专利名称：：一种治疗不孕症的药物组合物及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及一种药物组合物及其制备方法，特别是涉及一种治疗不孕症的药物组合物及其制备方法，属于新药
技术领域：
。
背景技术：
：不孕症是妇科常见疾病之一。致病因素复杂，常与多种疾病同时存在。不孕症的发生，往往会给患者生理和心理带来诸多伤害，且严重影响到患者的家庭幸福。中药治疗不孕症历史悠久，其治疗效果已得到世界医学界的关注，在现代医学研究理论体系的指导下，充分发挥传统中药治疗不孕症之精华，以开发疗效确切、适于临床广泛应用的现代中药制剂已成为不孕症药物的开发重点。
发明内容本发明目的在于公开一种治疗不孕症的药物组合物，该药物组合物具有补益肝肾，益气健脾，滋阴养血，活血调经，温阳暖宫之功效，用于脾肾阴虚，肝郁气滞，肾虚宫寒所致的不孕症。本发明目的是通过如下技术方案实现的本发明药物组合物的原料药组成为羚羊角0.30.7重量份香附1545重量份当归1030重量份金银花515重量份补骨脂515重量份防风515重量份菊花515重量份白芍1030重量份杜仲1030重量份苍术515重量份川芎515重量份桑寄生515重量份西洋参1030重量份钩藤1030重量份益母草515重量份艾叶515重量份菟丝子515重量份甘草39重量份本发明药物组合物的原料药组成优选为:羚羊角0.5重量份白芍20重量份杜仲20重量份苍术10重量份川芎10重量份桑寄生10重量份香附30重量份当归20重量份金银花10重量份补骨脂10重量份防风10重量份菊花10重量份西洋参20重量份钩藤20重量份益母草10重量份艾叶10重量份菟丝子10重量份甘草6重量份本发明药物组合物的制备方法包括如下步骤:(1)取羚羊角，粉碎成极细粉，备用；(2)取香附、西洋参、钩藤、补骨脂、川芎，每次用4一8倍55%95%的乙醇提取1一3次，提取液滤过，合并滤液，浓縮至相对密度为1.30(60°C)的稠膏，干燥、粉碎，得细粉备用；药渣备用；(3)取白芍、当归、杜仲、金银花、益母草、苍术、艾叶、防风、菟丝子、桑寄生、菊花、甘草，与上述药渣合并，每次加水8—16倍，煎煮13次，煎液合并，滤过，浓縮至相对密度为1.30(6(TC)的稠膏，干燥、粉碎，得细粉备用；(4)取上述细粉，与羚羊角极细粉混匀，按常规制剂方法，加入常规药用辅料，制成临床上可接受的药物剂型。本发明药物组合物的制备方法包括如下步骤(1)取羚羊角，粉碎成极细粉，备用；(2)取香附、西洋参、钩藤、补骨脂、川芎，每次用6倍75%的乙醇提取2次，提取液滤过，合并滤液，浓縮至相对密度为1.30(6(TC)的稠膏，干燥、粉碎，得细粉备用；药渣备用；(3)取白芍、当归、杜仲、金银花、益母草、苍术、艾叶、防风、菟丝子、桑寄生、菊花、甘草，与上述药渣合并，每次加水12倍量，煎煮2次，煎液合并，滤过，浓縮至相对密度为1.30(60°C)的稠膏，干燥、粉碎，得细粉备用；(4)取上述细粉，与羚羊角极细粉混匀，按常规制剂方法，加入常规药用辅料，制成临床上可接受的药物剂型。药效学试验研究结果证明，本发明药物组合物具有的增加卵巢卵泡数量，增加子宫内膜面积，调节内分泌的效果，提示本发明具有明显的促进卵泡生长和促进排卵的作用。下述实验例和实施例进一步证明但不限于本发明。本发明药物组合物治疗肾虚型不孕症的药效学研究1.肾虚不孕动物模型的建立制作无排卵大鼠模型(即雄激素致不孕大鼠模型.ASR)。取第9日龄雌性SD大鼠80只(实验组〕，于颈背部皮下注射丙酸争丸酮1.25mg/只(0.05rnl/只)。第22R龄断奶，利用自然光照，室温维持在2(TC左右，同样条件饲养，由专人喂养。第70日龄(大鼠体重约150g左右)阴道开口。