专利名称：作为环氧合酶－2抑制剂的二芳基－2(5h)－呋喃酮类的释放一氧化氮的前药的制作方法
背景技术：
环氧合酶-2的选择性抑制剂是已知为非甾体抗炎药物(NSAIDs)的这类药物的一个亚类。NSAIDs在减少前列腺素诱导的疼痛和与发炎过程相关的肿胀方面具有活性，但在对与发炎过程并不相关的其它前列腺素调节过程的影响方面也具有活性。因此最常用的NSAIDs的高剂量使用会产生严重的副作用，包括威胁生命的溃疡，这限制了其治疗潜力。对于NSAIDs的一种替代物是使用皮质类固醇，其具有甚至更激烈的副作用，尤其是当涉及长期疗法时。
已发现以前的NSAIDs通过抑制人类花生四烯酸/前列腺素途径中的酶，包括环氧合酶(COX)，从而防止前列腺素的产生。发现有两种同工型COX酶，第一种，即COX-1，涉及生理学功能，而第二种，即COX-2，在发炎组织中被诱导，这一发现产生了新的进展。尽管常规NSAIDs阻滞两种形式的酶，但对与炎症相关的可诱导COX-2酶的识别提供了可行的抑制靶，其更有效地减轻炎症并产生更少且不那么激烈的副作用。已鉴定了很多具有作为COX-2抑制剂活性的化合物，包括罗非昔布(VIOXX)，艾托考昔(ARCOXITM)，塞来昔布(CELEBREX)和伐地考昔(BEXTRATM)，并且在该领域继续着大量的研究。
患有慢性的环氧合酶-2介导的疾病或病症的很多患者都是年迈患者，因此这些患者处于血栓形成的心血管事件的增加的危险中，例如卒中、心肌缺血、心肌梗塞、心绞痛、短暂性缺血发作(TIA；一时性黑矇)、可逆性缺血性神经障碍、和任何血管床(内脏、肾脏、主动脉、周围、等)中任何相似血栓形成事件。而且，有证据显示具有慢性炎性病症(如类风湿性关节炎和全身性红斑狼疮)的患者处于血栓形成的心血管事件的增加的危险中。理想的是这些患者得到合适的疗法以减少他们处于此类事件的危险，例如低剂量阿司匹林疗法。然而，据报道在大鼠模型中共同给药阿司匹林和选择性COX-2抑制剂导致比由任一药物单独给药产生的胃损伤实质上更加严重。参见Fiorucci等人，Gastroenterology，123卷，1598-1606页，2002。因此，COX-2选择性抑制剂对NSAIDs的主要优势会被阿司匹林的伴随使用所抵销。
本领域已知释放NO形式的非甾体抗炎药物，且据报道其比它们的常规NSAIDs对应体具有改进的肠胃和心血管安全曲线。而且，2001年6月28日公开的WO01/45703揭示了释放NO形式的选择性环氧合酶-2选择性抑制剂。
本发明提供用于环氧合酶-2选择性抑制剂的新型亚硝化前药，其适用于治疗环氧合酶-2介导的疾病或病症，且能够单独给药或与低剂量阿司匹林合用。本发明提供了治疗慢性的环氧合酶-2介导的疾病或病症的功效，有效减少了血栓形成的心血管事件和潜在的肾脏副作用的危险，同时减少了GI溃疡或出血的危险。
发明简述本发明包含式I的新型化合物，其是适用于治疗环氧合酶-2介导的疾病的二芳基-2-(5H)呋喃酮的一氧化氮释放前药 本发明还包含治疗环氧合酶-2介导的疾病的药学组合物和方法，包括使用式I的化合物。以上化合物可用作与低剂量阿司匹林的联合疗法以治疗慢性的环氧合酶-2介导的疾病或病症，同时还减少了血栓形成的心血管事件。
发明详述本发明包含作为前药的式I的新化合物，或其药学可接受盐，其在体内转变为二芳基-2(5H)-呋喃酮类，且适用于治疗环氧合酶-2介导的疾病 其中n是1-6的整数；R1选自(a)S(O)2CH3和(b)S(O)2NH2；R2和R3各自独立地选自(a)氢，(b)卤素，(c)C1-6烷氧基，(d)C1-6烷基硫基，(e)CN，(f)CF3，(g)C1-6烷基，和(h)N3；R4选自(a)C1-4烷基，任选由1-3个卤素基团取代，(b)苯基、萘基、或5-或6-元芳族杂环，各自任选由1-3个卤素基团取代，(c)-O-R5；和(d)-(CH2)m-N(R6)(R7)m是1-4的整数；和R5、R6和R7各自独立选自氢和C1-4烷基，任选由1-3个卤素基团取代。
本发明的一个实施方案包含式I的化合物，其中R1是S(O)2CH3，且R2和R3均为氢。
本发明的另一个实施方案包含式I的化合物，其中n是1、2或3。
本发明的另一个实施方案包含式I的化合物，其中R4是C1-4烷基。
本发明的另一个实施方案包含式I的化合物，其中R4是甲基。
本发明也包含包括了式I的化合物和药学可接受载体的药学组合物。
本发明也包括治疗对用非甾体抗炎药物的治疗敏感的炎性疾病的方法，包括给需要此治疗的患者给药非毒性治疗有效量的式I化合物。以上方法包含于该实施方案，其中该患者也处于血栓形成的心血管事件危险中，并且该患者在进行阿司匹林疗法以减少心血管事件危险。
本发明另一实施方案包含了治疗环氧合酶介导疾病的方法，该疾病由优于抑制COX-1而选择性地抑制COX-2的活性药物有利地治疗，所述方法包括给需要此治疗的患者给药非毒性治疗有效量的式I化合物。以上方法包含于该实施方案，其中该患者也处于血栓形成的心血管事件危险中，并且该患者在进行阿司匹林疗法以减少心血管事件危险。
本发明另一实施方案包含了治疗慢性的环氧合酶-2介导疾病或病症，并减少需要此治疗并处于血栓形成的心血管事件危险中的人类患者中血栓形成的心血管事件危险的方法，包括给所述患者伴随或顺序口服式I化合物和阿司匹林，式I化合物用量为治疗环氧合酶-2介导疾病或病症的有效量，阿司匹林用量为减少血栓形成的心血管事件危险的有效量。以上方法包含于该实施方案，其中式I化合物基于每日一次进行口服。以上方法包含于该实施方案，其中式I化合物基于每日两次进行口服。以上方法包含于该实施方案，其中环氧合酶-2选择性介导的疾病或病症选自骨关节炎、类风湿性关节炎和慢性痛。以上方法包含于该实施方案，其中阿司匹林给药剂量为约30mg-约1g。以上方法包含于该实施方案，其中阿司匹林给药剂量为约80mg-约650mg。以上方法包含于该实施方案，其中阿司匹林给药剂量为约81mg-约325mg。以上方法包含于该实施方案，其中阿司匹林每日口服一次。
本发明也包含包括了式I的化合物和阿司匹林以及药学可接受载体的药学组合物。
术语“卤素”或“卤代”包括F、Cl、Br和I。
术语“烷基”指具有指定碳原子数目的线性或支化结构和其组合。由此，例如C1-6烷基包括甲基、乙基、丙基、2-丙基、仲-和叔-丁基、丁基、戊基、己基、1，1-二甲基乙基、环丙基、环丁基、环戊基、和环己基。
术语“烷氧基”指具有指定碳原子数目的直链或支链构型的烷氧基基团。例如C1-6烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基等。
术语“烷基硫基”指具有指定碳原子数目的直链或支链构型的烷基硫基基团。例如C1-6烷基硫基包括甲硫基、丙硫基、异丙硫基等。
术语“5-或6元芳族杂环”指例如吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、吡唑、唑、异唑、噻唑、异噻唑、三唑、二唑、噻二唑、四唑、吡啶、嘧啶、吡嗪、哒嗪、和三嗪。
