用于调控sirtuin基因表达的方法

用于调控sirtuin基因表达的方法
【专利摘要】本发明提供了用于在动物中调控sirtuin基因表达、模拟热量限制、预防和治疗阿尔茨海默病、增加寿命和延缓衰老的方法。方法包括向动物施用一种或多种异黄酮，优选的量是从约0.001至约10g/kg/天。
【专利说明】用于调控SIRTUIN基因表达的方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2011年4月15日提交的美国临时申请系列号61/517228的优先权，其公开内容通过引用整合到本文中。
[0003]发明背景 发明领域
[0004]本发明一般涉及用于调控基因表达的方法，特别涉及用于在动物中调控sirtuin基因表达的方法。
[0005]相关领域描述
[0006]异黄酮是在植物，如豆类和豆科植物(特别是大豆)中发现的天然存在的化学化合物。异黄酮模拟雌激素的效应，并调节雌激素代谢。其结果是，已知异黄酮降低肿瘤细胞增殖，诱导肿瘤细胞凋亡，调控激素平衡，并降低乳腺癌和前列腺癌、心脏病、骨质疏松和若干其他疾病和病症的风险。
[0007]蛋白质表达是基因表达的亚成分(subcomponent)。蛋白质表达表示DNA翻译成多肽链之后的阶段，该多肽链最终折叠成蛋白质。蛋白质表达通常被用于表示对特定细胞或组织中的一种或多种蛋白质的量或浓度的量度。
[0008]Sirtuin是低等生物中调控寿命的NAD+依赖性酶的家族,所述低等生物包括酵母、蠕虫和蝇类。尚不清楚sirtuin如何影响寿命。迄今为止，已经在哺乳动物中鉴别出7个家族成员。SIRT6和SIRT7是核蛋白。SIRT3、SIRT4和SIRT5是线粒体蛋白。SIRTl和SIRT2是在核和细胞质中均发现的蛋白质。哺乳动物的sirtuin与细胞胁迫抗性、基因组稳定性、肿瘤发生和能量代谢相关。参见Finkel等人，Nature460, 587-591 (2009)。
[0009]SIRTl表现出介导与能量限制相关的寿命延长。SIRTl的激活通过调控热量限制期间的能量消耗来提高寿命。SIRTl还表现出降低(6-淀粉样蛋白斑的产生。(6-淀粉样蛋白斑的积累与阿尔茨海默病相关。参见Donmez等人，Celll42，320-332 (2010)。异黄酮衍生物对SIRTl的活化和表达表现出差异性效应。据报道，白藜芦醇——SIRTl的激活
剂-促进线粒体的生物发生，并保护其免受代谢病。参见Rasbach等人,JPharmacol Exp
Ther325，536-543 (2008)。虽然白藜芦醇是有效的，但它对氧高度敏感，难以维持其稳定性。
[0010]热量限制通过激活sirtuin,增加了寿命、促进健康、延迟衰老和衰老相关疾病。在人和宠物中难以实践热量限制。
[0011]因此，需要用于在动物中调控sirtuin基因表达的组合物和方法。还需要用于调控sirtuin基因表达从而调控sirtuin表达，模拟热量限制、预防和治疗阿尔茨海默病、增加寿命和延缓衰老的组合物和方法。这类疗法在衰老的人和其他动物中将特别有效，用于改善所有涉及动物的整体生活质量。对于伴侣动物，这类疗法将导致改善主人的满意度，改善主人-伴侣动物的关系。
[0012]发明概述
[0013]因此，本发明的目标是提供用于调控动物中的sirtuin基因表达的方法。[0014]本发明的另一个目标是提供用于在动物中模拟热量限制、预防和治疗阿尔茨海默病、增加寿命和延缓衰老的方法。
[0015]本发明的另一个目标是提供用于在动物中调控sirtuin基因表达、模拟热量限制、预防和治疗阿尔茨海默病、增加寿命和延缓衰老的组合物。
[0016]一个或多个上述或其它目标是通过向动物施用一种或多种治疗有效量的异黄酮实现的。在普通的实施方案中，向动物施用的异黄酮的量是从约0.001至约10g/kg/天。
[0017]本发明的其他目标、特征和优点对于本领域技术人员是显而易见的。
[0018]发明详述
[0019]定义
[0020]术语“异黄酮”意指可用于本发明的异黄酮，及其天然的或合成的类似物、衍生物、前体和代谢物。异黄酮指3-苯基色酮,是黄酮的异构体形式,其中苯基与苯并批喃环的3位而非2位连接。可以在多种来源中发现异黄酮，所述来源包括但不限于大豆。异黄酮的非限制性例子包括大豆黄素；大豆苷；6-0_丙二酰大豆黄素；6-0_乙酰大豆黄素；染料木黄酮；
6-0-丙二酰染料木黄酮；6-0_乙酰染料木黄酮；黄豆黄素；6-0_丙二酰黄豆黄素；6-0_乙酰黄豆黄素；鹰嘴豆素甲；芒柄花素；德鸢尾素；樱黄素；红车轴草异黄酮；glycitinn ;二氢大豆黄素；雌马酚；0_脱甲基安哥拉紫檀素；大豆黄素7，4' -二-O-硫酸酯；大豆黄素
7-0-β-D-葡糖苷酸；大豆黄素4’-O-硫酸酯；6，7，5'-三羟基异黄酮；6，7，3'，4'-四羟基异黄酮；7，8，4'-三羟基异黄酮；5，6，7，4'-四羟基异黄酮；二氢染料木黄酮；对乙苯酚；3'，4'，5，7-四羟基异黄`酮；染料木黄酮4’-O-硫酸酯；染料木黄酮7-0-β-D-葡糖苷酸；染料木黄酮4’ -O-硫酸酯；和4' ,5,7-三羟基异黄酮.[0021]术语“动物”意指任何可以从sirtuin基因表达调控受益的动物，例如人、禽、牛类动物(bovine)、犬科动物(canine)、马类动物(equine)、猫科动物(feline)、hicrine、狼类动物(lupine)、鼠类动物(murine)、羊类动物(ovine)和猪类(porcine)动物。
[0022]术语“伴侣动物”意指家养动物，例如猫、狗、兔、豚鼠、雪貂、仓鼠、小鼠、沙鼠、马、
牛、山羊、绵羊、驴、猪等。
[0023]术语“治疗有效量”意指本发明化合物⑴治疗或预防文中所述的特定疾病、病患或病症的量，(ii)减弱、缓和或消除特定疾病、病患或病症的一种或多种症状的量或者(iii)预防或延缓文中所述的特定疾病、病患或病症的一种或多种症状的发作的量。
[0024]术语“治疗”包含预防性即预防治疗和姑息治疗。
[0025]术语“药学上可接受的”和“营养学上可接受的”表明物质或组合物必须是在化学和/或毒理学上与制剂包含的其他成分和/或要用其治疗的哺乳动物是相容的。
[0026]术语“动物的健康和/或身心健康”意指动物的整个身体、精神和社交是健康幸福的，不仅仅是无疾病或不衰弱。
[0027]术语“延长盛年期”意指延长动物过健康生活的岁数，并不仅仅延长动物活着的岁数，例如动物在其生命盛年期相对更长的一段时间内是健康的。
