射光谱，结果见图2，随着对硝基苯酚浓度的增加，量子点荧光信号强度^15nm)基本保持不变，而外层分子印迹层与对硝基苯酚结合后，导致外层碳点(455nm)的荧光强度逐渐降低。根据双发射峰(455nm和615nm)的荧光强度之比建立标准曲线，结果见图3。对比标准曲线，根据待测溶液的荧光强度比
1.93，可知待测溶液中对硝基苯酚的浓度为3.56 μ g/mL，与高效液相色谱的测试结果相一致，证明本方法的测量结果准确。
[0036]实施例2
[0037](I)包覆量子点的荧光二氧化硅纳米粒子的制备；
[0038]采用已公开中国专利(授权公告号:CN102757790B和CN1306002C)的方法，制得包覆量子点的荧光二氧化硅纳米粒子。
[0039](2)硅氧烷功能化碳点的制备；
[0040]采用已公开中国专利(公开号:CN103421495A)的方法，制得硅氧烷功能化碳点。
[0041](3)核壳式双发射荧光二氧化硅纳米粒子的制备；
[0042]取5mg步骤(I)所得包覆量子点的荧光二氧化硅纳米粒子超声分散在10mL无水甲苯中，向其中加入15 μ L步骤(2)所得的硅氧烷功能化碳点，搅拌均匀后加热至回流温度，反应16h后，离心分离产物，得到5.9mg核壳式双发射荧光二氧化硅纳米粒子的固体粉末。
[0043](4)核壳式双发射分子印迹二氧化硅纳米粒子的制备；
[0044]取5mg步骤(3)所得核壳式双发射荧光二氧化硅纳米粒子溶于10mL乙醇，向其中加入0.25mg对硝基苯酸，搅拌2h。之后，加入25 μ L正娃酸乙酯和25 μ L氨水，室温下反应3h，离心后用乙醇清洗产物，得到核壳式双发射分子印迹二氧化硅纳米粒子的固体粉末。
[0045](5)核壳式双发射分子印迹二氧化硅纳米粒子用于检测对硝基苯酚
[0046]取5mg步骤(4)所得核壳式双发射分子印迹二氧化硅纳米粒子溶于10mL乙醇中，向其中分别加入浓度为O?14 μ g/mL的对硝基苯酚标准溶液和待测溶液，混合均匀后室温反应1min后测定体系在350nm激发波长下的荧光发射光谱，随着对硝基苯酚浓度的增加，量子点荧光信号强度^15nm)基本保持不变，而外层分子印迹层与对硝基苯酚结合后，导致外层碳点(455nm)的焚光强度逐渐降低。根据双发射峰(455nm和615nm)的焚光强度之比建立标准曲线。对比标准曲线，根据待测溶液的荧光强度比，可知待测溶液中对硝基苯酚的浓度。
[0047]实施例3
[0048](I)包覆量子点的焚光二氧化娃纳米粒子的制备；
[0049]采用已公开中国专利(授权公告号:CN102757790B和CN1306002C)的方法，制得包覆量子点的荧光二氧化硅纳米粒子。
[0050](2)硅氧烷功能化碳点的制备；
[0051]采用已公开中国专利(公开号:CN103421495A)的方法，制得硅氧烷功能化碳点。
[0052](3)核壳式双发射荧光二氧化硅纳米粒子的制备；
[0053]取5mg步骤(I)所得包覆量子点的荧光二氧化硅纳米粒子超声分散在75mL无水甲苯中，向其中加入10 μ L步骤(2)所得的硅氧烷功能化碳点，搅拌均匀后加热至回流温度，反应12h后，离心分离产物，得到5.8mg核壳式双发射荧光二氧化硅纳米粒子的固体粉末。
[0054](4)核壳式双发射分子印迹二氧化娃纳米粒子的制备；
[0055]取5mg步骤(3)所得核壳式双发射荧光二氧化硅纳米粒子溶于75mL乙醇，向其中加入0.5mg对硝基苯酸，搅拌2h。之后，加入40 μ L正娃酸乙酯和40 μ L氨水，室温下反应5h，离心后用乙醇清洗产物，得到核壳式双发射分子印迹二氧化硅纳米粒子的固体粉末。
[0056](5)核壳式双发射分子印迹二氧化硅纳米粒子用于检测对硝基苯酚
