治疗性组合物和其用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及用于治疗和预防胃肠癌的组合物。特别地，本发明涉及含有蜂胶和环 糊精的抗胃肠癌组合物，包括包含一种或多种蜂胶提取物的抗胃肠癌组合物。特别预期包 含蜂胶和γ-环糊精，例如欧洲蜂胶和γ-环糊精的抗胃肠癌组合物，以及这类组合物治疗 或预防诸如结肠直肠癌、胃癌以及咽喉癌的胃肠癌的用途。
【背景技术】
[0002] 粗蜂胶是由蜜蜂从收集自植物来源（诸如芽和汁液）的树脂产生的树脂状物 质，其与蜂蜡混合。取决于植物来源，粗蜂胶的颜色可以从黄色变化至棕色乃至几乎黑 色。蜂蜡通常通过使用乙醇提取而与蜂胶分离，在乙醇中蜡不可溶，但树脂状化合物高度 可溶。存在许多类型的蜂胶，这是基于树脂化合物的植物来源、和地理区域。最为熟知 的蜂胶类型是"欧洲"蜂胶，其中树脂化合物是由蜜蜂主要从杨树并且在较小程度上从桦 树和柳树的叶和芽渗出物获得；和"巴西绿"蜂胶，其主要由蜜蜂从酒神菊树的叶渗出物 获得。产自新西兰的蜂胶可以被归类为"欧洲"的，因为其组成广泛地匹配其它欧洲蜂胶 (Markham等，1996.新西兰蜂胶中的主要有机成分的HPLC和GC-MS鉴别（HPLC and GC-MS identification of the major organic constituents in New Zealand propolis) Phytochemistry, 42(1) :205-211)。已经报导了粗蜂胶和来源于蜂胶的提取物具有抗细菌、 抗真菌以及抗病毒活性。还已经调查了其治疗几种类型的癌症，特别是乳癌的用途。
[0003] 存在于蜂胶树脂中的抗癌成分的鉴别和验证由于树脂的复杂和多组分性质而具 有挑战性。在巴西绿蜂胶中，抗癌活性主要归因于阿特匹林C (art印illan C)，而在欧洲 蜂胶树脂中，抗癌活性主要归因于咖啡酸苯乙酯（CAPE)，一种二羟基肉桂酸酯；和白杨素， 一种糖苷配基类黄酮，参看例如Sawicka等（2012) "蜂胶的抗癌活性（The anticancer activity of propolis)'，，Folia Histochemica et Cytobiologica, 50(1)，25-37。
[0004] 结肠直肠癌据报导分别是来自发达国家的女性和男性中的第二大和第三大最常 见癌症。结肠直肠癌在发达国家中更为普遍-美国、澳大利亚、欧洲以及新西兰具有最高比 率-其发病率比发展中国家高多达10倍。虽然手术可以是有效的，但早期检测对于积极的 手术结果是关键的。其它疗法主要针对寿命延长和姑息护理，因为当前化学疗法和放射疗 法治疗原发性肿瘤或在淋巴结外部的转移的功效有争论。
[0005] 咽喉癌，也称作食管癌、咽癌或喉癌，包涵在咽、鼻咽、口咽、下咽部、喉（喉头）或 扁桃体的组织中发展的肿瘤。用于咽喉癌的疗法包括手术、放射疗法或化学疗法。用于咽 喉癌的治疗可以损伤咽喉并且可能导致患者饮食、呼吸以及睡眠的方式改变。
[0006] 胃癌是世界上癌症相关死亡的第二大最常见原因。诊断常常延迟，因为症状在疾 病的早期可能不出现。用以去除胃的手术（胃切除术）是可以治愈胃癌的唯一治疗。在手 术之后的化学疗法和辐射疗法可以改善治愈的机率。
[0007] 因此，需要抗胃肠癌组合物，包括适合用于治疗或预防结肠直肠癌、胃癌以及咽喉 癌的那些和能够支持抗胃肠癌活性的维持或加强抗胃肠癌活性的那些。
[0008] 本发明的一个目的在于提供用于治疗或预防结肠直肠癌、胃癌以及咽喉癌的抗胃 肠癌组合物，包括稳定的抗胃肠癌组合物，或至少为公众提供有用的选择。