[0028]术语“联合”意指将本发明的组合物(I)在食品组合物中一起施用至动物或者(2)利用相同或不同的施用途径，在大约相同时间或周期地，以相同或不同频率单独施用至动物。“周期地”意指将组合物以对于特定化合物或组合物可接受的日程施用。“大约相同的时间”通常意指将组合物在相同的时间或者互相在大约72小时之内施用。[0029]术语“膳食补充剂”意指除动物正常饮食之外，旨在被摄入的产品。膳食补充剂可以是任何形式的，例如固体、液体、凝胶、片剂、胶囊、粉末等。优选地，将其以方便的剂型例如囊剂提供。可将膳食补充剂以散装(bulk)零售包装例如散装粉末、液体、凝胶或油状物提供。类似地，可将所述补充剂以散装量提供以被包括在其他食品项目例如点心、零食(treats)、补充物棒、饮料等中。
[0030]术语“衰老”意指使动物达到或超过动物物种和/或该物种中的品种的50%平均生命预期的老龄。例如，如果给定的狗品种的平均生命预期是12年，则该品种的“衰老动物”是6岁或更老。
[0031]术语“食物”或“食物产品”或“食物组合物”意指预期用于动物包括人食用的产品或组合物，并为动物提供营养。
[0032]术语“规律的”意指至少每个月施用本发明的组合物，并更优选每周施用。在一些实施方案中，更频繁的施用或消费例如每周两次或三次是优选的。还更优选的是包括至少每天消费一次的方案，例如当本发明的组合物是至少每天一次消费的食物组合物的组分时。
[0033]术语“单一包装”意指将套盒(kit)的组件物理联合在一个或多个容器中或与一个或多个容器物理联合，并视为生产、分配、销售或使用的单位。容器包括但不限于包、盒、纸板箱、瓶、包装例如收缩包装、钉连的或其他方式附着的部件或其组合。单一包装可以是物理关联的单个本发明的组合物和食物组合物的容器，从而它们被认为是生产、分配、销售或使用的单位。
[0034]术语“虚拟包装”意指套盒的组件通过关于一个或多个物理或虚拟的套盒组件的说明(directions)联系在一起，所述说明指导使用者如何获得其他组件，例如含有一个组件和说明的包或者其他容器，所述说明指导使用者访问站点、获取记录信息或回传服务、看可视信息或者接触看护者或指导者以获得如何使用所述套盒或者安全性或者有关一个或多个套装组件技术信息的指导。`
[0035]除非另外指明，文中表述的剂量表示为毫克/千克体重/天(mg/kg/天)。
[0036]除非另外具体指明，文中表述的所有百分数是基于干物质的相对组合物重量的百分数。技术人员将理解术语“基于干物质”意指组合物中存在的成分的浓度或百分数是已除去组合物中任何游离水分后测量或测定的。
[0037]如全文所用，文中以速记(shorthand)方式使用范围，以避免必须陈列和描述范围内的各个值和每一值。如果合适的话，可将范围内的任何适当值选为范围的上限值、下限值或端点。
[0038]如文中所用，除非上下文另外清楚说明，单数形式的词包括其复数形式，且反之亦然。因此，“一种(a/an)”和“该(the)”的说法通常包括各术语的复数。例如“一种补充剂”、“一种方法”或“一种食物”的说法包括复数的所述“补充剂”、“方法”或“食物”。类似地，词“包含”应解释为包含在内，而不应进行排除性解释。同样，术语“包括”和“或”都应解释为包括在内的，除非根据上下文该解释是被清楚禁止的。类似地，特别是当置于一系列术语后面时，术语“示例”仅是示范性和解释性的，并不应认为是唯一的或全部的。
[0039]文中公开的方法和组合物和其他进步不限于文中描述的具体的方法、策略和试剂，因为正如技术人员将理解的，它们可以改变。此外，文中所用的术语仅是用于描述特定实施方案的目的，并不意欲限制以及不用于限制所公开或所要求保护的范围。
[0040] 除非另外定义，所有技术和科学术语、专业术语和文中所用的缩写具有本发明领域内或者使用该术语的领域内的普通技术人员通常所理解的含义。尽管任何组合物、方法、 制品或其他类似于或相当于文中所述的那些的手段或物质可用于实施本发明，但是文中描述了优选的组合物、方法、制品或其他手段或物质。
[0041]将文中引用或提到的所有专利、专利申请、出版物、技术和/或学术论文，以及其它参考文献以法律允许的程度全部引入文中作为参考。所述参考文献的讨论仅旨在总结其中所做的主张。并不是承认任何所述专利、专利申请、出版物或参考文献或者其任何部分是相关的、具体的或是现有技术的。尤其保留挑战所述相关的、具体的或现有技术的专利、专利申请、出版物和其它参考文献的任何主张的准确度和适当性的权利。
[0042]本发明
[0043]在一个方面，本发明提供了用于调控动物中的sirtuin基因表达的方法。方法包括以治疗有效量向动物施用一种或多种异黄酮，用于调控sirtuin基因表达。
[0044]在另一个方面，本发明提供了用于模拟动物中的热量限制的方法。方法包括以治疗有效量向动物施用一种或多种异黄酮，用于调控sirtuin基因表达并且因此模拟动物中的热量限制。
[0045]在另一个方面，本发明提供了用于预防和治疗动物中的阿尔茨海默病的方法。方法包括以治疗有效量向动物施用一种或多种异黄酮，用于调控sirtuin基因表达并且因此预防和治疗动物中的阿尔茨海默病。
[0046]在另一个方面，本发明提供了用于增加动物寿命的方法。方法包括以治疗有效量向动物施用一种或多种异黄酮，用于调控sirtuin基因表达并且因此增加动物寿命。
[0047]在另一个方面，本发明提供了用于延缓动物衰老的方法。方法包括以治疗有效量向动物施用一种或多种异黄酮，用于调控sirtuin基因表达并且因此延缓动物衰老。
[0048]本发明是基于这样的发现，即，向动物施用异黄酮调控动物中的sirtuin基因表达，和sirtuin影响与动物相关的多种功能，例如模拟动物的热量限制、预防和治疗动物的阿尔茨海默病、增加动物寿命和延缓动物衰老等。
[0049]调控sirtuin基因表达调控了动物中的血清素(serotonin)的量。在优选的实施方案中，sirtuin基因是上调的，并且因此增加动物中的sirtuin的量。
[0050]调控的sirtuin基因和血清素是SIRT2和SIRT3。研发用于支持本发明的数据显示，SIRT6的基因不受向动物施用异黄酮的调控。
[0051]在一个实施方案中，表达的sirtuin 基因是 SIRT1、SIRT2、SIRT3、SIRT4、SIRT5 或 SIRT7的至少一种。在另一个实施方案中，表达的sirtuin基因是SIRT2或SIRT3的至少一种。在另一个实施方案中，表达的sirtuin基因是SIRT4、SIRT5或SIRT7的至少一种。
[0052]在另一个方面，本发明提供了用于调控动物中的SIRTl表达的方法，包括以治疗有效量向动物施用一种或多种异黄酮。
[0053]在另一个方面，本发明提供了用于调控动物中的SIRT2表达的方法，包括以治疗有效量向动物施用一种或多种异黄酮。
[0054]在另一个方面，本发明提供了用于调控动物中SIRT3表达的方法，包括以治疗有效量向动物施用一种或多种异黄酮。[0055]在另一个方面，本发明提供了用于调控动物中SIRT4表达的方法，包括以治疗有效量向动物施用一种或多种异黄酮。
