酸酯的合成
[0516] 向冷却至0°C的搅拌着的3-甲基-3-(2, 4, 5-三甲基-3, 6-二氧代环己-1，4-二 烯-1-基）丁酸（237mg;0· 95mmol)(按照实施例1，步骤1和2的描述制备）和（2R) -6-羟 基己烷-1，2-二基二硝酸酯（在步骤3中制备）（213mg;0· 95mmol)的DCM(5ml)溶液中加 入EDAC(162mg;1. 04mmol)和催化量的DMAP。将反应液于0°C下搅拌过夜。然后将粗产物用 水、HC1 1N、水和盐水洗涤，干燥并真空蒸发。将粗产物通过快速色谱纯化[Cy/Et0Ac:0%至 20% (1CV)，20%至40% (7CV)，40%至60% (2CV)]得到338mg黄色油状标题化合物（收 率：78· 2% ) 〇
[0517] NMR( 3 0 0MHz,CDC13)δ5 . 3 0 - 5 . 2 1 (m, 1Η) , 4 . 7 4 (dd,J =12. 9, 3. 0Hz, 1H) , 4. 47 (dd,J= 12. 9, 6. 5Hz, 1H) , 3. 99 (t,J= 6. 3Hz, 2H), 2. 98 (s, 2H), 2. 16 (d,J= 7. 2Hz, 3H), 1. 96 (s, 6H),L81 - 1. 69 (m, 2H),L66 -1.56(m，2H), 1.52- 1.31(m，8H)。aD2°= +2.3(0.47%Me0H)
[0518] 实施例14
[0519] (S)-5, 6-二（硝基氧基）己基3-(4,5-二甲氧基-2-甲基-3, 6-二氧代环 己-1，4-二烯基）-3-甲基丁酸酯（化合物17 ;化合物11的（S)-异构体）的合成
[0520]
[0521] 步骤1:2, 3-二甲氧基-5-甲基苯-1，4-二醇的合成
[0522]
[0523] 将似8比(5.28;137.2111111〇1)溶于15〇1111水，然后在室温下搅拌加入2,3-二甲氧 基-5-甲基环己-2, 5-二烯-1，4-二酮（Sg;27· 4mmol)在 75mlEt20 和 38mlMeOH的混合 物中的溶液。15分钟后，将混合物置于分液漏斗中，分层。将乙醚相除去并将水相用每份 50ml的乙醚萃取两次。将合并的有机萃取液用盐水洗涤并用硫酸钠干燥。减压除去溶剂得 到红色油状标题化合物（9g;88% )。其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
[0524] 步骤2:6-羟基-7, 8-二甲氧基-4, 4-二甲基苯并二氢吡喃-2-酮的合成
[0525]
[0526] 将2,3-二甲氧基-5-甲基苯-1，4-二醇（在步骤2中获得）（9 8;49臟〇1)、3-甲基 丁-2-稀酸甲酯（7ml;58mmol)和甲磺酸（80mL)在搅拌下于70°C加热90分钟。然后将混 合物倒入冰中，用水稀释至600ml并用乙醚萃取（3x150ml)。将合并的有机层用盐水洗涤， 用硫酸钠干燥并浓缩至干得到棕色固体，将其用甲醇结晶得到黄色结晶状的纯净标题化合 物（6.5g;50% )。
[0527] 步骤3:4-硝基苯基3-(4, 5-二甲氧基甲基-3,6-二氧代环己-1，4-二稀 基）-3_甲基丁酸酯的合成
[0528]
[0529] 采用与Carpino等人，J.Org.Chem.，1989, 54, 3303-3310所述类似的合成方法，但 由于3-(4, 5-二甲氧基-2-甲基-3, 6-二氧代环己-1，4-二烯基）-3-甲基丁酸被证实是 高度不稳定的（虽然其在文章中有记载），因此将其就地转化成其4-硝基苯基酯。
