一种检测志贺氏菌的核酸侧向流试纸条的制备方法及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了食源性病原微生物福氏志贺氏菌(Shigellaflexneri)的快速核酸试纸条检测试剂盒及其应用方法，属于分子生物学和免疫学领域。本发明将核酸检测中的聚合酶链式反应的高灵敏度、高特异性方法与免疫学检测中的免疫胶体金快速检测技术相结合，通过设计独特的引物，对引物加以标记，对提取的靶DNA进行特异性扩增以及扩增产物在展开液中与试纸条条上固定的金标记抗体结合而形成稳定、可见的检测带及质控带，从而实现对主要食源性病原微生物快速、准确的检测。
【专利说明】—种检测志贺氏菌的核酸侧向流试纸条的制备方法及其应用
【技术领域】
[0001]本发明属于分子生物学和免疫学领域，涉及食品及加工原料中福氏志贺氏菌的核酸扩增产物侧向流免疫胶体金试纸条试剂盒的制备和应用方法。
【背景技术】
[0002]为有效控制食品生产和进出口贸易中因致病性微生物引起的食源性疾病，保证食品领域的公共安全，需要开发灵敏、便捷、准确的食源性病原微生物检测方法。在食源性疾病危险因素中，在我国流行的食源性疾病中，微生物性食物中毒位居第一，而在食源性病原微生物中其中最典型的致病菌是志贺氏菌、阪崎肠杆菌、金黄色葡萄球、单增李斯特菌、大肠杆菌0157:H7等病原菌。志贺氏菌是革兰氏阳性菌，广泛分布于自然界或寄生于人体及动物体表和体内，金黄色葡萄球菌的致病力强，常可引起皮肤、组织和器官的炎症，产生的肠毒素可污染食物导致食物中毒。
[0003]传统的食品生产、质量监督和进出口检验检疫中，常规的细菌培养及鉴定方法，检验步骤繁琐，检验周期长，对有些细菌无法给出快速和准确的鉴定，不能完全满足质量控制及进出口检验检疫的要求。基于核酸扩增的方法检测对象是来自病原微生物的DNA，经特异性扩增后进行产物鉴定，这类方法因灵敏度高，特异性好，耗时少而发展迅速，主要的方法包括普通/突光PCR和核酸环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)(发明专利:快速检测志贺氏菌的LAMP试剂盒，
【发明者】郑文杰, 赵良娟, 张宏伟, 刘培, 赵宏, 奚文辉, 杜敬, 韩宇宁, 尹长城, 刘斯奇 申请人:天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心