本文所述的一些化合物包含烯属双键、除非另行指明，意在包括E和Z几何异构体。式I化合物可包含一个或多个不对称中心，且因此可作为外消旋体和外消旋混合物、单一对映体、非对映体混合物和单独非对映体而出现。本发明意在包括式I化合物的所有此类异构形式。
术语“治疗慢性的环氧合酶-2介导的疾病或病症”指治疗或预防可通过抑制环氧合酶-2酶而有利地治疗或预防的任何慢性疾病或病症。该术语包括缓解疼痛、发热和各种状况的炎症，包括风湿热、与流感或其它的病毒性感染相关的症状、普通感冒、背下部和颈部疼痛、腹泻、头痛、偏头痛(急性和预防性治疗)、牙痛、扭伤和劳损、肌炎、神经痛、滑膜炎、包括类风湿性关节炎的关节炎、退化性关节病(骨关节炎)、痛风和强直性脊椎炎、急性、亚急性和慢性肌肉骨骼痛综合征如滑液囊炎、烧伤、损伤、和外科和牙科术后的疼痛以及手术疼痛的优先治疗。此外该术语包括抑制细胞瘤的转化和转移瘤的生长，因此包括癌症的治疗。该术语还包括子宫内膜异位症和帕金森病的治疗以及治疗环氧合酶介导的增生性疾病，例如在糖尿病性视网膜病和肿瘤血管生成中可能出现的疾病。术语“治疗”不仅包含治疗患者以缓解患者疾病或病症的征兆和症状，还包含预防性地治疗无症状患者以预防该疾病或病症的发作或进展。
“血栓形成的心血管事件”限定为由血小板聚集、血栓形成、和继发性缺血性临床事件引起的已知类型的任何突发事件，包括血栓形成或血栓栓塞性卒中、心肌缺血、心肌梗塞、心绞痛、短暂性缺血发作(TIA；一时性黑矇)、可逆性缺血性神经障碍、和任何血管床(内脏、肾脏、主动脉、周围、等)中任何相似血栓形成事件。
术语“需要此治疗并处于血栓形成的心血管事件危险中的患者”指既需要治疗环氧合酶-2介导的疾病，又处于血栓形成事件的危险中的患者。本领域技术人员可诊断出需要治疗环氧合酶-2介导的疾病或病症，又处于患有血栓形成事件的危险中的患者。例如，这种患者可以是患有骨关节炎和先前的心肌梗塞的50岁以上的患者。血栓形成的心血管事件的其它危险因素包括高血压、血胆固醇过多、糖尿病、慢性肾损伤、吸烟、或此类事件的任何以前的个人或家族史。向患者的给药组合包括自我给药和由他人向患者给药。
术语“治疗有效量”意指这样的药物或药剂量该量将引起由研究者、兽医、医生、或其它临床医师寻求的组织、系统、动物或人类的生物或药物响应。该术语也包含这样的药学药物量其将防止或减少由研究者、兽医、医生、或其它临床医师寻求的防止在组织、系统、动物或人类中出现的生物或药物事件的危险。环氧合酶-2抑制剂的给药剂量可高达NSAIDs的常规剂量水平。本发明使用的式I化合物的合适剂量水平如下所述。化合物可依照每日一次或两次的方案给药。
术语“减少危险的有效量”指这样的药物量其将防止或减少由研究者、兽医、医生、或其它临床医师寻求的防止在组织、系统、动物或人类中出现的生物或药物事件的危险。阿司匹林的给药剂量为约30mg-约1g，每天一次，优选剂量为约80mg-约650mg。
术语“伴随给药”指基本上同时给药药物。术语“伴随给药”既包含以单一药学剂型给药两种药物，也包含以其分别的单独药学剂型给药各活性药物。使用分别的剂型的情况下，该药物可以实质上在相同时间给药，即同时给药。
术语“顺序给药”指在分别交错的时间给药该药物。因此，药物可以顺序给药，使得阿司匹林和本发明化合物的有利药学效果由患者在基本上相同的时间实现。因此，例如，若本发明化合物和阿司匹林都基于每日一次给药时，在两种药物顺序给药之间的间隔可以相隔高达12小时。
本发明的药学组合物包括为活性成分的式I化合物或其药学上可接受的盐，并且也可以含有药学上可接受的载体以及任选的其它治疗成分。术语“药学上可接受的盐”包括由包括无机碱和有机碱的碱制备的盐，该碱产生非毒性药学可接受盐。由无机碱衍生的盐包括铝盐、铵盐、钙盐、铜盐、铁盐、亚铁盐、锂盐、镁盐、锰盐、亚锰盐、钾盐、钠盐、锌盐等。特别优选的是铵盐、钙盐、镁盐、钾盐和钠盐。由药学上可接受的有机非毒性碱衍生的盐包括伯胺盐，仲胺盐和叔胺盐，取代的胺包括天然存在的取代的胺、环胺以及碱性离子交换树脂的盐，例如精氨酸、甜菜碱、咖啡碱、胆碱、N，N-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡萄糖胺、葡糖胺、组氨酸、哈胺(Hydrabamine)、异丙胺、赖氨酸、甲基葡萄糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇等的盐。
当本发明的化合物为碱时，可以由包括无机酸和有机酸的酸制备盐，该酸产生药学上可接受的盐。此类酸包括乙酸、己二酸、天冬氨酸、1，5-萘二磺酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺酸、柠檬酸、1，2-乙二磺酸、乙磺酸、乙二胺四乙酸、富马酸、葡庚糖酸、葡萄糖酸、谷氨酸、氢碘酸、氢溴酸、盐酸、羟乙磺酸、乳酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲磺酸、粘酸、2-萘磺酸、硝酸、草酸、双羟萘酸、泛酸、磷酸、新戊酸、丙酸、水杨酸、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、对-甲苯磺酸、十一烷酸、10-十一烯酸等。
式I化合物是环氧合酶-2选择性抑制剂的前药，其在体内转化为二芳基-2(5H)-呋喃酮类。该化合物还在体内释放一氧化氮，据信这有助于改进的肠胃和潜在的肾脏安全曲线。由此，本发明化合物可与低剂量阿司匹林共同给药以治疗慢性的环氧合酶-2介导的疾病或病症，有效减少血栓形成的心血管事件和潜在的肾脏副作用的危险，同时减少GI溃疡或出血的危险。因此，相对于NSAIDs和现有的环氧合酶-2选择性抑制剂，具有高血压和心血管疾病的患者，以及具有肾机能不全的潜在患者，将从被给予本发明化合物中积极获益。
藉由本发明前药活性部分的环氧合酶-2活性，式I的化合物因此适用于缓解疼痛、发热和各种炎症病症，包括风湿热、与流感或其它的病毒性感染相关的症状、普通感冒、背下部和颈部疼痛、腹泻、头痛、偏头痛(急性和预防性治疗)、牙痛、扭伤和劳损、肌炎、神经痛、滑膜炎、包括类风湿性关节炎的关节炎、退化性关节病(骨关节炎)、痛风和强直性脊椎炎、急性、亚急性和慢性肌肉骨骼痛综合征如滑液囊炎、烧伤、损伤、和外科和牙科术后的疼痛以及手术疼痛的超前治疗。此外该化合物可抑制细胞瘤的转化和转移瘤的生长，因此可以用于治疗癌症。式I化合物还可用于子宫内膜异位症和帕金森病的治疗或预防。
式I化合物也可以通过阻止收缩性类前列腺素的合成而抑制类前列腺素诱导的平滑肌收缩，因此可以用于治疗痛经、早产和哮喘。
由于如上所述本发明前药的活性部分对环氧合酶-2(COX-2)的高活性和/或其优于环氧合酶-1(COX-1)而对环氧合酶-2(COX-2)的选择性，式I的化合物证明其适宜作为传统的非甾体类抗炎药(NSAIDs)的替代药，特别是当此类非甾体抗炎药可能为禁忌时，例如具有下列疾病的患者消化性溃疡、胃炎、局限性肠炎、溃疡性结肠炎、憩室炎或具有胃肠损害复发史；GI出血、凝血疾病包括贫血例如血凝血酶原过少、血友病或其它的出血问题(包括与减少的或受损的血小板功能有关的那些)；肾脏疾病(例如受损的肾脏机能)；外科手术前的患者或服用抗凝药物的患者；和那些易患NSAIDs诱导的哮喘的患者。
