一种伏立康唑眼用纳米结晶制剂及其制备方法
【专利摘要】本发明提供一种伏立康唑眼用纳米结晶制剂及其制备方法，该伏立康唑眼用纳米结晶制剂由伏立康唑、可生物降解的高分子辅料、促渗剂、渗透压调剂剂、pH调节剂和蒸馏水制备而成；本发明伏立康唑眼用纳米结晶制剂的特点在于从纳米结晶技术和眼用渗透促进剂两方面提高难溶性药物伏立康唑的溶解度，增强与角膜的黏附力和渗透性。采用EudragitRS100，PVA等为主要载体材料通过沉淀法制备伏立康唑纳米结晶制剂；选择安全性好、刺激性小的新型眼用渗透促进剂增强体系的角膜渗透性。本发明可用于脂溶性药物伏立康唑的眼部给药，该组合物具有良好的稳定性、具有渗透性强、生物利用度高、无刺激性的优点。
【专利说明】一种伏立康唑眼用纳米结晶制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种眼用制剂，尤其涉及一种伏立康唑眼用纳米结晶制剂及其制备方 法。
【背景技术】
[0002] 近年来，由于抗生素、糖皮质激素、免疫抑制剂等的广泛应用以及角膜接触镜的应 用、植物性外伤等因素的逐步增多，眼部真菌感染发生率呈上升趋势。同时由于该病具有发 病隐匿、病程长、缺乏特异有效的治疗方法、易复发等特点，其已成为临床上治疗棘手且致 盲率极高的感染性眼病。同时临床上眼部真菌感染的药物由于自身难溶性特点导致局部治 疗药物品种非常缺乏，加之眼睛自身的类屏障生理结构，药物很难透过角膜到达病灶部位 导致眼内病灶部位对抗真菌治疗不敏感，这些因素是该病治疗中存在的主要问题。
[0003] 眼部真菌感染最常见的治疗方案包括眼表面给药、眼局部注射给药和全身给药。 由于泪液冲刷、角膜屏障作用及渗透路径长等原因，常规眼表给药透过角膜进入玻璃体腔、 视网膜及脉络膜的药物量极少；而全身给药由于血液-视网膜屏障等，仅有2%左右的药物 进入眼部发挥作用，需要大剂量频繁给药，造成多种全身不良反应；玻璃体内注射、眼周注 射等方式能有效提高眼后段药物浓度和药物生物利用度，但它们严重的不良反应限制了其 应用。因此，既要保证一定时间内角膜和玻璃体腔有效药物浓度，又要病人顺应性好、使用 方便、痛苦小是治疗真菌性眼部感染函待解决的问题。
[0004] 伏立康唑是一种新型的第二代三唑类广谱抗真菌药，与临床上其它抗真菌药物如 两性霉素 B、酮康唑、伊曲康唑比较具有抗菌谱广、毒性低及抗菌效力强的特点。目前临床 应用的有注射剂、口服片剂和胶囊剂。EP0357241公开了伏立康唑化合物及其制备方法， 同时公开了伏立康唑或其药学上可用盐药物制剂中的运用，其说明书中公开含有乳糖或 淀粉的伏立康唑片。CN1261287公开了可以用环糊精配制的伏立康唑药物制剂，但现在研 究人员普遍怀疑未衍生、或未代谢的环糊精对人体有毒副作用，不适合做药物的赋形剂。 CN101390861公开了一种伏立康唑固体组合物，其制备过程中采用了以泊洛沙姆为载体的 固体分散体技术，存在形式可以为分散片、口崩片、咀嚼片，但其制备工艺相对较复杂，工艺 步骤增多会使活性成分在转移过程中被损耗掉，药物含量得不到保证。伏立康唑上市的还 有注射剂、粉针剂等剂型，但这些剂型的储存和运输较为不便，患者使用也不方便，且有报 道伏立康唑注射剂在加速试验中检测出无活性的伏立康唑对映体，表明产品的稳定性存在 不足。
[0005] 伏立康唑作为新型广谱抗真菌药因对多种眼部常见致病真菌有更好的抗菌活性 而日益受到眼科学界的重视，但全身用药治疗真菌感染的眼部疾病时由于需要大剂量频繁 给药导致肝功能异常、皮疹及视觉障碍等不良反应加重；同时伏立康唑溶解度低，常规眼表 给药由于角膜吸收障碍导致进入眼部组织的药物浓度低，所以研究其眼部给药系统是非常 必要的。
