凝血酶抑制剂的药物前体的制作方法

专利名称：凝血酶抑制剂的药物前体的制作方法
技术领域：
本发明涉及药学活性化合物的药用药物前体，具体地说，这些活性化合物是胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶、特别是凝血酶的竞争抑制剂，本发明涉及作为药物的药物前体、包含它们的药用组合物以及生产它们的合成途径。
背景血液凝固是参与止血(即预防受损血管失血)和血栓形成(即在血管内形成血块，有时导致血管梗塞)的主要过程。
凝固是一系列复杂的酶促反应的结果。该系列反应中的一个最终步骤是将酶原凝血酶原转化为活性酶凝血酶。
已知凝血酶在凝固中起重要作用。它激活血小板，导致血小板聚集；将纤维蛋白原转化为血纤维蛋白单体，后者自发聚合为血纤维蛋白聚合物；以及激活凝血因子XIII，后者再使这些聚合物交联，形成不溶性血纤维蛋白。此外，凝血酶激活凝血因子V和凝血因子VIII，导致由凝血酶原“正反馈”产生凝血酶。
期望有效的凝血酶抑制剂通过抑制血小板的聚集以及血纤维蛋白的形成和交联，表现出抗凝活性。此外，期望通过抑制正反馈机制，增强抗凝活性。现有技术Claesson(Blood Coagul.Fibrin.(1994)5，411)已经描述了低分子量凝血酶抑制剂的开发。
Blombck等(J.Clin.Lab.Invest.24，增刊107，59，(1969))报道了基于位于纤维蛋白原Aα链酶切位点周围氨基酸序列的凝血酶抑制剂。在讨论的氨基酸序列中，这些作者提出三肽序列Phe-Val-Arg是最有效的抑制剂。
随后在例如美国专利4,346,078；国际专利申请WO 93/11152、WO 94/29336、WO 93/18060和WO 95/01168；和欧洲专利申请648780、468 231、559 046、641 779、185 390、526 877、542 525、195 212、362 002、364 344、530 167、293 881、686 642和601 459中公开了低分子量的肽基凝血酶抑制剂。
新近，在欧洲专利申请0 699 317和国际专利申请WO 95/23609、WO 95/35309、WO 96/25426和WO 94/29336中已经公开了基于肽衍生物的凝血酶抑制剂。
特别是，后一申请公开了肽衍生物RaOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-H，其中Ra表示H、苄基或C1-6烷基。
尽管已知这些活性化合物表现出显著的抗凝血酶活性，但改进它们口服和胃肠外给药后的药效学性质是有益的。希望改进的药效学性质实例包括(a)提供改善的胃肠道吸收，以便减小与这些活性化合物生物利用度有关的个体内和/或个体间的变异性；(b)使该血浆浓度时间曲线图变平(即减小在给药间隔内血浆浓度中的峰/谷比)，以便减小落在治疗间隔之外的风险和由于浓度峰太高引起的副作用(例如出血)以及由于浓度峰太低引起的副作用(例如血栓形成)；以及(c)增加这些活性化合物的作用时间。
此外，口服和胃肠外给与活性凝血酶抑制剂可能由于局部浓度高，导致不良的局部出血(例如在肠腔中或皮下)。
最后，在胃肠道内也可以抑制胰蛋白酶和其它丝氨酸蛋白酶的口服的活性凝血酶抑制剂可能表现出包括消化不良在内的另外的副作用(例如在肠腔内抑制胰蛋白酶)。
尽管在国际专利申请WO 94/29336中也公开了作为凝血酶抑制剂的上述活性化合物的某些N-苄酯基衍生物，但没有提到这些衍生物可以用作药物前体。事实上，WO 94/29336没有提到这些活性化合物的合适药物前体。
我们发现通过给与按照本发明的化合物，可以解决上述问题，这些化合物尽管本身是无活性的，但口服和/胃肠外给药时在体内代谢，形成包括上述那些化合物在内的活性凝血酶抑制剂。
本发明说明书按照本发明，提供式I化合物或其药学上可接受的盐(下文称为“本发明化合物”)R1O(O)C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-R2I其中R1表示-R3或-A1C(O)N(R4)R5或-A1C(O)OR4；A1表示C1-5亚烷基；R2(它取代Pab-H的脒基单位中的一个氢原子)表示OH、C(O)OR6、C(O)OR7或C(O)OCH(R8)OC(O)R9；R3表示H、C1-10烷基或C1-3烷苯基(该后一基团可任选地用C1-6烷基、C1-6烷氧基、硝基或卤素取代)；R4和R5独立地表示H、C1-6烷基、苯基、2-萘基，或当R1表示-A1C(O)N(R4)R5时，与连接它们的氮原子一起表示吡咯烷基或哌啶基；R6表示C1-17烷基、苯基或2-萘基(它们全都可任选地用C1-6烷基或卤素取代)；R7表示2-萘基、苯基、C1-3烷苯基(后三种基团可任选地用C1-6烷基、C1-6烷氧基、硝基或卤素取代)或C1-12烷基(后一基团可任选地用C1-6烷氧基、C1-6酸基或卤素取代)；R8表示H或C1-4烷基；以及R9表示2-萘基、苯基、C1-6烷氧基或C1-8烷基(后一基团可任选地用卤素、C1-6烷氧基或C1-6酸基取代)；条件是当R1表示R3，R3表示苄基、甲基、乙基、正丁基或正己基和R2表示C(O)OR7时，那么R7不表示苄基。
本发明化合物可能表现出互变异构。所有互变异构形式及其混合物都包括在本发明范围内。
本发明化合物也可以含有一个或多个非对称碳原子，因此可以表现出光学和/或非对映异构现象。所有的非对映异构体都可以采用例如色谱或分级结晶的常规技术分离。可以采用例如分级结晶或HPLC的常规技术通过分离这些化合物的外消旋混合物或其它混合物，分离各种立体异构体。或者，可以通过使合适的光学活性原材料在不引起外消旋或差向异构化的条件下反应，或通过例如用纯手性酸衍生，随后用常规方法(例如HPLC、硅胶上的色谱)分离非对映异构体衍生物，制备所需光学异构体。所有的立体异构体都包括在本发明范围内。
按照本发明的再一方面，提供上述限定的但无附带条件的式I化合物作为药物前体的用途。
R3、R4、R5、R6、R7和R9可以表示的烷基可以是线性的，或当有足够数目的碳原子时，可以是支链、环状或部分环状的，可以是饱和的或不饱和的，可以插入氧和/或用OH取代或封端，条件是该OH基团不连接sp2碳原子或与氧原子相邻的碳原子。
“部分环状烷基”我们是指诸如CH2Ch之类的基团。
R8可以表示的以及可以用来取代R3、R6和R7的烷基可以是线性的，或当有足够数目的碳原子时，可以是支链的，可以是饱和的或不饱和的和/或插入氧。
R3和R7可以表示的烷苯基的烷基部分可以是线性的，或当有足够数目的碳原子时，可以是支链和/或饱和的或不饱和的。
A1可以表示的亚烷基可以是线性的，或当有足够数目的碳原子时，可以是支链和/或饱和的或不饱和的。
R9可以表示的以及可以用来取代R3、R7和R9的烷氧基可以是线性的，或当有足够数目的碳原子时，可以是支链的和/或饱和的或不饱和的。
可以用来取代R7和R9的酸基可以是线性的，或当有足够数目的碳原子时，可以是支链的和/或饱和的或不饱和的。
本说明书结束处列出了缩写。
按照本发明的再一方面，提供上述限定的式I化合物，另外的条件是(a)R1不表示-A1C(O)OR4；(b)R4和R5不独立地表示H；(c)当R2表示OC(O)R6时，R6不表示C1-17烷基。
按照本发明的再一方面，提供式I化合物，其中(a)R1表示-A1C(O)OR4；(b)R4和R5独立地表示H；(c)当R2表示OC(O)R6时，R6表示C1-17烷基。
当R1表示-A1C(O)N(R4)R5时，优选的本发明化合物包括那些化合物，其中A1表示C1-3亚烷基；R4表示H或C1-6烷基；R5独立地表示C1-6烷基或C4-6环烷基；或那些化合物，其中R4和R5一起表示吡咯烷基。
当R1表示-A1C(O)OR4时，优选的本发明化合物包括那些化合物，其中A1表示C1-5亚烷基；R4表示C1-6烷基。
当R1表示R3时，优选的本发明化合物包括那些化合物，其中R3表示H、C1-10烷基(该后一基团可以是线性的，或当有足够数目的碳原子时，可以是支链的和/或部分环状或环状的)或C1-3烷苯基(后一基团可任选地被取代，可以是线性的，或当有足够数目的碳原子时，可以是支链的)。
优选的本发明化合物包括那些化合物，其中R2表示OH、OC(O)R6(其中，在后一种情况下，R6表示任选取代的苯基或C1-17烷基(后一基团可以是线性的，或当有足够数目的碳原子时，可以是支链、环状或部分环状的和/或饱和或不饱和的))、C(O)OR7(其中，在后一种情况下，R7表示任选地取代的苯基、C1-12烷基(后一基团可任选地被取代，可以是线性的，或当有足够数目的碳原子时，可以是支链、环状或部分环状的和/或饱和或不饱和的)或C1-3烷苯基(后一基团可任选地被取代，可以是线性的，或当有足够数目的碳原子时，可以是支链的)或C(O)OCH(R8)OC(O)R9(其中在后一种情况下，R8表示H或甲基，及R9表示苯基或C1-8烷基(后一基团可任选地被取代，可以是线性的，或当有足够数目的碳原子时，可以是支链的和/或环状或部分环状的))。
更优选的本发明化合物包括那些化合物，其中R1表示H、线性C1-10烷基、支链C3-10烷基、部分环状C4-10烷基、C4-10环烷基、可任选取代的线性C1-3烷苯基、可任选取代的支链C3烷苯基、-A1C(O)N(R4)R5(其中在后一种情况下，A1表示C1-3亚烷基，R4表示H或C1-3烷基，R5表示C2-6烷基或C5-6环烷基，或R4和R5一起表示吡咯烷基)或-A1C(O)OR4(其中在后一种情况下，A1表示C1-5亚烷基，而R4表示C1-4烷基)；R2表示OH、OC(O)R6(其中在后一种情况下，R6表示可任选取代的苯基、线性C1-4烷基、支链C3-4烷基和顺式十八基)、C(O)OR7(其中在后一种情况下，R7表示可任选取代和/或可任选不饱和的线性C1-4烷基或可任选取代和/或可任选不饱和的支链C3-4烷基、可任选取代的苯基或可任选取代的线性C1-3烷苯基或可任选取代的支链C3烷苯基)或C(O)OCH(R8)OC(O)R9(其中，在后一种情况下，R8表示H或甲基，而R9表示苯基、C5-7环烷基、线性C1-6烷基、支链C3-6烷基或部分环状C7-8烷基)。
特别优选的本发明化合物包括那些化合物，其中R1表示线性C1-6烷基、C6-10环烷基或可任选取代的线性C1-3烷苯基；R2表示OH、OC(O)R6(其中在后一种情况下，R6表示线性C1-3烷基或支链C3烷基)、C(O)OR7(其中在在后一种情况下，R7表示可任选取代的线性C14烷基或可任选取代的支链C3-4烷基、可任选取代的线性C1-3烷苯基或支链C3烷苯基)或C(O)OCH(R8)OC(O)R9(其中在后一种情况下，R8表示H，而R9表示C5-7环烷基、线性C1-6烷基或部分环状C7-8烷基)。
当R1表示R3，而R4表示可任选取代的C1-3烷苯基时，优选的可任选取代基包括C1-6烷基(尤其是甲基)。
当R2表示C(O)OR7，而R7表示可任选取代的C1-12烷基时，优选的可任选的取代基包括卤素(尤其是氯)和C1-6烷氧基(尤其是甲氧基)。
当R2表示C(O)OR7，而R7表示可任选取代的苯基时，优选的可任选取代基包括C1-6烷基(尤其是甲基)、C1-6烷氧基(尤其是甲氧基)和卤素(尤其是氯)。
当R2表示C(O)OR7，而R7表示可任选取代的C1-3烷苯基时，优选的可任选取代基包括硝基。
优选的本发明化合物包括实施例1-68的化合物。
更优选的本发明化合物包括EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2；nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2；tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu；PrlC(O)CH2CH2CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；ChNHC(O)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；(nPr)2NC(O)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCC(CH3)3；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCC(CH3)3；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH3)OOCCH3；MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh；MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；iPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；(nPr)2NCOCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；ChNHCOCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc；HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-O-cis-Oleyl；Cyclooctyl-OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；tBuCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；(2-Me)BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；ChCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；ChOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；PhC(Me)2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；(Me)2CHC(Me)2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)；ChCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)；(2-Me)BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu；iPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-iBu；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCh；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCH2Ch；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(Me)OOCPh；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCPh；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(Me)OAc；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OAc；tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OAc；MeOOC-C(＝CHEt)CH2-OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；Men-OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)；andEtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CCl3.
