, 56. 28, 55. 85, 53. 51, 30. 27, 29. 69, 29. 42, 27 .48, 25. 97 ；HRMS (ESI-TOF) (m/z) [M+H]+calcd for C39H50N012724. 3328, found724. 3307
[0036] 2d :m. p. 84-86°C !1H NMR(400Hz, CDCl3) : δ 7. 78 (s, 1H, 5-ArH-), 7. 09 (s, 1H, 8-ArH -),6.97(d，J = 7.6Hz，lH，6，-ArH-),6.85-6.79(m，2H，2，，5，-ArH-),6.10(s，lH，7，-C H2-)，6. 05 (s，1H，7，-CH2-)，5. 51-5. 41 (m，2H，3a-CH2_)，4. 84 (d，J = 7. 6Hz，1H，I " -CH-)，4 ? 07 (s，3H，6-OMe)，4. 02-3. 98 (m，2H，2 "，5 " -CH-)，3. 88-3. 86 (m，1H，5 " -CH-)，3. 81 (s，3H，7 -OMe)，3. 68 (s，3H，3 " -OMe)，I. 66-1. 63 (m，2H，-CH2-)，3. 50 (s，3H，4" -OMe)，3. 49-3. 46 (m，I H，-CH2-)，3. 39-3. 24 (m，1H，-CH2-)，3. 24 (t，J = 8. 8Hz，1H，4" -CH2-)，3. 08 (t，J = 10. 0Hz， 1H，3 " -CH-)，2. 96 (s，1H，-CH-)，2. 89 (s，2H，-CH2-)，2. 61-2. 55 (m，6H，3 X -CH2-)，2. 38-2. 3 4 (m，2H，-CH2-)，2. 00 (s，1H，-OH-)，I. 73-1. 68 (m，2H，-CH2-)，I. 39-1. 32 (m，8H，4 X -CH2-)，13C NMR(CDCl3) : δ 169. 78, 151. 83, 150. 19, 147. 52, 144. 26, 136. 20, 130. 85, 130. 41，130. 39, I 28. 36, 126. 92, 123. 62, 123. 56, 119. 28, HO. 73, HO. 67, 108. 20, 106. 30, 104. 66, 101. 24, I 00. 88, 85. 49, 81. 68, 79. 52, 73. 84, 67. 27, 63. 54, 61. 00, 59. 26, 58. 82, 58. 42, 57. 64, 56. 28 ,55. 83, 52. 73, 52. 51, 30. 27, 29. 40, 27. 51, 26. 50, 25. 96 ；HRMS (ESI-TOF) (m/z) [M+H]+calcd for C41H55N2012767. 3750, found767. 3751.
[0037] 2e :m. p. 106-107°C !1H NMR(400Hz, CDCl3) : δ 7. 78(s, 1H, 5-ArH-)，7. 09(s, 1H, 8-A rH-),6. 97 (d, J = 6.0Hz, -ArH-), 6. 84-6. 79 (m, 2H, 2; ,5' -ArH-), 6. 09 (s, 1H, 7; -CH2-)，6. 06 (s, 1H, 7，-CH2-)，5. 51-5. 42 (m, 2H, 3a-CH2_)，4. 85 (d, J = 7. 6Hz, 1H, I " -CH-) ，4. 07 (s, 3H, 6-OMe)，4. 02-3. 99 (m, 2H, 2 "，5 " -CH-)，3. 89-3. 85 (m, 1H, 5 " -CH-)，3. 81 (s, 3H， 7-OMe)，3. 67 (s，3H，3 " -OMe)，3. 49 (s，3H，4 " -OMe)，3. 41-3. 36 (m，2H，-CH2-)，3. 24 (t，J = 8.8Hz，lH，4"-CH2-)，3.06(t，J=11.2Hz，lH，3"-CH-)，2.81(d，J = 7.6Hz，lH，-CH-)，2. 30 (s，2H，-CH2-), I. 93-1. 69 (m，8H，4 X-CH2-), I. 48-1. 26 (m，12H，6 X-CH2-) ;13C NMR(CDCl3) :δ 169. 95, 151. 86, 150. 22, 147. 51, 144. 34, 136. 17, 130. 83, 130. 22, 128. 36, 127. 01, 123. 63, 123. 56, 119. 19, HO. 73, HO. 66, 108. 20, 106. 28, 104. 63, 101. 25, 100. 97, 85. 40, 81. 60 ,79. 47, 73. 75, 67. 31, 63. 53, 60. 99, 58. 80, 57. 37, 56. 29, 53. 83, 48. 47, 30. 47, 30. 24, 29. 2 8, 29. 26, 29. 08, 26. 88, 25. 90, 24. 02 ；HRMS (ESI-TOF) (m/z) [M+H]+calcd for C41H54N012752. 3641, found752. 3648.
