专利名称：：含有氯吡格雷的药物组合物的制作方法
技术领域：
：本发明属于医药
技术领域：
，具体涉及一种含有原花青素和氯吡格雷或其药理上可接受的盐作为活性成分的药物组合物。
背景技术：
：花青素(anthocyanin)属酚类化合物中的类黄酮类，是一种水溶性色素，是一类广泛存在于植物中的主要呈色物质，可以随着细胞液的酸碱改变颜色(细胞液呈酸性则偏红，细胞液呈碱性则偏蓝)，多存在于葡萄、苹果、高粱和樱桃等植物中，其中以葡萄(籽和皮)含量最为丰富。花青素是构成花瓣和果实颜色的主要色素之一，它是由不同数量的儿茶素或表儿茶素结合而成，自然条件下游离的花青素极少见，原花青素是山不同数量的儿茶素或表儿茶素结合而成，最简单的原花青素是儿茶素或表儿茶素或儿茶素与表儿茶素形成的二聚体，此外还有三聚体、四聚体等直至十聚体。按聚合度的大小，通常将二至四聚体称为低聚体(0PC)，将五聚体以上的称为高聚体(PPC)。原花青素具有广泛的生物活性，近年來的研究发现其在抗氧化、抗动脉粥样硬化、抗病毒、抗肿瘤、抗辐射、抗炎症、抗过敏、保健功效等许多功能上均显示了一定效果，作用广泛、使用时几乎无任何副作用。随着年龄的增长，动脉中的弹性纤维由于逐渐氧化而变硬，而动脉硬化是导致老年人心脑血管疾病的一个主要原因，机体内的低密度酯蛋白、胆固醇增加也是导致动脉硬化和心脏病的关键因素。动物实验和临床研究发现，葡萄籽提取物原花青素可以有效地降低胆固醇和低密度脂蛋白水平，预防血栓形成，有助于预防心脑血管疾病的发生。血小板聚集在止血与血栓形成中具有关键的作用，多种物质都可以通过各自特异性受体引起血小板的活化与聚集。二磷酸腺苷(ADP)是人们发现最早、也是体内最重要的诱导血小板聚集的物质。血小板二磷酸腺苷(ADP)受体拮抗剂包括噻氯吡定、氯吡格雷、普拉格雷等。氯吡格雷是一种新型高效的抗血小板药物，临床上应用于治疗动脉粥状硬化疾病、急性冠脉综合症、预防冠脉内支架植入术后支架内再狭窄和血栓性并发症等，与其他抗血小板药物相比，氯吡格雷具有疗效强、费用低、副作用小等优点，氯吡格雷与阿司匹林联用正逐渐成为心脑血管病中抗血栓治疗的标准。氯吡格雷为血小板聚集抑制剂，能选择性地抑制ADP与血小板受体的结合，随后抑制激活ADP与糖蛋白GPlIb/IIla复合物，从而抑制血小板的聚集，氯吡格雷作为一种有效的抗血小板制剂正被临床广泛使用。国际专家已达成"抗血小板制剂越有效越容易导致出血"的共识，同时这也是临床上的治疗矛盾，氯吡格雷抗凝活性强、抑制血小板聚集有效、作用迅速，但不可避免的导致出血危险性增加。如果药物引发出血风险增加，即便出血不严重，也会显著降低患者的依从性，依从性降低的风险在抗血小板制剂中很重要，这可能会导致心血管事件的反弹。因此在应用抗血小板制剂氯吡格雷治疗血栓性疾病时如何有效降低出血风险成为临床治疗中迫切需要解决的问题。
发明内容本发明提供了一种含有活性成分原花青素和氯吡格雷或其药理上可接受的盐的药物组合物。本发明将原花青素和氯吡格雷这两者联合用药，找到了一种更为有效的治疗血栓性疾病的方法。基于目前临床上关于"抗血小板制剂越有效越容易导致出血"的共识，氯吡格雷在抗血小板聚集中抗凝活性越好、越有效、作用越迅速，其出血风险越大。寻找一种即能保持抗凝活性的迅速强劲又能有效降低出血风险的复方药物组合物成为治疗血栓性疾病的研究方向。氯吡格雷是通过抑制血小板聚集发挥抗凝效果的药物，而原花青素却是从植物中提取的类黄酮类物质，是一种强有力的抗氧化剂，可抑制炎症和过敏，改善关节的柔韧性等作用。本发明通过反复多次的试验摸索，创造性地把氯吡格雷和中药提取物原花青素有效组合在一起，发现在应用氯吡格雷治疗血栓类疾病的同时联合应用原花青素在抑制血栓形成中效果出乎意外，原花青素不但没有影响氯吡格雷的抗凝效果，两者合用后在降低出血不良反应上取得了非常好的效果，这样就在充分发挥氯吡格雷在抗血小板聚集中抗凝活性好、作用迅速的优势的同时，出血风险大大降低，有效降低了氯吡格雷在抗血小板聚集中带来的出血风险，大大降低了氯吡格雷的不良反应。