仑+氢氯噻嗪组大鼠心肌胶原蛋白含量、心肌CVF、 PVCA均显著降低。 与阿利吉仑+氢氯噻嗪组比较，加入不同剂量叶酸(0.04 0.16mg/kg)组大鼠心肌胶原蛋白 含量及心肌CVF、 PVCA进一步降低，有显著性差异。表明叶酸与阿利吉仑+氨氯噻嗪合用， 对高血压大鼠心肌保护作用增强。见表3。
(4) 阿利吉仑+氢氯噻嗪+叶酸对SHR高血压大鼠肾内小动脉的影响高血压大鼠的血 管改变，主要表现为血管壁外膜的纤维化，管壁中层增厚(由平滑肌细胞增生、肥厚和细胞 间质增多所致)；内膜玻璃样变，内皮细胞增生，上述变化使血管壁厚度/管腔比值减小。与 正常组大鼠比较，模型组大鼠肾小动脉壁厚增加，内径减小，壁厚/内径比增加。与模型组比 较，阿利吉仑+氢氯噻嗪组大鼠肾小动脉壁厚降低、壁厚/内径比增加，加用叶酸组大鼠肾小 动脉壁厚进一步降低、壁厚/内径比进一步增加，与阿利吉仑+氢氯噻嗪组比较有显著性差异。 见表4。表3阿利吉仑+氢氯噻嗪+叶酸对SHR高血压大鼠心肌胶原蛋白含量、心肌胶原容积分数 (CVF)和心肌血管周围胶原面积(PVCA)的影响(i土SD)
组别剂量(mg/kg)N胶原蛋白(mg/g)CVF(%)PVCA (%)
正常组一202.97 ±0.652.14±0.561.08 ±0.38
模型组一158.23 ±1.32"6.25 ±1.14'*5.05 ±1.06"
阿利吉仑+氢氯噻嗪+叶酸15+1.25+0.04176.73±0.87A4.43士1.01"3.18±0.41"**
15+1.25+0.08185.12±0.56A"3.47土0.52血"3.34 ±0.47"**
15+1.25+0.16195.11±0.55A"3.72±0.66"*3.12土0.51""
阿利吉仑+氢氯噻嗪15+1.25186.23士0.82"5.35 ±0.87"4.23±0.51A
叶酸0.08168.14±0.816.02 ±1.554.75±0.63A
注与正常组比较，"PO.01;与模型组比较，AP<0.05， "PO.01;与阿利吉仑+氢氯噻嗪组比较，*P<0.05。表4阿利吉仑+氢氯噻嗪+叶酸对SHR高血压大鼠肾内l小动脉的影响(S土SD)组别剂量(mg/kg)N壁厚(um)内径(u m)壁厚/内径(％)
正常组—204.6±0.865.4 ±10.68.1±1.4
模型组—1515,2±3.3**48.2 ± 8.广31.9±7.3'*
阿利吉仑十氢氯噻嗪+叶酸15+1.25+0.04179.1 ±2.4"53.8±9.318.2±3.5"*
15+1.25+0.08188.7±1.5"55.5±5.716.3±4.1"**
15+1.25+0.16198.7 ±1.6"53.6 ±7.517.8±3.2"*
阿利吉仑十氢氯噻嗪15+1.251810.5 ±2.4"51.8±7.922.6 ±3,8"
叶酸0.081613.8±3.048.9±8.328.9 ±5.7
注与正常组比较，"P<0.01;与模型组比较，"PO.01;与阿利吉仑+氢氯噻嗪组比较，^<0.05， **P<0.01。
实施例2:阿利吉仑+氢氯噻嗪+叶酸对卒中易感型自发性高血压大鼠靶器官损害的保护作用
8周龄左右雄性易感型自发性高血压大鼠(SHR-SP)共60只，结合血压数值，分为模型 组、阿利吉仑+氢氯噻嗪+叶酸(30+2.5+0.08mg/kg)组、阿利吉仑+氢氯噻嗪(30+2.5mg/kg)
组。饲养条件室温22士2'C;相对湿度50%;固形饲料和垫料均由中国医学科学院实验动
物繁育场提供；饮用水为纯净水。另设WKY对照组，每组20只。灌胃给药，每天1次，每 周称重一次，根据体重调整药量，连续8周。 观察指标
