C下，在MD-5020光子技术国际分光光度计 上记录巧光光谱数据。
[0173] 对本文描述的化合物的合成重要的是1当量合适的醒例如，6与1.1当量合适的丙 二酸衍生物例如，7的诺文葛尔缩合(BCnSvenagel condensation)，参见反应方案1。该反应 通过赃晚（10%)催化并在回流的THF中在21小时内完成。参见X.H.化611，2.1.211曰〇，￥丄111， P. Lu，Y.G.Wang'ChemiStry Letters 2008,37:570-571;M.A.Haidekker，T.P.Brady， D.Lichlyter?E.A.Theodorakis?Journal of the American Chemical Society 2006(美 国化学会期刊2006)，128:398-399。在硅胶上的标准层析纯化后，W高产率分离目标产物8 (表2)。反应方案1的试剂和条件：（a)1.0当量6，1.1当量7,0.1当量贼晚，1'耶，50它，21小时。
[0174] 反应方案I.
[0175]
[0176] 表2.化合物8a-8d的结构和产率 「01771
[0178] 通过使用8当量的裡化赃晚处理商购甲氧基糞甲醒9和产生的醒10与氯基醋7的诺 文葛尔缩合合成糞系化合物11 (反应方案2，29 %的总产率）。参见H.M. Guo，F. Tanaka, J.Org.Chem. 2009，74:2417-2424。反应方案2试剂和条件：（a)8.0当量赃晚的苯/HMPA: 1/1， 0°(：，8.0当量118祉1，01：，15111111，然后1.0当量9,251：，12小时，35%;(6)1.0当量10，1.1当量 7，0.1当量赃晚，THF，50°C，21小时，82%。在一些实施反应方案中，R 4、R哺Ris能相应于上述 R4、R5 和 Ris。
[0179] 反应方案2.
[0180]
[0181] 通过醒6a与a-氯基醋12的缩合，随后是缩丙酬单元的酸催化的脱保护制备化合物 14(反应方案 3,68%总产率）。参见M.A.化idekker，T.P.化ady，S.H.化alian，W.Akers， D 丄ichlyter，E. A. Ilieodorakis，Bioorg. Chem. 2004，32:274-289。反应方案3试剂和条件： (日）1.0当量6日，1.1当量12,0.1当量赃晚，1'册，50°(：，21小时，91%;(6)1.5111111〇113,0.10邑 DOWEX-H+，1:1 THF/MeOH，25 °C，20小时，75 %。
[0182] 反应方案3.
[0183]
[0184] W四步法合成二苯乙締系化合物19,其包括：（a)将节漠15转化为憐酸醋16; (b)16 与醒6a的化rner-Emmons締化W形成17; (C)漠化物17的裡化和甲酯化W产生醒18; W及(d) 产生的醒18与氯基醋7的诺文葛尔缩合(反应方案4,42%总产率）。参见H.Meier, E.Ka巧址， H.C.Ho1St,Eur，J.Org. Qiem.2006，2609-2617;L.Viau，0.Maury，H.Le Bozec，Tetr址e化on Lett. 2004,45:125-128。反应方案4试剂和条件：（a) 1.0当量15,15当量亚憐酸S乙醋，90 1：，19小时，98%;(6)1.0当量16，1.0当量化畑16，1.0当量6曰，过量01。，25°(：，24小时，74%; (。）1.0当量17，1.0当量11-8祉1，1.33当量01。，1'邸，-78°(：，60%;((1)1.0当量18，1.1当量7， 0.1当量赃晚，THF, 50°C，21小时，97%。反应方案4中的R哺R2特定用于反应方案4并不意图 相应于上述Ri和R 2。
[0185] 后而古宝4
[0186]
12 实施例la.化)-2-(2-(2-甲氧基乙氧基）乙氧基）乙基2-氯基-3-(4-(二甲基氨基） 苯基）丙締酸醋（8曰）。98% ;黄色固体;Ih NMR(400MHz，CDCl3)S8.07(s，lH)，7.93(d，2H，J = 9.0Hz)，6.69(d，2H，J=9.1Hz)，4.41(m，2H)，3.81-3.79(m，2H)，3.73-3.65(m，6H)，3.56-3.54(m，2H)，3.37(s，3H)，3.10(s，6H) ;i3c 匪R(100MHz，CDCl3)Sl64.2，154.7，153.6, 134.1,119.3,117.4,111.4,93.6,71.9,70.8,70.6,70.5,68.9,65.0,59.0,40.0;HRMS计算 值Cl姐26化Os (M)+362.1836求得值362.1841。 