制备睾酮及其酯的新的酶促方法与流程

技术特征：

1.一种通过式(II)的睾酮酯的酶促水解来制备式(I)的睾酮的方法：

在式(II)中，R是C1-C9直链或支链烷基或C3-C9环烷基或支链环烷基，所述方法的特征在于所述酶是来自于特异腐质霉(Humicola insolens)的脂肪酶，其中编码所述特异腐质霉脂肪酶的DNA序列被遗传修饰或未被遗传修饰，或者所述酶是来自于南极假丝酵母A(Candida Antarctica A)的脂肪酶。

2.根据权利要求1的方法，其中所述特异腐质霉脂肪酶由宿主细胞产生，其中所述宿主细胞是米曲霉(Aspergillus oryzae)。

3.根据权利要求2的方法，其中所述来自于米曲霉的脂肪酶是51032。

4.根据权利要求1至3任一项的方法，其中所述来自于特异腐质霉的脂肪酶是角质酶。

5.根据权利要求1至4任一项的方法，其中在所述式(II)的睾酮酯中，R是C1-C6直链或支链烷基，或者是C7支链环烷基。

6.根据权利要求1至5任一项的方法，其中R是甲基、乙基、3-环戊基乙基、2-甲基丁基、正己基或正壬基。

7.根据权利要求1至6任一项的方法，其中相比于式(II)的化合物使用约10至约40体积的缓冲溶液体积。

8.根据权利要求1至7任一项的方法，其中所述方法在约35℃至约70℃的温度进行。

9.根据权利要求1至8任一项的方法，其中：

-所述温度为约70℃，并且pH为约7.0，或者

-所述温度在约50℃至约70℃之间，并且pH在约7.0至约8.5之间，或者

-所述温度为约35℃，pH在约7.0至约10.0之间，并且缓冲溶液的量为约10体积。

10.根据权利要求1至9任一项的方法，其中在所述式(II)的睾酮酯中R是乙基，以及所述酶是51032。

11.根据权利要求1至10任一项的方法，其中所述式(II)的睾酮酯的制备：

其中R是C1-C9直链或支链烷基，或者是C3-C9环烷基或支链环烷基，

通过式(I)的睾酮的酯化来进行：

12.脂肪酶用于式(II)化合物的酶促水解以提供式(I)的睾酮的用途：

其中R是C1-C9直链或支链烷基，或者是C3-C9环烷基或支链环烷基，

其中所述脂肪酶是来自于特异腐质霉的脂肪酶，其中编码所述特异腐质霉脂肪酶的DNA序列被遗传修饰或者未被遗传修饰，或者是来自于南极假丝酵母A的脂肪酶。

13.根据权利要求12的用途，其中所述来自于特异腐质霉的脂肪酶是51032。

14.根据权利要求12至13任一项的用途，其中在所述式(II)的化合物中，R是乙基。

15.一种用于制备式(III)的睾酮酯的方法：

其中R是C1-C9直链或支链烷基，或者是C3-C9环烷基或支链环烷基，

所述方法包括下列步骤：

a)根据权利要求1至9任一项制备式(I)的睾酮的方法；

b)式(I)的睾酮的酯化反应：

以提供式(III)的睾酮酯。

16.权利要求15的方法，其中在所述式(III)的睾酮酯中，R是乙基、3-环戊基乙基、2-甲基丁基、正己基或正壬基。

17.根据权利要求15或16的方法，其中在用于进行步骤a)的起始原料式(II)的睾酮酯中，R是乙基。