类似地，式I化合物适用作制剂中常规NSAIDs的部分或全部替代物，其中其目前与其它药物或成分共同给药。因此，在另一方面，本发明包含治疗上述环氧合酶-2介导的疾病的药学组合物，包括如上所述非毒性治疗有效量的式I化合物，和一种或多种成分，例如其它疼痛缓解剂，包括对乙酰氨基酚或非那西丁；麻醉性镇痛剂，例如可待因、芬太尼、氢吗啡酮、左啡诺、哌替啶、美沙酮、吗啡、羟考酮、脱氢吗啡、右丙氧芬、丁丙诺啡、布托啡诺、地佐辛、纳布啡、和喷他佐辛；包括咖啡因的增强剂；H2拮抗剂，氢氧化铝或氢氧化镁、二甲硅油；减充血剂，包括苯福林、苯丙醇胺、假麻黄碱、羟甲唑啉、ephinephrine、萘甲唑啉、丁苄唑啉、环己丙甲胺或左旋去氧麻黄碱；镇咳剂(antiitussive)，包括可待因、二氢可待因酮、咳美芬、咳必清或右旋甲吗喃；利尿剂；镇静或非镇静的抗组胺药；和质子泵抑制剂例如奥美拉唑。对于偏头痛的治疗或预防而言，本发明也包含了与例如利扎曲普坦、舒马普坦、佐米曲坦和那拉曲坦的5-HT激动剂共同给药。另外，本发明包含治疗环氧合酶介导的疾病的方法，包括给需要这种治疗的患者施用非毒性的治疗有效量的式I化合物，任选地与一种或多种上面刚刚所列的这些成分共同给药。
本发明化合物是环氧合酶-2的抑制剂前药，且因此适用于治疗以上枚举的环氧合酶-2介导的疾病。通过它们优于抑制环氧合酶-1而选择性地抑制环氧合酶-2的能力阐述了这一活性。因此，如随后的分析试验所阐述，本发明的化合物转化成活性化合物并因此治疗环氧合酶介导的疾病的能力可通过测量在花生四烯酸、环氧合酶-1或环氧合酶-2和式I化合物存在下合成的前列腺素E2(PGE2)的量来确定。IC50值表示使PGE2合成达到未抑制的对照组的50％所需的抑制剂的浓度。为了治疗任何这些环氧合酶介导的疾病，式I化合物可以含有常规非毒性药学可接受载体、辅助剂和溶媒的单位剂型经口服、局部、肠胃外给药、经吸入喷雾或直肠给药。本发明化合物可经由含服或口腔中舌下粘膜给药。本文所用的术语“肠胃外”包括皮下注射、静脉内、肌内、胸骨内注射或输注技术。本发明化合物还可通过鼻、肺(吸入气雾剂)或眼途径给药。除了治疗温血动物如小鼠、大鼠、马、牛、羊、狗、猫等外，本发明化合物可有效治疗人。
如上所述，治疗上述环氧合酶-2介导的疾病的药学组合物可任选包括一种或多种上述成分。
含有活性成分的药学组合物可采用适合于口服使用的形式，例如片剂、锭剂、糖锭剂、水悬浮液的或油悬浮液、可分散的粉剂或粒剂、乳剂、硬胶囊或软胶囊、糖浆剂或酏剂。用于口服使用的组合物可按本领域公知的制备药学组合物的任意方法制备，为了提供药学上美观可口的制剂，这些组合物可含有一种或多种选自甜味剂、调味剂、着色剂和防腐剂的试剂。片剂含有活性成分以及与之混合的适合制备片剂的非毒性药学可接受赋形剂。这些赋形剂可例如为惰性稀释剂，例如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；成粒剂和崩解剂，例如玉米淀粉或藻酸；粘合剂，例如淀粉、明胶或阿拉伯胶；润滑剂，例如硬脂酸镁，硬脂酸或滑石。片剂可不被包衣或用已知方法包衣，以便在胃肠道中延缓崩散和吸收，从而在较长的期限内提供持续的作用。例如可使用时间延缓物质，如甘油单硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯。也可用美国专利4,256,108、4,166,452和4,265,874所述方法包衣形成控制释放的渗透治疗片剂。
口服使用的制剂也可采用硬胶囊形式，其中活性成分与惰性固体稀释剂例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土混合，或采用软胶囊形式，其中活性成分与水或油状介质例如花生油、液体石腊或橄榄油混合。
水悬浮液含有活性物质以及与之混合的适合制备水悬浮液的赋形剂。这些赋形剂为悬浮剂，例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、西黄蓍胶和阿拉伯胶；分散剂或湿润剂可以是天然存在的磷脂，例如卵磷脂，或氧化烯与脂肪酸的缩合产物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物，例如十七亚乙基氧基十六烷醇，或环氧乙烷与脂肪酸和己糖醇所得的偏酯的缩合产物，例如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯，或环氧乙烷与脂肪酸和己糖醇酐所得的偏酯的缩合产物，例如聚乙烯失水山梨糖醇单油酸酯。水悬浮液也可含有一种或多种防腐剂，例如对羟基苯甲酸乙酯或正丙酯，一种或多种着色剂，一种或多种调味剂，以及一种或多种甜味剂，例如蔗糖、糖精或天冬甜素。
液体制剂包括使用自乳化药物递送体系和NanoCrystal技术。也可利用环糊精包合复合物。
油悬浮液可通过将活性成分悬浮于植物油例如花生油、橄榄油、芝麻油、椰子油，或矿物油如液体石腊中来制备。油悬浮液可含有增稠剂，例如蜂蜡、硬石腊或鲸蜡醇。可加入如上所述的甜味剂和调味剂以得到可口的口服制剂。可通过加入抗氧化剂如抗坏血酸使这些组合物防腐。
适合于通过加入水制备水悬浮液的可分散的粉剂和粒剂提供活性成分以及与之混合的分散剂或湿润剂、悬浮剂和一种或多种防腐剂。合适的分散剂或湿润剂和悬浮剂如上面所举例的那些。也可含有其它赋形剂，例如甜味剂、调味剂和着色剂。
本发明的药学组合物也可以水包油的乳剂形式存在。油相可为植物油，例如橄榄油或花生油，或矿物油，如液体石腊或它们的混合物。合适的乳化剂可以是天然存在的磷脂，例如大豆，卵磷脂，脂肪酸和己糖醇酐所得的酯或偏酯，例如失水山梨糖醇单油酸酯，以及所述的偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如聚氧乙烯失水山梨糖醇单油酸酯。乳剂也可含有甜味剂和调味剂。
糖浆剂和酏剂可用甜味剂例如甘油、丙二醇、山梨糖醇或蔗糖配制。这些制剂也可含有缓和剂、防腐剂、调味剂和着色剂。药学组合物可采用无菌的可注射的含水或含油(oleagenous)悬浮液形式，该悬浮液可按照本领域公知的方法使用上述的合适的分散剂或湿润剂和悬浮剂来配制。无菌的可注射制剂也可以是在非毒性的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌的可注射溶液或悬浮液，例如在1，3-丁二醇中的溶液。在可使用的并且可接受的溶媒和溶剂中，可使用水、林格氏溶液和等渗的氯化钠溶液。另外，无菌的固定油通常用作溶剂或悬浮介质。为此目的，可使用任何温和的固定油，包括合成的一或二甘油酯。另外，脂肪酸如油酸也可用于可注射的制剂。
