专利名称：2-苯羧酸酯青霉烯类化合物及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及具有抗菌作用的2-苯羧酸酯青霉烯类化合物(包括其盐及其酯的形式)和该化合物的制备方法。此外，本发明还涉及该类化合物在制备抗菌剂中的应用，以及含有该类化合物作为有效成分的抗菌药物。
背景技术：
近年来，各类抗生素不断被开发和问世，同时针对抗菌剂的耐药菌也迅速发展，例如，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、对甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)等，这些细菌接触抗菌药物后，通过质粒或染色体介导发生变异，获得耐药性，给临床治疗造成了新的困扰。从1961年发现MRSA以来，其已成为世界范围内最常见的院内感染病原菌，已有报道的抗菌药物尚难有效控制此等耐药菌感染，尤其是MRSA感染，由于该菌株不仅对各类β-内酰胺类抗生素有内在的耐药性，而且可通过获得其它耐药基因而呈现出对其它类抗生素的多重耐药性，给临床治疗带来了严重问题。目前，万古霉素(Vancomycin)成为临床上治疗MRSA感染的一线用药，但因具有副作用，限制了其在临床上的应用，而且，随着万古霉素在临床的广泛应用，对其耐药的MRSA和肠球菌随之出现且愈发顽固。对抗MRSA已成为临床上更为棘手的问题。因而，迫切需要探寻新的强抗MRSA活性的抗生素，也促使业界工作者努力研制新型抗耐药性细菌药物，设计并筛选具有新化学结构、新作用机制或新作用靶位的新抗菌药。
在寻求能解决上述问题的有效药物中，广谱、高效、低毒的新型β-内酰胺抗生素是焦点和热点所在，其中的碳青霉烯及青霉烯药物的研发格外引人瞩目。在化学结构上，青霉烯类抗生素与碳青霉烯抗生素不同之处在于5元环上由硫代替了碳，与碳青霉烯相比，青霉烯化合物具有更广泛的抗菌活性，对厌氧革兰氏阳性菌及多数革兰氏阴性菌的抗菌活性均等同于或优于头孢菌素及青霉素类抗生素。青霉烯类其固体化合物和酯型前药可口服吸收，不易被β-内酰胺酶水解，同时对脱氢肽水解酶-I(DHP-I)较碳青霉烯稳定，其抗绿脓杆菌活性低于碳青霉烯。
青霉烯类抗生素(式1)首次由哈佛大学著名化学家Woodward基于青霉素与头孢菌素融合的概念，向青霉素骨架中引入双键，以增大β-内酰胺反应性，从而提高抗菌活性的设想而设计合成的。
已开发上市的法罗培南(faropenem，结构如下式)为青霉烯类化合物钠盐，是日本Suntory公司生物医药研究所合成，并与山之内制药公司共同开发的新口服青霉烯类抗生素，是具有很强抗菌活性的广谱青霉烯类抗生素药物，特别对金葡菌、耐青霉素的肺炎球菌、粪链球菌等革兰氏阳性菌与脆弱类杆菌等厌氧菌的抗菌活性明显高于现有头孢菌素，抗革兰氏阴性菌活性与口服头孢菌素相似，对除绿脓杆菌外的需氧及厌氧革兰氏阳性菌、阴性菌显示出广谱抗菌活性。结构上法罗培南属β-内酰胺类，环上有四氢呋喃基取代，为非酯原型吸收型药物，对各种β-内酰胺酶稳定，耐药菌株少。法罗培南对金葡菌的青霉素结合蛋白(PBP-1、2、3)、大肠杆菌PBP-2显示强亲和力，表明其抗菌作用强，与现有临床使用的碳青霉烯类抗生素泰能(tinenam)相比，其显著特点是对DHP-I稳定，因此可单独给药，并且安全性高，对厌氧菌及革兰氏阳性菌的清除率尤其高。因此，法罗培南的强效广谱抗菌作用已经被公认，但其对MRSA缺乏有效的抑菌活性。
Men-10700(Menarini Spa)，化学名为(5R，6S-[(R)-1-羟乙基]-2-(N-甲基甘氨酰胺-N-甲基)青霉烯-3-羧酸，也是现在研究最多的青霉烯类抗生素，其广谱抗菌活性使之有可能成为治疗厌氧菌引起感染的有效抗生素。其C2位为氨基酸衍生物侧链，对MRSA和表皮葡萄球菌以外的革兰氏阳、阴性菌均显示出高抗菌活性。该化合物对MSSA和表皮葡萄球菌的活性最为显著，抗菌活性优于第三代头孢菌素；对于革兰氏阴性菌株MIC90≤2mg/L，但对MRSA疗效甚微。因Men-10700在对抗第三代头孢菌素的革兰氏阴性菌方面有很好的抗菌效果，业内正在发展其口服前药类型。
目前广谱抗菌的青霉烯类药物中，如法罗培南等，均表现出对除抗MRSA以外的广谱抗菌作用，即对MRSA缺乏有效的抑菌活性。因此，寻求新的抗MRSA疗效高、副作用小的抗生素成为亟待解决的问题，人们希望能够开发出一种无耐药性、效果更优秀、抗菌活性更高的抗生素。
发明内容
本发明人经过对青霉烯类构效关系的研究和筛选，提出一类具有抗菌作用的2-苯羧酸酯青霉烯类化合物，大量实验证明该化合物尤其对MRSA有显著的抑菌活性，解决了上述问题。
本发明提供了2-苯羧酸酯青霉烯类化合物，包括其盐和酯的形式。
本发明提供了该2-苯羧酸酯青霉烯类化合物的制备方法及合成路线。
本发明还提供了2-苯羧酸酯青霉烯化合物的抗菌用途，具体的说，是该类化合物在制备抗生素类药物，尤其是抗MRSA的药物中的抗菌用途。
本发明还提供了一种含有有效量的式I化合物的抗生素类药物组合物，尤其是抗MRSA的药物组合物。
本发明提供的2-苯羧酸酯青霉烯类化合物，在青霉烯双环母核的C-2位置上连接有2-苯羧酸酯，该化合物结构由通式(I)表示
式中，n为0、1或2；R代表连接在苯环上的一个或一个以上取代基，选自H、卤原子、烷氧基、NO2、CN或烷基；R1为H、碱金属或在生物体内水解的酯残基。
本发明提供的上述式I结构的2-苯羧酸酯青霉烯类化合物具有广谱抗菌作用，尤其对MRSA的抗菌活性优于目前市售的青霉烯类抗菌素药物。
根据本发明的目的，通过对2-苯羧酸酯青霉烯类化合物的构效关系和抗菌作用的研究，筛选出抗菌作用最强的式I结构的青霉烯类化合物，优选化合物结构中n为0、1或2，R为H、F、Cl、Br、1-3个碳的烷氧基(例如OCH3、OC2H5)、NO2、CN或1-3个碳的烷基(例如CH3、C2H5)。
本发明化合物中，优选n＝0，即2-苯甲酸甲酯青霉烯类化合物。
本发明化合物中，取代基R的位置优选为间位或对位，尤其为间位，更优选R为H、间位或对位取代的硝基、CN或卤原子。
本发明的部分具体化合物如下表所示 本发明提供的上述化合物在其广谱抗菌的同时，尤其对MRSA有显著的抑菌活性，对肠球菌、敏感金葡菌也有良好的药用效果。
本发明还提供了含有2-苯羧酸酯青霉烯类化合物作为有效成分的抗菌药物组合物，其含有药学有效量的式I结构的化合物及可药用的辅料，包括赋形剂、稀释剂稳定剂和矫味剂等，按照药剂学常规方法混合，制成片剂、胶囊、颗粒剂、散剂或糖浆剂的形式口服给药或以注射剂的形式非口服给药。
上述制剂可通过常规制药方法制备。可用的添加剂包括赋形剂(可以是糖类衍生物如乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和山梨糖醇；淀粉衍生物如玉米淀粉、土豆淀粉、糊精和羧甲基淀粉；纤维素衍生物如结晶纤维素、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠；阿拉伯胶；右旋糖酐；硅酸盐衍生物如偏硅酸镁铝；磷酸盐衍生物如磷酸钙；碳酸盐衍生物如碳酸钙；硫酸盐衍生物如硫酸钙等)、粘合剂(例如明胶、聚乙烯吡咯烷酮和聚乙二醇)、崩解剂(例如纤维素衍生物如羧甲基纤维素钠、聚乙烯吡咯烷酮)、润滑剂(例如滑石、硬脂酸镁、鲸蜡或硼酸等)、稳定剂(对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯等)、矫味剂(例如常用的甜味剂和香料等)、稀释剂和注射液用溶剂(例如水、乙醇和甘油等)。