特别优选的本发明化合物包括EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CCl3；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOnBu；nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；Cyclooctyl-OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCh；MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；iPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；和EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc.制备按照本发明，也提供制备式I化合物的方法，该方法包括(a)通过将相应的式I化合物(其中R2表示OC(O)R6，而R6如上限定)与醇盐碱(例如一种碱金属醇盐)例如于室温下，在合适有机溶剂(例如THF)存在下进行反应，制备式I化合物(其中R2表示OH)。
(b)通过将相应的式I化合物(其中R2表示C(O)OR7，而R7如上限定)与羟胺或其酸加成盐例如于室温下，在合适碱(例如碳酸钾或三乙胺)和合适有机溶剂(例如THF或EtOH)存在下进行反应，制备其中式I化合物(R2表示OH)。
(c)通过将以下相应式II化合物与式III化合物例如于室温和较高温度(例如40℃)之间，在合适碱(例如碳酸钾)和合适有机溶剂(例如THF、D/F或乙腈)存在下进行反应，制备式I化合物，H-(R)Cgl-Aze-Pab-R2II其中R2如上限定，R1O(O)C-CH2-L1III其中L1表示离去基团，例如卤化物(例如溴化物)或烷基磺酸盐(例如三氟甲基磺酸盐)，而R1如上限定。
(d)通过将相应的式I化合物(其中R1表示C1-10烷基或C1-3烷苯基，而R2表示OH或C(O)OR7)与合适的碱(例如碱金属醇盐或碱金属氢氧化物)例如于室温下，在合适有机溶剂(例如水和MeOH)存在下进行反应，制备式I化合物(其中R1表示H，R2表示OH或C(O)OR7，而R7上面限定)。
(e)通过将相应的式I化合物(其中R2表示OH)与以下式IV化合物例如于室温下，在合适碱(例如三乙胺、吡啶或DMAP)和合适有机溶剂(例如二氯甲烷或THF)存在下进行反应，制备式I化合物(其中R2表示OC(O)R6、而R6如上限定)R6C(O)-O-C(O)R6IVR6C(O)Hal V其中Hal表示Cl或Br，而在两种情况下，R6都如上限定。
(f)通过将以下相应的式VI化合物与合适酸(例如TFA)例如于室温下，在合适有机溶剂(例如二氯甲烷)存在下进行反应，制备其中R1表示H、R2表示OC(O)R6、而R6如上限定的式I化合物，P1O(O)C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-R2VI其中P1表示酸不稳定酯保护基团(例如tBu或Bn)，而R2表示OC(O)R6，其中R6如上限定。
(g)通过以下相应的式VII化合物在本领域技术人员众所周知的条件下的酯基转移，制备式I化合物，其中R1表示R3，R3表示C1-10烷基或C1-3烷苯基，R2表示OH或C(O)OR7，而R7如上限定，R1aO(O)C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-R2VII其中R1a表示非正在形成的C1-10烷基或C1-3烷苯基，而R2如上限定或为另一不稳定烷基取代基。
通过将以下式VIII化合物在本领域技术人员众所周知的条件下去保护，可以制备式II化合物，
Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-R2VIII其中R2如上限定。
可以用类似于上文所述式I化合物(其中R1表示R3，而R3表示C1-10烷基或C1-3烷苯基)的制备方法，制备式VI和VII化合物。
可以通过将以下式IX化合物与Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OH例如于室温下，在合适偶联系统(例如EDC)、合适碱(例如DMAP)和合适有机溶剂(例如二氯甲烷或乙腈)存在下进行反应，制备式VIII化合物，H-Pab-R2IX其中R2如上限定。
可以通过将相应的式VIII化合物(其中R2表示C(O)OR7或C(O)OCH(R8)OC(O)R9)与羟胺或其酸加成盐例如于室温下，在合适碱(例如碳酸钾或三乙胺)和合适有机溶剂(例如THF和EtOH)存在下进行反应，制备式VIII化合物(其中R2表示OH)。
可以通过将Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H与以下式X化合物例如于室温下或低于室温下，在合适碱(例如NaOH)和合适的有机溶剂(例如THF)存在下进行反应，制备式VIII化合物(其中R2表示C(O)OR7或C(O)OCH(R8)OC(O)R9)，L2C(O)OR2aX其中L2表示离去基团(例如卤素或酚盐)，R2a表示R7或-CH(R8)OC(O)R9，而R7、R8和R9如上文限定。
或者可以通过将相应的式VIII化合物(其中R2表示OH)与上文限定的式IV或上文限定的式V化合物例如于室温下，在合适碱(例如三乙胺、吡啶或DMAP)和合适有机溶剂(例如二氯甲烷或THF)存在下进行反应，制备其中R2表示C(O)OR6的式VIII化合物。
或者可以通过将Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H与以下式XI化合物例如于室温下，在合适的有机溶剂(例如THF)存在下进行反应，制备式VIII化合物(其中R2表示OC(O)R6)，R6C(O)-O-O-C(O)R6XI其中R6如上限定。
可以通过将相应的式VIII化合物(其中R2表示OC(O)R6，而R6如上文限定)与合适碱(例如碱金属醇盐)例如于室温下，在合适的有机溶剂(例如THF)存在下进行反应，制备其中R2表示OH的式VIII化合物。
式IX化合物是文献中众所周知的，或可以采用类似于上文所述那些方法制备。例如可以通过将H-Pab-H或其保护的衍生物与上文限定的式X化合物例如于室温下，在合适碱(例如NaOH)和合适有机溶剂(例如THF)存在下进行反应，制备式IX化合物，其中R2表示C(O)OR7或C(O)OCH(R8)OC(O)R9，而R7、R8和R9如上文限定。
通过将H-Pab-H或其受保护的衍生物与Boc-Cgl-Aze-OH例如按上述用于式VIII的方法进行反应，可以制备Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H。
或者可以通过将以下式XII化合物在本领域技术人员众所周知的条件下去保护，制备Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H，Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-P2XII其中P2表示Boc邻位的保护基团。
式III、IV、V、X、XI和XII化合物或者是市售的，是文献中众所周知的，或者可采用已知技术(例如下文所述)得到的。
可以采用常规技术，将本发明化合物从其反应混合物中分离。
本领域技术人员会意识到，在上述方法中，中间化合物的官能团可能需要用保护基团保护。
希望保护的官能团包括羟基、氨基、脒基和羧酸。合适的羟基保护基团包括三烷基甲硅烷基和二芳基甲硅烷基(例如叔丁基二甲基甲硅烷基、叔丁基二苯基甲硅烷基或三甲基甲硅烷基)和四氢吡喃基。合适的羧酸保护基团包括C1-6烷基酯或苄基酯。合适的氨基和脒基保护基团包括叔丁酯基或苄酯基。脒基氮可以或者是单保护的或者是双保护的。
可以按照诸如下文所述的本领域技术人员众所周知的技术除去保护基团。
在Protective Groups in Organic Chemistry，J W F McOmie编辑，Plenum Press(1973)和Protective Groups in Organic synthesis，第2版，TW Green和P G M Wutz，Wiley-Interscience(1991)中全面描述了保护基团的用法。医学和药物用途本发明化合物是有用的，因为它们在体内代谢，形成具有药理学活性的化合物。因此它们被指定为药物，特别是药物前体。
具体地说，尽管本发明化合物本身对凝血酶是无活性的，但例如在下述试验中证明的，它们在体内代谢，形成潜在的凝血酶抑制剂。
“本发明化合物本身对凝血酶是无活性的”是指在以下试验A的测定中，它们表现出的IC50TT值大于1μM。
因此预期本发明化合物可用于需要抑制凝血酶的那些疾病中。
因此，在包括人在内的动物血液和组织中血栓形成和凝固性过高的治疗处理和/或预防处理中需要本发明化合物。
已知凝固性过高可以导致血栓栓塞病。
可以提到的血栓栓塞病包括诸如凝血因子V突变(凝血因子VLeiden)之类的活化蛋白C抗性以及抗凝血酶III、蛋白C、蛋白S、肝素辅因子II的遗传性或获得性缺陷。已知与凝固性过高和血栓栓塞病有关的其它疾病包括循环抗磷脂抗体(Lupus抗凝剂)、高半胱氨酸血(homocysteinemi)、肝素诱导的血小板减少症和血纤维蛋白溶解中的缺陷。因此，在治疗处理和预防处理这些疾病中需要本发明化合物。
在有不合要求的过量凝血酶而无凝固性过高病症的疾病的治疗中还需要本发明化合物，这些疾病例如神经变性疾病，诸如Alzheimer氏病。
可以提到的特殊疾病状态包括治疗处理和/或预防处理静脉血栓形成和肺栓塞、动脉血栓形成(例如在心肌梗塞、不稳定咽峡炎、基于血栓形成的中风和外周动脉血栓形成)和通常在动脉纤维性颤动期间来自心房或在透壁心肌梗塞后来自左心室的全身性栓塞。
此外，预期本发明化合物在血栓溶解、经皮经管腔成形术(PTA)和冠状动脉分流术手术后预防重新阻塞(即血栓形成)中用实用性；一般在显微手术和血管手术后预防重新血栓形成中有实用性。
其它适应症包括治疗处理和/或预防处理由细菌、多种创伤、中毒或任一其它机制引起的播散性血管凝血；当血液与体内外来物表面(诸如血管移植物、stent血管移植片固定模、血管导管、机械和生物假瓣膜或任何其它医疗装置)接触时进行的抗凝剂处理；和诸如在心血管手术期间采用心肺机(heat-lung machine)或在血液透析中，当血液与体外医疗装置接触时进行的抗凝剂处理。
凝血酶除对凝血过程的作用外，还已知激活大量细胞(诸如嗜中性白细胞、成纤维细胞、内皮细胞和平滑肌细胞)。因此，本发明化合物也可用来治疗处理和/或预防处理特发性和成人呼吸窘迫综合症、在用放疗或化疗治疗后的肺纤维化、败血症性休克、败血症、炎症反应，包括(但不限于)水肿、诸如冠状动脉疾病之类的急性或慢性动脉粥样硬化、脑动脉疾病、外周动脉疾病、再灌损伤和经皮经管腔血管成形术(PTA)后的重狭窄。
抑制胰蛋白酶和/或凝血酶的本发明化合物也可以用来治疗胰腺炎。
按照本发明的再一方面，提供需要抑制凝血酶的疾病的治疗方法，该方法包括给与患这疾病或易患这种疾病的患者治疗有效量的如上限定的式I化合物或其药学上可接受的盐。
本发明化合物通常以药学上可接受的剂量形式经口、颊、直肠、皮肤、鼻、气管、支气管、通过任何其它胃肠外途径或通过吸入，以药用制剂形式给药，该药用制剂包含获得作为游离碱或者作为药学上可接受的非毒性有机或无机酸加成盐的药物前体。根据所述的失调和待治疗病人及给药途径，所述组合物可以以变化的剂量给与。
本发明化合物也可以结合具有不同作用机制的任一抗凝剂和/或与其共同给药，抗凝剂诸如抗血小板剂乙酰水杨酸、氯苄噻啶、clopidogrel、凝血噁烷受体和/或合成酶抑制剂、血纤维蛋白酶原受体拮抗剂、环前列腺素mimetics和磷酸二酯酶抑制剂和ADP受体(P2T)拮抗剂。
在血栓形成疾病，特别是心肌梗塞的治疗中，本发明化合物还可以与抗凝剂(thromolytics)结合和/或与其一起给药，这些抗凝剂诸如组织血纤维蛋白溶酶原激活剂(天然的或重组的)、链激酶、尿激酶、原尿激酶、一种分离的链激酶血纤维蛋白溶酶原激活剂复合体(ASPAC)、动物唾液腺血纤维蛋白溶酶原激活剂等等。
因此，按照本发明的再一方面，提供一种药用制剂，还制剂包含与药学上可接受的辅助剂、稀释剂或载体混合的上文限定的式I化合物或其药学上可接受的盐。
在人类的治疗处理中，本发明化合物合适的口服日剂量为大约0.001-100mg/kg体重，胃肠外给药的合适日剂量为0.001-50mg/kg体重。
本发明化合物的优点是，与下式化合物、特别是其中Ra表示H的化合物相比，它们在口服和胃肠外给药后，可以具有诸如上文指定的那些改进的药效学性质RaO(O)C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-H其中Ra如上文限定。
本发明化合物对凝血酶、胰蛋白酶和其它丝氨酸蛋白酶是无活性的。由此这些化合物在胃肠道中仍是无活性的，因此可以避免口服本身有活性的抗凝剂所经历的潜在的问题复杂性，诸如由胰蛋白酶抑制引起的出血和消化不良。
此外，采用本发明化合物可以避免与胃肠外给与活性凝血酶抑制剂伴生的或在胃肠外给与活性凝血酶抑制剂后的局部出血。
本发明化合物也可能具有的优点是，它们比现有技术中已知的化合物更有效，毒性更低，作用时间更长，活性范围更广，产生的副作用更小，更易于吸收，或它们可以具有其它的有用药理学性质。生物学试验试验A凝血酶凝结时间(TT)的测定将含人凝血酶(T 6769，Sigma Chem Co.，终浓度为1.4 NIH单位/ml)的100μlpH7.4的缓冲液和10μl抑制剂溶液保温1分钟。然后，加入100μl合并的正常柠檬酸盐人血浆，在自动装置(KC 10，Amelung)上测定凝结时间。
将以秒计的凝结时间对抑制剂浓度作图，通过内推法确定IC50TT。
IC50TT为将人血浆凝血酶凝结时间加倍的抑制剂浓度。试验B体外测定血浆中凝血酶时间以清醒的大鼠检测口服或胃肠外给与本发明化合物后的凝血酶的抑制，这些大鼠在实验前1或2天装有用于从颈动脉取血的导管。在实验当天，给与溶于乙醇∶SolutolTM∶水(5∶5∶90)的该化合物，在固定时间取血样，装入含有1份柠檬酸钠溶液(0.13mol/L)和9份血液的塑料管中。将这些管离心，以获得几乎不含血小板的血浆。该血浆用来按下述测定凝血酶时间。
100μl柠檬酸盐大鼠血浆用100μl0.9％的盐水溶液稀释，通过加入含人凝血酶(T 6769，Sigma Chem Co.，美国)的100μlpH7.4的缓冲液，开始血浆凝固。在自动装置(KC 10，Amelung，德国)上测定凝结时间。
通过使用使合并的柠檬酸盐大鼠血浆的凝血酶时间与溶于盐水中的活性凝血酶抑制剂HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H(参见国际专利申请WO 94/29336)的已知浓度相联系的标准曲线，估计大鼠血浆中上述活性凝血酶抑制剂的浓度。
在该大鼠中活性凝血酶抑制剂HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H(假定凝血酶时间的延长是由上述化合物引起的)的估计血浆浓度的基础上，利用梯形规律并将数据无限外推，计算口服和/或胃肠外给与该药物前体后该曲线下的面积(AUCpd)。
在口服或胃肠外给与该药物前体后，如下计算活性凝血酶抑制剂HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H的生物利用度[(AUCpd/剂量)/(AUC活性，iv/剂量]×100这里AUC活性，iv表示按上述方法给清醒大鼠静脉注射HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H后获得的AUC。试验C体外测定尿中凝血酶时间通过体外测定尿中凝血酶时间，估计口服或胃肠外给与溶于乙醇∶SolutolTM∶水(5∶5∶90)中的本发明化合物后排泄于尿中的活性凝血酶抑制剂HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H的量(假定该凝血酶时间的延长是由上述化合物引起的)。
将清醒大鼠置于代谢笼中，使得在口服本发明化合物后分别收集24小时的尿和粪便。如下对收集的尿测定该凝血酶时间。
合并的正常柠檬酸盐人血浆(100μl)与该浓缩的大鼠尿或其盐水稀释液一起保温1分钟。然后，通过给与缓冲液(pH7.4；100μl)中的人凝血酶(T 6769，Sigma Chem Co.)，引发血浆凝固。在自动装置(KC 10；Amelung)上测定该凝结时间。
通过使用使合并的正常柠檬酸盐人血浆的凝血酶时间与溶于浓缩大鼠尿(或其盐水稀释液)中的活性凝血酶抑制剂HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H的已知浓度相联系的标准曲线，估计大鼠尿中上述活性凝血酶抑制剂的浓度。通过用尿中上述活性抑制剂的估计平均浓度乘以24小时内大鼠尿的总生产量，可以计算该尿中排泄的该活性抑制剂的量(AMOUNTpd)。
如下计算口服或胃肠外给与药物前体该后，活性凝血酶抑制剂HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H的生物利用度[(AMOUNTpd/剂量)/(AMOUNT活性，iv/剂量]×100这里AMOUNT活性，iv表示按上述给清醒大鼠静脉注射HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H后在尿中排泄的量。试验D通过LC-MS测定尿中的HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H如下所述，通过LC-MS分析测定口服或胃肠外给与溶于乙醇∶SolutolTM∶水(5∶5∶90)的本发明化合物后排泄在尿中的该活性凝血酶抑制剂HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H的量。
按以上方法C中所述，进行动物研究。收集尿样，在分析前将其于-20℃冷冻。
按照以下方法分析尿样的HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H含量将解冻的尿样混合，如需要在离心机中离心。用1.0ml甲醇活化固相提取管(Analytichem Bond Elut.No.1210-2059)，用1.0ml乙腈∶水(50∶50)调节，然后用1.0ml0.1％甲酸调节。将50μl工作内标(20μmol/L)加入每个提取管中。对于尿标准，加入50μl标准溶液。将200μl样品(或对于尿标准，加入空白尿)加入每个管中，此后通过重力或温和真空吸出。在用1.0ml乙腈∶醋酸铵(2mmol/L)(35∶65)洗脱之前，用1.0ml醋酸铵(2mmol/L)洗出残留尿。将收集的洗脱液转移至自动取样小瓶中。将30μl该提取物注射到LC柱(Hypersil BDS-C18；3μm；75mm×4.0mm内径；Hewlett-Packard No.79926 03-354)，用具有40％乙腈和0.1％甲酸的醋酸铵缓冲液(1.3mmol/L)，以0.75ml/分钟洗脱。分出该流出物，使得以30μl/min进入P-E Sciex API-3质谱仪的电喷雾(electrospray)离子源中。HO(O)C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-H和HO(O)C-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab-H(内标)的保留时间都接近1.5分钟。分别在m/z 430.2和444.2下，以单位质量分辨监测它们的分子离子((M+H)+)。尿标准有两个水平，一个在定量极限处，用来基于HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H与该内标峰面积比进行校准。检查该方法在0.050-20μmol/L范围内的直线性。变化的相关系数在1-20μmol/L下为1-2％，而在0.50μmol/L下为7％。定量的极限为0.050μmol/L。