式I化合物也可以直肠给药的栓剂形式给药。这些组合物可通过将药物与合适的无刺激的赋形剂混合来制备，赋形剂在常温下为固体，但在直肠温度下为液体，因此在直肠中溶化释放出药物。这些物质为可可脂和聚乙二醇。
为局部使用，可使用含有式I化合物的乳膏、软膏、胶冻剂、溶液或悬浮液等。(就本申请目的而言，局部应用包括漱口剂和含漱液。)本发明的药学组合物也可利用吸收促进剂，例如吐温80、吐温20、维生素E TPGS(d-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯)和Gelucire。
大约0.01mg至大约140mg/kg体重/天的剂量或大约0.5mg至大约7g/患者/天的剂量水平可用于治疗上述病症。例如通过给药大约0.01至50mg化合物/kg体重/天或大约0.5mg至大约3.5g/患者/天，优选2.5mg至1g/患者/天，可有效地治疗炎症。
可与载体物质混合制备单一剂型的活性成分的量随治疗的主体和具体的给药方式而变化。例如，用于人口服给药的制剂可含有0.5mg-5g活性药物，活性药物与合适的和常规用量的载体物质混合，载体物质可为组合物总量的大约5％至大约95％。单位剂型一般含有大约1mg至大约500mg活性成分，典型的有25mg、50mg、100mg、200mg、300mg、400mg、500mg、600mg、800mg或1000mg。
然而，应当理解，对于任何具体患者的特定剂量取决于各种因素，包括年龄、体重、一般的健康状况、性别、饮食、给药时间、给药途径、排泄速度、药物的配合和所治疗的具体疾病的严重程度。
合成方法适用作环氧合酶-2选择性抑制剂的二苯乙烯衍生物公开于US5849943中，在此将其全文引入作为参考。
本领域中已知适于用作COX-2抑制剂的二芳基-2(5H)-呋喃酮类，并且公开于US5474995中，在此将其全文引入作为参考。
用于制备适于用作COX-2抑制剂的二芳基-2(5H)-呋喃酮类的方法公开于US5840924中，在此将其全文引入作为参考。以商标名VIOXX销售的罗非考昔在本领域中是已知的并且可商购。
本发明的化合物可根据以下合成路线进行合成路线1 路线1中采用的缩写D.M.＝Dess-Martin试剂HF.pyr＝氟化氢吡啶(70/30)生物活性测定分析可以用下列分析方法测试式I化合物以测定它们的生物活性。
环氧合酶抑制活性以全细胞和微粒体环氧合酶分析测试化合物作为环氧合酶抑制剂活性。这两个分析用放射免疫分析法测定响应于花生四烯酸的前列腺素E2(PGE2)的合成。全细胞分析所用的细胞，且微粒体由此制备用于微粒体分析，是人骨肉瘤143细胞(特别表达环氧合酶-2)和人U-937细胞(特别表达环氧合酶-1)。在这些分析中，100％活性定义为在没有加入花生四烯酸酯和在花生四烯酸酯存在下前列腺素E2合成的差值。IC50值表示使PGE2合成达到未抑制的对照样的50％所需的推定抑制剂浓度。
A.微粒体环氧合酶分析如前所述制备Cox微粒体部分(Percival等人，Arch.Biochem.Biophys.(1994)315111-118)。在50mM的pH8.0的KPi、1μM血红素、1mM补充了10μg/ml的各Cox-1或Cox-2微粒体部分的苯酚中进行酶反应。将1μl的DMSO或测试化合物(在DMSO中浓缩的100倍储备液)加入100μl缓冲液。15分钟后，通过添加10μl的100μM花生四烯酸启动酶反应。酶反应在室温进行5分钟，之后通过添加10μl的1N HCl而停止反应。随后由EIA(分析设计)，采用生产商说明确定PGE2水平。
该分析可用于论证本发明化合物的未转化前药对COX-1和COX-2均无活性。
B.人全血环氧合酶分析基本原理全血提供了蛋白质和富含细胞的环境，用于研究抗炎性化合物如COX-2抑制剂和NSAIDs的生化功效。为研究这些化合物对环氧合酶的两种同工型(COX-2和COX-2)的抑制活性，人血由脂多糖(LPS)刺激24小时以诱导COX-2或使血液自发凝结以激活COX-1。前列腺素E2(PGE2)和血栓素B2(TXB2)的产生在培育末期由免疫分析分别测量为COX-2和COX-1活性读数。
方法之前报道的COX-1和COX-2活性的人全血分析(Brideau等，1996)按照下述进行。
1COX-2(LPS-诱导的PGE2产生)通过静脉穿刺从健康男性志愿者中收集新鲜血液于肝素化的试管中。这些受试者无明显的炎性病症，且在血液收集前至少7天未服用任何NSAIDs。血液与100μg/ml细菌脂多糖(LPS)(SigmaChem，#L-2630，得自大肠杆菌；血清型0111B4；用0.1w/v％在磷酸盐缓冲盐水中的牛血清白蛋白稀释)初始地预培养。5分钟后，于37℃，将每份500μl的经LPS处理的血液aree与2μl溶媒(DMSO)或2μl在DMSO中的测试化合物一起培养24小时(用于诱导COX-2)。将在0时刻(无LPS)的未刺激对照血液用作空白。在24hr培养末期，血液于40℃以3000rpm离心10分钟以获得血浆。用酶放射免疫试剂盒(分析设计，901-001)，根据生产商说明分析血浆PGE2。
2COX-1(凝结诱导的TXB2产生)将来自男性或女性志愿者的新鲜血液收集于不含抗凝剂的真空采血管(vacutainer)中。这些受试者无明显的炎性病症，且在血液收集前至少7天未服用任何NSAIDs。将500μl等份立即转移至预先加入2μl DMSO或2μl试验化合物的聚丙烯试管中。将这些试管旋转，并于37℃培养1h以使血液凝结。培养结束后，离心(3000rpm，40℃，10min)获得血清。得到血清，并且根据生产商的说明用酶免疫试剂盒(分析设计，901-002)测定TXB2。
代表性的大鼠爪水肿分析-方案计划基本原理角叉菜胶诱导的大鼠爪水肿分析是评价急性炎症中常规的、非选择性NSAIDs功效的既定分析(Winterand Flataker，1965；Mukherjee等，1996；Vinegar等，1987)。
方法将雄性Sprague-Dawley大鼠(200-250g)禁食16-18h，然后口服溶媒(0.5％美多秀(methocel))或试验化合物。1小时后，用永久性标志在一后爪的踝关节以上画线确定所测的爪的面积。基于阿基米德排水原理，用器官充盈度测量器(Ugo-Basile，意大利)测量爪的体积(V0)。使用带有27号针的注射器将0.05mL 1％角叉菜胶(SigmaChem.)的盐水溶液从大鼠的足底下注射(即每只爪500μg角叉菜胶)。三小时后，再次测量爪的体积(V3)并且计算爪体积的增加值(V3-V0)。将爪水肿与溶媒对照组比较，并以对照组的值作为0％计算抑制百分率。
NSAIDs-诱导的大鼠胃病基本原理常规的NSAIDs的主要副作用为它们使人产生胃损害的能力。大鼠对于NSAIDs的作用特别敏感，在过去常常使用大鼠评价现有的常规NSAIDs的胃肠副作用。在本分析中，通过测定口服51Cr-EDTA之后的51Cr泌尿排泄观察NSAIDs诱导的胃肠损害。51Cr泌尿排泄是公知且灵敏的检测动物和人胃肠完整性的技术。
