专利名称：一种复方苦参纳米注射制剂及其制备方法
技术领域：
本发明属中药制药技术领域，具体涉及一种复方苦参纳米注射制剂及其制备方法。
背景技术：
纳米中药主要是指运用纳米技术制造的，粒径小于100纳米的中药有效成分、有效部位、原药及复方制剂。生物机体对药物的吸收、代谢是一个复杂的过程，中药制剂产生的药理效应不能仅仅归之于药物特有的化学组成还与该制剂的物理状态密切相关。因此，改变药物制剂的物理状态是新药研制的一种有效方法。在改变物理状态方面，改变药物的单元尺寸是十分有效的。当颗粒尺寸进入纳米量级时由于量子尺寸效应和表面效应，纳米粒子呈现出新奇的物理化学和生物学特性。这就是应用纳米技术于中药研究可能使药物活性和生物利用度提高乃至产生新的特性依据所在。
同传统中药相比，纳米中药具有以下特点①提高了药物的利用度，减少用药量。②增强药物的靶向性。③具有缓释功能，将中药纳米粒进行一定的表面修饰后，可能使中药具有缓释作用。④呈现新的药效，拓宽原药适应症，中药加工至纳米尺寸时，由于其量子尺寸等效应导致其物理、化学特性的改变，从而可使中药呈现出新功能。⑤丰富中药的剂型选择，提升传统给药途径。
目前纳米技术在中药研究中存在以下的问题。第一，纳米中药的制备困难我国虽已制备一些纳米级的中药，可是由于中药品种繁多，成分复杂，不同的成分由于其作用部位、作用机制及作用缓急的不同而要求其粒径大小、载体成分及给药剂量均有可能不同。同时纳米中药应该有它自己的一套质量标准，使其生产规范化。第二，纳米中药的毒副作用药物制成纳米微粒，其物理性质和化学性质均发生了显著的变化，这些变化对人体是否有毒副反应均未有有关的研究报道。但由于纳米材料的特殊性，除了可穿透皮肤，还会进入细胞器内，是否会直接参与或作为催化剂扰乱机体正常的化学反应，均未见有关报道。此外，纳米中药还可以通过机体的屏障系统，那它是否会影响中枢神经系统，精子的生成及其活力、胎儿的发育等，这些问题均无法回避。第三，中药在纳米级粉碎后，纳米微粒表面积变大，由于纳米微粒表面的活性使他们很容易团聚在一起，这给纳米微粒的收集及其药效的稳定性带来很大的困难。第四，成本提高由于现有技术水平及设备的限制，造成纳米中药在制备中的花费比传统中药的制备要高出不少。
目前纳米中药的研究主要集中于利用纳米技术对少数成分比较明确的单体有效成分进行纳米处理制成纳米制剂，或将原料药直接粉碎成纳米级，对大部分中药的纳米制剂研究还很少，主要是因为中药有效成分和有效部位特别是中药复方中有效部位本身就是一个“黑匣子”，中药中真正起药理作用的有效成分或有效部位研究本身就是一个难题，而且由于中药成分比较复杂，所以将其制备成纳米制剂需要克服的困难较多，因此，中药纳米制剂及技术是医药科研工作者的重要研究课题。
复方苦参注射液是以苦参、白土苓为原料经科学提炼而制成的注射剂，具有清热利湿，凉血解毒，散结止痛的功效，用于癌性疼痛的出血。复方苦参注射液既有良好的抗癌效应，又能有效缓解疼痛，研究表明复方苦参注射液不仅对癌性疼痛、癌性出血、改善患者生存质量有效，还有使瘤体缩小的作用。但复方苦参注射液在临床应用中除了局部使用有轻度刺激外，还有头晕、便秘、恶心、过敏等不良反应发生的报道，有速发型和缓发型二类，也有出现寒战、高热输液反应的。复方苦参注射液其所含成分稳定性差，在长期贮存过程中苦参碱和氧化苦参碱两成分会发生相互转化，这写都影响了复方苦参注射液的质量控制和临床应用。
专利(申请号01102554)公开了一种“纳米复方苦参制剂药物及其制备方法”，该方法将各药物的纳米原料按配比配制，且制备方法实用性较差。
发明内容
基于上述原因，本发明研究人员经大量实验研究，将提取得到的复方苦参有效部位加适量载体采用本发明工艺方法制备成纳米注射制剂，本发明方法简便，易于大生产，制备得到的制剂粒径达到纳米级，采用本发明方法制备的纳米制剂载药量大，稳定性好，而且能显著提高药物对肿瘤细胞的靶向性，药理实验表明本发明复方苦参纳米注射制剂疗效更显著，靶向性好，且刺激性小，安全性好。
本发明旨在提供一种稳定、安全、疗效好、具有靶向作用的复方苦参纳米注射制剂。
本发明还提供了上述复方苦参纳米注射制剂的制备方法。