通过将24小时内总尿生产量乘以尿中HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H的测定浓度，可以计算该尿中排泄的该活性抑制剂的量(AMOUNTpd)。然后按以上方法C中所述，计算该活性凝血酶抑制剂的生物利用度。
通过以下实施例说明本发明。实施例一般实验步骤在备有电喷雾接口的Finnigan MAT TSQ 700三段四极质谱计上记录质谱。
在BRUKER ACP 300和Varian UNITY加400和500分光计上测量1H NMR和13C NMR，操作的1H频率分别为300.13、399.96和499.82 MHz，而操作的13C频率分别为75.46、100.58和125.69 MHz。以δ单位报告化学位移。原材料的制备按照国际专利申请WO 94/29336中所述方法，制备Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H、Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H×HCl、H-(R)Aze-Pab-Z、H-(R)Aze-Pab-Z×HCl、Bn-OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z、Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-Z、Boc-(R)Cgl-Aze-OH和Pab-Z×HCl。实施例1EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2于0℃将氯甲酸烯丙酯(1.7g；14mmol)滴加到含Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H(6.1g；13mmol)的THF(125ml)和2M NaOH(70ml；140mmol)的溶液中。于0℃搅拌1h后，将反应混合物浓缩，加入水(100ml)，产生的水相用二氯甲烷(3×100ml)萃取。将合并的有机相浓缩，产生6.4g粗产物，后者通过采用EtOAc∶THF∶Et3N(68∶29∶3)作为洗脱剂的快速色谱进行纯化。浓缩产生5.8g(81％)白色固体的副标题化合物。1H NMR(500 MHz，CDCl3)δ 8.19(bt，1H)，7.78(d，2H)，7.26(d，2H)，6.02-5.92(m，1H)，5.32(d，J＝17 Hz，1H)，5.18(d，J＝10 Hz，1H)，5.06(d，J＝7 Hz，1H)，4.82(bs，1H)，4.61(d，J＝6 Hz，2H)，4.58-4.48(m，1H)，4.38-4.27(m，2H)，4.14-4.03(m，1H)，3.77-3.68(m，1H)，2.60-0.90(m，24H).13C NMR(125 MHz，CDCl3)羰基和脒信号δ172.70，170.74，168.02，164.54，155.98.(ii)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2×2TFA于0℃将TFA(15ml)加入含Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2(2.03g；3.65mmol，来自以上步骤(i))的二氯甲烷(15ml)溶液中。该反应混合物于周围温度搅拌3h后，将其浓缩产生2.8g白色固体的副标题化合物。1H NMR(500 MHz，MeOH(d4))δ7.80(d，2H)，7.57(d，2H)，6.02(m，1H)，5.45(d，J＝17 Hz，1H)，5.33(d，J＝10 Hz，1H)，5.91-4.80(m，3H)，4.56(s，2H)，4.38(bq，J＝8 Hz，1H)，3.71(d，J＝7 Hz，1H)，2.76-2.60(m，1H)，2.35-2.20(m，1H)，1.9-1.0(m，11H).(iii)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2将H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2×2TFA(649mg；0.95mmol，来自以上步骤(ii))、K2CO3(656mg，4.8mmol)、水(0.1ml)和THF(10ml)的混合物于40℃搅拌2h，然后加入含溴乙酸乙酯(190mg；1.14mmol)的THF(1ml)。于40℃搅拌4h并于周围温度下搅拌14h后，将该反应混合物过滤、浓缩并通过采用EtOAc∶THF∶Et3N(68∶29∶3)作为洗脱剂的快速色谱纯化，产生244mg(47％)白色固体的标题化合物。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ8.46(bt，1H)，7.81(d，2H)，7.35(d，2H)，6.08-5.94(m，1H)，5.35(d，J＝18 Hz，1H)，5.23(d，J＝11 Hz，1H)，4.93(dd，J＝6 and 9 Hz，1H)，4.66(d，2H)，4.62-4.38(ABX-谱的AB部分)，4.16-4.04)(m，4H)，3.20(d，2H)，2.86(d，1H)，2.64-2.45(m，2H)，2.0-1.0(m 17H).13C NMR(100 MHz，CDCl3)羰基和脒信号δ175.33，172.24，170.72，168.19，164.35.实施例2nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2按照实施例1(iii)所述的步骤，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2×2TFA(503mg；0.74mmol，参见以上实施例1(ii))和溴乙酸正丙酯(160mg，0.88mmol)制备标题化合物，产生277mg(68％)的白色固体。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ8.48(bt，1H)，7.83(d，2H)，7.35(d，2H)，6.76(宽峰，1H)，6.02(m，1H)，5.37(dd，1H)，5.24(dd，1H)，4.94(t，1H)，4.67(dd，2H)，4.49(ABX-谱的AB部分，2H)，4.12(m，2H)，3.98(t，2H)，3.24(AB-系统，2H)，2.87(d，1H)，2.52(m，2H)，1.99(bd，2H)，1.80-1.50(m，7H)，1.61(q，2H)，1.30-1.10(m，2H)，1.00(qd，2H)，0.90(t，3H).13C-NMR(100 MHz，CDCl3)羰基和脒信号δ175.4，172.3，170.7，167.9，164.5实施例3tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2按照实施例1(iii)所述的步骤，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2×2TFA(285mg；0.42mmol，参见以上实施例1(ii))和溴乙酸正丁酯(96mg，0.50mmol)制备标题化合物，产生93mg(39％)的白色固体。1H NMR(500 MHz，CDCl3)δ8.50(bt，1H)，7.81(d，2H)，7.36(d，2H)，6.07-5.97(m，1H)，5.36(d，J＝16 Hz，1H)，5.22(d，J＝10 Hz，1H)，4.93(dd，J＝9 and 6 Hz，1H)，4.76(d，J＝6 Hz，2H)，4.57-4.46(m，2H)，4.18-4.04(m，2H)，3.19-3.08(AB-谱，JAB＝20 Hz，2H)，2.86(d，J＝8 Hz，1H)，2.72-2.53(m，2H)，2.0-0.9(m，23H).13C NMR(100 MHz，CDCl3)羰基和脒信号δ175.28，171.53，170.76，167.81，164.1.实施例4EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOET(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt按照实施例1(i)所述步骤，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H(600mg；1.3mmol)和氯甲酸乙酯(150mg；1.4mmol)制备副标题化合物，产生240mg(34％)的白色固体。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ9.37(bs，1H)，8.16(bs，1H)，7.72(d，2H)，7.18(d，2H)，5.17(d，1H)，4.73(t，1H)，4.47(dd，1H)，4.27(m，2H)，4.06(q，2H)，3.66(t，1H)，2.48(m，1H)，2.37(m，1H)，1.4-1.8(m，7H)，1.22(s，9H)，1.3-0.8(m，7H).13C-NMR(75MHz，CDCl3)羰基和脒信号δ172.6，170.7，167.9，164.8，156.0(ii)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt×2HCl于0℃，在5分钟内将氯化氢加入含Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt(240mg；0.44mmol，来自以上步骤(i))的EtOAc(20ml)溶液中。该反应混合物于0℃搅拌1h后，将其浓缩产生225mg(100％)白色固体。1H-NMR(300 MHz，D2O)δ7.85(d，2H)，7.61(d，2H)，4.98(dd，1H)，4.60(s，1H)，4.44(p，5H)，3.90(d，1H)，2.73(m，1H)，2.37(m，1H)，2.0-1.65(m，9H)，1.39(t，3H)，1.4-1.1(m，7H)，0.98(m，1H).13C-NMR(75 MHz，D2O)羰基和脒信号δ172.7，169.4，166.8，154.3.(iii)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt按照实施例1(iii)中所述步骤，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt×2HCl(160mg；0.31mmol，来自以上步骤(ii))和溴乙酸乙酯(52.5mg；0.31mmol)制备标题化合物。产量100mg(61％)的淡黄色粉末。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ8.48(bt，1H)，7.81(d，2H)，7.38(d，2H)，4.51(ABX-谱的AB部分，2H)，4.21(q，2H)，4.15-4.05(m，4H)，3.21(AB-谱，2H)，2.86(d，1H)，2.68(m，1H)，2.53(m，1H)，1.96(bd，2H)，1.90-1.70(m，12H)，1.35(t，3H)，1.22(t，6H)，1.30-0.95(m，2H).13C-NMR(75 MHz，CDCl3)羰基和脒信号δ175.5，172.2，170.7，167.6，164.9实施例5EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr按照以上实施例1(i)所述步骤，用Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H(6.0g；13mmol)和氯甲酸正丙酯(1.57ml；14mmol)制备副标题化合物，产量为5.4g(76％)。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ8.25(bt，1H)，7.82(d，2H)，7.31(d，2H)，5.09(bd，1H)，4.87(dd，1H)，4.58(dd，1H)，4.39(dd，2H)，4.14(q，1H)，4.10(t，2H)，3.79(t，1H)，2.54(dm，2H)，2.21(s，1H)，1.87-1.55(m，8H)，1.33(s，9H)，1.45-1.0(m，4H)，0.99(t，3H).13C-NMR(100 MHz，CDCl3)羰基和脒信号δ172.7，170.6，167.8，165.0，155.9.(ii)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr×2TFA按照实施例1(ii)所述步骤，用2.1g(3.7mmol)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr(来自以上步骤(i))制备副标题化合物。产量为3.7g。1H-NMR(400 MHz，MeOH-d4)δ7.77(d，2H)，7.60(d，1H)，4.86(dd，1H)，4.56(ABX-谱的AB部分，2H)，4.33(m，4H)，3.72(d，1H)，3.30(m，1H)，2.68(m，1H)，2.28(m，1H)，1.9-1.7(m，9H)，1.4-1.1(m，6H)，1.02(t，3H).13C-NMR(100 MHz，MeOH-d4)羰基和脒信号δ172.7，169.3，168.0，161.4.(iii)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr按照实施例1(iii)中所述步骤，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr×2TFA(472mg；0.69mmol，来自以上步骤(ii))和溴乙酸乙酯(138mg；0.83mmol)制备标题化合物，产生0.22mg(58％)的白色固体。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ8.46(bt，1H)，7.82(d，2H)，7.32(d，2H)，4.92(dd，1H)，4.49(ABX-谱的AB部分，2H)，4.10(m，6H)，3.23(AB-谱，2H)，2.80(dm，2H)，1.98(bd，2H)，1.74(q，2H)，1.63(dd，2H)，1.52(m，1)，1.21(t，3H)，1.20-1.10(m，2H)，0.98(t，3H).13C-NMR(100 MHz，CDCl3)羰基和脒信号δ175.3，172.2，170.7，167.6，164.8.实施例6MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr按照以上实施例1(iii)中所述步骤，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr×2TFA(365mg；0.53mmol，参见以上实例5(ii))和溴乙酸甲酯(98mg；O.64mmol)制备标题化合物，产生114mg(41％)的白色固体。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ8.44(bt，1H)，7.82(d，2H)，7.32((d，2H)，7.04(宽峰1H)，4.92(dd，1H)，4.49(ABX-谱的AB部分)，4.12(m，2H)，4.10(t，2H)，3.63(s，3H)，3.24(s，2H)，2.87(d，1H)，2.65(m，1H)，2.52(m，1H)，2.01(宽峰，1H)，1.96(bd，2H)，1.75(q，4H)，1.63(bdd，1H)，1.53(m，1H)，1.3-1.1(m，5H)，0.99(t，3H).13C-NMR(100 MHz，CDCl3)羰基和脒信号δ175.3，172.5，170.7，167.7，165.0.实施例7EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH2OMe(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH2OMe按照以上实施例1(i)所述步骤，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H(6.0g；13mmol)和氯甲酸2-甲氧基乙酯(1.94g；14mmol)制备副标题化合物。产量为3.9g(34％)。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ8.24(bt，1H)，7.83(d，2H)，7.31(d，2H)，5.08(bd，1H)，4.87(dd，1H)，4.58(dd，1H)，4.39(dd，2H)，4.30(t，2H)，4.15(m，1H)，3.79(bt，1H)，3.68(t，2H)，3.40(s，3H)，2.65-2.45(m，2H)，2.20(宽峰，1H)，1.9-1.55(m，6H)，1.34(s，9H)，1.3-0.95(m，6H).13C-NMR(100 MHz，CDCl3)羰基和脒信号δ172.7，170.7，167.8，164.6，155.9.(ii)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH2OMe×2TFA按照以上实施例1(ii)的所述步骤，用1.71gBoc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH2OMe(来自以上步骤(i))制备副标题化合物。产量为1.89g(88％)。1H-NMR(400 MHz，MeOH-d4)δ7.77(d，2H)，7.59(d，2H)，4.85(dd，1H)，4.56(d，2H)，4.49(m，2H)，4.37(m，1H)，4.28(m，1H)，3.70(m，3H)，3.37(s，3H)，2.68(m，1H)，2.28(m，1H)，1.9-1.7(m，7H)，1.4-1.1(m，6H).13C-NMR(100 MHz，MeOH-d4)羰基和脒信号δ172.7，169.3，168.0，154.6.(iii)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH2OMe按照以上实施例1(iii)中所述步骤，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH2OMe×2TFA(487mg；0.69mmol，来自以上步骤(ii))和溴乙酸乙酯(138mg；O.83mmol)制备标题化合物，产生粗产物，后者通过采用THF∶二氯甲烷(3∶1)作为洗脱剂的快速色谱进行纯化。产量为0.13mg(34％)的白色粉末。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ8.46(bt，1H)，7.83(d，2H)，7.32(d，2H)，7.21(宽峰，1H)，4.92(dd，1H)，4.49(ABX-谱的AB部分，2H)，4.30(t，2H)，4.12(q，2H)，4.07(q，2H)，3.68(t，1H)，3.40(s，3H)，3.24(s，2H)，2.62(m，1H)，2.52(m，1H)，2.07(宽峰，1H)，1.97(bd，1H)，1.8-1.5(m，5H)，1.3-1.1(m，6H)，1.05-0.95(m，2H).13C-NMR(100 MHz，CDCl3)羰基和脒信号δ175.3，172.2，170.7，167.8，164.6.实施例8MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH2OMe按照以上实施例1(iii)中所述步骤，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH2OMe×2TFA(490mg；0.7mmol，参见以上实施例7(ii))和溴乙酸甲酯(128mg；0.84mmol)制备标题化合物，产生粗产物，后者通过采用THF∶二氯甲烷(3∶1)作为洗脱剂的快速色谱进行纯化。