[0006] 与传统制剂技术相比，基于纳米技术的胶粒给药系统通过包裹、吸附等方式改变 药物的理化特性和生物学特性如生物黏附性、透黏膜/血脑屏障作用、缓控释特性、靶向性 等，从而实现对活性药物增强疗效、降低不良反应、增强顺应性等目的。在众多种胶粒给药 系统中，纳米结晶给药系统具有能够显著提高难溶性药物的溶解度，提高药物透黏膜能力， 减少给药次数等特点。纳米结晶是利用表面活性剂的稳定作用，将药物颗粒分散在水中， 通过粉碎或者控制析晶技术形成稳定的纳米胶态分散体。体系中纳米级粒径的纯药物颗 粒依靠表面活性剂的电荷效应或/和立体效应稳定地混悬在溶液中，药物平均粒径一般在 100?500nm之间。纳米结晶可以进一步制备为适合口服、注射、眼部或其他给药途径的药 物剂型。与同样具有高渗透性特点的微乳制剂比较，纳米结晶制剂对眼部的刺激性更小。尽 管近年来发展的无醇微乳减少了眼部刺激，稳定性良好，但高浓度表面活性剂和助表面活 性剂的潜在毒性限制了微乳的应用。同时纳米结晶技术还具有生产工艺简单、易实现工业 化生产等特点。纳米结晶技术在国外已逐渐实现产业化，尤其是在难溶性的抗真菌感染药 物、抗病毒药物等的制剂开发方面具有广阔的应用前景，但目前尚无用于眼部给药的伏立 康唑纳米结晶制剂。
【发明内容】
[0007] 本发明目的在于提供一种渗透性高、稳定性好的伏立康唑纳米结晶制剂及其制备 方法，解决现有技术中伏立康唑由于溶解性差、眼部特有生理屏障在治疗眼部真菌感染疾 病中效果受限制等问题。
[0008] 本发明的具体技术方案如下： 一种伏立康唑眼用纳米结晶制剂，其特征在于：包括下述原料：伏立康唑，水溶性稳 定剂、脂溶性稳定剂、促渗剂、渗透压调节剂和pH调节剂，其中伏立康唑的质量体积比为 0. 05?2%，水溶性稳定剂的质量体积比为1?10%，脂溶性稳定剂的质量体积比为1?10%， 促渗剂的质量体积比为〇?4%，所述制剂的渗透压在0. 28?0. 32m0smol/kg范围内，pH为 7. 0-8. 0 〇
[0009] 所述水溶性稳定剂为乙烯吡咯烷酮（PVP)、聚乙烯醇（PVA)、泊洛沙姆中的一种或 几种的混合物。
[0010] 所述脂溶性稳定剂为甲基丙烯酸共聚物和甲基丙烯酸酯共聚物（Eudragit RS100)、甲基丙烯酸共聚物和甲基丙烯酸酯共聚物（Eudragit RL100)、单油酸甘油酯 (GM0)、乙烯-醋酸乙烯酯聚合物（EVA)、卵磷脂中的一种或几种的混合物。
[0011] 所述促渗剂为透明质酸钠、十二烷基硫酸钠（SDS)、N-甲基吡咯烷酮 (Pharmasolve)、去氧胆酸钠、羟丙基-环糊精、月桂氮卓酮、乙二胺四乙酸二钠、吐温80、丙 二醇中的一种几种的混合物。
[0012] 所述渗透压调节剂为甘油、甘露醇、丙二醇中的一种。
[0013] 所述pH调节剂为盐酸、氢氧化钠、磷酸盐、硼酸、硫酸盐、枸橼酸中的一种。
[0014] 本发明还提供上述制备伏立康唑眼用纳米结晶制剂的方法，其步骤如下： (1) 将伏立康唑与脂溶性稳定剂分散在与水互溶的有机溶剂中得到药物溶液A ; (2) 将水溶性稳定剂和促渗剂分散在蒸馏水中作为分散介质，得到水相溶液B ; (3) 将药物溶液A快速分散于水相溶液B中得纳米混悬液C ; (4) 除去上步所得的纳米混悬液C中的有机溶剂，然后再加入渗透压调节剂、PH调节剂 和蒸馏水至规定值，使其pH值为7. 0-8. Ο ;得伏立康唑眼用纳米结晶制剂。