2 实施例1b.化）-2-(2-(2-甲氧基乙氧基）乙氧基）乙基2-氯基-3-(4-(二甲基氨 基)-2-甲氧基苯基)丙締酸醋(86)。98%的产率;黄色固体;4醒3(4001化，〔0(：13)88.64(3， lH)，8.39(d，lH，J = 9.2Hz)，6.63(dd，lH，J = 2.3Hz，J = 9.2Hz)，6.01(s，lH)，4.40(m，2H)， 3.87(s，3H)，3.81-3.78(m，2H)，3.73-3.65(m，6H)，3.56-3.53(m，2H)，3.36(s，3H)，3.10(s, 6H);UC 匪R(400MHz，CDCl3)Sl65.0，162.2，155.9，148.5，131.3，118.4，109.7，105.4, 93.0，92.0，72.2，71.1，70.9，70.8，69.2，65.1，59.3，55.6，40.4;HRMS计算值C20出sN2〇6(M+ Na)+415.1840求得值415.1836。
[0189] 实施例ic.(Z)-2-(2-(2-甲氧基乙氧基）乙氧基）乙基2-氯基-3-(4-(二乙基氨基） 苯基)丙締酸醋(8。）。90%的产率;澄色液体;4醒1?(4001化，〔0(：13)88.05(8，1^，7.92((1， 2H、J = 9.1Hz)，6.67(d，2H、J = 9.2Hz)，4.42(m，2H)，3.82-3.79(m，2H)，3.73-3.72(m，2H), 3.69-3.65(m，4H)，3.57-3.54(m，2H)，3.45(q，4H，J = 7.1Hz)，3.37(s，3H)，1.23(t，細J = 7. IHz);1化醒RdOOMHz，CDC13)S164.7,154.8,151.9,1：34.8,119.0,117.8,111.4,93.0， 72.2,71.1，70.9,70.8,69.2,65.2,59.3,45.0，12.8;册15计算值〔2证3〇的〇5(]?+化）+ 413.2047求得值413.2053。
[0190] 实施例ld.(Z)-2-(2-(2-甲氧基乙氧基）乙氧基）乙基-2-氯基-3-(4-(二下基氨 基)苯基）丙締酸醋（8(1)。78% 的产率;黄色液体;iHNMR(400MHz，CDCl3)S8.00(s，lH)，7.87 (d,2H J = 9.0Hz),6.60(d,2H J = 9.2Hz),4.38(m,2H),3.78-3.76(m,2H),3.71-3.69(m, 2H)，3.66-3.62(m，4H)，3.53-3.51(m，2H)，3.34-3.30(m，7H)，1.57(m，4H)，1.34(m，4H)， 0.94(1，細，1 = 7.3化）；1化醒尺（1001化，〔0(：13)8164.7，154.7，152.2，1：34.6，118.9，117.9， 111.5,92.8,72.1,71.0,70.8,69.1,65.2,59.2,51.1,29.5,20.4,14.1; HRMS 计算值 C2 己出 8N2〇5(M+Na)+469.2673求得值469.2677。
[0191] 实施例le. 6-(赃晚-I-基)-2-糞甲醒（10)。在(TC下，通过注射器向包含苯(3mL)、 HMPA(3mL)和赃晚（1.65ml，16.7mmol)的50ml 圆底烧瓶加入n-BuLi (1.6M的己烧，10.4mL， 16.7mmol)。在揽拌15分钟后，使用6-甲氧基-2-糞甲醒（390mg，2.09mmol)的苯:HMPA 1:1 (2ml)溶液处理反应混合物。将反应混合物升溫至室溫，保持揽拌12小时，然后将其倾入冷 却的5 %化Cl水溶液(30ml)。使用乙酸(3 X 20mL)萃取混合物，在MgS〇4上干燥并浓缩。通过 快速层析（20%Et0Ac的己烧)纯化产物W产生化合物9。9:35%的产率，黄色固体；Ih醒R (300MHz，CDCl3)Sl0.02(s，lH)，8.14(s，lH)，7.88-7.73(m，2H)，7.67(d，lH，J=8.6Hz), 7.32(dd，lH，J = 2.5Hz，J = 9.1Hz)，7.08(d，lH，J = 2.4Hz)，3.42-3.32(m，4H)，1.85-1.57 (m，6H);Uc NMR(100MHz，CDCl3)Sl92.2，152.2，138.8，l：M.7，131.6，130.7，127.5，126.5， 123.6，119.7，109.0,49.8,25.8,24.6;HRMS计算值Cl6Hl7N0(M+H^240.1383求得值 240.1387。
