4)的抗体中和VEGF是临床 批准的治疗，从而抑制癌症或诸如AMD的其他血管生成疾病。然而，甚至当联合化学治疗给 予时已经发现对VEGF阻断的抗性。该抗性可以与重塑的脉管系统和其他生成血管因子的 增加的表达相关。
[0025] 相对于仅结合配体之一（VEGF-A)的Avastin，预期抗-KDR抗体预防所有已知的 VEGF与VEGFR2/KDR的结合。相比与仅阻断VEGF-A，这可具有对于肿瘤血管生成的更意义 深远的抑制作用。可能的是，在Avastin抗性的情况下使用抗-KDR抗体的治疗可以为有效 的。靶向KDR超过VEGF的潜在优势概述在表1中。
[0026] 表1.靶向KDR的抗体治疗超过VEGF的优势
[0027]
【主权项】
1. 一种结合KDR的分离的抗体、或其抗原-结合片段，包含：（i)包含SEQ ID N0:3或11 表示的VHCDRl区、SEQ ID NO:4或12表示的VHCDR2区、和SEQ ID NO:5表示的VHCDR3区 的重链可变区；以及（ii)包含SEQ ID N0:6表示的VLCDRl区、SEQ ID N0:7表示的VLCDR2 区、和SEQ ID N0:8表示的VLCDR3区的轻链可变区； 或所述抗体的变体、或其抗原-结合片段，包含重链和轻链可变区，除了在所述CDR区 中高达8种氨基酸取代外，所述重链和轻链可变区与（i)和（ii)的所述重链和轻链可变区 相同。
2. 权利要求1所述的分离的抗体、或其抗原-结合片段，其中所述重链可变区包含SEQ ID NO: 1表示的氨基酸序列。
3. 权利要求1所述的分离的抗体、或其抗原-结合片段，其中所述轻链可变区包含SEQ ID NO:2表示的氨基酸序列。
4. 一种结合KDR的分离的抗体、或其抗原-结合片段，包含：（i)包含如图11所示抗体 的VHCDR1、VHCDR2、和VHCDR3的重链可变区；以及（ii)包含如图11所示抗体的VIXDR1、 VLCDR2、和VLCDR3的对应的轻链可变区； 或所述抗体的变体、或其抗原-结合片段，包含重链和轻链可变区，除了在所述CDR区 中高达8种氨基酸取代外，所述重链和轻链可变区与（i)和（ii)的所述重链和轻链可变区 相同。
5. 权利要求4所述的分离的抗体、或其抗原-结合片段，其中所述重链可变区包含SEQ ID NO: 17-42表示的氨基酸序列的任意一种。
6. 权利要求4所述的分离的抗体、或其抗原-结合片段，其中所述轻链可变区包含SEQ ID N0:43-68表示的氨基酸序列的任意一种。
7. -种结合KDR的分离的抗体、或其抗原-结合片段，包含重链可变区，所述重链可变 区包含SEQ ID NO: 1表示的氨基酸序列。
8. 权利要求7所述的分离的抗体、或其抗原-结合片段，包含轻链可变区，所述轻链可 变区包含与SEQ ID N0:2表示的氨基酸序列具有至少90% -致性的氨基酸序列。
9. 权利要求7所述的分离的抗体、或其抗原-结合片段，包含轻链可变区，所述轻链可 变区包含SEQ ID N0:2表示的氨基酸序列。
10. -种结合KDR的分离的抗体、或其抗原-结合片段，包含轻链可变区，所述轻链可变 区包含SEQ ID N0:2表示的氨基酸序列。
11. 权利要求10所述的分离的抗体、或其抗原结合片段，包含重链可变区，所述重链可 变区包含与SEQ ID NO: 1表示的氨基酸序列具有至少90%-致性的氨基酸序列的氨基酸序 列。
12. 权利要求1所述的分离的抗体，其中所述抗体为人源化的。
13. 权利要求12所述的分离的抗体，其中VH区包含SEQ ID N0:9表示的氨基酸序列， 以及VL区包含SEQ ID NO: 10表示的氨基酸序列。
14. 权利要求1所述的分离的抗体，其中所述抗体选自单链抗体、ScFv、缺乏铰链区的 单价抗体、和微型抗体。