[0015] 所述伏立康唑眼用纳米结晶制剂的渗透压在0. 28?0. 32mOsmol/kg范围内， 所述步骤（1)中，伏立康唑与有机溶剂质量体积比为：伏立康唑：有机溶剂=lg : (4? 40) ml ； 所述步骤（1)中，有机溶剂选自氯仿、丙酮、乙醇、乙酸乙酯、异丙醇、甲醇、二甲基亚 砜、N-甲基吡咯烷酮中的一种或多种的混合物； 所述步骤（2)中，水溶性稳定剂与蒸馏水质量体积比为：lg:出?60ml) 所述步骤（3)中，快速分散的具体操作为：高速剪切或超声分散； 所述步骤（4)中除去有机溶剂的方法为：减压旋转蒸发。
[0016] 所述高速剪切的具体操作为在8000?13000rpm下剪切5?15min ; 所述超声分散的具体操作为在400?900W，超声比率2:2,条件下，超声分散30-90次； 所述减压旋转蒸发具体操作为：在35-45°C条件下旋转蒸发5?15min。
[0017] 本发明将生物相容性高分子材料作为药物载体制备伏立康唑纳米结晶眼部释药 系统。
[0018] 纳米结晶的制备方法主要有碾磨法、高压匀质法、沉淀法、乳化法和微乳法等，本 发明的伏立康唑纳米结晶制剂采用沉淀法。先将药物溶于有机溶剂中，在搅拌的情况下把 溶有药物的有机溶剂加入到含有表面活性剂的水溶液中，控制温度高速剪切和超声适当的 时间后除去有机溶剂，制得纳米结晶。该方法可采用常规的工艺设备，适合工业大规模高效 益生产。
[0019] 本发明由伏立康唑、可生物降解的高分子辅料、促渗剂、渗透压调剂剂、pH调节剂 和蒸馏水制备而成；本发明伏立康唑眼用纳米结晶制剂的特点在于从纳米结晶技术和眼用 渗透促进剂两方面提高难溶性药物伏立康唑的溶解度，增强与角膜的黏附力和渗透性。采 用Eudragit RS100, PVA等为主要载体材料通过沉淀法制备伏立康唑纳米结晶制剂；选择 安全性好、刺激性小的新型眼用渗透促进剂增强体系的角膜渗透性。本发明可用于脂溶性 药物伏立康唑的眼部给药，该组合物具有良好的稳定性、具有渗透性强、生物利用度高、无 刺激性的优点。
[0020] 本发明的优点在于：将难溶性伏立康唑制成纳米结晶制剂可显著提高其的溶解 度，从而提高药物的血管外用药的生物利用度；本发明能提高伏立康唑透角膜能力，减少给 药次数，大大减少系统给药引起的不良反应，提高患者的顺应性；纳米结晶制剂适合应用到 眼部敏感部位，具有舒适度高、无刺激性的优点；同时纳米结晶技术还具有生产工艺简单、 易实现工业化生产等特点。
[0021]
【专利附图】
【附图说明】
[0022] 图1为本发明所制备的伏立康唑纳米结晶制剂的粒径图； 图2为本发明所制备的伏立康唑纳米结晶制剂的及透射电镜图； 图3为本发明所制备的伏立康唑纳米结晶制剂的示差扫描量热图； 图4为本发明所制备的伏立康唑纳米结晶制剂与伏立康唑注射剂猪角膜累积透过率 的曲线图； 图5为本发明所制备的伏立康唑纳米结晶制剂与与伏立康唑注射剂对黑曲霉菌的抗 真菌活性曲线图。
【具体实施方式】
[0023] 实施例1 (1) 将5g伏立康唑和50g脂溶性稳定剂分散在50ml有机溶剂中，得到药物溶液A ;其 中，脂溶性稳定剂为Eudragit RS100或EVA，有机溶剂为体积比为3 : 1的丙酮-甲醇混合 物； (2) 将10g的水溶性稳定剂和20g促渗剂分散在600ml蒸馏水中制得到水相分散介 质，得到水相分散介质溶液B，其中水溶性稳定剂为PVA或PVP，促渗剂为N-甲基吡咯烷酮 (Pharmasolve)和透明质酸钠，两种促渗剂的比例为9:1 ; (3) 将步骤（1)制得的药物溶液A高速剪切或超声条件下分散于步骤（2)制得的水 相分散介质B中，制得混悬液C ;其中高速剪切的条件是Fluko -FA25高剪切分散乳化机， 13000印111剪切101^11，超声的条件是400?9001，超声比率2:2，超声次数30次 ； (4) 将步骤（3)制得的混悬剂C通过减压旋转蒸在40°C条件下旋转蒸发10 min，得伏 立康唑纳米结晶混悬液； (5) 将步骤（4)制得的伏立康唑纳米结晶混悬液，加入渗透压调节剂、pH调节剂和蒸 馏水至l〇〇〇ml，使该制剂的渗透压为0. 