产量为155mg(41％)的白色粉末。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ8.44(t，1H)，7.83(d，2H)，7.31(d，2H)，4.92(dd，1H)，4.49(ABX-谱的AB部分，2H)，4.30(t，2H)，4.13(m，2H)，3.68(t，2H)，3.63(s，3H)，3.39(s，3H)，3.25(s，2H)，2.87(d，1H)，2.62(m，1H)，2.52(m，1H)，1.96(bd，1H)，1.8-1.5(m，6H)，1.3-1.1(m，5H)，1.00(q，2H).13C-NMR(100 MHz，CDCl3)羰基和脒信号δ175.2，172.6，170.7，167.8，164.5.实施例9EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu按照实施例1(i)所述步骤，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H(1.01g；2.1mmol)和氯甲酸正丁酯(0.32g；2.4mmol)制备副标题化合物。于周围温度下搅拌1.5h后，将该反应混合物浓缩，并用三份二氯甲烷萃取。然后合并的有机相用水洗涤，通过Na2SO4干燥并浓缩，产生1.0g(83％)白色粉末的副标题化合物。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ9.81-9.31(bs，1H)，8.36-8.20(m，1H)，7.35(d，2H)，7.84(d，2H)，6.78-6.43(bs，1H)，5.05-4.82(m，2H)，4.69-4.15(m，3H)，4.15-4.08(m，3H)，3.86-3.70(m，1H)，2.68-2.42(m，2H)，1.92-0.88(m，25H).13C-NMR(125 MHz，CDCl3)羰基和脒信号δ172.5，170.7，167.9，164.9，156.0.FAB-MS(m+1)＝572(m/z)(ii)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu×2HCl按照实施例4(ii)所述步骤，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu(2.5g；4.4mmol，来自以上步骤(i))制备副标题化合物，产生2.4g(100％)的白色粉末。1H-NMR(300 MHz，MeOH-d4)δ7.78-7.60(m，2H)，4.66-4.49(m，2H)，0.98(t，2H)，4.49-4.35(m，3H)，4.35-4.22(m，1H)，3.75(d，1H)，1.92-1.67(m，8H)，1.56-1.07(m，8H).其中一个质子信号被CD3OH信号所掩盖13C-NMR(100 MHz，MeOH-d4)羰基和脒信号δ172.7，169.3，167.9，154.7MS(m+1)＝472(m/z)(iii)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu按照实施例1(iii)中所述步骤，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu×2HCl(400mg；0.74mmol)和溴乙酸乙酯(147mg；0.88mmol)制备标题化合物。该产物通过用二氯甲烷和EtOH(梯度0.1％＝＞12.8％)作为洗脱剂的快速色谱进行纯化，产生290mg(70％)的白色固体。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ9.70-9.36(bs，1H)，8.47(t，1H)，7.81(d，2H)，7.32(d，2H)，7.07-6.73(bs，1H)，4.97-4.87(dd，1H)，4.62-4.35(m，2H)，4.20-3.98(m，6H)，3.27-3.12(m，2H)，2.84(s，1H)，2.70-2.40(m，2H)，2.03-0.85(m，22H)13C-NMR(75MHz，CDCl3)羰基和脒信号δ175.3，172.3，170.8，167.9，165.0FAB-MS(m+1)＝558(m/z)实施例10PrlC(O)CH2CH2CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(i)PrlC(O)CH2CH2CH2OH将γ-丁内酯(4.0g；46.5mmol)和吡咯烷(6.6g；92.8mmol)的混合物于室温下搅拌2.5h。真空浓缩该产物，产生14.5g(100％)的黄色油产物。1H-NMR(300MHz，MeOH-d4)δ3.58(t，2H)，3.50(t，2H)，3.40(t，2H)，2.42(t，2H)，2.06-1.75(m，6H)(ii)PrlC(O)CH2CH2CH2OOCCH2Br于0℃将溴乙酰溴(4.0ml；45.8mmol)滴加到含PrlC(O)CH2CH2CH2OH(7.2g；45.8mmol；来自以上步骤(i))和DMAP(5.6g，45.8mmol)的二氯甲烷的混合物中。于室温下搅拌1.5h后，加入另1份溴乙酰溴(1.0ml，11.4mmol)和DMAP(1.4g，11.4mmol)，反应回流1.5h。加入水，用二氯甲烷萃取3次。该有机相用Na2SO4干燥并浓缩，产生10.3g(81％)的黄色油产物。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ4.15(t，2H)，3.75(s，2H)，3.40-3.31(m，4H)，2.30(t，2H)，1.98-1.83(m，4H)，1.81-1.73(m，2H)(iii)PrlC(O)CH2CH2CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)按照实施例1(iii)中所述步骤，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(6g；10.4mmol)和PrlC(O)CH2CH2CH2OOCCH2Br(3.5g；12.4mmol；来自以上步骤(ii))制备标题化合物。该粗产物通过用庚烷∶EtOAc∶异丙醇(1∶2∶2)作为洗脱剂的快速色谱进行纯化，产生4.2g，然后后者采通过制备型RPLC，用含44％乙腈的0.1M NH4OAc作为洗脱剂进行纯化，产生2.64g(36％)的白色固体产物。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ9.80-9.22(b s，1H)，8.36(t，1H)，7.96-7.58(m，3H)，7.45(d，2H)，7.37-7.22(m，5H)，5.20(s，2H)，4.95-4.88(dd，1H)，4.72-4.29(m，2H)，4.15-4.04(m，2H)，4.04-3.88(m，2H)，3.40(t，2H)，3.34(t，2H)，3.28-3.17(m，2H)，2.85(d，1H)，2.67-2.48(m，1H)，2.23(t，2H)，2.14-0.93(m，18H).13C-NMR(125 MHz，CDCl3)羰基和脒信号δ175.3，172.4，170.9，170.4，168.2，164.6FAB-MS(m+1)＝703(m/z)实施例11ChNHC(O)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(i)ChNHC(O)CH2OH将环己胺(9.9g；99.8mmol)和2，5-二氧-1，4-二噁烷(3.0g；25.9mmol)的混合物于100℃搅拌2.5h。将该产物浓缩，产生8.1g(100％)的棕色固体产物。1H-NHR(500 MHz，MeOH-d4)δ3.92(s，2H)，3.75-3.65(m，1H)，1.90-1.58(m，5H)，1.43-1.07(m，5H)。其中两个质子被CD3OH信号信号所掩盖。13C-NHR(125 MHz，MeOH-d4)脒和羰基信号δ174.0，62.5，33.7，26.5，26.1，26.0。其中一个碳信号被CD3OH信号所掩盖。(ii)ChNHC(O)CH2OOCCH2Br将溴乙酰溴(4.0ml；45.8mmol)于0℃滴加到含ChNHC(O)CH2OH(8.0g；50.9mmol；来自以上步骤(i))和DMAP(6.2g；50.9mmol)的二氯甲烷(80ml)的混合物中。于室温下搅拌1.5h后，加入另一份溴乙酰溴(1.0ml，11.4mmol)和DMAP(1.4g，11.4mmol)，将该反应混合物回流1.5h。加入水，该水相用三份二氯甲烷萃取。该有机相用水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，产生10.3g(73％)的棕色固体产物。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ6.12-6.00(bs，1H)，4.62(s，2H)，3.90(s，2H)，3.84-3.76(m，1H)，1.95-1.86(m，2H)，1.75-1.65(m，2H)，1.65-1.56(m，1H)，1.43-1.29(m，2H)，1.24-1.10(m，3H).(iii)ChNHC(O)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z按照实施例1(iii)中所述的相似步骤，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(6g；10.4mmol)和ChNHC(O)CH2OOCCH2Br(3.5g；12.4mmol；来自以上步骤(ii))开始，制备标题化合物。该粗产物通过用庚烷∶EtOAc∶异丙醇(5∶2∶2)作为洗脱剂的快速色谱进行纯化，随后浓缩，然后通过制备型RPLC，采用含50％乙腈的0.1M NH4OAc作为洗脱剂。浓缩和冷冻干燥产生2.6g(36％)的白色固体产物。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ9.78-9.25(bs，1H)，7.90(t，1H)，7.78(d，2H)，7.44(d，2H)，7.38-7.24(m，5H)，6.66(t，1H)，5.20(s，2H)，4.90-4.83(dd，1H)，4.60-4.45(m，2H)，4.18-3.93(m，4H)，3.73-3.62(m，1H)，(d，1H)，3.23，3.44(AB，2H)，2.87，2.65-2.08(m，3H)，1.98-0.93(m，22H)13C-NMR(125 MHz，CDCl3)羰基和脒信号δ175.1，171.7，170.7，168.8，166.1，164.4FAB-MS(m+1)＝703(m/z)实施例12(nPr)2NC(O)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCC(CH3)3(i)(nPr)2NC(O)CH2OH将2，5-二氧-1，4-二噁烷(2.02g；17.4mmol)和二正丙胺(5ml；36.5mmol)的混合物于50℃加热1h，于90℃加热66h。加入甲苯，随后真空除去过量的二正丙胺。残留物通过采用含10％甲醇的二氯甲烷作为洗脱剂的快速色谱进行纯化，产生4.18g(66％)的所需化合物。1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ4.1(d，2H)，3.65(t，1H)，3.25-3.35(m，2H)，2.9-3.0(m，2H)，1.45-1.6(m，4H)，0.8-0.95(m，6H)(ii)(nPr)2NC(O)CH2OOCCH2Br将含(nPr)2NC(O)CH2OH(0.743g；4.7mmol；来自以上步骤(i))、DCC(0.951g；4.6mmol)和溴乙酸(0.704g；5.1mmol)的二氯甲烷(15ml)的混合物于室温下搅拌1.5h。通过过滤除去沉淀，并从滤液中真空除去该溶剂。该残留物的Kugelrohr蒸馏产生0.66g(50％)的所需化合物。1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ4.8(s，2H)，4.0(s，2H)，3.2-3.3(m，2H)，3.05-3.15(m，2H)，1.5-1.7(m，4H)，0.8-1.0(dt，6H)(iii)新戊酸基甲基4-硝基苯基碳酸酯将新戊酸银(7.5g；25mmol)和碘甲基4-硝基苯基碳酸酯(Alexander等，J.Med.Chem.，(1988)31，318；7.99g；25mmol)的混合物在苯(50ml)中回流2h。真空除去苯，将该残留物溶于甲苯中。通过hyflo过滤并通过采用甲苯作为洗脱剂的快速色谱进行纯化，提供4.00g(54％)副标题化合物。1H NMR(300 MHz；CDCl3)δ8.25(d，2H)，7.40(d，2H)，5.85(s，2H)，1.2(s，2H)13C NMR(75 MHz，CDCl3)羰基和脒信号δ176.77，155.06(iv)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCC(CH3)3于室温下，将含新戊酰基甲基4-硝基苯基碳酸酯(1.18g；4mmol；来自以上步骤(iii)的二氯甲烷(20ml)溶液加入含Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H(1.88g；4mmol)和三乙胺(0.66ml；4.75mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液中。1h后，用EtOAc替代二氯甲烷，该混合物通过采用EtOAc作为洗脱剂的快速色谱进行纯化，产生1.27g(50％)的副标题化合物。1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ9.5(bs，1H)，8.25(t，1H)，7.8(d，2H)，7.3(d，2H)，7.0(bs，1H)，5.0-4.8(m，2H)，4.65-4.5(m，1H)，4.5-4.3(m，2H)，4.2-4.05(m，1H)，3.75(t，1H)，2.7-2.4(m，2H)，1.9-1.45(m，5H)，1.45-0.8(m，24H)(v)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCC(CH3)3将Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCC(CH3)3(327mg；0,52mmol；来自以上步骤(iv))溶于二氯甲烷(5ml)和TFA(1.2ml)的混合物中。2h后，将该反应混合物真空浓缩，加入乙腈，再真空除去该溶剂，产生副标题粗产物，后者不用进一步纯化而用于下一步骤。(vi)(nPr)2NC(O)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCC(CH3)3将来自以上步骤(v)的残留物与含(nPr)2NC(O)CH2OOCCH2Br(150mg；0.53mmol；来自以上步骤(ii))和K2CO3(480mg；3.5mmol)在THF(5ml)中混合，并于40℃加热3h。将该反应混合物过滤并浓缩为粗产物，后者通过制备型RPLC纯化，产生78mg(21％)的标题产物。1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ9.3-9.6(bs，1H)，8.5(m，1H)，7.95-8.15(bs，1H)，7.85-7.95(d，2H)，7.2-7.3(d，2H)，5.8(s，2H)，4.8-4.9(dd，1H)，4.5-4.7(m，3H)，4.0-4.4(m，3H)，2.8-3.4(m，5H)，2.2-2.7(m，3H)，1.75-1.3(m，9H)，1.3-1.0(m，14H)，1.0-0.7(m，7H).13C NMR(75 MHz，CDCl3)羰基和脒信号δ177.24，175.30，171.85，170.79，168.78，165.82，163.14.实施例13EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCC(CH3)3与以上实施例12(vi)中所述步骤相似，由粗品Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCC(CH3)3(0.41g；0.65mmol；来自以上实施例12(iv))，采用乙腈(10ml)作为溶剂，制备标题化合物。于室温下过夜搅拌后，真空除去该溶剂，将该残留物在EtOAc和水之间分配。水相用EtOAc萃取3次，将合并的有机相干燥(Na2SO4)，真空除去该溶剂。将该残留物经过采用二氯甲烷/甲醇作为洗脱剂的快速色谱。从冰醋酸中冷冻干燥，产生84mg(21％)的标题化合物。1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ9.9(bs，1H)，8.5(t，1H)，7.35(d，2H)，5.85(s，2H)，5.90(dd，2H)，4.6-4.35(m，2H)，4.15-4.0(m，4)，3.2(s，2H)，2.85(d，1H)，2.7-2.45(m，2)，2.0-1.9(m，2H)，1.8-1.45(m，5H)，1.3-0.9(m，18H).13C NMR(75 MHz，CDCl3)羰基和脒信号δ177.23，175.48，172.29，170.80，168.85，163.14.实施例14EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH3)OOCCH3(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH3)OOCCH3于室温下，将含Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H(6.38g；13.5mmol)、1-乙酸基乙基4-硝基苯基碳酸酯(Alexander等，J.Med.Chem.，(1988)31，318)(3.05g；12mmol)和三乙胺(1.95ml；14mmol)的二氯甲烷(40ml)溶液搅拌16h，然后加入EtOAc。将产生的溶液稍微浓缩，并用Na2CO3水溶液(10％)洗涤，将其浓缩为粗产物，后者通过采用EtOAc作为洗脱剂的快速色谱进行纯化，产生5.59g(77％)的副标题化合物。1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ9.5(bs，1H)，8.25(t，1H)，7.85(d，2H)，7.35(d，2H)，6.95(q，1H)，6.7(bs，1H)，5.0-4.85(m，2H)，4.65-4.5(m，1H)，4.5-4.25(m，2H)，4.2-4.05(m，1H)3.75(t，1H)，2.65-2.45(m，2H)2.05(s，3H)，1.9-1.45(m，11H)，1.45-0.8(m，12H).13C NMR(75 MHz，CDCl3)羰基和脒信号δ172.61，170.80，169.54，168.91，162.50，156.02.(ii)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH3)OOCCH3按照以上实施例12(v)中所述步骤，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH3)OOCCH3(2.21g；3.68mmol；来自以上步骤(i))制备副标题粗产物。(iii)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH3)OOCCH3将来自以上步骤(ii)的粗品H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH3)OOCCH3溶于二氯甲烷(150ml)中。