实施例io采用组胺致大鼠背部皮肤急性炎症反应，使血浆蛋白透入血管外组织速率加快，致毛细血管通透性增加，然后注入伊文思蓝，通过比较蓝染面积和其丙酮生理盐水浸出液吸光度值来反应本发明药物组合物在降低毛细血管通透性的作用。本发明的药物组合物的优势体现在下列几个方面一、原花青素和氯吡格雷的联合应用产生了很好的协同效果，取得了意想不到的疗效。氯吡格雷能有效抑制血小板聚集，但同时会引发出血风险，我们通过设计不同的实验，证实了合用原花青素不但没有影响到氯吡格雷的抗凝活性，反而使得氯吡格雷的抗凝活十3增强，更为可贵的是使氯吡格雷的出血率减小，降低出血风险可使氯吡格雷的抗凝活性发挥的更有效、更迅速彻底。二、长期使用本发明的药物组合物，对血栓性疾病患者的长期生存率具有有益的影响，对患者的预后产生积极的影响，这也是本发明所解决的最具有意义的临床治疗问题。本发明要求保护的是一种含有活性成分原花青素和氯吡格雷或其药理上可接受的盐的药物组合物。根据药物的性质和患者用药方便的需要，我们将本发明的药物组合物制备成固体药物制剂，如片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂、散剂、膜剂等。其中片剂包括普通片剂、分散片、缓释片、崩解片、咀嚼片、泡腾片、肠溶衣片等剂型。氯吡格雷药理上可接受的盐为其烟酸盐、枸橼酸盐、硫酸氢盐、盐酸盐、马来酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硝酸盐、草酸盐等。所述的原花青素为花青素单体、低聚体或高聚体中的一种或多种，原花青素单体为儿茶素或表儿茶素或者其混合物，原花青素二聚体为儿茶素、表儿茶素或儿茶素与表儿茶素形成的二聚体或其混合物。药物组合物中氯吡格雷或氯吡格雷可药用盐中的游离氯吡格雷和原花青素的重量比为1:0.21:100。氯吡格雷或氯吡格雷可药用盐中的游离氯吡格雷和原花青素的重量比优选为1:0.2~1:20，在此优选比例中氯吡格雷和原花青素联合应用在药效试验中发现效果最好，并能更大程度充分发挥氯吡格雷在抗血小板聚集中抗凝活性好、作用迅速的优势，同时出血风险大大降低，有效降低了氯吡格雷在抗血小板聚集中带来的出血风险，并降低了氯吡格雷的不良反应。本发明采用固体药物制剂，具有携带、使用方便，给药途径简单、易行的优点，易于为患者接受。本发明的药物组合物按照通常的制药技术配制，可以使用以下添加剂按常规技术制备赋形剂(例如乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇、山梨糖醇、淀粉、糊精、结晶纤维素、阿拉伯胶、葡聚糖等)，润滑剂(硬脂酸镁、硬脂酸钙、滑石粉、微粉硅胶、硼酸、十二烷基硫酸钠等)，粘合剂(羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等)，崩解剂(低取代羟丙基纤维素、羧甲基纤维素、羧甲基淀粉、交联聚乙烯吡咯烷酮等)，乳化剂(膨润土、氢氧化镁、氢氧化铝、十二垸基硫酸钠等)，稳定剂(对羟基苯甲酸甲酯、苯甲醇、苯乙醇、苯酚、山梨酸、脱氢乙酸等)，矫味剂(蔗糖、香料、阿斯巴甜、环糊精等)，稀释剂等。具体实施例方式现通过以下实施例详细阐述本发明，但本发明的范围并不仅限于此。下面实施例中所述的氯吡格雷可药用盐的重量均是以药用盐中所含氯吡格雷的重量计。实施例1普通片剂5原花青素25g氯吡格雷硫酸氢盐25g微晶纤维素250g乳糖20g10%淀粉浆适量硬脂酸镁1.5g制备工艺称取处方量的原花青素、氯吡格雷硫酸氢盐、微晶纤维素、乳糖混合均匀。另将适量的10%淀粉浆加入于混合粉末中，混合均匀，制软材，通过18目尼龙筛制成湿粒，6(TC左右干燥，干粒水分应控制在1.5%以下。20目筛整粒，再与硬脂酸镁混匀，压片，即得。实施例2普通片剂儿茶素5g氯吡格雷盐酸盐25g淀粉400g糊精20g50%乙醇适量硬脂酸镁2.0g制备工艺称取处方量的儿茶素、氯吡格雷盐酸盐、淀粉、糊精混合均匀。