化合物(I)的给药量随患者年龄、性别、病情等差异而不同。一般成人的给药量可约为0.01-5000mg/日，优选1-1000mg/日，更优选5-500mg/日。
本发明提供的化合物作为青霉烯化合物中的一种，可通过适当方法被合成出来，例如可以是包括使具有通式II的化合物与选定的苯羧酸化合物发生酯化反应，以及脱除保护基的过程，式中T1和T2分别为羟基保护基和羧基保护基。
根据本发明的合成方法，通过使2位具有羟甲基并且在母核上的羟基和羧基均带有保护基的青霉烯双环母核(通式II)，在2位羟甲基脱水实现酯化，然后脱去保护基。该通式化合物II可以是市售产品，也可以是按照文献记载合成得到的中间产物，具体方法可以参见Journal of MedicanalChemistry，1992，Vol.35，No.10 1836-37。
在通式化合物II中，3位羧基和6位羟甲基在酯化前被保护，确保苯羧酸与2位羟甲基脱水酯化，保护基T1和T2的选择在满足酯化反应的前提下没有特别限制，基于被保护基团特性很容易确定，而脱保护基的方法对于本领域普通技术人员来说是很容易实现的。根据本发明具体合成方法，T1可为三烷基硅类保护基，例如特丁基二甲基硅烷(TBS)或三甲基硅烷，T2通常为烯丙基保护基或对硝基苄基(PNB)保护基，且使酯化产物顺序脱除T1和T2。
在本发明优选实施例中，具体合成过程可以为上述反应物苯环上有取代基的苯甲酸、苯乙酸或苯丙酸溶于溶剂中(例如四氢呋喃)，加入偶氮二乙酸二乙酯，然后加入式II化合物和三苯磷的四氢呋喃溶液，反应完全后得到酯化产物(过程a)；将该酯化产物溶于有机溶剂，经适当反应脱除羟基保护基(过程b)，得到中间产物，该过程可以采用乙腈做溶剂，加入稀盐酸溶液反应实现，也可以采用四氢呋喃做溶剂，在室温下加入乙酸，四丁基氟化铵，50℃左右反应6小时而完成；得到中间产物再次用有机溶剂溶解后，连续加入四(三苯磷)钯、三苯磷和2-乙基己酸钠的乙酸基质溶液反应，溶剂可以是卤代烷，例如二氯甲烷，酯类溶剂，例如乙酸乙酯等，反应体系经检测无原料点后(脱除羧基保护基)，加水提取，经对水层产物的进一步洗涤，可以先使用二氯甲烷、乙酸己酯洗，然后用乙醚洗，再经干燥，纯化处理(过程c)，即得本发明的目的产物，按照该实施例方法制得的产品为一种钠盐。
本发明合成方法的一个实施例可以按照以下过程实现(R、n定义同前述)
C2H5OCON＝NCOOC2H5，PPh3b0.1M HCl，CH3CNcPPh3，Pb(PPh3)4，CH3CHC2H5(CH2)3COONa此外，本发明还提供了2-苯羧酸酯青霉烯类化合物在制备抗菌剂中的应用，以及含有2-苯羧酸酯青霉烯类化合物作为有效成分的抗菌药物组合物。抑菌实验结果1.样品1)63-78号产品 (合成样品)2)法罗培南(Faropenem) (合成样品)3)Sultacillin (浙江黄岩新华药物化工有限公司)4)亚胺培南(Imipenem) (默沙东)5)美罗培南(Meropenem) (浙江海正药业)6)万古霉素(Vancomycin)(sigma)2.制备抗菌素平皿
将药物样品编号，如表1，据所需药量用少量甲醇助溶，用蒸馏水补足到所要求量，充分稀释混匀后，取出前管半量加等量蒸馏水对倍稀释成15个浓度，每个药浓度取1mL药液，加19mL Mueller-Hinton Agar培基混匀后，倒入平皿待冷却即可。金葡球菌和粪链肠球菌实验用上述培基，其中内含5％羊血，其它菌实验用Mueller-Hinton Agar药敏培基。
3.种菌方法实验菌接种在普通营养肉汤中(10mL/管)，将上述接种菌置37℃孵育18h，次日稀释成106作为实验用菌浓度，将菌加入微孔板中，用多点接种法在不同浓度的药物平皿上接种，待干，置摄氏37℃孵育18h后观察结果。
表1 青霉烯类化合物的MIC结果
根据本发明提供的上述式(I)化合物及其药理学实验结果，显示其构效关系如下a.由于2位上苯羧酸酯侧链的引入，本发明化合物抗菌活性明显提高；b.抗菌活性活性随着延长侧链的加长，活性有所降低，因此式(I)化合物中n为0、1或2；c.活性与取代基的性质无太大的关系，R可以选自H、F、Cl、Br、NO2、CN或CH3中任一或多个基团，优选R为一个上述基团；d.苯环上不同取代位置的青霉烯类抗生素之间，间位取代的活性明显高于邻位和对位，而邻位和对位活性相当；e.苯环上取代越多，抗菌活性越差，因此，本发明化合物的苯环上取代基团优选H、F、Cl、Br、NO2、CN或CH3中任一并且间位取代。
结论1)对敏感金葡菌，63-78抗菌作用等于或优于faropenem，Sultacillin，meropenem，vacomycin。
2)所有青霉烯类化合物均显示良好的抗MRSA的抗菌活性，与临床用药万古霉素相比，抗菌活性至少相当或优于万古霉素。
3)对肠球菌，63，65，67，68，71，72，73，74，76，77抗菌活性与五种参照药物相当或优于他们。
实验结果揭示，在现有的抗菌类的抗生素中，最广泛应用于临床并被公众所熟知的优选法罗培南，但其抗MRSA的MIC90为256μg/ml，本发明的化合物抗MRSA的MIC90最大为4μg/ml，最小(间位取代)为0.25μg/ml，与法罗培南相比药效提高了64-1000倍，抗菌效果明显优于其他同类药。
综上所述，设计并合成的2-苯羧酸酯青霉烯类化合物，尤其是2-苯羧酸甲酯青霉烯类化合物(除64外)，对革兰氏阳性菌MSSA和肠球菌都具有较高的抗菌活性，特别对于MRSA均显示出良好的抗菌效果。
具体实施例方式
实施例1(5R，6S)-2-(对氯苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯31称取对氯苯甲酸(0.596g，3.811mmol)溶于6mL四氢呋喃中，加入偶氮二乙酸二乙酯(0.664g，3.811mmol)，然后缓慢加入29(1.264g，3.176mmol)和三苯磷(281.00，3.811mmol)的四氢呋喃溶液，颜色逐渐由橙色变为浅黄色或无色。反应8h后，TLC检测，已反应完全。常温下减压蒸除四氢呋喃后，加入乙酸己酯提取。分别用饱和碳酸氢钠和水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩。乙酸己酯∶二氯甲烷(1∶4)洗脱，收集组分。得白色固体31(1.36g，80％)。
m.p.101-102℃.1H NMR(CDCl3)δ8.05(dd，J＝6.9Hz，2H，Ph)，7.47(dd，2H，J＝8.7Hz，Ph)，5.92(m，1H，CH＝CH2)，5.75-5.62(m，1H，H5 and CH2CH＝OH)，5.44-5.24(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.79-4.68(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.47-4.20(m，1H，CHOSi)，2.72(d，J＝3.9Hz，H6)，1.28(d，J＝6.9Hz，CH3-CH)，0.87(s，9H)，0.08(s，6H).MS(FAB)m/z 538(M+H+)，537(M)。