本发明与复方苦参注射液比较，其特征在于采用本发明工艺将复方苦参制备成达到纳米粒径的制剂，采用本发明方法制备的纳米制剂具有显著的靶向性。
本发明通过以下技术方案实现一、工艺制法(1)制剂处方重量份组成为复方苦参有效部位2-5份，载体10-20份。
(2)复方苦参有效部位的制备按照《中华人民共和国卫生部药品标准》中药成方制剂分册第十四册复方苦参注射液项下的制法进行提取醇沉，药液回收乙醇后液压浓缩并真空干燥，得到本发明复方苦参有效部位。
(3)方法一、取处方量的复方苦参有效部位、乳化剂、脂质，混匀，加热熔融，将聚山梨醇-20或60加入其中，与70℃的蒸馏水混合，搅拌制备成微乳，将65℃的微乳倒入可保温的注射器中保温15分钟，在机械搅拌条件下于一定时间内将热的微乳加入到冷的蒸馏水中，即得药物混悬液。
方法二、取处方量的复方苦参有效部位、乳化剂、脂质，加热至80±5℃，在搅拌条件下加入适量相同温度甘油和泊洛沙姆的水溶液，制成粗乳，在80±5℃条件下用高压乳匀机载40MPa压力下乳匀5次，迅速冷却至室温形成主药混悬液。
方法三、按处方称取乳化剂，加少量吐温80，在高速搅拌条件加入70±5℃的蒸馏水中，待完全熔融作为水相，再称取脂质加入处方量复方苦参有效部位，加热熔融作为油相，将油相缓慢加入水相中，持续搅拌1小时后超声分散室稳，频率45-50Hz，超声5-8分钟，迅速冷却至室温形成主药混悬液。
方法四、取复方苦参有效部位，脂质和丙酮适量加入容器中，超声使充分溶解加入处方量的乳化剂，微热使溶成有机相，另取乳化剂溶于适量水中，构成水相，将有机相在(1000r/min)搅拌下注入75±2℃水相中，继续加热搅拌4h，使有机溶媒完全蒸发并使体系浓缩，将所得的半透明体系搅拌下(1000r/min)快速溶解于0-2℃的水相中，继续搅拌2小时，即得主药混悬液。
(4)制剂的制备水针制剂的制备取上述混悬液，加PVP适量，加注射用水至全量，搅匀，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成本发明复方苦参纳米水针制剂；输液制剂的制备取上述混悬液，加PVP适量，加注射用水至全量，搅匀，加入氯化钠或葡萄糖调等渗，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成本发明复方苦参纳米输液制剂；粉针制剂的制备取上述混悬液，加入赋形剂，加注射用水调整浓度，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，冷冻干燥，制备成本发明复方苦参粉针制剂。
本发明载体主要包括脂质和乳化剂两部分。
本发明所用的脂质可以为脂肪酸甘油酯类(包括三硬脂酸甘油酯、三棕榈酸甘油酯、三肉豆蔻酸甘油酯、三月桂酸甘油酯、三窬酸甘油酯、Witepsol W35、Witepsol H35、Witepsol H42、单硬脂酸甘油酯)及脂肪酸类(如硬脂酸、棕榈酸)等。
本发明所用乳化剂可以为磷脂(包括大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂及磷脂酰胆碱等)、Pluronic F68、泊洛沙姆、聚山梨醇、胆酸盐、四丁酚醛等。
本发明纳米注射制剂可以为纳米水针剂、纳米粉针剂、纳米输液制剂。
本发明纳米水针剂、纳米输液剂加入少量PVP(聚乙烯吡咯烷酮)，可以提高制剂的稳定性，防止纳米粒聚集。
本发明纳米粉针制剂的赋形剂为甘露醇、葡萄糖、乳糖、右旋糖酐、葡聚糖中的一种或两种。
本发明制剂所用纳米载体还可以通过以下方法制备得到将复方苦参有效部位的油溶液(聚氰基丙烯酸烷酯、聚乳酸、聚丙交酯-乙交酯、壳聚糖、明胶中的一种或几种)，同无水乙醇混合，摇匀，得透明溶液；水相为0.5％非离子型表面活性剂Pluronic F68的水溶液(pH值约6)，两相均为20℃，将油相通过硅胶管或细针头射入电磁搅拌的水相中，立即形成纳米囊，将溶液真空蒸发至原体积的1/5左右，用玻砂漏斗(9-15μm)过滤，即得。
本发明所用的以上载体制备工艺是我们经大量实验研究和优选的结果，在研究过程中我们采用了很多纳米技术工艺并进行了比较，有的工艺难以制备成纳米药物，而有的工艺即便制备成纳米药物，也达不到本发明制剂的靶向效果。