[0192] 实施例1f.化)-2-(2-(2-甲氧基乙氧基）乙氧基）乙基-2-氯基-3-(6-(赃晚-I-基） 糞-2-基)丙締酸醋（11)。82%的产率;红色液体;Ih NMR(400MHz，CDCl3)S8.30(s，lH)，8.22 (d，lH J=1.2Hz)，8.10(dd，lHJ=1.8Hz J = 8.細z)，7.76(d，lHJ = 9.2Hz)，7.65(d，lHJ =8.細z)，7.29(dd，lHJ = 2.4HzJ = 9.2Hz)，7.05(d，lHJ = 2.2Hz)，4.47(m，2H)，3.85-3.82(m,2H),3.74-3.66(m,6H),3.57-3.54(m,2H),3.42-3.38(m,4H),3.37(s,3H),1.74-1.67(m，6H);Uc 醒R(100MHz，CDCl3)Sl63.4，155.5，151.9，137.8，l：M.7，130.6，127.3， 126.4，126.0，125.7，119.3，116.4，108.4，98.7，71.9，70.8，70.6，70.5，68.8，65.4，59.0， 49.4，25.5，24.3; HRMS 计算值 C26出 2化 Os (M+H) +453.2384求得值453.2390。
[0193] 实施例lg.(2,2-二甲基-I，3-二氧戊环-4-基）甲基2-氯基乙酸醋（12)。在(TC下， 向2-氯基乙酸（1.02邑，12111111〇1)溶液滴加乙缩醒（2,2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基）甲醇 (1.32g，1 Ommo 1)的5ml 的DCM和DMAP(6Img，0.50mmo 1)。最终，加入邸C 1.86g(12mmo 1)并将 反应混合物在(TC下揽拌6小时。使用15mL的DCM稀释反应并将形成的DCU过滤除去。在无水 MgS化上干燥滤液并在减压下去除溶剂。通过快速层析（己烧:EtOAc; 10:1)纯化残留物W产 生化合物12。12:71 % 的产率；无色液体；lHNMR(400MHz，CDCl3)M.：M-4.32(m，lH)，4.28-4.17(m，2H)，4.07(dd，lH，J = 6.5Hz，J = 8.5Hz)，3.75(dd，lH，J = 5.8Hz，J = 8.5Hz)，3.51 (S，2H)，1.41 (S，3H)，1.34(S，3H);HRMS计算值C曲i3N(k(M+H)+200.0923求得值200.0931。
[0194]实施例化.化)-(2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基）甲基2-氯基-3-(4-(二甲基氨 基)苯基)丙締酸醋（13)。向包含醒6曰(0.75旨，5.0111111〇1)和化合物12(1.2旨，5.5111111〇1)的201111 的THF溶液的圆底烧瓶加入0. SOmmol的赃晚并将混合物在50°C下加热。在减压下浓缩粗混 合物并通过快速层析（10-30 %乙酸乙醋的己烧)纯化产物W产生化合物13。13 :91 %的产 率；黄色固体；iHNMR(400MHz，CDCl3)S8.08(s，lH)，7.94(d，2H，J = 9.0Hz)，6.69(d，2H，J = 9.2Hz)，4.42-4.29(m，3H)，4.13(dd，lH J = 6.2Hz J = 8.6Hz)，3.89(dd，lH J = 5.9Hz J = 8.5Hz)，3.11(s，6H)，1.46(s，3H)，1.38(s，3H);i3CMlR(400MHz，CDCl3)Sl64.3，155.3， 153.9,134.5,119.5,117.5,111.7,110.I,93.3,73.7,66.7,65.6,40.3,26.9,25.7;HRMS计 算值 Cl 抽 22N2(k(M+H)+331.1658求得值331.1691。