该混合物用10％Na2CO3溶液洗涤，该有机相用K2CO3干燥并过滤。将含K2CO3(756mg；5.5mmol)和(O-三氟甲磺酰基)-羟乙酸乙酯(790mg；3.3mmol)的二氯甲烷(5ml)加入该产生的溶液中。该反应混合物于室温下搅拌5-10分钟，然后真空浓缩。将该残留物溶于EtOAc中，产生的混合物通过C盐过滤。将滤液经过采用EtOAc作为洗脱剂的快速色谱，然后通过HPLC，产生475mg(22％)的标题化合物。1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ9.5(bs，1H)，8.3(t，1H)，7.7(d，2H)，7.2(d，2H)，6.85(q，1H)，4.8(t，1H)，4.45-4.25(m，2H)，4.1-3.85(m，4H)，3.1(s，2H)，2.75(s，1H)，2.5-2.3(m，2H)，1.95(s，3H)，1.9-1.8(m，1H)，1.7-1.25(m，8H)，1.25-1.75(m，8H).13C NMR(75.5 MHz，CDCl3)羰基和脒信号δ175.26，172.34，170.81，169.49，168.80，162.43.实施例15MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh于20℃在45分钟内，将溶于THF(10ml)的过氧化二苯甲酰(556mg；2.3mmol)滴加到含Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H(1.0g；2.1mmol)和Na2HPO4(18.7g；105mmol)的THF(45ml)溶液中。于20℃搅拌24h后，将该反应混合物浓缩，将产生的粗产物经过制备型RPLC。产生124mg(10％)白色固体的副标题化合物。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ8.26(m，1H)，8.09(m，2H)，7.72(m，2H)，7.59(m，1H)，7.48(m，2H)，7.36(d，2H)，5.13(s，2H)，4.87-4.98(m，2H)，4.54-4.61(m，1H)，4.33-4.47(m，2H)，4.13-4.19(m，1H)，3.81(t，1H)，2.53-2.63(m，2H)，1.73-1.86(m，3H)，1.66-1.72(m，2H)，1.36(s，9H)，0.968-1.28(m，6H).13C-NMR(100 MHz，CDCl3)羰基和脒信号δ172.7，170.6，163.9，157.0，155.9.LC-MSm/z 592(M+H+)；m/z 614(M+Na+).(ii)H-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh于20℃将TFA(6ml)加入含Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh(600mg；1.01mmol；来自以上步骤(i))的二氯甲烷(18ml)溶液中。搅拌14h后，将该反应混合物浓缩，将产生的粗产物在EtOAc0.1M NaOH之间分配。进行相分离，将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发。产量480mg(96％)白色固体。1H-NMR(400 MHz，MeOH-d4)δ8.18(m，2H)，7.77(m，2H)，7.64(m，1H)，7.52(m，2H)，7.43(d，2H)，4.75-4.81(m，1H)，4.50(s，2H)，4.18-4.34(m，2H)，3.12(d，1H)，2.57-2.68(m，1H)，2.23-2.33(m，1H)，1.88-1.96(m，1H)，1.73-1.84(m，2H)，1.59-1.71(m，2H)，1.45-1.57(m，1H)，0.80-1.34(m，5H)LC-MSm/z 492(M+H+)；m/z 514(M+Na+)(iii)MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh于20℃将溴乙酸甲酯(177mg；1.16mmol)加入含H-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh(480mg；0.97mmol；来自以上步骤(ii))、K2CO3(270mg；2mmol)的乙腈(5ml)溶液中。该反应于20℃搅拌4h。将该反应混合物过滤并浓缩，产生粗产物，后者通过制备型RPLC纯化，产生269mg(49％)白色固体的标题化合物。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ8.43(m，1H，NH)，8.09(m，2H)，7.69(m，2H)，7.59(m，1H)，7.47(m，2H)，7.34(m，2H)，5.27(s，2H)，4.93(dd，1H)，4.59(dd，1H)，4.40(dd，1H)，4.12(m，2H)，3.65(s，3H)，2.87(d，1H)，2.72-2.63(m，1H)，2.55-2.48(m，1H)，1.96(m，1H)，1.74(m，2H)，1.67(d，1H)，1.59(d，1H)，1.56-1.50(m，1H)，1.29-1.08(m，4H)，1.04-0.94(m，1H)13C-NMR(100 MHz，CDCl3)羰基和脒信号δ175.1，172.5，170.6，164.0，157.1LC-MSm/z 564(M+H+)实施例16MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH于20℃下，将KOMe(1.6ml；0.29M；0.46mmol)加入含MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OC(O)Ph(260mg；0.46mmol；参见以上实施例15(iii))的THF(4.6ml)溶液中。搅拌15分钟后，将该混合物浓缩并经过制备型RPLC。产生109mg(52％)白色固体的标题化合物。1H-NMR(500 MHz，MeOH-d4)δ7.59(d，2H)，7.34(d，2H)，4.83(s，2H)，4.82-4.76(m，1H)，4.48(d，1H)，4.33(d，1H)，4.15-4.30(m，2H)，3.64(s，3H)，3.04(d，1H)，2.57(m，1H)，2.26(m，1H)，1.95(m，1H)，1.75(m，2H)，1.58-1.70(m，2H)，1.53(m，1H)，1.31-1.10(m，4H)，1.04(m，1H)13C-NMR(100 MHz，MeOH-d4)羰基和脒信号δ175.9，174.3，172.7，155.2LC-MSm/z 460(M+H+)，m/z 482(M+Na+)实施例17EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH向EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-C(O)OCH(CH3)OOCCH3(184mg；0.31mmol；参见以上实施例14(iii))溶液中加入含盐酸羟胺(120ml；1.72mmol)和三乙胺(0.8ml；5.7mmol)的EtOH(95％；4.0ml)，并将该混合物于室温下搅拌4天。将该混合物浓缩，该粗产物经过制备型RPLC。产生85mg(58％)的标题化合物。1H-NMR(300 MHz，CD3OD)δ7.6(d，2H)，7.35(d，2H)，4.75-4.85(m，1H)，4.4-4.55(m，2H)，4.0-4.35(m，4H)，3.35(d，2H)，3.05(d，1H)，2.5-2.65(m，1H)，2.2-2.35(m，1H)，1.9-2.05(m，1H)，1.4-1.85(m，5H)，0.85-1.35(m，8H)13C-NMR(75.5 MHz，CD3OD)羰基和脒信号δ175.97，173.91，172.72，155.23LC-MS(m+1)＝474(m/z)实施例18BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH将BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(1.0g；1.52mmol)加入含盐酸羟胺(320ml；4.59mmol)和三乙胺(1.7ml；12.24mmol)的EtOH溶液中。将该反应混合物搅拌40h，然后浓缩。该粗产物通过制备型RPLC，采用含50％乙腈的0.1M NH4OAc作为洗脱剂进行纯化，产生0.34g(42％)的标题化合物。LC-MS(m+1)＝536(m/z)实施例19nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z与实施例1(iii)中所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z×2HCl(700mg；1.2mmol)和溴乙酸正丙酯(268mg；1.45mmol)制备标题化合物。产量为259mg(35％)。FAB-MS(m+1)＝606(m/z)实施例20nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH与实施例18中所述步骤类似，由nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(182mg；0.3mmol；参见以上实施例19)制备标题化合物。该粗产物通过制备型RPLC，采用含40％乙腈的0.1M NH4OAc作为洗脱剂进行纯化，产生74mg(51％)的所需化合物。LC-MS(m+1)＝488(m/z)实施例21iPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH与实施例18中所述步骤类似，由iPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(590mg；0.7mmol；参见以下实施例39)制备标题化合物。产量为110mg(32％)。LC-MS；(m+1)＝488(m/z)实施例22tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH与实施例18中所述步骤类似，由tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(738mg；1.2mmol；参见以下实施例37)制备标题化合物。产量为290mg(48％)。LC-MS(m+1)＝502(m/z)实施例23(nPr)2NCOCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH(i)HOOCCH2-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-O-Boc将含HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH(670mg；1.5mmol；参见以下实施例28)、(Boc)2O(654mg；3mmol)和DMAP(92mg；0.75mmol)的THF∶水(10∶1)的溶液于室温下搅拌2h。将该反应混合物浓缩，并通过制备型RPLC纯化。冷冻干燥产生112mg(12％)白色固体的副标题化合物。LC-MS(m-1)＝643(m/z)(ii)(nPr)2NCOCH2OOCCH2-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-O-Boc将含HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-O-Boc(100mg；0.15mmol；参见以上步骤(i))、(nPr)2NCOCH2OH(27mg；0.17mmol；参见以上实施例12(i))、EDC(40mg；0.21mmol)和DMAP(10mg；0.075mmol)的乙腈(5ml)溶液于室温下搅拌4天。将该反应混合物浓缩，通过制备型RPLC纯化并冷冻干燥，产生21mg(18％)的副标题化合物。LC-MS(m-1)＝787(m/z)(iii)(nPr)2NCOCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH将含(nPr)2NCOCH2-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-O-Boc(20mg；0.025mmol)的TFA∶二氯甲烷(1∶1)溶液于室温下搅拌5分钟。将该反应混合物浓缩并从乙腈和水中冷冻干燥，产生5mg(34％)的标题化合物。LC-MS(m+1)＝587(m/z)实施例24ChNHCOCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH与实施例18中所述步骤类似，由ChNHCOCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(118mg；0.17mmol；参见以上实施例11(ii))制备标题化合物。产量为1.8mg。LC-MS(m+1)＝585(m/z)实施例25MeNHCOCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH与实施例18中所述步骤类似，由MeNHCOCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(81mg；0.12mmol；参见以下实施例36)制备标题化合物。产量为10mg(16％)。LC-MS(m+1)＝517(m/z)实施例26EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc(i)H-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc与以下实施例27(步骤(i)、(ii)和(iii))中所述方法类似，用乙酸酐代替丙酸酐，制备副标题化合物。LC-MS(m+1)＝430(m/z)(ii)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc与以上实施例1(iii)中所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc(370mg；0.6mmol)和溴乙酸乙酯(105mg；0.63mmol)制备标题化合物。产量为67mg(22％)。LC-MS(m+1)＝516(m/z)实施例27EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OC(O)Et(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OH将Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(1.0g；1.52mmol)加入含盐酸羟胺和三乙胺的EtOH溶液中。将该反应混合物于室温下搅拌40小时，然后将其浓缩。该粗产物通过制备型RPLC纯化。LC-MS(m+1)＝488(m/z)(ii)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OC(O)Et将含Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OH(500mg；0.91mmol；来自以上步骤(i))和丙酸酐(3.5ml)的溶液于室温下搅拌45分钟，然后浓缩。该粗产物通过制备型RPLC采用含50％乙腈的0.1M NH4OAc作为洗脱剂进行纯化，产生266mg(54％)的副标题化合物。LC-MS(m+1)＝544(m/z)(iii)H-(R)Cgl-Aze-Pab-OC(O)Et与实施例1(ii)中所述步骤类似，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OC(O)Et(238mg；0.44mmol；来自以上步骤(ii))制备副标题化合物。产量为290mg(100％)。LC-MS(m+1)＝444(m/z)(iv)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OC(O)Et于0℃将EtOOCCH2OSO2CF3(105mg；0.45mmol，由含triflicanhydride和羟乙酸乙酯制备)滴加到H-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCEt(300mg；0.45mmol；来自以上步骤(iii))和K2CO3(308mg；2.23mmol)的二氯甲烷溶(6ml)液中。于室温下将该反应混合物搅拌1h后，用水、柠檬酸和水洗涤该反应混合物，将其干燥(Na2SO4)并浓缩。该粗产物通过制备型RPLC，采用含45％乙腈的0.1M NH4OAc作为洗脱剂进行纯化，产生63mg(27％)的标题化合物。LC-MS(m+1)＝530(m/z)实施例28HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH(i)tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh与实施例1(iii)中所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh(250mg；0.5mmol；参见以上实施例15(ii))和溴乙酸叔丁酯(119mg；0.6mmol)制备副标题化合物。产量为211mg(69％)。LC-MS(m+1)＝606(m/z)(iii)HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh与实施例1(ii)中所述步骤类似，由tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh(233mg；0.3mmol；来自以上步骤(i))制备副标题化合物。产量为65mg(37％)。LC-MS(m+1)＝550(m/z)(iii)HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pa-OH将含HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh(60mg；0.1mmol；来自以上步骤(ii))和KOMe(0.2M；0.2mmol)的THF(10ml)和甲醇(1.5ml)的溶液于室温下搅拌5分钟。将该反应混合物浓缩并从水和乙腈中冷冻干燥，产生28mg(63％)标题化合物。LC-MS(m+1)＝446(m/z)实施例29HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-O-顺式十八基(i)tBuOOCCH2-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-Z将含tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(1.7g；2.8mmol；参见以下实施例37)、(Boc)2O(672mg；3.08mmol)和DMAP(68mg；0.56mmol)的THF(30ml)溶液于室温下搅拌24h。于5℃加入额外的(Boc)2O(305mg；1.4mmol)。再过24h后，将该反应混合物浓缩并通过制备型RPLC纯化，产生587mg(30％)的所需化合物。EC-MS(m+1)＝720(m/z)(ii)tBuOOCCH2-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-OH与实施例18中所述步骤类似，由tBuOOCCH2-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-Z(580mg；0.8mmol；来自以上步骤(i))制备副标题化合物。