宽叶阿魏酮作为β2-肾上腺素受体拮抗剂的应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及化合物的新用途，具体涉及宽叶阿魏酮作为β2-肾上腺素受体拮抗剂的应用。
【专利说明】宽叶阿魏酮作为β 2-肾上腺素受体拮抗剂的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及领域化合物的新用途，具体地说，涉及宽叶阿魏酮作为β 2-肾上腺素 受体拮抗剂的应用。
【背景技术】
[0002] 宽叶阿魏酮（Conferone)是从圆锥莖阿魏（Ferula, conocaula)的果实中分 离得到，随后发现在大多数阿魏属的植物中均可检获，因而被认为是一种常见的小分子 天然产物成分。实验研宄显示，宽叶阿魏酮可以增强长春碱（vinblastine)、长春新碱 (vincristine)和顺钼（cisplatin)的细胞毒性，但宽叶阿魏酮本身则未显示明显的细胞 毒性。
[0003] 目前已知的选择性β2-肾上腺素受体有两种：ICI-118,551[(±)-l-[2,3-(di hydr0-7-methyl-lH-inden-4-yl)oxy]-3-[(1-methylethyl)amino]-2-butanol]和布托 沙明（Butoxamine，Butaxamine)[a-[l-(t-butylamino)ethyl]_2, 5-dimethoxybenzyl alcohol)hydrochloride]。该两种药物均用于实验研宄，主要作用为在实验中阻断β2-肾 上腺素受体的活性，以验证其它药物的活性是否和β 2-肾上腺素受体相关。到目前为止， 上述两种化合物均尚未用于临床。近期的研宄发现，β 2-肾上腺素受体抑制剂的效能因量 而异，而现有已知的上述两种化合物的活性都很高，在使用中可控度较低。
【发明内容】
[0004] 为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一种新的β 2-肾上腺素 受体拮抗剂，并提供宽叶阿魏酮作为β 2-肾上腺素受体拮抗剂的新用途。
[0005] 为了实现本发明目的，本发明首先提供宽叶阿魏酮作为β 2-肾上腺素受体拮抗 剂的应用。
[0006] 本发明还提供了宽叶阿魏酮在制备治疗糖尿病的药物中的应用。
[0007] 本发明还提供了宽叶阿魏酮在制备抗心脑血管疾病的药物中的应用。
[0008] 进一步地，所述应用为宽叶阿魏酮在制备降血压药物中的应用。
[0009] 进一步地，所述应用为宽叶阿魏酮在制备抗心律失常药物中的应用。
[0010] 本发明的有益效果在于：
[0011] 本发明首次发现宽叶阿魏酮为β 2肾上腺素受体拮抗剂，更适于对β 2-肾上腺素 受体活性的微调，且其作为天然物质相对化学合成的β 2肾上腺素受体拮抗剂具有稳定性 高，毒性低的优势。
[0012] 本发明还发现宽叶阿魏酮可以用于治疗糖尿病、高血压、心律失常、心衰、血管痉 挛及其由此引起的疾病。以宽叶阿魏酮为活性成分，以常规的制剂工艺，单独使用或与其他 药物配合制备成在临床上可以使用的各种不同剂型的药物。当给药剂量大于l〇mg/kg体重 时，即能够对上述症状产生一定程度的疗效。
【专利附图】
【附图说明】
[0013] 图1为本发明所述宽叶阿魏酮的化学结构式；
[0014] 图2为本发明所述宽叶阿魏酮对β 2肾上腺素受体的拮抗活性随宽叶阿魏酮浓度 变化的曲线示意图。
【具体实施方式】
[0015] 以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
[0016] 实施例1宽叶阿魏酮对β 2肾上腺素受体的影响
[0017] 材料和方法：细胞系采用HEK/beta-2,由中国科学院北京基因组研宄所提供。