[0038] 2f :m. p. 122-123? !1H NMR(400Hz, CDCl3) : δ 7. 78(s, 1H, 5-ArH-)，7. 09(s, 1H, 8-A rH-)，6.95(d，J = 7.6Hz，lH，6，-ArH-)，6.85-6.79(m，2H，2，，5，-ArH-)，6.10(s，lH，7， -CH 2-)，6.05(s，lH，7，-CH2-)，5.51-5.42(m，2H，3a-CH2-)，4.85(d，J = 7.2Hz，lH，l"-CH-)，4. 07 (s，3H，6-0Me)，4. 03-3. 99 (m，2H，2 "，5 " -CH-)，3. 89-3. 86 (m，1H，5 " -CH-)，3. 81 (s，3H ，7-0Me)，3. 67 (s，3H，3 " -OMe)，3. 49 (s，3H，4 " -OMe)，3. 41-3. 36 (m，2H，-CH2-)，3. 23 (t，J = 8. 4Hz，1H，4 " -CH2-)，3. 07 (t，J = 11. 2Hz，1H，3 " -CH-)，2. 96 (s，2H，-CH2-)，2. 89-2. 85 (m ，4H，2 X-CH2-), I. 87-1. 69 (m，6H，3 X-CH2-), I. 94-1. 39 (m，12H，6 X-CH2-) ;13C NMR(CDCl3): δ 169. 77, 151. 83, 150. 20, 147. 49, 144. 33, 136. 12, 130. 81，130. 18, 128. 36, 126. 97, 123. 6 I, 123. 54, 119. 20, HO. 71, HO. 65, 108. 17, 106. 27, 104. 59, 101. 22, 100. 95, 85. 36, 81. 58, 79. 45, 73. 72, 67. 23, 63. 51, 60. 97, 58. 78, 57. 43, 56. 28, 55. 84, 53. 06, 31. 43, 30. 21, 29. 23 ,29. 01, 26. 82, 25. 89, 23. 51, 22. 56, 22. 17 ；HRMS (ESI-TOF) (m/z) [M+H]+calcd for C41H54NO1 !736. 3691, found736. 3673.
[0039] 式（I)化合物具有重要的生物活性，体外对人结肠癌细胞（HCT-116)，人乳腺癌细 胞（MCF-7)，人肺腺癌细胞（A549)，人肝癌细胞（HepG2)，人子宫颈癌细胞（Hela)、人胃癌细 胞株（MKN45)、人肾癌细胞（Ketr-3)、人口腔鳞癌细胞（KB)共八种肿瘤细胞的细胞毒活性 试验表明：此类式（1)所示结构的Cleistanthin-A的衍生物对肿瘤细胞生长具有抑制作 用，可发展成为新的防治肿瘤药物。
[0040] 为了更好地理解本发明的实质，下面分别用该类式⑴所示结构的 Cleistanthin-A的衍生物对八种肿瘤细胞株的生长的抑制作用的药理实验结果，说明其在 抗肿瘤药物研究领域中的新用途。药理实施例给出了代表性化合物的部分活性数据。必须 说明，本发明的药理实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质 对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护的范围
[0041] 药物实施例1 :化合物2a对的人结肠癌细胞HCT-116细胞毒活性
[0042] HCT-116细胞用RPMI1640培养基培养，培养基中含有10 %的胎牛血清，lOOU/mL青 霉素和lOOU/mL的链霉素。细胞以每孔5 X IO3的浓度加入到96孔板中，在37°C含有5% CO2的潮湿空气的培养箱中培养24小时。
[0043] 取对数生长期细胞接种于96孔板，24h贴壁后加入不同浓度的药物，每个浓度设4 个平行孔，培养68h后加入四甲基偶氮唑盐（MTT)溶液，继续培养4 h，弃去培养液，加入二 甲亚砜150 μ L，振荡10min，用酶标仪测定570nm吸收度（A)值，计算半数抑制浓度（IC5。）。 化合物2a的IC m为I. 5 X 10 9M,而阳性对照紫杉醇对HCT-116细胞的IC5。为2. I X 10 9M。
[0044] 实验结论此类式（1)所示结构的Cleistanthin-A衍生物对HCT-116细胞具有较 强的细胞毒活性，有可能发展成为新的具有抗肿瘤作用的药物。
[0045] 下表为根据与以上实施例1的方法检测以下实施例化合物的细胞毒活性。
[0046]
[0047] 从以上药理实施例中我们可以看出这些化合物对这八种肿瘤细胞都显示了较强 的细胞毒活性，细胞毒活性超过或与阳性对照紫杉醇相当，可开发成抗肿瘤药物。
【主权项】
1. 通式（I)所示的Cleistanthin-A衍生物及其医学上可接受的盐： 其中：n = 5-8， R可独立的选自吗晰、N-氨基吗晰、居己基脈嗦、N-甲基脈嗦、脈巧、4-居基脈巧、3-居 基脈巧、4-脈巧基脈巧、四氨化咯。2. 下列分子式所示的Cleistanthin-A衍生物及其医学上可接受的盐：3. 根据权利要求1或2所述的Cleistanthin-A衍生物的制备方法，其特征是： A. 由Cleistanthin-A与氨氧化钢、相应的二漠焼姪在二甲亚讽中反应得到漠烷基 Cleistanthin-A, B. 然后在与无水碳酸钟、相应的杂环在N，N'-二甲基甲醜胺中反应而得到， 反应式如下：其中n = 6-8， R为4-居基脈巧、N-甲基脈嗦、居己基脈嗦、4-居基脈巧、吗晰、脈巧。4.根据权利要求1所述的Cleistanthin-A衍生物在制备防治口腔上皮癌、胃癌、肾癌、 结肠癌、肺癌、肝癌、子宫颈癌及乳腺癌的药物中的应用。
【专利摘要】本发明公开了涉及式(I)所示的山荷叶素糖苷Cleistanthin-A的衍生物、其几何异构体、及其药学上可接受的盐。本发明还涉及制备式(I)化合物的方法。这些衍生物被发现具有较强的抑制肿瘤细胞生长活性，可作为抗肿瘤药物用途。
【IPC分类】C07H17/04, C07H1/00, A61P35/00
【公开号】CN105503978
【申请号】CN201410555794
【发明人】赵育, 陆亚鹏, 朱俐
【申请人】南通大学
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2014年10月19日