【发明内容】
[0009] 因此，在第一个方面，本发明涉及一种抗胃肠癌组合物，其包含蜂胶和环糊精，并 且特别是γ环糊精。
[0010] 在一个实施方案中，抗胃肠组合物是抗结肠直肠癌组合物。在另一个实施方案中， 抗胃肠组合物是抗胃癌组合物。在另一个实施方案中，抗胃肠组合物是抗咽喉癌组合物。
[0011] 在另一个方面，本发明涉及一种医药组合物，其包含蜂胶和γ-环糊精、基本上由 蜂胶和γ-环糊精组成、或由蜂胶和γ-环糊精组成。在一个实施方案中，这种组合物用于 维持或改善肠道健康。因此，在一个实施方案中，本发明涉及一种用于维持或改善肠道健康 的医药组合物，这种组合物包含蜂胶和环糊精、基本上由蜂胶和环糊精组成、或由蜂胶和环 糊精组成。
[0012] 在一个实施方案中，蜂胶是蜂胶树脂。在一个实施方案中，树脂是蜂胶树脂并且环 糊精是y _环糊精。
[0013] 在另一个方面，本发明涉及一种治疗或预防受试者中的胃肠癌的方法，这种方法 包括将有效量的包含蜂胶和环糊精、基本上由蜂胶和环糊精组成、或由蜂胶和环糊精组成 的组合物施用于有需要的受试者。
[0014] 在另一个方面，本发明涉及一种在受试者中抑制胃肠肿瘤形成、抑制胃肠肿瘤生 长、抑制胃肠肿瘤转移或者治疗或预防胃肠癌的方法，这种方法包括将有效量的包含蜂胶 和环糊精、基本上由蜂胶和环糊精组成、或由蜂胶和环糊精组成的组合物独立、同时或依序 施用于有需要的受试者。
[0015] 本发明的另一个方面涉及一种诱导受试者中的一种或多种赘生性胃肠细胞的凋 亡的方法，这种方法包括将有效量的包含蜂胶和环糊精、基本上由蜂胶和环糊精组成、或由 蜂胶和环糊精组成的组合物施用于有需要的受试者。
[0016] 在一个实施方案中，凋亡是胃肠肿瘤细胞，诸如结肠直肠、胃或咽喉肿瘤细胞的凋 亡。
[0017] 本发明的另一个方面涉及一种调节受试者中的一种或多种赘生性胃肠细胞的增 殖的方法，这种方法包括将有效量的包含蜂胶和环糊精、基本上由蜂胶和环糊精组成、或由 蜂胶和环糊精组成的组合物施用于有需要的受试者。
[0018] 举例来说，在一个实施方案中，调节是减少。因此，本发明涉及一种减少受试者中 的一种或多种赘生性胃肠细胞的增殖的方法，这种方法包括将有效量的包含蜂胶和环糊 精、基本上由蜂胶和环糊精组成、或由蜂胶和环糊精组成的组合物施用于有需要的受试者。
[0019] 在一个实施方案中，增殖是胃肠肿瘤细胞，诸如结肠直肠、胃或咽喉肿瘤细胞的增 殖。
[0020] 本发明的另一个方面涉及一种增加受试者对胃肠癌疗法的反应性的方法，其包括 向受试者施用包含蜂胶和环糊精、基本上由蜂胶和环糊精组成、或由蜂胶和环糊精组成的 组合物。
[0021] 本发明的另一个方面涉及一种增加受试者中的胃肠肿瘤对胃肠癌疗法的敏感性 的方法，其包括向受试者施用包含蜂胶和环糊精、基本上由蜂胶和环糊精组成、或由蜂胶和 环糊精组成的组合物。
[0022] 在另一个方面，本发明涉及一种使对治疗具抗性的一种或多种胃肠癌细胞重新敏 感的方法，这种方法包括将有效量的包含蜂胶和环糊精、基本上由蜂胶和环糊精组成、或由 蜂胶和环糊精组成的组合物施用于一种或多种胃肠癌细胞。
[0023] 在一个实施方案中，胃肠癌细胞包含存在于受试者中的肿瘤。在一个实施方案中， 胃肠癌细胞是结肠直肠癌细胞。在另一个实施方案中，胃肠癌细胞是胃癌细胞。在另一个 实施方案中，胃肠癌细胞是咽喉癌细胞。
[0024] 本发明还涉及一种至少部分逆转罹患胃肠癌的受试者中的赘生性细胞对胃肠癌 疗法的抗性的方法，这种方法包括向受试者施用包含蜂胶和环糊精、基本上由蜂胶和环糊 精组成、或由蜂胶和环糊精组成的组合物。
