剂，直接涂抹在因创伤（如手术伤、烧伤、烫伤、溃疡）的损伤创面上，能促进创面组织愈合， 缩短愈合时间，疗效较好，且对皮肤无刺激性，使用方便，易于清洗便于操作，适用于临床。 [0048] 效价评价：临床应用效果由医师按自觉症状和查体所见综合评定，分为痊愈、显 效、有效、无效四类，痊愈、显效、有效合计为有效，不含抑菌剂的重组人碱性成纤维细胞生 长因子凝胶剂治疗组与对照组（磺胺嘧啶锌）比较，结果表明：不含抑菌剂的重组人碱性成 纤维细胞生长因子凝胶剂临床验证，治疗烧伤、烫伤及溃疡，有效率分别在95%以上，证明 不含抑菌剂的重组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶剂是可行的，较合理。而对照组有效率 在74%以上。
[0049] 实验四
[0050] 眼刺激性实验
[0051] 实验目的
[0052] 观察本实施例3制得的不含抑菌剂的重组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶剂单 次和多次滴眼后眼部所产生的刺激反应，为临床安全用药提供依据。
[0053] 实验动物
[0054] 日本大耳白兔：由成都军区成都总医院动物房提供
[0055] 许可证号：SCXK (军）2002-016
[0056] 实验药物
[0057] 本实施例3制得的不含抑菌剂的重组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶剂
[0058] 荧光素钠注射液：广州明兴制药有限公司生产
[0059] 实验方法与结果
[0060] 单次给药刺激试验
[0061] 预选动物：取健康无伤2Kg以上的日本大耳兔10只，雌雄兼用，单只饲养，挂笼卡 标记。实验前24小时内对每只动物的双眼进行检查，检查方法：（1)肉眼观察：角膜无浑浊， 结膜无充血、水肿及分泌物，瞳孔圆形，两侧等大，对光反射良好。（2)裂隙灯检查：角膜透 明，无云翳、班翳；虹膜纹理清晰，无充血、水肿。（3)荧光素染色：取荧光素钠注射液，临用 时用生理盐水稀释5倍，每兔滴一滴后用生理盐水冲洗干净，观察角膜末着色者为角膜正 常。
[0062] 经上述检查无眼部疾患的健康兔用于实验，有眼睛刺激症状、角膜缺陷和结膜损 伤的动物不能用于实验。
[0063] 取符合要求的动物6只用苦味酸标记后用于实验，每只兔左眼滴不含抑菌剂的重 组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶剂0. lml，右眼滴生理盐水0.1 ml作对照，滴药时压迫鼻 泪管，并使眼被动闭合10秒钟。给药后1、2、4、24、48、72小时对每只兔眼进行检查，检查方 法同预选动物时的检查方法，按表一眼部的刺激反应情况计记分。若72小时后眼部未见任 何刺激症状，则不再进行观察；若72小时后出现有刺激症状，则延长观察期限至21天，以观 察刺激反应的可逆情况。
[0064] 每次检查，均应记录眼部反应堆分值（评分表见表1)。除了观察所列出的结膜、角 膜和虹膜损伤外，其他所观察到的也应记录和报告。
[0065] 表1眼刺激反应分值标准
[0069] 结果评价：
[0070] 记分方法：将每一个观察时间每一动物的眼角膜、虹膜和结膜的刺激反应分值相 加得总积分，将一组的积分总和除以动物数，即得最后分值。按表2判断其刺激程度。
[0071] 表2眼刺激性评价标准
[0072]
[0073] 试验结果：不含抑菌剂的重组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶剂单次给药对兔眼 未出现刺激性反应，分值为0,详见表3。
[0076] 多次给药刺激试验
[0077] 预选动物：取健康无伤2kg以上的日本大耳白兔10只，雌雄兼用，单只饲养，挂笼 卡标记。实验前24小时内对按单次给药刺激实验预选动物时的检查方法对每只动物的双 眼进行检查，经上述检查无眼部疾患的健康兔用于实验，有眼睛刺激症状、角膜缺陷和结膜 损伤的动物不能用于实验。
[0078] 取符合要求的动物6只用苦味酸标记后用于实验，每只兔左眼滴不含抑菌剂的重 组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶剂0. lml，右眼滴生理盐水0.1 ml作对照，滴药时压迫鼻 泪管，并使眼被动闭合10秒钟。连续给药4周，每天给药3次，每天给药前和最后一次给药 后1、2、4、24、48、72小时对每只兔眼进行检查，检查方法同动物预选时的检查方法，按表一 眼部的刺激反应情况记分。若72小时后眼部未见任何刺激症状，则不再进行观察；若72小 时后出现有刺激症状，则延长观察期限至21天，以观察刺激反应的可逆情况。
[0079] 检查方法、记分方法及结果评价方法同单次给药刺激试验。
[0080] 试验结果：给药4周，每天给药前对兔眼进行检查，均未出现刺激性反应，分值为 0。最后一次给药后1、2、4、24、48、72小时检查，结果也未出现刺激性反应，分值为0。详见 表4。试验结果表明不含抑菌剂的重组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶剂多次给药对兔眼 无刺激性。
[0081] 表4不含抑菌剂的重组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶剂对兔眼刺激性评分
[0083] 结论：不含抑菌剂的重组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶剂单次用药和多次用药 后对兔眼均无刺激性反应。