(1) 血压给药前及给药后4周，8周均进行大鼠动脉压测定。比较给药组与模型组间差别。
(2) 每日观察动物饮食、存活情况及行为活动，于8周记录各组动物脑卒中发生情况。 G)神经功能分级参照Bederscm的神经功能分级标准，分为如下5级，每周观察一次。0级(正常)无神经功能缺损症状。
l级(轻微)前肢蜷縮或屈曲，主要是持续性腕屈曲或肩内收伴肘部伸展。 2级(中度)前肢持续性蜷缩或屈曲，可见腕、肘全部屈曲、肩部内收或内旋。 3级(严重)持续性肢体蜷缩或屈曲， 一侧肢体推力体抗持续性减弱，自主活动时不伴
肢体划圈行为。
4级(甚重)双侧肢体持续性蜷縮或屈曲， 一侧肢体推力体抗持续性减弱，自主活动时 出现肢体划圈行为。
(4)病理学观察所有存活动物及死亡后可取得病理组织的大鼠均取脑组织，切片、 HE染色，观察脑出血、脑梗塞或混合性脑卒中，计算各组大鼠脑卒中发生率。模型组有2
只，阿利吉仑+氢氯噻嗪+叶酸三联组1只，阿利吉仑+氢氯噻嗪复方组1只动物死亡后被其 他动物食掉，未能取得脑组织进行病理检査。
结果
4正常组大鼠比较，模型组大鼠收缩压显著升高；4模型组比较，阿利吉仑+氢氯噻嗪组 及阿利吉仑+氢氯噻嗪+叶酸组大鼠收缩压均显著降低；与阿利吉仑+氢氯噻嗪组比较，加用 叶酸组大鼠收縮压的降压幅度没有显著改变。见表5。
表5阿利吉仑+氢氯噻嗪+叶酸对SHR-SP大鼠收縮压(mmHg)的影响(S土SD)
组别 剂量(mg/kg) 给药前血压(n) 4周血压(n) 8周血压(n)
正常组 一112.8 ±28.4(20)126.9±24.1(20)128.3 ±28.2(20)
模型组 一179.8 ±26.2**(20)188.2±22.广(18)181.7±25.6*'(15)
阿利吉仑+氢氯15+1.25+0.08176.1 ±28.9(20)123.8±28,4"(19)118.0±27.8"(18)
噻嗪+叶酸
阿利吉仑+氢氯15+1.25175.4 ±29.6(20)125.6±20.1AA(19)122.5±28.2"(17)
噻嗪
注模型组与正常组比较，"PO.01;给药组与模型组比较，"P<0.01。
本实验过程中，模型组大鼠卒中后出现明显精神萎靡，嗜睡，毛发蓬松、干枯或脱落、
无光泽，体重下降，i动活动明显减少，行动迟缓，肢体呈不同程度瘫痪，部分大鼠发病同
时伴有抽搐、腹泻、小便失禁、眼球出血等症状，病情严重者数小时内死亡。治疗组的大部 分动物神经功能缺损较模型组轻微，精祌状态明显优于模型组，自主活动增加，主动觅食、 饮水，体重下降不明显，毛发也较模型组顺滑有光泽。
模型组20只大鼠中有14只发生脑卒中，其中死亡5只，除2只动物于夜间死亡后未能 及时取得组织外，其他18只动物均进行了病理组织学观察，共16只有脑卒中发生，其中脑 出血5只，脑梗死6只，混合性中风5只。脑卒中灶及周围均可见小动脉透明变性或纤维素样坏死，管壁增厚，管腔狭窄，有的管腔内可见微血栓形成，管周渗血。阿利吉仑+氢氯噻嗪 组20只大鼠有12只发生脑卒中，其中死亡3只，1只动物未能取得病理组织，其他19只动 物均进行了病理组织学观察，共14只有脑卒中发生，与模型组比较未见显著差异。阿利吉仑 +氢氯噻嗪+叶酸组20只大鼠有8只发生脑卒中，于实验结束时死亡2只，其中1只动物未 能取得病理组织，其他19只动物均进行了病理组织学观察，共8只有脑卒中发生，其脑卒中 发生率明显降低，且与模型对照组比较差异具有显著性(PO.05)，详见表6。
4周及8周时观察，发现给予复方阿利吉仑+氢氯噻嗪+叶酸(30+0.08mg/kg)可明显改 善大鼠的神经功能分级(P<0.05)，详见表7及表8。
表6阿利吉仑+氢氯噻嗪+叶酸连续给药8周对SHR-SP大鼠脑卒中的影响