二、质量检测仪器H-7000型透射电镜仪(日本Hitachi公司)；Zetamaster光子相关光谱仪(英国Malvern公司)；LC-10A高效液相色谱仪(日本岛津)；TGL-18G型台式高速离心机。
检测依据参照《中华人民共和国药典》2005版二部附录XIX E指导原则项下的方法。
1、形态观察及粒径将本发明纳米药物在透射电镜下进行形态观察，可见呈圆球体，大小较均匀，表面光滑，无粘连。根据纳米药物的显微照片测定了500个，平均粒径为37.6nm，最大粒径为68.5nm，最小粒径为22.0nm，且粒径分布符合正态分布规律。
2、包封率和载药量测定参照复方苦参注射液项下苦参碱的含量测定方法进行含量测定，并用下述公式计算包封率和载药量包封率(％)＝(投药量－游离药物量)/投药量×100％；载药量(％)＝(投药量－游离药物量)/纳米药物的重量×100％。结果以苦参碱计平均包封率为95.7.％，载药量可达10％-25％。
3、稳定性考察将本发明纳米药物分别置于小瓶内，密封。于冰箱(3-5℃)、室温(20-25℃)和37℃(RH75％)的环境中放置，于0、1、2和3月观测纳米药物的外观、大小、再分散性等。结果均未见明显变化，3种条件下的纳米药物再分散性保持良好，无聚合现象的发生。结果见表1。
表1稳定性实验结果
4、加速实验含量测定复方苦参注射液(山西金晶药业有限公司)；本发明复方苦参纳米注射制剂(按本发明制备工艺制备，由广东天之骄药物开发有限公司实验室制备)；将以上制剂分别置40℃，RH75％条件下放置6个月，分别测定制剂中苦参碱的含量，考察加速条件下复方苦参制剂含量的变化(以0月含量为100％计算)。结果见表2。
表2制剂稳定性试验含量测定结果
试验结果表明在加速实验过程中复方苦参注射液的苦参碱含量下降明显，而采用本发明方法制备的复方苦参纳米注射制剂变化较小，同时测定上述制剂的不溶性微粒，发现复方苦参注射液不溶性微粒数目与本发明复方苦参纳米制剂比较在贮藏过程中不溶性微粒有显著增加趋势，而本发明复方苦参纳米制剂数目少且贮藏过程中基本不变，说明本发明复方苦参纳米制剂的制备方法显著提高了制剂的质量和稳定性，具有重要的实际意义。
三、药理和靶向实验试药与动物复方苦参注射液(山西金晶药业有限公司)；本发明复方苦参纳米注射制剂(按本发明制备工艺制备，由广东天之骄药物开发有限公司实验室制备)；Wistar大鼠，体重180-220g；健康小鼠，体重18-22g；瘤株小鼠S180，小鼠肝癌H22(广州市实验动物中心)。
1.对移植性肝癌H22的影响和靶向作用无菌抽取接种后第7d的肝癌H22荷瘤小鼠腹水，加4倍量生理盐水混匀，立即接种于小鼠右前肢腋窝处皮下，每只接种0.2ml，接种后24h随机分组，尾静脉注射给药，给药剂量为8g生药/kg，给药容积同为0.2ml/只，对照组给予等量生理盐水，每日给药1次，连续给药10d，于末次给药后24h脱颈处死小鼠，称体重并细心剥离皮下瘤块，于EM50电子天平称取瘤重，并计算抑瘤率，取肿瘤细胞然后按组织∶生理盐水为1∶1.5(W/V)的比例匀浆，离心10min(2000rpm)，取上清液用HPLC法测定苦参碱的含量。同时末次给药后1h取血测定血清中的苦参碱含量。结果见表3、表4。
表3对移植性肝癌H22小鼠的影响
注与生理盐水组比较**P＜0.01，与阳性对照组比较ΔΔP＜0.01表4对移植性肝癌H22的靶向作用
结果表明本发明复方苦参纳米注射制剂能延长移植性肝癌H22小鼠的生存时间，具有比复方苦参注射液更好的药理作用，本发明纳米注射制剂与复方苦参注射液比较有效成分在血清中浓度相当，而肝癌H22肿瘤细胞中显著增加，表明本发明纳米注射制剂对肝癌H22肿瘤细胞具有较好的靶向性。
2.对小鼠S180肿瘤作用2.1对小鼠S180肿瘤生长抑制作用和靶向作用取接种传代小鼠S180，在匀浆器中加入生理盐水，制成小鼠S180瘤匀浆液，再以生理盐水1∶3稀释，然后取0.2ml注入小鼠左腋下皮下，24小时称重，给药组小鼠每日尾静脉给药一次，给药剂量为8g生药/kg，给药容积同为0.2ml/只，对照组给予等量生理盐水，共7天。停药次日处死小鼠，称体重并细心剥离皮下瘤块，于EM50电子天平称取瘤重，并计算抑瘤率，将称重后的瘤块按组织∶生理盐水为1∶1.5(W/V)的比例匀浆，离心10min(2000rpm)，取上清液用HPLC法测定苦参碱的含量。同时末次给药后1h取血测定血清中的苦参碱含量。结果分别见表5、表6。