实施例2(5R，6S)-2-(间甲氧基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯32以间甲氧基苯甲酸和29为原料，操作同31。得淡黄色固体，收率87％。
m.p.78-79℃.1H NMR(CDCl3)δ7.85(d，J＝7.8Hz，1H，Ph)，7.50(m，1H，Ph)，6.99(m，2H，Ph)，5.92(m，1H，CH＝CH2)，5.72-5.60(m，2H，H5 andCH2CH＝CH)，5.43-5.23(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.72(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.23(m，1H，CHOSi)，2.85(s，3H，-OCH3)，1.25(d，J＝6.9Hz，3H，CH3-CH)，0.87(s，9H)，0.08(s，6H).FAB-MSm/z 534(M+H+)。
实施例3(5R，6S)-2-(间氟苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯33以间氟苯甲酸和29为原料，操作同31。得淡黄色液体，收率79％。
1H NMR(CDCl3)δ7.86(m，1H，Ph)，7.73(d，J＝8.7Hz，1H，Ph)，7.44(m，1H，Ph)，7.31(m，1H，Ph)，5.94(m，1H，CH＝CH2)，5.76-5.63(m，2H，H5 andCH2CH＝CH)，5.44-5.24(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.71(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.23(m，1H，CHOSi)，3.73(d，J＝3.9Hz，1H，H6)，1.27(m，3H，CH3-CH)，0.87(s，9H)，0.08(s，6H).FAB-MSm/z 520(M-H+)。
实施例4(5R，6S)-2-(间硝基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯34以间硝基苯甲酸和29为原料，操作同31。得无色液体，收率91％。
1H NMR(CDCl3)δ8.87(m，1H，Ph)，8.46(m，2H，Ph)，7.69(m，1H，Ph)，5.95(m，1H，CH＝CH2)，5.83-5.65(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.45-5.24(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.76(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.25(m，1H，CHOSi)，3.74(m，1H，H6)，1.23(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H)，0.87(s，9H)，0.07(s，6H).FAB-MSm/z 547(M-H+)。
实施例5(5R，6S)-2-(苯丙酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯35以苯丙酸和29为原料，操作同31。得无色液体，收率87％。
1H NMR(CDCl3)δ7.29-7.19(m，5H，Ph)，5.92(m，1H，CH＝CH2)，5.56(d，J＝1.2Hz，1H，H5)，5.51-5.36(m，2H，CH2CH＝CH2)，5.26-5.08(m，2H，CH2OCO)，4.70(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.23(m，1H，CHOSi)，3.69(m，1H，H6)，2.97(m，2H，OCCH2CH2)，2.69(m，2H，OCCH2CH2)，1.23(d，J＝5.7Hz，3H，CH3-CH)，0.88(s，9H)，0.07(s，6H).FAB-MSm/z 530(M-H+)。
实施例6(5R，6S)-2-(苯乙酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯36以苯乙酸和29为原料，操作同31。得白色固体，收率93％。
m.p.67-69℃.1H NMR(CDCl3)δ7.30(m，5H，Ph)，5.90(m，1H，CH＝CH2)，5.56-5.48(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.41-5.08(m，3H，CH2CH＝CH and CH2OCO)，4.68(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.22(m，1H，CHOSi)，3.67(m，3H，H6 and OCCH2Ph)，1.24(d，J＝8.7Hz，3H，CH3-CH)，0.88(s，9H)，0.07(s，6H).FAB-MSm/z 516(M-H+)。
实施例7(5R，6S)-2-(对甲氧基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯37以对甲氧基苯甲酸和29为原料，操作同31。得白色晶体，收率89％。
m.p.73-75℃.1H NMR(CDCl3)δ8.00(d，J＝9.9Hz，2H，Ph)，6.93(d，J＝9.0Hz，2H，Ph)，5.92(m，1H，CH＝CH2)，5.72-5.60(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.43-5.30(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.72(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.23(m，1H，CHOSi)，3.86(s，3H，OCH3)，3.71(d，J＝4.8Hz，1H，H6)，1.21(d，J＝6.9Hz，3H，CH3-H)，0.87(s，9H)，0.06(s，6H).FAB-MSm/z534(M+H+))，532(M-H+)。
实施例8(5R，6S)-2-(对氟苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯38以对氟苯甲酸和29为原料，操作同31。得白色晶体，收率86％。