[0025] 本发明进一步涉及一种完全或部分逆转负荷胃肠癌的患者对胃肠癌疗法的抗性 的方法，这种方法包括向所述患者施用包含蜂胶和环糊精、基本上由蜂胶和环糊精组成、或 由蜂胶和环糊精组成的组合物的步骤。
[0026] 在另一个方面，本发明提供了一种使负荷胃肠癌的患者中对使用胃肠癌疗法的治 疗具抗性或者预测具抗性或变成抗性的一种或多种肿瘤重新敏感的方法，所述方法包括向 所述患者施用包含蜂胶和环糊精、基本上由蜂胶和环糊精组成、或由蜂胶和环糊精组成的 组合物的步骤。
[0027] 在一个实施方案中，一种或多种肿瘤对胃肠癌疗法具抗性或者预测具抗性或变成 抗性，这是由于在一种或多种肿瘤内或在患者内一个或多个癌前细胞存活信号传导路径的 活化增加，包括例如在来自患者的样品，诸如组织样品、肿瘤活检体、或血液或血浆样品内 AKT、JNK或JAK/STAT信号传导路径中的一者或多者的活化增加。
[0028] 在一个实施方案中，本发明提供了一种钝化或抑制在一种或多种肿瘤内或在患者 内一个或多个癌前细胞存活信号传导路径的方法。举例来说，本发明涉及一种钝化或抑制 在一种或多种肿瘤内AKT、JNK或JAK/STAT信号传导路径中的一者或多者的方法。
[0029] 在一个实施方案中，一种或多种肿瘤对胃肠癌疗法具抗性或者预测具抗性或变成 抗性，这是由于在肿瘤内AKT、JNK或JAK/STAT信号传导路径中的一者或多者的活化增加。
[0030] 在一个实施方案中，本发明提供了一种防止肿瘤对原发性胃肠癌疗法变成抗性的 方法，其中这种抗性至少部分由例如在肿瘤内AKT、JNK或JAK/STAT信号传导路径中的一者 或多者的活化增加来介导。
[0031] 在一个实施方案中，肿瘤对使用化学治疗剂的治疗具抗性。
[0032] 在一个实施方案中，胃肠癌是结肠直肠癌。在另一个实施方案中，胃肠癌是胃癌。 在另一个实施方案中，胃肠癌是咽喉癌。
[0033] 在另一个方面，本发明涉及一种改善肠道健康的方法，这种方法包括向有需要的 受试者施用包含蜂胶和环糊精、基本上由蜂胶和环糊精组成、或由蜂胶和环糊精组成的组 合物；并且特别是蜂胶和γ-环糊精，例如欧洲蜂胶和γ-环糊精。
[0034] 在另一个方面，本发明提供了一种协同组合物，其包含蜂胶和γ-环糊精。在一个 实施方案中，组合物是协同治疗性组合物。在一个实施方案中，组合物提供协同治疗作用。
[0035] 在一个实施方案中，蜂胶和γ -环糊精提供大于单独任一者的作用或大于单独任 一者的相加作用的协同治疗作用。举例来说，对诱导凋亡、胃肠癌细胞存活或增殖、对疗法 重新敏感、治疗或预防胃肠癌、或受试者或肿瘤对治疗方法的反应性存在更大作用。在一个 实施方案中，蜂胶和γ-环糊精允许在适当时共同施用或依序施用的胃肠癌疗法的施用在 剂量方面或在施用时长方面减小或增大。
[0036] 本发明的另一个方面涉及蜂胶和环糊精的用途，其用于制造达成如本文所描述的 目的的组合物。
[0037] 本发明的另一个方面涉及蜂胶和γ -环糊精与至少一种额外治疗剂的用途，其用 于制造达成如本文所描述的目的的组合物。
[0038] 本发明的另一个方面涉及包含蜂胶和γ-环糊精的复合物与至少一种额外治疗 剂的用途，其用于制造达成如本文所描述的目的的组合物，其中这种组合物经过配制以提 供蜂胶和γ -环糊精复合物与至少一种额外治疗剂的独立、同时或依序施用。
[0039] 本发明的另一个方面涉及一种组合物，其包含蜂胶和γ-环糊精、基本上由蜂胶 和γ-环糊精组成、或由蜂胶和γ-环糊精组成。