表5对小鼠S180肿瘤生长抑制作用
注与生理盐水组比较**P＜0.01，与复方苦参注射液比较ΔΔP＜0.01表6对小鼠S180肿瘤的靶向作用
结果表明本发明复方苦参纳米注射制剂能显著抑制S180肿瘤生长，具有比复方苦参注射液更好的药理作用，本发明纳米注射制剂与复方苦参注射液比较有效成分在血清中浓度相当，而S180肿瘤细胞中显著增加，表明本发明纳米注射制剂对S180肿瘤细胞具有较好的靶向性。
2.2对荷瘤S180小鼠死亡率和存活时间的影响取接种传代小鼠S180，在匀浆器中加入生理盐水，制成小鼠S180瘤匀浆液，再以生理盐水1∶3稀释，然后取0.2ml注入小鼠左腋下皮下，于接种肿瘤后一周，即第八天开始按1.1方法给药，让其自然死亡，待对照组动物全部死亡后，比较死亡率，并比较90天各组动物的存活时间差异，设给药组与对照组，每组小鼠20只，结果见表7。
表7对小鼠死亡率和存活时间的影响
注与生理盐水组比较**P＜0.01，与复方苦参注射液组比较ΔP＜0.05结果表明本发明复方苦参纳米注射制剂能显著降低荷瘤小鼠死亡率，延长荷瘤小鼠存活时间，与复方苦参注射液比较作用更显著。
3.镇痛作用3.1对小鼠热板致痛作用的影响取小鼠30只，雌雄各半，随机分为3组，每组10只，即生理盐水组、复方苦参注射液组、本发明复方苦参纳米注射制剂组，给药剂量为8g生药/kg，给药容积相同为0.2ml/只，空白对照组给予等量生理盐水，连续给药3天，末次给药后1h将各鼠分别固定于55±0.5℃的热板仪中，以舔后足作为“疼痛”的反应指标，观察给药后小鼠对热板痛的反应时间，结果见表5。
3.2对醋酸引起的扭体反应的影响取小鼠，雌雄各半，分组及给药方法同3.1，连续给药3天，末次给药后1h，腹腔注射0.6％醋酸溶液0.2ml/20g体重，观察10min内的小鼠扭体次数，结果见表8。
表8镇痛试验结果
注与生理盐水组比较*P＜0.05**P＜0.01试验结果表明本发明复方苦参纳米注射制剂具有较好的镇痛作用，与复方其中本发明复方苦参纳米注射制剂的镇痛作用比复方苦参注射液的作用更为显著。
4.止血作用4.1对小鼠出血时间的影响取小鼠，雌雄各半，分组及给药方法同3.1，连续给药3天，于末次给药后30min将小鼠尾尖端3mm处剪断，待血液自行流出开始计时，每隔30s用滤纸吸去血滴1次，直至血流自行停止(滤纸吸无血)为止，计算出血时间，结果见表9。
表9对小鼠出血时间的影响
注与生理盐水组比较*P＜0.05**P＜0.01试验结果表明本发明复方苦参纳米注射制剂具有显著的止血作用，与复方苦参注射液组比较效果更好。
5.抗炎作用5.1对小鼠耳二甲苯致炎的影响取小鼠30只，雌雄各半，分组及给药方法同3.1，连续给药3天，于末次给药后30min，将二甲苯0.02ml涂于小鼠左耳，1h后脱臼处死小鼠，剪下二耳，打孔称重，以左耳与右耳片重量差值为肿胀度，结果见表10。
表10对小鼠耳二甲苯致炎的影响结果
注与生理盐水组比较*P＜0.05**P＜0.01结果表明本发明复方苦参纳米注射制剂具有良好的抗炎作用，与复方苦参注射液组比较其抗炎效果更好。
7.血管刺激性考察取家兔8只，随机均分2组，每组4只，分别于左耳把家兔置于固定器中，且头用兔头固定仪固定，用酒精将皮肤消毒后，于右侧耳缘静脉注射复方苦参注射液和本发明复方苦参纳米注射制剂，于另一侧对应部位注射同一体积的生理盐水作为对照，每日注射1次，连续1周，观察兔耳缘静脉反应，每日观察注射部位血管有无发红、水肿、周围有无渗血，触摸血管有无变硬现象，左右耳比较观察。于末次给药后24h，将动物处死，取下两耳，进行组织切片检查，切片部位为进针部位的向心端，距进针部位1-4cm，分1-2.5cm和2.5-4cm两段取样。