[0056]在另一个方面，本发明提供了用于调控动物中SIRT5表达的方法，包括以治疗有效量向动物施用一种或多种异黄酮。
[0057]在另一个方面，本发明提供了用于调控动物中SIRT7表达的方法，包括以治疗有效量向动物施用一种或多种异黄酮。
[0058]在多个实施方案中，动物是任何具有调控sirtuin基因表达的需要的动物，所述需要包括但不限于模拟热量限制、预防和治疗阿尔茨海默病、增加寿命和延缓衰老。在一个实施方案中，动物是人或伴侣动物，优选犬科动物或猫科动物。在另一个实施方案中，动物是衰老的动物。
[0059]异黄酮是本领域技术人员已知的任何异黄酮。在多个实施方案中，异黄酮选自形式为糖苷配基、糖苷、乙酰糖苷和丙二酰糖苷的异黄酮。优选的，异黄酮选自鹰嘴豆素甲、大豆黄素、大豆苷、黄豆黄素、芒柄花素、雌马酚、染料木黄酮、德鸢尾素、羽扇豆异黄酮、樱黄素、红车轴草异黄酮和glycitinn。在一个实施方案中，异黄酮是从大豆获得的大豆异黄酮，或通过饲喂大豆或大豆提取物给动物向动物施用的异黄酮。在另一个实施方案中，异黄酮是用一个或多个木脂体或coumestan取代的异黄酮,所述木脂体或coumestan如松脂醇、落叶松树脂醇、闭联异松树脂醇(secoisolariciresinol)、马台树脂醇、羟基马台树脂醇、丁香树脂醇、芝麻素、肠二醇、肠内酯和拟雌内酯。
[0060]向动物施用调控sirtuin基因表达的异黄酮的任何量。
[0061]在优选的实施方案中，向动物施用一种或多种异黄酮，施用的量是从约0.1至约10克异黄酮，优选从约0.5至约7.5克，更优选从约I至约5克。
[0062]在多个实施方案 中，向动物施用的异黄酮的量是从约0.1至约10克异黄酮/天(g/天)，优选从约0.5至约7.5g/天，更优选从约I至约5g/天。
[0063]在其他实施方案中，向动物施用的异黄酮的量是从约0.001至约10克异黄酮/千克体重(g/kg/bw),优选从约0.05至约5g/kg/bw,更优选从约0.01至约lg/kg/bw。
[0064]在其他实施方案中，向动物施用的异黄酮的量是从约0.001至约10克异黄酮每千克体重/天(g/kg/bw/天)，优选从约0.05至约5g/kg/bw/天，更优选从约0.01至约Ig/kg/bw/ 天。
[0065]在另一个方面，本发明提供了用于调控sirtuin基因表达的包含治疗有效量的异黄酮的组合物。在另一个实施方案中，本发明提供了用于调控sirtuin基因表达并且因此能够实现模拟动物的热量限制、预防和治疗动物的阿尔茨海默病、增加动物寿命和延缓动物衰老中的一种或多种的包含治疗有效量的异黄酮的组合物。
[0066]可利用任何适当的施用途径、以任何适当的形式，将本发明的组合物施用至动物。例如，可将组合物以食物组合物、以膳食补充剂、以药物组合物、以营养品组合物或者作为药物施用。类似地，可利用各种施用途径包括口腔、鼻内、静脉内、肌内、胃内、经幽门、皮下、直肠等施用组合物。优选地，将组合物口服施用至动物。最优选地，将组合物作为膳食补充剂或者作为食物组合物的成分口服施用至动物。
[0067]在优选的实施方案中，将本发明的组合物作为适合动物包括人和伴侣动物例如狗和猫消费的食物组合物成分施用至动物。此类食物组合物包括预期为动物提供必需饮食需求的完善食物或者食物补充剂例如动物零食。
[0068]在各实施方案中，食物组合物例如宠物食物组合物或宠物零食组合物包含大约5%至大约50%的粗蛋白。粗蛋白物质可包含植物蛋白例如大豆粉、大豆蛋白浓缩物、玉米谷蛋白粉、小麦谷蛋白、棉杆和花生粉或者动物蛋白例如酿蛋白、白蛋白和肉蛋白。文中可用的肉蛋白的示例包括牛肉、猪肉、羔羊肉、马肉、禽肉、鱼肉及其混合物。
[0069]食物组合物还可含有大约5%至大约40%的脂肪。适当的脂肪示例包括动物脂肪和植物脂肪。优选地，脂肪源是动物脂肪源例如牛/羊脂(tallow)或者油脂(grease)。还可使用植物油例如玉米油、葵花籽油、红花油、葡萄籽油、大豆油、橄榄油和其他富含单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸的油。
[0070]食物组合物还可包含大约10%至大约60%的碳水化合物。适当的碳水化合物的示例包括谷物或谷类例如米、玉米、黍、高粱、紫花苜蓿、大麦、大豆、油菜(canola)、燕麦、小麦、黑麦、黑小麦和其混合物。组合物还可任选地含有其他物质例如干乳清和其他的乳副产品。
[0071]所述食物组合物的含水量可根据食物组合物的性质而变化。食物组合物可以是干组合物(例如粗块食物(kibble))、半湿润组合物、湿组合物或其任何混合物。在优选的实施方案中，组合物是完全和营养均衡的宠物食物。在所述实施方案中，宠物食物可以是“湿食物”、“干食物”或者中等含水量的食物。“湿食物”描述通常在罐或锡箔袋中销售的宠物食物，并通常具有大约70%至大约90%的含水量。“干食物”描述具有与湿食物相似组成的宠物食物，但是含有有限的含水量，通常在大约5%至大约15%或者大约20%的范围内(通常作为小饼干样粗块食物(kibbles)存在)。在一优选的实施方案中，组合物具有大约5%至大约20%的含水量。干食物产品包括各种不同含水量的食物，从而它们是相对耐贮存的，并对微生物或真菌损害或污染是耐受的。还优选的是干食物组合物，其是挤出的食物产品，例如宠物食物或者用于人或伴侣动物的快餐食物。
·[0072]食物组合物还可含有一种或多种纤维源。术语“纤维”包括食物中所有“填充物(bulk) ”源，不论是可消化的或不可消化的，可溶解的或不溶解的，可发酵的或不可发酵的。优选的纤维是植物例如海生植物来源的，但是也可使用微生物来源的纤维。正如本领域普通技术人员应该知道的，可利用多种可溶的或不溶的纤维。纤维源可以是甜菜浆(来自于甜菜)、阿拉伯树胶、塔尔哈(talha)胶、蚤草、米糠、角豆树豆胶、柑橘果肉、果胶、低聚果糖、短链果寡糖、甘露果寡糖、大豆纤维、阿拉伯半乳聚糖、低聚半乳糖、阿拉伯糖基木聚糖或其混合物。
[0073]或者，纤维源可以是可发酵纤维。以前已描述了可发酵纤维用于为伴侣动物的免疫系统提供益处。还可将技术人员已知的提供增加肠道中益生菌的生长的益生元的可发酵纤维或其他组合物加入所述组合物中，以增加本发明提供的对动物免疫系统的益处。
[0074]在一些实施方案中，食物组合物的灰分含量是从低于1%至大约15%，优选大约5%至大约10%。
[0075]在优选实施方案中，组合物是食物组合物，其包含大约15%至大约50%的蛋白质、大约5%至大约40%的脂肪、大约5%至大约10%的灰分含量，并具有大约5%至大约20%的含水量。在其他实施方案中，食物组合物还含有文中所述的益生元或益生菌。