方法将雄性Sprague Dawley大鼠(150-200g)口服给予试验化合物，一次(急性给药)或数日多次剂量(慢性给药)。在最后剂量给予后，立即给大鼠口服51Cr-EDTA(10μCi/大鼠)。将所述动物单独置于代谢笼中，自由进食食物和水。收集24小时期间的尿，以总摄入剂量的百分比计算51Cr泌尿排泄。
松鼠猴(squirrel monkeys)蛋白丢失性胃病基本原理蛋白丢失性胃病(表现为在GI道出现循环细胞和血浆蛋白)是对NSAIDs的显著的和剂量-限制副响应。这可以通过静脉给予51CrCl3溶液定量评价。该同位素离子可以急切地与细胞和血清珠蛋白和细胞内质网结合。因此在给予该同位素后24小时收集的粪便中出现的放射活性测量可以提供蛋白丢失胃病的敏感的和定量的指标。
方法通过管饲法给予各组雄性松鼠猴(0.8-1.4kg)1％美多秀或试验化合物，数日多次剂量。在最后一个药物/溶媒剂量后1小时静脉给予51Cr(5μCi/kg的1ml/kgPBS)，在代谢笼中收集24小时粪便并用γ-计数评价分泌的51Cr。51Cr粪便分泌被计算为总注射剂量的百分比。
雄性Sprague-Dawley大鼠中的大鼠主动脉平滑肌环通过腹膜内注射高剂量戊巴比妥钠(80-100mg/Kg)使得雄性Sprague-Dawley大鼠(Charles River Laboratories(Wilmington，MA))安乐死，制备大鼠主动脉平滑肌环。胸主动脉被迅速切除并立即置于含温热(37℃)充氧(95％O，5％CO2)Kreb’s缓冲液(每毫摩尔组成NaCl(119)；KCI(4.69)；CaCl2.H2O(2.52)；MgSO4.7H2O(0.57)；NaHCO2，(25)；NaH2PO.，.H2O(1.01)和葡萄糖(11.1))的Petri盘中。在立体解剖显微镜下，清洗主动脉，除去粘附脂肪和结缔组织。将组织切成环形片断，各约长2-3mm。
为测量组织在各种条件下的舒张试验，将不锈钢组织夹持器和U形不锈钢丝嵌入主动脉环的内腔。组织夹持器将环固定到器官浴槽底部，而U形钢丝末端系上细丝线，使得其连接至FT-202传感器。随后将组织夹持器和钢丝以及主动脉环悬浮到充满新鲜Kreb’s缓冲液的5ml的双夹套控温玻璃器官浴槽(Radnoti Glass Technology，Inc.，Monrovia，CA)中。将95％O2和5％CO2混合物鼓泡通过浴槽底部的多孔烧结盘。环获得1.5g的初始静止张力，且该制备允许在初始张力平衡约90分钟。在该平衡期间，浴槽流体每15分钟改变并用新选预热(37℃)Kreb’s缓冲液置换。静置的主动脉肌的等长张力和其对不同刺激的响应在通过低噪音ETH-400生物放大器(CB Sciences，Inc，Milford，MA)后经由MacLab 8/S计算机界面(CB Sciences，Inc，Milford，MA)在Power Macintosh 6100计算机上记录。组织条的收缩性响应度由10TM去氧肾上腺素确立，且该组织条由药物培养20分钟以确立稳定的收缩水平。
为测试舒张效果，可在该组织浴槽中将试验化合物以0.1μM-0.1mM的积累浓度加入去氧肾上腺素预收缩条。试验化合物的浓度可仅在舒张之后增加，因为之前的浓度已达到平高线水平。
大鼠中的胃侵蚀模型本发明与阿司匹林共同给药的组合的胃保护效果可通过以下分析评价。
在用于试验之前将雄性Wistar大鼠(200-250g)禁食16-18h。阿司匹林、结合阿司匹林的罗非考昔(分别给药)、或结合阿司匹林的试验化合物(分别给药)在试验早晨以在0.5％美多秀中1ml/kg的给药体积给予。3小时后，通过吸入CO2使动物安乐死，胃被除去、在盐水中漂洗并制备用于成像处理。采用数字照相机对胃进行显微拍照，由不知道是治疗组的观察者采用成像软件对胃侵蚀进行测量。胃侵蚀的长度mm测量，获得来自各胃的所有侵蚀的总长度并用作胃损伤评分。
该模型也记载于S.Fiorucci等人，Gastroenterology，123卷，1598-1606页，2002和M.Souza等人，Am.J.Physiol.Gastrointest.Liver Physiol.，285卷，G54-G61页，2003。
代表性实施例本发明用下列非限定实施例来阐述，除非另有说明，其中所有操作都在室温或环境温度下进行，即在18-25的温度下进行；使用旋转蒸发器在减压(600-4000帕4.5-30mm.Hg)且浴温至多60℃的条件下蒸发溶剂；反应过程用薄层色谱法(TLC)监测，所给的反应时间仅是用于说明；熔点未经校正，‘d’表示分解；所给的熔点为所制备的物质得到的熔点；在某些制备中多晶型可能产生具有不同熔点的物质的分离；用至少一种下列方法测定所有最终产物的结构和纯度TLC，质谱，核磁共振(NMR)谱或微量分析数据；所给的收率仅是用于说明；在300MHz、400MHz或500MHz下使用指定的溶剂测定的NMR数据是以主要鉴定质子的δ值形式且按相对于作为内标的四甲基甲硅烷(TMS)的每百万份之份数(ppm)给出；用于信号形状的常规缩写为s.单峰；d.双峰；t.三峰；m.多重峰；br.宽峰等；另外，“Ar”表示芳香族信号；化学符号具有其通用含义；还使用下列缩写v(体积)，w(重量)，b.p.(沸点)，m.p.(熔点)，L(升)，mL(毫升)，g(克)，mg(毫克)，mol(摩尔)，mmol(毫摩尔)，eq(当量)。
下列缩写具有指定的含义Ac＝乙酰基Boc-甘氨酸＝N-叔丁氧基羰基-甘氨酸DIBAL＝氢化二异丁基铝DMAP＝4-(二甲氨基)吡啶DMF＝N，N-二甲基甲酰胺EDCl＝盐酸1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺HF.pyr＝氟化氢吡啶(70/30)TBS＝叔丁基(二甲基)甲硅烷基TBSCl＝叔丁基(二甲基)甲硅烷基氯化物THF＝四氢呋喃烷基的缩写Me＝甲基Et＝乙基t-Bu＝叔丁基具有以下结构的Dess-Martin反应剂在本领域中已知。
参见Dess，D.B.；Martin，J.C.，J.Org.Soc.，1983，48，4155。
实施例1(2Z)-4-(乙酰氧基)-3-[4-(甲基磺酰基)苯基]-2-苯基丁-2-烯酸5，6-双(硝基氧基)己酯
步骤1(2Z)-2-[4-(甲基磺酰基)]-3-苯基丁-2-烯-1，4-二醇 向于-78℃搅拌的，在1.5L的二氯甲烷中110g的4-(4-甲基磺酰基-苯基)-3-苯基-5H-呋喃-2-酮溶液滴加150mL的DIBAL。所得混合物温热到室温且搅拌过夜。反应混合物随后冷却到-78℃，滴加1.2L的1M的NaOH水溶液。添加之后，所得混合物温热到室温，并分离有机相。水相用二氯甲烷萃取。合并有机相并通过Na2SO4干燥。蒸发之后得到110g标题化合物。
1H NMR(丙酮-d6，500MHz)δ7.69(d，2H)，7.36(d，2H，7.16-7.05(m，5H)，4，66(d，2H)，4.63(d，2H)，4.19(t，1H，OH)，4.17(t，1H，OH)，3.04(s，3H)。