[0040] 本发明的另一个方面涉及一种产品，其包含蜂胶和γ-环糊精、基本上由蜂胶和 γ -环糊精组成、或由蜂胶和γ -环糊精组成，任选地与一种或多种、两种或更多种或者三 种或更多种额外治疗剂一起作为组合制剂用于达成如本文所描述的目的的同时、独立或依 序使用。
[0041] 本发明的另一个方面涉及一种本发明组合物，其用于治疗或预防胃肠癌。
[0042] 以下实施方案可以涉及上述方面中的任一者。
[0043] 在各种实施方案中，环糊精是γ-环糊精，或环糊精以包含γ-环糊精的环糊精的 组合存在。
[0044] 在一个实施方案中，环糊精是化学改性的环糊精。
[0045] 在一个实施方案中，蜂胶作为蜂胶提取物或级分存在于抗胃肠癌组合物中。
[0046] 在一个实施方案中，存在于抗胃肠癌组合物中的蜂胶不含蜡。举例来说，已经使用 本领域中已知的提取工艺使蜂胶脱蜡。
[0047] 在一个实施方案中，蜂胶是"欧洲"或"杨树"蜂胶。举例来说，"欧洲"蜂胶至少部 分来源于杨树、桦树、落叶松或柳树的一种或多种种类的芽和叶渗出物。在另一个实施方案 中，蜂胶是"巴西绿"蜂胶。举例来说，"巴西"蜂胶至少部分由蜜蜂从酒神菊树的叶渗出物 获得。
[0048] 在一个实施方案中，组合物包含约1. Owt%至约99wt%蜂胶。在一个替代性实施 方案中，组合物包含约1. 〇wt%至约99wt%蜂胶树脂。
[0049] 在各种实施方案中，组合物包含约lwt%至约99wt%蜂胶、约lwt%至约25wt% 蜂胶、约lwt%至约30wt%蜂胶、约5wt%至约25wt%蜂胶、约5wt%至约30wt%蜂胶、约 5wt%至约99wt%蜂胶、约10wt%至约25wt%蜂胶、约10wt%至约30wt%蜂胶、约10wt% 至约99wt%蜂胶、约15wt%至约25wt%、约15wt%至约30wt%、约15wt%至约99wt%、约 20wt%至约25wt%、约20wt%至约30wt%、约20wt%至约99wt%、或约25wt%蜂胶、或约 30wt%蜂胶。
[0050] 在各种实施方案中，组合物包含约lwt %至约99wt %蜂胶树脂、约lwt %至约 25wt%蜂胶树脂、约lwt%至约30wt%蜂胶树脂、约5wt%至约25wt%蜂胶树脂、约5wt% 至约30wt%蜂胶树脂、约5wt%至约99wt%蜂胶树脂、约10wt%至约25wt%蜂胶树脂、约 10wt%至约30wt%蜂胶树脂、约10wt%至约99wt%蜂胶树脂、约15wt%至约25wt%、约 15wt% 至约 30wt%、约 15wt% 至约 99wt%、约 20wt% 至约 25wt%、约 20wt% 至约 30wt%、 约20wt%至约99wt%、或约25wt%蜂胶树脂、或约30wt%蜂胶树脂。
[0051 ] 在一个实施方案中，组合物中的蜂胶被完全包封于环糊精内。
[0052] 在一个实施方案中，组合物中蜂胶与环糊精的摩尔比不大于约1:1。
[0053] 在一个实施方案中，欧洲蜂胶包含咖啡酸苯基醚酯（CAPE)。在一个实施方案中，欧 洲蜂胶包含白杨素。在一个实施方案中，欧洲蜂胶包含咖啡酸。在一个实施方案中，欧洲蜂 胶包含咖啡酸苯甲酯。在一个实施方案中，欧洲蜂胶包含短叶松素。在一个实施方案中，欧 洲蜂胶包含松属素。在一个实施方案中，欧洲蜂胶包含高良姜素。
[0054] 在各种实施方案中，欧洲蜂胶包含CAPE、白杨素、高良姜素、松属素、短叶松素、肋D 啡酸苯甲酯以及咖啡酸中的两者或更多者的任何组合。