[01M]实施例li.化)-2,3-二径基丙基2-氯基-3-(4-(二甲基氨基)苯基)丙締酸醋（14)。 将化合物13(0.5g，1.5mmol)溶于THF/MeOH( 1:1)的混合物并加入DOWEX-H+树脂(0.1 Og)并 将不均匀混合物揽拌20小时。通过过滤去除DOWEX-r树脂并加入S乙胺（50mg，0.5mmol)， 在减压下去除溶剂。通过快速层析（100%乙酸)纯化残留物W产生化合物14。14:75%的产 率;亮黄色固体；Ih NMR(400MHz，CDCl3)S8.08(s，lH)，7.94(d，2H，J = 9.1Hz)，6.69(d，2H，J =9.2Hz)，4.42-4.32(m，2H)，4.05(m，lH)，3.80-3.70(m，2H)，3.12(s，6H);UCNMR(100MHz， CDC13)S199.0,164.8,155.5,154.0,1:34.6,119.4,117.9,111.8,111.7,92.8,70.3,70.2， 66.9，66.8，63.6，63.5，40.3，40.2; HRMS 计算值 Cl 出 i8N2〇4(M+H)+291.1：M5 求得值 291.1361。
[0196] 实施例1j. 4-漠苄基亚憐酸二乙醋（16)。在圆底烧瓶中将I-漠-4-(漠甲基）苯 (5.0旨，20111111〇1)和亚憐酸^乙醋（51血，300111111〇1)混合和并在90°(：下回流19小时。在减压下 去除过量的亚憐酸S乙醋并通过快速层析（1:1己烧/EtOAc)纯化产物W产生化合物16。16: 98% 的产率；无色液体；Ih 匪 R(400MHz，CDCl3)S7.30(d，2H，J = 7.5Hz)，7.05(d，2H，J = 7.6Hz)，3.99-3.88(m，4H)，2.99(s，lH)，2.94(s，lH) ,1.12(t，6H，J = 6.9Hz) ;i3c 匪R (lOOMHz, CDCb )8131.7,131.6,131.5,121.0,62.3,34.0,32.0,16.5; HRMS 计算值 Cii化泌r〇3P(M+H)+307.0097求得值307.0093。
[0197] 实施例1k.化)-4-(4-漠苯乙締)-N，N-二甲基苯胺（17)。将DMF(无水）（10.5mL)加 入至甲醇钢（176mg，3.26mmo 1)并且颜色变为粉红色。向上述溶液滴加4-漠苄基亚憐酸二乙 醋（1.0邑，3.26111111〇1)的01尸(6.51111)，时间为2分钟，随后滴加4(二甲基氨基)苯甲醒(486111邑， 3.26mmol)。将反应混合物在室溫下揽拌24小时。加入去离子水（17mL)。通过真空过滤滤出 产物并使用DCM/己烧重结晶W产生化合物17。17 : 74 %的产率；黄褐色固体；Ih匪R (400MHz，CDCl3)S7.47-7.32(m，6H)，7.04(d，lH，J=12.5Hz)，6.83(d，lH，J=16.3Hz)，6.71 (d，2H，J = 8.9Hz ),2.99( S，6H);i3c 匪 RdOOMHz ,CDCb) 8150.5,137.4,136.1,132.1， 131.8,129.7,128.3,128.2,127.9,127.7,125.5,123,2,120.3,112.6,40.7 ;HRMS 计算值 Cl姐I泌rN 302.0541 求得值302.0539。
[019引实施例11. 4-(4-(二甲基氨基）苯乙締）苯甲醒（18)。向圆底烧瓶转移化合物17 (300mg，Immol )，随后是THF(SmL)。将不均匀溶液在-78°C下冷却并滴加 n-BuLi (1.6M的己 烧，Immol)，时间为5分钟，随后滴加 DMF( 1.5mL)。将反应混合物在-78°C下揽拌3小时，然后 通过水（ImL)将其泽灭并使用使用乙酸(2X25mL)萃取混合物。使用盐水洗涂合并的有机萃 取物，在MgS04上干燥并在减压下浓缩W产生化合物18。18:60 %的产率;黄色粉末;Ih醒R (400MHz,CDCl3)59.96(s,lH),7.83(d,2HJ = 8.2Hz),7.60(d,2H J = 8.2Hz),7.44(d,2H J =8.細z)，7.22(d，lHJ=16.2Hz)，6.94(d，lHJ=16.2Hz)，6.72(d，2HJ = 8.Wz)，3.01 (s，6H);Uc NMR(100MHz，CDCl3)Sl91.8,150.8,144.7,1:34.7,1:34.6,132.7,130.4,128.4， 126.4，124.9，122.8，112.4，40.5; HRMS计算值Cl讯 17N0 化2.1384求得值化2.1383。