连续阴道脱落细胞涂片2个性周期(l个性周期5天)阴道上皮无性周期变化，提示无排卵大鼠模型造模成功。同样，取第9日龄雌性SD大鼠10只(正常组)，于颈背部皮下注射等量中性茶油，至第70日龄阴道开口，连续阴道涂片2个性周期，观察其阴道上皮细胞有无性周期变化。经涂片观察，实验组80只参与造模大鼠，其中有54只无性周期变化，保留备用，余26只有性周期变化，剔除。正常组IO只注射中性茶油大鼠，全部具有规律性的性周期变化，保留备用。2.分组与给药按随机数目表法将54只实验组大鼠分为模型组(模型对照组，10只)、本发明药物组合物300mg、600mg、1200mg/kg组(治疗组，每组11只)、克罗米芬组(西药对照组，11只)。加上正常对照组10只，进行实验。动物分组完成后，从第80天开始，每天灌胃给药一次，均连续灌胃28天(四周)后检测指标。3.标本采集及指标检测各组连续灌胃28天后皆断头处死，剖腹，取出双侧卵巢、子宫，观察卵巢、子宫形态并记录卵巢子宫重量等各项指标。3.l取出卵巢，剥离千净后放入4%多聚甲醛中固定，各级酒精脱水，石蜡包埋，切片，切片厚约10-20um，分别进行IGF-1和丽P-9原位杂交，显微镜检并电脑摄像，图像分析卵巢IGF-lmRNA和MMP-9mRNA信号表达强度。3.2取出卵巢、子宫，剥离干净后放入10%福尔马林液中固定，各级酒精脱水，石蜡包埋，切片，切片厚约5wm，常规苏木素、伊红染色镜检并行电脑摄像，观察卵巢、子宫形态学变化。3.3分离颈静脉，提管取血，离心后置于4。C冰箱中保存，待测血清中FSH、LII含量。4统计学方法计量资料方差齐用方差分析，方差不齐用秩和检验，组间比较用q检验，计数资料用X2检验，所有数据均用SPSS12.0统计软件经计算机处理。5.结果5.1对大鼠卵巢、子宫的影响5.1.1卵巢、子宫的大体观察模型组卵巢苍白，表面见卵泡，但卵泡数目少，卵泡较小，无黄体；子宫较小，色泽欠红润。正常组和本发明药物组合物各剂量组以及西药组大鼠卵巢色泽鲜红，卵泡数目明显多于模型组，卵泡明显增大，表面见较多黄体;子宫外观粗大发紫，子宫肌层明显增厚。5.1.2卵巢、子宫重量及卵泡数量、子宫内膜面积比较各组卵巢、子宫重量经方差分析结果表明与正常对照组比较，模型组重量显著降低(p<0.01);本发明药物组合物大中剂量组及西药组重量显著高于模型(P<0.01)，而本发明药物组合物大中剂量组与与正常组、西药组相比无显著差异(P〉0.05)。本发明药物组合物小剂量组也能显著增加模型大鼠子宫重量(p<0.01)。结果见表l。与正常对照组比较，模型组泡数目显著减少(P〈0.(H)，本发明药物组合物大中剂量组和西药对照组卵泡数目与模型组比较显著升高(P<0.01)，且本发明药物组合物大中剂量组优于西药组(P〈0.01)。与正常对照组比较模型组的子宫内膜面积显著减少(p〈O.OD，本发明药物组合物大中剂量组与西药对照组子宫内膜面积与模型组比较显著升高(P<0.01)，且本发明药物组合物大中剂量组组优于西药组(P〈0.01)，本发明药物组合物小剂量也能显著增加模型大鼠卵泡数目和子宫内膜面积(p〈0.01)，效果与阳性药相当。结果见表2。以上结果提示本发明药物组合物能增加肾虚不孕大鼠卵巢及子宫重量，本发明药物组合物与正常组及西药组比较无差异；本发明药物组合物能增加卵巢各级卵泡总数，使卵巢激素的耙器官一子宫内膜面积明显增大，作用优于克罗米芬。表1对肾虚不孕模型大鼠卵巢与子宫重量的影响组别N剂量(mg/kg)卵巢重(g)子宫重(g)空白对照10一0.028土0.007*0.181±0.048*模型对照10—0.017±0.0030.095±0.013本发明药物组合物113000.020±0.0050.138土0.036'116000週±0.006'0.168±0扁*1112000.026±0.006*0.182±0.045*克罗米芬1150.024±0.005*0.170±0.037*与模型组比较*p<0.01。