药性分离物MRSA的估计的组合(n = 3)PD5〇值为83.4mg/kg。在这 种金黄色葡萄球菌全身感染的鼠模型中，新纳米混悬液的体内效能与现有技术的历史制剂 的效能处于相同的范围。
[0268] ^16:全身小鼠感染模型对MSSA的组合结果(η = 3)
Luz/u」 X 4只初彻仕;^久W九过程T囚与斗〈切·九兀大的保囚夕匕ΙΕ 0271 ] ^17 :全身小鼠感染模型对抗MRSA的组合结果(η = 3)
[0273] * -些动物因与本研究无关的原因死亡
[0274]
[0275] 本发明的新纳米混悬液在鼠全身感染模型中提供对MSSA和MRSA的显著防护作用， 其中与化合物(I)的现有技术的历史制剂相比存活百分比类似。
[0276] 实施例17-针对金黄色葡萄球菌的体内中性白细胞减少症的小鼠大腿感染模型
[0277] 本研究的目的在于使用中性白细胞减少症的小鼠大腿感染模型比较现有技术的 历史制剂与本发明的新纳米混悬液针对金黄色葡萄球菌的敏感性(MSSA)和甲氧西林抗药 性(MRSA)菌株的体内效能。
[0278] 越
[0279] 进行7次独立的研究。由过夜平板培养物制备金黄色葡萄球菌分离物并且重新混 悬至通过光密度证实的预先确定的浓度。通过制备的接种物的CFU计数确定最终接种物浓 度。对于每次研究，每个剂量组分配4只18-20克的⑶-1雌性小鼠，并且通过在-4和-1天时的 2次连续剂量的环磷酰胺（150和100mg/kg)使得它们的中性白细胞减少。通过肌内注射给小 鼠注射0.1 mL的细菌混悬液。感染后90分钟，通过静脉内施用治疗小鼠。恰好在剂量递送前 新鲜制备本发明的纳米混悬液（根据实施例3制备），给小鼠施用50mg/kg、100mg/kg和 200mg/kg的化合物（I)。通过IV递送一剂量的现有技术历史制剂和万古霉素并且用作对比 物。给感染对照小鼠施用盐水。
[0280]
[0281 ]针对敏感性分离物MSSA，本发明的纳米混悬液与化合物（I)的现有技术的历史制 剂具有相同的活性，其中在l〇〇mg/kg的生物负荷量减少为0.611ogl0CFU/大腿(n=l)。针对 抗性分离物MRSA，本发明的纳米混悬液与化合物（I)的现有技术的历史制剂具有相同的活 性，其中在1〇〇11^/1^的生物负荷量减少为0.791吨1(^?1]/大腿(11 = 1)。
[0282]
[0283] 本发明的新的纳米混悬液与化合物(I)的现有技术的历史制剂相比在中性白细胞 减少症的小鼠大腿感染模型中对MSSA和MRSA提供类似的效能。
[0284] 实施例18-体内组织分布研究
[0285] 在雄性Sprague Dawley大鼠中进行组织分布研究，以便与现有技术的历史制剂比 较化合物(I)的血浆、肝、心脏、肺、皮肤和骨中的药代动力学(PK)特性。给动物施用200mg化 合物(I)/kg现有技术的历史制剂(F3)或本发明的纳米混悬液(Fl和F2)，作为在尾静脉内单 一 10分钟输注施用。
[0286] 所施用的3种制剂如下且将结果概括在下表18中：
[0287] 制剂#1 (Fl):基本上根据实施例3制备本发明的纳米混悬液，其包含在5 %PVP 12PF 中的 ％ · 9mg 化合物（I) /mL。
[0288] 制剂#2(F2):基本上根据实施例8制备本发明的纳米混悬液，其包含在5%PVP K12 中的88mg化合物（I) /mL。
[0289] 现有技术历史制剂(F3):基于环糊精的复合物，其为包含在20%HPBCD和1%葡萄 糖中的10.28mg化合物（I) /mL的浓缩物。
[0290] ^18 :单一 10分钟静脉内输注200mg/kg化合物（I)制剂（10mg/mL)后化合物⑴的 平均大鼠药代动力学参数
[0292] 观察到现有技术的历史制剂与本发明的药物水性纳米混悬液相比在血浆和组织 中的暴露较高，因为历史制剂与本发明的药物水性纳米混悬液相比的血浆清除率减半，导 致血浆暴露较高。观察到制剂Fl(通过湿磨法制备-实施例3)和F2(通过受控沉淀法制备-实 施例8)在血浆和组织暴露方面几乎等同。
[0293] 然而，尽管本发明的纳米混悬液具有低于现有技术的历史制剂的血浆浓度，但是 在与现有技术的历史制剂比较时，本发明的药物水性纳米混悬液在所有基体中的总组织_ 血浆分配系数均较高，正如可以从下表19中观察到的。发现制剂1和2在这方面几乎等同。
[0294]表19:3种制剂的大鼠组织-血浆分配系数
[0296] 这暗示本发明的药物水性纳米混悬液提供比现有技术的历史制剂更好的进入组 织的渗透性，由此能够以较低浓度施用制剂。