15. 权利要求1所述的分离的抗体，其中所述抗体是Fab或Fab'片段。
16. 权利要求1所述的分离的抗体，其中所述抗体是F(ab'）2片段。
17. 权利要求1所述的分离的抗体，其中所述抗体是整个抗体。
18. 权利要求1所述的分离的抗体，包含人IgG恒定结构域。
19. 权利要求18所述的分离的抗体，其中所述IgG恒定结构域包含IgGl CHl结构域。
20. 权利要求18所述的分离的抗体，其中所述IgG恒定结构域包含IgGl Fc区。
21. -种分离的抗体、或其抗原-结合片段，所述分离的抗体、或其抗原-结合片段与权 利要求1所述抗体竞争与人KDR的结合。
22. -种分离的抗体、或其抗原-结合片段，所述分离的抗体、或其抗原-结合片段以 5. 3x10-1 IM或更低的KD结合KDR。
23. -种分离的抗体、或其抗原-结合片段，其中所述分离的抗体、或其抗原-结合片 段： a. 阻断VEGF与KDR的结合； b. 抑制KDR信号传递； c. 抑制内皮细胞增殖； d. 抑制肿瘤血管生成； e. 抑制肿瘤细胞生长； f. a.-e.中任一项或多项的组合。
24. 权利要求23所述的分离的抗体或其抗原-结合片段，其中所述分离的抗体或其抗 原-结合片段阻断VEGF与KDR的结合；抑制KDR信号传递；抑制内皮细胞增殖；抑制肿瘤 血管生成；和抑制肿瘤细胞生长。
25. -种分离的抗体或其抗原-结合片段，所述分离的抗体或其抗原-结合片段直接抑 制肿瘤生长。
26. 权利要求1、4、或2U22-25中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体与鼠 KDR或 非人灵长类KDR交叉反应。
27. -种根据权利要求1或权利要求13编码所述分离的抗体、或其抗原-结合片段的 分离的多核苷酸。
28. -种表达载体，包含权利要求24所述分离的多核苷酸。
29. -种分离的宿主细胞，包含权利要求28所述的载体。
30. -种组合物，包含生理上可接受的媒介物和药学上有效量的根据权利要求1、13、 或21-26中任一项所述分离的抗体或其抗原-结合片段。
31. 权利要求30所述组合物在制备用于治疗患者的癌症的药物的用途。
32. 权利要求30所述组合物在制备用于治疗患者的具有与畸变的VEGF或KDR表达或 活性相关的癌症的药物的用途。
33. 权利要求32所述的用途，其中所述癌症选自：血管肉瘤、肾细胞癌、胃肠癌、转移性 胃或胃食管连接部腺癌、乳癌、膀胱癌、肝细胞癌、结肠直肠癌、前列腺癌、非小细胞肺癌、成 神经细胞瘤、卵巢癌、黑素瘤、复发性多形性成胶质细胞瘤、和白血病。
34. 权利要求30所述组合物在制备用于治疗患者的炎性疾病的药物的用途。
35. 权利要求30所述组合物在制备治疗患者的类风湿性关节炎的药物的用途。
36. 权利要求30所述组合物在制备治疗患者的银肩病的药物的用途。
37. 权利要求30所述组合物在制备治疗患者的血管生成-介导的疾病的药物中的用 途D
38.权利要求37所述的用途，其中所述患者患有年龄-相关的黄斑变性。
【专利摘要】本发明提供抗-KDR单克隆抗体和相关的组合物，可将其用在用于治疗各种癌症、类风湿性关节炎、糖尿病性视网膜病和与畸变的VEGF或KDR表达和/或活性相关的其他疾病的各种治疗方法的任一种中。
【IPC分类】A61P35-02, A61K39-395, C07K16-28, A61P27-02, A61P17-06, A61P35-00, C12N15-13, A61P29-00
【公开号】CN104650229
【申请号】CN201510002351
【发明人】柯耀煌, 李森伟, 张永克, 余国良, 朱伟民
【申请人】埃派斯进有限公司
【公开日】2015年5月27日
【申请日】2012年3月12日
【公告号】CN103087192A, CN103087192B