[0076]当以食物组合物施用时，异黄酮的量作为组合物的百分比是食物组合物的大约0.1至大约40%、优选大约3至大约30%、更优选大约5至大约20%。在各实施方案中，食物组合物包含大约 1%、2%、4%、6%、8%、10%、12%、14%、16%、18%、20%、22%、24%、 26%、28%、30%、32%、34%、36%、38% 或 40%。
[0077]在另一实施方案中，将组合物以膳食补充剂施用至动物。膳食补充剂可具有任何适当的形式，例如肉汤、饮用水、饮料、酸乳、粉末、颗粒、糊、混悬液、咀嚼剂、小片(morseI)、 零食、点心、小球(pellet)、丸剂、胶囊剂、片剂、囊剂或任何其他适合递送的形式。膳食补充剂可含有组合物和任选的化合物例如维生素、防腐剂、益生菌、益生元和抗氧化剂。这使得能够将补充剂小量地施用至动物，或者可在施用至动物前，将补充剂稀释。施用至动物前， 膳食补充剂可能需要与食物组合物或者与水或其他稀释剂混合。当以膳食补充剂施用时， 组合物包括补充剂的大约0.1至大约90%，优选大约3至大约70%，更优选大约5至大约 60%。
[0078]在另一实施方案中，将组合物以药物组合物或营养品组合物施用至动物。药物组合物包含本发明的组合物，以及一种或多种药学或营养学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。通常，通过将化合物或组合物与下列物质混合制备药物组合物:赋形剂、缓冲剂、粘合齐[|、增塑剂、着色剂、稀释剂、压缩剂(compressing agents)、润滑剂、矫味剂、润湿剂等,包括技术人员已知的可用于生产药物和配制适于作为药物施用至动物的组合物的其他成分。 当以药物组合物或营养品组合物施用时，组合物包括本发明的组合物的大约0.1至大约 90 %，优选大约3至大约70 %，更优选大约5至大约60 %。
[0079]可根据需要、根据预期或者规律地将本发明的组合物施用至动物。规律施用的目标是向动物提供觌律和连贯剂量的组合物或者由所述摄入产生的直接或间接的代谢产物。 所述规律和连贯的施用将预期产生组合物或者其直接或间接代谢产物的恒定血液水平。因此，规律施用可以是每月一次、每周一次、每天一次或每天多次。类似地，施用可以是每隔一天、一周或者一月，每隔两天、两周或者两月，每隔三天、三周或者三月等。施用可以是每天多次。当用作日常饮食需求的补充剂时，可将组合物例如经口服或以其它方式直接施用至动物。或者，可将组合物与日常饲料或食物包括流体例如饮用水相接触或者混合在一起，或者静脉内联合用于接受所述治疗的动物。施用还可作为动物膳食方案的一部分实现。例如， 膳食方案可包含以实现本发明方法的有效的量，使动物规律地摄取组合物。
[0080]根据本发明的方法，组合物的施用包括作为饮食方案的一部分的施用可跨越从动物分娩到成年生活的一段时间。在各实施方案中，动物是人或伴侣动物例如狗或猫。在一些实施方案中，动物是年轻或正成长的动物。在更优选的实施方案中，动物是衰老的动物。在其他实施方案中，当动物已达到其预计或预期寿命的超过大约30%、40%或50%时，例如规律地或长期规律地，开始施用。在一些实施方案中，动物已达到其预期寿命的40%、45% 或50 %。还在其他实施方案中，动物是更老的，已达到其可能寿命的60 %、66 %、70 %、75 % 或80%。寿命的确定基于保险精算表格、计算、估计等，并可考虑过去、现在和未来的已知是积极或消极地影响寿命的影响或因素。当确定寿命时，种类、性别、大小、遗传因素、环境因素和应激源、现在和过去的健康状况、过去和现在的营养状况、应激源等的考虑还可影响或者被考虑在内。
[0081]向动物施用一段时间的本发明的组合物，所述时间是实现本发明的一个或多个目标所需要的，所述目标例如，调控sirtuin基因表达；模拟热量限制；预防和治疗阿尔茨海默病；增加寿命；延缓动物衰老；改善生活质量；和促进动物的健康和身心健康。优选的，向动物规律的施用组合物。
[0082]在另一个方面，本发明提供了包含治疗有效量的本发明的组合物的治疗组合物，用于调控sirtuin基因表达；模拟热量限制；预防和治疗阿尔茨海默病；增加寿命；延缓动物衰老；改善生活质量；和促进动物的健康和身心健康中的一种或多种。治疗组合物含有的本发明的组合物的量足以向动物施用这样的量的本发明的组合物，即，当根据对于特定组合物的预期或推荐施用组合物时，所述量从约0.005至约1000mg/kg/天,优选从约0.01至约500mg/kg/天,最优选从约0.05至约250mg/kg/天。通常,本发明的组合物包括从约I至约90%的治疗组合物，优选从约3至约70%，更优选从约5至约60%。在某些实施方案中，本发明的组合物包括90 %以上的治疗组合物。
[0083]在各实施方案中，组合物还含有一种或多种物质例如维生素、矿物质、益生菌、益生元、盐和功能添加剂包括例如palatants、着色剂、乳化剂和抗微生物剂或其他防腐剂。可用于所述组合物的矿物质包括例如钙、磷、钾、钠、铁、氯化物、硼、铜、锌、镁、锰、碘、硒等。文中可用的其他维生素的示例包括脂溶性维生素例如A、D、E和K。菊糖、氨基酸、酶、辅酶等可用于包括在各实施方案中。
[0084]在各实施方案中，组合物包含下述物质中的至少一种:(1) 一种或多种益生菌；
(2)—种或多种灭活益生菌；(3)灭活益生菌的一种或多种成分(例如蛋白质、脂质、糖蛋白等)，其具有与益生菌相似或相同的促进健康的益处；(4) 一种或多种益生元；以及(5)其组合。可将益生菌或其成分整合至含有组合物的组合物中(例如均匀或非均匀地分布于组合物中)或者施用到含有组合物的组合物中(例如与载体一起或者无载体条件下，局部施用)。所述方法是技术人员已知的，例如US5968569和相关专利。