产量为341mg(71％)。EC-MS(m+1)＝602(m/z)(iii)tBuOOCCH2-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-O-顺式十八基将含tBuOOCCH2-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-OH(340mg；0.56mmol；来自以上步骤(ii))、顺式十八基氯(170mg；0.56mmol)和三乙胺(62mg；0.61mmol)的二氯甲烷溶液搅拌5分钟。将该反应混合物浓缩并通过制备型RPLC纯化，产生326mg(67％)副标题化合物。EC-MS(m+1)＝867(m/z)(iv)HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-O-顺式十八基与实施例1(ii)中所述步骤类似，由tBuOOCCH2-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-O-顺式十八基(223mg；0.25mmol；来自以上步骤(iii))制备标题化合物。LC-MS(m+1)＝710(m/z)实施例30环辛基-OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(i)溴乙酸环辛酯将环辛醇(1.3g；10mmol)和DMAP(0.3g)溶于二氯甲烷中，然后加入溴乙酰氯(1ml；12mmol)。搅拌18h后，该反应混合物用Na2CO3水溶液(2M)和HCl(1M)洗涤、干燥、浓缩并采用石油醚∶二氯甲烷(50∶50)通过快速色谱纯化，产生1.8g(72％)副标题化合物。(ii)环辛基-OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z与实施例1(iii)中所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z×2HCl(703mg；1.2mmol)和溴乙酸环辛酯(363mg；1.46mmol；来自以上步骤(i))制备标题化合物。产量为379mg(46％)。FAB-MS(m+1)＝674(m/z)实施例31tBuCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z与实施例1(iii)中所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z×2HCl(2.5g；4.3mmol)和溴乙酸叔丁基甲酯(1.08g；5.2mmol)制备标题化合物。产量为1.87g(69％)。FAB-MS(m+1)＝634(m/z)实施例32(2-Me)BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(i)溴乙酸甲基苄酯与实施例30(i)中所述步骤类似，由2-甲基苄醇(5g；41mmol)和溴乙酰氯(12.6g；80mmol)制备副标题化合物。产量为8.2g(82％)。(ii)(2-Me)BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z与实施例1(iii)中所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z×2HCl(580mg；1mmol)和溴乙酸2-甲基苄酯(290mg；1.2mmol；来自以上步骤(i))制备标题化合物。产量为30mg(4.5％)。LC-MS(m+1)＝668(m/z)实施例33ChCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z将含BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(1.41g；1.7mmol)和环已基甲基醇(6ml)的三乙胺(474μl)和二氯甲烷(3ml)的溶液回流4天。处理该反应混合物，产生粗产物，后者通过采用二氯甲烷∶甲醇(95∶5)作为洗脱剂的快速色谱进行纯化，产生801mg(71％)的标题化合物。FAB-MS(m+1)＝660(m/z)实施例34ChOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(i)溴乙酸环己酯与实施例32(i)中所述步骤类似，由环己醇(1g；10mmol)和溴乙酰氯(1ml；12mmol)制备副标题化合物。(ii)ChOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z与实施例1(iii)中所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z×2HCl(2.5g；4.32mmol)和溴乙酸环己酯(1.5g；5.2mmol)制备标题化合物。产量为1.7g(60％)。FAB-MS(m+1)＝646(m/z)实施例35PhC(Me)2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(i)溴乙酸2-苯基-2-丙酯与实施例30(i)中所述步骤类似，由2-苯基-2-丙醇(3g；22mmol)和溴乙酰氯(4.16g，26mmol)制备副标题化合物。产量为1.2g(44％)。(ii)PhC(Me)2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z与实施例1(iii)中所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z×2HCl(1.2g；2.2mmol)和溴乙酸2-苯基-2-丙酯(640mg；2.5mmol；来自以上步骤(i))制备标题化合物。产量为1.3g(86％)。1H-NMR(500 MHz；CDCl3)δ9.3(br s，1H)，8.35(t，1H)，7.75(d，2H)，7.45(d，2H)，7.30-7.05(m，10H or 11H)，5.15(s，2H)，4.78(t，1H)，4.40-4.30(ABX-谱的AB部分，2H)，3.95(q，1H)，3.74(q，1H)3.27-3.19(AB-谱，2H)，2.72(d，1H)，2.43(q，2H)，1.93(br d，1H)，1.75-1.60(m，9H or 10H)，1.54(d，1H)，1.49-1.40(m，1H)，1.25-1.0(m，4H)，0.92(q，1H)实施例36MeNHCOCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z与实施例1(iii)中所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z×2HCl(1.0g；1.7mmol)和MeNHCOCH2OOCCH2Br(440mg；2mmol；与以上实施例11(步骤(i)、(ii)和(iii))中所述步骤类似，采用甲胺替代环己胺进行制备)制备标题化合物。产量为380mg(35％)。FAB-MS(m+1)＝635(m/z)实施例37tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z与实施例1(iii)中所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z×2HCl(500mg；1.0mmol)和溴乙酸叔丁酯(231mg；1.2mmol)制备标题化合物。产量为420mg(69％)。LC-MS(m+1)＝620(m/z)实施例38(Me)2CHC(Me)2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z与实施例1(iii)中所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(787mg；1.4mmol)和溴乙酸2，3-二甲基-2-丁酯(364mg；1.63mmol)制备标题化合物。产量为590mg(67％)。FAB-MS(m+1)＝648(m/z)实施例39iPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z与实施例1(iii)中所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(700mg；1.2mmol)和溴乙酸异丙酯(262mg；1.5mmol)制备标题化合物。产量为225mg(31％)。FAB-MS(m+1)＝606(m/z)实施例40BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)与实施例1(i)所述步骤类似，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H和氯甲酸4-甲氧基苯酯制备副标题化合物。FAB-MS(m+1)＝622(m/z)(ii)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)×2HCl与实施例4(ii)中所述步骤类似，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)(来自以上步骤(i))制备副标题化合物。(iii)BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)与实施例1(iii)所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)×2HCl(85mg；0.16mmol；来自以上步骤(iii))和溴乙酸苄酯(90mg；0.2mmol)制备标题化合物。产量为60mg(56％)。FAB-MS(m+1)＝670(m/z)实施例41ChCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)与实施例1(iii)所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)(554mg；0.64mmol；参见以上实施例40(ii))和溴乙酸环己基甲酯(165mg；0.7mmol)制备标题化合物。产量为34mg(8％)。FAB-MS(m+1)＝676(m/z)实施例42(2-Me)BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)与实施例1(iii)所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)(522mg；1mmol；参见以上实施例40(ii))和溴乙酸2-(甲基)苄酯(365mg；1.5mmol)制备标题化合物。产量为158mg(23％)。LC-MS(m+1)＝684(m/z)实施例43EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)与实施例1(i)所述步骤类似，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab(1.96g；4.56mmol)和4-甲苯基-氯甲酸酯(850mg；4.99mmol)制备副标题化合物。产量为1.39g(55％)。FAB-MS(m+1)＝606(m/z)(ii)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)与实施例4(ii)中所述步骤类似，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)(388mg；0.64mmol；来自以上步骤(i))制备副标题化合物。产量为293mg(91％)。FAB-MS(m+1)＝506(m/z)(iii)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)与实施例1(iii)所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)(288mg；0.6mmol；来自以上步骤(ii))和溴乙酸乙酯(114mg；0.7mmol)制备标题化合物。产量为81mg(24％)。FAB-MS(m+1)＝592(m/z)实施例44BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)与实施例1(iii)所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)(272mg，；0.54mmol；参见以上实施例43(ii))和溴乙酸苄酯(147mg；0.6mmol)制备标题化合物。产量为107mg(31％)。FAB-MS(m+1)＝654(m/z)实施例45BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu与实施例1(iii)所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu×2HCl(400mg；0.74mmol；参见以上实施例9(ii))和溴乙酸苄酯(210mg；0.88mmol)制备标题化合物。产量为220mg(48％)。FAB-MS(m+1)＝620(m/z)实施例46iPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2与实施例1(iii)所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2×2TFA(456mg；0.67mmol；参见以上实施例1(ii))和溴乙酸异丙酯(145mg；0.8mmol)制备标题化合物。产量为294mg(79％)。FAB-MS(m+1)＝556(m/z)实施例47EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-iBu(i)Boc-Pab-COO-iBu于0℃将氯甲酸异丁酯(270mg；2.2mmol)加入含Boc-Pab-H(500mg；2.0mmol；由Pab-Z和(Boc)2O制备(形成Boc-Pab-Z)，然后在Pd/C上氢化制得)和三乙胺(400mg；4.0mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液中。搅拌5h后，加入水。将有机相干燥(Na2SO4)并浓缩，产生530mg(76％)的副标题化合物。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ9.5(bs，1H)，7.82(d，2H)，7.31(d，2H)，6.6(bs，1H)，5.0(bs，1H)，4.33(bd，2H)，3.93(d，2H)，2.04(m，1H)，1.45(s，9H)，0.97(d，6H)(ii)H-Pab-COO-iBu×2HCl与实施例4(ii)中所述步骤类似，由Boc-Pab-COO-iBu(520mg；1.5mmol；来自以上步骤(i))制备副标题化合物。产量为430mg(88％)。1H-NMR(500 MHz，MeOD)δ7.89(d，2H)，7.75(d，2H)，4.30(s，2H)，4.17(d，2H)，2.11-2.05(m，1H)，1.02(d，6H)(iii)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-iBu将EDC(270mg；1.4mmol)加入含Boc-(R)Cgl-Aze-OH(480mg；1.4mmol)、H-Pab-COO-iBu×2HCl(430mg；1.3mmol；来自以上步骤(ii))和DMAP(650mg；5.3mmol)的乙腈(20ml)的溶液中。于室温下搅拌3天后，将该反应混合物浓缩，然后溶于水和EtOAc中。该有机相用NaHCO3(aq)洗涤并干燥(Na2SO4)，浓缩并通过采用EtOAc作为洗脱剂的快速色谱进行纯化，产生510mg(52％)副标题化合物。(iv)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-iBu×2HCl与实施例4(ii)中所述步骤类似，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-iBu(500mg；0.88mmol；来自以上步骤(iii))制备副标题化合物。产量为360mg(87％)。(v)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-iBu与实施例1(iii)所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-iBu×2HCl(290mg；0.53mmol；来自以上步骤(iv))和溴乙酸乙酯(110mg；0.64mmol)制备标题化合物。产量为140mg(47％)。FAB-MS(m+1)＝558(m/z)实施例48BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr与实施例1(iii)所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr×2TFA(902mg；1.3mmol；参见以上实施例5(ii))和溴乙酸苄酯(362mg；1.6mmol)制备标题化合物。产量为199mg(25％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3)δ8.43(bs，1H)，7.78(d，2H)，7.38-7.27(m，7H)，5.05(s，2H)，4.90(dd，1H)，4.56-4.39(ABX-谱的AB部分2H)，4.12-4.03(m，3H)，3.98-3.91(q，1H)，3.33-3.22(AB-谱2H)，2.85(d，1H)，2.65-0.94(m，19H)实施例49EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCh(i)EtSCOOCH2OOCCh于0℃将NaOH(9.1ml；10M；68mmol)加入含硫酸氢四丁基铵(15.6g；45.6mmol)和环己基甲酸(5.85mg；46mmol)的二氯甲烷溶液中。搅拌5分钟后，将该反应混合物过滤，用二氯甲烷洗涤，溶于甲苯中，将其浓缩，并溶于THF中，产生[Bu4N]+[OOCCh]-。将EtSCOOCH2Cl(4g；25.9mmol；参见Folkmann和Lund，J.Synthesis，(1990)，1159)于室温下加入含[Bu4N]+[OOCCh]-的THF溶液中。于室温下搅拌12h后，将该反应混合物浓缩，并通过快速色谱纯化，产生2.57g(40％)副标题化合物。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)特征峰δ5.80(s，2H，O-CH2-O)，2.85(q，2H，CH2-S)(ii)ClCOOCH2OOCCh将SO2Cl2(31.8g；23.6mmol)于0℃加入EtSCOOCH2OOCCh(2.9g；11.8mmol；来自以上步骤(i))中。搅拌30分钟后，将该反应混合物浓缩，产生1.82g(70％)的所需化合物。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)特征峰δ5.82(s，2H，O-CH2-O)(iii)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCh与实施例1(i)类似，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H(750mg；1.59mmol)和ClCOOCH2OOCCh(460mg；2.1mmol；来自以上步骤(ii))制备副标题化合物。该粗产物通过制备型RPLC纯化。