m.p.100-101.5℃.1H NMR(CDCl3)δ8.07(m，2H，Ph)，7.12(m，2H，Ph)，5.98(m，1H，CH＝CH2)，5.75-5.62(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.45-5.24(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.74(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.25(m，1H，CHOSi)，3.73(dd，J＝1.5，4.5Hz，1H，H6)，1.23(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H)，0.88(s，9H)，0.08(s，6H).FAB-MSm/z 522(M+H+)。
实施例9(5R，6S)-2-(五氟苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯39以五氟苯甲酸和29为原料，操作同31。得白色晶体，收率80％。
m.p.110-111℃。1H NMR(CDCl3)δ5.92(m，1H，CH＝CH2)，5.80(d，J＝14.7Hz，1H，CH2-CH＝CH)，5.64(s，1H，H5)，5.44-5.24(m，3H，CH2CH＝CHand，CH2OCO)，4.72(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.25(m，1H，CHOSi)，3.75(m，1H，H6)，1.23(d，J＝5.7Hz，3H，CH3-H)，0.88(s，9H)，0.07(s，6H).FAB-MSm/z592(M-H+)。
实施例10(5R，6S)-2-(对溴苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯40以对溴苯甲酸和29为原料，操作同31。得白色晶体，收率86％。
m.p.125-127℃.1H NMR(CDCl3)δ7.90(d，J＝8.7Hz，2H，Ph)，7.59(d，J＝8.7Hz，2H，Ph)，5.98(m，1H，CH＝CH2)，5.75-5.62(m，2H，H5 andCH2CH＝CH)，5.44-5.24(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.73(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.24(m，1H，CHOSi)，3.72(dd，J＝1.5，4.5Hz，1H，H6)，1.22(d，J＝6.6Hz，3H，CH3-H)，0.87(s，9H)，0.07(s，6H).FAB-MSm/z 582(M+H+)。
实施例11(5R，6S)-2-(邻氟苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯41以邻氟苯甲酸和29为原料，操作同31。得白色固体。收率94％。
m.p.81.5～82.5℃.1H NMR(CDCl3)δ8.00(m，1H，Ph)，7.58(m，1H，Ph)，7.22(m，2H，Ph)，5.98(m，1H，CH＝CH2)，5.78-5.62(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.44-5.24(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.72(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.23(m，1H，CHOSi)，3.73(dd，J＝2.1，4.5Hz，1H，H6)，1.23(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H)，0.88(s，9H)，0.08(s，6H).FAB-MSm/z 522(M+H+)。
实施例12(5R，6S)-2-(邻甲氧基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯42以邻甲氧基苯甲酸和29为原料，操作同31。得白色晶体，收率87％。
m.p.62-64℃.1H NMR(CDCl3)δ7.94(m，1H，Ph)，7.41(m，1H，Ph)，7.26(m，2H，Ph)，5.92(m，1H，CH＝CH2)，5.74-5.61(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.45-5.24(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.73(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.24(m，1H，CHOSi)，3.72(dd，J＝1.5，4.5Hz，1H，H6)，2.62(s，3H，CH3)，1.22(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-CH)，0.86(s，9H)，0.07(s，6H).FAB-MSm/Z 516(M-H+)。
实施例13(5R，6S)-2-(对氰基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯43以对氰基苯甲酸和29为原料，操作同31。得白色晶体，收率76％。
m.p.100～102℃.1H NMR(CDCl3)δ8.14(d，J＝7.8Hz，2H，Ph)，7.76(d，J＝7.8Hz，2H，Ph)，5.91(m，1H，CH＝CH2)，5.79-5.63(m，2H，H5 andCH2CH＝CH)，5.44-5.24(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.73(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.24(m，1H，CHOSi)，3.73(d，J＝3.9Hz，1H，H6)，1.22(d，J＝6.0Hz，3H，CH3-H)，0.87(s，9H)，0.07(s，6H).FAB-MSm/z 528(M)。
实施例14(5R，6S)-2-(对硝基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯44以对硝基苯甲酸和29为原料，操作同31。得白色固体，收率95％。
m.p.152-154℃.1H NMR(CDCl3)δ8.30(m，4H，Ph)，5.92(m，1H，CH＝CH2)，5.81-5.64(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.45-5.25(m，3H，CH2OCOand CH2-CH＝CH)，4.73(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.25(m，1H，CHOSi)，3.74(dd，J＝1.8，4.5Hz，1H，H6)，1.23(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H)，0.87(s，9H)，0.08(s，6H).