[0085]典型的益生菌 包括但不限于益生菌菌株，所述益生菌菌株选自:乳杆菌属(Lactobacilli)、双歧杆菌属(Bifidobacteria)或肠球菌属(Enterococci)例如路氏乳杆菌(Lactobacillus reuteii)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、动物乳杆菌(Lactobacillus animal is)、瘤胃乳杆菌(Lactobacillus ruminis)、约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)、干酿乳杆菌(Lactobacillus casei)、副干酿乳杆菌(Lactobacillus paracasei)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)和双歧杆菌(Bifidobacterium sp.)、屎肠球菌(Enterococcus faecium)和肠球菌(Enterococcus sp.)。在一些实施方案中，益生菌菌株选自路氏乳杆菌(NCC2581 ；CNCM 1-2448)、路氏乳杆菌(NCC2592 ；CNCM 1-2450)、鼠李糖乳杆菌(NCC2583 ；CNCM 1-2449)、路氏乳杆菌(NCC2603 ；CNCM1-2451)、路氏乳杆菌(NCC2613 ；CNCM 1-2452)、嗜酸乳杆菌(NCC2628 ；CNCM 1-2453)、青春双歧杆菌(Bifidobacteriumadolescentis)(例如 NCC2627)、双歧杆菌 NCC2657 或者屎肠球菌 SF68 (NCIMB10415)。含有本发明组合物的组合物包含如下量的益生菌，所述量足够提供大约IO4-大约IO12Cfu/动物/天，优选IO5-大约IO11Cfu/动物/天，最优选IO7-1OiciCfu/动物/天。当益生菌是被杀死的或灭活的时，被杀死的或灭活的益生菌或其成分的量应产生与活的微生物类似的有益作用。许多所述益生菌及其益处是技术人员已知的，例如EP1213970B1、EP1143806B1、US7189390、EP1482811B1、EP1296565B1和US6929793。在一优选的实施方案中，益生菌是屎肠球菌SF68(NCMB10415)。在一实施方案中，利用技术人员已知的方法和材料将益生菌包封于载体中。
[0086]如所述的，组合物可含有一种或多种益生元，例如低聚果糖、低聚葡萄糖、低聚半乳糖、低聚异麦芽糖、低聚木糖、大豆低聚糖、乳果寡糖(Iactosucrose)、乳果糖和异麦芽酮糖。在一实施方案中，益生元是菊苣根、菊苣根提取物、菊糖或其组合。通常，将益生元以足够积极地刺激肠道中的健康微生物群落并使这些“好”细菌繁殖的量施用。典型的量是大约I克至大约10克每份或者对于动物推荐的每日膳食纤维的大约5%至大约40%。通过任何适当的方法，可以使益生菌和益生元成为组合物的一部分。一般来讲，可将所述物质与组合物混合或者将其例如通过喷洒或喷雾施用至组合物的表面。当所述物质是套盒的一部分时，可将所述物质与其他物质混合或置于它们自己的包装中。通常，基于干物质，食物组合物含有大约0.1%至大约10%的益生元，优选大约0.3%至大约7%、最优选大约0.5%至大约5%的益生元。可利用技术人员已知的方法例如US5952033将益生元整合到组合物中。
[0087]技术人员可确定组合物、食物成分、维生素、矿物质、益生菌、益生元、抗氧化剂或拟用于制备要施用至特定动物的特定组合物的其他成分的适当的量。在决定如何最好地配制特定组合物和其他成分时，所述技术人员会考虑动物种类、年龄、大小、体重、健康等。可考虑的其他因素包括组合物的类型(例如宠物食物组合物vs.膳食补充剂)、各成分需要的剂量、不同动物对特定类型组合物的平均消费量(例如根据种类、体重、活性/能量要求等)，以及组合物的生产要求。
[0088]在另一方面，本发明提供了适用于向动物施用异黄酮的套盒。根据套盒组件的需求，所述套盒在单一包装中的独立容器中或在虚拟包装中的独立容器中包含，异黄酮和一种或多种的(I)适合被动物消耗的一种或多种成分；(2)如何组合异黄酮和其他套盒组件以生产用于调控sirtuin基因表达、模拟热量限制、预防和治疗阿尔茨海默病、增加寿命和延缓衰老的组合物的说明；(3)如何使用异黄酮调控sirtuin基因表达的说明；(4)如何使用异黄酮模拟热量限制的说明；(5)如何使用异黄酮预防和治疗阿尔茨海默病的说明；(6)如何使用异黄酮增加寿命的说明；`(7)如何使用异黄酮延缓衰老的说明；(8) —种或多种益生菌；(9) 一种或多种失活的益生菌；(10) —种或多种失活的益生菌的促进与益生菌相似或相同的健康益处的组分；(11) 一种或多种益生元；(12)用于制备或组合套盒组件来生产适合向动物施用的组合物的装置；和(13)用于向动物施用组合的或制备的套盒组件的装置。在一个实施方案中，套盒包括小药囊中的组合物。
[0089]当套盒包含虚拟包装时，套盒局限于与一种或多种物理套盒组件组合的虚拟环境中的说明。套盒以足够调控sirtuin基因表达、模拟热量限制、预防和治疗阿尔茨海默病、增加寿命和延缓衰老的量包含异黄酮和其他成分。通常，仅在动物消费之前，将异黄酮和其他适当的套盒组件混合。套盒可含有在任何不同组合和/或混合物中的套盒组件。在一实施方案中，套盒含有包含异黄酮的盒，以及用于动物消费的食物的容器。套盒可含有其他组件，例如用于混合异黄酮和成分的装置或者用于容纳混合物的装置例如食物碗。在另一实施方案中，将异黄酮与其他促进动物健康的营养补充剂例如维生素和矿物质混合。所述组件各自提供于单一包装的不同容器中或者以不同包装中的不同组件的混合物提供。在优选的实施方案中，套盒含有异黄酮和一种或多种适合于动物消费的其他成分。优选地，所述套盒含有说明书，其描述如何将异黄酮与其他成分组合，以形成用于动物消费的食物组合物，通常通过将异黄酮与其他成分混合或者通过将异黄酮施用于其他成分，例如通过将异黄酮洒在食物组合物上。
[0090]在另一方面，本发明提供了用于交流信息或说明的工具，所述信息或说明是关于一种或多种的(I)使用异黄酮调控sirtuin基因表达；(2)使用异黄酮模拟热量限制；(3) 使用异黄酮预防和治疗阿尔茨海默病；(4)使用异黄酮增加寿命；(5)使用异黄酮延缓衰老；(6)使用异黄酮促进健康衰老；(7)如果消费者对本发明的方法和组合物有疑问，用于消费者使用的联系信息；(8)关于异黄酮的营养信息；所述工具包含含有所述信息或说明的一种或多种物理或电子文档、数字存储介质、光存储介质、音频呈现、视听显示或视觉显示。所述交流工具用于说明利用本发明的益处，以及传达用于施用异黄酮和含有异黄酮的食物组合物至动物的许可的方法。所述工具包含含有所述信息或说明的一种或多种物理或电子文档、数字存储介质、光存储介质、音频呈现、视听显示或视觉显示。优选地，所述工具选自展示网站、视觉显示报摊、小册子、产品标签、包装说明书、广告、分发的印刷品、公告、 录音带、录像带、DVD、⑶-ROM、计算机可读芯片、计算机可读卡、计算机可读磁盘、USB装置、 火线(FireWire)装置、计算机内存和其任何组合。[0091]另一方面，本发明提供生产包含异黄酮和一种或多种其他适合动物消费的成分 (例如蛋白质、脂肪、碳水化合物、纤维、维生素、矿物质、益生菌、益生元等中的一种或多种)的食物组合物的方法。该方法包括将适合于动物消费的一种或多种成分与异黄酮混合。或者，该方法包括将异黄酮单独或与其他成分联合或组合施用至食物组合物上，例如作为包衣或覆盖物(topping)。食物组合物的生产和/或加工期间，可将异黄酮在任何时间加入。所述组合物可以依据本领域任何适合的方法制备。
