一种药物组合物及其用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及3-(3' -羟基丁基）异苯并呋喃-(3H)-酮和2-莰醇药物组合物。以 及该药物组合物在预防和治疗脑缺血疾病、在治疗和预防痴呆疾病药物中的应用。其中 3-(3' -羟基丁基）异苯并呋喃-(3H)-酮和2-莰醇是其消旋体化合物或其光学活性化合 物。
【背景技术】
[0002] 脑缺血病具有发病率高、致残率和死亡率大等特点，是危害人类生命健康的常见 病和多发病，因此寻找抗缺血性药物引起了国内外学者的广泛关注。
[0003] 丁苯酞又名芹菜甲素，最初发现于芹菜籽中，其药效学特点涵盖了很多方面作用： 1、能改善缺血脑能量代谢；2、明显缩小大鼠局部脑缺血脑梗塞面积，改善神经功能缺失； 3、改善局部脑缺血引起的脑水肿；4、对缺血区局部脑血流和软脑膜微循环有明显改善作 用；5、能显著改善局部脑缺血引起的记忆障碍。
[0004] 目前市场上已经有丁苯酞软胶囊、丁苯酞氯化钠注射液等产品上市。适应症为治 疗轻、中度急性缺血性脑卒中。
[0005] 文献报道（王春华等：丁基苯酞在大鼠中代谢产物的研究《药学学报》1997， 32(9) :641-646)，丁苯酞在体内主要转化成两种代谢产物3-(3' -羟基丁基）异苯并呋 喃-(3H)-酮和3-(2' -羟基丁基）异苯并呋喃-(3H)-酮。
[0006] 在尿中丁苯酞原形与代谢产物的比值约为9:91，脑组织中原型药与代谢产物的比 值约为44:56,但脑中的代谢产物只有3-(3' -羟基丁基）异苯并呋喃-(3H)-酮。
[0007] 3- (3 ' -羟基丁基）异苯并呋喃-(3H)-酮含有两个手性碳分子，所以3- (3 ' -羟基 丁基）异苯并呋喃-(3H)-酮有消旋体化合物和光学活性化合物存在形式。
[0008] 3- (3' -羟基丁基）异苯并呋喃-(3H)-酮：
[0010] (3S，3' S)(3' -羟基丁基）异苯并咲喃-(3H)-丽：
[0011]
[0012] (3S，3' R)(3' -羟基丁基）异苯并咲喃-(3H)-丽：
[0014] (3R，3' S)(3' -羟基丁基）异苯并咲喃-(3H)-丽：
[0016] (3R，3' R)-3-(3' -羟基丁基）异苯并呋喃-(3H)-酮：
[0018] (3S)-3_(3' -羟基丁基）异苯并呋喃-(3H)-酮：
[0019]
[0020] (3R) -3- (3 ' -羟基丁基）异苯并呋喃-(3H)-酮：
[0022] (3' S)-3_(3' -羟基丁基）异苯并呋喃-(3H)-酮：
[0024] (3' R)-3-(3羟基丁基）异苯并呋喃-(3H)-酮
[0026] 2-莰醇是中国传统中药（龙脑）中的主要成分，2-莰醇分为消旋体、右旋异构体、 左旋异构体。作为传统常用中药，冰片具有开窍醒神，清热止痛的功效，在中药中常作为"引 药"应用。目前2-莰醇消旋体、右旋异构体、左旋异构体分别可以由提取纯化和化学合成得 到。
[0027] (±)_2_ 莰醇：
[0033] 现有技术中未见将3_(3' -羟基丁基）异苯并呋喃-(3H)-酮和2-莰醇或其各自 光学活性化合物作为活性成分同时使用的报道。
【发明内容】
[0034] 在进行药物研究时，发明人惊喜的发现，2-莰醇对3_(3' -羟基丁基）异苯并呋 喃-(3H)-酮有良好的增效作用，将3- (3 ' -羟基丁基）异苯并呋喃-(3H)-酮、2-莰醇两者 进行配伍，具有良好的疗效，两者联合使用，疗效远高于单独使用3-(3羟基丁基）异苯并 呋喃-(3H)-酮。于是发明人经过大量的创造性劳动，反复推理、验证、改进完成了本发明。
[0035] 本发明的目的一方面在于提供一种药用组合物，其包括3- (3 ' -羟基丁基）异苯并 呋喃-(3H)-酮、2-莰醇和药学上可接受的载体。
[0036] 作为本发明进一步的改进，所述3_(3' -羟基丁基）异苯并呋喃-(3H)-酮是其消 旋体化合物或其光学活性化合物。
[0037] 作为本发明进一步的改进，所述2-莰醇是其消旋体化合物或其光学活性化合物。
[0038] 本发明的另一个目的在于提供包含制备预防和治疗脑缺血疾病、治疗和预防痴呆 疾病药物中的应用。