产量为355mg(9％)。FAB-MS(m+1)＝656(m/z)(iv)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCh×2TFA与实施例1(ii)中所述步骤类似，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCh(来自以上步骤(iii))制备副标题化合物。(v)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCh与实施例1(iii)所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCh×2TFA(193mg；0.35mmol；来自以上步骤(iv))和三氟乙酸乙酯(83mg；0.35mmol)制备标题化合物。产量为87mg(39％)。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ8.48(t br，1H)，7.83(d，2H)，7.37(d，2H)，5.86(s，2H)，4.95(dd，1H)，4.15-4.39(ABX-谱的AB部分2H)，4.18-4.05(m，5H)，3.26-3.17(AB＝谱，2H)，2.87(d，1H)，2.75-0.95(m，29H)实施例50EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCH2Ch与实施例49所述步骤类似，由环己基乙酸代替环己基甲酸开始，制备标题化合物。产量为74mg(17％)。FAB-MS(m+1)＝656(m/z)实施例51EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(Me)OOCPh与实施例49所述步骤类似，由EtSCOOCH(CH3)Cl(采用Folkmann等，J.Synthesis，(1990)，1159所述步骤，由ClCOCH(CH3)Cl和EtSH制备)代替EtSCOOCH2Cl开始，制备标题化合物。产量为70mg(23％)。FAB-MS(m+1)＝650(m/z)实施例52EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCPh与实施例49所述步骤类似，用苯甲酸代替环己基甲酸制备标题化合物。产量为50mg(39％)。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ9.73-9.25(s br，1H)，8.45(t，1H)，8.05(d，2H)，7.83(d，2H)，7.60-7.10(m，6H)，6.10(s，2H)，4.96-4.84(dd，1H)，4.62-4.30(ABX，2H)，4.20-3.93(m，4H)，3.25(s，2H)，2.84(d，1H)，2.73-2.41(m，2H)，2.41-0.87(m，15H)13C-NMR(300 MHz，CDCl3，羰基和脒信号)δ163.1，165.3，169.0，170.8，172.3，175.5实施例53BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(Me)OAc与实施例1(iii)所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH3)OC(O)CH3(108mg；0.21mmol；参见以上实施例14(ii))和溴乙酸苄酯(36μl；0.23mmol)制备标题化合物。产量为41mg(30％)。FAB-MS(m+1)＝650(m/z)实施例54EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OAc(i)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OAc×2TFA与实施例14(步骤(i)和(ii))中所述步骤类似，采用乙酸基甲基4-硝基苯基碳酸酯(与实施例12(iii)中所述步骤类似，采用乙酸银代替新戊酸银制备)制备副标题化合物。处理产生的副标题化合物不用进一步纯化而用于下一步骤中。(ii)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OAc与实施例1(iii)所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OAc×2TFA(0.83mmol；来自以上步骤(i))和溴乙酸乙酯(2.2mmol)制备标题化合物。产量为286mg。FAB-MS(m+1)＝574(m/z)实施例55tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OAc与实施例1(iii)所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OAc×2TFA(0.313mmol；参见以上实施例54(i))和溴乙酸叔丁酯(73mg；0.376mmol)制备标题化合物。产量为156mg(83％)。FAB-MS(m+1)＝602(m/z)实施例56BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOC-tBu与实施例1(iii)所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOC-tBu(379mg；0.71mmol；参见以上实施例12(v))和溴乙酸苄酯(135μl；0.85mmol)制备标题化合物。产量为146mg(30％)。FAB-MS(m+1)＝678(m/z)实施例57EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CCl3(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CCl3与实施例1(i)中所述步骤类似，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H(1.0g；2.12mmol)、2M NaOH(11.7mmol)和氯甲酸三氯乙酯(494mg；2.33mmol)制备副标题化合物。产量为1.08g(79％)。(ii)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CCl3与实施例1(ii)所述步骤类似，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CCl3(1.04g；1.607mmol；来自以上步骤(i))制备副标题化合物。产量为1.43g(99％)。1H-NMR(500MHz；CD3OD)δ7.79(d，2H)，7.61(d，2H)，5.10(s，2H)，4.87-4.81(m，2H)，4.63-4.52(q，2H)，4.41-4.34(m，1H)，4.30-4.24(m，1H)，3.72(d，1H)，2.72-2.63(m，1H)，2.32-2.25(m，1H)，1.88-1.10(m，14H)(iii)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CCl3与实施例1(ii)所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CCl3(400mg；0.52mmol；来自以上步骤(iii))和溴乙酸乙酯(95mg；0.57mmol)制备标题化合物。产量为8mg(23％)。1H-NMR(500MHz；CDCl3)δ8.47(bt，1H)，7.83(d，2H)，7.48(bs，1H)，7.31(d，2H)，4.92(dd，1H)，4.85(s，2H)，4.58-4.39(ABX-谱的AB部分，2H)，4.16-4.06(m，4H)，3.24(s，2H)，4.87(d，1H)，2.65-2.59(m，1H)，2.56-2.48(m，1H)，2.10-0.95(m，16H)实施例58MeOOC-C(＝CEt)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(i)MeOOC-C(＝CH)C(OH)Et将丙醛(10.1g；0.174mol)滴加到含丙烯酸甲酯(10g；0.116mol)和1，4-二氮杂双环[2，2，2]辛烷(1.3g；0.0116mol)的溶液中。将该反应混合物于室温下搅拌14天。加入乙酸乙酯(150ml)。该有机相用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)、过滤并浓缩，产生所需化合物。产量为15.5g(93％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3)δ6.24(s，1H)，5.81(s，1H)，4.34(t，1H)，3.78(s，3H)，2.82(bs，1H)，1.69(m，2H)，0.95(t，3H)(ii)MeOOC-C(＝CEt)CH2Br于0℃将HBr(6.5ml，～48％)滴加到MeOOC-C(＝CH)C(OH)Et(3g；20.8mmol；来自以上步骤(i))中。5分钟后，滴加H2SO4(浓H2SO4；6ml)。于室温下将该反应混合物搅拌12小时。分离两相，上层相用醚稀释。该醚相用水和NaHCO3水溶液洗涤，干燥(Na2SO4和木炭)并浓缩。该残留物通过快速色谱所纯化。产量为1.7g(40％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3)δ6.97(t，3H)，4.23(s，2H)，3.8(s，3H)，2.32(m，2H)，1.13(t，3H)(iii)tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z与实施例1(iii)所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(2.1g；3.6mmol)和溴乙酸叔丁酯(780mg；4.0mmol)制备副标题化合物。产量为1.73g(78％)。(iv)HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z将含tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(来自以上步骤(iii))和TFA的二氯甲烷溶液于室温下搅拌3h。将该反应混合物浓缩并从水和HCl(浓的；10eq)中冷冻干燥。(v)MeOOC-C(＝CEt)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z将含HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(263mg；0.41mmol；来自以上步骤(iv))、NaOH(1M；1.239mmol)和水(4ml)的溶液冷冻干燥。加入DMF(5ml)，然后于0℃滴加MeOOC-C(＝CEt)CH2Br(103mg；0.496mmol；来自以上步骤(ii))。该反应混合物于室温下搅拌24h，用甲苯(5ml)稀释，用水洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩。该残留物通过采用EtOAc∶甲醇(95∶5)作为洗脱剂的快速色谱进行纯化。产量为95mg(33)。FAB-MS(m+1)＝690(m/z)实施例59MenOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)(i)MenOOCCH2Br与实施例30(i)所述步骤类似，由MenOH(10mmol)和溴乙酰氯(12mmol)制备副标题化合物。产量为1.5g(54％)。(ii)MenOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)与实施例1(iii)中所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)(521mg；1mmol；参见以上实施例40(ii))和MenOOCCH2Br(416mg；1.5mmol；来自以上步骤(i))制备标题化合物。产量为36mg(5％)。FAB-MS(m+1)＝718(m/z)实施例60tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOnPr与实施例1(iii)所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr(575mg；0.837mmol；参见以上实施例5(ii))和溴乙酸叔丁酯(196mg；1.01mmol)制备标题化合物。产量为110mg(23％)。LC-MS(m+1)＝572(m/z)实施例61MenOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z与实施例1(iii)所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(0.7g；1.21mmol)和MenOOCCH2Br(0.4g；1.45mmol；参见以上实施例59(i))制备标题化合物。产量为0.33g(38％)。FAB-MS(m+1)＝702(m/z)实施例62BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO2)(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO2)与实施例1(i)中所述步骤类似，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H(1.03g；2.18mmol)、2M NaOH(24ml)和氯甲酸4-NO2-苄酯(518mg；2.4mmol)制备副标题化合物。产量为1.32g(93％)。FAB-MS(m+1)＝651(m/z)(ii)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO2)与实施例4(ii)所述步骤类似，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO2)(1.32g；2.03mmol；来自以上步骤(i))制备副标题化合物。产量为1.0g(79％)。FAB-MS(m+1)＝551(m/z)(iii)BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO2)与实施例1(iii)所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO2)(0.5g；0.80mmol；来自以上步骤(ii))和溴乙酸苄酯(220mg；0.90mmol)制备标题化合物。FAB-MS(m+1)＝699(m/z)实施例63EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Bn(4-NO2)
与实施例1(iii)中所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO2)(211g；0.38mmol；参见以上实施例62(ii))和溴乙酸乙酯(47μl；0.42mmol)制备标题化合物。产量为44mg(18％)。1H-NMR(300MHz；CDCl3)δ9.55(bs，1H)，8.50(bt，1H)，8.20(d，2H)，7.80(d，2H)，7.60(d，2H)，7.35(d，2H)，6.87(bs，1H)，4.95(dd，1H)，4.65-4.40(ABX-谱的AB部分，2H)，4.18-4.04(m，5H)，3.27-3.15(AB-谱，2H)，2.87(d，1H)，2.75-2.60(m，1H)，2.57-2.45(m，1H)，2.00-0.95(m，16H).实施例64PrlC(O)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(i)PrlC(O)CH2OH将2，5-二氧-1，4-二噁烷(2.0g；17mmol)和吡咯烷(8ml；97mmol)的混合物回流1h。通过蒸发除去过量的吡咯烷。产量为4.4g(99％)。FAB-MS(m+1)＝130(m/z)(ii)PrlC(O)CH2OOCCH2Br于0℃将溴乙酰溴(0.63g；3.1mmol)滴加到含PrlC(O)CH2OH(0.4g；3.1mmol；来自以上步骤(i))的DMF(15ml)溶液中。该反应混合物于0℃搅拌1.5h，于室温下搅拌3h。再加入溴乙酰溴(0.63g；3.1mmol)，将该反应混合物加热至80℃，将其于室温下搅拌12h并浓缩。产量为320mg(41％)。FAB-MS(m+1)＝252(m/z)(iii)PrlC(O)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z与实施例1(iii)所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(580mg；1mmol)和PrlC(O)CH2OOCCH2Br(300mg；1.2mmol；来自以上步骤(ii))制备标题化合物。产量为400mg(60％)。FAB-MS(m+1)＝675(m/z)1H-NMR(500MHz；CDCl3)δ9.66-9.42(bs，1H)，8.64-8.56(m，1H)，8.03-7.93(d，2H)，7.89-7.66(bs，1H)，7.45(d，2H)，7.45-7.25(m，5H)，5.20(s，2H)，4.98-4.92(dd，1H)，4.82-4.74(m，1H)，4.62，4.58(AB谱，2H)，4.26-4.05(m，3H)，3.47-3.16(m，6H)，2.95(d，1H)，2.78-2.68(m，1H)，2.54-2.42(m，1H)，2.03-1.95(m，16H)实施例65(2-Me)BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO2)与实施例1(iii)中所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO2)(500g；0.80mmol；参见以上实施例62(ii))和溴乙酸2-(甲基)苄酯(234mg；0.96mmol；参见以上实施例32(i))制备标题化合物。产量为528mg(92％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ9.34(bs，1H)，8.38(t，1H)，8.09(d，2H)，7.72(d，2H)，7.48(d，2H)，7.37(bs，1H)，7.23(d，2H)，7.17-7.05(m，4H)，5.18(s，2H)，5.00(s，2H)，4.81(dd，1H)，4.45-4.34(ABX-谱的AB部分，2H)，4.04-3.97(q，1H)，3.93-3.86(q，1H)，3.27-3.17(AB谱，2H)，2.79(d，1H)，2.54-2.35(m，2H)，2.22(s，3H)，1.91-1.84(bd，1H)，1.71-1.39(m，5H)，1.19-0.84(m，4H).实施例66MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt与实施例1(iii)中所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt(350mg；0.69mmol；参见实施例4(ii))和溴乙酸甲酯(126mg；0.83mmol)制备标题化合物。产量为188mg(53％)。LC-MS(m+1)＝516(m/z)实施例67(nPr)2NC(O)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO2)(i)(nPr)2NC(O)CH2OOCCH2Cl将(nPr)2NC(O)CH2OH(244mg；1.53mmol；参见以上实施例12(i))和溴乙酰氯(270mg；1.72mmol)的混合物于室温下搅拌12小时。