FAB-MSm/z 549(M+H+)，547(M-H+)。
实施例15(5R，6S)-2-(邻硝基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯45以邻硝基苯甲酸和29为原料，操作同31。得无色液体，收率79％。
1H NMR(CDCl3)δ7.95(m，1H，Ph)，7.77(m，1H，Ph)，7.68(m，2H，Ph)，5.98(m，1H，CH＝CH2)，5.77-5.63(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.44-5.24(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.72(m，2H，OCH2CH＝CH2)，3.73(dd，J＝2.1，4.2Hz，1H，H6)，1.22(d，J＝6.3Hz，3H，CH3CH)，0.87(s，9H)，0.06(s，6H).FAB-MSm/z 547(M-H+)。
实施例16(5R，6S)-2-(邻氯苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯46以邻氯苯甲酸和29为原料，操作同31。得白色固体，收率81％。
m.p.130-131℃.1H NMR(CDCl3)δ8.07(m，2H，Ph)，7.12(m，2H，Ph)，5.98(m，1H，CH＝CH2)，5.75-5.62(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.45-5.24(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.74(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.25(m，1H，CHOSi)，3.73(dd，J＝1.5，4.5Hz，1H，H6)，1.23(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H)，0.88(s，9H)，0.08(s，6H).FAB-MSm/z 399(M+H+)。
实施例17(5R，6S)-2-(对氯苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯47在31(1.5mmol)的乙腈溶液中加入0.1N的稀盐酸水溶液45mL，搅拌反应12h后，TLC检测已反应完全。在反应混合物中加入8％的的氢氧化钠水溶液4.5mL。浓缩至很少体积。加入乙酸己酯，用饱和食盐水洗三次后，无水硫酸钠干燥。真空蒸去乙酸己酯，乙酸己酯二氯甲烷(4∶1，1∶1)洗脱，收集产物组分，得到白色固体，收率67％。
m.p.131-132℃.1H NMR(CDCl3)δ7.98(d，J＝7.8Hz，2H，Ph)，7.46(d，H＝10.8，2H，Ph)，6.00-5.88(m，1H，CH＝CH2)，5.72-5.65(m，2H，H5 andCH2CH＝CH)，5.45-5.26(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.73-4.66(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.29-4.21(m，1H，CHOSi)，3.77(d，J＝6.6Hz，1H，H6)，1.34(d，J＝6.9Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z 424(M+H+)。
实施例18(5R，6S)-2-(邻甲氧基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯48以32为原料，操作同47。得白色晶体，收率81％。
m.p.94-95℃.1H NMR(CDCl3)δ7.85(m，1H，Ph)，7.51(m，1H，Ph)，6.99(m，2H，Ph)，5.98(m，1H，CH＝CH2)，5.70-5.63(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.45-5.25(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.75(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.22(m，1H，CHOSi)，3.76(d，J＝1.5Hz，1H，H6)，1.35(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H).
FAB-MSm/z 420(M+H+)。
实施例19(5R，6S)-2-(间氟苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯49以33为原料，操作同47。得淡黄色固体，收率85％。
m.p.103-104℃.1H NMR(CDCl3)δ7.84(d，J＝7.8Hz，1H，Ph)，7.72(d，J＝9.3，1H，Ph)，7.44(m，1H，Ph)，7.30(m，1H，Ph)，5.95(m，1H，CH＝CH2)，5.73-5.66(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.45-5.26(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.76(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.25(m，1H，CHOSi)，3.78(d，J＝6.3Hz，1H，H6)，1.34(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z 407(M+)。
实施例20(5R，6S)-2-(间硝基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯50以34为原料，操作同47。得白色晶体，收率82％。
m.p.160-161℃.1H NMR(CDCl3)δ8.87(s，1H，Ph)，8.47-8.37(m，2H，Ph)，7.69(m，1H，Ph)，5.98(m，1H，CH＝CH2)，5.80-5.67(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.46-5.27(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.80(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.26(m，1H，CHOSi)，3.81(m，1H，H6)，1.35(d，J＝5.7Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z 434(M+)。
实施例21(5R，6S)-2-(苯丙酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯51以35为原料，操作同47。得白色晶体。收率90％。
m.p.77-78℃.1H NMR(CDCl3)δ7.31(m，5H，Ph)，5.94(m，1H，CH＝CH2)，5.70(s，1H，H5)，5.60-5.28(m，2H，CH2CH＝CH2)，5.28-5.09(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.79(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.26(m，1H，CHOSi)，3.73(m，1H，H6)，2.97(m，2H，OCCH2CH2)，2.74(m，2H，OCCH2CH2)，1.34(d，J＝3.6Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z 417(M+)。
实施例22(5R，6S)-2-(苯乙酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯52
以36为原料，操作同47。得黄色晶体。收率86％。
m.p.71-73℃.1H NMR(CDCl3)δ7.30(m，5H，Ph)，5.93(m，1H，CH＝CH2)，5.59-5.10(m，5H，H5，CH2CH＝CH2，CH2OCO)，4.73(m，2H，CH2-CH＝CH)，4.22(m，1H，CHOSi)，3.73(d，J＝6.9Hz，1H，H6)，3.67(s，2H，OCCH2)，1.34(d，J＝6.9Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z 403(M+)。
实施例23(5R，6S)-2-(对甲氧基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯53以37为原料，操作同47。得白色晶体。收率92％。
m.p.89-90℃.1H NMR(CDCl3)δ8.00(m，2H，Ph)，6.92(m，2H，Ph)，5.92(m，1H，CH＝CH2)，5.69-5.63(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.45-5.25(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.73(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.24(m，1H，CHOSi)，3.86(m，1H，H6)，3.75(m，1H，H6)，1.34(d，J＝5.7Hz，3H，CH3-CH).FAB-MSm/z420(M++H)。
实施例24(5R，6S)-2-(对氟苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯54以38为原料，操作同47。得白色晶体。收率86％。
m.p.103-104℃.1H NMR(CDCl3)δ8.07(m，2H，Ph)，7.13(m，2H，Ph)，5.98(m，1H，CH＝CH2)，5.72-5.65(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.45-5.26(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.78(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.25(m，1H，CHOSi)，3.77(dd，J＝2.1，6.9Hz，1H，H6)，1.35(d，J＝6.9Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z407(M+H+)。
实施例25(5R，6S)-2-(五氟苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯55以39为原料，操作同47。得白色固体。收率89％。