另将适量的50%乙醇加入于混合粉末中，混合均匀，制软材，通过18目尼龙筛制成湿粒，6(TC左右千燥，干粒水分应控制在1.5%以下。20目筛整粒，再与硬脂酸镁混匀，压片，即得。实施例3分散片表儿茶素600g氯吡格雷15g交联羧甲基纤维素钠10g微晶纤维素500g聚乙烯吡咯烷酮50g5%PVP60%乙醇溶液适量微粉硅胶5g制备工艺按处方量称取表儿茶素、氯吡格雷，以微品纤维素为填充剂，交联羧甲基纤维素钠、聚乙烯吡咯烷酮为崩解剂，5MPVP60M乙醇溶液为黏合剂，微粉硅胶为助流剂，用流化床一步制粒，然后压片，即得。实施例4缓释片原花青素低聚体75g氯吡格雷15g羟丙基甲基纤维素20g乳糖250g80%乙醇溶液适量硬脂酸镁1.5g制备工艺先将原花青素低聚体、氯吡格雷、乳糖粉碎过100目筛；羟丙基甲基纤维素过80目筛。然后按处方量称取处方量的原花青素、氯吡格雷、羟丙基甲基纤维素及乳糖将其混匀，加80%乙醇溶液制软材，过18目筛制粒，湿颗粒在60。C左右千燥，干颗粒经16目筛整粒，加硬脂酸镁混匀，混匀压片，即得。实施例5胶囊剂原花青素高聚体500g氯吡格雷5g微晶纤维素300g微粉硅胶5g制备工艺将原花青素低聚体、氯吡格雷、微晶纤维素、微分硅胶粉碎过100目筛混匀，直接填装胶囊即得。实施例6颗粒剂原花青素氯吡格雷淀粉糊精庶糖粉80%乙醇制备工艺称取处方腦g5g加0g25g30g适量量的原花青素、氯吡格雷、淀粉、糊精、蔗糖粉混合均匀。另将适量的80%乙醇加入于混合粉末中，混合均匀，制软材，通过18目尼龙筛制成湿粒，60°C左右干燥，20目筛整粒，分装，即得。实施例7滴丸剂原花青素250g氯吡格雷25g聚乙二醇4000150g聚乙二醇6000150g制备工艺将聚乙二醇4000和聚乙二醇6000置容器中，加热至90。C10(TC，待全部熔融后，加入原花青素及氯吡格雷搅拌至熔解，转移至贮液瓶中，密闭并保温在80°C9(、°C，调节滴液定量阀门，由上往下，滴入10。C15t:的液状石蜡中，将成形的滴丸沥尽并擦除液状石蜡，置石灰缸里干燥，即得。实施例8分散片原花青素400g氯吡格雷5g交联羧甲基纤维素钠80g微晶纤维素500g聚乙烯吡咯垸酮50g5%PVP60%乙醇溶液适量微粉硅胶5g制备工艺按处方量称取原花青素、氯吡格雷，以微晶纤维素为填充剂，交联羧甲基纤维素钠、聚乙烯吡咯垸酮为崩解剂，5XPVP60X乙醇溶液为黏合剂，微粉硅胶为助流剂，用流化床一步制粒，然后压片，即得。实施例9氯吡格雷原花青素药物组合物对大鼠血小板聚集的抑制作用1.试验方法取SD大鼠64只，雄性，重量200-300g，山东新时代药业新药药理中心提供，随机分8组，每组8只，预养一周。对照组(生理盐水)、氯吡格雷组(6mg/kg)、原花青素组(6ing/kg)、儿茶素组(6mg/kg)、表儿茶素组(6mg/kg)、原花青素加氯吡格雷(6mg/kg+6mg/kg)组、8儿茶素加氯吡格雷(6mg/kg+6mg/kg)组、表儿茶素加氯吡格雷(6mg/kg+6mg/kg)组，灌胃给药，每日一次，共7天。抗血小板聚集作用的测定动物经上述给药2天后，隔夜禁食，于次R给药1小时后，用乌拉坦腹腔注射麻醉后剖腹分离腹主动脉，插入聚乙烯管取血5ml于试管内(管内按抗凝剂和血1:9预置3.8%枸橼酸钠溶液0.5ml)，将全血按1000转/分离心4min，取富血小板血浆(PRP)lml。再将余液按3000转/分离心8min，取贫血小板血浆(PPP)lml，分置两塑料试管内。调剂后恒温(37±0.1)°C。用ADP(30ul/管)和胶原(30ul/管)做聚集诱导剂，描计最大聚集强度，并计算其抑制率。聚集抑制率=(对照组聚集强度一试验组聚集强度)/对照组聚集强度X100%2.