[0057]取5mg步骤(4)所得核壳式双发射分子印迹二氧化硅纳米粒子溶于75mL乙醇中，向其中分别加入浓度为O?14 μ g/mL的对硝基苯酸标准溶液和待测溶液，混合均匀后室温反应1min后测定体系荧光发射光谱，随着对硝基苯酚浓度的增加，量子点荧光信号强度(615nm)基本保持不变，而外层分子印迹层与对硝基苯酸结合后，导致外层碳点(455nm)的荧光强度逐渐降低。根据双发射峰(455nm和615nm)的荧光强度之比建立标准曲线。对比标准曲线，根据待测溶液的荧光强度比，可知待测溶液中对硝基苯酚的浓度。
[0058]本发明公开和提出的一种基于分子印迹比率型荧光探针检测对硝基苯酚的方法，本领域技术人员可通过借鉴本文内容，适当改变原料和工艺路线等环节实现，尽管本发明的方法已通过较佳实施例子进行了描述，相关技术人员明显能在不脱离本
【发明内容】
、精神和范围内对本文所述的方法和技术路线进行改动或重新组合，来实现最终的制备技术。特别需要指出的是，所有相类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，他们都被视为包括在本发明精神、范围和内容中。
【主权项】
1.一种基于分子印迹比率型荧光探针检测对硝基苯酚的方法，其特征在于步骤如下: (1)将包覆量子点的荧光二氧化硅纳米粒子超声分散在无水甲苯中，加入硅氧烷功能化碳点，搅拌均匀后加热至回流温度，反应12?24h后，离心分离产物，得到核壳式双发射荧光二氧化硅纳米粒子的固体粉末； (2)将所得核壳式双发射荧光二氧化硅纳米粒子的固体粉末溶于乙醇中，向其中加入对硝基苯酚后搅拌均匀，然后加入正硅酸乙酯和氨水，室温下反应3?5h，离心后用乙醇清洗产物，得到核壳式双发射分子印迹二氧化硅纳米粒子的固体粉末； (3)将所得核壳式双发射分子印迹二氧化硅纳米粒子的固体粉末溶于乙醇中，然后加入对硝基苯酚标准溶液和待测溶液，使用荧光光谱仪测定体系荧光发射光谱，根据双发射峰的荧光强度之比建立标准曲线，对比标准曲线得到待测溶液中对硝基苯酚的浓度。2.如权利要求1所述的方法，其特征是所述在步骤(I)中，每毫克包覆量子点的荧光二氧化娃纳米粒子需超声分散在10?20mL无水甲苯中。3.如权利要求1所述的方法，其特征是所述在步骤(I)中，每毫克包覆量子点的荧光二氧化娃纳米粒子需添加I?3 μ L娃氧烧功能化碳点。4.如权利要求1所述的方法，其特征是所述在步骤(2)中，每毫克核壳式双发射荧光二氧化娃纳米粒子的固体粉末需溶于10?20mL乙醇中。5.如权利要求1所述的方法，其特征是所述在步骤(2)中，每毫克核壳式双发射荧光二氧化娃纳米粒子需添加0.02?0.1mg对硝基苯酸、3?8 μ L正娃酸乙酯和3?8 μ L氨水。6.如权利要求1所述的方法，其特征是所述在步骤(3)中，每毫克核壳式双发射分子印迹二氧化娃纳米粒子的固体粉末需溶于10?20mL乙醇中。7.如权利要求1所述的方法，其特征是所述荧光强度对应激发波长为350nm。
【专利摘要】本发明涉及一种基于分子印迹比率型荧光探针检测对硝基苯酚的方法。分子印迹比率型荧光探针，是由核壳式双发射分子印迹二氧化硅纳米粒子构成的；采用包覆量子点的二氧化硅纳米粒子和硅氧烷功能化碳点制备双发射比率型荧光纳米粒子，再在其表面生长一层含有印记分子对硝基苯酚的二氧化硅层，得到分子印迹双荧光复合纳米粒子。在该结构中，位于二氧化硅纳米粒子核内部的量子点作为参比荧光信号，外层分子印迹层中的碳点作为响应荧光信号，用于对硝基苯酚的选择性识别。充分发挥了分子印迹的抗干扰、高选择、高灵敏度等优势，克服了传统的单一荧光信号分析方法中易受检测底物浓度、外部环境等因素影响，在环境污染物监测与控制等领域具有重大的意义。
【IPC分类】G01N21/64
【公开号】CN105092548
【申请号】CN201510413198
【发明人】苏荣欣, 高召, 黄仁亮, 齐崴, 王梦凡
【申请人】天津大学
【公开日】2015年11月25日
【申请日】2015年7月14日