m.p.164-166℃.1H NMR(CDCl3)δ5.95(m，1H，CH＝CH2)，5.76(d，J＝15Hz，1H，CH2CH＝CH)，5.67(d，J＝1.8Hz，1H，H5)，5.45-5.26(m，3H，CH2-CH＝Ch and CH2OCO)，4.77(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.26(m，1H，CHOSi)，3.78(m，1H，H6)，1.35(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H).EAB-MSm/Z 268(M-C6H5COO+)。
实施例26(5R，6S)-2-(对溴苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯56以40为原料，操作同47。得白色晶体。收率82％。
m.p.138-140℃.1H NMR(CDCl3)δ7.89(d，J＝8.1Hz，2H，Ph)，7.59(d，J＝8.7Hz，2H，Ph)，5.96(m，1H，CH＝CH2)，5.72-5.64(m，2H，H5 andCH2CH＝CH)，5.45-5.26(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.78(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.24(m，1H，CHOSi)，3.77(d，J＝6.0Hz，1H，H6)，1.34(d，J＝6.9Hz，3H，CH3-CH).FAB-MSm/z 467(M+)，469(M++2)。
实施例27(5R，6S)-2-(邻氟苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯57以41为原料，操作同47。得无色液体。收率81％。
1H NMR(CDCl3)δ7.95(m，1H，Ph)，7.55(m，1H，Ph)，7.19(m，2H，Ph)，5.94(m，1H，CH＝CH2)，5.74-5.65(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.45-5.25(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.77(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.25(m，1H，CHOSi)，3.77(m，1H，H6)，1.34(d，J＝6.9Hz，3H，CH3-CH).FAB-MSm/z 407(M+)。
实施例28(5R，6S)-2-(邻甲基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯58以42为原料，操作同47。得白色晶体。收率87％。
m.p.110-111℃.1H NMR(CDCl3)δ7.93(d，J＝7.8Hz，1H，Ph)，7.42(m，1H，Ph)，7.25(m，2H，Ph)，5.98(m，1H，CH＝CH2)，5.71-5.64(m，2H，H5 andCH2CH＝CH)，5.45-5.26(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.75(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.25(m，1H，CHOSi)，3.77(d，J＝6.6Hz，1H，H6)，2.61(s，3H，CH3)，1.34(d，J＝5.7Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z 403(M+)。
实施例29(5R，6S)-2-(对硝基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯59
以43为原料，操作同47。得白色晶体。收率79％。
m.p.165-166℃.1H NMR(CDCl3)δ8.15(d，J＝7.8Hz，2H，Ph)，7.77(d，J＝7.8Hz，2H，Ph)，5.95(m，1H，CH＝CH2)，5.76-5.66(m，2H，H5 andCH2CH＝CH)，5.45-5.26(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.81(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.26(m，1H，CHOSi)，3.78(d，J＝6.0Hz，1H，H6)，1.35(d，J＝6.0Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z 415(M+H+)。
实施例30(5R，6S)-2-(对硝基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯60以44为原料，操作同47。得白色固体。收率83％。
m.p.172-174℃.1H NMR(CDCl3)δ8.26(m，4H，Ph)，5.92(m，1H，CH＝CH2)，5.78-5.67(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.45-5.27(m，3H，CH2OCOand CH2-CH＝CH)，4.76(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.26(m，1H，CHOSi)，3.78(d，J＝7.8Hz，1H，H6)，1.35(d，J＝6.0Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z 433(M-H+)。
实施例31(5R，6S)-2-(邻硝基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯61以45为原料，操作同47。得淡黄色晶体。收率88％。
m.p.130-133℃.1H NMR(CDCl3)δ7.95(m，1H，Ph)，7.79-7.66(m，3H，Ph)，5.96(m，1H，CH＝CH2)，5.75-5.65(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.45-5.26(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.75(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.24(m，1H，CHOSi)，3.77(m，1H，H6)，1.34(d，J＝5.7Hz，3H，CH3-CH).FAB-MSm/z434(M+)。
实施例32(5R，6S)-2-(邻氯苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯62以46为原料，操作同47。得白色固体。收率82％。
m.p.145-146℃.1H NMR(CDCl3)δ7.88(d，J＝6.6Hz，1H，Ph)，7.51-7.31(m，3H，Ph)，5.99(m，1H，CH＝CH2)，5.74-5.65(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.48-4.84(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.72(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.25(m，1H，CHOSi)，3.76(dd，J＝1.5，6.6Hz，1H，H6)，1.37(d，J＝7.2Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z 424(M+H+)。
实施例33(5R，6S)-2-(对氯苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸单钠盐63将47(1.25mmol)溶于1.5mL二氯甲烷中，室温下连续加入四(三苯磷)钯(0.0125mmol)，三苯磷(0.0625mmol)和2-乙基己酸钠(1.43mmol)的乙酸己酯溶液1.5mL。搅拌反应1h后TLC检测，已无原料点。加入2mL水提取，水层用二氯甲烷和乙酸己酯洗，用乙醚洗。冷冻干燥得到黄色固体。用大孔树反相柱纯化，梯度洗脱水；水∶丙酮(95∶5；9∶1；4∶1；1∶1)；丙酮。所得组分冷冻干燥得到白色固体63，收率72％。
1H NMR(CDCl3)δ8.02(d，J＝5.1Hz，2H，Ph)，7.53(d，J＝5.1Hz，2H，Ph)，5.80(d，J＝8.4Hz，1H，H5)，5.61 and 5.40(m，2H，CH2OCO)，4.11(m，1H，CHOSi)，3.66(d，J＝4.2，1H，H6)，1.30(d，J＝3.9Hz，3H，CH3-H).IR(KBr)νmaxcm-11770(β-lactam C＝O)，1724(OC＝O)，1595，1489.FAB-MSm/z 428(M++Na)。
实施例34(5R，6S)-2-(邻甲氧基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸单钠盐64以48为原料，操作同47。得白色固体，收率67％。
1H NMR(CDCl3)δ7.77(d，J＝4.2Hz，1H，Ph)，7.54(m，1H，Ph)，7.11(d，J＝5.1Hz，1H，Ph)，6.98(m，1H，Ph)，5.72(d，J＝9.0Hz，1H，CHOCO)，5.63(s，1H，H5)，5.42(d，J＝9.0Hz，1H，CHOCO)，4.12(m，1H，CHOSi)，3.88(s，3H，OCH3)，3.78(d，J＝3.9Hz，1H，H6)，1.30(d，J＝3.9Hz，3H，CH3-H).13CNMR(D2O)δ175.80(COONa)，166.95(C＝O)，160.97(C＝O)，145.51(C＝C)，127.91(C＝C)，135.46，132.81，127.92，121.38，120.11，113.30(6C，Ph)，71.67(2′-C)，68.42(OCH2)，66.16(C6)，63.80(1′-C)，56.38(C5)，21.71(CH3)；IR(KBr)νmaxcm-11759(β-lactam C＝O)，1736(OC＝O)，1601，1491.FAB-MSm/z 402(M+H+)。
实施例35(5R，6S)-2-(间氟苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸单钠盐65
以49为原料，操作同47。得淡黄色固体，收率64％。
1H NMR(CDCl3)δ7.50(d，J＝7.8Hz，1H，Ph)，7.59(m，1H，Ph)，7.47-7.40(m，1H，Ph)，7.33-7.27(m，1H，Ph)，5.70(d，J＝14.7Hz，1H，CHOCO)，5.56(d，J＝1.2Hz，1H，H5)，5.36(d，J＝14.7Hz，1H，CHOCO)，4.02(m，1H，CHOSi)，1.70(dd，J＝1.2，6.6Hz，1H，H6)，1.21(d，J＝10.8Hz，3H，CH3-H).