[0092]在另一个方面，本发明提供了可用于含有异黄酮或本发明的任何组合物的包装。 包装包含至少一种适合于容纳异黄酮或本发明的任何组合物的材料，以及附着到所述材料上的标签，所述标签包含字、图、图样、简称、标语、短语或其它装置或其组合，其指明该包装包含异黄酮或本发明的任何组合物，具有涉及调控sirtuin基因表达、模拟热量限制、预防和治疗阿尔茨海默病、增加寿命、延缓衰老和促进健康衰老的有益性质。通常，这类装置包括印刷在材料上的词语“促进健康衰老”、“老年支持”、“老年人帮手”或等价的表述。任何适合含有异黄酮或本发明的任何组合物的包装构造和包装材料都可用于本发明，例如，用纸、 塑料、箔、金属等生产的袋子、盒子、瓶子、罐头、小袋等。在优选的实施方案中，包装还包括异黄酮或本发明的任何组合物。在多个实施方案中，包装还包括至少一个窗口，其允许在不打开包装的条件下看到包装内容物。在一些实施方案中，窗口是包装材料的透明部分。在其它方面，窗口是包装材料的缺失部分。在优选的实施方案中，包装含有适用于特定动物的食物组合物，如人、犬科动物或猫科动物，适合标签时，优选用于狗或猫的伴侣动物食物组合物。在优选的实施方案中，包装是包含本发明的食物组合物的罐头或小袋。
[0093]在另一个方面，本发明提供了异黄酮用于制备药物的用途，所述药物用于调控 sirtuin基因表达；模拟热量限制；预防和治疗阿尔茨海默病；增加寿命；延缓衰老；促进健康衰老；改善生活质量；和促进动物的健康和身心健康中的一种或多种。一般而言，通过混合化合物或组合物(即，异黄酮或包含异黄酮的组合物)与赋形剂、缓冲剂、粘合剂、增塑剂、着色剂、稀释剂、压缩剂、润滑剂、矫味剂、润湿剂和技术人员已知的可用于生产药物和配制适于施用至动物的药物的其他成分混合，来制备药物。[0094]在另一个方面，本发明提供了用于调控动物的sirtuin表达的方法。方法包括向动物施用治疗有效量的一种或多种异黄酮，用于调控sirtuin表达。
[0095]对于本发明的所有方法，施用治疗有效量的异黄酮。在优选的实施方案中，向动物施用的一种或多种异黄酮的量是从约0.1至约10克异黄酮，优选从约0.5至约7.5克，更优选从约I至约5克。在多个实施方案中，向动物施用的异黄酮的量是从约0.1至约10克异黄酮/天(g/天)，优选从约0.5至约7.5g/天,更优选从约I至约5g/天。在其他实施方案中，向动物施用的异黄酮的量是从约0.001至约10克异黄酮/千克体重(g/kg/bw)，优选从约0.05至约5g/kg/bw,更优选从约0.01至约lg/kg/bw。使用任何合适的方法施用异黄酮，优选口服。在一个实施方案中，异黄酮作为食物组合物的一部分施用，例如整合到食物组合物中或用于食物组合物上。当整合到食物组合物中时,异黄酮通常对于用于生产食物组合物的成分是内在的，例如大豆中的异黄酮。在另一种情况下，异黄酮作为膳食补充剂的一部分施用，例如在丸剂或胶囊中。
实施例
[0096]还可通过下述实施例进一步解释本发明，但是将理解这些实施例仅用于解释目的，而不预期限制本发明的范围，除非另外具体说明。
[0097]实施例1
[0098]材料和方法
[0099]处理:将终末分化的狗脂肪细胞暴露在200、25和O μ M雌马酚下24小时。收集细胞进行RNA分离。
[0100]RNA 分离:根据生产商的说明，使用 Quiashredder (Qiagen, Valencia, CA)柱将处理的细胞样品涡旋和均质化。收集均质化的裂解液，向其中添加1份等体积的64%乙醇。然后，将该混合物一次应用700 μ L于RNAqueous?过滤柱(Ambion Inc.,Austin,TX),10，OOOrpm离心I分钟。使用700uL洗涤溶液#1和500uL洗涤溶液#2/3洗涤柱，每次洗漆10, OOOrpm离心I分钟。通过离心(10，OOOrpm)干燥过滤柱I分钟。使用30uL等体积的70-80°C洗脱溶液，离心(如上述)洗脱RNA三次。用DNA酶处理获得的RNA，并将其在Beckman DU640B 分光光度计(Beckman Coulter, Inc., Brea, CA)中 260am 定量。此外,根据生产商的说明，使用生物分析仪(Agilent, Santa Clara, CA)评估数量和质量。
[0101]定量PCR:各自对每条引物/探针组运行所有样品，确定应该使用何种标准曲线。使用具有给定目标的最低CT(循环阈值)的实验样品的系列稀释的RNA，生成标准曲线。逆转录1-2个样品，使用1:5系列稀释液作为给定目标的标准曲线。运行包括sirtuin-1、-2、-3和-6在内的目标。将值针对根据定量PCR确定的亲环蛋白A(PPIA)的水平归一化。根据每个最低样品归一化值计算归纳法。每组运行η = 3次。结果显示在表I中。
[0102]表1
[0103]在用0、25或200uM雌马酚处理的狗的脂肪细胞中的Sirtuin基因表达
[0104]
[0[25 [200
【权利要求】
1.用于在调控动物中的sirtuin基因表达的方法，包括向动物施用一种或多种治疗有效量的异黄酮。
2.权利要求1的方法，其中表达的sirtuin基因是SIRTl、SIRT2、SIRT3、SIRT4、SIRT5或SIRT7的至少一种。
3.权利要求1的方法，其中表达的sirtuin基因是SIRT2或SIRT3的至少一种。
4.权利要求1的方法，其中表达的sirtuin基因是SIRT4、SIRT5或SIRI7的至少一种。
5.权利要求1的方法，其中异黄酮选自形式为糖苷配基、糖苷、乙酰糖苷和丙二酰糖苷的异黄酮。
6.权利要求1的方法，其中异黄酮选自鹰嘴豆素甲、大豆黄素、大豆苷、黄豆黄素、芒柄花素、雌马酚、染料木黄酮、德鸢尾素、羽扇豆异黄酮、樱黄素、红车轴草异黄酮和glycitinn。
7.权利要求1的方法，其中施用的异黄酮的量是从约0.001至约10g/kg/天。
8.权利要求1的方法，其中规律的向动物施用异黄酮。
9.权利要求8的方法，其中施用的异黄酮的量是从约0.1至约10g。
10.权利要求1的方法，其中异黄酮作为膳食补充剂或食物组合物向动物施用。
11.权利要求10的方法，其中异黄酮在食物组合物中施用，且异黄酮包括从约0.001至约40%的食物组合物。·
12.权利要求10的方法，其中配制食物组合物，从而向动物提供完全且平衡的营养。
13.权利要求10的方法，其中食物组合物或膳食补充剂还包含一种或多种益生菌；失活的益生菌；失活的益生菌的促进与益生菌相似或相同的健康益处的组分；和一种或多种 碰生兀。
14.权利要求1的方法，其中动物是人或伴侣动物。
15.权利要求14的方法，其中伴侣动物是犬科动物。
16.权利要求15的方法，其中伴侣动物是猫科动物。