组别
剂量(mg/kg)
动物数 (试验始/末)
脑卒中发生数 (发生率)
病理组织学观察 发生数与发生率
正常组 模型组
阿利吉仑+氢氯噻嗪+叶酸 阿利吉仑+氢氯噻嗪
30+2.5+0.08 30+2.5
20/20 20/15 20/18 20/17
0 (0%) 14 (70%) * 8 (40%) A 12 (60%)
1 (5%) 16 (88.89%) 8 (42.1%) A 14 (73.7%)
注乂2检验，模型组与正常组比较，><0.05， "P<0.01;给药组与模型组比较，AP<0.05;模型组2只，
三联组1只，阿利吉仑+氢氯噻嗪复方组1只动物死亡后未能取得脑组织进行病理检査，统计中未计算入 内。
表7阿利吉仑+氢氯噻嗪+叶酸连续给药4周对SHR-SP大鼠脑卒中神经功能分级比较(只)
组别
剂量 (mg/kg)
动物
0级
1级
2级
3级
4级
对照组
模型组"
阿利吉仑+氢
氯噻嗪+叶酸4
阿利吉仑+氢
30+2.5+0.08
30+2.,
20
18
19
19
20 (100%)0 (0%) 0 (0%) 0 (0%) 2 (11.1%) 2 (11.1%) 2 (11.1%) 5 (27.8%) 10 (52.6%) 3 (15.8%) 3 (15.8%) 2 (10.5%)
(26.3%)
(10.5%) 3 (15.8%) 4 (21.1%)
0 (0%)
7 (38.9%)
1 (5.3%)
5 (26.3%)
注乂2检验，与对照组比较，**P<0.01;与模型组比较，AP<0.05。表8阿利吉仑+氢氯噻嗪+叶酸连续给药8周对SHR-SP大鼠脑卒中神经功能分级比较(只)
组别剂量 (mg/kg)动物 数0级1级2级3级4级
对照组 一2020 (100%)0(0%)0 (0%)0 (0%)0 (0%)
模型组"一151 (6.7%)1(6.7%)1 (6.7%)5 (33.30/o)7 (46.7%)
阿利吉仑+氢氯 噻嗪+叶酸A30+2.5+0.081810(55.6%)3(16.7。/0)2 (11.1%)2 (11.1%)1 (5.6%)
阿利吉仑+氢氯 噻嗪30+2.5174 (23.5%)2(11.8%)3 (17.6%)4 (23.5%)4 (23.5%)
注乂2检验，与对照组比较，"P〈0.01;与模型组比较，AP<0.05。
实施例3:阿利吉仑150mg/氢氯噻嗪12.5mg/叶酸0.2mg片的制备 处方
阿利吉仑150.0g
氢氯噻嗪12.5g
叶酸0.2g
淀粉
微晶纤维素60.0g
羧甲基淀粉钠雄g
泊洛萨姆F68l.Og
水适量
10°/。聚维酮水溶液适量
硬脂酸镁适量
制成1000片制备工艺叶酸过80目筛，其他辅料分别过100目筛后75。C干燥2小时，备用；精密
称定处方量的阿利吉仑、氢氯噻嗪、淀粉、羧甲基淀粉钠和微晶纤维素过筛混匀，备用；取 处方量的叶酸和泊洛萨姆Fm加入少量水，充分混合均匀后等量递增加入预混好的阿利吉仑、 氢氯噻嗪、淀粉、羧甲基淀粉钠和微晶纤维素，用10%聚维酮水溶液制成软材，30目筛制粒， 6(TC干燥3h; 30目整粒，加入适量硬脂酸镁混匀，含量测定后压片，包装。 实施例4:阿利吉仑150mgZ氢氯噻嗪12.5mg/叶酸0.4mg片的制备
处方
阿利吉仑 150.0g
氢氯噻嗪 12.5g
叶酸 0.4g淀粉
微晶纤维素 羧甲基淀粉钠 泊洛萨姆F6S 水
10%聚维酮水溶液
硬脂酸镁
30.0g 60.0g
mog
l.Og
制成iooo片
制备工艺同实施例3。
实施例5:阿利吉仑150mg/氢氯噻嗪12.5mg/叶酸0.8mg片的制备 处方
阿利吉仑150.0g
氢氯噻嗪12.5g
叶酸0.8g