表2对肾虚不孕模型大鼠卵泡数量和子宫内膜面积的影响组别N剂量(mg/kg)各级卵泡数(个)子宫内膜面积(mm2)空白对照10—26.33±1.97'18.24±4.98'模型对照10—7.15±1.682.08±0.88本发明药物组11合物30012.15士1.68'4.38±1.06*1160019.52±1.53*A8.77±1.39*A11120021.48±1.59*A9.82±1.15*A克罗米芬1113.12士1.15'4.70±0.47'与模型组比较V0.01;与阳性药比较厶P<0.015.2本发明药物组合物对大鼠内分泌的影响与空白对照组比较，模型组大鼠血促排卵素FSH和黄体生成素LH的水平明显降低7(p〈0.0D。本发明药物组合物大中剂量组与西药对照组能够显著增加模型动物血中FSH与LH水平(p<0.01)，且本发明药物组合物大中剂量组与正常组比较无差异(P〉0.05)，提示本发明药物组合物能增强垂体的内分泌功能促进促性腺激素的合成和释放提高垂体促性腺激素水平以促进卵泡的发育和卵巢的排卵作用类似克罗米芬。结果见表3。表3对肾虚不孕模型大鼠血中FSH和LH的影响(IU/L)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>与模型组比较*p〈0.015.3对大鼠卵巢胰岛素样生长因子-lmRNA(IGF-lmRNA)和基质金属蛋白酶-9raRNA(丽P-9mRNA)表达的影响与正常对照组比较，模型组IGF-lmRNA的表达无论在表达面积和表达强度上都显著降低(p<0.01)，本发明药物组合物大中剂量及西药对照组能够显著提高模型表达面积和表达强度(p〈0.01);灰度值比较中本发明药物组合物各组与西药组比较无差异(P〉0.05),而本发明药物组合物各组与正常组比较也无差异(P〉0.05)，结果见表4。说明本发明药物组合物组灰度值向正常组靠拢。提示本发明药物组合物能很好地促进卵巢胰岛素样生长因子-lmRNA(IGF-lmRNA)的表达，从而促进卵泡的发育和卵巢的排卵。表4结果还表明与正常对照组比较，模型组MMP-9mRNA的表达无论在表达面积和表达强度上都显著增加(p<0.01)，本发明药物组合物大中剂量组和西药对照组能显著升高模型的表达强度和表达面积(p<0.01)，且本发明药物组合物大中剂量组的作用优于阳性组(P<0.01)，但是与正常组相比仍有差异(P<0.01)，结果见表5。提示本发明药物组合物能很好地促进卵巢基质金属蛋白酶-9mRNA的表达从而促进卵泡的发育和卵巢的排卵。表4对肾虚不孕模型大<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>与模型组比较*p<0.01表5对肾虚不孕模型大鼠卵巢丽P-9mRNA表达的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>与模型组比较^p〈0.01;与阳性药比较Ap〈0.016.小结与结论综上所述本发明药物组合物能增加肾虚不孕大鼠卵巢及子宫重量，效果与克罗米芬类似；本发明药物组合物可增加卵巢各级卵泡总数，使卵巢激素的靶器官一子宫内膜面积明显增大，作用优于克罗米芬。本发明药物组合物能增强垂体的内分泌功能促进促性腺激素的合成和释放提高垂体促性腺激素水平以促进卵泡的发育和卵巢的排卵，作用类似克罗米芬。本发明药物组合物能很好地促进卵巢胰岛素样生长因子-lmRNA(IGF-lmRNA)和基质金属蛋白酶-9mRNA(MMP-9mRNA)的表达，从而促进卵泡的发育和卵巢的排卵。