[0297] 在本说明书和如下的权利要求的上下文中，除非上下文中另有要求，否则措词'包 含'和变化形式例如'含有'和'包括'应当被理解为包含所述的整体、步骤、整体组或步骤 组，但不排除任意其它整体、步骤、整体组或步骤组。
【主权项】
1. 药物水性纳米混悬液，其包含纳米颗粒形式的4-(4-乙基-5-氟-2-羟基苯氧基)-3-氟苯甲酰胺和稳定剂。2. 根据权利要求1的药物水性纳米混悬液，其中所述稳定剂是表面活性剂或表面活性 剂聚合物。3. 根据权利要求2的药物水性纳米混悬液，其中所述稳定剂是聚乙烯吡咯烷酮。4. 根据权利要求1-3任一项的药物水性纳米混悬液，其基本上不含环糊精。5. 根据权利要求1 _4任一项的药物水性纳米混悬液，其中该纳米混悬液的体积中位直 径(Dv (0 · 50))约为0 · 050μπι-约 0 · 600μπι。6. 根据权利要求1-5任一项的药物水性纳米混悬液，其中4-(4-乙基-5-氟-2-羟基苯氧 基)-3_氟苯甲酰胺在该纳米混悬液中的浓度至少为20mg/mL，例如至少30mg/mL、至少40mg/ mL、至少50mg/mL、至少60mg/mL、至少70mg/mL 或至少80mg/mL。7. 根据权利要求1-6任一项的药物水性纳米混悬液，还包含张度调节剂。8. 根据权利要求7的药物水性纳米混悬液，其中所述张度调节剂选自NaC 1、甘露醇和葡 萄糖。9. 根据权利要求1-8任一项的药物水性纳米混悬液，其具有约250m0sm/kg-约350m0sm/ kg、例如约280m0sm/kg-约320m0sm/kg的重量摩尔渗透压浓度。10. 根据权利要求1-9任一项的药物水性纳米混悬液，其中该纳米混悬液是等渗的。11. 根据权利要求1 -1 〇任一项的药物水性纳米混悬液，其中该纳米混悬液对用至多 40kGy的γ射线照射保持稳定。12. 根据权利要求1 -10任一项的药物水性纳米混悬液，其中该纳米混悬液在2 5 °C和 60%RH可稳定地储存至多6周。13. 根据权利要求1-12任一项的药物水性纳米混悬液，其用于胃肠外施用。14. 根据权利要求13的药物水性纳米混悬液，其用于静脉内施用。15. 根据权利要求1-14任一项的药物水性纳米混悬液，还包含一种或多种另外的药物。16. 根据权利要求15的药物水性纳米混悬液，其中另外的药物是抗菌剂。17. 根据权利要求16的药物水性纳米混悬液，其中抗菌剂选自碳青霉烯类、氨基糖苷 类、多黏菌素类、甘氨酰环素、利福平和舒巴坦。18. 根据权利要求1-17任一项的药物水性纳米混悬液，可通过对颗粒4-(4-乙基-5-氟-2-羟基苯氧基)-3-氟苯甲酰胺在水中的混悬液进行湿磨得到。19. 根据权利要求1-17任一项的药物水性纳米混悬液，可通过对4-(4-乙基-5-氟-2-羟 基苯氧基)-3-氟苯甲酰胺的纳米颗粒进行受控沉淀得到。20. 根据权利要求1-19任一项的药物水性纳米混悬液，其用于疗法。21. 根据权利要求1-19任一项的药物水性纳米混悬液，其用于治疗微生物感染。22. 根据权利要求1-19任一项的药物水性纳米混悬液在制备用于治疗微生物感染的药 物中的用途。23. 治疗微生物感染的方法，包括对受试者施用治疗有效量的根据权利要求1-19任一 项的药物水性纳米混悬液。24. 用于根据权利要求21的药物水性纳米混悬液、根据权利要求22的用途或根据权利 要求23的治疗方法，其中所述微生物感染是由如下微生物对人或动物造成的感染:金黄色 葡萄球菌(Staphylococcus aureus)，包括多元抗药株，例如甲氧西林敏感的金黄色葡萄球 菌(MSSA)、抗甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、万古霉素-中间体金黄色葡萄球菌(VISA)和 万古霉素耐药性金黄色葡萄球菌(VRSA)菌株、鲍氏不动杆菌(Acinetobacter baumannii)、 炭疽芽抱杆菌(Bacillus anthracis)、肺炎衣原体(Chlamydophila pneumoniae)、大肠杆 菌（Escherichia coli)、流感嗜血菌（Haemophilus influenzae)、幽门螺杆菌 (Helicobacter pylori )、肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae)、脑膜炎奈瑟球菌 (Neisseria meningitides)、淋病奈瑟球菌(Neisseria gonorrhoeae)、中间葡萄球菌 (S · intermedius)、P .mul toe i da、支气管败血性产喊菌(Β· bronchi sept ica)、溶血性曼氏杆 菌(M.haemolytica)和大叶性肺炎放线杆菌(A.pleuropneumoniae)和另外的细菌，例如结 核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)或其它微生物，例如恶性症原虫(Plasmodium falciparum)〇25. 