[0530] 将步骤3得到的内酯（2g;7. 51mmol)的DMF(15mL)溶液在室温下加入到搅拌着的 H)C(12. 7g;33. 7mmol)的DMF(15mL)溶液中并继续搅拌4小时。将混合物用水稀释至300mL 并迅速用乙醚萃取（3xl50mL)。将合并的有机萃取液用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩至 约10mL。将该溶液在Et0Ac(40mL)中稀释然后依次加入对-硝基苯酚（1. 57g;11. 2mmol)、 DCC(2. 31g;11. 2mmol;1. 5eq.)和DMAP(催化量）。将混合物室温搅拌16小时，然后将其浓 缩至干。用中性氧化铝进行色谱纯化（洗脱剂：环己烷/AcOEt8/2)得到橙色油状的标题 化合物（800mg;26% )。
[0531] 虫NMR(300MHz，CDC13)δ8. 24 (d，2H)，7. 20 (d，2H)，3. 93 (s，3H)，3. 89 (s，3H)，3. 32 (s，2H)，2. 19 (s，3H)，1. 55 (s，3H)，1. 53 (s，3H) 〇
[0532] 步骤4: (S)-5, 6_二（硝基氧基）己基3-(4, 5_二甲氧基_2_甲基-3, 6_二氧代 环己-1，4-二烯基）-3-甲基丁酸酯的合成
[0533]
[0534] 在一个 50-ml的单颈瓶中，将 178.0mg(0.45mmole)4-硝基苯基 3-(4,5-二甲 氧基-2-甲基-3, 6-二氧代环己-1，4-二烯基）-3-甲基丁酸酯（在步骤4中获得）和 111.0mg(0.50mmole) (S)-6-羟基己烷-1,2-二基二硝酸酯（在实施例12,步骤2中获得） 加入到DCM(L5ml)中。10分钟后，加入55. 0mg((X45mmole)DMAP。将溶液室温搅拌18小 时。将反应液用水洗涤，用MgS04干燥，过滤并减压浓缩，以定量收率得到红色油。将得到 的红色油通过自动化硅胶柱色谱纯化，用Cy/DCM/MeOH(50/50/0至68/30/2)混合物洗脱得 至IJ200mg(91%收率）橙色油状标题化合物。
[0535] MS:m/z= 489[M+H] +
[0536] TLC: (Cy/DCM/MeOH68:30:2)Rf= 0· 33
[0537] NMR(CDCl3):5.25(m，lH)，4.74(dd，lH)，4.50(dd，lH)，4.0(t，2H)，3.97(s，3H)，3. 93 (s，3H)，3. 0 (s，2H)，2. 14 (s，3H)，1. 8-1. 5 (m，6H)，1. 43 (s，6H)。
[0538] 实施例15
[0539] (S)-5, 6-二（硝基氧基）己基3-(4,5-二甲氧基-2-甲基-3, 6-二氧代环 己-1，4-二烯基）-3-甲基丁酸酯（化合物17)的合成
[0540]
[0541] 标题化合物的制备如下：
[0542] 步骤1:2, 5_二氧代吡略烧-1-基3_ (4, 5_二甲氧基_3, 6_二氧代环己_1，4_二 烯基）-3-甲基丁酸酯的合成
[0543]
[0544] 采用与Carpino等人，J.Org.Chem.，1989, 54, 3303-3310所述类似的合成方法，但 由于3-(4, 5-二甲氧基-2-甲基-3, 6-二氧代环己-1，4-二烯基）-3-甲基丁酸被证实是 高度不稳定的（虽然其在文章中有记载），因此将其就地转化成其N-羟基琥珀酰亚胺基酯。
[0545] 将实施例14的步骤3得到的内酯（2. 5g;9. 39mmol)的DMF(20mL)溶液在室温下 加入到搅拌着的^^(14.88;39.4111111 〇1)的01^(2〇1^)溶液中并继续搅拌4小时。将混合 物用水稀释至300mL并迅速用乙醚萃取（3xl50mL)。将合并的乙醚萃取液用盐水洗涤，用 硫酸钠干燥并浓缩至约10mL。将该溶液在DCM(40mL)中稀释，然后依次加入NHS(1. 29g; 11.2mmol)和EDC1.HCI(2. 16g;11.2mmol)并继续搅拌16小时。将混合物用水稀释并用 DCM萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩至干得到橙色油状标题化合物 (2. 74g；78% ) 〇