观察指标及评分标准观察方法包括肉眼观察和显微镜下病理观察。观察给药血管及其周围组织的变化，显微镜下观察耳缘静脉有无血栓形成、内皮损伤及血管周围组织的病理变化情况。对各项指标评分。①血管变化。肉眼观察无明显充血记0分，轻度充血发红、纹路清晰记1分，充血发红、纹路不清记2分，重度充血、呈紫红色记3分；显微镜观察血管内皮及血管壁完整记0分，有内皮损伤记1分，有血栓栓塞记2分，血管破裂记3分。②血管周围组织变化。肉眼观察无明显水肿记0分，轻微水肿记1分，明显水肿记2分，严重水肿记3分；显微镜观察周围组织正常记0分，水肿记1分，出血记2分，有炎症细胞浸润记3分。将每组4只家兔各项观察指标得分累加，计算各组平均得分值，见表11。
表11刺激性试验结果
由以上实验结果可知本发明复方苦参纳米注射制剂与复方苦参注射液比较刺激性具有明显改善。
8.溶血毒性考察2％红细胞混悬液的制备取兔耳缘静脉取血10-20ml，放入盛有玻璃珠的锥形瓶中，振摇10分钟，除去纤维蛋白原，使成脱纤血。加10倍量的生理盐水溶液，摇匀，离心，除去上清液，沉淀的红细胞再用生理盐水溶液洗涤2-3次，至上清液不呈红色时为止。将所得的红细胞用用生理盐水配成浓度为2％的混悬液，即得。
试验方法取试管6支，按表中的配比量依次加入2％红细胞混悬液和生理盐水溶液，混匀，于37℃恒温箱中放置30分钟，分别加入不同量的药液(以第6管为空白对照)，摇匀后，置37℃恒温箱中，开始每隔15分钟观察1次，1小时后，每隔1小时观察1次，共观察2小时。结果见表12。
表12溶血实验结果
结果以第3试管为准，各管均未染有红色，显微镜下观察未见有红细胞破裂，说明本品不溶血，安全性好。
9.急性毒性实验取Wistar大鼠80只，雌雄各半。禁食24h，随机分4组，每组20只。浓缩成相同的生药浓度，各组分别尾静脉注射药物，给药剂量按生药量折算相当于复方苦参注射液300g生药/kg，每天给药3次，连续7天，观察小鼠死亡情况，结果见表13。
表13急性毒性实验结果
急性毒性实验结果表明本发明复方苦参纳米注射制剂与复方苦参注射液比较安全性更好。
小结以上药理实验结果表明本发明复方苦参纳米注射制剂药理作用显著好于复方苦参注射液，且本发明复方苦参纳米注射制剂具有更好的靶向性和安全性。
四、制备实施例实施例1(1)取复方苦参有效部位20g、卵磷脂50g、单硬脂酸甘油酯50g，混匀，加热熔融，将聚山梨醇-202g加入其中，与70℃的蒸馏水混合，搅拌制备成微乳，将65℃的微乳倒入可保温的注射器中保温15分钟，在机械搅拌条件下于一定时间内将热的微乳加入到冷的蒸馏水中，即得药物混悬液。
(2)制剂的备水针制剂的制备取上述混悬液，加PVP 2g，加注射用水至1000ml，搅匀，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成本发明复方苦参纳米水针制剂；输液制剂的制备取上述混悬液，加PVP 4g，加注射用水至50000ml，搅匀，加入氯化钠调等渗，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成本发明复方苦参纳米输液制剂；粉针制剂的制备取上述混悬液，加入甘露醇，加注射用水调整浓度，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，冷冻干燥，制备成本发明复方苦参粉针制剂500瓶。
实施例2(1)取复方苦参有效部位20g、豆磷脂50g、硬脂酸60g，混匀，加热熔融，将聚山梨醇-603g加入其中，与70℃的蒸馏水混合，搅拌制备成微乳，将65℃的微乳倒入可保温的注射器中保温15分钟，在机械搅拌条件下于一定时间内将热的微乳加入到冷的蒸馏水中，即得药物混悬液。
(2)制剂的制备水针制剂的制备取上述混悬液，加PVP 2g，加注射用水至1000ml，搅匀，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成本发明复方苦参纳米水针制剂；输液制剂的制备取上述混悬液，加PVP 4g，加注射用水至50000ml，搅匀，加入氯化钠调等渗，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成本发明复方苦参纳米输液制剂；粉针制剂的制备取上述混悬液，加入甘露醇，加注射用水调整浓度，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，冷冻干燥，制备成本发明复方苦参粉针制剂500瓶。