28m0smol/kg，pH值为7. 2 ;其中渗透压调节剂选择 甘油或丙二醇，pH调节剂选择氢氧化钠或硼酸钠；即得伏立康唑纳米结晶眼用制剂。
[0024] 实施例2 (1) 将0. 5g伏立康唑和10g单油酸甘油酯分散20ml有机溶剂中，得到药物溶液A ;其 中有机溶剂为体积比为1 : 1的丙酮-PEG400混合物； (2) 将40g的水溶性稳定剂和20g促渗剂分散在800ml蒸馏水中制得到水相分散介质 B，其中水溶性稳定剂为泊洛沙姆407,促渗剂为透明质酸钠和丙二醇，两种促渗剂的比例为 1:4 ; (3) 将步骤（1)制得的药物溶液A高速剪切或超声条件下分散于步骤（2)制得的水 相分散介质B中，制得混悬液C ;其中高速剪切的条件是Fluko -FA25高剪切分散乳化机， 8000rpm剪切10min，超声的条件是功率400?900W，超声比率2:2,超声次数30次； (4) 将步骤（3)制得的混悬剂C通过减压旋转蒸在40°C条件下旋转蒸发10 min，得伏 立康唑纳米结晶混悬液； (5) 将步骤（4)制得的伏立康唑纳米结晶混悬液，加入渗透压调节剂、pH调节剂和蒸 馏水至l〇〇〇ml，使该制剂的渗透压为0. 30m0smol/kg，pH值为7. 0 ;其中渗透压调节剂选择 甘油或丙二醇，pH调节剂选择枸盐酸；即得伏立康唑纳米结晶眼用制剂。
[0025] 实施例3 (1) 将20. 0g伏立康唑和100g脂溶性稳定剂分散在200ml有机溶剂中，得到药物溶液 A ;其中脂溶性稳定剂为Eudragit RL100和乙烯-醋酸乙烯酯聚合物（EVA)，两种脂溶性稳 定剂比例为4:1;有机溶剂为体积比为2 : 1的丙酮-乙醇混合物； (2) 将50g的水溶性稳定剂和20g促渗剂分散在600ml蒸馏水中制得到水相分散介质 B，其中水溶性稳定剂为PVA，促渗剂为十二烷基硫酸钠和丙二醇，两者比例为3:1 ; (3)将 步骤（1)制得的药物溶液A高速剪切或超声条件下分散于步骤（2)制得的水相分散介质B 中，制得混悬液C ;其中高速剪切的条件是Fluko -FA25高剪切分散乳化机，13000rpm剪切 15min，超声的条件是功率400?900W，超声比率2:2,超声次数60次； (4) 将步骤（3)制得的混悬剂C通过减压旋转蒸在35°C条件下旋转蒸发15 min，得伏 立康唑纳米结晶混悬液； (5) 将步骤（4)制得的伏立康唑纳米结晶混悬液，加入渗透压调节剂、pH调节剂和蒸 馏水至l〇〇〇ml，使该制剂的渗透压为 0. 32m0smol/kg，pH值为7. 7. 6 ;其中渗透压调节 剂选择甘油，pH调节剂选择硼酸钠；即得伏立康唑纳米结晶眼用制剂。