将该混合物注入NaHCO3水溶液中，用二氯甲烷萃取。该有机相用KHSO4水溶液(0.2M)和盐水洗涤，干燥并浓缩。FAB-MS(m+1)＝237(m/z)1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ4.82(s，2H)，4.22(s，2H)，3.31-3.26(t，2H)，3.10-3.15(t，2H)，1.68-1.52(m，2H)，1.97-0.86(m，6H)(ii)(nPr)2NC(O)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO2)与实施例1(iii)中所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOBn(4-NO2)(343mg；0.62mmol；参见以上实施例62(ii))和(nPr)2NC(O)CH2OOCCH2Cl(160mg；0.68mmol；来自以上步骤(i))制备标题化合物。产量为89mg(19％)。FAB-MS(m+1)＝750(m/z)实施例68(2-Me)BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCtBu与实施例1(iii)中所述步骤类似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCtBu(380mg；0.71mmol；参见以上实施例12(ii))和溴乙酸2-(甲基)苄酯(215mg；0.88mmol；参见以上实施例32(i))制备标题化合物。产量为37mg(7.5％)。FAB-MS(m+1)＝692(m/z)实施例69实施例1-68的化合物都在以上试验A中进行测试，发现全都表现出高于1.0μM的IC50TT值(即与表现出0.01μMIC50TT的活性抑制剂HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-H相比较，它们本身对凝血酶无活性)。实施例70实施例1-68的化合物都在以上试验B、C和/或D中的一个、两个或全部试验中进行测试，发现它们或者作为游离酸和/或者作为其一种或多种酯，表现出的大鼠口服和/或胃肠外生物利用度都同活性抑制剂HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-H一样。在假定在大鼠内形成HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-H的基础上，合适时按照试验B和/或试验C中所述公式，计算该生物利用度。缩写Ac＝ 乙酰基aq＝ 水溶液Aze＝S-氮杂环丁烷-2-甲酸Boc＝叔丁酯基(Boc)2O＝二叔丁基二碳酸酯Bn＝ 苄基Bu＝ 丁基Cgl＝ 环己基甘氨酸Ch＝ 环己基DCC＝ 二环己基碳二亚胺DMAP＝N，N-二甲基氨基吡啶EDC＝ 盐酸1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺Et＝ 乙基EtOH＝乙醇EtOAc＝ 乙酸乙酯h＝ 小时HCl＝盐酸H-Pab-H＝ 1-脒基-4-氨基甲苯H-Pab-Z＝ 4-氨甲基-1-(N-苄酯基脒基)苯HPLC＝高效液相色谱K2CO3无水碳酸钾Me＝ 甲基Men (1R，2S，5R)-基Pab-OH＝ 4-氨甲基-苄胺肟(4-氨甲基-1-(氨基-羟基亚氨基甲基)苯Piv(aloyl)＝ 2，2-二甲基乙酰基Pr＝ 丙基Prl＝ N-吡咯烷基RPLC＝反相高效液相色谱TFA＝ 三氟乙酸THF＝ 四氢呋喃Z＝ 苄酯基前缀n、s、i和t具有其常用的含义正、异、仲和叔。NHR谱中的前缀s、d、t、q和b分别指单峰、双重峰、三重峰、四重峰和宽峰。如果没有另外陈述，则默认氨基酸的立体化学为(S)型。
权利要求
1.式I化合物或其药学上可接受的盐，R1O(O)C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-R2I其中R1表示-R3或-A1C(O)N(R4)R5或-A1C(O)OR4；A1表示C1-5亚烷基；R2(它取代Pab-H的脒基单位中的一个氢原子)的表示OH、OC(O)R6、C(O)OR7或C(O)OCH(R8)OC(O)R9；R3表示H、C1-10烷基或C1-3烷苯基(该后一基团可任选地用C1-6烷基、C1-6烷氧基、硝基或卤素取代)；R4和R5独立地表示H、C1-6烷基、苯基、2-萘基，或当R1表示-A1C(O)N(R4)R5时，与连接它们的氮原子一起表示吡咯烷基或哌啶基；R6表示C1-17烷基、苯基或2-萘基(它们全都可任选地用C1-6烷基或卤素取代)；R7表示2-萘基、苯基、C1-3烷苯基(后三种基团可任选地用C1-6烷基、C1-6烷氧基、硝基或卤素取代)或C1-12烷基(后一基团可任选地用C1-6烷氧基、C1-6酸基或卤素取代)；R8表示H或C1-4烷基；以及R9表示2-萘基、苯基、C1-6烷氧基或C1-8烷基(后一基团可任选地用卤素、C1-6烷氧基或C1-6酸基取代)；条件是当R1表示R3，R3表示苄基、甲基、乙基、正丁基或正己基，而R2表示C(O)OR7时，那么R7不表示苄基。
2.权利要求1限定的式I化合物，其中当R1表示-A1C(O)N(R4)R5时，A1表示C1-3亚烷基。
3.权利要求1或2中限定的式I化合物，其中当R1表示-A1C(O)N(R4)R5时，R4表示H或C1-6烷基。
4.权利要求1-3的任一项中限定的式I化合物，其中当R1表示-A1C(O)N(R4)R5时，R5表示C1-6烷基或C4-6环烷基。
5.权利要求1-3的任一项中限定的式I化合物，其中当R1表示-A1C(O)N(R4)R5时，R4和R5一起表示吡咯烷基。
6.权利要求2-5的任一项中限定的式I化合物，其中A1表示C1-3亚烷基，R4表示H或C1-3烷基，R5表示C2-6烷基或C5-6环烷基，或R4和R5一起表示吡咯烷基。
7.权利要求1限定的式I化合物，其中当R1表示-A1C(O)OR4时，A1表示C1-5亚烷基。
8.权利要求1或7限定的式I化合物，其中当R1表示-A1C(O)OR4时，R4表示C1-6烷基。
9.权利要求7或8限定的式I化合物，其中A1表示C1-5亚烷基，而R4表示C1-4烷基。
10.权利要求1限定的式I化合物，其中当R1表示R3时，R3表示H、C1-10烷基(该后一基团可以是线性的，或当有足够数目的碳原子时，可以是支链的和/或部分环状或环状的)或C1-3烷苯基(后一基团可任选地被取代，可以是线性的，或当有足够数目的碳原子时，可以是支链的)。
11.权利要求1或权利要求10中要求保护的化合物，其中R1表示H、线性C1-10烷基、支链C3-10烷基、部分环状C4-10烷基、C4-10环烷基、可任选取代的线性C1-3烷苯基、可任选取代的支链C3烷苯基。
12.权利要求11中要求保护的化合物，其中R1表示线性C1-6烷基、C6-10环烷基或可任选取代的线性C1-3烷苯基。
13.权利要求1-12的任一项中限定的式I化合物，其中R2表示OH。
14.权利要求1-12的任一项中限定的式I化合物，其中当R2表示OC(O)R6时，R6表示任选取代的苯基或C1-17烷基(后一基团可以是线性的，或当有足够数目的碳原子时，可以是支链、环状或部分环状的和/或饱和或不饱和的))。
15.权利要求14中要求保护的化合物，其中R6表示可任选取代的苯基、线性C1-4烷基、支链C3-4烷基和顺式十八基。
16.权利要求15中要求保护的化合物，其中R6表示线性C1-3烷基或支链C3烷基。
17权利要求1-12的任一项中限定的式I化合物，其中当R2表示C(O)OR7时，R7表示任选取代的苯基、C1-12烷基(后一基团可任选地被取代，可以是线性的，或当有足够数目的碳原子时，可以是支链、环状或部分环状的和/或饱和或不饱和的)或C1-3烷苯基(后一基团可任选地被取代，可以是线性的，或当有足够数目的碳原子时，可以是支链的)。
18.权利要求17中要求保护的化合物，其中R7表示可任选取代和/或可任选不饱和的线性C1-4烷基或可任选取代和/可任选不饱和的支链C3-4烷基、可任选取代的苯基或可任选取代的线性C1-3烷苯基或可任选取代的支链C3烷苯基。
19.权利要求18中要求保护的化合物，其中R7表示可任选取代的线性C1-4烷基或可任选取代的支链C3-4烷基、可任选取代的线性C1-3烷苯基或支链C3烷苯基。
20.权利要求1-12的任一项中限定的式I化合物，其中当R2表示C(O)OCH(R8)OC(O)R9时，R8表示H或甲基。
21.权利要求1-12或权利要求20的任一项中限定的式I化合物，其中当R2表示C(O)OCH(R8)OC(O)R9时，R9表示苯基或C1-8烷基(后一基团可任选地被取代，可以是线性的，或当有足够数目的碳原子时，可以是支链的和/或环状或部分环状的))。
22.权利要求20或权利要求21中限定的式I化合物，其中R8表示H或甲基，而R9表示苯基、C5-7环烷基、线性C1-6烷基、支链C3-6烷基或部分环状C7-8烷基。
23.权利要求22中要求保护的化合物，其中R8表示H，而R9表示C5-7环烷基、线性C1-6烷基或部分环状C7-8烷基。
24.前述权利要求的任一项中要求保护的化合物，其中当R1表示R3，而R3表示可任选取代的C1-3烷苯基时，所述可任选的取代基为C1-6烷基
25.权利要求24中要求保护的化合物，其中所述取代基为甲基。
26.前述权利要求的任一项中要求保护的化合物，其中当R2表示C(O)OR7，而R7表示可任选取代的C1-12烷基时，所述可任选取代基选自卤素和C1-6烷氧基。
27.权利要求26中要求保护的化合物，其中所述取代基选自氯和甲氧基。
28.前述权利要求的任一项中要求保护的化合物，其中当R2表示C(O)OR7，而R7表示可任选取代的苯基时，所述可任选取代基选自C1-6烷基、C1-6烷氧基和卤素。
29.权利要求28中要求保护的化合物，其中所述取代基选自甲基、甲氧基和氯。
30.前述权利要求的任一项中要求保护的化合物，其中当R2表示C(O)OR7，而R7表示可任选取代的C1-3烷苯基时，所述可任选取代基为硝基。
31.权利要求1中要求保护的化合物，其中EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2；nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2；tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu；PrlC(O)CH2CH2CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；ChNHC(O)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；(nPr)2NC(O)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCC(CH3)3；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCC(CH3)3；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH3)OOCCH3；MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh；MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；iPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；(nPr)2NCOCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；ChNHCOCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc；HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-O-cis-Oleyl；Cyclooctyl-OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；tBuCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；(2-Me)BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；ChCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；ChOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；PhC(Me)2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；(Me)2CHC(Me)2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)；ChCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)；(2-Me)BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu；iPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-iBu；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCh；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCH2Ch；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(Me)OOCPh；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCPh；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(Me)OAc；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OAc；tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OAc；MeOOC-C(＝CHEt)CH2-OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；Men-OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)；andEtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CCl3.
32.权利要求1要求保护的化合物，它为EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CCl3；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOnBu；nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；Cyclooctyl-OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCh；MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；iPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；andEtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc.
33.权利要求1限定的式I化合物，其中额外的条件是R1不表示-A1C(O)OR4。
34.权利要求1限定的式I化合物，其中额外的条件是R4和R5不独立地表示H。
35.权利要求1限定的式I化合物，其中额外的条件是当R2表示OC(O)R6时，R6不表示C1-17烷基。
36.权利要求1限定的式I化合物，其中R1表示-A1C(O)OR4。
37.权利要求1限定的式I化合物，其中当R4和R5独立地表示H。
38.权利要求1限定的式I化合物，其中当R2表示OC(O)R6时，R6表示C1-17烷基。
39.药用制剂，它包括与药学上可接受的辅助剂、稀释剂或载体混合的权利要求1-38的任一项中限定的式I化合物或其药学上可接受的盐。
40.用作药物的权利要求1-38的任一项中限定的式I化合物或其药学上可接受的盐。
41.用于治疗需要抑制凝血酶的疾病的权利要求1-38的任一项中限定的式I化合物或其药学上可接受的盐。
42.用于治疗血栓形成的权利要求1-38的任一项中限定的式I化合物或其药学上可接受的盐。
43.用作抗凝剂的权利要求1-38的任一项中限定的式I化合物或其药学上可接受的盐。
44.权利要求1-38的任一项中限定的式I化合物或其药学上可接受的盐的用途，即用作治疗需要抑制凝血酶的疾病的药物生产中的活性组分的用途。
45.权利要求44中要求保护的用途，其中所述疾病为血栓形成。
46.权利要求1-38的任一项中限定的式I化合物或其药学上可接受的盐的用途，即用作抗凝剂生产中的活性组分的用途。
47.需要抑制凝血酶的疾病的治疗方法，该方法包括向患或易患此种疾病的人给与权利要求1-38的任一项中限定的式I化合物或其药学上可接受的盐。
48.权利要求47中要求保护的方法，其中所述疾病为血栓形成。
49.权利要求47中要求保护的方法，其中所述疾病为血液和组织中凝固性过高。
50.权利要求1中限定的、但没有附带条件的式I化合物作为药物前体的用途。
51.制备式I化合物的方法，该方法包括(a)对于R2表示OH的式I化合物，将R2表示OC(O)R6和R6如权利要求1限定的相应式I化合物与醇盐碱反应；(b)对于R2表示OH的式I化合物，将R2表示C(O)OR7而R7如权利要求1限定的相应的式I化合物与羟胺或其酸加成盐反应；(c)将以下相应的式II化合物与式III化合物反应，H-(R)Cgl-Aze-Pab-R2II其中R2如权利要求1限定的，R1O(O)C-CH2-L1III其中L1表示离去基团，而R1如权利要求1限定的；(d)对于R1表示H及R2表示OH或C(O)OR7的式I化合物，将相应的式I化合物(其中R1表示C1-10烷基或C1-3烷苯基，而R2表示OH或C(O)OR7)与碱反应；(e)对于R2表示OC(O)R6的式I化合物，将R2表示OH的相应的式I化合物与以下式IV化合物反应，R6C(O)-O-C(O)R6IVR6C(O)HalV其中Hal表示Cl或Br，而在两种情况下，R6都如权利要求1限定的。(f)对于其中R1表示H，而R2表示OC(O)R6，而R6如权利要求1限定的式I化合物，将以下相应的式VI或式V化合物与酸反应，P1O(O)C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-R2VI其中P1表示酸不稳定酯保护基团，而R2表示OC(O)R6，其中R6如权利要求1限定的；(g)对于其中R1表示R3，R3表示C1-10烷基和C1-3烷苯基，R2表示OH或C(O)OR7，而R7如权利要求1限定的式I化合物，将以下相应的式VII化合物进行酯基转移，R1aO(O)C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-R2VII其中R1a表示非正在形成的C1-10烷基或C1-3烷苯基或另一选择的不稳定烷基取代基，而R2如权利要求1限定的。
全文摘要
提供式(Ⅰ)化合物:R
文档编号A61P7/02GK1209139SQ9618002
公开日1999年2月24日 申请日期1996年12月17日 优先权日1995年12月21日
发明者T·安顿松, D·古斯塔夫松, K·J·霍夫曼, J·E·奈斯特伦, H·泽伦森, M·瑟伦 申请人:阿斯特拉公司