步骤2(2Z)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-[4-(甲基磺酰基)苯基]-3苯基丁-2-烯-1-醇
向于-78℃搅拌的，在1L的THF中的110g(2Z)-2-[4-(甲基磺酰基)苯基]-3-苯基丁-2-烯-1，4-二醇和50g咪唑溶液中滴加在250mL二氯甲烷中的51g TBSCl溶液，所得混合物在-78℃搅拌30min。随后加入盐水并温热到室温。分离有机相。水相用EtOAc萃取。合并有机相，通过Na2SO4干燥，蒸发。快速色谱法纯化所得粗物质提供25.6g白色固体标题化合物。
1H NMR(丙酮-d6，500MHz)δ7.69(d，2H)，7.37(d，2H)，7.18-7.04(m，5H)，4，77(s，2H)，4.65(d，2H)，3.96(t，1H，OH)，3.03(s，3H)，0.84(s，9H)，0.01(s，6H)。
步骤3乙酸(2Z)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-[4-(甲基磺酰基)苯基]-3苯基丁-2-烯酯 向在1L的二氯甲烷中的46g(2Z)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-[4-(甲基磺酰基)苯基]-3苯基丁-2-烯-1-醇和120mmolDMAP溶液滴加120mmol乙酸酐。所得混合物在rt搅拌1h。反应混合物负载到硅胶柱上，用EtOAc洗脱提供50.5g白色固体的标题化合物。
1H NMR(丙酮-d6，500MHz)δ7.68(d，2H)，7.33(d，2H)，7.15-7.04(m，5H)，5.16(s，2H)，4.75(s，2H)，3.02(s，3H)，1.92(s，3H)，0.81(s，9H)，-0.03(s，6H)。
步骤4乙酸(2Z)-4-羟基-2-[4-(甲基磺酰基)苯基]-3-苯基丁-2-烯酯
向在125mL的MeCN中的50.5g乙酸(2Z)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-[4-(甲基磺酰基)苯基]-3苯基丁-2-烯酯溶液中加入10mL的PyHF，所得混合物在rt搅拌1.5h。反应混合物用600mL甲苯稀释，随后负载到硅胶柱上，用EtOAc洗脱。蒸发溶剂得到38.3g标题化合物。
1H NMR(丙酮-d6，500MHz)δ7.68(d，2H)，7.32(d，2H)，7.15-7.00(m，5H)，5.20(s，2H)，4.62(d，2H)，4.09(t，1H，OH)，3.02(s，3H)，1.92(s，3H).
步骤5(2Z)-4-(乙酰氧基)-3-[4-(甲基磺酰基)苯基]-2-苯基丁-2-烯酸 向在500mL二氯甲烷中的38.3g乙酸(2Z)-4-羟基-2-[4-(甲基磺酰基)苯基]-3-苯基丁-2-烯酯溶液加入47g Dess-Martin试剂，所得混合物在rt搅拌2h。随后加入2mL水，所得混合物在rt搅拌1.5h。随后混合物过滤并蒸发。由此获得的粗物质溶解于200mL的THF与200mL的t-BuOH的溶剂混合物中。向所得混合物添加30mL 2-甲基-2-丁烯，随后加入200mL的1.2M磷酸和200mL的1M的NaClO2。所得混合物在rt搅拌30min。分离有机相，水相用EtOAc萃取。合并有机相，通过Na2SO4干燥，过滤，然后蒸发。从醚重结晶纯化粗物质以提供37g白色固体标题化合物。
1HNMR(丙酮-d6，500MHz)δ7.76(d，2H)，7.43(d，2H)，7.18-7.12(m，3H)，7.12-7.08(m，2H)，5.24(8，2H)，3.05(s，3H)，1.88(s，3H)。
步骤6乙酸5，6-二溴己酯 向在-78℃的CH2Cl2(750mL，0.4M)中的己-5-烯-1醇(30.9mg，309mmol)和DMAP(41.5g，340mmol，1.1当量)溶液中加入乙酸酐(32.1mL，340mmol，1.1当量)。反应在rt搅拌1h。产物通过采用20％EA/HeX的硅胶塞以提供作为无色油的所需产物(42.7g，收率＝97％)。该化合物直接用于溴化。向乙酸己-5-烯-1酯(42.7g，300mmol)的-78℃的CH2Cl2(600mL，0.5M)溶液中加入溴(330mL，330mmol，1.1当量)。反应在-78℃搅拌15min，随后温热到rt。蒸发溶剂提供作为浅黄色油的所需产物(89g，收率＝98％)。
1H NMR(500MHz，丙酮-d6)δ4.38-4.32(m，1H)，4.04(t，2H)，3.95-3.93(m，1H)，3.84-3.80(m，1H)，2.16-2.10(m，1H)，1.98(s，3H)，1.90-1.82(m，1H)，1.72-1.62(m，3H)，1.56-1.48(m，1H)。
步骤7乙酸5，6-二(硝基氧基)己酯 向rt下CH3CN(600mL，0.282M)的乙酸5，6-二溴己酯(89g，295mmol)中加入硝酸银(200g，1180mmol，4当量)。反应在80℃搅拌过夜，随后蒸发至干。残余物在EtOAc中悬浮，超声处理并过滤通过硅胶塞并用EA冲洗。通过combi-flash 3×120g硅胶试剂盒，其采用梯度(5min内0-5％，30min内5-55％，10min内55-70％EA/Hex)，产物被纯化以提供浅黄色油的所需产物(65.2g，收率＝83％)。
1HNMR(500MHz，丙酮-d6)δ5.52-5.46(m，1H)，5.00(dd，1H)，4.72(dd，1H)，4.05-4.03(m，2H)，1.96(s，3H)，1.88-1.84(m，2H)，1.71-1.65(m，2H)，1.60-1.50(m，2H)。
步骤8二硝酸6-羟基己-1，2-二酯 向0℃的乙酸5，6-双(硝基氧基)己酯(31.3g，118mmol)的THF-EtOH(1∶1，0.492M)溶液中5分钟内滴加氢氧化钠溶液(2N，126mL，251mmol，2.1当量)。反应在rt搅拌2h。用饱和NaHCO3溶液猝灭反应混合物，用EA冲洗3次。合并的有机层被盐水冲洗，Na2SO4干燥，过滤并蒸发。通过采用梯度(5min内0-5％，30min内5-55％，10min内55-70％EA/Hex)的combi-flash 2×120g硅胶试剂盒纯化提供淡黄色油的所需产物(24.5g，收率＝92％)。
1H NMR(500MHz，丙酮-d6)δ5.53-5.47(m，1H)，5.00(dd，1H)，4.72(dd，1H)，3.55(d，2H)，3.50(t，1H)，1.88-1.80(m，2H)，1.58-1.51(m，4H)。
步骤9(2Z)-4-(乙酰基氧基)-3-[4-(甲基磺酰基)苯基]-2-苯基丁-2-烯酸5，6-双(硝基氧基)己酯