[0199] 实施例1m.化)-2-(2-(2-甲氧基乙氧基）乙氧基）乙基-氯基-3-(4-(4(二甲基氨 基)苯乙締)苯基）丙締酸醋（19)。97%的产率;红色固体;111醒1?(4001化，〔0(：13)88.20(3， lH)，7.98(d，2H，J = 8.4Hz)，7.57(d，2H，J = 8.4Hz)，7.45(d，2小时，J = 8.7Hz)，7.20(d，lH， J = 16.2Hz)，6.92(d，lH J=16.2Hz)，6.72(d，2H J = 8.7Hz)，4.47(m，2H)，3.84-3.82(m， 2H)，3.74-3.72(m，2H)，3.70-3.66(m，4H)，3.57-3.55(m，2H)，3.37(s，3H)，3.02(s，6H);Uc NMR(100MHz,CDCl3)5l54.9,133.0,132.2,128.6,128.5,126.7,122.7,112.4,72.2,71.1, 70.8,69.0,65.8,59.3,40.6,40.5,29.9,28.2;HRMS计算值C27出2N2O5(M+Na)+487.2203求得 值487.2201。
[0200] 实施例2.化合物27-33的化合物合成。在下列实施例2a-2o中提供本文描述的化合 物的分析结果。
[0201] -般注解。W最高商业质量获得所有试剂并使用而不需进一步纯化，除非另外注 明的情况下。通过注射器或不诱钢套管转移空气和水分敏感的液体和溶液。在约20mmHg下， 在低于45°C下，通过旋转蒸发浓缩有机溶液。所有非水性反应均在无水条件下进行。除非另 外规定，产率是指色谱和光谱（Ih NMR，"C NMR)均质物质。通过0.25mm Dynamic Adsorbents, Inc.硅胶板(60F-254)上进行的薄层色谱(TLC)监测反应并在UV光下显影和/ 或通过浸入10 %乙醇憐钢酸(PMA)溶液并加热显影。将Dynamic Adsorbents, Inc.硅胶(60， 粒度0.040mm-0.063mm)用于快速层析。在Varian MercuiT 400MHz、300MHz和/或Unity 500MHz仪器上记录NMR光谱并使用残留的非気代溶剂作为内标标准化。将下列缩写用于说 明多重性:S =单峰、d =双重峰、t = S重峰、q=四重峰、m =多重峰、b =宽峰。在电喷雾离子 化化SI)或电子轰击化I)条件下的VG 7070服质谱仪上记录高分辨率质谱化RMS)。
[0202] 在反应方案5中描述用于合成包括化合物27-33的本文描述的化合物的一般策略。 W两步法将商购6-漠糞-2-簇酸甲醋（20)转化为相应的糞甲醒21 :a)通过使用DIBAL聞尋醋 还原为伯醇和b)在使用PCC处理后将醇氧化为醒。Granzhan，A. ;Teulade-Fichou，M.-P.， Te化ahe化on 2009,65,（7) ,1349-1360。漠化物转化为合适的胺需要使用新化学W提高产 率并W更大规模应用所述方法。在大多数情况下，使用Buchwald和化Kwig条件在钮的存在 下处理漠化物21^高产率产生醒22-25。6肥日111，4.5.;1?61111613，1?.4.;811地*日1(1，5丄.， Angew.畑em.Int.Ed.Engl.1995，34，（12)，1348-1350;Wolfe,J.PBuchwald,S.L.， J.Org.Qiem.2000,65,（4)，1144-1157;Ha;rtwig,J.F.,Accounts Chem.Res.2008,41，（11)， 1534-1544。醒22-25和合适的氯基醋26的诺文葛尔缩合决定最终探针(probe)27-32的合 成。Sutharsan,J.;LichIyter,D.;Wright,N.E.;Dakanali,MHaidekker,M.A.; 化6〇(1〇^1^3,6.4.^6化址6化〇11 2010,66，（14)，2582-2588。通过使用酸性树脂使探针32 中的乙缩醒脱保护，产生最终的染料33。表3概述了最终产物的R、X组合W及缩合产率。
[0203] 反应方案5.用于合成探针27-33的一般策略
[0204]
[0205] 表3. AP结合探针的结构和产率
[0206]
[0207] 实施例2a. 6-漠-2-糞甲醒（21)。在氣气下，在(TC下，向DIBAl^-Hd.OM的庚烧， 34mL，34mmol)溶液滴加20 (3. Ogr，1 Immol)的无水THF溶液。使反应混合物升溫至室溫并保 持揽拌过夜。完成后，加入MeOH,随后是饱和酒石酸钟钢溶液和乙酸乙醋。在将两相分离后， 使用饱和氯化锭溶液和盐水洗涂有机相，在MgS化上干燥