[0026] 实施例4 (1) 将5g伏立康唑和50g脂溶性稳定剂Eudragit RS100分散在50ml有机溶剂中，得 到药物溶液A ;其中有机溶剂为有机溶剂为体积比为3 : 1的丙酮-甲醇混合物； (2) 将10g的PVA分散在600 ml蒸馏水中制得到水相分散介质，得到水相分散介质溶 液B ; (3) 将步骤（1)制得的药物溶液A高速剪切或超声条件下分散于步骤（2)制得的水 相分散介质B中，制得混悬液C ;其中高速剪切的条件是Fluko -FA25高剪切分散乳化机， 13000印111剪切51^11，超声的条件是功率400?9001，超声比率2:2，超声次数30次 ； (4) 将步骤（3)制得的混悬剂C通过减压旋转蒸在45°C条件下旋转蒸发5 min，得伏立 康唑纳米结晶混悬液； (5) 将步骤（4)制得的伏立康唑纳米结晶混悬液，加入渗透压调节剂、pH调节剂和蒸 馏水至l〇〇〇ml，使该制剂的渗透压为0. 28m0smol/kg，pH值为7. 2 ;其中渗透压调节剂选择 丙二醇，pH调节剂选择硫酸盐；即得伏立康唑纳米结晶眼用制剂。
[0027] 实施例5 (1) 将l〇g伏立康唑和20g脂溶性稳定剂EVA分散在40ml有机溶剂中，得到药物溶液 A ;其中有机溶剂为体积比为2:1对的乙酸乙酯-乙醇混合物； (2) 将100g水溶性稳定剂和25g促渗剂分散在600ml蒸馏水中制得到水相分散介质， 得到水相分散介质溶液B，其中水溶性稳定剂为PVA和泊洛沙姆407,两者比例为3:1，促渗 剂为N-甲基吡咯烷酮和去氧胆酸钠，两者比例为4:1 ; (3) 将步骤（1)制得的药物溶液A高速剪切或超声条件下分散于步骤（2)制得的水 相分散介质B中，制得混悬液C ;其中高速剪切的条件是Fluko -FA25高剪切分散乳化机， 8000印111剪切151^11，超声的条件是400?9001，超声比率2:2，超声次数为90次 ； (4) 将步骤（3)制得的混悬剂C通过减压旋转蒸在45°C条件下旋转蒸发5 min，得伏立 康唑纳米结晶混悬液； (5) 将步骤（4)制得的伏立康唑纳米结晶混悬液，加入渗透压调节剂、pH调节剂和蒸 馏水至l〇〇〇ml，使该制剂的渗透压为0. 30m0smol/kg，pH值为7. 8 ;其中渗透压调节剂选择 丙二醇，pH调节剂选择氢氧化钠；即得伏立康唑纳米结晶眼用制剂。
[0028] 实施例6 (1) 将l〇g伏立康唑和50g Eudragit RS100分散在50ml有机溶剂中，得到药物溶液 A ;其中有机溶剂为体积比为4:1的丙酮-N-甲基吡咯烷酮的混合液； (2) 将50g的PVP和5g促渗剂分散在800ml蒸馏水中制得到水相分散介质，得到水相 分散介质溶液B，其中促渗剂为丙二醇； (3) 将步骤（1)制得的药物溶液A高速剪切或超声条件下分散于步骤（2)制得的水 相分散介质B中，制得混悬液C ;其中高速剪切的条件是Fluko -FA25高剪切分散乳化机， 8000印111剪切151^11，超声的条件是400?9001，超声比率2:2，超声次数为60次； (4) 将步骤（3)制得的混悬剂C通过减压旋转蒸在45°C条件下旋转蒸发5 min，得伏立 康唑纳米结晶混悬液； (5) 将步骤（4)制得的伏立康唑纳米结晶混悬液，加入渗透压调节剂、pH调节剂和蒸 馏水至1000ml，使该制剂的渗透压为0. 28m0smol/kg，pH值为7. 4 ;其中渗透压调节剂选择 甘露醇，pH调节剂选择磷酸盐；即得伏立康唑纳米结晶眼用制剂。
[0029] 所制备的伏立康唑纳米结晶制剂采用动态光散射（Nano-ZS 90,英国Malvern公 司)测定，结果见表2。随着载药量增加，粒径由增大的趋势，当主药含量< 0.5%时，伏立康 唑纳米结晶粒径能控制在l〇〇nm左右，Zeta电位大于+25mV，使体系更加稳定。
[0030] 表2实施例1-6伏立康唑纳米结晶制剂粒径及多分散系数
【权利要求】