13CNMR(D2O)δ175.72(COONa)，165.82(C＝O)，165.54(C＝O)，162.30(C＝C)，144.96(C＝C)，133.09，132.99，128.11，126.60，121.30，117.2(6C，Ph)，71.73(C6)，66.08(CHOH)，63.84(C5)，62.12(CH2O)，21.67(CH3)；FAB-MSm/z390(M+H+)。
实施例36(5R，6S)-2-(间硝基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸单钠盐66以50为原料，操作同47。得白色固体，收率78％。
1H NMR(CDCl3)δ8.71(s，1H，Ph)，8.41(d，J＝6.9Hz，1H，Ph)，8.31(d，J＝7.8Hz，1H，Ph)，7.67(m，1H，Ph)，5.79(d，J＝14.7Hz，1H，CHOCO)，5.56(d，J＝1.5Hz，1H，H5)，5.40(d，J＝14.7Hz，1H，CHOCO)，4.04(m，1H，CHOSi)，3.67(d，J＝6.9Hz，1H，H6)，1.20(d，J＝6.6Hz，3H，CH3-H).IR(KBr)νmaxcm-11763(β-lactam C＝O)，1732(OC＝O)。
实施例37(5R，6S)-2-(苯丙酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸单钠盐67以51为原料，操作同47。得淡黄色固体，收率54％。
1H NMR(CDCl3)δ7.29-7.17(m，5H，Ph)，5.56(d，J＝6.0Hz，1H，H5)，5.52and 5.18(d，J＝8.7Hz，CH2OCO)，4.11(m，1H，CHOSi)，3.73(d，J＝3.9Hz，1H，H6)，2.94(m，2H，OCCH2)，2.65(m，2H，OCCH2CH2)，1.30(d，J＝7.8Hz，3H，CH3-H)。
实施例38(5R，6S)-2-(苯乙酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸单钠盐68以52为原料，操作同47。得淡黄色固体，收率72％。
1H NMR(CDCl3)δ7.20(m，5H，Ph)，5.48(m，2H，H5 and CHOCO)，5.10(d，J＝14.4Hz，1H，CHOCO)，4.01(m，1H，CHOSi)，3.60(s，3H，H6 andOC-CH2-Ph)，1.30(d，J＝3.9Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z 386(M+H+)。
实施例39(5R，6S)-2-(对甲氧基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸单钠盐69以53为原料，操作同47。得白色固体，收率65％。
1H NMR(CDCl3)δ7.91(m，2H，Ph)，6.90(m，2H，Ph)，5.62-5.18(3H，H5and CH2OCO)，4.13(m，1H，CHOSi)，3.80(s，3H，OCH3)，3.23(m，1H，H6)，1.30(d，J＝3.9Hz，3H，CH3-H).FAB-MS(m/z)402(M+H+)。
实施例40(5R，6S)-2-(对氟苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸单钠盐70以54为原料，操作同47。得淡黄色固体，收率79％。
1H NMR(CDCl3)δ8.03-7.95(m，2H，Ph)，7.19-7.07(m，2H，Ph)，5.70(d，J＝14.7，1H，CHOCO)，5.60(s，1H，H5)，5.35(d，J＝14.7Hz，1H，CHOCO)，4.11-3.99(m，1H，CHOSi)，3.64(d，J＝1.2Hz，1H，H6)，1.21(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z 390(M+H+)。
实施例41(5R，6S)-2-(五氟苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸单钠盐71以55为原料，操作同47。得白色固体，收率81％。
1H NMR(CDCl3)δ5.83(d，J＝14.1Hz，1H，CHOCO)，5.54(d，J＝1.2Hz，1H，H5)，5.37(d，J＝14.1Hz，1H，CHOCO)，4.04(m，1H，CHOSi)，3.62(dd，J＝1.2，7.2Hz，H6)，1.22(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H)；FAB-MSm/z 462(M+H+)。
实施例42(5R，6S)-2-(对溴苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸单钠盐72以48为原料，操作同47。得白色固体，收率58％。
1H NMR(D2O)δ7.83(d，J＝8.4Hz，2H，Ph)，7.52(d，J＝8.7Hz，2H，Ph)，5.70(d，J＝14.7Hz，1H，CHOCO)，5.55(d，J＝1.2H，1H，H5)，5.35(d，J＝14.7Hz，1H，CHOCO)，4.03(m，1H，CHOSi)，3.67(dd，J＝1.2，6.9Hz，1H，H6)，1.21(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H).IR(KBr)νmaxcm-11766(β-lactam C＝O)，1718(OC＝O).