[0055] 在一个实施方案中，欧洲蜂胶具有大于约lmg/g、约1. 5mg/g、约2mg/g、约2. 5mg/ g、约 3mg/g、约 3. 5mg/g、约 4mg/g、约 4. 5mg/g、约 5mg/g、约 5. 5mg/g、约 6mg/g、约 7. 5mg/g、 约 10mg/g、约 15mg/g、约 20mg/g、约 25mg/g、约 30mg/g、约 40mg/g、约 50mg/g、约 75mg/g、约 100mg/g、约 125mg/g、约 150mg/g、约 175mg/g、约 200mg/g、250mg/g、约 300mg/g、约 350mg/ g、约 400mg/g、约 450mg/g、约 500g/g、约 550mg/g、约 600mg/g、约 650mg/g、约 700mg/g、约 750mg/g、约 800mg/g、约 850mg/g、约 900mg/g、约 950mg/g、直至约 1000mg/g 的 CAPE 浓度。
[0056] 在一个实施方案中，欧洲蜂胶具有大于约lmg/g、约1. 5mg/g、约2mg/g、约2. 5mg/ g、约 3mg/g、约 3. 5mg/g、约 4mg/g、约 4. 5mg/g、约 5mg/g、约 5. 5mg/g、约 6mg/g、约 7. 5mg/g、 约 10mg/g、约 15mg/g、约 20mg/g、约 25mg/g、约 30mg/g、约 40mg/g、约 50mg/g、约 75mg/g、约 100mg/g、约 125mg/g、约 150mg/g、约 175mg/g、约 200mg/g、250mg/g、约 300mg/g、约 350mg/ g、约 400mg/g、约 450mg/g、约 500mg/g、约 550mg/g、约 600mg/g、约 650mg/g、约 700mg/g、约 750mg/g、约 800mg/g、约 850mg/g、约 900mg/g、约 950mg/g、直至约 1000mg/g 的松属素浓度。
[0057] 在一个实施方案中，欧洲蜂胶具有大于约lmg/g、约1. 5mg/g、约2mg/g、约2. 5mg/ g、约 3mg/g、约 3. 5mg/g、约 4mg/g、约 4. 5mg/g、约 5mg/g、约 5. 5mg/g、约 6mg/g、约 7. 5mg/g、 约 10mg/g、约 15mg/g、约 20mg/g、约 25mg/g、约 30mg/g、约 40mg/g、约 50mg/g、约 75mg/g、约 100mg/g、约 125mg/g、约 150mg/g、约 175mg/g、约 200mg/g、250mg/g、约 300mg/g、约 350mg/ g、约 400mg/g、约 450mg/g、约 500mg/g、约 550mg/g、约 600mg/g、约 650mg/g、约 700mg/g、约 750mg/g、约 800mg/g、约 850mg/g、约 900mg/g、约 950mg/g、直至约 1000mg/g 的高良姜素浓 度。
[0058] 在一个实施方案中，欧洲蜂胶具有大于约lmg/g、约1. 5mg/g、约2mg/g、约2. 5mg/ g、约 3mg/g、约 3. 5mg/g、约 4mg/g、约 4. 5mg/g、约 5mg/g、约 5. 5mg/g、约 6mg/g、约 7. 5mg/g、 约 10mg/g、约 15mg/g、约 20mg/g、约 25mg/g、约 30mg/g、约 40mg/g、约 50mg/g、约 75mg/g、约 100mg/g、约 125mg/g、约 150mg/g、约 175mg/g、约 200mg/g、250mg/g、约 300mg/g、约 350mg/ g、约 400mg/g、约 450mg/g、约 500mg/g、约 550mg/g、约 600mg/g、约 650mg/g、约 700mg/g、约 750mg/g、约 800mg/g、约 850mg/g、约 900mg/g、约 950mg/g、直至约 1000mg/g 的白杨素浓度。