[0084] 以上所述仅为本发明的优选实施例，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人 员，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同 替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 不含抑菌剂的重组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶剂，其特征在于，包括以下组 分：重组人碱性成纤维细胞生长因子I X IO6~9 X 10 6IU、蛋白稳定剂0.0 l~5. Og、增稠剂 0? 1~20. 0g、pH调节剂0? 1~10. 0g、缓冲剂0? 1~10. 0g、保湿剂0? 1~50. 0g，加注射用 水定容至l〇〇〇ml。2. 如权利要求1所述的不含抑菌剂的重组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶剂所述pH 调节剂为三乙醇胺、氢氧化钠、碳酸氢钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二 钾、硼酸、硼砂、醋酸、醋酸钠、柠檬酸、柠檬酸钠、酒石酸、酒石酸钠、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢 钠、碳酸氢钾、氢氧化钠、氢氧化钾、盐酸、硫酸、硝酸、磷酸中的一种或者多种混合。3. 如权利要求1所述的不含抑菌剂的重组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶剂，其特征 在于，所述增稠剂为糊精及衍生物、海藻酸钠及其衍生物、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、羟丙 基甲基纤维素、羟丙基纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素、阿拉伯胶、西黄耆胶、瓜尔豆胶、 卡波普、植物凝集素、透明质酸、黄原胶、壳聚糖、泰洛沙泊中的一种或多种混合。4. 如权利要求1所述的不含抑菌剂的重组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶剂，其特征 在于，所述保湿剂为甘油、丙二醇中的一种或多种混合。5. 如权利要求1所述的不含抑菌剂的重组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶剂，其特征 在于，所述蛋白稳定剂为甘露醇、十二烷基硫酸钠、苷氨酸、吐温、右旋糖苷、透明质酸、硫酸 软骨素、肝素中的一种或多种混合。6. 如权利要求1所述的不含抑菌剂的重组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶剂，其特 征在于，所述缓冲剂为枸橼酸纳/枸橼酸缓冲对、磷酸盐缓冲对、tris-盐酸缓冲对、甘氨 酸-三乙胺缓冲对中的一种或多种混合。7. 如权利要求1所述的不含抑菌剂的重组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶剂，其特征 在于，所述不含抑菌剂的重组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶剂采用不含抑菌剂的独立包 装，所述不含抑菌剂的独立包装的容器的容积范围为〇. 1~〇. 5ml/支。8. 不含抑菌剂的重组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶剂的制备方法，其特征在于，包 括以下步骤： 51 :称取增稠剂0? 1~20. 0g，pH调节剂0? 1~10.0 g溶于注射用水中，灭菌30min ; 52 :称取重组人碱性成纤维细胞生长因子IX IO6~9X10 6IU、蛋白稳定剂0. 01~ 5. 〇g、缓冲剂0. 1~10. 〇g、及保湿剂0. 1~50g溶于注射用水中； 53 :将步骤S2所得的药液经过0. 22~0. 45 y m微孔滤膜过滤5次后与步骤Sl所得药 液混合，并用注射用水定容至1000ml，搅拌均匀； 54 :灌装步骤S3所得药液至不含抑菌剂的包装容器中，容器的容积范围为0. 1~ 0? 5ml/ 支。
【专利摘要】本发明提供一种不含抑菌剂的重组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶剂，包括以下组分：重组人碱性成纤维细胞生长因子1×106～9×106IU、蛋白稳定剂0.01～5.0g、增稠剂0.1～20.0g、pH调节剂0.1～10.0g、缓冲剂0.1～10.0g、保湿剂0.1～50.0g，加注射用水定容至1000ml。本发明还提供不含抑菌剂的重组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶剂的制备方法。本发明提供的不含抑菌剂的重组人碱性成纤维细胞生长因子凝胶剂无抑菌剂，用完即弃，可避免抑菌剂的存在对眼部产生的刺激，以及使用及储存过程中可能出现的微生物污染。
【IPC分类】A61K9/06, A61P17/02, A61P27/02, A61K38/18
【公开号】CN104984326
【申请号】CN201510413146
【发明人】曲伟, 许岩, 邓春平, 方海洲, 王新志
【申请人】珠海亿胜生物制药有限公司
【公开日】2015年10月21日
【申请日】2015年7月14日