FAB-MSm/z 450(M+H+)。
实施例43(5R，6S)-2-(邻氟苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸单钠盐73以57为原料，操作同47。得白色固体，收率77％。
1H NMR(D2O)δ7.90-7.84(m，1H，Ph)，7.60-7.53(m，1H，Ph)，7.24-7.10(m，2H，Ph)，5.65(d，J＝18.6Hz，1H，H5)，5.55 and 5.35(m，2H，CH2OCO)，4.12-3.99(m，1H，CHOSi)，3.66(d，J＝5.7Hz，1H，H6)，1.21(d，J＝6.9Hz，3H，CH3-H).IR(KBr)νmaxcm-11754(β-lactam C＝O)，1736(OC＝O).FAB-MSm/z390(M+H+)。
实施例44(5R，6S)-2-(邻甲基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸单钠盐74以58为原料，操作同47。得白色固体，收率82％。
1H NMR(D2O)δ7.91(d，J＝4.8Hz，2H，Ph)，7.45(m，1H，Ph)，7.29(m，2H，Ph)，5.78(d，J＝8.7Hz，1H，CHOCO)，5.62(s，1H，H5)，5.39(d，J＝8.7Hz，1H，CHOCO)，4.11(m，1 H，CHOSi)，3.68(d，J＝4.2，1H，H6)，1.30(d，J＝3.6Hz，3H，CH3-H).13CNMR(D2O)δ175.16(COONa)，168.20(C＝O)，166.46(C＝O)，142.32(C＝C)，141.41(C＝C)，133.41，132.73，131.69，130.31，129.98，126.87(6C，Ph)，71.99(C6)，66.40(CHOH)，63.89(C5)，61.38(CH2O)，21.84(CH3CHO)，21.69(PhCH3)；FAB-MSm/z 386(M+H+)，408(M+Na+)。
实施例45(5R，6S)-2-(对氰基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸单钠盐75以59为原料，操作同47。得浅黄色固体，收率48％。
m.p.130-131℃.1H NMR(D2O)δ7.83(d，J＝8.4Hz，2H，Ph)，7.52(d，J＝8.7Hz，2H，Ph)，5.70(d，J＝14.7Hz，1H，CHOCO)，5.55(d，J＝1.2H，1H，H5)，5.35(d，J＝14.7Hz，1H，CHOCO)，4.03(m，1H，CHOSi)，3.67(dd，J＝1.2，6.9Hz，1H，H6)，1.21(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/Z 397(M+H+)。
实施例46(5R，6S)-2-(对硝基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸单钠盐76以60为原料，操作同47。得淡黄色固体，收率74％。
1H NMR(D2O)δ8.08(m，2H，Ph)，7.80(d，J＝8Hz，2H，Ph)，5.72(d，J＝14.5Hz，1H，CHOCO)，5.56(s，1H，H5)，5.38(d，J＝14.5Hz，1H，CHOCO)，4.03(m，1H，CHOSi)，3.70(d，J＝6.5Hz，1H，H6)，1.21(d，J＝6.5Hz，3H，CH3-H).
FAB-MSm/z 417(M+H+)，439(M+Na+)。
实施例47(5R，6S)-2-(邻硝基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸单钠盐77以61为原料，操作同47。得白色固体，收率65％。
1H NMR(D2O)δ8.00-7.66(m，4H，Ph)，5.80(d，1H，H5)，5.65 and 5.42(m，2H，CH2OCO)，4.12(m，1H，CHOSi)，3.80(d，J＝3.9Hz，1H，H6)，1.30(d，J＝3.9Hz，3H，CH3-CH).FAB-MSm/z 417(M+H+)。
实施例48(5R，6S)-2-(苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羟乙基]-青霉烯-3-羧酸单钠盐78以62邻氯为原料，操作同47。得白色固体，收率55％。
1H NMR(D2O)δ7.83(d，J＝8.4Hz，2H，Ph)，7.52(d，J＝8.7Hz，2H，Ph)，5.70(d，J＝14.7Hz，1H，CHOCO)，5.55(d，J＝1.2H，1H，H5)，5.35(d，J＝14.7Hz，1H，CHOCO)，4.03(m，1H，CHOSi)，3.67(dd，J＝1.2，6.9Hz，1H，H6)，1.21(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z 406(M+H+)。
权利要求
1.2-苯羧酸酯青霉烯类化合物，其特征在于，该化合物结构如通式I所示 其中，n为0、1或2，R代表连接在苯环上的一个或一个以上取代基，选自H、卤原子、烷氧基、NO2、CN或烷基，R1为H、碱金属或在生物体内水解的酯残基。
2.权利要求1所述的2-苯羧酸酯青霉烯类化合物，其中，R为C1-C3的烷氧基或烷基。
3.权利要求1所述的2-苯羧酸酯青霉烯类化合物，其中，R取代基团为间位或对位取代。
4.权利要求1或3所述的2-苯羧酸酯青霉烯类化合物，其中，R为H、硝基、CN或卤原子。
5.权利要求1所述的2-苯羧酸酯青霉烯类化合物，其为2-苯甲酸甲酯青霉烯化合物。
6.权利要求1所述的式I化合物的制备方法，其包括使具有通式II的化合物与选定的苯羧酸化合物发生酯化反应，以及脱除保护基的过程， 式中T1和T2均为保护基。
7.权利要求6所述的制备方法，其中，使酯化产物顺序脱除保护基T1和T2。
8.权利要求1-5任一项所述的2-苯羧酸酯青霉烯类化合物在制备抗生素类药物中的应用。
9.权利要求8所述的应用，其中所述2-苯羧酸酯青霉烯类化合物用于制备可抗MRSA的抗生素药物。
10.抗菌药物组合物，其中含有权利要求1-5的任一化合物的可药用酸、盐或酯作为活性成分。
全文摘要
本发明涉及具有抗菌作用的2－苯羧酸酯青霉烯类化合物，结构如下所示，包括其盐和酯，该化合物具有强效抗革兰氏阳性菌，尤其是抗MRSA的活性，本发明还涉及该2－苯羧酸酯青霉烯类化合物的制备方法和该化合物在制备抗菌剂中的应用，以及含有该化合物作为有效成分的抗菌药物。
文档编号A61K31/429GK1556109SQ20041000038
公开日2004年12月22日 申请日期2004年1月9日 优先权日2004年1月9日
发明者刘浚, 韩红娜, 陈晓芳, 金洁, 王燕云, 屈传星, 刘 浚 申请人:中国医学科学院医药生物技术研究所