[0018] β 2肾上腺素受体激活剂选用异丙肾上腺素（isoprenaline) (SIGMA, Cat#I2760) 作为阳性对照，β 2肾上腺素受体拮抗剂选用ICI118, 551hydrocloride(SIGMA，Cat#I127-5MG)作为阳性对照。宽叶阿魏酮等待测小分子购自上海陶素生化科技有限公司。
[0019] 首先将HEK/beta-2细胞接种到96孔板的孔中，细胞数为4X104/孔。然后放到CO 2 培养箱中培育一天。第二天用钙流测试法分别检测了添加宽叶阿魏酮等小分子化合物后对 钙流的促进作用和添加宽叶阿魏酮等小分子化合物再添加 β2肾上腺素受体激动剂后对 钙流的阻断作用，小分子的初筛用量为30μΜ。我们的初筛结果显示，宽叶阿魏酮具有β2 肾上腺素受体拮抗剂的活性。在初筛结果显示活性的基础上，我们进一步测试了宽叶阿魏 酮作为β 2肾上腺素受体拮抗剂的IC50 = 28. 14 μ M(图2)。
[0020] 实施例2宽叶阿魏酮对高血压的影响
[0021] 试验目的：通过初次对自发性高血压大鼠（SHR)灌胃多个剂量的测试化合物，检 测化合物是否会引起高血压动物实验模型SHR大鼠血压和血糖变化，以及引起血压变化的 剂量值，初步证明先导化合物是否作用于Beta肾上腺素受体，也为下一步精细药效学实验 做参考。
[0022] 材料和方法：高血压动物实验模型SHR大鼠的制备采用10周龄雄性大鼠两肾一夹 法制备。SHR高血压161±1.5mmHg为成功的动物模型。宽叶阿魏酮购自上海陶素生化科技 有限公司。宽叶阿魏酮的溶剂采用大豆油。给药途径为灌胃。Softron BP-98A无创血压计 (北京软隆科技有限公司）用于血压测量。京都1640血糖仪和配套试纸（日本RAY，Inc) 用于血糖的测量。
[0023] 实验流程：
[0024] 动物的实验流程 [0025]第一天：
[0026] 化合物剂型制备：称取实验所需65mg的宽叶阿魏酮，放入IOOml量的离心管；用 0. 5ml标准和0. 2ml标准的移液枪多次向离心管注入大豆油至5. 2ml。放入超声设备进行 充分混合（药品的晶体颗粒较大，难以充分且均匀的大豆油中混悬）。
[0027] SHR大鼠准备：分别对大鼠进行称重、血压（心率值；收缩压、平均压和舒张压）、 血糖（全血）测试。记录实验数据。
[0028] 灌胃：注射器抽取适量大豆油混悬液，取出#1大鼠进行灌胃，记录时间；12分钟 后，抽取适量大豆油混悬液，取出#2大鼠进行灌胃，再次记录时间；#3、#4、#5类推。如表1 给药。
[0029] Ih血压和血糖测试：
[0030] 血压测量采用套尾法。将大鼠固定在筒形器材中，尾套套于大鼠尾巴根部，分别读 取心率值、收缩压、平均压和舒张压值。记录实验数据。
[0031] 血压测试后，大鼠尾部取血。用血糖仪配套的干净试纸直接采血，读取血糖值。记 录实验数据。
[0032] 随后定时完成2h、6h的血压和血糖测试。记录实验数据。
[0033] 第二天：
[0034] 完成第24h的血压和血糖测试工作，记录实验数据。
[0035] 处死大鼠。
[0036] 表175mg/kg给药剂量SHR大鼠的血压和血糖测试数据
【权利要求】
1. 宽叶阿魏酮作为e 2-肾上腺素受体拮抗剂的应用。
2. 宽叶阿魏酮在制备治疗糖尿病的药物中的应用。
3. 宽叶阿魏酮在制备抗心脑血管疾病的药物中的应用。
4. 根据权利要求3所述的应用，其特征在于，宽叶阿魏酮在制备降血压药物中的应用。
5. 根据权利要求3所述的应用，其特征在于，宽叶阿魏酮在制备抗心律失常药物中的 应用。
【文档编号】A61P9/00GK104490862SQ201410669986
【公开日】2015年4月8日 申请日期:2014年11月20日 优先权日:2014年11月20日
【发明者】赵勇, 谢威, 刘昕, 陈洁, 宋新蕊, 常莉 申请人:北京市计算中心