用于制备药物水性纳米混悬液的方法，包含下列步骤： (a) 制备包含颗粒4-(4-乙基-5-氟-2-羟基苯氧基)_3_氟苯甲酰胺和稳定剂的水性混 悬液;和 (b) 研磨步骤(a)的水性混悬液，形成纳米颗粒4-(4-乙基-5-氟-2-羟基苯氧基)-3-氟 苯甲酰胺。26. 根据权利要求25的方法，其中所述稳定剂是表面活性剂或表面活性剂聚合物。27. 根据权利要求26的方法，其中所述稳定剂是聚乙烯吡咯烷酮。28. 根据权利要求25-27任一项的方法，其中步骤(b)包含将研磨介质添加到所述混悬 液中、然后置于滚筒式粉碎机上的步骤。29. 根据权利要求25-28任一项的方法，其中得到的纳米颗粒形式的4-(4-乙基-5-氟_ 2-羟基苯氧基)-3-氟苯甲酰胺具有约0.050μπι-约0.600μπι的体积中位直径(DvO. 5)。30. 根据权利要求25-29任一项的方法，其中基本上根据实施例1或实施例2的方法制备 步骤(a)中的4- (4-乙基_5_氣_2_羟基苯氧基)_3_氣苯甲酰胺。31. 根据权利要求30的方法，其中步骤(a)中的4-(4-乙基-5-氟-2-羟基苯氧基)-3-氟 苯甲酰胺具有基本上如图1中所示的XRH)图。32. 可通过根据权利要求25-31任一项的方法得到的药物水性纳米混悬液。33. 用于制备药物水性纳米混悬液的方法，包含下列步骤： (i) 将4-(4-乙基-5-氟-2-羟基苯氧基)-3-氟苯甲酰胺溶于有机溶剂； (ii) 将步骤(i)的溶液添加到稳定剂溶于水的溶液中，同时维持均匀溶液； (i i i)搅拌步骤(i i)的溶液;和 (iv)将步骤(iii)的溶液缓慢地添加到冷水中，形成纳米颗粒形式的4-(4-乙基-5-氟-羟基苯氧基)-3_氣苯甲酰胺。34. 根据权利要求33的方法，其中步骤(i)的有机溶剂是乙酸乙酯。35. 根据权利要求33或根据权利要求34的方法，其中所述稳定剂是表面活性剂或表面 活性剂聚合物。36. 根据权利要求35的方法，其中所述稳定剂是聚乙烯吡咯烷酮。37. 根据权利要求33-36任一项的方法，其中步骤（i i i)在约30°C-约50°C、适合地约40 °(：的温度下进行。38. 根据权利要求33-37任一项的方法，其中步骤（iv)在约0 °C-约5 °C、适合地约2°C的 温度下进行。39. 根据权利要求33-38任一项的方法，其中得到的纳米颗粒形式的4-(4-乙基-5-氟_ 2-羟基苯氧基)-3-氟苯甲酰胺具有约0.050μπι-约0.600μπι的体积中位直径(DvO. 5)。40. 根据权利要求25-39任一项的方法，还包含添加张度调节剂的步骤。41. 根据权利要求40的方法，其中所述张度调节剂选自NaCl、甘露醇和葡萄糖。42. 根据权利要求25-41任一项的方法，其中所述纳米混悬液是等渗的。43. 根据权利要求2 5 -41任一项的方法，其中所述纳米混悬液具有约2 5 OmO sm/kg-约 350m0sm/kg、例如约280m0sm/kg-约320m0sm/kg的重量摩尔渗透压浓度。44. 可通过根据权利要求33-43任一项的方法得到的药物水性纳米混悬液。
【专利摘要】特别地提供包含纳米颗粒形式的(i)4-(4-乙基-5-氟-2-羟基苯氧基)-3-氟苯甲酰胺和稳定剂的药物水性纳米混悬液。
【IPC分类】A61K9/00, A61K31/166, A61P31/04, A61K9/107, A61K45/06, A61K47/32, A61K47/26
【公开号】CN105705145
【申请号】CN201480059220
【发明人】V·盖鲁斯, C·毛泽, 戴克 F·范, D·阿梅耶
【申请人】Fab药物股份公司
【公开日】2016年6月22日
【申请日】2014年8月29日
【公告号】EP3038613A1, US20160206577, WO2015028637A1