[0546]虫NMR(300MHz，CDC13)δ3. 97 (s，3H)，3. 88 (s，3H)，3. 28 (s，2H)，2. 88 (s，4H)，2. 16 (s，3Η), 1. 55(s，3Η), 1. 57(s，3Η) 〇
[0547] 步骤2: (S) _5, 6_二（硝基氧基）己基3_(4, 5_二甲氧基_2_甲基_3, 6_二氧代 环己-1，4-二烯基）-3-甲基丁酸酯（化合物17)的合成
[0548]将 40. 0mg(0.lmmole)2, 5-二氧代吡咯烷-1-基3-(4, 5-二甲氧基-2-甲 基-3,6-二氧代环己-1，4-二烯基）-3-甲基丁酸酯、28.011^(0.12臟〇1 6)(5)-6-羟基己 烷-1，2-二基二硝酸酯（在实施例12的步骤2中制备）和DMF(lml)在搅拌下混合物在 一起。10 分钟后，加入 19. 0mg(0.lmmole)EDOHCl和 12. 0mg(0.lmmole)DMAP。将溶液搅 拌5小时至50°C。将反应液用水洗涤，用MgS04干燥，过滤并减压浓缩，以定量收率得到红 色的油。将得到的红色油用硅胶Versaflash短柱通过自动化柱色谱进行纯化，用Cy/DCM/ MeOH(50/50/0至68/30/2)混合物洗脱得到14. 6mg(31 %收率）橙色油状标题化合物。
[0549]MS:m/z= 489[M+H] +
[0550] TLC: (Cy/DCM/MeOH68:30:2)Rf= 0· 33
[0551] NMR(CDCl3):5.25(m，lH)，4.74(dd，lH)，4.50(dd，lH)，4.0(t，2H)，3.97(s，3H)，3. 93 (s，3H)，3· 0 (s，2H)，2· 14 (s，3H)，1· 8-1. 5 (m，6H)，1· 43 (s，6H)。
[0552] 实施例16
[0553] 在高渗盐水诱导的兔子眼内压（Ι0Ρ)增加中降低眼内压的活性
[0554] 本研究评估了单次应用两种不同浓度（1%和0. 3% )的化合物（1)在具有实验性 眼内压增加的兔子中降低眼内压的效果。
[0555] 实验中使用体重为1. 8-2.OKg的成年雄性新西兰大白兔。
[0556] 通过向玻璃体两边注射0. 1ml高渗盐水溶液（5 % )诱导短暂性眼内压增加 (Krauss等人，2011，Orihashi等人，2005) 〇
[0557] 在注射高渗盐水前（基础值）和注射30、60、120和240分钟后用Tono-PenXL测 量眼内压。在注射高渗盐水后，立即以滴眼液的形式灌输载体（5%Crem〇ph〇r-EL;0. 3% DMS0,0. 2mg/ml苯扎氯铵的PBS溶液，pH6. 0)或化合物。眼睛被随机分配到不同的治疗 组。载体和化合物以所需剂量直接灌输到结膜袋中。在每组的压力测量临进行前，在每只 眼中灌输一滴0. 4%盐酸奥布卡因（Novesine,Sandoz)。
[0558] 结果如表3所报道，并且用相对于载体和相对于注射高渗盐水前的基础眼内压而 言（局部给药后60分钟和120分钟时）眼内压的变化来表示。
[0559]
[0560] 实施例17
[0561] 在高渗盐水诱导的兔子眼内压（Ι0Ρ)增加中降低眼内压的活性
[0562] 本研究评估了单次应用化合物（15)(实施例12)和用作参比化合物的ISMN(5-单 硝酸异山梨醇酯）在眼内压升高的动物模型中降低眼内压的效果。
[0563] 实验中使用体重为1. 8-2.OKg的成年雄性新西兰大白兔。