[0059] 在一个实施方案中，欧洲蜂胶具有大于约lmg/g、约1. 5mg/g、约2mg/g、约2. 5mg/ g、约 3mg/g、约 3. 5mg/g、约 4mg/g、约 4. 5mg/g、约 5mg/g、约 5. 5mg/g、约 6mg/g、约 7. 5mg/g、 约 10mg/g、约 15mg/g、约 20mg/g、约 25mg/g、约 30mg/g、约 40mg/g、约 50mg/g、约 75mg/g、约 100mg/g、约 125mg/g、约 150mg/g、约 175mg/g、约 200mg/g、250mg/g、约 300mg/g、约 350mg/ g、约 400mg/g、约 450mg/g、约 500mg/g、约 550mg/g、约 600mg/g、约 650mg/g、约 700mg/g、约 750mg/g、约 800mg/g、约 850mg/g、约 900mg/g、约 950mg/g、直至约 lOOOmg/g 的咖啡酸苯甲 酯浓度。
[0060] 在各种实施方案中，组合物包含咖啡酸苯基醚酯（CAPE)、咖啡酸、松属素、咖啡酸 苯甲酯、白杨素、高良姜素以及短叶松素中的一者或多者。
[0061] 在例示性实施方案中，组合物是已经添加有CAPE、咖啡酸、松属素、咖啡酸苯甲酯、 白杨素、高良姜素以及短叶松素中的一者或多者的组合物。
[0062] 在一个实施方案中，组合物具有大于约1、2、3、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、 60、70、75、80、90、100、125、150、175、200、250、300、350、400、450、500、600、700、800、900 或 999mg/g的CAPE浓度，并且适用范围可以在这些值中的任一者之间选择（例如，约1至约 5、约1至约10、约2至约20、约5至约20、约5至约25、约10至约25、约10至约40、约15 至约100、或约20至约999mg/g)。
[0063] 在一个实施方案中，组合物具有大于约1、2、3、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、 60、70、75、80、90、100、125、150、175、200、250、300、350、400、450、500、600、700、800、900 或 999mg/g的松属素浓度，并且适用范围可以在这些值中的任一者之间选择（例如，约1至约 5、约1至约10、约2至约20、约5至约20、约5至约25、约10至约25、约10至约40、约15 至约100、或约20至约999mg/g)。
[0064] 在一个实施方案中，组合物具有大于约1、2、3、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、 60、70、75、80、90、100、125、150、175、200、250、300、350、400、450、500、600、700、800、900 或 999mg/g的高良姜素浓度，并且适用范围可以在这些值中的任一者之间选择（例如，约1至 约5、约1至约10、约2至约20、约5至约20、约5至约25、约10至约25、约10至约40、约 15至约100、或约20至约999mg/g)。
[0065] 在一个实施方案中，组合物具有大于约1、2、3、5、10、15、20、25、30