下述实施例均能实现上述实验例的效果。实施例l本发明药物组合物胶囊剂羚羊角5g、香附300g、西洋参200g、白芍200g、当归200g、钩藤200g、杜仲200g、金银花100g、益母草100g、苍术100g、补骨脂100g、艾叶100g、川芎100g、防风100g、菟丝子100g、桑寄生100g、菊花100g、甘草60g。(1)取羚羊角粉碎成极细粉，备用；(2)取香附、西洋参、钩藤、补骨脂、川芎，每次用6倍量75%的乙醇，回流提取2次，每次2小时，提取醇液合并，滤过，减压回收乙醇并浓縮至相对密度为1.30(60°C)的稠膏，干燥、粉碎，得细粉备用；药渣备用；(3)取白芍、当归、杜仲、金银花、益母草、苍术、艾叶、防风、菟丝子、桑寄生、菊花、甘草，与上述药渣合并，每次加水12倍量，煎煮2次，每次2小时，煎液合并，滤过，浓縮至相对密度为1.30(60°C)的稠膏，干燥、粉碎，得细粉备用；(4)取上述细粉，与羚羊角极细粉混匀，加入450g淀粉，混匀，装胶囊，即得。实施例2本发明药物组合物丸剂羚羊角3.5g、香附445g、西洋参105g、白芍295g、当归105g、钩藤295g、杜仲105g、金银花145g、益母草145g、苍术145g、补骨脂55g、艾叶145g、川芎55g、防风145g、菟丝子145g、桑寄生55g、菊花145g、甘草35g。(1)取羚羊角，粉碎成极细粉，备用；(2)取香附、西洋参、钩藤、补骨脂、川芎，每次用8倍量90%的乙醇，回流提取3次，每次1小时，提取醇液合并，滤过，减压回收乙醇并浓縮至相对密度为1.30(60'C)的稠膏，干燥、粉碎，得细粉备用；药渣备用；(3)取白芍、当归、杜仲、金银花、益母草、苍术、艾叶、防风、菟丝子、桑寄生、菊花、甘草，与上述药渣合并，加16倍量水煎煮3小时，煎液滤过；减压浓縮至相对密度为1.30(60°C)的稠膏，干燥、粉碎，得细粉备用；(4)取上述细粉，与羚羊角极细粉混匀，以水泛丸，即得。实施例3本发明药物组合物颗粒剂羚羊角6.5g、香附155g、西洋参295g、钩藤105g、补骨脂145g、川芎145g、白芍105g、当归295g、杜仲290g、金银花55g、益母草145g、苍术55g、艾叶55g、防风55g、菟丝子55g、桑寄生145g、菊花55g、甘草85g。(1)取羚羊角，粉碎成极细粉，备用；(2)取香附、西洋参、钩藤、补骨脂、川芎，用4倍量85%的乙醇回流提取2次，每次2小时，提取醇液合并，滤过，减压回收乙醇并浓縮至相对密度为1.30(6(TC)的稠膏，干燥、粉碎，得细粉备用；药渣备用；(3)取白芍、当归、杜仲、金银花、益母草、苍术、艾叶、防风、菟丝子、桑寄生、菊花、甘草，与上述药渣合并，每次加水10倍量，煎煮2次，每次1小时，煎液合并，滤过，浓縮至相对密度为1.30(60°C)的稠膏，干燥、粉碎，得细粉备用；(4)取上述细粉，与羚羊角极细粉混匀，加入蔗糖及糊精，制粒，干燥，整粒，即得。实施例4本发明药物组合物片剂羚羊角5g、香附300g、西洋参200g、钩藤200g、补骨脂100g、川芎100g、白芍200g、10当归200g、杜仲200g、金银花100g、益母草100g、苍术100g、艾叶100g、防风100g、菟丝子100g、桑寄生100g、菊花100g、甘草60g。(1)取羚羊角，粉碎成极细粉，备用；(2)取香附、西洋参、钩藤、补骨脂、川芎，每次用6倍量80%的乙醇，回流提取2次，每次3小时，提取醇液合并，滤过，减压回收乙醇并浓縮至相对密度为1.30(60°C)的稠膏，干燥、粉碎，得细粉备用；药渣备用；(3)取白芍、当归、杜仲、金银花、益母草、苍术、艾叶、防风、菟丝子、桑寄生、菊花、甘草，与上述药渣合并，每次加水14倍量，煎煮2次，每次1小时，煎液合并，滤过，浓縮至相对密度为1.30(6(TC)的稠膏，干燥、粉碎，得细粉备用；(4)取上述细粉，与羚羊角极细粉混匀，加入淀粉，制粒，干燥，整粒，压片，即得。