2.5g的(2Z)-4-(乙酰基氧基)-3-[4-(甲基磺酰基)苯基]-2-苯基丁-2-烯酸，10mmol的5，6-双(硝基氧基)己-1-醇，15mmol的DMAP和10mmol的EDCI溶液在rt搅拌3h。随后加入AcOH(2mL)，混合物过滤通过硅胶垫，用EtOAc冲洗，蒸发，通过快速色谱法纯化(15-50％EtOAc/己烷)得到白色固体的2.45g所需化合物。
1H NMR(丙酮-d6，500MHz)δ7.79(d，2H)，7.45(d，2H)，7.21-7.16(m，1H)，7.13-7.08(m，2H)，5.52-5.44(m，1H)，5.21(s，1H)，4.98(dd，1H)，4.72(dd，1H)，4.29(t，2H)，3.09(s，3H)，1.92(s，3H)，1.89-1.74(m，4H)，1.60-1.48(m 2H)。
实施例2(2Z)-4-(乙酰基氧基)-3-[4-(甲基磺酰基)苯基]-2-苯基丁-2-烯酸(5R)-5，6-双(硝基氧基)己酯 步骤14-硝基苯甲酸己-5-烯-1-酯
向0℃的CH2Cl2(350mL，0.57M)中的己-5-烯-1-醇(20.0g，200mmol)溶液中加入三乙胺(33.7mL，240mmol，1.2当量)，DMAP(1.22g，10mmol，0.05当量)，随后是4-硝基苄氧基氯(39g，210mmol，1.05当量)。反应在rt搅拌2h。用饱和NH4Cl溶液猝灭反应混合物，用CH2Cl2萃取3次。合并的有机相用盐水冲洗，Na2SO4干燥，过滤并蒸发。通过采用梯度(5min内0-5％，30min内5-25％，10min内25-40％EA/Hex)的combi-flash 2×120g硅胶试剂盒纯化产物，提供浅黄色油的所需产物(35g，收率＝70％)。
1H NMR(500MHz，丙酮-d6)δ8.36(d，2H)，8.26(d，2H)，5.87-5.79(m，1H)，5.03(d，1H)，4.94(d，1H)，4.38(t，2H)，2.14(m，2H)，1.84-1.78(m，2H)，1.60-1.54(m，2H)。
步骤24-硝基苯甲酸(5R)-5，6-二羟基己酯 向0℃的t-BuOH-H2O(1∶1，0.077M)中的AD-混合-β(34g)溶液加入4-硝基苯甲酸己-5-烯-1-酯(6g，24.07mmol)。反应在0℃搅拌过夜。反应混合物用250mL的EA稀释，通过加入10g的偏亚硫酸氢钠猝灭并在0℃搅拌30min。混合物在rt搅拌1h，随后用EtOAc萃取3次，用盐水冲洗，Na2SO4干燥，过滤并蒸发。化合物由醚重结晶，并在冷室内搅拌过夜两次以得到3.3g白色固体的标题化合物(通过Mosher衍生物分析，大于99％的对映体过量)。
1H NMR(500MHz，丙酮-d6)δ8.36(d，2H)，8.27(d，2H)，4.38(t，2H)，3.62-3.54(m，3H)，3.49-3.45(m，1H)，3.41-3.35(m，1H)，1.87-1.77(m，2H)，1.69-1.62(m，1H)，1.59-1.49(m，2H)，1.46-1.40(m，1H)。
步骤34-硝基苯甲酸(5R)-5，6-二(硝基氧基)己酯 向-78℃的CH2Cl2(20mL，0.565M)中硝酸(8mL，178mmol，15.75当量)溶液中加入硫酸(2mL，37.5mmol，3.32当量)，随后是CH2Cl2(10mL)中的4-硝基苯甲酸(5R)-5，6-二羟基己酯(2.5g，8.83mmol)。混合物在0℃搅拌2h。反应混合物倾倒在冰(约200g)上，随后用CH2Cl2萃取3次。合并的有机层用水、盐水冲洗，Na2SO4干燥，过滤蒸发。通过采用梯度(5min内0-5％，25min内5-40％，10min内40-70％EA/Hex)的combi-flash 120g硅胶试剂盒纯化产物，以提供粘性浅黄色油的所需产物(3.1g，收率＝91％)。
1H NMR(500MHz，丙酮-d6)δ8.35(d，2H)，8.26(d，2H)，5.56-5.52(m，1H)，5.03(dd，1H)，4.75(dd，1H)，4.41(t，2H)，1.98-1.88(m，4H)，1.76-1.66(m，2H)。
步骤4二硝酸(2R)-6-羟基己-1，2-二酯
5min内向0℃的THF-Et0H(1∶1，0.5M)中4-硝基苯甲酸(5R)-5，6-二(硝基氧基)己酯(3.1g，8.3mmol)溶液滴加氢氧化钠2N(10mL，20mmol，2当量)。反应在rt搅拌2h。用饱和NH4Cl溶液猝灭反应混合物，用EtOAc萃取3次。合并的有机层用盐水冲洗，Na2SO4干燥，过滤并蒸发。通过采用梯度(5min内0-5％，30min内5-55％，10min内55-70％EA/Hex)的combi-flash 120g硅胶试剂盒纯化产物，提供无色油的所需产物(1.51g，收率＝81％)。
1H NMR(500MHz，丙酮-d6)δ5.52-5.48(m，1H)，5.01(dd，1H)，4.72(dd，1H)，3.56-3.50(m，3H)，1.88-1.81(m，2H)，1.54-1.50(m，4H)。
步骤5(2Z)-4-(乙酰基氧基)-3-[4-(甲基磺酰基)苯基]-2-苯基丁-2-烯酸(5R)-5，6-双(硝基氧基)己酯 rt下3g的(2Z)-4-(乙酰基氧基)-3-[4-(甲基磺酰基)苯基]-2-苯基丁-2-烯酸、1.7g的二硝酸(2R)-6-羟基己-1，2-二酯、10mmol的DMAP和10mmol的EDCI溶液在40mL的二氯甲烷中搅拌2h。随后，加入乙酸酐(0.5mL)，混合物过滤通过硅胶垫，用EtOAc冲洗，蒸发，通过快速色谱法(15-50％EtOAc/己烷)纯化得到白色固体的所需化合物2.8g。
1H NMR(丙酮-d6，500MHz)δ7.79(d，2H)，7.45(d，2H)，7.21-7.16(m，1H)，7.13-7.08(m，2H)，5.52-5.44(m，1H)，5.21(s，1H)，4.98(dd，1H)，4.72(dd，1H)，4.29(t，2H)，3.09(s，3H)，1.92(s，3H)，1.89-1.74(m，4H)，1.60-1.48(m 2H)。
实施例3(2Z)-4-(乙酰基氧基)-3-[4-(甲基磺酰基)苯基]-2-苯基丁-2-烯酸4，5-双(硝基氧基)戊酯 步骤14，5-双(硝基氧基)戊醇 向在0℃150mL的EtOH中的18.7g的乙酸4，5-双(硝基氧基)戊酯溶液加入2.96g的NaOH。混合物搅拌90min，通过添加饱和NaHCO3猝灭，用EtOAc萃取，盐水冲洗，硫酸钠干燥。通过快速色谱法纯化得到6.3g的橙色油的所需化合物。
1H NMR(丙酮-d6，500MHz)δ5.56(m，1H)，5.01(dd，1H)，4.73(dd，1H)，3.68(t，1H)，3.60(m，2H)，1.93-1.86(m，2H)，1.69-1.64(m，2H)。
步骤2(2Z)-4-(乙酰基氧基)-3-[4-(甲基磺酰基)苯基]-2-苯基丁-2-烯酸4，5-双(硝基氧基)戊酯