17.权利要求1的方法，其中动物是衰老的动物。
18.用于模拟动物中的热量限制的方法，包括以治疗有效量向动物施用一种或多种异黄酮，用于调控sirtuin基因表达并且从而模拟热量限制。
19.权利要求18的方法，其中表达的sirtuin基因是SIRTl、SIRT2、SIRT3、SIRT4、SIRT5或SIRT7的至少一种。
20.权利要求18的方法，其中表达的sirtuin基因是SIRT2或SIRT3的至少一种。
21.权利要求18的方法，其中表达的sirtuin基因是SIRT4、SIRT5或SIRT7的至少一种。
22.权利要求18的方法，其中异黄酮选自形式为糖苷配基、糖苷、乙酰糖苷和丙二酰糖苷的异黄酮。
23.权利要求18的方法，其中异黄酮选自鹰嘴豆素甲、大豆黄素、大豆苷、黄豆黄素、芒柄花素、雌马酚、染料木黄酮、德鸢尾素、羽扇豆异黄酮、樱黄素、红车轴草异黄酮和glycitinn。
24.权利要求18的方法，其中施用的异黄酮的量是从约0.001至约10g/kg/天。
25.权利要求18的方法，其中规律的向动物施用异黄酮。
26.权利要求25的方法，其中施用的异黄酮的量是从约0.1至约10g。
27.权利要求18的方法，其中异黄酮作为膳食补充剂或食物组合物向动物施用。
28.权利要求27的方法，其中异黄酮在食物组合物中施用，且异黄酮包括从约0.001至约40%的食物组合物。
29.权利要求27的方法，其中配制食物组合物，从而向动物提供完全且平衡的营养。
30.权利要求27的方法，其中食物组合物或膳食补充剂还包含一种或多种益生菌；失活的益生菌；失活的益生菌的促进与益生菌相似或相同的健康益处的组分；和一种或多种益生元。
31.权利要求18的方法，其中动物是人或伴侣动物。
32.权利要求31的方法，其中伴侣动物是犬科动物。
33.权利要求32的方法，其中伴侣动物是猫科动物。
34.权利要求18的方法，其中动物是衰老的动物。
35.用于预防和治疗动物中的阿尔茨海默病的方法，包括以治疗有效量向动物施用一种或多种异黄酮，用于调控sirtuin基因表达并且从而预防和治疗动物中的阿尔茨海默病。
36.权利要求35的方法，其中表达的sirtuin基因是SIRT1、SIRT2、SIRT3、SIRT4、SIRT5或SIRT7的至少一种。
37.权利要求35的方法，其中表达的sirtuin基因是SIRT2或SIRT3的至少一种。
38.权利要求35的方法，其中表达的sirtuin基因是SIRT4、SIRT5或SIRT7的至少一种。
39.权利要求35的方法，其中异黄酮选自形式为糖苷配基、糖苷、乙酰糖苷和丙二酰糖苷的异黄酮。
40.权利要求35的方法，其中异黄酮选自鹰嘴豆素甲、大豆黄素、大豆苷、黄豆黄素、芒柄花素、雌马酚、染料木黄酮、德鸢尾素、羽扇豆异黄酮、樱黄素、红车轴草异黄酮和glycitinn。
41.权利要求35的方法，其中施用的异黄酮的量是从约0.001至约10g/kg/天。
42.权利要求35的方法，其中规律的向动物施用异黄酮。
43.权利要求42的方法，其中施用的异黄酮的量是从约0.1至约10g。
44.权利要求35的方法，其中异黄酮作为膳食补充剂或食物组合物施用。
45.权利要求44的方法，其中异黄酮在食物组合物中施用，且异黄酮包括从约0.001至约40%的食物组合物。
46.权利要求44的方法，其中配制食物组合物，从而向动物提供完全且平衡的营养。
47.权利要求44的方法，其中食物组合物或膳食补充剂还包含一种或多种益生菌；失活的益生菌；失活的益生菌的促进与益生菌相似或相同的健康益处的组分；和一种或多种益生元。
48.权利要求35的方法，其中动物是人或伴侣动物。
49.权利要求48的方法，其中伴侣动物是犬科动物。
50.权利要求49的方法，其中伴侣动物是猫科动物。
51.权利要求35的方法，其中动物是衰老的动物。
52.用于增加动物寿命的方法，包括以治疗有效量向动物施用一种或多种异黄酮，用于调控sirtuin基因表达并且从而增加寿命。
53.权利要求52的方法，其中表达的sirtuin基因是SIRT1、SIRT2、SIRT3、SIRT4、 SIRT5或SIRT7的至少一种。
54.权利要求52的方法，其中表达的sirtuin基因是SIRT2或SIRT3的至少一种。
55.权利要求52的方法，其中表达的sirtuin基因是SIRT4、SIRT5或SIRT7的至少一种。
56.权利要求52的方法，其中异黄酮选自形式为糖苷配基、糖苷、乙酰糖苷和丙二酰糖苷的异黄酮。
57.权利要求52的方法，其中异黄酮选自鹰嘴豆素甲、大豆黄素、大豆苷、黄豆黄素、芒柄花素、雌马酚、染料木黄酮、德鸢尾素、羽扇豆异黄酮、樱黄素、红车轴草异黄酮和 glycitinn。
58.权利要求52的方法，其中施用的异黄酮的量是从约0.001至约10g/kg/天。
59.权利要求52的方法，其中规律的向动物施用异黄酮。
60.权利要求59的方法，其中施用的异黄酮的量是从约0.1至约10g。
61.权利要求52的方法，其中异黄酮作为膳食补充剂或食物组合物施用。
62.权利要求61的方法，其中异黄酮在食物组合物中施用，且异黄酮包括从约0.001至约40%的食物组合物。
63.权利要求61的方法，其中配制食物组合物，从而向动物提供完全且平衡的营养。
64.权利要求61的方法，其中食物组合物或膳食补充剂还包含一种或多种益生菌；失活的益生菌；失活的益生菌的促进与益生菌相似或相同的健康益处的组分；和一种或多种.、/./ 1.~碰生兀。
65.权利要求52的方法，其中动物是人或伴侣动物。
66.权利要求65的方法，其中伴侣动物是犬科动物。
67.权利要求66的方法，其中伴侣动物是猫科动物。
68.权利要求52的方法，其中动物是衰老的动物。
69.用于延缓动物衰老的方法，包括以治疗有效量向动物施用一种或多种异黄酮，用于调控sirtuin基因表达并且从而延缓动物衰老。
70.权利要求69的方法，其中表达的sirtuin基因是SIRTl、SIRT2、SIRT3、SIRT4、 SIRT5或SIRT7的至少一种。
71.权利要求69的方法，其中表达的sirtuin基因是SIRT2或SIRT3的至少一种。
72.权利要求69的方法，其中表达的sirtuin基因是SIRT4、SIRT5或SIRT7的至少一种。
73.权利要求69的方法，其中异黄酮选自形式为糖苷配基、糖苷、乙酰糖苷和丙二酰糖苷的异黄酮。
74.权利要求69的方法，其中异黄酮选自鹰嘴豆素甲、大豆黄素、大豆苷、黄豆黄素、芒柄花素、雌马酚、染料木黄酮、德鸢尾素、羽扇豆异黄酮 、樱黄素、红车轴草异黄酮和 glycitinn。
75.权利要求69的方法，其中施用的异黄酮的量是从约0.001至约10g/kg/天。
76.权利要求69的方法，其中规律的向动物施用异黄酮。