[0039] 本发明的有益效果是：3_(3' -羟基丁基）异苯并呋喃-(3H)_酮、2-莰醇两者的 配伍，根据药效试验结果，针对脑缺血疾病、治疗和预防痴呆疾病治疗中，两者具有显著增 加药效的协同作用。
【具体实施方式】
[0040] 为更好地说明本发明，以下将结合动物实验数据以实施例的方式对本发明做进一 步的详细说明，给出本发明的实施细节，但是不应被认为是对本发明的限制。
[0041] 实施例1 :对局灶性脑缺血再灌损伤的保护作用
[0042] I. 1材料与方法
[0043] 1. 1. 1实验动物
[0044] Sprague-Dawley(SD)大鼠，雄性，清洁级，体重 260_290g。
[0045] I. 1. 2 方法
[0046] I. 1. 2. 1脑缺血模型的制备
[0047] 采用颈内动脉线栓法制备大脑中动脉阻塞（Middle cerebral artery occlusion，MCA0)脑缺血再灌注模型。动物用7%水合三氯乙酸（6ml/kg)麻醉后，俯卧位 固定于手术台上，消毒皮肤，颈部正中切开，分离右侧颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉，轻轻 剥离迷走神经，结扎并剪断颈外动脉，循颈内动脉向前，结扎翼腭动脉。夹闭颈总动脉近心 端，从颈外动脉的结扎线的远端作一切口，插入外径为0. 285mm的尼龙线，进过颈总动脉分 叉进入颈内动脉，然后徐徐插入至有轻微阻力为止（自分叉处约20_)，阻断大脑中动脉的 所有血供，右侧脑缺血2. Oh后，轻轻拔出尼龙线，恢复血供进行再灌注，缝合皮肤，消毒。
[0048] I. 1. 2. 2 给药
[0049] 制备脑缺血模型后，将动物机率均等单盲分配至各实验组。动物于再灌注后立即 静脉给药1次，模型组动物给予等体积的生理盐水。脑缺血后24小时评价神经缺陷症状， 而后处死动物，取脑，染色，拍照测定脑梗死面积。
[0050] I. 1. 2. 3动物分组与给药剂量
[0051]
[0052] 表1
[0053] I. I. 2. 4神经缺陷症状评分及脑梗死面积的测定
[0054] 采用改良Bederson5分制法进行神经缺陷症状评价。采用单盲法评价脑缺血后大 鼠的神经缺陷症状，即由试验设计者将动物按组标记，对神经缺陷症状进行评分的试验者 不知道动物的分组情况，评分结束后，评分者将各种标记的评分结果呈交设计者，由设计者 揭盲，获得各试验组每只动物的评分。
[0057] 脑梗死程度的测定，动物处死后，断头取脑，去除嗅球、小脑和低位脑干，用生理 盐水冲洗大脑表面血迹，吸去表面残留水迹，于-20°C放置20min，取出后立即于视线交 叉平面垂直向下作冠状切面，并向后每隔2mm切一片，将脑片置于2% TTC染液中孵育 (37°C 90min)，正常脑组织染成深红色，缺血脑组织则呈苍白色，用生理盐水冲洗后，迅速将 脑片从前向后按顺序排成一排，吸干表面残留水迹，拍照。
[0058] 照片用图像分析软件处理，根据公式计算左脑相应的体积以及梗死灶体积，求出 梗死灶百分比。
[0059] 梗死体积计算法：
[0060] V = t (A^A2+A3+............+An)
[0061] t为切片厚度，A为梗死面积。
[0062] % I = 100% X (VC-VL)/VC
[0063] % I为梗死体积百分比，VC为对照侧（左脑半球）脑体积，VL为梗死侧（右脑半 球）非梗死区域体积。
[0064] I. L 2. 5统计学分析
[0065] 定量资料表示为均值土标准差。脑梗死面积和神经缺陷症状评分采用单因素方 差分析，Scheffe' s检验测定两组间的差异显著性。将差异P〈0. 05定义为差异显著。
[0066] 1. 2实验结果
[0067] L 2. 1对神经缺陷症状的影响
[0068] 神经缺陷症状的程度见表3,与模型组相比，各复方组均能显著改善神经缺陷症 状。（3S，3' S)-3-(3' -羟基丁基）异苯并呋喃-(3H)-酮组、3-(3' -羟基丁基）异苯并 呋喃-(3H)-酮组两单方与模型组比较，虽有改善神经缺陷症状的趋势，但效果不及各复方 组；（±)-2-莰醇组、（+)-2-莰醇组、（-)-2-莰醇组三个单方组改善神经缺陷症状不明显。
[0071] 其中，X土SD，*，与模型组相比，ρ〈0· 05。
[0072] 1. 2. 2对脑梗塞面积的影响
[0073] 对脑梗塞面积的影响见表