权利要求1、一种治疗不孕症的药物组合物，其特征在于该药物组合物的原料药组成为羚羊角0.3～0.7重量份香附15～45重量份西洋参10～30重量份白芍10～30重量份当归10～30重量份钩藤10～30重量份杜仲10～30重量份金银花5～15重量份益母草5～15重量份苍术5～15重量份补骨脂5～15重量份艾叶5～15重量份川芎5～15重量份防风5～15重量份菟丝子5～15重量份桑寄生5～15重量份菊花5～15重量份甘草3～9重量份2、如权利要求1所述药物组合物，其特征在于该药物组合物的原料药组成为羚羊角0.5重量份白芍20重量份杜仲20重量份苍术10重量份川芎10重量份桑寄生10重量份西洋参20重量份钩藤20重量份益母草10重量份艾叶10重量份菟丝子10重量份甘草6重量份香附30重量份当归20重量份金银花10重量份补骨脂10重量份防风10重量份菊花10重量份3、如权利要求1一2所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤-(1)取羚羊角，粉碎成极细粉，备用；(2)取香附、西洋参、钩藤、补骨脂、川芎，每次用4一8倍60%95%的乙醇提取1一3次，提取液滤过，合并滤液，浓縮至相对密度为1.30(6(TC)的稠膏，干燥、粉碎，得细粉备用；药渣备用；(3)取白芍、当归、杜仲、金银花、益母草、苍术、艾叶、防风、菟丝子、桑寄生、菊花、甘草，与上述药渣合并，每次加水8—16倍量，煎煮13次，煎液合并，滤过，浓縮至相对密度为1.30(6(TC)的稠膏，干燥、粉碎，得细粉备用；(4)取上述细粉,与羚羊角极细粉混匀，按常规制剂方法，加入常规药用辅料，制成临床上可接受的药物剂型。4、如权利要求3所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤(1)取羚羊角，粉碎成极细粉，备用；(2)取香附、西洋参、钩藤、补骨脂、川芎，每次用6倍75%的乙醇提取2次，提取液滤过，合并滤液，浓縮至相对密度为1.30(60°C)的稠膏，干燥、粉碎，得细粉备用；药渣备用；(3)取白芍、当归、杜仲、金银花、益母草、苍术、艾叶、防风、菟丝子、桑寄生、菊花、甘草，与上述药渣合并，每次加水12倍量，煎煮2次，煎液合并，滤过，浓縮至相对密度为1.30(60°C)的稠膏，干燥、粉碎，得细粉备用；(4)取上述细粉，与羚羊角极细粉混匀，按常规制剂方法，加入常规药用辅料，制成临床上可接受的药物剂型。全文摘要本发明公开了一种治疗不孕症的药物组合物及其制备方法，本发明药物组合物是由下述重量配比的原料制成的药剂羚羊角0.3～0.9重量份、香附15～45重量份、西洋参10～30重量份、白芍10～30重量份、当归10～30重量份、钩藤10～30重量份、杜仲10～30重量份、金银花5～15重量份、益母草5～15重量份、苍术5～15重量份、补骨脂5～15重量份、艾叶5～15重量份、川芎5～15重量份、防风5～15重量份、菟丝子5～15重量份、桑寄生5～15重量份、菊花5～15重量份、甘草3～9重量份。本发明药物组合物具有补益肝肾，益气健脾，滋阴养血，活血调经，温阳暖宫之功效，用于脾肾阴虚，肝郁气滞，肾虚宫寒所致的不孕症，疗效确切。文档编号A61K35/32GK101502605SQ20091007951公开日2009年8月12日申请日期2009年3月6日优先权日2009年3月6日发明者王丽娟申请人:天科仁祥技术(北京)有限责任公司