[0564] 将动物用20mg/ml/kg的戊巴比妥钠麻醉。通过向玻璃体两边注射0. 1ml高渗盐 水溶液（5% )诱导眼内压增加（Krauss等人，2011，Orihashi等人，2005)。
[0565] 在注射高渗盐水前（基础值）和注射30、60、90、120、240和360分钟后用1'〇11〇-?611 XL测量眼内压。在注射高渗盐水后，立即以滴眼液的形式灌输载体（5%Cremophor-EL; 0. 3%DMS0 ;0. 2mg/ml苯扎氯铵的PBS溶液，pH6. 0)或试验化合物。眼睛被随机分配到 不同的治疗组。载体或化合物以所需剂量直接灌输到结膜袋中。在每组的压力测量临进行 前，在每只眼中灌输一滴用盐水1:1稀释的〇. 2%盐酸奥布卡因（Novesine,Sandoz)。
[0566] 结果如表4所报道，并且用相对于载体和相对于注射高渗盐水前的基础眼内压而 言（局部给药后30分钟和60分钟时）眼内压的变化来表示。
[0567] 与ISMN治疗组相比，单次应用化合物（15)导致明显更多的眼内压降低。
[0568]
【主权项】
1. 式（I)化合物或其立体异构体，其中： 札选自H、甲基、甲氧基； 私是11或甲基； R3选自H、甲基、甲氧基； 或者&和R3-起形成-CH=CH-CH=CH-; 尺4和R5是甲基并且η是1，或者 心是11，1?5选自苯基、对-氟苯基、对-甲氧基苯基、对-异丙基苯基、对-三氟甲基苯 基或对-甲基苯基并且η是2; m是从1至10的整数； P是〇或1 ; &是11或甲基。2. 根据权利要求1所述的式（I)化合物，其中： R2是甲基； 1?4和R5是甲基并且η是1。3. 根据权利要求1所述的式（I)化合物，其中： R2是甲基； 心是11，1?5选自苯基、对-氟苯基、对-甲氧基苯基、对-异丙基苯基、对-三氟甲基苯 基或对-甲基苯基并且η是2。4. 根据权利要求2所述的式（I)化合物，其中： R^R3是甲基。5. 根据权利要求2所述的式（I)化合物，其中： 札和R3是甲氧基。6. 根据权利要求2所述的式（I)化合物，其中：RJPR3-起形成-CH=CH-CH=CH-。7. 根据权利要求2所述的式（I)化合物，其中：Ri是甲基并且R3是甲氧基。8. 根据权利要求2所述的式（I)化合物，其中：Ri是甲氧基并且1?3是甲基。9. 根据权利要求4至8任意一项所述的式（I)化合物，其中p是0并且R6是H。10. 根据权利要求4至8任意一项所述的式（I)化合物，其中p是1。11. 根据权利要求3所述的式（I)化合物，其中1和1?3是甲基。12. 根据权利要求3所述的式（I)化合物，其中RJPR3是甲氧基。13. 根据权利要求3所述的式（I)化合物，其中RJPR3-起形成-CH=CH-CH=CH-。14. 根据权利要求3所述的式（I)化合物，其中L是甲基并且R3是甲氧基。15. 根据权利要求3所述的式（I)化合物，其中Ri是甲氧基并且1?3是甲基。16. 根据权利要求11至15任意一项所述的式（I)化合物，其中p是0并且1?6是H。17. 根据权利要求11至15任意一项所述的式（I)化合物，其中p是1。18. 根据权利要求1所述的式（I)化合物，选自： 4_(硝基氧基）丁基3-甲基-3-(2, 4, 5-三甲基-3, 6-二氧代环己-1，4-二烯基）丁 酸酯（化合物1); 6_(硝基氧基）己基3-甲基-3-(2, 4, 5-三甲基-3, 6-二氧代环己-1，4-二烯基）丁 酸酯（化合物2); 6_(硝基氧基）己基4-苯基-4-(2, 4, 5-三甲基-3, 6-二氧代环己-1，4-二烯基）丁 酸酯（化合物3); 4_ (硝基氧基）丁基3-甲基-3-(3-甲基-1，4-二氧代-1，4-二氢萘-2-基）丁酸酯 (化合物4); 6_ (硝基氧基）己基4- (4-氟苯基）-4- (2, 4, 5-三甲基-3, 6-二氧代环己-1，4-二烯 