一种抗BEX2单克隆抗体的制备和应用的制作方法

文档序号:12639572阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种抗BEX2单克隆抗体,由保藏编号为CCTCC No:C201709的杂交瘤细胞株分泌产生。

2.一种杂交瘤细胞株,其保藏编号CCTCC No:C201709。

3.一种如权利要求1所述的抗BEX2单克隆抗体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

a)针对BEX2的编码框氨基酸全序列,序列如SEQ ID NO:1所示,进行全基因合成,并将序列连接到表达载体中;鉴定阳性克隆,提取及表达菌转化;大量诱导表达生产;Ni磁珠亲和纯化,经纯化,得到蛋白抗原用于免疫;

b)将上述蛋白抗原作为免疫原免疫小鼠;

c)获取免疫小鼠的脾细胞,与小鼠骨髓瘤细胞融合;

d)经多轮筛选出反应阳性的细胞克隆,作为生产抗BEX2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株;

e)在免疫小鼠体内接种杂交瘤细胞获得腹水抗体,将腹水进行纯化,得到鼠来源的所述的抗BEX2的单克隆抗体。

4.如权利要求3所述的抗BEX2单克隆抗体的制备方法,其特征在于,所述的步骤a中的表达载体为PET28a;表达菌为大肠杆菌。

5.如权利要求3所述的抗BEX2单克隆抗体的制备方法,其特征在于,所述的步骤a中通过添加终浓度为0.1-1mmol/L的IPTG诱导工程菌产生BEX2蛋白。

6.一种如权利要求1所述的抗BEX2单克隆抗体在制备用于检测BEX2的免疫检测试剂或试剂盒中的应用。

7.一种如权利要求2所述的杂交瘤细胞株在在制备用于检测BEX2的免疫检测试剂或试剂盒中的应用。

8.如权利要求6或7所述的应用,其特征在于,所述的免疫检测试剂或试剂盒为Western Blot或免疫组化检测试剂或试剂盒。

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