向在0℃的20mL的CH2Cl2中1.72g的(2Z)-4-(乙酰基氧基)-3-[4-(甲基磺酰基)苯基]-2-苯基丁-2-烯酸加入1.06g的4，5-双(硝基氧基)戊醇，225mg的DMAP和970mg的EDCI。混合物在RT搅拌2h，随后通过添加饱和NH4Cl猝灭，用EtOAc萃取，饱和NaHCO3、盐水冲洗，且硫酸钠干燥。通过快速色谱法纯化得到白色固体的标题化合物1g。
1H NMR(丙酮-d6，500MHz)δ7.77(d，2H)，7.43(d，2H)，7.18-7.16(m，3H)，7.08(dd，2H)，5.53-5.50(m，1H)，5.20(s，1H)，4.97(dd，1H)，4.69(dd，1H)，4.31(m，2H)，3.05(s，2H)，1.89(m，7H)。
实施例4(2Z)-4-(乙酰基氧基)-3-[4-(甲基磺酰基)苯基]-2-苯基丁-2-烯酸3，4-双(硝基氧基)丁酯 步骤13，4-双(硝基氧基)丁醇
RT下向150mL的丙酮中27.8g的丁-1，2，4-三醇溶液中加入27.3mL的2，2-二甲氧基丙烷和10mg的PTSA。反应搅拌3h，随后通过添加200mg的NaHCO3猝灭。搅拌15min之后，蒸发溶剂。粗化合物过滤通过采用60％EtOAc/己烷的硅胶垫以提供30g的所需化合物，其为无色油。该化合物直接用于下一步骤。
向在0℃的200mL的CH2Cl2中20g的2-(2，2-二甲基-1，3-二烷-4-基)乙醇溶液中加入33.5g的DMAP和26mL的乙酸酐。混合物在RT搅拌2h，随后由过滤通过硅胶短垫而猝灭。通过快速色谱法纯化提供20.7g无色油的所需化合物。该化合物直接用于下一步骤。在-78℃硫酸(40mL)加入硝酸(20mL)，随后在0℃搅拌10min。在-78℃，加入20mL的CH2Cl2中10g的乙酸2-(2，2-二甲基-1，3-二烷-4-基)乙酯溶液，反应搅拌1h。通过将反应混合物加入到1L埃伦迈尔烧瓶中500g冰而实现猝灭。随后化合物由CH2Cl2萃取，由NaHCO3、盐水冲洗，硫酸钠干燥。粗产物勿需进一步纯化而直接用于下一步骤。向25℃40mL的EtOH中的5.1g乙酸3，4-双(硝基氧基)丁酯溶液加入855mg的NaOH。混合物搅拌1h，添加饱和NaHCO3而猝灭。EtOAc萃取，盐水冲洗，硫酸钠干燥。快速色谱法纯化得到浅黄色油的所需化合物1g。
1H NMR(丙酮-d6，500MHz)δ5.71-5.66(m，1H)，5.07(dd，1H)，4.76(dd，1H)，3.97(t，1H)，3.77-3.68(m，2H)，2.02-1.95(m，2H)。
步骤2(2Z)-4-(乙酰基氧基)-3-[4-(甲基磺酰基)苯基]-2-苯基丁-2-烯酸3，4-双(硝基氧基)丁酯
向0℃的30mL CH2Cl2中1.72g(2Z)-4-(乙酰基氧基)-3-[4-(甲基磺酰基)苯基]-2-苯基丁-2-烯酸溶液加入750mg的3，4-双(硝基氧基)丁醇，560mg的DMAP和880mg的EDCl。混合物在RT搅拌2h，随后通过加入饱和NH4Cl猝灭，EtOAc萃取，饱和NaHCO3、盐水冲洗，硫酸钠干燥。快速色谱法纯化得到930mg白色固体的标题化合物。
1H NMR(丙酮-d6，500MHz)δ7.77(d，2H)，7.43(d，2H)，7.17-7.15(m，3H)，7.08(dd，2H)，5.56-5.52(m，1H)，5.22(s，2H)，4.95(dd，1H)，4.69(dd，1H)，4.47-4.41(m，2H)，3.05(s，3H)，2.32-2.19(m，2H)，1.89(s，3H)。
权利要求
1.式I的化合物，或其药学可接受盐 其中n是1-6的整数；R1选自(a)S(O)2CH3和(b)S(O)2NH2；R2和R3各自独立地选自(a)氢，(b)卤素，(c)C1-6烷氧基，(d)C1-6烷基硫基，(e)CN，(f)CF3，(g)C1-6烷基，和(h)N3；R4选自(a)C1-4烷基，任选由1-3个卤素基团取代，(b)苯基、萘基、或5-或6-元芳族杂环，各自任选由1-3个卤素基团取代，(c)-O-R5；和(d)-(CH2)m-N(R6)(R7)m是1-4的整数；和R5、R6和R7各自独立选自氢和C1-4烷基，任选由1-3个卤素基团取代。
2.根据权利要求1的化合物，其中R1是S(O)2CH3，和R2和R3均为氢。
3.根据权利要求1的化合物，其中n是1、2或3。
4.根据权利要求1的化合物，其中R4是C1-4烷基。
5.根据权利要求4的化合物，其中R4是甲基。
6.一种治疗对用非甾体抗炎剂的治疗敏感的炎性疾病的方法，包括给需要此治疗的患者给药非毒性治疗有效量的权利要求1的化合物。
7.根据权利要求6的方法，其中该患者也处于血栓形成的心血管事件危险中，并且该患者在进行阿司匹林疗法以减少心血管事件的危险。
8.一种治疗环氧合酶介导疾病的方法，该疾病由优于抑制COX-1而选择性地抑制COX-2的活性药物有利地治疗，所述方法包括给需要此治疗的患者给药非毒性治疗有效量的权利要求1的化合物。
9.根据权利要求8的方法，其中该患者也处于血栓形成的心血管事件危险中，并且该患者在进行阿司匹林疗法以减少心血管事件危险。
10.一种治疗慢性的环氧合酶-2介导疾病或病症，和减少需要此治疗并处于血栓形成的心血管事件危险中的人类患者中血栓形成的心血管事件危险的方法，包括给所述患者伴随或顺序口服权利要求1的化合物和阿司匹林，权利要求1的化合物用量为治疗慢性的环氧合酶-2介导疾病或病症的有效量，阿司匹林用量为减少血栓形成的心血管事件危险的有效量。
11.根据权利要求10的方法，其中该化合物基于每日一次进行口服给药。
12.根据权利要求10的方法，其中该化合物基于每日两次进行口服给药。
13.根据权利要求10的方法，其中环氧合酶-2选择性介导的疾病或病症选自骨关节炎、类风湿性关节炎和慢性痛。
14.根据权利要求10的方法，其中阿司匹林给药剂量为约30mg-约1g。
15.根据权利要求14的方法，其中阿司匹林给药剂量为约80mg-约650mg。
16.根据权利要求15的方法，其中阿司匹林给药剂量为约81mg-约325mg。
17.根据权利要求10的方法，其中阿司匹林每日一次口服给药。
18.一种药物组合物，其包括权利要求1的化合物和阿司匹林以及药学可接受载体。
19.一种药物组合物，其包括权利要求1的化合物和药学可接受载体。
全文摘要
本发明包含式I的新型化合物，其是适用于治疗环氧合酶－2介导的疾病的二芳基－2(5H)－呋喃酮类的一氧化氮释放前药。本发明还包含某种治疗环氧合酶－2介导的疾病的药物组合物和方法，包括使用式I的化合物。以上化合物可用作与低剂量阿司匹林的联合疗法以治疗慢性的环氧合酶－2介导的疾病或病症，同时还减少了血栓形成的心血管事件。
文档编号A61P29/00GK1914151SQ200580003240
公开日2007年2月14日 申请日期2005年1月25日 优先权日2004年1月27日
发明者C·贝特莱特, 李连海, C·博利厄, 王召印, C·F·斯图里诺 申请人:默克弗罗斯特公司