淀粉mog
微晶纤维素60.0g
羧甲基淀粉钠20.0g
泊洛萨姆F68l.Og
水适量
10%聚维酮水溶液适量
硬脂酸镁适量
制成1000片制备工艺同实施例3。
实施例6:阿利吉仑300mg/氢氯噻嗪12.5mg/叶酸0.4mg片的制备 处方
阿利吉仑
叶酸 淀粉
微晶纤维素 羧甲基淀粉钠 泊洛萨姆F68 水
10%聚维酮水溶液
300.0g
12.5g
0.4g
20.0g
30.0g
訓g
l.Og硬脂酸镁
制成1000粒
制备工艺同实施例3。 实施例7:阿利吉仑300mg/氢氯噻嗪25mg/叶酸0.4mg胶囊的制备 处方
阿利吉仑
叶酸 淀粉
微晶纤维素 羧甲基淀粉钠 5%聚维酮k-30水溶液 硬脂酸镁
300.0g
25.0g
0.4g
20.0g
20.0g
10.0g
制成1000粒
制备工艺将阿利吉仑300g、氢氯噻嗪25g、叶酸0.4g 、微晶纤维素10g、淀粉5g、羧甲 基淀粉钠10g粉碎、过筛后混合均匀，与适量的5。/。聚维酮k-30水溶液混合制成软材后制粒、 干燥、加入约1%的硬脂酸镁混合均匀，按常规方法装胶囊1000粒即得。 实施例8:阿利吉仑150mg/氢氯噻嗪25mg/叶酸0.4mg胶囊的制备
处方
150.0g 25.0g 0.4g 御g 30.0g 30.0g
阿利吉仑
叶酸 淀粉
微晶纤维素 羧甲基淀粉钠 5%聚维酮k-30水溶液
制成1000粒
制备工艺同实施例7.
权利要求
1.一种药物组合物，包括(1)药用剂量的阿利吉仑；(2)药用剂量的氢氯噻嗪；(3)药用剂量的叶酸；及(4)药剂学上可接受的载体。
2. 权利要求1所述的药物组合物，其特征在于所述阿利吉仑含量为100 600mg，优选 150 300mg;所述氢氯噻嗪含量为12.5 25mg;所述叶酸含量为0.2 1.6mg,优选0.4 1.0mg。
3. 权利要求1 2中任一项所述的药物组合物，其特征在于所述药物组合物的制药剂型为 口服制剂，包括片剂、胶囊或颗粒剂。
4. 权利要求1 3中任一项所述的药物组合物在制备用于预防、治疗或延缓高血压的药物 中的用途。
5. 权利要求1 3中任一项所述的药物组合物在制备用于预防、治疗或延缓高血压引起的 靶器官损害的药物中的用途。
6. 权利要求5所述的用途，其特征在于所述的靶器官损害包括左室肥厚、良性小动脉性 肾硬化症、恶性小动脉性肾硬化症、肾功能衰竭、视网膜动脉硬化、或高血压眼底病变。
7. 权利要求1 3中任一项所述的药物组合物在制备用于降低高血压引起的心脑血管事件 危险性的药物中的用途。
8. 权利要求7所述的用途，其特征在于所述降低高血压引起的心脑血管事件危险性是指 降低心绞痛、心肌梗死、心力衰竭、脑梗塞、或脑出血的发生率。
9. 权利要求7所述的用途，其特征在于所述降低高血压引起的心脑血管事件危险性是指 降低脑卒中的发生率。
全文摘要
本发明涉及一种含有阿利吉仑、氢氯噻嗪和叶酸的药物组合物。该药物组合物包含药用剂量的阿利吉仑、药用剂量的氢氯噻嗪、药用剂量的叶酸和药剂学上可接受的载体。本发明还涉及该药物组合物在制备用于预防、治疗或延缓高血压、高血压引起的靶器官损害的药物中的用途，本发明还涉及该药物组合物在制备用于降低高血压引起的心脑血管事件危险性的药物中的用途。属于药学领域。通过本发明的实施，提供给患者这种特定用途的药物组合物可以提高患者依从性，使患者服药方便，降低医疗费用，具有较好市场前景。
文档编号A61K31/165GK101590030SQ20081011309
公开日2009年12月2日 申请日期2008年5月27日 优先权日2008年5月27日
发明者徐希平, 王文艳, 陈光亮, 陈明侠 申请人:北京奥萨医药研究中心有限公司;深圳奥萨医药有限公司