实施例3(1)取复方苦参有效部位30g、卵磷脂80g、单硬脂酸甘油酯90g，加热至80±5℃，在搅拌条件下加入相同温度甘油2g和泊洛沙姆5g的水溶液，制成粗乳，在80±5℃条件下用高压乳匀机载50MPa压力下乳匀5次，迅速冷却形成主药混悬液。
(2)制剂的制备水针制剂的制备取上述混悬液，加PVP 2g，加注射用水至1000ml，搅匀，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成本发明复方苦参纳米水针制剂；输液制剂的制备取上述混悬液，加PVP 4g，加注射用水至50000ml，搅匀，加入氯化钠调等渗，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成本发明复方苦参纳米输液制剂；粉针制剂的制备取上述混悬液，加入甘露醇，加注射用水调整浓度，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，冷冻干燥，制备成本发明复方苦参粉针制剂500瓶。
实施例4(1)取复方苦参有效部位50g、卵磷脂80g、三肉豆蔻酸甘油酯120g，加热至80±5℃，在搅拌条件下加入相同温度甘油3g和泊洛沙姆5g的水溶液，制成粗乳，在80±5℃条件下用高压乳匀机载50MPa压力下乳匀5次，迅速冷却形成主药混悬液。
(2)制剂的制备水针制剂的制备取上述混悬液，加PVP 2g，加注射用水至1000ml，搅匀，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成本发明复方苦参纳米水针制剂；输液制剂的制备取上述混悬液，加PVP 3g，加注射用水至50000ml，搅匀，加入葡萄糖调等渗，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成本发明复方苦参纳米输液制剂；粉针制剂的制备取上述混悬液，加入乳糖，加注射用水调整浓度，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，冷冻干燥，制备成本发明复方苦参粉针制剂500瓶。
实施例5(1)取复方苦参有效部位40g、Pluronic F68 75g、硬脂酸75g，加热至80±5℃，在搅拌条件下加入相同温度甘油3g和泊洛沙姆6g的水溶液，制成粗乳，在80±5℃条件下用高压乳匀机载50MPa压力下乳匀5次，迅速冷却形成主药混悬液。
(2)制剂的制备水针制剂的制备取上述混悬液，加PVP 2g，加注射用水至1000ml，搅匀，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成本发明复方苦参纳米水针制剂；输液制剂的制备取上述混悬液，加PVP 4g，加注射用水至50000ml，搅匀，加入氯化钠调等渗，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成本发明复方苦参纳米输液制剂；粉针制剂的制备取上述混悬液，加入葡萄糖，加注射用水调整浓度，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，冷冻干燥，制备成本发明复方苦参粉针制剂500瓶。
实施例6(1)取卵磷脂80g，吐温80 2g，在高速搅拌条件加入70±5℃的蒸馏水中，待完全熔融作为水相，再称取三窬酸甘油酯80g加入复方苦参有效部位30g，加热熔融作为油相，将油相缓慢加入水相中，持续搅拌1h后超声分散室稳，频率45-50Hz，超声5-8分钟，即得。
(2)制剂的制备水针制剂的制备取上述混悬液，加PVP 2g，加注射用水至1000ml，搅匀，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成本发明复方苦参纳米水针制剂；输液制剂的制备取上述混悬液，加PVP 4g，加注射用水至50000ml，搅匀，加入葡萄糖调等渗，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成本发明复方苦参纳米输液制剂；粉针制剂的制备取上述混悬液，加入右旋糖酐，加注射用水调整浓度，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，冷冻干燥，制备成本发明复方苦参粉针制剂500瓶。