试验结果表1对ADP和胶原引起的大鼠血小板聚集的抑制作用(x土s，n=8)组别齐u量ADP胶原(mg/kg)聚集强度(％)抑制率(％)聚集强度(％)抑制率(％)对照组NS0.601±0扁0.758±0.081氯吡格雷组60.403±0.056**32.90.504士0.07(T33.5原花青素组60.585±0.0652.660.701±0扁7.52儿茶素组60.593±0.0501.330.717±0.0405,41表儿茶素组60.581±0.0433.330.722±0.0554.75原花青素+氯组6+60.289土0.052树51.90.302±0.065***52.2儿茶素+氯组6+60.291±0.055**#51.60.339±0細***55.3表儿茶素+氯组6+60.263±0.053***56,20.363土0.061树52.1注"与对照组比较p〈0.01;#与氯吡格雷组比较p<0.05;由表1可见，原花青素、儿茶素以及表儿茶素和氯吡格雷联合用药后，对ADP或者胶原引起的大鼠血小板聚集有明显的抑制作用，联合应用产生了很好的协同作用，且随着药物剂量的增加，其抑制率也增高呈剂量依赖性。实施例10原花青素氯吡格雷联合用药对大鼠皮肤毛细血管通透性的影响1.试验方法SD大鼠40只，雄性，体重(200±20)g，山东新时代药业新药药理中心提供，按体重随机分为模型组、氯吡格雷组(3mg/kg)、原花青素氯吡格雷低剂量组(18mg/kg+3mg/kg)9及原花青素氯吡格雷高剂量组(36mg/kg+6mg/kg)，每组10只。按体重灌胃给药，模型组灌胃生理盐水，试验前1天将大鼠背部毛除净，给药1小时后，将大鼠背部皮下注入200ug组胺(lmg/ml)，立即在尾静脉注射1%伊文思蓝0.4ml/100nig，20min后断头处死，剥皮测着色皮斑面积，以圆面积计算公式计算，然后用标准的2cm直径打孔器打下蓝染皮片。将大鼠皮肤蓝染皮片放入7:3丙酮与生理盐水混合液(4ml)中，分两次浸泡，每次2小时，合并浸液，加上述混合液至5ml，放置电热恒温水槽，在65。C孵存36小时，直至皮肤蓝色完全消失。在用离心机离心10min，取上清液，用紫外可见光光度计测定吸光度。运用SPSS统计软件处理，蓝染面积采用多样品组间两两比较检验，多个样本吸光度数据间比较采用非参数检验。2.试验结果表2原花青素氯吡格雷联合用药对大鼠皮肤通透性的影响(x土s)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注^与模型组比较P〈0.05;"与模型组比较P〈0.01;^与氯吡格雷组比较，P〈0.01。实验表明，原花青素氯吡格雷低、高剂量组均对组胺所致的大鼠皮肤毛细血管通透性的发生有明显的抑制作用，随着剂量的增加，其抑制程度增高呈剂量依赖性，与模型组比较，原花青素氯吡格雷低、高剂量组均有显著性差异，单独使用氯吡格雷蓝染面积增大，吸光度增加，使毛细血管通透性增加更严重，与文献报道一致，应用原花青素氯吡格雷药物组合物后吸光度减小，有效降低大鼠皮肤毛细血管通透性。实施例11原花青素氯吡格雷药物组合物对实验大鼠颈动-静脉旁路血栓形成的抑制作用1.试验方法取大鼠110只，雄性，体重200-250g，随机分为6组，每组20只(对照组10只)，预养一周。共设对照组(生理盐水)、氯吡格雷组(5mg/kg)、原花青素高聚体组(50mg/kg)、原花青素低聚体组(50mg/kg)、原花青素高聚体氯吡格雷组(50mg/kg+5mg/kg)及原花青素低聚体氯吡格雷组(50mg/kg+5mg/kg)。血栓形成抑制率的测定取大鼠称重，灌胃给药后60min，用乌拉坦腹腔注射麻醉后，分离左颈外静脉和右颈总动脉，取三段聚乙烯管组成的套管，其中间一段置一根5cm长的称重丝线，以肝素生理盐水(50u/ml)充满聚乙烯管。当管的一端插入颈外静脉后，夹住管的一端，将丝线固定的一端套管插入右颈总动脉，手术完成后立即丌放血流。15min后中断血流，迅速取出丝线称重。总重量减去丝线重量即为血栓湿重。按以下公式计算血栓形成抑制率。