77.权利要求76的方法，其中施用的异黄酮的量是从约0.1至约10g。
78.权利要求69的方法，其中异黄酮作为膳食补充剂或食物组合物施用。
79.权利要求78的方法，其中异黄酮在食物组合物中施用，且异黄酮包括从约0.001至约40%的食物组合物。
80.权利要求78的方法，其中配制食物组合物，从而向动物提供完全且平衡的营养。
81.权利要求78的方法，其中食物组合物或膳食补充剂还包含一种或多种益生菌；失活的益生菌；失活的益生菌的促进与益生菌相似或相同的健康益处的组分；和一种或多种 碰生兀。
82.权利要求69的方法，其中动物是人或伴侣动物。
83.权利要求82的方法，其中伴侣动物是犬科动物。
84.权利要求83的方法，其中伴侣动物是猫科动物。
85.权利要求69的方法，其中动物是衰老的动物。
86.包含治疗有效量的异黄酮的组合物，其用于一种或多种的在动物中调控sirtuin基因表达、模拟热量限制、预防和治疗阿尔茨海默病、增加寿命和延缓衰老。
87.权利要求86的组合物，其包含治疗有效量的异黄酮，用于调控sirtuin基因表达，并且从而能够在动物中实现模拟热量限制、预防和治疗阿尔茨海默病、增加寿命和延缓衰老中的一种或多种。
88.权利要求86的组合物，其含有的异黄酮的量为足以向动物施用大约从约0.001至约10g/kg/天的异黄酮的量。
89.药物或营养品组合物，其包含异黄酮和一种或多种药学或营养学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
90.包装，其包含至少一种适合于容纳异黄酮的材料，以及附着到所述包装上的标签，所述标签包含字、图、图样、简称、标语、短语或其它装置或其组合，其指明该包装的内含物包含异黄酮。
91.权利要求90的包装，其中附着到所述包装上的标签包含字、图、图样、简称、标语、短语或其它装置或其组合，其指明该包装的内含物包含具有与促进健康衰老相关的有益性质的异黄酮。
92.权利要求91的包装，其中有益性质是调控sirtuin基因表达、模拟热量限制、预防和治疗阿尔茨海默病、增加寿命、延缓衰老和促进健康衰老中的一种或多种。
93.权利要求90的包装，其还包含异黄酮。
94.权利要求90的包装，其还包含至少一个窗口。
95.用于交流信息或说明的工具，所述信息或说明是关于一种或多种的(I)使用异黄酮调控sirtuin基因表达；(2)使用异黄酮模拟热量限制；(3)使用异黄酮预防和治疗阿尔茨海默病；(4)使用异黄酮增加寿命；(5)使用异黄酮延缓衰老；(6)使用异黄酮促进健康衰老；(7)如果消费者对本发明的方法和组合物有疑问，用于消费者使用的联系信息；和(8)关于异黄酮的营养信息；所述工具包含含有所述信息或说明的一种或多种物理或电子文档、数字存储介质、光存储介质、音频呈现、视听显示或视觉显示。
96.权利要求95的工具，其选自展示网站、视觉显示报摊、小册子、产品标签、包装说明书、广告、分发的印刷品、公告、录音带、录像带、DVD、CD-ROM、计算机可读芯片、计算机可读卡、计算机可读磁盘、USB装置、火线装置、计算机内存和其任何组合。。
97.适用于向动物施用异黄酮的套盒，根据套盒组件的需求，其在单一包装中的独立容器中或在虚拟包装中的独立容器中包含，异黄酮和一种或多种的(I)适合被动物消耗的一种或多种成分；(2)如何组合异黄酮和其他套盒组件以生产用于调控sirtuin基因表达、模拟热量限制、预防和治疗阿尔茨海默病、增加寿命和延缓衰老的组合物的说明；(3)如何使用异黄酮调控sirtuin基因表达的说明；(4)如何使用异黄酮模拟热量限制的说明；(5)如何使用异黄酮预防和治疗阿尔茨海默病的说明；(6)如何使用异黄酮增加寿命的说明；(7) 如何使用异黄酮延缓衰老的说明；(8) —种或多种益生菌；(9) 一种或多种失活的益生菌；(10)一种或多种失活的益生菌的促进与益生菌相似或相同的健康益处的组分；(11) 一种或多种益生元；(12)用于制备或组合套盒组件来生产适合向动物施用的组合物的装置；和(13)用于向动物施用组合的或制备的套盒组件的装置。
98.权利要求97的套盒，其中异黄酮在小药囊中。
99.权利要求97的套盒，其包含异黄酮和一种或多种适合被动物消耗的成分。
100.权利要求97的套盒，包括异黄酮和一种或多种益生菌。
101.用于调控动物中的SIRTl表达的方法，包括以治疗有效量向动物施用一种或多种异黄酮。
102.用于调控动物中的SIRT2表达的方法，包括以治疗有效量向动物施用一种或多种异黄酮。·
103.用于调控动物中的SIRT3表达的方法，包括以治疗有效量向动物施用一种或多种异黄酮。
104.用于调控动物中的SIRT4表达的方法，包括以治疗有效量向动物施用一种或多种异黄酮。
105.用于调控动物中的SIRT5表达的方法，包括以治疗有效量向动物施用一种或多种异黄酮。
106.用于调控动物中的SIRT7表达的方法，包括以治疗有效量向动物施用一种或多种异黄酮。
107.用于调控动物中的sirtuin表达的方法,包括以治疗有效量向动物施用一种或多种异黄酮。
108.权利要求107的方法，其中异黄酮选自形式为糖苷配基、糖苷、乙酰糖苷和丙二酰糖苷的异黄酮。
109.权利要求107的方法，其中异黄酮选自鹰嘴豆素甲、大豆黄素、大豆苷、黄豆黄素、芒柄花素、雌马酚、染料木黄酮、德鸢尾素、羽扇豆异黄酮、樱黄素、红车轴草异黄酮和 glycitinn。
110.权利要求107的方法，其中施用的异黄酮的量是从约0.001至约10g/kg/天。
111.权利要求107的方法，其中规律的向动物施用异黄酮。
112.权利要求111的方法，其中施用的异黄酮的量是从约0.1至约10g。
113.权利要求107的方法，其中异黄酮作为膳食补充剂或食物组合物向动物施用。
114.权利要求113的方法，其中异黄酮在食物组合物中施用，且异黄酮包括从约0.001至约40 %的食物组合物。
115.权利要求113的方法，其中配制食物组合物，从而向动物提供完全且平衡的营养。
116.权利要求113的方法，其中食物组合物或膳食补充剂还包含一种或多种益生菌；失活的益生菌；失活的益生菌的促进与益生菌相似或相同的健康益处的组分；和一种或多种益生元。
117.权利要求107的方法，其中动物是人或伴侣动物。
118.权利要求117的方法，其中伴侣动物是犬科动物。
119.权利要求118的方法，其中伴侣动物是猫科动物。
120.权利要求107的方·法，其中动物是衰老的动物。
【文档编号】A61P39/06GK103596563SQ201280029380
【公开日】2014年2月19日 申请日期:2012年3月26日 优先权日:2011年4月15日
【发明者】Y·潘, R·P·米德尔顿 申请人:雀巢产品技术援助有限公司