实施例7(1)取复方苦参有效部位20g，硬脂酸90g和丙酮200ml加入容器中，超声使充分溶解，加入处方量的卵磷脂80g，微热使溶成有机相，另取泊洛沙姆20g溶于250ml水中，构成水相，将有机相在(1000r/min)搅拌下注入75±2℃水相中，继续加热搅拌4h，使有机溶媒完全蒸发并使体系浓缩到约500ml，将所得的半透明体系搅拌下(1000r/min)快速溶解于0-2℃的100ml水相，继续搅拌2h，即得。
(2)制剂的制备水针制剂的制备取上述混悬液，加PVP 2g，加注射用水至1000ml，搅匀，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成本发明复方苦参纳米水针制剂；输液制剂的制备取上述混悬液，加PVP 4g，加注射用水至50000ml，搅匀，加入葡萄糖调等渗，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成本发明复方苦参纳米输液制剂；粉针制剂的制备取上述混悬液，加入葡聚糖，加注射用水调整浓度，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，冷冻干燥，制备成本发明复方苦参粉针制剂500瓶。
实施例8(1)将复方苦参有效部位25g溶于聚丙交酯-乙交酯120g，同1000ml无水乙醇混合，摇匀，得透明溶液；水相为0.5％非离子型表面活性剂Pluronic F68的水溶液3000ml(pH值约6)，两相均为20℃，将油相通过硅胶管或细针头射入电磁搅拌的水相中，立即形成纳米囊，将溶液真空蒸发至原体积的1/5左右，用玻砂漏斗(9-15μm)过滤，即得。
(2)制剂的制备水针制剂的制备取上述混悬液，加PVP 2g，加注射用水至1000ml，搅匀，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成本发明复方苦参纳米水针制剂；输液制剂的制备取上述混悬液，加PVP 3g，加注射用水至50000ml，搅匀，加入氯化钠调等渗，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成本发明复方苦参纳米输液制剂；粉针制剂的制备取上述混悬液，加入葡萄糖和乳糖，加注射用水调整浓度，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，冷冻干燥，制备成本发明复方苦参粉针制剂500瓶。
实施例9(1)将复方苦参有效部位30g溶于聚氰基丙烯酸烷酯140g、同1000ml无水乙醇混合，摇匀，得透明溶液；水相为0.5％非离子型表面活性剂Pluronic F68的水溶液3000ml(pH值约6)，两相均为20℃，将油相通过硅胶管或细针头射入电磁搅拌的水相中，立即形成纳米囊，将溶液真空蒸发至原体积的1/5左右，用玻砂漏斗(9-15μm)过滤，即得。
(2)制剂的制备水针制剂的制备取上述混悬液，加PVP 2g，加注射用水至1000ml，搅匀，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成本发明复方苦参纳米水针制剂；输液制剂的制备取上述混悬液，加PVP 3g，加注射用水至50000ml，搅匀，加入氯化钠或葡萄糖调等渗，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成本发明复方苦参纳米输液制剂；粉针制剂的制备取上述混悬液，加入乳糖和葡聚糖，加注射用水调整浓度，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，冷冻干燥，制备成本发明复方苦参粉针制剂500瓶。
权利要求
1.一种复方苦参纳米注射制剂，其特征在于它是将苦参、白土苓提取得到的复方苦参有效部位配以载体制成的纳米级的注射制剂，其中复方苦参有效部位2-5重量份、载体10-20重量份。其特征还在于它具有靶向作用。