血栓形成抑制率-(对照组血栓重一试验组血栓重)/对照组血栓重X100呢测定完血栓湿重后处死大鼠，解剖，借助放大镜观察胃粘膜充血、水肿、出血情况，有胃粘膜充血、水肿、出血现象的大鼠，记入相应的实验组胃粘膜出血例。2.试验结果表3花青素氯吡格雷对实验大鼠颈动-静脉旁路血栓形成的抑制作用(x士s)组别n剂量他.栓湿重(mg)抑制率(％)出血出血率(mg/kg)例数对照组10NS34.72±5.38氯吡格雷组20525.84±4.47w25.58315%原花青素高聚体组205031.15±6.8910.2800%"原花青素低聚体组205030.22±8.0112.9600%**原花青素高聚体氯吡格雷组2050+517.66±4.23""**49.1400%**原花青素低聚体氯吡格雷组2050+513.09±3.35,62.3000%**注""与对照组比较，P〈0.01;"与氯吡格雷组比较，P〈0.01。由表3可见，原花青素高聚体、原花青素低聚体和氯吡格雷联合用药后，在抑制血栓形成上取得了很好的协同性作用，而且在联合用药后，对氯吡格雷的主要不良反应，出血危险性增加有了很好的抑制作用，使得出血率明显降低，说明原花青素高聚体、原花青素低聚体和氯吡格雷联合用药后，在抑制大鼠动-静脉旁路血栓形成取得很好效果的同时，并没有产生任何的出血风险。1权利要求1.一种药物组合物，其特征在于它含有原花青素和氯吡格雷或其药理上可接受的盐。2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于其中所述的氯吡格雷药理上可接受的盐为其烟酸盐、枸橼酸盐、硫酸氢盐、盐酸盐、马来酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸iL硝酸盐或草酸盐。3.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于所述的原花青素是其单体、低聚体或高聚体中的一种或一种以上。4.如权利要求1-3中任一权利要求所述的原花青素，其特征在于所述的原花青素单体是儿茶素或表儿茶素。5.如权利要求1所述的原花青素，其特征在于它是儿茶素或表儿茶素形成的低聚体。6.如权利要求1所述的原花青素，其特征在于它是儿茶素形成的二聚体、表儿茶素形成的,二聚体或儿茶素与表儿茶素形成的二聚体或其混合物。7.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于所述的药物组合物中氯吡格雷或氯吡格雷可药用盐中的游离氯吡格雷和原花青素的重量比为1:0.21:100。8.如权利要求l所述的药物组合物，其特征在于所述的药物组合物中氯吡格雷或氯吡格雷可药用盐中的游离氯吡格雷和原花青素的重量比为1:0.21:20。9.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于所述的药物组合物为固体药物制剂。10.如权利要求9所述的药物组合物，其特征在于所述的药物组合物剂型为片剂、颗粒剂、胶囊剂、滴丸剂、散剂。全文摘要本发明提供了一种含有活性成分原花青素和氯吡格雷或其药理上可接受的盐的药物组合物，将原花青素和氯吡格雷这两者联合用药，找到了一种更为有效的治疗血栓性疾病的方法，通过反复多次的试验摸索，本发明创造性地把氯吡格雷和中药提取物原花青素有效组合在一起，发现在应用氯吡格雷治疗血栓类疾病的同时联合应用原花青素在抑制血栓形成中效果出乎意外，原花青素不但没有影响氯吡格雷的抗凝效果，两者合用后在降低出血不良反应上取得了非常好的效果，这样就在充分发挥氯吡格雷在抗血小板聚集中抗凝活性好、作用迅速的优势的同时，出血风险大大降低，有效降低了氯吡格雷在抗血小板聚集中带来的出血风险，大大降低了氯吡格雷的不良反应。文档编号A61K31/4365GK101554379SQ20081001498公开日2009年10月14日申请日期2008年4月9日优先权日2008年4月9日发明者程国良,赵志全申请人:鲁南制药集团股份有限公司