1. 一种伏立康唑眼用纳米结晶制剂，其特征在于：包括下述原料：伏立康唑，水溶性 稳定剂、脂溶性稳定剂、促渗剂、渗透压调节剂和pH调节剂，其中伏立康唑的质量体积比 为0. 05?2%，水溶性稳定剂的质量体积比为1?10%，脂溶性稳定剂的质量体积比为1? 10%，促渗剂的质量体积比为〇?4%，所述伏立康唑眼用纳米结晶制剂的渗透压在0. 28? 0· 32mOsmol/kg 范围内，pH 为 7. 0-8. 0。
2. 如权利要求1所述的伏立康唑眼用纳米结晶制剂，其特征在于：所述水溶性稳定剂 为乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、泊洛沙姆中的一种或几种的混合物。
3. 如权利要求1所述的伏立康唑眼用纳米结晶制剂，其特征在于：所述脂溶性稳定剂 为甲基丙烯酸共聚物和甲基丙烯酸酯共聚物（Eudragit RS100)、甲基丙烯酸共聚物和甲 基丙烯酸酯共聚物（Eudragit RL100)、单油酸甘油酯、乙烯-醋酸乙烯酯聚合物、卵磷脂中 的一种或几种的混合物。
4. 如权利要求1所述的伏立康唑眼用纳米结晶制剂，其特征在于：所述促渗剂为透明 质酸钠、十二烷基硫酸钠、N-甲基吡咯烷酮、去氧胆酸钠、羟丙基-环糊精、月桂氮卓酮、乙 二胺四乙酸二钠、吐温80、丙二醇中的一种几种的混合物。
5. 如权利要求1所述的伏立康唑眼用纳米结晶制剂，其特征在于：所述渗透压调节剂 为甘油、甘露醇、丙二醇中的一种。
6. 如权利要求1所述的伏立康唑眼用纳米结晶制剂，其特征在于：所述pH调节剂为盐 酸、氢氧化钠、磷酸盐、硼酸、硫酸盐、枸橼酸中的一种。
7. -种制备如权利要求1所述的伏立康唑眼用纳米结晶制剂的方法，其特征在于：步 骤如下： (1) 将伏立康唑与脂溶性稳定剂分散在与水互溶的有机溶剂中得到药物溶液A ; (2) 将水溶性稳定剂和促渗剂分散在蒸馏水中作为分散介质，得到水相溶液B ; (3) 将药物溶液A快速分散于水相溶液B中得纳米混悬液C ; (4) 除去上步所得的纳米混悬液C中的有机溶剂，然后再加入渗透压调节剂、PH调节剂 和蒸馏水至规定值，使其pH值为7. 0-8. 0 ;得伏立康唑眼用纳米结晶制剂。
8. 如权利要求7所述的制备伏立康唑眼用纳米结晶制剂的方法，其特征在于：（1)所述 伏立康唑眼用纳米结晶制剂的渗透压在0. 28?0. 32mOsmol/kg范围内； (2) 所述步骤（1)中，伏立康唑与有机溶剂质量体积比为：伏立康唑：有机溶剂=lg : (4 ?40) ml ; (3) 所述步骤（1)中，有机溶剂选自氯仿、丙酮、乙醇、乙酸乙酯、异丙醇、甲醇、二甲基 亚砜、N-甲基吡咯烷酮中的一种或多种的混合物； (4) 所述步骤⑵中，水溶性稳定剂与蒸馏水质量体积比为：lg: (6?60ml) (5) 所述步骤（3)中，快速分散的具体操作为：高速剪切或超声分散； (6) 所述步骤（4)中除去有机溶剂的方法为：减压旋转蒸发。
9. 如权利要求8所述所述的制备伏立康唑眼用纳米结晶制剂的方法，其特征在于：（1) 所述高速剪切的具体操作为在8000?13000rpm下剪切5?15min ; (2) 所述超声分散的具体操作为在400?900W，超声比率2:2,条件下，超声分散30-90 次； (3) 所述减压旋转蒸发具体操作为：在35-45°C条件下旋转蒸发5?15min。
【文档编号】A61P27/02GK104188904SQ201410507426
【公开日】2014年12月10日 申请日期:2014年9月28日 优先权日:2014年9月28日
【发明者】祝红达, 戴助, 徐瑶, 蔡萌, 尚星星 申请人:湖北工业大学