2.根据权利要求1的一种复方苦参纳米注射制剂，其特征在于所述的纳米级为20-70nm。
3.根据权利要求1或2所述的复方苦参纳米注射制剂，其制备方法为(1)主药混悬液的制备方法一、取处方量的复方苦参有效部位、乳化剂、脂质，混匀，加热熔融，将聚山梨醇-20或60加入其中，与70℃的蒸馏水混合，搅拌制备成微乳，将65℃的微乳倒入可保温的注射器中保温15分钟，在机械搅拌条件下于一定时间内将热的微乳加入到冷的蒸馏水中，即得药物混悬液。方法二、取处方量的复方苦参有效部位、乳化剂、脂质，加热至80±5℃，在搅拌条件下加入适量相同温度甘油和泊洛沙姆的水溶液，制成粗乳，在80±5℃条件下用高压乳匀机载40MPa压力下乳匀5次，迅速冷却至室温形成主药混悬液。方法三、按处方称取乳化剂，加少量吐温80，在高速搅拌条件加入70±5℃的蒸馏水中，待完全熔融作为水相，再称取脂质加入处方量复方苦参有效部位，加热熔融作为油相，将油相缓慢加入水相中，持续搅拌1小时后超声分散室稳，频率45-50Hz，超声5-8分钟，迅速冷却至室温形成主药混悬液。方法四、取复方苦参有效部位，脂质和丙酮适量加入容器中，超声使充分溶解加入处方量的乳化剂，微热使溶成有机相，另取乳化剂溶于适量水中，构成水相，将有机相在1000r/min搅拌下注入75±2℃水相中，继续加热搅拌4h，使有机溶媒完全蒸发并使体系浓缩，将所得的半透明体系在1000r/min搅拌下快速溶解于0-2℃的水相中，继续搅拌2小时，即得主药混悬液。(2)制剂的制备水针制剂的制备.取上述混悬液，加PVP适量，加注射用水至全量，搅匀，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成本发明纳米水针制剂；输液制剂的制备取上述混悬液，加PVP适量，加注射用水至全量，搅匀，加入氯化钠或葡萄糖调等渗，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成本发明纳米输液制剂；粉针制剂的制备取上述混悬液，加入赋形剂，加注射用水调整浓度，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，冷冻干燥，制备成本发明粉针制剂。
4.根据权利要求1或2所述的复方苦参纳米注射制剂，其制备方法为(1)主药混悬液的制备将复方苦参有效部位溶于聚氰基丙烯酸烷酯、聚乳酸、聚丙交酯-乙交酯、壳聚糖、明胶中的一种或几种，同无水乙醇混合，摇匀，得透明溶液；水相为pH值约6的0.5％非离子型表面活性剂Pluronic F68的水溶液，两相均为20℃，将油相通过硅胶管或细针头射入电磁搅拌的水相中，立即形成纳米囊，将溶液真空蒸发至原体积的1/5左右，用9-15μm玻砂漏斗过滤，即得。(2)制剂的制备水针制剂的制备.取上述混悬液，加PVP适量，加注射用水至全量，搅匀，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成本发明纳米水针制剂；输液制剂的制备取上述混悬液，加PVP适量，加注射用水至全量，搅匀，加入氯化钠或葡萄糖调等渗，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，灭菌，制备成本发明纳米输液制剂；粉针制剂的制备取上述混悬液，加入赋形剂，加注射用水调整浓度，调pH值为6.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，冷冻干燥，制备成本发明纳米粉针制剂。
全文摘要
本发明公开了一种复方苦参纳米注射制剂及其制备方法，将复方苦参有效部位与适宜量的载体与其它辅料采用本发明工艺方法制成纳米载体，并制备成水针剂、粉针剂和输液剂，本发明制剂稳定性好，具有靶向作用，药理实验表明本发明纳米注射制剂安全性好，且具有更好的疗效。
文档编号A61K9/10GK1883545SQ20051007749
公开日2006年12月27日 申请日期2005年6月24日 优先权日2005年6月24日
发明者张晴龙 申请人:张晴龙