基）丁酸酯（化合物5); 4_(硝基氧基）丁基4-苯基-4-(2, 4, 5-三甲基-3, 6-二氧代环己-1，4-二烯基）丁 酸酯（化合物6); 4_ (硝基氧基）丁基4- (4-氟苯基）-4- (2, 4, 5-三甲基-3, 6-二氧代环己-1，4-二烯 基）丁酸酯（化合物7); (55,6幻-5,6-二（硝基氧基）庚基3-甲基-3-(2,4,5-三甲基-3,6-二氧代环 己-1，4-二烯基）丁酸酯（化合物8); 4_ (硝基氧基）丁基4- (4, 5-二甲氧基-2-甲基-3, 6-二氧代环己-1，4-二烯基）-4-苯 基丁酸酯（化合物9); 5, 6-二（硝基氧基）己基-3-甲基3-(2, 4, 5-三甲基-3, 6-二氧代环己-1，4-二烯 基）丁酸酯（化合物10) 5, 6-二（硝基氧基）己基3-(4,5-二甲氧基-2-甲基-3, 6-二氧代环己-1，4-二烯 基）-3_甲基丁酸酯（化合物11) 4_ (硝基氧基）丁基3- (4, 5-二甲氧基-2-甲基-3, 6-二氧代环己-1，4-二烯基）-3-甲 基丁酸酯（化合物12) 5, 6-二（硝基氧基）己基4-(4,5-二甲氧基-2-甲基-3, 6-二氧代环己-1，4-二烯 基）-4-苯基丁酸酯（化合物13) 5, 6-二（硝基氧基）己基4-苯基-4-(2, 4, 5-三甲基-3, 6-二氧代环己-1，4-二烯 基）丁酸酯（化合物14) (S)-5, 6-二（硝基氧基）己基3-甲基-3-(2, 4, 5-三甲基-3, 6-二氧代环己-1，4-二 烯基）丁酸酯（化合物15) (R) -5, 6-二（硝基氧基）己基3-甲基-3-(2, 4, 5-三甲基-3, 6-二氧代环己-1，4-二 烯基）丁酸酯（化合物16) (S) -5, 6-二（硝基氧基）己基-3- (4, 5-二甲氧基-2-甲基-3, 6-二氧代环己-1，4-二 烯基）-3-甲基丁酸酯（化合物17)， 及其立体异构体。19. 用作药物的根据权利要求1至18任意一项所述的式（I)化合物。20. 用于治疗高眼压青光眼、正常眼压性青光眼、继发性青光眼和高眼压症的根据权利 要求1至18任意一项所述的式（I)化合物。21. 用于治疗年龄相关性黄斑变性、糖尿病性视网膜病变、黄斑变性、炎症性视网膜病、 葡萄膜炎的根据权利要求1至18任意一项所述的式（I)化合物。22. 包含根据权利要求1至18任意一项所述的式（I)化合物和至少一种眼科可接受的 成分和/或眼科可接受的载体的眼科组合物。23. 包含根据权利要求1至18任意一项所述的式（I)化合物和一种或多种选自下列的 其它活性成分的组合物：α肾上腺素能受体激动剂、β受体阻滞剂、碳酸酐酶抑制剂、前列 腺素类似物、非留体抗炎药或留体抗炎药。24. 用于治疗高眼压青光眼、正常眼压性青光眼、继发性青光眼和高眼压症的权利要求 23所述的组合物。25. 用于治疗年龄相关性黄斑变性、糖尿病性视网膜病变、黄斑变性、炎症性视网膜病、 葡萄膜炎的权利要求22所述的组合物。26. 包含权利要求23所述的组合物和至少一种眼科可接受的成分和/或眼科可接受的 载体的眼科组合物。
【专利摘要】本发明涉及具有醌基结构的式(I)的一氧化氮供体化合物、其组合物和用于治疗和/或预防青光眼和高眼压的所述化合物，其中R1至R6、n、m和p如权利要求1所定义。
【IPC分类】C07C69/612, A61K31/215, C07C69/608, C07C69/635
【公开号】CN105263487
【申请号】CN201480031571
【发明人】N·阿尔米兰特, L·斯托洛尼, G·罗森, E·巴斯蒂亚
【申请人】尼科斯科学爱尔兰公司
【公开日】2016年1月20日
【申请日】2014年4月14日
【公告号】CA2909622A1, EP2986288A1, US20160145192, WO2014170264A1...